一种具有乌发功效的化妆品组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种具有乌发功效的化妆品组合物及其制备方法。


背景技术：

2.随着人们生活水平的提高，人们对个人头发的健康和干净整洁越发重视，头发对于人来说，不仅具有美观的作用，同时还具有生物学功能和生理学功能，对人的心理和社交都会产生影响。但在目前，人们的脱发、白发现象 日渐增多，也越来越严重，尤其是年轻人经常为日渐稀薄的头发或者很早就生出的白发所苦恼。
3.为了解决这一问题，目前市场上具有乌发功能的产品和药物很多，然而这些医用或化妆品用的乌发用品很多否含有化学成份、激素及对人体有害的化学物质，或是存在见效慢、效果保持时间短、对头皮损伤大等问题。因此，患者迫切需要有一种能长期使用，效果好，无副作用，且制备简单易于量产的乌发制剂来解决上述问题。


技术实现要素：

4.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种具有乌发功效的化妆品组合物及其制备和应用，以满足人们对头发健康以及乌发产品的迫切需要。
5.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：第一方面，本发明提供一种具有乌发功效的化妆品组合物，由以下原料组成：4%-6%乙醇、2%-4.25%甘油、0.001%-0.01%甘氨酸、0.001%-0.01%欧洲落叶松木提取物、0.001%-0.01%玫瑰花提取物、0.0001%-0.001%茶叶提取物、0.0005%-0.00075%红车轴草花提取物、0.1%-0.25%乙酰酪氨酸、0.02%-0.05%外泌体、0.27%-0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。
6.优选地，所述具有乌发功效的化妆品组合物的原料为：4.5%-5.5%乙醇、2.5%-4%甘油、0.003%-0.01%甘氨酸、0.003%-0.01%欧洲落叶松木提取物、0.003%-0.01%玫瑰花提取物、0.0003%-0.001%茶叶提取物、0.00055%-0.0007%红车轴草花提取物、0.1%-0.2%乙酰酪氨酸、0.025%-0.045%外泌体、0.275%-0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。
7.优选地，所述具有乌发功效的化妆品组合物的原料为：4%乙醇、2%甘油、0.005%甘氨酸、0.006%欧洲落叶松木提取物、0.0078%玫瑰花提取物、0.00066%茶叶提取物、0.00065%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.025%外泌体、0.27%苯氧乙醇，余量用水补足。
8.优选地，所述具有乌发功效的化妆品组合物的原料为：5%乙醇、3.5%甘油、0.0075%甘氨酸、0.0075%欧洲落叶松木提取物、0.0065%玫瑰花提取物、0.00085%茶叶提取物、0.0007%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.03%外泌体、0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。
9.第二方面，本发明提供一种具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，包括以下步骤：s1.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫
瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；s2.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s3.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s4.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s5.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。
10.进一步地，所述欧洲落叶松木提取物的制备方法为：采用超临界co2萃取技术萃取得到欧洲落叶松木提取物。
11.更进一步地，制备欧洲落叶松木提取物的萃取时间为2.5-5.5 h，萃取温度为40-60℃，萃取压力30-50 mpa。
12.进一步地，所述红车轴草花提取物的制备方法为：用醇溶液加热回流，提取2-5h，浓缩后得到。
13.更进一步地，制备红车轴草花提取物的醇溶液为80%乙醇水溶液或甲醇溶液。
14.进一步地，所述茶叶提取物的制备方法为：先用去离子水浸泡2-5h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取2-5h，浓缩后得到。
15.进一步地，所述玫瑰花提取物的制备方法为：先用70%乙醇水溶液浸泡2-5h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取2-5h，浓缩后得到。
16.进一步地，所述外泌体为脂肪干细胞来源外泌体。
17.第三方面，本发明提供一种具有乌发功效的化妆品组合物在制备乌发化妆品中的应用。
18.本发明的有益效果为：本发明的具有乌发功效的化妆品组合物具有显著促进b16细胞黑色素合成以及激活酪氨酸酶活性的效果，最终起到乌发的作用。并且，本发明的发明人无意中发现，在本发明组合物中加入玫瑰花提取物和红车轴草花提取物，其可以大大增强原配方促进促进b16细胞黑色素合成以及激活酪氨酸酶活性的效果，本发明的乌发组合物各原料相辅相成，协同增效，共同发挥作用。本发明所述的具有乌发功效的化妆品组合物，制备工艺简单，可行性高，并且对头皮和皮肤无刺激和过敏反应，效果显著，是一种理想的乌发产品。
附图说明
19.图1为本发明组合物对b16细胞内黑色素合成激活率的柱状图；图2为本发明组合物对酪氨酸酶活性激活率的柱状图。
具体实施方式
20.为了更好地理解本发明，下面结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
21.实施例1：一种具有乌发功效的化妆品组合物，由以下原料组成：4%乙醇、2%甘油、0.001%甘
氨酸、0.001%欧洲落叶松木提取物、0.001%玫瑰花提取物、0.0001%茶叶提取物、0.0005%红车轴草花提取物、0.1%乙酰酪氨酸、0.02%外泌体、0.27%苯氧乙醇，余量用水补足。
22.一种所述具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，包括以下步骤：s1.取欧洲落叶松木，采用超临界co2萃取技术萃取，萃取时间为2.5 h，萃取温度为40℃，萃取压力30mpa，萃取完成后得到欧洲落叶松木提取物，备用；s2.取玫瑰花，先用70%乙醇水溶液浸泡3h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取2h，浓缩后得到玫瑰花提取物，备用；s3.取茶叶，先用去离子水浸泡2.5h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取2.5h，浓缩后得到茶叶提取物，备用；s4.取红车轴草花，加入其质量的7倍量的甲醇溶液，加热回流，提取3h，浓缩后得到红车轴草花提取物，备用；s5.收集脂肪干细胞分泌的直径在30-150 nm的同质性囊泡，即为所述的外泌体，备用；s6.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、茶叶提取物、玫瑰花提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；s7.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s8.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s9.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s10.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。
23.实施例2：一种具有乌发功效的化妆品组合物，由以下原料组成：6%乙醇、4.25%甘油、0.01%甘氨酸、0.01%欧洲落叶松木提取物、0.01%玫瑰花提取物、0.001%茶叶提取物、0.00075%红车轴草花提取物、0.25%乙酰酪氨酸、0.05%外泌体、0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。
24.一种所述具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，包括以下步骤：s1.取欧洲落叶松木，采用超临界co2萃取技术萃取，萃取时间为5.5 h，萃取温度为60℃，萃取压力50mpa，萃取完成后得到欧洲落叶松木提取物，备用；s2.取玫瑰花，先用70%乙醇水溶液浸泡5h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取3h，浓缩后得到玫瑰花提取物，备用；s3.取茶叶，先用去离子水浸泡2h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取4h，浓缩后得到茶叶提取物，备用；s4.取红车轴草花，加入其质量的6倍量的80%乙醇水溶液溶液，加热回流，提取2h，浓缩后得到红车轴草花提取物，备用；s5.收集脂肪干细胞分泌的直径在30-150 nm的同质性囊泡，即为所述的外泌体，备用；s6.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；
s7.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s8.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s9.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s10.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。
25.实施例3：一种具有乌发功效的化妆品组合物，由以下原料组成：4%乙醇、2%甘油、0.005%甘氨酸、0.006%欧洲落叶松木提取物、0.0078%玫瑰花提取物、0.00066%茶叶提取物、0.00065%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.025%外泌体、0.27%苯氧乙醇，余量用水补足。
26.一种所述具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，包括以下步骤：s1.取欧洲落叶松木，采用超临界co2萃取技术萃取，萃取时间为3h，萃取温度为55℃，萃取压力45mpa，萃取完成后得到欧洲落叶松木提取物，备用；s2.取玫瑰花，先用70%乙醇水溶液浸泡3.5h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取4.5h，浓缩后得到玫瑰花提取物，备用；s3.取茶叶，先用去离子水浸泡4.5h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取3h，浓缩后得到茶叶提取物，备用；s4.取红车轴草花，加入其质量的8倍量的80%乙醇水溶液溶液，加热回流，提取4.5h，浓缩后得到红车轴草花提取物，备用；s5.收集脂肪干细胞分泌的直径在30-150 nm的同质性囊泡，即为所述的外泌体，备用；s6.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；s7.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s8.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s9.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s10.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。
27.实施例4：一种具有乌发功效的化妆品组合物，由以下原料组成：5%乙醇、3.5%甘油、0.0075%甘氨酸、0.0075%欧洲落叶松木提取物、0.0065%玫瑰花提取物、0.00085%茶叶提取物、0.0007%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.03%外泌体、0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。
28.一种所述具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，包括以下步骤：s1.取欧洲落叶松木，采用超临界co2萃取技术萃取，萃取时间为3.5h，萃取温度为45℃，萃取压力35mpa，萃取完成后得到欧洲落叶松木提取物，备用；s2.取玫瑰花，先用70%乙醇水溶液浸泡3h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取3h，浓缩后得到玫瑰花提取物，备用；s3.取茶叶，先用去离子水浸泡3h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取3.5h，浓缩后
得到茶叶提取物，备用；s4.取红车轴草花，加入其质量的7倍量的80%乙醇水溶液溶液，加热回流，提取4h，浓缩后得到红车轴草花提取物，备用；s5.收集脂肪干细胞分泌的直径在30-150nm的同质性囊泡，即为所述的外泌体，备用；s6.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；s7.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s8.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s9.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s10.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。
29.实施例5：本发明乌发组合物乌发作用实验前期本发明发明人经过预实验，发现含有功效成分甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、茶叶提取物、乙酰酪氨酸、外泌体的组合物具有乌发作用，虽然效果比较明显，但是仍不尽如人意，因此对其进行改进。经过多次试验，发明人发现在原配方的基础上加入具有生发作用的红车轴草花提取物后，其乌发效果有所提升，在此基础上再加入玫瑰花提取物以后，乌发作用显著提高，即，红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的加入，具有显著增强原配方效果的作用。为了验证该效果，在细胞层面继续进行以下实验：（1）mtt法检测b16细胞活力实验分组及实验用药物的制备：取实施例4中步骤s2和s4制备得到的红车轴草花提取物和玫瑰花提取物，按实施例4中两者的比例混合得到混合组合物，记为a组；同实施例4中的制备方法，步骤s6中不加入红车轴草花提取物和玫瑰花提取物，其他步骤相同，制备得到不含红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的乌发组合物，记为b组；取实施例4中制备得到化妆品组合物，记为c组。取a、b、c组中的各组合物，分别用1640完全培养基混合均匀后，再分别配制成梯度浓度为10、20、40、80、160mg/l浓度的样品溶液。所有样品均用0.22μm的无菌滤头过滤后备用。
30.选择对数生长期的小鼠b16黑色素瘤细胞，用质量分数为0.25%的胰蛋白酶溶液消化后，以1640完全培养基配成密度为1
×
10^5个/ml的细胞悬液，接种于96孔培养板，每孔100μl，于37℃，5%co2培养箱内培养。贴壁24h后，分为3组，分别加入上述a、b、c组中含不同质量浓度的样品溶液，并设空白组加等体积的细胞悬液和等体积的1640完全培养基，每孔100μl。每一质量浓度设3个复孔，于37℃，5%co2培养箱内培养72h后，mtt法于酶标仪570nm处测定吸光度。按下列公式计算细胞相对增殖率：细胞相对增殖率=(l-m)/(m-n)
×
100%。式中l为样品组的平均吸光度，m为对照组的平均吸光度，n为空白组的平均吸光度。结果见表1。
31.表1对b16细胞活力的影响
注：数据表示为平均数
±
标准差。下同。
32.可见，在浓度为10、20、40、80、160mg/l时，本发明的乌发组合物以及其成分其对b16细胞有轻微促增殖作用，细胞形态正常，说明本发明组合物及其成分对b16细胞并无毒性作用。
33.（2）b16细胞内黑色素含量的测定样品制备同上述mtt法检测b16细胞活力中制备方法。将培养的第3代b16细胞以密度1
×
10^5个/ml接孔于6孔板，24h后换液。添加上述a、b、c组中含有不同质量浓度样品的样品溶液培养基，每一质量浓度设3个复孔。对照组以1640完全培养基代替样品溶液。37℃，5%co2条件下孵育24h后，弃去上清液。每孔加入质量浓度2.5g/l的胰蛋白酶消化液1ml于室温下消化5min。加入4ml1640完全培养基中止消化，并吹打成单细胞悬液。取0.5ml作细胞计数，其余细胞悬液离心10min，弃上清液，加入1ml1mol/l的naoh溶液，并在90℃水浴中孵育2h后，在酶标仪490nm处测其吸光度。按下列公式计算样品对黑色素合成的激活率：激活率=((样品孔吸光度/样品孔细胞密度)-(对照孔吸光度/对照孔细胞密度)
×
100%)，结果见表2、图1。
34.表2对b16细胞内黑色素合成的影响可以看出，单独使用红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的样品溶液和单独使用不含有红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的原配方样品溶液处理b16细胞后，对b16细胞内黑色素合成具有一定的激活作用，但是在原配方中加入红车轴草花提取物和玫瑰花提取物后的新乌发配方（c组），对b16细胞内黑色素的激活率最高达到(82.2
±
4.5)%，其表现出显著的黑色素合成激活能力，且呈质量浓度依赖性。这说明红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的加入可以显著提升原配方的乌发效果。
35.（3）酪氨酸酶活性的测定样品制备同上述mtt法检测b16细胞活力中制备方法。取2 ml上述含不同质量浓度样品的a、b、c组样品溶液，对照组以 pbs溶液代替，分别与酪氨酸酶( 100 u) 的混合液，37℃孵育10 min，加入0. 003 mol/l多巴反应液1 ml，继续在37℃孵育2 min，立即在475 nm处测吸光度。酪氨酸酶活性激活率按下列公式计算：激活率 = (( e
‑ꢀ
f)-( m-n))/(m
ꢀ‑
n)
ꢀ×ꢀ
100%。式中m为未加样品加酪氨酸酶的混合液在475 nm 处测得的吸光度; n为未加样品和酪氨酸酶的混合液在475 nm处测得的吸光度; e为加样品和酪氨酸酶的混合液在475 nm处测得的吸光度; f为加样品而未加酪氨酸酶的混合液在475nm处测得的吸光度，结果见表3、图2。
36.表3 对酪氨酸酶活性的影响可以看出，单独使用红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的样品溶液和单独使用不含有红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的原配方样品溶液对酪氨酸酶的活性具有一定的激活作用，且呈质量浓度依赖性，但是在原配方中加入红车轴草花提取物和玫瑰花提取物后的新乌发配方（c组），对酪氨酸酶活性的激活率最高达到(92.1
ꢀ±ꢀ
6.3) %，其表现出显著的酪氨酸酶活性激活能力，且呈质量浓度依赖性。这说明红车轴草花提取物和玫瑰花提取物的加入可以显著提升原配方的乌发效果。综上，本发明的具有乌发功效的化妆品组合物具有显著的激活b16细胞黑色素合成以及激活酪氨酸酶活性的作用，是一种效果显著的具有乌发作用的组合物。
37.申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种具有乌发功效的化妆品组合物及其制备方法和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
38.以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
39.另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

技术特征：
1.一种具有乌发功效的化妆品组合物，其特征在于，由以下原料组成：4%-6%乙醇、2%-4.25%甘油、0.001%-0.01%甘氨酸、0.001%-0.01%欧洲落叶松木提取物、0.001%-0.01%玫瑰花提取物、0.0001%-0.001%茶叶提取物、0.0005%-0.00075%红车轴草花提取物、0.1%-0.25%乙酰酪氨酸、0.02%-0.05%外泌体、0.27%-0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。2.根据权利要求1所述的具有乌发功效的化妆品组合物，其特征在于，由以下原料组成：4.5%-5.5%乙醇、2.5%-4%甘油、0.003%-0.01%甘氨酸、0.003%-0.01%欧洲落叶松木提取物、0.003%-0.01%玫瑰花提取物、0.0003%-0.001%茶叶提取物、0.00055%-0.0007%红车轴草花提取物、0.1%-0.2%乙酰酪氨酸、0.025%-0.045%外泌体、0.275%-0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。3.根据权利要求1所述的具有乌发功效的化妆品组合物，其特征在于，由以下原料组成：4%乙醇、2%甘油、0.005%甘氨酸、0.006%欧洲落叶松木提取物、0.0078%玫瑰花提取物、0.00066%茶叶提取物、0.00065%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.025%外泌体、0.27%苯氧乙醇，余量用水补足。4.根据权利要求1所述的具有乌发功效的化妆品组合物，其特征在于，由以下原料组成：5%乙醇、3.5%甘油、0.0075%甘氨酸、0.0075%欧洲落叶松木提取物、0.0065%玫瑰花提取物、0.00085%茶叶提取物、0.0007%红车轴草花提取物、0.2%乙酰酪氨酸、0.03%外泌体、0.28%苯氧乙醇，余量用水补足。5.一种如权利要求1-4任一项所述的具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s1.按重量份称取原料，将水分为两份，将甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸加入其中一份水中，混合均匀，得到a溶液，备用；s2.在容器中加入另一份水，在搅拌下缓慢加入a溶液；s3.继续缓慢搅拌，在搅拌下加入乙醇，至完全溶解；s4.继续在搅拌下加入外泌体，至完全溶解；s5.继续在搅拌下加入苯氧乙醇，至完全溶解，即可得到所述具有乌发功效的化妆品组合物。6.如权利要求5所述的具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于，所述欧洲落叶松木提取物的制备方法为：采用超临界co2萃取技术萃取得到欧洲落叶松木提取物；所述红车轴草花提取物的制备方法为：用醇溶液加热回流，提取2-5h，浓缩后得到；所述茶叶提取物的制备方法为：先用去离子水浸泡2-5h，再用70%乙醇水溶液加热回流提取2-5h，浓缩后得到；所述玫瑰花提取物的制备方法为：先用70%乙醇水溶液浸泡2-5h，再用75%乙醇水溶液加热回流提取2-5h，浓缩后得到。7.如权利要求5所述的具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于，所述外泌体为脂肪干细胞来源外泌体。8.如权利要求6所述的具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于，制备欧洲落叶松木提取物的萃取时间为2.5-5.5 h，萃取温度为40-60℃，萃取压力30-50 mpa。9.如权利要求6所述的具有乌发功效的化妆品组合物的制备方法，其特征在于，制备红车轴草花提取物的醇溶液为80%乙醇水溶液或甲醇溶液。
10.如权利要求1-9任一项所述的具有乌发功效的化妆品组合物在制备乌发化妆品中的应用。

技术总结
本发明提供一种具有显著促进B16细胞黑色素合成以及激活体外酪氨酸酶活性的作用的具有乌发功效的化妆品组合物及其制备方法。所述的乌发化妆品组合物的原料由乙醇、甘油、甘氨酸、欧洲落叶松木提取物、玫瑰花提取物、茶叶提取物、红车轴草花提取物、乙酰酪氨酸、外泌体、苯氧乙醇、水组成。水组成。水组成。


技术研发人员：郭晶耀
受保护的技术使用者：广东欣会铝制品有限公司
技术研发日：2023.06.16
技术公布日：2023/9/7