一株极端东方化假单胞菌及其应用的制作方法

1.本发明涉及一株极端东方化假单胞菌及其应用，属于微生物农药技术领域。


背景技术：

2.松材线虫病(bursaphelench xylophilus)被称为“松树癌症”，松树一旦感染，暂无有效的治疗办法，病死率极高。目前，我国因松材线虫病损失的松树累计高达数十亿株，造成的直接经济损失和生态服务价值损失上千亿元。如果松材线虫病疫情得不到有效控制，不但以松树为主的景观不复存在，而且对生态环境将会造成严重的破坏。
3.甘薯茎线虫病是由甘薯茎线虫(ditylenchus dipsaci)引起的，发生在甘薯上的病害。在中国以山东、河北两省发病较严重。该病主要危害薯块，致使薯块糠心，其次是侵害薯苗和薯蔓基部，一般造成减产15％，严重时减产可达60％，甚至绝收。
4.松材线虫病和甘薯茎线虫病分别是目前林业和农业中危害严重且难于防治的两种线虫病害。目前，对于这两种线虫病防治主要以化学和物理防治为主，如：打孔注药、清理染病树木仍是松材线虫病主流的防治手段；施用化学农药是甘薯茎线虫病的常用防治手段。这些防治方式虽起到一定遏制效果，但给生态环境带来沉重负担；同时，费时费力费财，不是长久之计！因此，探讨如何在保护环境和生物多样性的前提下，寻求一种安全、环保、高效的防治松材线虫的生物防治方法对保护我国的森林生态安全具有重要意义，寻求一种安全、环保、高效的防治甘薯茎线虫病的生物防治方法对提高甘薯产量及农业生产安全具有重要意义。
5.极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)是假单胞菌属的一种功能研究相对较少的新菌种，具有潜在的开发价值。专利cn110144302a公开了一种高产嗜铁素极端东方化假单胞菌以及菌剂和用途，菌株为swny 4-5，其微生物保藏号为cgmcc no.16563，相关实验表明，以该菌株制成的菌剂能有效防治植物生理缺铁性黄化病，有效防治由于根结线虫引起的植物病理性黄化病；但该专利中对根结线虫研究未进行大田试验验证，推广性不足，同时该菌株对松材线虫和甘薯茎线虫防治效果未进行研究。目前，对于极端东方化假单胞菌研究少之又少，未见极端东方化假单胞菌防治松材线虫和甘薯茎线虫的报道。


技术实现要素：

6.针对上述问题，本发明提供了一株极端东方化假单胞菌及其应用，该菌株为极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02，该菌株能够有效防治松材线虫病害和甘薯茎线虫病害发生和传播，还可减轻因化学农药使用带来的环境污染，且该菌株易于发酵制备微生物菌剂，因此表现出广阔的应用前景。
7.本发明的上述目的是通过以下技术方案实现的：本发明自济南西郊湿地泥样分离并经杀线活性筛选得到对松材线虫和甘薯茎线虫均具有高致死率的极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02，该菌株已于2022年08月19日保藏于中国微生
物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.25551，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。该菌株在na培养基上生长，前期无色透明并逐渐变为奶白色、边缘整齐、表面光滑湿润，圆形，不产色素；后期产生大量黄绿色色素，并导致培养基变色。
8.本发明的另一个目的是提供了极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02在防治松材线虫病和/或甘薯茎线虫病方面的应用。
9.本发明还提供了一种极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02液体制剂。
10.上述极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02液体制剂制备方法，其特征是，将极端东方化假单胞菌szsy-02种子液按照体积比3～8％接入大量发酵培养基中在25～30℃下发酵培养16～20h，得到极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂，活菌数800～1000亿/ml。
11.大量发酵培养基配方(质量比)：食用葡萄糖1.8～2.2％、鱼蛋白胨0.4～0.6％、糖蜜液0.2～0.4％、酵母浸粉1.2～1.8％、硫酸镁0.008～0.015％、磷酸二氢钾0.02～0.04％、碳酸钙0.4～0.6％，剩余为水，ph调至7.2～7.3。
12.优选的，大量发酵培养基配方(质量比)：食用葡萄糖2％、鱼蛋白胨0.5％、糖蜜液0.3％、酵母浸粉1.5％、硫酸镁0.01％、磷酸二氢钾0.03％、碳酸钙0.5％，剩余为水，ph调至7.2～7.3。
13.上述极端东方化假单胞菌szsy-02种子液的制备方法为：将活化后的极端东方化假单胞菌szsy-02接种于种子液培养基中，25～30℃下恒温振荡培养10～15h，制成极端东方化假单胞菌szsy-02种子液。其中，种子液培养基配方(质量比)：葡萄糖0.5％、蛋白胨0.5％，牛肉粉0.3％，氯化钠0.5％，其余为水，调整ph7.3
±
0.1。
14.本发明的技术效果是：
15.1、本发明自济南西郊湿地泥样分离筛选得到对松材线虫和甘薯茎线虫有高致死率的极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02，该菌株液体制剂对松材线虫林间防效为79.12％，对甘薯茎线虫田间防效为75.51％，能够有效预防松材线虫病害和甘薯茎线虫病害发生与扩散；
16.2、极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂易于发酵生产，使用方法简单，可有效缓解因化学农药使用带来的环境污染，在松材线虫和甘薯茎线虫绿色防治中展现出广阔的应用前景。
附图说明
17.图1为szsy-02、szsy-05标准菌液对松材线虫校正死亡率的影响；
18.图2为极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02菌落形态；
19.图3为极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02菌体形态，其中a图为简单染色；b图为革兰氏染色结果。
具体实施方式
20.下面将结合本发明实施例中的内容，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于
本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
21.实施例1：极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)菌株szsy-02的分离与纯化
22.1.菌株分离纯化方法
23.(1)分离来源：本发明所涉及的极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02是从济南西郊湿地泥样中分离获得。
24.(2)分离时间及地点：于2021年4月16日在济南栖圣农林科技有限公司研发部实验室分离获得。
25.(3)分离与纯化步骤：采用稀释涂布法分离获得的，具体方法如下：
26.①
样品采集：在山东省济南市西郊湿地块，采用五点取样法，分别采集湿地四周及中央深度10～20cm范围内适量泥块，分装于保鲜袋并置于含生物冰袋的泡沫盒中，运回实验室；每个保鲜袋注明采集时间、采集地点和采集人等信息；
27.②
制备泥样悬液：称取1g泥样放入盛有100ml无菌生理盐水的500ml三角瓶中，置于30℃恒温振荡培养箱中150rpm均匀震荡10～20min，使河泥中的菌体、芽孢或孢子均匀分散，即制成泥样悬液；
28.③
稀释涂布：利用10倍稀释法将泥样悬液依次稀释成10-1
～10-5
稀释度的菌样；分别从10-3
、10-4
和10-5
稀释度的菌样中各吸取100μl分别涂布于na和含氯霉素pda平板上，每个梯度每种培养基分别涂布三个平行；
29.④
培养：将涂布的平板封口，置于30℃培养箱中培养2～3d，定时观察平板菌落生长情况；
30.⑤
纯化：根据平板上不同菌落形态，用接种环、接种钩进行挑单菌和划线培养，30℃恒温倒置培养，直至平板上长出单一菌落；
31.⑥
保存：将纯化的单菌落接种于相应培养基试管中，30℃恒温2～3d后，保存于4℃冰箱备用。
32.2.结果分析
33.依据上述方法，从济南西郊湿地泥样中共分离到细菌12株，编号szsy-01～szsy-12；分离到真菌5株，编号szsy-21～szsy25。
34.实施例2：高效杀线虫菌株极端东方化假单胞菌szsy-02的筛选
35.1.实验方法
36.(1)不同待测菌株标准菌液制备
37.无菌条件下，将待测12株细菌于na培养基划线，30℃条件下活化培养，同时观察有无染菌；活化完成后，用接种环取一环菌苔接种于nb培养中，27℃、120r/min恒温振荡培养12h，制成不同菌株种子液；将种子液按照体积比1％接种量接种于nb培养基中，27℃、120r/min恒温振荡培养20h，制成不同菌株发酵液；利用稀释法将待测菌株发酵液制成浓度为1.0
×
109cfu
·
ml-1
标准菌液。
38.(2)松材线虫、甘薯茎线虫溶液制备
39.将保存于灰葡萄孢菌平板中的松材线虫和甘薯茎线虫分别转接于新的灰葡萄孢菌平板中，保鲜膜封口，于25℃恒温箱中培养5～10d；线虫培养完成后，无菌条件下，利用贝
尔曼漏斗法分离线虫，用0.002％的放线菌酮+0.1％的硫酸链霉素进行消毒，并用无菌水漂洗干净，制成浓度约为5000头/ml无菌线虫提取液。
40.(3)不同待测菌株标准菌液对松材线虫和甘薯茎线虫杀灭活性检测
41.按照体积比1:1将待测菌株标准菌液与线虫提取液(摇匀)于96孔板充分混合，各为100μl，并使线虫稳定在2500头/ml；以无菌水处理为空白对照；25℃静置处理24h；处理完成后将混合液于2000r/min离心机离心180s，去掉上清，用200μl无菌水重悬，取50μl重悬液于载玻片上，镜检，观察线虫死亡情况，以僵直不动线虫为死亡线虫标准，计算各待测菌株标准菌液处理线虫死亡率及校正死亡率。
42.死亡率(％)＝线虫死亡数/线虫总数
×
100；
43.校正死亡率(％)＝(处理死亡率-空白对照死亡率)/(1-空白对照死亡率)
×
100。
44.2.结果分析
45.经实验证明，在检测的12株细菌中，仅有szsy-02和szsy-05的标准菌液表现出杀线虫活性，且两者对松材线虫和甘薯茎线虫均具杀灭活性(参照表1)。
46.表1不同菌株标准菌液对两种线虫杀灭活性统计
[0047][0048][0049]
注：“+，+”代表“对两种线虫均具杀灭活性”，“－，－”代表“对两种线虫均无杀灭活性”。
[0050]
通过对校正死亡率计算发现，经szsy-02标准菌液处理24h后，松材线虫和甘薯茎线虫校正死亡率分别为100％和96.97％；经szsy-05标准菌液处理24h后，松材线虫和甘薯茎线虫校正死亡率分别为25.66％和50.91％(参照图1)。进一步分析发现，szsy-02标准菌液对松材线虫和甘薯茎线虫杀灭活性显著高于szsy-05标准菌液。以上结果说明，szsy-02菌液能够高效杀灭松材线虫和甘薯茎线虫，可将szsy-02作为松材线虫和甘薯茎线虫生物防治的优良菌株进行后续研究。
[0051]
实施例3：菌株szsy-02的鉴定
[0052]
(1)菌落培养特征：该菌株在na培养基(牛肉膏0.3％，蛋白胨1％，氯化钠0.5％，琼脂1.5～2％)上生长，前期无色透明并逐渐变为奶白色、边缘整齐、表面光滑湿润，圆形，不产色素；后期(27～30℃恒温培养3d)产生大量黄绿色色素，并导致培养基变色(参照图2)。
[0053]
(2)显微特性观察：菌体镜检呈杆状或略有弯曲(参照图3a)，大小1.8～2.2
×
0.2～0.4μm；无芽孢产生；革兰氏染色阴性(参照图3b)。
[0054]
(3)分子生物学特性：
[0055]
该菌株的16s rdna基因序列测定结果如下(seq-1)：
[0056]
gagaagcttgcttctcttgagagcggcggacgggtgagtaatgcctaggaatctgcctggtagtggggg
ataacgttcggaaacgaacgctaataccgcatacgtcctacgggagaaagcaggggaccttcgggccttgcgctatcagatgagcctaggtcggattagctagttggtgaggtaatggctcaccaaggcgacgatccgtaactggtctgagaggatgatcagtcacactggaactgagacacggtccagactcctacgggaggcagcagtggggaatattggacaatgggcgaaagcctgatccagccatgccgcgtgtgtgaagaaggtcttcggattgtaaagcactttaagttgggaggaagggcagttacctaatacgtgattgttttgacgttaccgacagaataagcaccggctaactctgtgccagcagccgcggtaatacagagggtgcaagcgttaatcggaattactgggcgtaaagcgcgcgtaggtggtttgttaagttggatgtgaaatccccgggctcaacctgggaactgcattcaaaactgactgactagagtatggtagagggtggtggaatttcctgtgtagcggtgaaatgcgtagatataggaaggaacaccagtggcgaaggcgaccacctggactaatactgacactgaggtgcgaaagcgtggggagcaaacaggattagataccctggtagtccacgccgtaaacgatgtcaactagccgttggaagccttgagcttttagtggcgcagctaacgcattaagttgaccgcctggggagtacggccgcaaggttaaaactcaaatgaattgacgggggcccgcacaagcggtggagcatgtggtttaattcgaagcaacgcgaagaaccttaccaggccttgacatccaatgaactttccagagatggattggtgccttcgggaacattgagacaggtgctgcatggctgtcgtcagctcgtgtcgtgagatgttgggttaagtcccgtaacgagcgcaacccttgtccttagttaccagcacgtcatggtgggcactctaaggagactgccggtgacaaaccggaggaaggtggggatgacgtcaagtcatcatggcccttacggcctgggctacacacgtgctacaatggtcggtacagagggttgccaagccgcgaggtggagctaatcccataaaaccgatcgtagtccggatcgcagtctgcaactcgactgcgtgaagtcggaatcgctagtaatcgcgaatcagaatgtcgcggtgaatacgttcccgggccttgtacacaccgcccgtcacaccatgggagtgggttgcaccagaagtagc
[0057]
经微生物学特性和分子生物学特性研究，鉴定菌株szsy-02为极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)，该菌株已于2022年08月19日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.25551。
[0058]
实施例4：极端东方化假单胞菌szsy-02对松材线虫和甘薯茎线虫的毒力测定
[0059]
1.实验方法
[0060]
首先制备不同浓度极端东方化假单胞菌szsy-02的发酵液：将实施例2制备的极端东方化假单胞菌szsy-02发酵液浓度分别调整为0.4
×
108cfu
·
ml-1
、0.8
×
108cfu
·
ml-1
、1.6
×
108cfu
·
ml-1
、3.2
×
108cfu
·
ml-1
和6.4
×
108cfu
·
ml-1
。
[0061]
参照实施例2所述方法对不同浓度极端东方化假单胞菌szsy-02发酵液杀线活性进行检测，在处理24h后观察两种线虫死亡情况，计算各处理线虫校正死亡率，确定了其24h的lc
50
。经处理后，极端东方化假单胞菌szsy-02发酵液终浓度为0.2
×
108cfu
·
ml-1
、0.4
×
108cfu
·
ml-1
、0.8
×
108cfu
·
ml-1
、1.6
×
108cfu
·
ml-1
和3.2
×
108cfu
·
ml-1
。
[0062]
2.结果分析
[0063]
实验结果分析发现，3.2
×
108cfu
·
ml-1
的极端东方化假单胞菌szsy-02发酵液处理线虫24h后，松材线虫与甘薯茎线虫校正死亡率分别高达95.56％和87.76％；我们进一步分别得到了其毒力回归方程，通过毒力回归方程计算分别得到szsy-02发酵液24h的lc
50
值，即lc
50
(松材线虫)＝0.73
×
108cfu
·
ml-1
，lc
50
(甘薯茎线虫)＝0.97
×
108cfu
·
ml-1
。该结果进一步说明szsy-02发酵液具有较高的杀线虫活性(参照表2)。
[0064]
表2不同浓度szsy-02的发酵液对松材线虫和甘薯茎线虫杀灭效果
[0065][0066]
实施例5：极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂制备过程
[0067]
种子液培养基配方(质量比)：葡萄糖0.5％、蛋白胨0.5％，牛肉粉0.3％，氯化钠0.5％，其余为水，调整ph7.3
±
0.1。
[0068]
大量发酵培养基配方(质量比)：食用葡萄糖2％、鱼蛋白胨0.5％、糖蜜液0.3％、酵母浸粉1.5％、硫酸镁0.01％、磷酸二氢钾0.03％、碳酸钙0.5％，剩余为水，ph调至7.2～7.3。其中，糖蜜液是制糖工业的副产品，主要成分为糖类，固形物约50％，蔗糖约24％～36％，其他糖约12％～24％；蛋白质3％～6％；此外还含有3％～4％的可溶性胶体，8％～10％矿物质。
[0069]
极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂制备过程：
[0070]
(1)种子液获取：无菌条件下，将极端东方化假单胞菌szsy-02于na培养基划线，30℃条件下活化培养，同时观察有无染菌；活化完成后，用接种环取一环菌苔接种于种子液培养基中，27℃、120r/min恒温振荡培养12h，制成szsy-02种子液；
[0071]
(2)大量发酵培养：按照罐体容积60～70％注水，依据大量发酵培养基配方上料，等到原料完全溶解后，调节ph7.2～7.3，加入少量消泡剂，121℃、0.1～0.12mpa灭菌30min；灭菌完成后，将种子液按照体积比5％接种量接入发酵罐中(500l)，在27℃、120r/min、通气量1.2v/v
·
min条件下，发酵培养16～20h，菌数可达800～1000亿/ml，此时即为极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂。
[0072]
实施例6：极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂林地药效试验
[0073]
本实施例提供了极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂对松材线虫林地防治的相关实验。
[0074]
1.试验方法
[0075]
(1)试验地点
[0076]
试验地选取威海环翠区张村镇松树苗木生产基地。试验区设在松树苗圃地内，地势平坦，易于观察与调查。试验区内栽培条件一致，松材线虫为害程度相当，符合试验要求。
[0077]
(2)试验药剂
[0078]
本发明实施例5制备的szsy-02液体制剂300倍稀释液。
[0079]
(3)供试作物与防治对象
[0080]
供试作物为黑松；防治对象为松材线虫。
[0081]
(4)试验方法
[0082]
本试验共设1个施药处理：300倍的szsy-02液体制剂，用量400公斤/亩(分两次施药，每次施药200公斤/亩)，共71亩，处理株数3789棵；对照为清水，用量400公斤/亩，共78亩，处理株数3923棵。我们于2021年6月1日在威海环翠区张村镇松树苗木生产基地展开无人机喷雾试验，施药后20d，进行第二次施药。两次施药完成后，于第二年对黑松死亡情况进
行统计，并计算各处理病情指数和防治效果。
[0083]
松材线虫病发病级数参照表3。
[0084]
表3松材线虫病发病分级标准
[0085][0086]
病情指数di(％)＝[∑(病级数)
×
该级发病植株数)]/[(病级最高值
×
调查总株数)]
×
100；
[0087]
防治效果(％)＝(对照病级指数-处理病情指数)/对照病情指数
×
100。
[0088]
2.结果分析
[0089]
实验结果分析发现，喷施300倍szsy-02液体制剂后，松材线虫病病情指数降低至0.57％，显著低于清水对照；进一步对其防治效果计算发现，300倍szsy-02液体制剂防治效果为79.79％(参照表4)。该结果说明，szsy-02液体制剂在林间能够有效防治松材线虫病害发生，可以作为松材线虫病生防制剂进行推广应用。
[0090]
表4各处理病情指数及防治效果
[0091][0092]
实施例7：极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂田间药效试验
[0093]
本实施例提供了极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂对甘薯茎线虫田间防治的相关实验。
[0094]
1.试验方法
[0095]
(1)试验地点
[0096]
试验地选取济南市莱芜区苗山镇甘薯种植地区。试验区地块往年甘薯茎线虫发病严重，符合试验要求。
[0097]
(2)试验药剂
[0098]
本发明实施例5制备的szsy-02液体制剂300倍稀释液。
[0099]
(3)供试作物与防治对象
[0100]
供试作物为甘薯，品种为市场普通品种“龙薯9号”；防治对象为甘薯茎线虫。
[0101]
(4)试验方法
[0102]
本试验于2022年5月15号开展，此时甘薯已定植完成。本试验共设1个施药处理：szsy-02液体制剂，每亩地4公斤(分两次施药，每次施药2公斤/亩)，施药区共10亩。苗期随
水滴灌一次，施药30d后相同方法第二次施药。对照区5亩为清水对照。当年10月中下旬调查各小区发病情况，计算薯块的发病率、病情指数及防治效果。
[0103]
发病率＝病薯数/薯块总数
×
100％；
[0104]
病情指数(％)＝[∑(各级别薯块数
×
相应级数)/(总薯块数
×
最高级数)]
×
100；
[0105]
防治效果(％)＝[(对照区病情指数－处理区病情指数)/对照区病情指数]
×
100。
[0106]
甘薯茎线虫病发病级数参照表5。
[0107]
表5甘薯茎线虫发病分级标准
[0108][0109]
2.结果分析
[0110]
实验结果发现，施用300倍szsy-02液体制剂后，甘薯茎线虫病发病率降低至17.96％，病情指数降低至6.29％，两项数据显著低于清水对照；进一步对其防治效果计算发现，300倍szsy-02液体制剂防治效果为74.34％(参照表6)。该结果说明，szsy-02液体制剂在田间能够有效防治甘薯茎线虫病害发生，可以作为甘薯茎线虫病生防制剂进行推广应用。
[0111]
表6各处理发病率、病情指数及防治效果
[0112][0113]

技术特征：
1.一株极端东方化假单胞菌(pseudomonas extremorientalis)szsy-02，所述菌株的保藏编号为cgmcc no.25551。2.权利要求1所述的极端东方化假单胞菌szsy-02在防治松材线虫病和/或甘薯茎线虫病方面的应用。3.一种极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂，以权利要求1所述的极端东方化假单胞菌szsy-02为有效成分。4.权利要求3所述的极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂的制备方法，其特征是，将极端东方化假单胞菌szsy-02种子液按照体积比3～8％接入大量发酵培养基中在25～30℃下发酵培养16～20h，得到极端东方化假单胞菌szsy-02液体制剂。5.如权利要求4所述的制备方法，其特征是，所述大量发酵培养基，按质量比计为：食用葡萄糖1.8～2.2％、鱼蛋白胨0.4～0.6％、糖蜜液0.2～0.4％、酵母浸粉1.2～1.8％、硫酸镁0.008～0.015％、磷酸二氢钾0.02～0.04％、碳酸钙0.4～0.6％，剩余为水，ph调至7.2～7.3。6.如权利要求5所述的制备方法，其特征是，所述大量发酵培养基，按质量比计为：食用葡萄糖2％、鱼蛋白胨0.5％、糖蜜液0.3％、酵母浸粉1.5％、硫酸镁0.01％、磷酸二氢钾0.03％、碳酸钙0.5％，剩余为水，ph调至7.2～7.3。7.如权利要求4所述的制备方法，其特征是，所述极端东方化假单胞菌szsy-02种子液的制备方法为：将活化后的极端东方化假单胞菌szsy-02接种于种子液培养基中，25～30℃下恒温振荡培养10～15h，制成极端东方化假单胞菌szsy-02种子液。8.如权利要求7所述的制备方法，其特征是，所述种子液培养基，按质量比计为：葡萄糖0.5％、蛋白胨0.5％，牛肉粉0.3％，氯化钠0.5％，其余为水，调整ph7.3
±
0.1。

技术总结
本发明公开了一株极端东方化假单胞菌及其应用。本发明自济南西郊湿地泥样分离并经杀线活性筛选得到对松材线虫和甘薯茎线虫均具有高致死率的极端东方化假单胞菌(Pseudomonas extremorientalis)SZSY-02，其保藏编号为CGMCC No.25551，该菌株液体制剂对松材线虫林间防效为79.12％，对甘薯茎线虫田间防效为75.51％，能够有效预防松材线虫病害和甘薯茎线虫病害发生与扩散，且液体制剂易于发酵生产，使用方法简单，可有效缓解因化学农药使用带来的环境污染。药使用带来的环境污染。药使用带来的环境污染。


技术研发人员：赵林 牛兆颖
受保护的技术使用者：济南栖圣农林科技有限公司
技术研发日：2023.03.09
技术公布日：2023/9/7