一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物、制备方法及应用

1.本发明涉及农药合成技术领域，特别涉及一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物、制备方法及应用。


背景技术：

2.近年来，植物病原真菌对农作物生产造成了极大的危害，造成了农产品质量和数量的下降，同时也带来了巨大的经济损失。化学合成农药主要用于预防和治疗这些真菌性病害。然而，长期使用这些化学合成农药不仅导致有害生物产生抗药性，而且对环境造成了一定程度的危害。来源于天然产物的绿色农药，具有结构新颖、高效、低毒、易在环境中分解、在作物中残留少或无残留、生物活性独特等优点。因此，从天然产物中选择先导结构，并进行先导结构的优化和展开对绿色农药的创制具有重要意义。
3.杨梅素是一种常见的植物源黄酮醇类化合物，广泛存在于浆果、蔬菜和水果中，目前广泛应用于医药、食品、保健品中，具有抑菌、抗病毒、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性。jiang等通过活性拼接将含哌啶的磺酰胺结构引入到杨梅素中，并通过浊度法测试目标化合物对xoo、xac和rs的抑制活性，结果表明部分化合物对柑橘溃疡病菌(xac)的和水稻白叶枯病菌(xoo)有很好的抑制效果，远优于对照药剂噻菌铜和叶枯唑。tang等以杨梅素为先导化合物，在其结构中引入阿魏酸和酰胺结构得到了一系列杨梅素衍生物，并采用半叶枯法测试了其对烟草花叶病毒(tmv)的抑制活性。结果表明:该系列化合物有烟草花叶病毒具有较好的抑制作用。jiang等将哌啶和二硫代氨基甲酸酯结构引入到杨梅素中，通过浊度法评价了其对xoo、xac和rs的抑制活性，结果表明部分化合物对xac的ec50低至0.11μg/ml，明显优于对照药剂叶枯唑(48.9μg/ml)和噻菌铜(60.0μg/ml)。peng等将活性小分子噁二唑基团引入到杨梅素结构中，合成了一系列含1,3,4-噁二唑硫醚的杨梅素衍生物，并对其进行了抗烟草花叶病毒活性测试。测试结果表明，在500μg/ml时，目标化合物对tmv具有良好的抑制活性。peng等将含磺(羧)酸酯的1,3,4-噁二唑硫醚引入到杨梅素中，并对进行了抑菌活性和抗tmv病毒活性测试，结果显示，目标化合物均具有一定的抑菌和抗病毒活性，sem实验结果表明，该类化合物能够导致病原体细胞膜发生变形甚至破裂，进而导致病原体死亡。
4.哌啶基团是一种含“n”的杂环，广泛存在于天然产物生物碱中，不仅具有抗菌、抗病毒、抗癌、抗氧化等广谱生物活性，而且具有选择性好、活性高、毒性低的优点。
5.酰胺基团作为目前市售的琥珀酸脱氢酶抑制剂的重要药效团，仍是潜在新型农药的研究热点之一。许多研究表明酰胺类化合物具有广谱生物活性，如抗菌、抗病毒、杀虫、除草等，广泛应用于农业生产中。
6.综上所述，含有哌啶酰胺基团的杨梅素化合物都具有较好的生物活性，但未见含哌啶酰胺的杨梅素衍生物在抗植物真菌活性的相关报道。


技术实现要素：

7.鉴于此，本发明目的在于提供一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物、制备方法及应用，
本发明提供的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物能有效抑制植物病原真菌。
8.为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案:一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物，其结构式如下所示:
[0009][0010]
式中，n为3或4；r独立地选自烷基、取代胺基、任意取代或未取代的苯基、芳杂环基中的一个。
[0011]
优选的，所述烷基为乙基或环戊基乙基；所述取代胺基为含有一个或以上甲基的胺基；所述取代苯基为苯环上邻位、间位和对位上含有一个及以上的甲基、甲氧基、硝基或卤原子，或苯环上邻位和间位上含有一个及以上甲基、甲氧基、硝基或卤原子；所述芳杂环基为呋喃基或吡啶基。
[0012]
本发明还提供了上述技术方案所述含哌啶酰胺的杨梅素衍生物的制备方法，包括以下步骤:
[0013]
(1)以杨梅苷和ch3i为原料，在碱性条件下的溶剂中常温反应48h，后经抽滤，萃取，浓缩操作后，所得产物在酸性条件的醇溶液中90℃回流2h制备中间体a；
[0014]
(2)以中间体a和二溴烷烃为原料，在碱性条件下的溶剂中冰浴10-12h，制备中间体b；
[0015]
(3)以中间体b和4-(n-boc-氨基)哌啶为原料，碳酸钾为催化剂，在乙腈溶剂中80℃条件下反应8h制备中间体c；
[0016]
(4)以中间体c为原料，乙醇为溶剂，升温至80℃的条件下逐滴加入浓度为5％hcl溶液反应2h脱去boc保护后，再用nahco3水溶液将体系调节至碱性制备中间体d；
[0017]
(5)以中间体d和取代的酰氯为原料，碳酸钾为催化剂，在溶剂中常温制备含哌啶酰胺的杨梅素衍生物；
[0018]
所述化合物a、化合物b、化合物c、化合物d的化学结构式如下:
[0019][0020]
所述二溴烷烃为br-(ch2)
n-br，n为3或4。
[0021]
优选的，步骤(1)所述杨梅苷和ch3i的摩尔比为10.8:(129～161)。
[0022]
优选的，步骤(2)所述中间体a和二溴烷烃的摩尔比为12.9:(39.2～64.7)。
[0023]
优选的，步骤(3)所述中间体b、4-(n-boc-氨基)哌啶和碳酸钾的摩尔比为1.94:(3.53～4.42):(5.89～14.72)。
[0024]
优选的，步骤(5)所述中间体d、酰氯和碳酸钾的摩尔比为(0.92～0.95):(0.8～0.9):(1.8～1.9)。
[0025]
本发明还提供了上述技术方案所述含哌啶酰胺的杨梅素衍生物在抑制植物病原真菌中的应用；所述植物病原真菌为水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、油菜菌核病菌、葡萄座腔病菌、猕猴桃拟茎点病菌、蓝莓灰霉病菌、辣椒疫霉病菌和辣椒炭疽病菌中的一种或多种。
[0026]
有益技术效果:本发明提供了一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物、制备方法及应用，本发明将具有优良活性的哌啶和酰胺基团引入到杨梅素的结构中，合成了一系列含哌啶酰胺的杨梅素衍生物，通过对所合成的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物抑制植物病原真菌活性测试，发现本发明合成的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物能有效抑制植物病原真菌。
具体实施方式
[0027]
下面将结合本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所举实施例是为了更好地对本发明进行说明，但并不是本发明的内容仅局限于所举实施例。所以熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
[0028]
本文中使用的术语仅用于描述特定实施例，并且无意于限制本公开。除非在上下文中具有明显不同的含义，否则单数形式的表达包括复数形式的表达。如本文所使用的，应当理解，诸如“包括”、“具有”、“包含”之类的术语旨在指示特征、数字、操作、组件、零件、元
件、材料或组合的存在。在说明书中公开了本发明的术语，并且不旨在排除可能存在或可以添加一个或多个其他特征、数字、操作、组件、部件、元件、材料或其组合的可能性。如在此使用的，根据情况，“/”可以被解释为“和”或“或”。
[0029]
本发明以杨梅苷为起始原料，合成了一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物，其结构式如下所示:
[0030][0031]
式中，n为3或4；r独立地选自烷基、取代胺基、任意取代或未取代的苯基、芳杂环基中的一个。
[0032]
在一些实施方式中，所述烷基为乙基或环戊基乙基；所述取代胺基为含有一个或以上甲基的胺基；所述取代苯基为苯环上邻位、间位和对位上含有一个及以上的甲基、甲氧基、硝基或卤原子，或苯环上邻位和间位上含有一个及以上甲基、甲氧基、硝基或卤原子；所述芳杂环基为呋喃基或吡啶基。
[0033]
本发明还提供了上述技术方案所述含哌啶酰胺的杨梅素衍生物的制备方法，包括以下步骤:
[0034]
(1)
[0035][0036]
以杨梅苷和ch3i为原料，在碱性条件下的溶剂中常温反应48h，后经抽滤，萃取，浓缩操作后，所得产物在酸性条件的醇溶液中90℃回流2h制备中间体a。
[0037]
在一些实施方式中，所述溶剂为n,n-二甲基甲酰胺；所述萃取为使用二氯甲烷进行萃取，收集有机相；所述浓缩为使用减压蒸馏方式进行浓缩；所述在酸性条件的醇溶液中回流2h后还包括进行抽滤、洗涤。
[0038]
在本发明中，步骤(1)所述反应具体操作为:于250ml的三口烧瓶中加入杨梅苷、无水碳酸钾和n,n-二甲基甲酰胺(dmf)，搅拌10min后，向体系中加入碘甲烷，常温反应48h，抽滤除去固体，收集滤液并用水分散，二氯甲烷萃取，收集有机相，减压蒸馏除去溶剂后得酒红色浓缩液；浓缩液加入乙醇，加热至90℃反应30 min，加入37％的浓盐酸，待大量固体析出后，继续回流2h，冷却反应液，抽滤，滤饼用乙醇洗涤数次，得到淡黄色固体为中间体a。
[0039]
在本发明中，所述杨梅苷和ch3i的摩尔比为10.8:(129～161)；所述杨梅苷和无水
碳酸钾的摩尔比为10.8:107.7。
[0040]
(2)
[0041][0042]
以中间体a和二溴烷烃为原料，在碱性条件下的溶剂中冰浴反应10-12h，制备中间体b。
[0043]
在一些实施方式中，所述溶剂为dmf；所述反应结束后还包括用冰水分散反应液使其析出固体；所述析出固体后还包括抽滤、洗涤步骤；所述洗涤为分别用水和石油醚进行洗涤。
[0044]
在本发明中，步骤(2)所述反应具体操作为:将中间体a、无水碳酸钾和dmf加入到250 ml的圆底烧瓶中，冰浴条件下搅拌1 h后，加入二溴烷烃，继续反应10-12h，待反应结束后，用冰水分散，析出大量固体，抽滤，滤饼分别用水、石油醚洗涤，得白色固体为中间体b。
[0045]
在本发明中，所述中间体a和二溴烷烃的摩尔比为12.9:(39.2～64.7)；所述二溴烷烃和无水碳酸钾的摩尔比为12.9:38.8。
[0046]
(3)
[0047][0048]
以中间体b和4-(n-boc-氨基)哌啶为原料，碳酸钾为催化剂，在乙腈溶剂中80℃条件下反应8h制备中间体c。
[0049]
在一些实施方式中，所述反应结束后还包括过滤、洗涤、减压旋蒸；所述洗涤为使用二氯甲烷进行洗涤。
[0050]
在本发明中，步骤(3)所述反应具体操作为:将4-(n-boc)氨基哌啶和无水k2co3加入到50ml的乙腈溶液中，常温搅拌30min后，向体系中加入中间体b，升温至80℃反应8h，待反应结束后，将混合物过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤，收集滤液并减压旋蒸，得酒红色油状粗产品为中间体c。
[0051]
在本发明中，所述中间体b、4-(n-boc-氨基)哌啶和碳酸钾的摩尔比为1.94:(3.53～4.42):(5.89～14.72)。
[0052]
(4)
[0053][0054]
以中间体c为原料，乙醇为溶剂，升温至80℃后，逐滴加入浓度为5％hcl水溶液脱去boc保护后，再用nahco3水溶液将体系调节至碱性制备中间体d。
[0055]
在一些实施方式中，所述nahco3水溶液的浓度为5％；所述碱性的ph值为8-9；所述调节至碱性后，还包括萃取、减压旋蒸；所述萃取为使用二氯甲烷进行萃取。
[0056]
在本发明中，步骤(4)所述反应具体操作为:将中间体c用50ml的乙醇溶解于100ml的单口烧瓶中，逐滴加入5％的盐酸，80℃反应2h，待反应结束后，减压旋出大量溶剂后，再加入30ml的乙酸乙酯不断搅拌至有大量黄色固体析出，抽滤，滤饼烘干，烘干后用蒸馏水将滤饼溶解，用少量乙酸乙酯萃取杂质，弃去有机相，收集水相并用5％的nahco3溶液调节ph值至8-9，用二氯甲烷萃取，收集有机相，减压旋蒸除去溶剂得白色固体为中间体d。
[0057]
(5)
[0058][0059]
以中间体d和取代的酰氯为原料，碳酸钾为催化剂，在溶剂中常温制备含哌啶酰胺的杨梅素衍生物。
[0060]
在一些实施方式中，所述溶剂为二氯甲烷；所述常温反应时间为30min；所述反应结束后还包括将反应体系分散到水中，然后进行萃取、干燥、减压旋蒸、重结晶或柱层析。
[0061]
在本发明中，步骤(5)所述反应具体操作为:将中间体d、无水k2co3和二氯甲烷加入到50ml圆底烧瓶中，冰浴条件下搅拌30min，逐滴加入取代的酰氯，常温反应30min，待反应结束将体系分散到水中，用二氯甲烷萃取3次，收集有机相，用无水na2so4干燥，减压旋蒸得粗产品，后经甲醇重结晶或柱层析得目标化合物；所述二氯甲烷和甲醇的体积比为25:1。
[0062]
在本发明中，所述中间体d、酰氯和碳酸钾的摩尔比为(0.92～0.95):(0.8～0.9):(1.8～1.9)。
[0063]
为了更好地理解本发明，下面结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明的内容不仅仅局限于下面的实施例。
[0064]
实施例1
[0065]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z1)，包括以下步骤:
[0066]
(1)3-羟基-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的合成:于250ml的三口烧瓶中加入5,7-二羟基-3-(((2r，3s，4s，5s，6r)-3,4,5-三羟基-6-甲基四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)-2-(3,4,5-三羟基苯基)-4h-色烯-4-酮(5.0g,10.8mmol)、无水碳酸钾(15.3g,107.7mmol)、80ml的dmf，搅拌约10min后，向体系中加入碘甲烷(8ml,129mmol)，常温反应约48h，抽滤除去固体，收集滤液并用水分散，二氯甲烷萃取，收集有机相，减压蒸馏除去溶剂后得酒红色浓缩液，浓缩液加入100ml乙醇，加热至90℃反应30min，加入10ml浓盐酸，待大量固体析出后，继续回流2h，冷却反应液，抽滤，滤饼用乙醇洗涤数次，得到淡黄色固体，产率80.7％。
[0067]
(2)3-(3-溴丙氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的合成:将3-羟基-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮(5.0g,12.9mmol)、无水碳酸钾(5.4g,38.8mmol)、100ml dmf加入到250ml的圆底烧瓶中，冰浴条件下搅拌1h后，加入1,3-二溴丙烷(3.9ml,39.2mmol)，继续反应10h，待反应结束后，用500ml冰水分散，析出大量固体，抽滤，滤饼分别用水、石油醚洗涤数次，得白色固体，产率91.5％。
[0068]
(3)叔丁基-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4基)氨基甲酸酯的合成:将4-(n-boc)氨基哌啶(0.72g,3.53mmol)和无水k2co3(0.82g,5.89mmol)加入到50ml的乙腈溶液中，常温搅拌30min后，向体系中加入3-(3-溴丙氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮(1.5g,2.94mmol)，升温至80℃反应8h。待反应结束后，将混合物过滤，滤饼用二氯甲烷洗涤3次，收集滤液并减压旋蒸，得酒红色油状粗产品，无需处理，直接进行下一步反应。
[0069]
(4)3-(3-(4-氨基哌啶-1-基)丙氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的制备:将步骤(3)中的粗产物用50ml的乙醇溶解于100ml的单口烧瓶中，逐滴加入8ml5％的盐酸水溶液，80℃回流2h。待反应结束后，减压旋出大量溶剂后，再加入30ml的乙酸乙酯不断搅拌至有大量黄色固体析出，抽滤，滤饼烘干。烘干后用200ml蒸馏水将滤饼溶解，用少量乙酸乙酯萃取杂质，弃去有机相，收集水相并用5％的nahco3溶液调节ph值至8-9，用二氯甲烷萃取，收集有机相，减压旋蒸除去溶剂得白色固体，产率90.3％。
[0070]
(5)n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成:将3-(3-(4-氨基哌啶-1-基)丙氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮(0.5g,0.946mmol)、无水k2co3(0.26g，1.89mmol)、20ml二氯甲烷加入到50ml圆底烧瓶中，冰浴条件下搅拌30min，逐滴加入摩尔量的的苯甲酰氯(0.13g,0.9mmol)，常温反应30min，待反应结束将体系分散到100ml的水中，用二氯甲烷萃取3次，收集有机相，用无水na2so4干燥，减压旋蒸得粗产品，后经甲醇重结晶或柱层析得目标化合物(二氯甲烷:甲醇＝25:1，v/v)，产率55％。
[0071]
实施例2
[0072]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-4-甲基苯甲酰胺的合成的合成(化合物编号为z2)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)的苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-甲基苯甲酰氯。产率:59％。
[0073]
实施例3
[0074]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-2-氟苯甲酰胺的合成(化合物编号为z3)，步骤同实施例1，区别在于，将步
骤(5)的苯甲酰氯替换为等摩尔量的2-氟苯甲酰氯。产率:56％。
[0075]
实施例4
[0076]
4-氯-n-(1-3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z4)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-氯苯甲酰氯。产率:52％。
[0077]
实施例5
[0078]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-4-氟苯酰胺的合成(化合物编号为z5)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-氟苯甲酰氯。产率:62％。
[0079]
实施例6
[0080]
4-溴-n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z6)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-溴苯甲酰氯。产率:62％。
[0081]
实施例7
[0082]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-4-甲氧基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z7)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-甲氧基苯甲酰氯。
[0083]
产率:52％
[0084]
实施例8
[0085]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-硝基苯酰胺)-4-硝基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z8)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-硝基苯甲酰氯。产率:55％。
[0086]
实施例9
[0087]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基呋喃-2-羧酰胺的合成(化合物编号为z9)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的2-呋喃甲酰氯。产率:55％。
[0088]
实施例10
[0089]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基异烟酰胺的合成(化合物编号为z10)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的异烟酰氯盐酸盐。产率:61％。
[0090]
实施例11
[0091]
3-环戊基-n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4基)丙酰胺的合成(化合物编号为z11)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的3-环戊基丙酰氯。产率:51％。
[0092]
实施例12
[0093]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)丙酰胺的合成(化合物编号为z12)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的丙酰氯。产率:48％。
[0094]
实施例13
[0095]
3-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-1,1-二甲基脲的合成(化合物编号为z13)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的二甲氨基甲酰氯。产率:40％。
[0096]
实施例14
[0097]
2,4-二氯-n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z14)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的2,4-二氯苯甲酰氯。产率:54％。
[0098]
实施例15
[0099]
n-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色酮-3-基)丙氧基)哌啶-4-基)-3,5-二甲基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z15)，步骤同实施例1，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的3,5-二甲基苯甲酰氯。产率:51％。
[0100]
实施例16
[0101]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z16)，包括以下步骤:
[0102]
(1)3-羟基-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的合成:与实施例1步骤1相同。
[0103]
(2)3-(4-溴丁氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的合成:与实施例1步骤2相同，区别在于，将1,3-二溴丙烷替换成等物质量得1,4-二溴丁烷。
[0104]
(3)叔丁基-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基-4h-色烯-3-基)氧基)哌啶-4基)氨基甲酸酯的合成:与实施例1步骤3相同，区别在于，将3-(3-溴丙氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮替换成等物质量的3-(4-溴丁氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮。
[0105]
(4)3-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-丁氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮的制备:与实施例1步骤4相同，区别在于，将叔丁基-(1-(3-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丙氧基)哌啶-4基)氨基甲酸酯替换成等物质量的叔丁基-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基-4h-色烯-3-基)氧基)哌啶-4基)氨基甲酸酯。
[0106]
(5)n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺合成:将3-(4-(4-氨基哌啶-1-基)-丁氧基)-5,7-二甲氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-4-酮(0.5g,0.92mmol)和无水k2co3(0.25g,1.84mmol)加入到20ml二氯甲烷溶液中，冰浴搅拌30min后，逐滴加入苯甲酰氯(0.12g,0.88mmol)后常温反应30min后停止反应，将反应体系分散到100ml的水中，用二氯甲烷萃取3次，收集有机相，并用na2so4干燥，减压旋蒸得粗产品，后经甲醇重结晶或柱层析得目标化合物(二氯甲烷:甲醇＝25:1，v/v)，产率58％。
[0107]
实施例17
[0108]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)啶-4-基)-4-甲基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z17)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-甲基苯甲酰氯。产率:60％。
[0109]
实施例18
[0110]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-2-氟苯酰胺的合成(化合物编号为z18)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的2-氟苯甲酰氯。产率:68％。
[0111]
实施例19
[0112]
4-氯-n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z19)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-氯苯甲酰氯。产率:62％。
[0113]
实施例20
[0114]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-4-氟苯酰胺(化合物编号为z20)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-氟苯甲酰氯。产率:61％。
[0115]
实施例21
[0116]
4-溴-n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z21)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-溴苯甲酰氯。产率:46％。
[0117]
实施例22
[0118]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-4-甲氧基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z22)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-甲氧基苯甲酰氯。产率:42％。
[0119]
实施例23
[0120]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基))-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-4-硝基苯甲酰胺的合成(化合物编号为z23)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的4-硝基苯甲酰氯。产率:67％。
[0121]
实施例24
[0122]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)呋喃-2-羧酰胺(化合物编号为z24)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的2-呋喃甲酰氯。产率:81％。
[0123]
实施例25
[0124]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)异烟酰胺(化合物编号为z25)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的异烟酰氯盐酸盐。产率:48％。
[0125]
实施例26
[0126]
3-环戊基-n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)丙酰胺(化合物编号为z26)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的3-环戊基丙酰氯。产率:65％。
[0127]
实施例27
[0128]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)丙酰胺(化合物编号为z27)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的丙酰氯。产率:59％。
[0129]
实施例28
[0130]
3-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-1,1-二甲基脲(化合物编号为z28)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的二甲基氨基甲酰氯。产率:67％。
[0131]
实施例29
[0132]
2,4-二氯-n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)苯甲酰胺的合成(化合物编号为z29)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的2,4-二氯苯甲酰氯。产率:62％。
[0133]
实施例30
[0134]
n-(1-(4-(5,7-二甲氧基-4-氧基-2-(3,4,5-三甲氧基苯基)-4h-色烯-3-基)丁氧基)哌啶-4-基)-3,5-二甲基苯甲酰胺(化合物编号为z30)，步骤同实施例16，区别在于，将步骤(5)中苯甲酰氯替换成等摩尔量的3,5-二甲基苯甲酰氯。产率:40％。
[0135]
实施例1～30中合成的含哌啶酰胺的杨梅素类衍生物的理化性质和质谱数据见表1，核磁共振氢谱(1h nmr)和碳谱(
13
c nmr)数据见表2。
[0136]
表1目标化合物理化性质及其质谱分析数据
[0137]
[0138][0139]
表2目标化合物核磁共振谱数据
[0140]
[0141]
[0142]
[0143]
[0144]
[0145]
[0146][0147]
试验例1抗植物病原真菌活性测试
[0148]
(1)测试方法
[0149]
采用菌丝生长速率法对水稻纹枯病菌(rs)、小麦赤霉病菌(fg)、油菜菌核病菌(ss)、葡萄座腔病菌(bd)、猕猴桃拟茎点病菌(ps)、蓝莓灰霉病菌(bc)、辣椒疫霉病菌(pc)、辣椒炭疽病菌(cc)这八种植物病原真菌进行了体外活性评价，以商品药剂嘧菌酯作为阳性对照。具体步骤如下:
[0150]
将10mg待测药物溶于1ml dmso中，取150μl药液加入1450μl融化的pda培养基中，配制成浓度为100μg/ml的含药培养基，摇匀后将含药培养基均匀地倒入3个已灭菌的培养皿中，常温下自然凝固，在培养皿中心接种直径为5.00mm的菌饼，用封口膜将培养皿封好，阴性对照加入150μldmso，阳性对照为商品药剂嘧菌酯，将培养皿置于28℃培养箱中培养2～5d，采用十字交叉法测量菌落直径，并使用spss计算出测试药物对供试真菌的抑制率。每个处理设置3个重复，每个试验重复3次。抑制率计算如下:
[0151]
抑制率i(％)＝(c
tur-t
tur
)/(c
tur-0.4)
×
100
[0152]ctur
:对照菌落直径即dmso处理的菌落直径；
[0153]
t
tur
:药剂处理的菌落直径；
[0154]
0.4:菌饼直径；
[0155]
i:抑制率.
[0156]
(2)抗植物病原真菌的生物活性测试结果见表3。
[0157]
表3.z1-z30在100μg/ml时的体外抑真菌活性
[0158][0159][0160]
从表3可以看出，所有目标化合物在100μg/ml浓度下对八种真菌均具有一定的抑制活性。其中，z11和z26对八种真菌表现出较好的抑制活性，z11和z26对rs、ss、bd、ps的抑制率分别为90.6％和91％、100％和97.5％、90.5％和91.2％、97％和97.9％，显著优于嘧菌酯(85.7％、61.8％、79.0％、79.7％)。z11和z26对fg、pc和cc的抑制活性分别为64.7％和69.7％、62.6％和63.6％、64.2％和69.2％，与嘧菌酯(66.7％、60.3％和63.1％)相当。
[0161]
以上实验活性数据表明含哌啶酰胺的衍生物对植物病源真菌具有一定的抑制作用，其中部分目标化合物对抗植物病菌表现出优良活性，可作为潜在的抗植物病菌药物，具有较好的应用前景。
[0162]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种具有如下所示结构式的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物:式中，n为3或4；r独立地选自烷基、取代胺基、任意取代或未取代的苯基、芳杂环基中的一个。2.根据权利要求1所述的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物，其特征在于，所述烷基为乙基或环戊基乙基；所述取代胺基为含有一个或以上甲基的胺基；所述取代苯基为苯环上邻位、间位和对位上含有一个及以上的甲基、甲氧基、硝基或卤原子，或苯环上邻位和间位上含有一个及以上甲基、甲氧基、硝基或卤原子；所述芳杂环基为呋喃基或吡啶基。3.权利要求1或2所述含哌啶酰胺的杨梅素衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤:(1)以杨梅苷和ch3i为原料，在碱性条件下的溶剂中常温反应48h，后经抽滤，萃取，浓缩操作后，所得产物在酸性条件的醇溶液中90℃回流2h制备中间体a；(2)以中间体a和二溴烷烃为原料，在碱性条件下的溶剂中冰浴10-12h，制备中间体b；(3)以中间体b和4-(n-boc-氨基)哌啶为原料，碳酸钾为催化剂，在乙腈溶剂中80℃条件下反应8h制备中间体c；(4)以中间体c为原料，乙醇为溶剂，升温至80℃的条件下逐滴加入浓度为5％hcl溶液反应2h脱去boc保护后，再用nahco3水溶液将体系调节至碱性制备中间体d；(5)以中间体d和取代的酰氯为原料，碳酸钾为催化剂，在溶剂中常温制备含哌啶酰胺的杨梅素衍生物；所述化合物a、化合物b、化合物c、化合物d的化学结构式如下:
所述二溴烷烃为br-(ch2)
n-br，n为3或4。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述杨梅苷和ch3i的摩尔比为10.8:(129～161)。5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述中间体a和二溴烷烃的摩尔比为12.9:(39.2～64.7)。6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述中间体b、4-(n-boc-氨基)哌啶和碳酸钾的摩尔比为1.94:(3.53～4.42):(5.89～14.72)。7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(5)所述中间体d、取代的酰氯和碳酸钾的摩尔比为(0.92～0.95):(0.8～0.9):(1.8～1.9)。8.权利要求1或2所述含哌啶酰胺的杨梅素衍生物在抑制植物病原真菌中的应用；所述植物病原真菌为水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、油菜菌核病菌、葡萄座腔病菌、猕猴桃拟茎点病菌、蓝莓灰霉病菌、辣椒疫霉病菌和辣椒炭疽病菌中的一种或多种。

技术总结
本发明提供了一种含哌啶酰胺的杨梅素衍生物、制备方法及应用，属于农药合成技术领域。本发明以杨梅素为基础，将具有优良活性的哌啶和酰胺基团引入到杨梅素的结构中，合成了一系列含哌啶酰胺的杨梅素衍生物，通过对所合成的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物抑制植物病原真菌活性测试，发现本发明合成的含哌啶酰胺的杨梅素衍生物能有效抑制植物病原真菌。素衍生物能有效抑制植物病原真菌。


技术研发人员：薛伟 张妙鹤 尹诗涛 冯双 陈帅 曾微 孙治灵 刘庚 贺鸣 卢平
受保护的技术使用者：贵州大学
技术研发日：2023.05.24
技术公布日：2023/8/16