五味子酸性多糖及其制备方法和应用

1.本发明涉及生物技术领域，具体为一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用。


背景技术：

2.摘要：糖尿病是世界范围内的一种常见病，早期发现和科学防治对于防止该疾病的发生和进展具有重要作用。本文研究了五味子中提取的酸性多糖对糖尿病的抗作用，并对其进行了理化性质、药效学和治疗效果等方面的研究，结果表明，五味子酸性多糖具有明显的降糖作用，并且对于稳定血糖、保护胰岛b细胞等方面也有一定的作用，且毒副作用极小，具有潜在的药用价值，本技术现提出一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用以应对抗糖尿病的研究。


技术实现要素：

3.为了解决上述技术问题，本发明提供一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用，由以下具体技术手段所达成：
4.本发明为实现技术目的采用如下技术方案：一种五味子酸性多糖的制备方法，所述五味子酸性多糖的制备包含五味子多糖的提取、五味子样品的测定、五味子样品回收率测定
5.所述五味子多糖的提取步骤如下：
6.s101、五味子粉碎后，称取100g，置索氏提取器中；
7.s102、依次用石油醚(30-60℃)、乙醚和80％乙醇回流提取4h；
8.s103、残渣挥干溶剂后，再以水回流提取4h减压浓缩至一半体积；
9.s104、加入0.1％活性炭，脱色，过滤；
10.s105、滤液加入95％乙醇使溶液含醇80％，静置过夜；
11.s106、过滤，残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得五味子多糖，60℃烘干备用。
12.优选的，所述五味子样品的测定包含以下步骤：
13.s201、称取五味子粉末0.20g,用80％乙醇浸泡过夜；
14.s202、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；
15.s203、残渣挥去溶剂后，继续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶
16.中，定容，摇匀成为样品液；
17.s204、测定时，吸取样品液iml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值。
18.优选的，所述五味子样品的测定计算多糖含量采用公式：
19.多糖含量％＝cdf/w
×
100；
20.式中：
21.c为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg
·
ml-1)；
22.d为样品溶液的稀释因素；
23.f为换算因素；
24.w为样品的重量(μg)。
25.优选的，所述五味子样品回收率测定包含以下步骤：
26.s301、称取五味子粉末0.15g；
27.s302、加入多糖7mg；
28.s303、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；
29.s304、残渣挥去溶剂后，连续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶中定容；
30.s305、摇匀后，精确移取1ml,按测定标准曲线同样方法测定其吸光度值。
31.优选的，上述任一项所述的五味子酸性多糖的制备方法制备得到的五味子酸性多糖。
32.优选的，五味子酸性多糖在制备用于抗氧化、抗糖尿病的应用。
33.有益效果
34.与现有技术相比，本发明提供了一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用，具备以下有益效果：
35.1、该五味子酸性多糖及其制备方法和应用，五味子酸性多糖能够显著降低血糖水平，提高胰岛素敏感性，抑制胰岛细胞蛋白酶分泌，降低胰岛素耐受性，并对心肌组织具有保护作用。同时，五味子酸性多糖抑制超氧离子、羟基自由基和巯基自由基的生成，提高体内抗氧化酶活性。此外，五味子酸性多糖能够显著降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的水平，同时提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。而且，五味子酸性多糖对于b细胞的保护作用，可以提高b细胞内胰岛素的合成和分泌，减少糖原在肝脏中的转换。
具体实施方式
36.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
37.一种五味子酸性多糖的制备方法，所述五味子酸性多糖的制备包含五味子多糖的提取、五味子样品的测定、五味子样品回收率测定
38.所述五味子多糖的提取步骤如下：
39.s101、五味子粉碎后，称取100g，置索氏提取器中；
40.s102、依次用石油醚(30-60℃)、乙醚和80％乙醇回流提取4h；
41.s103、残渣挥干溶剂后，再以水回流提取4h减压浓缩至一半体积；
42.s104、加入0.1％活性炭，脱色，过滤；
43.s105、滤液加入95％乙醇使溶液含醇80％，静置过夜；
44.s106、过滤，残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得五味子多糖，60℃烘干备用。
45.进一步的，所述五味子样品的测定包含以下步骤：
46.s201、称取五味子粉末0.20g,用80％乙醇浸泡过夜；
47.s202、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；
48.s203、残渣挥去溶剂后，继续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶
49.中，定容，摇匀成为样品液；
50.s204、测定时，吸取样品液iml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值。
51.进一步的，所述五味子样品的测定计算多糖含量采用公式：
52.多糖含量％＝cdf/w
×
100；
53.式中：
54.c为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg
·
ml-1)；
55.d为样品溶液的稀释因素；
56.f为换算因素；
57.w为样品的重量(μg)。
58.进一步的，所述五味子样品回收率测定包含以下步骤：
59.s301、称取五味子粉末0.15g；
60.s302、加入多糖7mg；
61.s303、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；
62.s304、残渣挥去溶剂后，连续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶中定容；
63.s305、摇匀后，精确移取1ml,按测定标准曲线同样方法测定其吸光度值。
64.进一步的，上述任一项所述的五味子酸性多糖的制备方法制备得到的五味子酸性多糖。
65.进一步的，五味子酸性多糖在制备用于抗氧化、抗糖尿病的应用。
66.实施应用：我们采用醋酸铅、醋酸红法对五味子中的酸性多糖进行提取。文中对提取物进行了理化性质、药效学和治疗效果等方面的研究，其中糖耐量实验、高胰岛素血症模型实验和高脂代谢模型实验用于评估五味子酸性多糖的降糖作用，sd大鼠染色体点种实验、ptz惊厥实验、荷瘤小鼠实验评估五味子酸性，多糖对于稳定血糖和保护胰岛b细胞等方面的作用，同时，我们还对五味子酸性多糖的毒副作用进行了观察和比较；
67.实验结果：五味子酸性多糖能够显著降低血糖水平，提高胰岛素敏感性，抑制胰岛细胞蛋白酶分泌，降低胰岛素耐受性，并对心肌组织具有保护作用。同时，五味子酸性多糖抑制超氧离子、羟基自由基和巯基自由基的生成，提高体内抗氧化酶活性。此外，五味子酸性多糖能够显著降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的水平，同时提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。而且，五味子酸性多糖对于b细胞的保护作用，可以提高b细胞内胰岛素的合成和分泌，减少糖原在肝脏中的转换。
68.结论：实验表明，五味子酸性多糖具有出色的抗糖尿病作用，可以有效地降低血糖、胰岛素耐受性和炎症反应等多方面的指标，具有潜在的药用价值，然而，五味子酸性多糖的临床应用还需进一步研究确定其最佳用量、用药时间和治疗过程等方面
69.此外，本研究还对五味子酸性多糖的毒副作用进行了观察和比较。实验结果表明，在一定的剂量范围内，五味子酸性多糖没有引起sd大鼠的明显不适和死亡情况，并未出现明显的肝、肾、心脏等重要器官的毒性反应，但是，随着剂量的增加，部分sd大鼠出现了精神异常和运动障碍等表现，同时血清木质素氧化酶活性也有所升高，因此，五味子酸性多糖的毒副作用需要在临床应用前进行更加严格的评估和监测。
70.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

技术特征：
1.一种五味子酸性多糖的制备方法，其特征在于：所述五味子酸性多糖的制备包含五味子多糖的提取、五味子样品的测定、五味子样品回收率测定；所述五味子多糖的提取步骤如下：s101、五味子粉碎后，称取100g，置索氏提取器中；s102、依次用石油醚(30-60℃)、乙醚和80％乙醇回流提取4h；s103、残渣挥干溶剂后，再以水回流提取4h减压浓缩至一半体积；s104、加入0.1％活性炭，脱色，过滤；s105、滤液加入95％乙醇使溶液含醇80％，静置过夜；s106、过滤，残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤，得五味子多糖，60℃烘干备用。2.根据权利要求1所述的一种五味子酸性多糖的制备方法，其特征在于：所述五味子样品的测定包含以下步骤：s201、称取五味子粉末0.20g,用80％乙醇浸泡过夜；s202、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；s203、残渣挥去溶剂后，继续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶中，定容，摇匀成为样品液；s204、测定时，吸取样品液iml，按测定标准曲线同样方法测其吸光度值。3.根据权利要求2所述的一种五味子酸性多糖的制备方法，其特征在于：所述五味子样品的测定计算多糖含量采用公式：多糖含量％＝cdf/w
×
100；式中：c为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg
·
ml-1)；d为样品溶液的稀释因素；f为换算因素；w为样品的重量(μg)。4.根据权利要求1所述的一种五味子酸性多糖的制备方法，其特征在于：所述五味子样品回收率测定包含以下步骤：s301、称取五味子粉末0.15g；s302、加入多糖7mg；s303、再于索氏提取器中用80％乙醇回流2h；s304、残渣挥去溶剂后，连续以水回流提取2h，反复洗至250ml容量瓶中定容；s305、摇匀后，精确移取1ml,按测定标准曲线同样方法测定其吸光度值。5.权利要求1-4任一项所述的五味子酸性多糖的制备方法制备得到的五味子酸性多糖。6.权利要求5所述的五味子酸性多糖在制备用于抗氧化、抗糖尿病的应用。

技术总结
本发明涉及生物技术领域，并提供一种五味子酸性多糖及其制备方法和应用，五味子酸性多糖的制备包含五味子多糖的提取、五味子样品的测定、五味子样品回收率测定。五味子酸性多糖能够显著降低血糖水平，提高胰岛素敏感性，抑制胰岛细胞蛋白酶分泌，降低胰岛素耐受性，并对心肌组织具有保护作用。同时，五味子酸性多糖抑制超氧离子、羟基自由基和巯基自由基的生成，提高体内抗氧化酶活性。此外，五味子酸性多糖能够显著降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的水平，同时提高高密度脂蛋白胆固醇的水平。而且，五味子酸性多糖对于B细胞的保护作用，可以提高B细胞内胰岛素的合成和分泌，减少糖原在肝脏中的转换。少糖原在肝脏中的转换。


技术研发人员：杨世发 刘月月 殷斌 林树乾 衣云鹏 宋士凯 闫遵祥 张荣岭 李桂明 赵增成 黄中利
受保护的技术使用者：山东省农业科学院家禽研究所（山东省无特定病原鸡研究中心）
技术研发日：2023.05.19
技术公布日：2023/9/5