伏环孢素及其中间体的制备方法与流程

1.本发明属于医药化学技术领域，具体涉及一类新的制备伏环孢素的中间体化合物，以及伏环孢素及其新中间体的制备方法。


背景技术：

2.伏环孢素，英文名为voclosporin，化学名称:环[[(6e)-(2s,3r,4r)-3-羟基-4-甲基-2-(甲氨基)-6,8-壬二烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰]。2021年1月22日，fda批准了aurinia制药公司的伏环孢素联合免疫抑制疗法治疗成人活动性狼疮肾炎(ln)，这是美国fda批准的第一个治疗狼疮肾炎口服疗法。
[0003]
伏环孢素(voclosporin，vcs，(e)-isa 247，isatx247)是新型钙调神经磷酸酶抑制剂(calcineurin inhibitor)，用于预防器官移植后排斥反应和治疗自身免疫性疾病。伏环孢素是在环孢素(csa)的氨基酸的烯丙基结构的末端引入一个双键，形成的一个共轭双烯结构的化合物。作为环孢素的衍生物，与环孢素相比伏环孢素具有更强的酶抑制活性、较低的肾毒性，具有较宽的治疗窗口。体外试验显示伏环孢素的抑制强度大约是环孢素的3～4倍。伏环孢素(vcs)和环孢素(csa)的结构式如下。
[0004][0005]
目前文献报道的该伏环孢素的制备方法主要有以下两种：专利文献wo2003033526报道了如路线1所示的伏环孢素的制备方法，该路线以环孢素为原材料经过羟基保护、溴代反应、wittig反应和脱保护得到伏环孢素。首先，该路线溴代反应位点较多，容易产生不同位点的取代和多取代溴代副产物，反应转化率较低。其次，该路线中wittig反应需要高温100℃反应21h，反应温度较高，反应时间较长。而且，脱乙酰基反应19h，反应时间较长，收率较低。该路线由环孢素制备伏环孢素四步收率分别为85％，65％，58％，54％，总收率约17％，总收率较低，不适合工业化放大生产。
[0006]
路线1
[0007][0008]
结构式中csa表示环孢素中大环部分。下同。
[0009]
专利文献wo2003033526还报道了如路线2所示的伏环孢素的制备方法，该路线以环孢素为原材料经过羟基保护、氧化反应、wittig反应和脱保护得到伏环孢素。该路线氧化反应过程使用过碘酸钠和氯化钌，容易产生酸和二醇杂质，所得醛基产物收率较低。且该路线中wittig反应和脱乙酰基反应收率较低。该路线由环孢素制备伏环孢素四步收率分别为85％，68％，43.4％，54％，总收率约13.5％，总收率较低，不适合工业化放大生产。
[0010]
路线2
[0011][0012]
专利文献wo2021173474报道了环孢素与4-溴-1-丁烯发生烯烃复分解反应制备环孢素衍生物的方法。使用文献方法将环孢素与4-溴-1-丁烯反应，反应完毕后反应体系中产生了一个11.42％的杂质，该杂质的质谱数据为[m-h]-＝1187.36，推断杂质结构如下。
[0013][0014]
上述杂质与环孢素和伏环孢素结构相近，在纯化和检测过程中很难分离，且杂质的产生致使反应收率较低，不利于工业化放大生产。


技术实现要素：

[0015]
针对现有技术存在的上述缺陷，本发明提供一种安全、易于操作、产品收率高、纯度好、反应条件温和、反应时间短、适合规模化工业生产的伏环孢素的制备方法。本发明所述的制备方法以环孢素或羟基保护的环孢素为原材料经过烯烃复分解反应、消除和脱羟基保护反应得到伏环孢素，反应操作简单，反应条件温和、反应时间较短，总收率约45％-50％。且所述制备方法使用对称烯烃代替1-位烯烃的端烯，避免了由1-位烯烃反应引入的杂质的产生，大大提高了环孢素的转化率和烯烃复分解反应产物的纯度。
[0016]
本发明结构式中csa表示环孢素中大环部分。
[0017]
本发明第一方面提供了一种伏环孢素中间体化合物式ia或式ib的制备方法，其特征在于，使式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应，分别得到化合物式ia或式ib；
[0018][0019]
其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；
[0020]
所述r
′
选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。
[0021]
所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsli催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。
[0022]
所述反应升温至回流，保温反应时间在3-8h，优选3-5h。
[0023]
该方法反应安全、易于操作、产物收率高、纯度好、反应条件温和、反应时间短、适合规模化生产。且该方法使用对称烯烃代替1-位烯烃的端烯，避免了由1-位烯烃反应引入的杂质的产生，大大提高了环孢素的转化率和烯烃复分解反应产物的纯度，该步反应收率在90％左右，纯度均在90％以上。
[0024]
本发明第二方面提供了一种伏环孢素的中间体化合物式ia或式ib，
[0025][0026]
其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；
[0027]
所述r
′
选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基；
[0028]
且式ia不为
[0029]
其中，化合物式ia或式ib包括但不限于以下结构的化合物：
[0030][0031]
本发明第三方面提供了一种伏环孢素的制备方法，其特征在于，使化合物式ia或式ib在碱性条件下反应消除r
′
h和脱去羟基保护基r，得到伏环孢素；
[0032][0033]
其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；
[0034]
所述r
′
选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。
[0035]
所述碱选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钠、碳酸钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、三乙烯二胺(dabco)，优选乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。
[0036]
所述反应的室温搅拌反应时间在3-8h，优选3-5h。
[0037]
该方法反应安全，使用的碱均便宜易得，且使用过程中安全风险低，该方法反应条件相较于文献报道的条件要更温和，反应时间更短；该方法能够一步同时消除r
′
h和脱去羟基保护基r，反应及后处理操作简单。该方法反应所用原材料转化率较高，转化率接近100％，所得产品纯度好，适合规模化生产。
[0038]
本发明第四方面提供了一种伏环孢素的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0039]
a)使式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应，分别得到化合物式ia或式ib；
[0040]
b)使化合物式ia或式ib在碱性条件下反应消除r
′
h和脱去羟基保护基r，得到伏环孢素；
[0041][0042]
其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；
[0043]
所述r
′
选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。
[0044]
所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsii催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。
[0045]
所述碱选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钠、碳酸钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、三乙烯二胺(dabco)，优选乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。
[0046]
所述反应步骤a)升温至回流，保温反应时间在3-8h，优选3-5h；步骤b)的室温搅拌反应时间在3-8h，优选3-5h。
[0047]
该方法两步反应均反应条件温和，反应时间短，反应及后处理简单，相较于文献报道的条件要温和，反应时间短，适合规模化生产。且该方法所得中间体及产物收率高、纯度
好、总收率约45％-50％，明显高于现有文献报道的收率。
[0048]
本发明第五方面提供一种伏环孢素的制备方法，其特征在于，使式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应后直接在碱性条件下反应消除r
′
h和脱去羟基保护基r，一锅法得到伏环孢素。
[0049]
所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsii催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。
[0050]
所述碱选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钠、碳酸钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、三乙烯二胺(dabco)，优选乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。
[0051]
该一锅法反应操作简单，反应条件温和，总收率约45％-50％，明显高于现有文献报道的收率。
[0052]
综上，本发明提供的伏环孢素及其新中间体的制备方法，反应更加安全，反应条件更加温和，反应时间更短，反应操作简单，反应收率较高，所得伏环孢素及其中间体纯度较好，更适合规模化生产，降低了生产成本。
具体实施方式
[0053]
以下通过具体的实施方式，对本发明的上述内容做进一步的详细说明，但不应将此理解为对本发明保护主题的任何限制。凡基于本发明上述内容所实现的技术方案均属于本发明的范围。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。本领域技术人员清楚，在下文中，如果未特别说明，本发明所进行的操作是本领域常规的室温条件下进行，所述室温具有本领域公知的技术含义，一般是指20～35℃，优选20～30℃，更优选20～25℃。
[0054]
本发明中，如未作特殊说明，所述反应溶剂的用量以及碱、催化剂的用量均为反应的常规用量，本领域的技术人员根据现有技术即可确定。
[0055]
本发明使用的试剂均为常规试剂，可以通过市场购买得到，所用起始原料和反应物均可以通过现有技术或公开的现有文献制备得到，也可以通过市场购买得到。
[0056]
实施例1、环[[(e)-(2s,3r,4r)-3-乙酰氧基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-辛烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物iv)的制备
[0057]
将环孢素(76.5g)，二氯甲烷(80ml)加入反应瓶中，搅拌溶解。加入乙酸酐(66.0g)三乙胺(98.5g)和4-二甲氨基吡啶(1.3g)。室温搅拌，tlc检测反应完全后浓缩，然后加入乙醇和纯化水，降温析晶，抽滤得粗品。将粗品加入乙醇/纯化水中精制，抽滤，干燥得式iv化合物(76.4g，收率96.6％，纯度95.79％)。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ8.59(d,j＝9.6hz,1h),8.07(d,j＝6.8hz,1h),7.53(d,j＝9.2hz,1h),7.49(d,j＝7.6hz,1h),5.71(dd，j＝4.4,11.2hz,1h),5.60-5.54(m,2h),5.43(m,j＝3.6,12.0hz,1h)，5.34-5.14(m,4h)，5.02-4.97(m,2h),4.86(ddd,1h),4.78(t,1h),4.69(d,j＝13.6hz,1h),4.43(ddd,1h),3.47(s,3h),3.28(s,3h),3.26(s,3h),3.23(s,3h),3.11(s,3h),2.69(s,3h),2.67(s,3h),2.46-2.43(m,1h),2.25-2.07(m,9h),2.03(s,3h),1.72-1.60(m,6h),1.55-0.80(m,55h)；esi ms m/
z：1261.47[c
64h113n11o13
+nh4]
+
,1242.29[c
64h113n11o13-h]-。
[0058]
实施例2、环[[(e)-(2s,3r,4r)-3-(三甲基硅氧基)-4-甲基-2-(甲氨基)-6-辛烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物v)的制备
[0059]
将环孢素(10.0g)，二氯甲烷(100ml)加入反应瓶中，搅拌溶解。加入三甲基氯硅烷(4.5g)和三乙胺(8.4g)。室温搅拌，tlc检测反应完全后依次用饱和氯化铵溶液、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，有机相浓缩。将粗品加入乙醇/纯化水中精制，抽滤，干燥得式v化合物(9.9g，收率93.4％，纯度92.92％)。
[0060]
实施例3、环[[(2s,3r,4r)-3-乙酰氧基-9-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物vi)的制备
[0061]
将化合物iv(1.0g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-二溴己-3-烯(2.0g)和hoveyda-grubbs ii催化剂(0.2g)，氮气保护。升温至回流，保温反应5h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(0.96g，收率90.6％，纯度92.54％)。
[0062]
实施例4、环[[(2s,3r,4r)-3-乙酰氧基-8-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物vii)的制备
[0063]
将化合物iv(1.0g)和二氯甲烷(13ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入2,5-二溴己-3-烯(2.0g)和zhan ii催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(0.97g，收率91.5％，纯度93.18％)。
[0064]
实施例5、环[[(2s,3r,4r)-3-乙酰氧基-9-(4-甲基)苯磺酰氧基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物viii)的制备
[0065]
将化合物iv(12.4g)和二氯甲烷(150ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-双(对甲苯磺酰氧基)己-3-烯(41.8g)和hoveyda-grubbs i催化剂(1.5g)，氮气保护。升温至回流，保温反应5h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(13.0g，收率91.3％，纯度92.25％)。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ8.57(m,1h),8.03(d,j＝6.0hz,1h),7.79-7.76(m,j＝7.2hz,2h),7.56(d,j＝8.8hz,1h),7.46(m,1h),7.35-7.32(m,2h),5.69(dd，j＝4.0，11.2hz,1h),5.66-5.51(m，2h),5.33-5.13(m,5h)，5.00-4.93(m,2h)，4.85-4.79(m,1h),4.73-4.61(m,2h),4.41(t,1h),4.14-4.09(m,1h),4.00-3.88(m,1h),3.45-3.44(m,3h),3.27-3.18(m,9h),3.09(s,3h),2.69-2.65(m,6h),2.45(s,3h),2.32-2.28(m,1h),2.23-2.11(m,4h),2.07-2.01(m,6h),1.94-1.83(m,4h),1.70-1.58(m,4h),1.45-1.41(m,2h),1.32-0.76(m,52h)；esi ms m/z：1446.13[c
72h121n11o16
s+nh4]
+
,1426.28[c
72h121n11o16
s-h]-。
[0066]
实施例6、环[[(2s,3r,4r)-3-乙酰氧基-8-(4-甲基)苯磺酰氧基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮
氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物ix)的制备
[0067]
将化合物iv(1.2g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入2,5-双(对甲苯磺酰氧基)己-3-烯(4.2g)和zhan ib催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(1.3g，收率94.2％，纯度91.96％)。
[0068]
实施例7、环[[(2s,3r,4r)-3-(三甲基硅氧基)-9-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物x)的制备
[0069]
将化合物v(1.0g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-二溴己-3-烯(2.0g)和hoveyda-grubbs i催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(0.97g，收率91.5％，纯度92.00％)。
[0070]
实施例8、环[[(2s,3r,4r)-3-(三甲基硅氧基)-8-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物xi)的制备
[0071]
将化合物v(1.0g)和二氯甲烷(14ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入2,5-二溴己-3-烯(2.0g)和zhan ic催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(0.97g，收率91.5％，纯度92.18％)。
[0072]
实施例9、环[[(2s,3r,4r)-3-羟基-9-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物xii)的制备
[0073]
将环孢素(12.0g)和二氯甲烷(150ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-二溴己-3-烯(24.0g)和grubbsi催化剂(1.0g)，氮气保护。升温至回流，保温反应5h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(11.9g，收率92.0％，纯度92.15％)。
[0074]
实施例10、环[[(2s,3r,4r)-3-羟基-8-溴-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物xiii)的制备
[0075]
将环孢素(1.2g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入2,5-二溴己-3-烯(2.4g)和grubbsii催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得目标化合物粗品。粗品柱层析得目标化合物(1.2g，收率93.0％，纯度91.85％)。
[0076]
实施例11、环[[(2s,3r,4r)-3-羟基-9-(4-甲基)苯磺酰氧基-4-甲基-2-(甲氨基)-6-壬烯酰]-l-2-氨基丁酰-n-甲基甘氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-缬氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-l-丙氨酰-d-丙氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-亮氨酰-n-甲基-l-缬氨酰](化合物xiv)的制备
[0077]
将环孢素(12.0g)和二氯甲烷(150ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-双(对甲
3-烯(2.0g)和zhan ii催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应4h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。将粗品和四氢呋喃(12ml)加入反应瓶中，搅拌溶解。加入碳酸钾(0.7g)，氮气保护。室温搅拌反应5h。向反应液加入二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，洗涤，浓缩得伏环孢素粗品。硅胶柱层析纯化，液相制备纯化得0.65g目标化合物，收率55.5％。
[0090]
实施例18、伏环孢素(vcs)的制备
[0091]
将环孢素(1.2g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入1,6-二溴己-3-烯(2.1g)和grubbs ii催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应3h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。将粗品和四氢呋喃(12ml)加入反应瓶中，搅拌溶解。加入叔丁醇钾(0.4g)，氮气保护。室温搅拌反应5h。向反应液加入二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，洗涤，浓缩得伏环孢素粗品。硅胶柱层析纯化，液相制备纯化得0.7g目标化合物，收率57.8％。
[0092]
实施例19、伏环孢素(vcs)的制备
[0093]
将环孢素(1.2g)和二氯甲烷(15ml)加入反应瓶中，氮气保护。加入2,5-双(对甲苯磺酰氧基)己-3-烯(4.5g)和zhan ii催化剂(0.1g)，氮气保护。升温至回流，保温反应3h。降温，依次用饱和碳酸氢钠溶液、纯化水、饱和食盐水洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩得粗品。将粗品和四氢呋喃(12ml)加入反应瓶中，搅拌溶解。加入dbu(0.6g)，氮气保护。室温搅拌反应5h。向反应液加入二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，抽滤，洗涤，浓缩得伏环孢素粗品。硅胶柱层析纯化，液相制备纯化得0.65g目标化合物，收率53.7％。

技术特征：
1.一种伏环孢素中间体化合物式ia或式ib的制备方法，其特征在于，使式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应，分别得到化合物式ia或式ib；其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；所述r'选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。2.如权利要求1所述伏环孢素中间体化合物式ia或式ib的制备方法,其所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsii催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。3.一种伏环孢素的制备方法，其特征在于，使化合物式ia或式ib在碱性条件下反应消除r'h和脱去羟基保护基r，得到伏环孢素；其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；
所述r'选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。4.如权利要求3所述伏环孢素的制备方法，所述碱选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钠、碳酸钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、三乙烯二胺(dabco)，优选乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。5.如权利要求3所述伏环孢素的制备方法，其中所述化合物式ia或式ib可进一步由式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应得到,其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；所述r'选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基。6.如权利要求5所述伏环孢素的制备方法,其所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsii催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。7.一种伏环孢素的制备方法，其特征在于，使式ii化合物在催化剂条件下与式化合物式iiia或式iiib发生烯烃复分解反应后直接在碱性条件下反应消除r'h和脱去羟基保护基r，一锅法得到伏环孢素。8.如权利要求7所述伏环孢素的制备方法，所述催化剂为grubbs催化剂或zhan催化剂，优选grubbsi催化剂、grubbsii催化剂、hoveyda-grubbsi催化剂、hoveyda-grubbsii催化剂、zhan ib催化剂、zhan ic催化剂、zhan ii催化剂。9.如权利要求7所述伏环孢素的制备方法，所述碱选自甲醇钠、乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、碳酸钠、碳酸钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)、三乙烯二胺(dabco)，优选乙醇钠、叔丁醇钠、叔丁醇钾、1,8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯(dbu)。10.一种伏环孢素的中间体化合物式ia或式ib，
其中，所述r选自氢、乙酰基、2,2-二甲基丙酰基、苯甲酰基、对甲氧基苯甲酰基、叔丁氧羰基、苄氧羰基、芴氧羰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，优选氢、乙酰基、三甲基硅基、三乙基硅基、三异丙基硅基、异丙基二甲基硅基、异丙基二乙基硅基、叔丁基二甲基硅基、叔丁基二苯基硅基，更优选氢、乙酰基；所述r'选自f，cl，br，i，三氟甲磺酰氧基，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基，对硝基苯磺酰氧基，优选br，i，甲磺酰氧基，苯磺酰氧基，对甲苯磺酰氧基；且式ia不为

技术总结
本发明属于医药化学技术领域，具体涉及一类新的制备伏环孢素的中间体化合物，以及伏环孢素及其新中间体的制备方法。该方法反应更加安全，反应条件更加温和，反应时间更短，反应操作简单，反应收率较高，所得伏环孢素及其中间体纯度较好，更适合规模化生产，降低了生产成本。本。


技术研发人员：田振平 张涛 丛超 何则欢 初乐玲 高永宏
受保护的技术使用者：齐鲁制药有限公司
技术研发日：2022.03.04
技术公布日：2023/9/13