RNASE4在制备炎症性肠病检测产品中的用途

rnase4在制备炎症性肠病检测产品中的用途
技术领域
1.本发明属于生物医药技术领域，具体涉及rnase4在制备炎症性肠病检测产品中的用途。


背景技术：

2.炎症性肠病(inflammatory bowel disease，ibd)是一种由各种原因引起的、可累及直肠、结肠、回肠甚至全消化道的慢性非特异性疾病，主要包括克罗恩病(crohn's disease，cd)和溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，uc)。据《柳叶刀》报道，uc和cd在欧美国家的发病率已超过0.3％。目前，发达国家的炎症性肠病发病率已处于平台期，尚无明显改善趋势。自1990年以来，非洲、亚洲和南美洲等新兴工业化国家的发病率以每年5～10％的速度迅速上升。当前，炎症性肠病的病因和发病机制尚不明确，涉及遗传、免疫系统、环境因素和肠道菌群等多方面，导致缺乏有效的诊断指标。
3.肠道菌群是一个庞大而复杂的微生态系统，与宿主一同进化，直接参与机体的消化、营养吸收、免疫调节、病原菌抵抗等多种功能。肠道菌群失衡则会导致多种肠道疾病，如肠道感染、炎症性肠病、结直肠癌等。因此，了解宿主与肠道菌群之间的调控关系对于解析肠道菌群在健康和疾病中的作用具有重要意义。抗菌蛋白质是一类具有广泛抗菌活性的小分子蛋白，在宿主的免疫防御中发挥重要作用，可以直接杀死或抑制细菌、真菌、病毒和其他病原微生物的生长。抗菌蛋白质与肠道菌群之间存在密切的相互作用。一方面，抗菌蛋白质可以保护肠道黏膜屏障，抵御病原微生物的入侵，维护肠道菌群的稳定。另一方面，肠道菌群通过调节宿主的免疫系统，可以影响抗菌蛋白质的产生和活性。因此，肠道抗菌蛋白质的水平是一种肠道健康与疾病潜在的生物标志物。
4.rnase4是一种新发现的抗菌蛋白质，在人类肾脏和膀胱中发挥着抗尿路致病性大肠埃希菌的作用。我们的研究发现，rnase4在肠道分泌抗菌蛋白质的细胞(潘氏细胞和杯状细胞)中高表达，调控肠道菌群的稳态，参与炎症性肠病的发生与发展，是其潜在的生物标志物。目前，专利“rnase4作为药物靶点在脑胶质瘤抑制药物中的应用”(专利公开号：cn105727311a)告知了rnase4作为脑胶质瘤治疗靶点的应用；专利“用于治疗和诊断前列腺癌的方法”(专利公开号：cn111417855a)告知了rnase4作为前列腺癌诊断和治疗的应用；专利“rnase4作为治疗和/或预防糖尿病的药物靶点的应用”(专利公开号：cn114404589a)告知了rnase4作为糖尿病预防与治疗的药物靶点应用。基于现有技术中关于本发明rnase4作为炎症性肠病诊断标志物的应用，目前未见报道。


技术实现要素：

5.鉴于以上现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供rnase4在制备炎症性肠病检测产品中的用途，用于解决现有技术中的问题。
6.为实现上述目的及其他相关目的，本发明是通过以下技术方案获得的。
7.本发明的目的之一在于提供与炎症性肠炎诊断相关的分子标志物，所述分子标志
物为rnase4。
8.本发明的目的之二在于提供检测如上文所述的分子标志物在制备炎症性肠炎检测产品中的应用。
9.优选的，所述物质用于检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平。
10.优选的，所述物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针。
11.优选的，所述物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物。
12.优选的，所述检测产品是根据样品中rnase4基因的表达量，检测对象是否患有炎症性肠炎。
13.优选的，所述检测产品中，rnase4基因是单一的生物标志物。
14.本发明的目的之三在于提供一种检测产品，所述检测产品中包含用于检测如上文所述分子标志物的物质。
15.优选的，所述物质用于检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平。
16.优选的，所述物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针。
17.优选的，所述物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物。
18.更优选的，所述引物包括如seq id no.3所示序列和如seq id no.4所示序列。
19.本发明的目的之四在于提供如上文所述的检测产品在制备炎症性肠炎用产品中的应用。
20.与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
21.本技术发现与健康人相比，rnase4基因mrna水平和rnase4蛋白在炎症性肠病患者的肠道组织和粪便组织中显著降低；且在同一炎症性肠病患者的炎症组织的水平显著低于正常肠道组织。此外，rnase4基因mrna水平和rnase4蛋白质在炎症性肠病患者的炎症部位的水平显著低于正常组织。本发明将rnase4基因或其活性片段作为生物标志物，可以为炎症性肠病的靶向选择检测提供依据，相对于已有的传统生物标志物，本发明所提供的生物标志物特异性更高，在炎症组织中显著低表达，对正常组织与炎症组织判断的准确性高，可以作为炎症性肠病检测、治疗的靶点。
附图说明
22.图1为本技术实施例1中rnase4基因mrna在健康人、炎症性肠病(ibd)、克罗恩病(cd)和溃疡性结肠炎(uc)肠道组织中的相对水平统计结果图，**：p《0.01。
23.图2a为本技术实施例1中炎症性肠病患者(ibd)中rnase4基因的roc曲线图。
24.图2b为本技术实施例1中克罗恩病患者(cd)中rnase4基因的roc曲线图。
25.图2c为本技术实施例1中溃疡性结肠炎患者(uc)中rnase4基因的roc曲线图。
26.图3为本技术实施例2中rnase4基因mrna在炎症性肠病患者正常肠道组织及患病肠道上皮组织中的相对水平统计结果图，**：p《0.01。
27.图4为本技术实施例3中rnase4蛋白质在炎症性肠病患者正常肠道组织及患病肠道上皮组织中表达水平，免疫印迹代表性图。
28.图5为本技术实施例3中rnase4蛋白质在炎症性肠病患者正常肠道组织及患病肠
f l r q h v h p e e t g g s d r y c n l m m q r r k m t l y h ckr f n t f i h e d i w n i r s i c s t t n i q c kn g k m n c h e gv v k v t d c r d t g s s r a p n c r y r a i a s t r r v v i a c e gn p q v p v h f d g
43.本发明第二方面保护检测如第一方面所述分子标志物的物质在制备炎症性肠炎检测产品中的应用。所述检测产品通常可以通过用于检测rnase4基因或其活性片段的物质检测样品中rnase4基因或其活性片段的表达量，从而可以根据样品中rnase4基因或其活性片段的表达量，对对象是否患有炎症性肠炎进行检测，或对对象是否适合于针对rnase4进行的靶向治疗进行检测。本发明发明人发现，rnase4基因或其活性片段的表达与被检测对象是否患有癌症有着密切关系，而rnase4基因阳性表达或高表达的患者，则可能更适合于针对rnase4进行的靶向治疗。
44.具体来说，在炎症性肠炎患者中，rnase4基因在肠道组织和病变组中中特异性地低表达，从而可以通过rnase4基因的表达量变化，判断对象是否患有炎症性肠炎，例如，rnase4基因低表达的患者通常有更高的几率患有炎症性肠炎。
45.所述rnase4的表达可以是指rnase4的mrna表达水平，所述rnase4的表达也可以是rnase4蛋白的表达水平。所述rnase4阳性表达通常指出现rnase4的表达、或rnase4的表达水平高于一定的标准。在本发明一具体实施例中，rnase4阳性可以是肠道和病变组织中可检测出rnase4的mrna的表达。在本发明另一具体实施例中，rnase4阳性可以是肠道和病变组织中可检测出rnase4的蛋白的表达。在本发明另一具体实施例中，所述rnase4阳性表达可以是样品的rnase4的mrna表达水平高于其周围健康组织。在本发明另一具体实施例中，所述rnase4阳性表达可以是样品的rnase4蛋白的表达水平高于其周围健康组织。
46.发明中，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质应该是本领域技术人员公知的，其制备方法亦应该是现有技术。具体来说，所述物质通常可以检测rnase4基因或其活性片段的物质的表达，具体可以检测rnase4基因的蛋白表达水平、或rnase4基因的分子(例如，rnase4 mrna)表达水平。例如，所述物质可以是能够特异性结合目标物质(例如，rnase4mrna、rnase4蛋白等)的物质，通过检测该物质的特异性结合。在本发明一具体实施方式中，所述物质可以是能够特异性结合rnase4基因的探针；在本发明另一具体实施方式中，所述物质可以是能够特异性针对rnase4蛋白的抗体。再例如，所述物质可以是能够特异性扩增rnase4基因的物质，通过对特异性扩增所得的基因片段进行检测，即可以检测rnase4基因或其活性片段的物质的表达。在本发明一具体实施方式中，所述物质可以是能够特异性扩增rnase4基因的引物和/或适用于检测扩增所得的产物的标记物(例如，染料)等。
47.优选的，所述物质用于检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平。
48.优选的，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针。
49.优选的，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物。
50.优选的，所述检测产品是根据样品中rnase4基因的表达量，检测对象是否患有炎症性肠炎。
51.优选的，所述检测产品中，rnase4基因是单一的生物标志物。
52.优选的，所述检测产品选自试剂盒、芯片、膜条、蛋白阵列、组合物或检测系统之任一。更优选的，所述检测产品为试剂盒。所述试剂盒通常可以针对患者的细胞、组织、体液进行检测，具体来说，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质具体可以为用于检测对象的细胞、组织、体液中rnase4基因或其活性片段的物质。所述体液具体可以是例如细胞内液、细胞外液等中的一种或多种的组合，所述细胞内液可以包括细胞核，更具体的，所述细胞外液具体可以是例如所述体液选自组织液、血浆、淋巴液等中的一种或多种的组合。在本发明一具体实施例中，所述试剂盒的检测样本为细胞、血液样品(例如，血浆样品和/或全血样品等)、组织(例如，肠道组织)或其病理切片等。
53.本发明第三方面保护一种检测产品，所述检测产品包括用于检测如第一方面的物质。
54.在所述检测产品中，所述物质用于检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平。优选的，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针。优选的，所述用于检测rnase4基因或其活性片段的物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物。更优选的，用于特异性扩增rnase4基因的引物包括如seq id no.3所示序列和如seq id no.4所示序列。
55.tgcagaggacccattcattgc(seq id no.3)
56.tcaagttgcagtagcgatcac(seq id no.4)
57.在所述检测产品中，所述检测产品选自试剂盒、芯片、膜条、蛋白阵列、组合物和检测系统中的一种或多种。优选的，所述检测产品为试剂盒，更优试剂盒还含有无菌水、taq dna聚合酶、样品基因组dna提取试剂中的一种或多种。
58.本发明第四发面保护第三方面所述的检测产品在制备炎症性肠炎用产品中的应用。所述炎症性肠炎用产品用于评估对象否易发炎症性肠炎、检测对象是否患有炎症性肠炎、或评估炎症性肠炎的治疗效果和/或判断炎症性肠炎。
59.以下由特定的具体实施例说明本发明的实施方式，熟悉此技术的人士可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点及功效。
60.在进一步描述本发明具体实施方式之前，应理解，本发明的保护范围不局限于下述特定的具体实施方案；还应当理解，本发明实施例中使用的术语是为了描述特定的具体实施方案，而不是为了限制本发明的保护范围。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或者按照各制造商所建议的条件。
61.当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。除实施例中使用的具体方法、设备、材料外，根据本技术领域的技术人员对现有技术的掌握及本发明的记载，还可以使用与本发明实施例中所述的方法、设备、材料相似或等同的现有技术的任何方法、设备和材料来实现本发明。
62.实施例1：rnase4基因mrna在炎症性肠病患者肠道组织中低表达
63.首先，获取健康人和炎症性肠病患者肠道上皮组织，其中健康人25例、炎症性肠病(ibd组)73例，其中包括uc患者27例(uc组)和cd患者46例(cd组)。然后，从肠道上皮组织样
本中提取mrna，使用试剂盒中的逆转录试剂将mrna反转录成cdna。接着，采用实时荧光定量pcr方法检测，使用试剂盒(thermo taqpath
tm qpcr master mix)中提供的引物和荧光染料对人rnase4和人β-actin(actb，作为内参)基因cdna序列进行pcr扩增。最后，根据所获得ct值，通过2-δct
法计算并分析，结果见图1。
64.从图1可知，相比于健康人群，rnase4基因mrna在炎症性肠病患者肠道组织中表达量显著降低。
65.进一步，采用losistic回归分析ibd组、uc组和cd组中标志物rnase4检测炎症性肠炎的诊断效能(roc)，结果见图2a、2b和2c。
66.从图2a可知，ibd组曲线下面积为0.941，灵敏度为0.795，特异性为0.96。
67.图2b可知，cd组曲线下面为0.958，灵敏度为0.913，特异性为0.92。
68.图2c可知，uc组曲线下面为0.912，灵敏度为0.852，特异性为0.8。
69.综上结果表明上述检测方法真实性较好。
70.逆转录反应体系见表1。
71.表1
72.ꢀꢀ
5*first strand buffer4μl0.1m dtt2μldntp(10mm)1μlm-mlvrt1μlrandom primer(100um)1μltotal rna1μgdepc水补充至20μl
73.逆转录反应条件见表2。
74.表2
[0075][0076][0077]
实时荧光定量pcr反应体系见表3。
[0078]
表3
[0079]
2*sybrpremixextaq3μlprimer1μldd水1μlcdna1μl 共计5μl
[0080]
引物序列为：
[0081]
人源rnase4上游引物：tgcagaggacccattcattgc(seq id no.3)
[0082]
人源rnase4下游引物：tcaagttgcagtagcgatcac(seq id no.4)
[0083]
人源actb上游引物：gtgacgttgacatccgtaaaga(seq id no.5)
[0084]
人源actb上游引物：gccggactcatcgtactcc(seq id no.6)
[0085]
实时荧光定量pcr反应条件见表4。
[0086]
表4
[0087]
ꢀꢀ
步骤1 50℃2min步骤2 95℃10min步骤3 95℃15sec步骤4 60℃35sec步骤5 返回步骤340个循环步骤6 4℃维持
[0088]
实施例2：rnase4基因mrna在炎症性肠病患者病变组织中低表达
[0089]
1)获取炎症性肠病患者炎症部位和正常部位肠道上皮组织，共计54例样本。
[0090]
2)从肠道上皮组织样本中提取mrna，使用试剂盒中的逆转录试剂将mrna反转录成cdna，逆转反应体系和反应条件同实施例1。
[0091]
3)采用实时荧光定量pcr方法检测，使用试剂盒中提供的引物和荧光染料对人rnase4和人β-actin(actb，作为内参)基因cdna序列进行pcr扩增。试剂盒中已知浓度的、含有引物pcr扩增人rnase4基因cdna所得扩增片段的阳性对照，实时荧光定量pcr方法同实施例1。最后，结果通过2-δct
法分析，结果见图3。
[0092]
从图3可知，相比于炎症性肠病患者正常部位，炎症部位的rnase4基因mrna表达显著降低。
[0093]
实施例3：rnase4蛋白在炎症性肠病患者肠道组织中低表达
[0094]
1)首先获取炎症性肠病患者炎症部位和正常部位肠道上皮组织，共计20例。
[0095]
2)用蛋白裂解液提取组织蛋白，16000g离心10min后，取200μl上清加入50μl sds-page蛋白上样缓冲液(5x)(碧云天，货号p0015)，沸水浴煮10min。聚丙烯凝胶电泳后，转膜至pvdf膜，将pvdf膜浸入封闭液(5％脱脂奶粉)中，摇床上常温封闭1h。加入抗rnase4抗体，4℃孵育过夜。洗去一抗(一抗见ribonuclease 4is associated with aggressiveness and progression of prostate cancer.commun biol.2022；5:625.)后，加入二抗hrp-conjugated affinipure goat anti-rabbit igg(h+l)(购买于proteintech，货号sa00001-2)常温孵育1h。洗去多余二抗后，加入hrp底物显色液，曝光显条带，结果见图4；计算相应条带灰度值并比较分析，结果见图5。
[0096]
从图4和图5结果可知，相比于炎症性肠病患者正常部位组织，炎症部位的rnase4蛋白含量在炎症性肠病患者肠道组织中显著减少。
[0097]
实施例4：rnase4蛋白质在炎症性肠病患者粪便样本中含量显著降低
[0098]
1)将粪便样品用粪便蛋白提取液按100mg粪便和300μl提取液的比例稀释后匀浆，冰上孵育20min，14000rpm离心10min之后，取上清，用bca法定量蛋白质浓度，得到待测样本。粪便蛋白提取液为ripa裂解液(碧云天)和蛋白酶抑制剂(碧云天)的混合物。
[0099]
2)将rnase4单抗(爱博泰克，abclonal)稀释到包被缓冲液(0.05m碳酸钠缓冲，ph9.6)中(终浓度为10μg/ml)，包被4℃过夜。
[0100]
3)弃去孔内包被液，加入pbs-t缓冲液(含有0.05％tween-20的pbs缓冲液)，置于室温摇床洗涤3次，每次3min。然后用pbs洗涤2次，每次3min。接着用bsa封闭液，常温封闭2h，加入梯度稀释的rnase4纯蛋白作为标准品以及待测样本，室温孵育过夜。弃去孔内样本，加入pbs-t缓冲液，置于室温摇床洗涤4次，每次3min。然后用pbs洗涤3次，每次3min。接着加入二抗rnase4抗体(自制)室温孵育2h。
[0101]
4)弃去二抗(二抗见ribonuclease 4is associated with aggressiveness and progression of prostate cancer.commun biol.2022；5:625.)后，加入pbs-t缓冲液，置于室温摇床洗涤4次，每次3min。然后用pbs洗涤3次，每次3min。接着加入三抗goat anti-rabbit igg(h+l)secondary antibody,ap(invitrogen)常温孵育1h。
[0102]
5)弃去三抗后，加入pbs-t缓冲液，置于室温摇床洗涤4次，每次3min。然后用pbs洗涤3次，每次3min。接着加入pnpp显色底物，室温显色，用酶标仪检测405nm的吸光值，根据标准样本吸光值计算浓度，结果见图6。
[0103]
从图6可知，相比于健康人群，rnase4蛋白质在炎症性肠病患者粪便样本中含量显著降低。
[0104]
进一步，采用losistic回归分析炎症性肠病患者粪便样本中标志物rnase4检测炎症性肠炎的诊断效能(roc)，结果见图7。
[0105]
从图7可知，roc检测曲线下面积为0.62，灵敏度为0.828，特异性为0.422。
[0106]
实施例5功能验证
[0107]
本实施例中，构建了rnase4敲除小鼠，发现rnase4基因敲除后，会显著加剧肠炎症状，同时回补rnase4体外重组蛋白后可以有效改善肠炎症状，包括如下步骤：
[0108]
5.1、构建小鼠肠炎模型
[0109]
1)委托赛业生物科技有限公司利用talen技术构建改小鼠(rnase4-/-)，其原理是提前设计终止密码子，导致rnase4蛋白的翻译提前终止，最终导致小鼠体内无法表达rnase4蛋白。
[0110]
2)接着将rnase4-/-小鼠随机分成两组，其中一组通过灌胃的方式给小鼠每天补充20mg/kg体重的重组rnase4蛋白(rnase4-/-‑
rnase4组)，另一组用溶剂做实验对照组(rnase4-/-组)。此外增加一组野生型(wt)小鼠作为空白对照组。各组均正常饲养。rnase4-/-‑
rnase4组为冻干的rnase4纯蛋白粉末，溶解于无菌的pbs水溶液得到。实验对照组为无菌pbs粉末和水的混合物。
[0111]
3)rnase4-/-‑
rnase4组和rnase4-/-组持续每天灌胃30天后，采用2.5％(m/v)葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium salt,dss)水溶液替换小鼠正常饮水，持续饮用6天后，换成正常水饮用2天，诱导获得小鼠肠炎模型，记录各组小鼠体重以及疾病活动指数。
[0112]
4)诱导结束后牺牲小鼠，收集小鼠结肠组织，he染色结肠组织以及qpcr检测结肠组织中各类炎性因子表达水平。
[0113]
疾病活动指数(disease activity index dai)：是结合体重评分、大便评分和便血评分三种情况进行综合评分，将3项结果的总分除以3即得到dai值，结果见图3。其中，体重评分：0，无体重下降；1，下降1-5％；2，下降6-10％；3，下降11-20％；4，下降超过20％；粪
便评分：0，固态大便；1，固态大便，易变形；2，不成形大便；3，液体状大便；便血评分：0，隐血检测阴性；1，隐血检测阳性；2粪便中有可见血；3，严重便血。
[0114]
组织形态学评分：取远端结肠组织1cm左右肠段进行福尔马林固定，并后续进行he染色，并根据he染色进行组织形态学评分(病理评分)。组织形态学评分是综合炎症评分和溃疡评分二种情况进行综合评分，将2项结果的总分除以2得到的组织形态学评分。其中，炎症评分如下：0，正常(正常范围内)；1、轻度(小，局灶性，或分散型，局限于固有层)；2、中度(多灶性或局部广泛性，延伸至粘膜下层)；3、严重(跨壁炎症，溃疡覆盖＞20个隐窝)。溃疡评分：0分，正常(无溃疡)；1、轻度(1-2个溃疡，共涉及20个隐窝)；2、中度(3-4个溃疡，共涉及20-40个隐窝)；3、重症(溃疡4个以上或隐窝40个以上)。
[0115]
炎性因子表达水平：取1cm左右结肠组织提取组织rna，qpcr检测结肠组织中各类炎性因子表达水平，如ccl2、ccl3、cxcl1、cxcl2、gcsf、il-6、il-1β、il-17a、s100a8和tnfα。
[0116]
dds诱导开始至处死，每天称重记录体重，结果见图8；疾病活动指数结果见图9；结肠部分测量其长度，结果见图11；炎性因子表达水平结果见图12。
[0117]
从图8可知，rnase4-/-组小鼠的体重下降，而回补rnase4重组蛋白后体重下降比例显著减缓可达到80％，与空白对照组相近。
[0118]
从图9可知，rnase4-/-组小鼠的疾病活动指数可达到3，而回补rnase4重组蛋白后疾病活动指数显著降低达到2.5，与空白对照组相近。
[0119]
从图10可知，rnase4-/-组小鼠的结肠长度为4.8cm，而回补rnase4重组蛋白后结肠长度为5.1cm，与空白对照组相近。
[0120]
从图11可知，从he染色可知，rnase4-/-组小鼠的结肠组织中隐窝结构被破坏，并出现类似空泡的结构，表明结肠组织的完整性受到破坏严重；而回补rnase4重组蛋白后，与空白对照组相近，结肠组织保持良好的完整性。从组织形态学评分同样证明即回补rnase4蛋白能有效治疗炎症性肠炎，并恢复健康水平。
[0121]
从图12可知，rnase4-/-组小鼠的炎症相关因子表达显著升高，而回补rnase4重组蛋白后炎症相关因子表达显著降低，与空白对照组相近。
[0122]
最后，还需要注意的是，以上列举的仅是本发明的若干个具体实施例。显然，本发明不限于以上实施例，还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形，均应认为是本发明的保护范围。

技术特征：
1.与炎症性肠炎诊断相关的分子标志物，所述分子标志物为rnase4。2.检测如权利要求1所述分子标志物的物质在制备炎症性肠炎检测产品中的应用。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述物质包括检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平；和/或，所述物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针；和/或，所述物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物；和/或，所述物质包括用于特异性检测rnase4基因蛋白的抗体。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测产品是根据样品中rnase4基因的表达量，检测对象是否患有炎症性肠炎。5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测产品中，rnase4为单一的生物标志物。6.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述检测产品选自试剂盒、芯片、膜条、蛋白阵列、组合物和检测系统中的一种或多种。7.一种检测产品，其特征在于，所述检测产品包含用于检测rnase4基因或其活性片段的物质；优选的，所述检测产品选自试剂盒、芯片、膜条、蛋白阵列、组合物和检测系统中的一种或多种。8.如权利要求7所述的检测产品，其特征在于，所述物质用于检测rnase4基因的蛋白表达水平或rnase4基因的mrna表达水平；和/或，所述物质包括用于检测rnase4基因或其活性片段的特异性探针；和/或，所述物质包括用于特异性扩增rnase4基因的引物；和/或，所述物质包括用于特异性检测rnase4基因蛋白的抗体。9.如权利要求7所述的检测产品，其特征在于，所述引物包括如seq id no.3所示序列和如seq id no.4所示序列。10.如权利要求6-8任一项所述的检测产品在制备炎症性肠炎用产品中的应用。

技术总结
本发明公开了RNASE4在制备炎症性肠病检测产品中的用途。本发明将RNASE4基因或其活性片段作为生物标志物，可以为炎症性肠病的靶向选择检测提供依据，相对于已有的传统生物标志物，本发明所提供的生物标志物特异性更高，在炎症组织中显著低表达，对正常组织与炎症组织判断的准确性高，可以作为炎症性肠病检测、治疗的靶点。疗的靶点。疗的靶点。


技术研发人员：许正平 盛静浩 孙钧 陈木雄 王文广 胡臻
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：2023.05.29
技术公布日：2023/8/24