喹啉类化合物及其制备方法、药物组合物及医药用途

1.本发明属于医药领域，具体涉及喹啉类化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物，还涉及上述化合物的制备方法、药物组合物及它们的医药用途。


背景技术：

2.蛋白酪氨酸激酶(tyrosine protein kinase，tpk)是细胞信号传递过程中的重要因子，参与一系列细胞功能，与细胞生长、分化、增殖密切相关，它催化atp的γ磷酸基转移到许多重要蛋白质的酪氨酸残基上，使酚羟基磷酸化，从而传递信号。酪氨酸激酶属于蛋白激酶家族，按其结构可以分为两大类：受体酪氨酸蛋白激酶(receptor ptks)和非受体酪氨酸蛋白激酶(non-receptor ptks)，这两类酪氨酸蛋白激酶按结构同源性可进一步分为多个酶属。人体共有518种激酶基因，其中90种ptks已被发现，包括受体型的酪氨酸激酶58种和非受体型的酪氨酸激酶32种。受体型的酪氨酸激酶包括血小板生长因子受体(platelet-derived growth factorreceptor，pdgfr)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，egfr)、成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptor，fgfr)等成员，它们通常具有一个细胞外结构域、一个跨膜区以及一个细胞内激酶域。癌症临床研究表明，这些受体及其配体与很多肿瘤都有重要联系，很多癌症出现了相关生长因子的过量表达，导致过量的酪氨酸磷酸化信号传入细胞。非受体型的酪氨酸激酶(nrptks)一般没有细胞外结构，它们通常与细胞膜耦联或存在于胞质中，包括abl激酶、src激酶、c-端src激酶等成员。在肿瘤组织中nrptks常被激活，再激活下游的信号传导途径，促进细胞增殖、抵抗细胞凋亡，促使肿瘤发生和发展。tpk分成受体依赖型酪氨酸蛋白激酶(rtk)和非受体依赖型酪氨酸蛋白激酶。受体依赖型即催化性受体，是通过跨膜结构的酶蛋白受体连接细胞内外，与生长因子配体结合后激活信号传导。受体型的酪氨酸蛋白激酶包括egfr、pdgfr和m-csf以及fgfr、vegfr和hgfr等。rtk都含有活性的细胞内结构域。肿瘤的发生跟受体与相应配体的结合有着密切关系，大多恶性肿瘤都出现了生长因子的过量表达，导致异常的酪氨酸磷酸化信号传入到细胞中。肿瘤细胞中受体激活后通过与下游分子结合并激活，使其具有酪氨酸激酶活性，促进细胞增殖。
3.血管生成是由血管形成新萌芽的过程或从预先存在的血管分裂出来的过程。在正常生理条件下，血管生成是促血管生成因子和抑血管生成因子协调作用的复杂过程。当血管生成发生异常就会引起一系列的疾病，包括视网膜病、关节炎、子宫内膜异位症、动脉粥样硬化和癌症。folkman在70年代初就已经证实原发性肿瘤的生长、转移必须依赖新血管的生成。事实上，肿瘤为了生长需要新的毛细血管来提供营养并带走代谢废物，新血管也为在后期的肿瘤细胞转移中提供帮助。
4.血管生成取决于多种生长因子，其中vegf在肿瘤血管生成时对内皮细胞表现出的专一性、重要性而使其成为研究热点。vegf是刺激血管生成的众多因子中最强有力的生长因子，又称血管通透因子，它直接作用于内皮细胞，促使有丝分裂发生、新生血管生长。vegf
家族成员有a、b、c、d、e和胎盘生长因子。多数恶性肿瘤细胞有自分泌vegf功能，转移的肿瘤细胞释放vegf刺激了局部血管生成。
5.作为vegf的特异受体vegfr在肿瘤新生血管中高表达。血管内皮细胞具有遗传稳定性，所以vegfr抑制剂不易产生耐药性，易于到达靶点，在肿瘤组织内高浓度聚集。vegfr主要有3类：vegfr-1(flt-1)；vegfr-2(kdr)和vegfr-3(flt-4)。vegfr是具有高度特异性的跨膜受体，蛋白结构由胞外区、跨膜区和胞内区3部分组成。胞外区是其与vegf的结合位点，含有7个免疫球蛋白样的功能区；胞内区有1个插入片段的酪氨酸蛋白激酶(ptk)；vegfr的生物学功能是与其配体结合后通过级联式的磷酸化反应使信号逐级传导和放大，引起细胞相应的生物学效应，从而诱导血管内皮细胞的分裂、增殖和迁移，增强毛细血管通透性、使血浆外渗，促成周围血管大量形成。
6.研究证明vegf/vegfr通路与肿瘤血管生成和淋巴管形成密切相关。该信号通路为自身的生存发展创造了有利的微环境，它可促进其微血管的生成，获取丰富的营养供应，淋巴管的生成在肿瘤扩散过程中发挥着更重要的作用，因此阻断vegf/vegfr信号通路可以有效抑制肿瘤血管生成和淋巴管生成，抑制肿瘤的生长和转移。


技术实现要素：

7.本发明的目的是提供一种作用于vegfr的小分子化合物，其可阻断vegf/vegfr通路，能够预防或治疗与vegf/vegfr通路有关的疾病。例如具有强效的血管形成抑制作用和抗肿瘤活性，对伴有新生血管形成异常增殖的其他各种疾病有改善、预防和治疗作用。
8.本发明人经过研究现已发现，具有下面通式(i)的化合物可作用于vegf/vegfr通路，显著抑制vegf等蛋白激酶活性，并具有显著的抗肿瘤作用。
9.本发明第一方面涉及式(i)所示的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物；
[0010][0011]
其中，
[0012]
r1和r2各自独立地选自氢，烷基，烷氧基，烷氧羰基，氨基烷酰基，烷氨基羰基；
[0013]
r3选自其中，r4选自-(nr6)
n1-c(o)-(nr7)
n2-,r6和r7各自独立地选自h，烷基；n1和n2各自独立地选自0，1；r5选自取代或未取代的烷基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的杂芳基，取代或未取代的杂环基，环烷基，环烯基，h，链烯基，炔基，烷氨基羰基，氨基羰基，氰基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：卤素，烷基，烷氧基，卤代烷基，硝基，环烷基，芳基。
[0014]
本发明第一方面的任意实施方式中，r1和r2各自独立地选自氢，c
1-c6直链或支链烷基，c
1-c6烷氧基，c
1-c6烷氧羰基，氨基c
1-c6烷酰基，c
1-c6烷氨基羰基。
[0015]
本发明第一方面的任意实施方式中，r1和r2各自独立地选自氨基c
1-c6烷酰基，c
1-c6烷氧基，c
1-c6烷氨基羰基。
[0016]
本发明第一方面的任意实施方式中，r1和r2各自独立地选自氨基甲酰基，甲氧基。
[0017]
本发明第一方面的任意实施方式中，r3选自其中，r4选自-(nr6)
n1-c(o)-(nr7)
n2-,r6和r7各自独立地选自h，c
1-c6烷基；n1和n2各自独立地选自0，1；r5选自取代或未取代的c
1-c6烷基，取代或未取代的5-10元芳基，取代或未取代的5-10元杂芳基，取代或未取代的5-10元杂环基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：卤素，c
1-c6烷基，c
1-c6烷氧基，卤代c
1-c6烷基，硝基，3-6元环烷基，5-10元芳基。
[0018]
本发明第一方面的任意实施方式中，r3选自其中，r4选自-c(o)nh-，-c(o)-，-c(o)n(ch3)-，-nh(co)nh-，r5选自取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，乙基，取代或未取代的噻唑基，取代或未取代的甲基，取代或未取代的哌嗪基，取代或未取代的吗啉基，取代或未取代的萘基，取代或未取代的噁唑基，取代或未取代的异噁唑基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：氟，甲基，氯，甲氧基，三氟甲基，乙氧基，硝基，溴，环丙基，苯基。
[0019]
本发明第一方面的任意实施方式中，r3选自其中，r4选自-c(o)nh-，-c(o)-，-c(o)n(ch3)-，-nh(co)nh-，r5选自选自苯基，乙基，乙基，甲基，甲基，苄基，
[0020]
本发明第一方面的任意实施方式中，r3选自
[0021][0022]
本发明第一方面的任意实施方式中，所述化合物选自：
[0023][0024][0025]
本发明第二方面提供了制备本发明第一方面的化合物的方法，其为如下的方法a
至方法e中的任意一种方法；
[0026]
所述方法a包括：
[0027]
将1-萘甲酸经过甲磺酸化和碱融反应，得到中间体4；
[0028]
将中间体4与中间体5反应，得到中间体6，然后以hobt、edci为缩合剂，将中间体6与胺反应，得到目标化合物8；或者，以hobt、edci为缩合剂，将中间体4与胺反应，得到中间体7，然后将中间体7与中间体5反应，得到目标化合物8；
[0029][0030]
所述方法b包括：
[0031]
将中间体5与2-羟基-6-萘甲酸反应，得到中间体10；
[0032]
将中间体10与氨基化合物进行酰胺缩合，得到目标化合物11；
[0033][0034]
所述方法c包括：
[0035]
将中间体5与5-羟基吲哚反应，得到中间体13；
[0036]
将中间体13与中间体14反应，得到目标化合物15；
[0037][0038]
所述方法d包括：
[0039]
将原料中间体16与hobt、edci反应，得到中间体17；
[0040]
将中间体17与nh2r5反应，得到中间体18；
[0041]
将中间体18与4-羟基苯胺反应，得到中间体20；
[0042]
将中间体20与中间体5反应，得到目标化合物21；
[0043][0044]
所述方法e包括：
[0045]
将原料化合物22缩合酰化，得到中间体23；
[0046]
将中间体23与中间体5进行亲核取代反应，得到目标化合物24；
[0047][0048]
上述的r1、r2和r5的定义如本发明第一方面中所述。
[0049]
本发明化合物的制备方法可以包括(但不限于)上述方法。在具体操作过程中，可以根据需要对方法中的步骤进行扩展或合并。
[0050]
本发明第三方面涉及一种药物组合物，包含本发明第一方面的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物；任选地，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。
[0051]
本发明第三方面的任意实施方式中，所述药物组合物还包含用于治疗肿瘤的其它药物和/或免疫调节剂(例如选自免疫检查点抑制剂、抗生素类药、烷化剂、抗代谢药、激素药、免疫活性剂、干扰素类活性剂中的一种或多种)。
[0052]
本发明第三方面的任意实施方式中，用于治疗肿瘤的其它药物为除本发明第一方面的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物及多晶型物以外的用于治疗肿瘤的药物。
[0053]
本发明第四方面涉及本发明第一方面的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物或者本发明第三方面的药物组合物在制备用于预防和/或治疗与vegf/vegfr通路有关疾病的药物中的用途。
[0054]
本发明的第五方面涉及一种预防和/或治疗与vegf/vegfr通路有关疾病的方法，包括将有效量的本发明第一方面的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物或者有效量的本发明第三方面的药物组合物施用于有需求的受试者。
[0055]
本发明第一方面的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物或者有效量的本发明第三方面的药物组合物，用于预防和/或治疗与vegf/vegfr通路有关疾病。
[0056]
在任意实施方式中，所述与vegf/vegfr通路有关疾病选自动脉粥样硬化、肺纤维化、视网膜病、子宫内膜异位症、关节炎和癌症中的一种或多种。
[0057]
在任意实施方式中，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌(例如小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、骨癌、脑癌、直肠癌、食管癌、肾癌(例如肾实质癌)、舌癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、黑色素瘤、淋巴瘤、甲状腺瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、肝细胞癌中的一种或多种。
[0058]
前述化合物的列表如下：
[0059]
[0060]
[0061]
[0062]
[0063][0064]
本发明的产品、方法以及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术，且所得到的技术方案均囊括在本发明要求保护的范围内。
[0065]
本发明中的术语“药学可接受的盐”包括本发明化合物与制药学上可接受的无机或有机酸形成的酸盐或与制药学上可接受的碱形成的碱盐。其中酸盐包括但不限于：盐酸盐，氢溴酸盐，氢碘酸盐，硝酸盐，硫酸盐，硫酸氢盐，磷酸盐，磷酸氢盐，乙酸盐，丙酸盐，丁酸盐，草酸盐，三甲基乙酸盐，己二酸盐，藻酸盐，乳酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，琥珀酸盐，马来酸盐，富马酸盐，苦味酸盐，天冬氨酸盐，葡糖酸盐，苯甲酸盐，甲磺酸盐，乙磺酸盐，苯磺酸盐，对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐；碱盐包括但不限于:铵盐，碱金属盐如钠和钾盐，碱土金属盐如钙和镁盐，有机碱盐如二环己胺和n-甲基-d-葡糖胺盐，以及氨基酸盐如精氨酸和赖氨酸盐。
[0066]
本发明中的术语“碱”，通常只要是有机合成上作为碱已知的物质均可，没有特别的限定，例如碳酸钠，碳酸氢钠，碳酸钾，碳酸氢钾，氢化钠，氢化钾，叔丁醇钠，叔丁醇钾，碳酸铯，三乙胺，三甲胺，n-甲基吗啉，n，n-二甲基苯胺，吡啶，异喹啉，氢氧化钾，氢氧化钠，甲醇钠，甲醇钾等。
[0067]
本发明中的术语“药学上可接受的载体”包括但不限于：离子交换剂，氧化铝，硬脂酸铝，卵磷脂，血清蛋白如人血清蛋白，缓冲物质如磷酸盐，甘油，山梨酸，山梨酸钾，饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物，水，盐或电解质，如硫酸鱼精蛋白，磷酸氢二钠，磷酸氢钾，氯化钠，锌盐，胶态氧化硅，三硅酸镁，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素物质，聚乙二醇，羧甲基纤维素钠，聚丙烯酸酯，蜂蜡，聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物和羊毛脂。
[0068]
本发明中的术语“烷基”是指烷烃分子中少掉一个氢原子而成的烃基。例如c
1-6
烷基、c
1-4
烷基、c
1-2
烷基；具体实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。
[0069]
本发明中的术语“烷氧基”是指以烷基—o—形式提供的基团，其中，“烷基”定义如前述。例如c
1-6
烷氧基、c
1-4
烷氧基、c
1-2
烷氧基；具体实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
[0070]
本发明中的术语“烷氧羰基”是指以烷氧基—c(o)—形式提供的基团，其中，“烷氧基”定义如前述。例如c
1-6
烷氧基羰基、c
1-4
烷氧基羰基、c
1-2
烷氧基羰基；具体实例包括但不限于甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基等。
[0071]
本发明中的术语“烷酰基”是指含有单羧基的饱和脂肪酸脱掉羟基形成的基团。例如c
1-6
烷酰基、c
1-4
烷酰基、c
1-2
烷酰基；具体实例包括但不限于甲酰基、乙酰基、正丙酰基、异丙酰基等。
[0072]
本发明中的术语“氨基烷酰基”是nh2—烷酰基—形式提供的基团，其中“烷酰基”定义如前述。例如氨基c
1-6
烷酰基、氨基c
1-4
烷酰基、氨基c
1-2
烷酰基；具体实例包括但不限于氨基甲酰基、氨基乙酰基、氨基正丙酰基、氨基异丙酰基、氨基正丁酰基等。
[0073]
本发明中的术语“烷氨基酰基”是以烷基—nh—c(o)—形式提供的基团，其中，“烷基”定义如前所述。例如c
1-6
烷氨酰基、c
1-4
烷氨酰基、c
2-6
烷氨酰基、c
1-2
烷氨酰基；具体实例包括但不限于甲基氨基酰基、乙基氨基酰基、正丙基氨基酰基、异丙基氨基酰基、正丁基氨基酰基等。
[0074]
本发明中的术语“芳基”是指具有芳香性的单环或稠环基团。例如5-10元芳基、5-8元芳基、5-6元芳基；具体实例包括但不限于苯基、萘基、蒽基、菲基等。
[0075]
本发明中的术语“杂芳基”是指至少含有一个n、o或s杂原子的具有芳香性的单环
或稠环基团。例如5-10元杂芳基、5-8元杂芳基、5-7元杂芳基、5-6元杂芳基；具体实例包括但不限于卟啉基、吡唑基、吡咯基、噻唑基、吡啶基、咪唑基、喹啉基等。
[0076]
本发明中的术语“杂环基”是指至少含有一个n、o或s杂原子的单环或多环饱和烃基。例如5-10元杂环基、5-8元杂环基、5-7元杂环基、5-6元杂环基；具体实例包括但不限于哌嗪基、吗啉基等。
[0077]
本发明中的术语“环烷基”是指单环饱和烷烃环中少掉一个氢原子而成的基团。例如3-6元环烷基、5-6元环烷基；具体实例包括但不限于环丁烷基、环戊烷基、环己烷基等。
[0078]
本发明的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物或者本发明药物组合物具有全身和/或局部作用，因此可以适宜的途径进行给药，例如口服、胃肠外、肺、鼻、舌下、舌、颊、直肠、经皮、结膜、局部给药或以植入物的形式给药。可以以适于这些给药途径的给药形式进行给药。
[0079]
适于口服给药的有可以迅速和/或以改变的方式传递活性成分的公知的给药形式，如片剂(未包衣片或包衣片，如具有肠包衣或膜包衣的片剂)、胶囊、糖衣片、颗粒、小药丸、粉剂、乳剂、混悬液和气雾剂。
[0080]
采用胃肠外给药可能可避免吸收步骤(静脉内、动脉内、心内、脊柱内或腰髓内给药)或者包含吸收(肌内、皮下、皮内、经皮或腹膜内给药)。适于胃肠外给药的给药形式特别是用于注射和输入的溶液、混悬液、乳剂、冷冻干燥物和无菌粉末形式的制剂。
[0081]
适于其他的给药途径有：例如吸入(特别是粉末吸入、喷雾)的药物、鼻滴剂/溶液、喷雾剂；用于舌、舌下或颊给药的片剂或胶囊、栓剂、用于耳朵和眼睛的制剂、阴道胶囊、水性混悬液(洗剂、振摇混合物)、亲脂性混悬液、软膏、乳膏、乳液、糊剂、撒粉或植入物，如斯腾特固定模。
[0082]
可以用本身已知的方法将该活性成分转化成所述的给药形式。其可以用惰性无毒的适宜药用赋形剂来实现。其特别是包括载体(例如微晶纤维素)、溶剂(例如液体聚乙二醇)、乳化剂(例如十二烷基硫酸钠)、分散剂(例如聚乙烯吡咯烷酮)、合成和天然生物聚合物(例如蛋白质)、稳定剂(例如抗氧剂和抗坏血酸)、着色剂(例如无机颜料如氧化铁)或矫味剂和/或掩味剂。在适宜的情况中，所说的活性成分可以以微囊包封的形式存在于一种或多种上述载体中。
[0083]
除本发明化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物之外，上述药物制剂还可以包含其他的药物活性成分。
附图说明：
[0084]
图1为化合物12和28对huvecs细胞体外血管形成抑制作用效果图。
[0085]
图2为化合物12和28对肝癌hepg2裸鼠异种移植瘤的抑制效果图。
[0086]
图3为化合物12和28对人甲状腺癌8305c裸鼠异种移植瘤的抑制效果图。
[0087]
图4为化合物12和28对人甲状腺癌8305c裸鼠异种移植瘤新生血管及增殖抑制免疫组化效果图。
具体实施方式
[0088]
提供以下实施例以便为本领域技术人员提供如何进行制备和评估本文请求保护
的方法和对化合物的完整公开说明。本实施例仅仅示例本发明而非限制本发明的范围。
[0089]
下面更为具体地描述本发明式(i)结构化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。本发明化合物还可以通过将任选本说明书中所描述的或本领域已知的各种合成方法的进行组合来更方便的制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员更容易的进行。
[0090]
下面的实施例是本发明优选的说明性优选方案，对本发明不构成任何限制。
[0091]
对于以下全部实施例，可以使用本领域技术人员已知的标准操作和纯化方法。除非另有说明，所有温度以℃(摄氏度)表示。化合物的结构是通过核磁共振(nmr)或质谱(ms)来确证的。化合物熔点由ry-1型熔点仪测定，温度计未经校正，是以℃给出。1hnmr由日本电子jnm-eca-400型核磁共振仪测定。质谱由api3000(esi)型质谱仪测定。所有反应用溶剂除注明外都未经标准化预处理。下面实施例中如无特殊说明，％是指质量百分比。柱色谱用硅胶为青岛海洋化工厂生产(200-300目)；薄层色谱用硅胶板为烟台化学工业研究所生产的薄层色谱硅胶预制板。本发明化合物可参照本领域常规方法，并使用合适试剂、原料和本领域人员已知的纯化方法制备。
[0092]
实施例1：4-[5-[(4-氟苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基]-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺的合成(化合物1)
[0093]
1.1 4-[(2，2-二甲基-4，6-二氧代-1，3-二噁烷-5-亚甲基)氨基]-2-甲氧基苯甲酸甲酯
[0094]
(2)
[0095]
将50.0g(347.0mmol)丙二酸环(亚)异丙酯、100.0g(942.0mmol)原甲酸三甲酯、125ml异丙醇加入到250ml三颈瓶中，加热回流搅拌40min。加入25.0g(138.0mmol)2-甲氧基-4-氨基苯甲酸甲酯继续回流搅拌10min。冷却至室温，过滤，滤饼用乙醚(50ml
×
2)洗涤，真空干燥，得黄色结晶状固体42.75g，收率92.4％，mp.200～202℃。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):11.22(s，1h)，8.67(s，1h)，7.69(d，j＝8.5hz，1h)，7.40(d，j＝2.0hz，1h)，7.16(dd，j＝8.5，2.1hz，1h)，3.84(s，3h)，3.76(d，j＝16.9hz，3h)，1.67(d，j＝17.1hz，6h)。esi-ms m/z:336.1[m+h]
+
。
[0096]
1.2 7-甲氧基-4-氧代-1，4-二氢喹啉-6-羧酸甲酯(3)
[0097]
将20g(59.6mmol)1.1的产物(2)、100ml二苯醚加入到250ml圆底烧瓶中，加热至200℃搅拌30min，反应结束后降温至40℃，加入乙醚，搅拌30min。过滤，滤饼用乙醚洗涤，真空干燥，得淡黄色固体(3)12.6g，收率90.5％，mp.243～246℃。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):11.64(s，1h)，8.39(s，1h)，7.83(dd，j＝7.5，5.8hz，1h)，6.98(s，1h)，5.95(dd，j＝7.5，1.1hz，1h)，3.85(s，3h)，3.77(s，3h)。esi-ms m/z:234.2[m+h]
+
。
[0098]
1.3 4-氯-7-甲氧基喹啉-6-羧酸甲酯(4)
[0099]
将5.0g(21mmol)1.2产物(3)、15ml氯化亚砜加入到100ml圆底烧瓶中，氮气保护下回流搅拌1h。减压蒸出氯化亚砜，将所得剩余淡黄色固体加入到200ml饱和碳酸氢钠溶液(含3ml乙酸乙酯)中，搅拌至无气泡冒出，过滤，滤饼用水洗涤，滤饼直接用于下一步反应。
[0100]
1.4 4-氯-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(5)
[0101]
将1.3的滤饼(中间体4)、150ml体积分数28％氨水、5ml乙酸乙酯加入到圆底烧瓶中，室温搅拌6h。过滤，滤饼用水洗涤，真空干燥，得淡黄色固体(5)3.86g，收率76.1％，
mp.214～218℃。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):8.78(d，j＝4.8hz，1h)，8.46(s，1h)，7.80(s，1h)，7.89(s，1h)，7.59(s，1h)，7.64(d，j＝4.8hz，1h)，4.00(s，3h)。esi ms m/z:237.0[m+h]
+
。
[0102]
1.5 1-(2-氯-4-羟基苯基)-3-环丙基脲
[0103]
将4g(27.9mmol)4-氨基-3-氯苯酚、14ml dmf加入到50ml圆底烧瓶中，冰浴冷却下滴加3.8g(48.4mmol)吡啶，缓慢滴加4.9g(31.6mmol)氯甲酸苯酯，滴加完毕后于室温搅拌1.5h得到中间体。在冰浴冷却下缓慢滴加2.39g(41.5mmol)环丙胺，室温搅拌5h。加入81.2ml水、7.2ml盐酸(6mol
·
l-1
)，搅拌过夜。过滤，洗涤，真空干燥，得灰色固体4.84g，收率77.3％，mp 155～159℃。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):9.47(s，1h)，7.66(d，j＝8.9hz，1h)，7.54(s，1h)，6.80(d，j＝2.7hz，1h)，6.75(d，j＝2.7hz，1h)，6.63(dd，j＝8.9，2.8hz，1h)，0.58(td，j＝6.8，4.8hz，2h)，0.43～0.26(m，2h)。esi-msm/z:227.5[m+h]
+
，249.1[m+na]
+
。
[0104]
1.6 6-磺酸钠-1-萘甲酸
[0105]
将5.00g(29.04mmol)1-萘甲酸加入50ml的茄型瓶中，常温下将6.0ml浓硫酸加入至茄型瓶中。缓慢升温至115℃恒温3h。tlc监测，反应完全。将反应母液缓慢滴加到30ml水中，冷却至室温后，用饱和naoh调ph至4左右(溶液颜色由酒红色变为乳白色并伴有大量固体析出)。抽滤，滤饼用少量蒸馏水洗涤，得淡黄色固体，真空干燥得产物5.01g，收率62.7％。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):13.16(s，1h)，8.81(d，j＝9.0hz，1h)，8.27～8.20(m，2h)，8.15(dd，j＝7.2，1.2hz，1h)，7.82(dd，j＝9.0，1.8hz，1h)，7.64～7.53(m，1h)。esi-msm/z:257[m-h]-。
[0106]
1.7 6-羟基-1-萘甲酸
[0107]
将5.00g(18.25mmol)6-磺酸钠-1-萘甲酸用研钵研磨成细粉状，分成三批。将15.00g(165.00mmol)koh加入至100ml坩埚中，用电热套加热至300℃左右(koh熔融)，将研磨好的6-磺酸钠-1-萘甲酸分批加入至坩埚中(加热过程边加入边搅拌)。加入完毕后恒温搅拌10分钟，停止加热。冷却50℃左右，缓慢加入25.0ml水，坩埚中的液体呈混浊状。然后将坩埚中的液体转移至烧杯中，用浓盐酸调ph至2左右(调节过程中溶液中有大量灰白色固体析出)。抽滤，滤饼用少量水清洗，真空干燥得1.55g灰白色固体，产率44.9％。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):13.03(s，1h)，9.93(s，1h)，8.72(d，j＝10.1hz，1h)，8.02～7.76(m，2h)，7.45(dd，j＝8.1，7.3hz，1h)，7.30
–
6.98(m，2h)。esi-msm/z:257[m-h]-。
[0108]
1.8 6-(6-氨基甲酰基-7-甲氧基喹啉-4-基氧基)-1-萘甲酸
[0109]
将6-羟基-1-萘甲酸(9，1.08g，5.74mmol)、碳酸铯(5.2g，16.0mmol)、dmf(11.0ml)依次加入至茄型瓶(氮气保护)中，常温搅拌10min。然后将4-氯-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(5，0.8g，3.39mmol)加入至茄型瓶中，常温搅拌10min后缓慢升温至75℃，恒温反应5h，tlc监测反应完全后，将反应液冷却至室温，加入20.0ml蒸馏水，用饱和nahco3调节ph至4～5，有大量固体析出。抽滤，滤饼用少量水洗涤，真空干燥得到白色固体。得1.7g，产率：68.9％。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):9.05(d，j＝9.5hz，1h)，8.73(s，1h)，8.69(d，j＝5.2hz，1h)，8.20(s，1h)，8.18(s，1h)，7.96(d，j＝2.5hz，1h)，7.90(s，1h)，7.78(s，1h)，7.67(t，j＝5.3hz，1h)，7.65～7.62(m，1h)，7.56(s，1h)，6.64(d，j＝5.2hz，1h)，4.05(s，3h)。esi-msm/z:387[m-h]-。
[0110]
1.9 4-(5-[(4-氟苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺的合成
[0111]
将0.30g(0.77mmol)6-(6-氨基甲酰基-7-甲氧基喹啉-4-基氧基)-1-萘甲酸(10)、0.30gedci(1.54mmol)、0.21g hobt(1.54mmol)、dmf(5.0ml)置于茄型瓶中，氮气保护，冰浴条件下搅拌。1h后tlc监测反应完全。然后往茄型瓶中加入对氟苯胺，加入后撤去冰浴，常温下反应5h，tlc监测反应完全。将50.0ml蒸馏水加入到反应液中搅拌30min，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤(10ml
×
3)，真空干燥得灰黄色固体，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得白色固体0.10g，收率27.0％。1h-nmr(400mhz，dmso-d6)δ(ppm):10.71(s，1h)，8.74(s，1h)，8.71(d，j＝5.2hz，1h)，8.36(d，j＝9.2hz，1h)，8.12(d，j＝8.2hz，1h)，7.97(d，j＝2.6hz，1h)，7.89(s，1h)，7.88～7.83(m，2h)，7.81(dd，j＝7.1，1.0hz，1h)，7.78(s，1h)，7.69(dd，j＝8.2，7.1hz，1h)，7.60(dd，j＝9.2，2.6hz，1h)，7.57(s，1h)，7.30～7.18(m，2h)，6.63(d，j＝5.2hz，1h)，4.06(s，3h)。esi-msm/z:482.4[m+h]
+
，504.0[m+na]
+
。
[0112]
实施例2：4-(5-[(3,4-二甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺
[0113]
(化合物2)
[0114]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.08g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.46(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.34(d,j＝9.2hz,1h),8.09(d,j＝8.3hz,1h),7.94(d,j＝2.5hz,1h),7.87(s,1h),7.76(dd,j＝5.4,4.6hz,2h),7.67(d,j＝8.1hz,1h),7.62(d,j＝1.3hz,1h),7.58(dd,j＝9.2,2.6hz,1h),7.56(s,1h),7.52(dd,j＝8.2,1.9hz,1h),7.13(d,j＝8.2hz,1h),6.63(s,1h),4.05(s,3h),2.24(s,3h),2.21(s,3h)。esi-ms m/z:492.2[m+h]
+
，514.4[m+na]
+
。
[0115]
实施例3：4-(5-[(苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物3)
[0116]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.11g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.66(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.36(d,j＝9.3hz,1h),8.11(d,j＝8.5hz,1h),7.96(d,j＝2.5hz,1h),7.91(s,1h),7.84(s,1h),7.82(d,j＝4.2hz,1h),7.79(d,j＝2.9hz,1h),7.72～7.66(m,1h),7.60(dd,j＝9.2,2.6hz,1h),7.56(s,1h),7.39(t,j＝7.9hz,2h),7.14(t,j＝8.4hz,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:464.1[m+h]
+
，486.1[m+na]+。
[0117]
实施例4：4-(5-[(4-吡啶基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物4)
[0118]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.11g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.05(s,1h),8.73(s,1h),8.71(d,j＝5.2hz,1h),8.53(d,j＝5.0hz,2h),8.35(d,j＝9.2hz,1h),8.15(d,j＝8.3hz,1h),7.98(d,j＝2.6hz,1h),7.89(s,1h),7.85(dd,j＝7.1,1.2hz,1h),7.81(dd,j＝4.9,1.5hz,2h),7.77(s,1h),7.70(dd,j＝8.3,7.1hz,1h),7.61(dd,j＝9.2,2.6hz,1h),7.56(s,1h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:465.1[m+h]+，487.1[m+na]
+
，929.3[2m+na]
+
。
[0119]
实施例5：4-(5-[(3-氯苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物5)
[0120]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.07g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.84(s,1h),8.73(s,1h),8.71(d,j＝5.2hz,1h),8.36(d,j＝9.2hz,1h),8.13(d,j＝7.7hz,1h),8.05(d,j＝2.0hz,1h),7.97(d,j＝2.3hz,1h),7.90(s,1h),7.82(d,j＝7.1hz,1h),7.78(s,1h),7.76～7.66(m,2h),7.60(dd,j＝9.2,2.5hz,1h),7.56(s,1h),7.42(t,j＝8.1hz,1h),7.21(dd,j＝6.4,2.9hz,1h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:498.1[m+h]
+
。
[0121]
实施例6：4-(5-[(4-甲氧基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物6)
[0122]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.16g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.52(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝4.4hz,1h),8.36(d,j＝9.6hz,1h),8.10(d,j＝8.8hz,1h),7.96(d,j＝2.8hz,1h),7.90(s,1h),7.78(d,j＝7.7hz,2h),7.74(d,j＝8.9hz,2h),7.71～7.64(m,1h),7.59(dd,j＝9.2,2.5hz,1h),7.56(s,1h),6.96(d,j＝9.1hz,2h),6.62(d,j＝5.3hz,1h),4.05(s,3h),3.76(s,3h)。esi-ms m/z:494.1[m+h]
+
，516.1[m+na]
+
。
[0123]
实施例7：4-(5-[(乙基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物7)
[0124]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.13g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.74(s,1h),8.71(d,j＝5.4hz,1h),8.64(t,j＝5.7hz,1h),8.37(d,j＝9.3hz,1h),8.04(dd,j＝6.6,3.0hz,1h),7.93(d,j＝2.5hz,2h),7.81(s,1h),7.62(dd,j＝6.7,3.8hz,1h),7.57(dd,j＝9.0,2.7hz,1h),6.62(d,j＝5.3hz,1h),4.05(s,3h),3.34(m,2h),1.19(t,j＝7.2hz,3h)。esi-ms m/z:416.1[m+h]
+
，438.1[m+na]
+
，831.1[2m+h]
+
，853.2[2m+na]
+
。
[0125]
实施例8：4-(5-[(2，3-二甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物8)
[0126]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.09g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.47(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.34(d,j＝9.2hz,1h),8.09(d,j＝7.7hz,1h),7.95(d,j＝2.5hz,1h),7.88(s,1h),7.77(d,j＝7.9hz,2h),7.70～7.64(m,1h),7.62(d,j＝1.9hz,1h),7.59(dd,j＝9.3,2.6hz,1h),7.56(s,1h),7.52(dd,j＝8.2,2.0hz,1h),7.13(d,j＝8.4hz,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),2.24(s,3h),2.21(s,3h)。esi-ms m/z:492.1[m+h]
+
，514.1[m+na]
+
，530.1[m+k]
+
。
[0127]
实施例9：4-(5-[(4-甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物9)
[0128]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.11g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.55(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.0hz,1h),8.35(d,j＝9.2hz,1h),8.10(d,j＝8.8hz,1h),7.95(d,j＝2.6hz,1h),7.89(s,1h),7.78(d,j＝7.4hz,2h),7.72(s,1h),7.70(s,1h),7.66(d,j＝7.5hz,1h),7.59(dd,j＝9.1,2.7hz,1h),7.56(s,1h),7.19(d,j＝8.4hz,2h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),2.30(s,3h)。esi-ms m/z:478.1[m+h]
+
，500.1[m+na]
+
。
[0129]
实施例10：4-(5-[(3-甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰
胺(化合物10)
[0130]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.10g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.57(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.35(d,j＝9.1hz,1h),8.10(d,j＝8.2hz,1h),7.95(d,j＝2.5hz,1h),7.89(s,1h),7.78(d,j＝6.8hz,2h),7.70(s,1h),7.67(d,j＝7.8hz,1h),7.60(d,j＝2.2hz,1h),7.58(d,j＝2.2hz,1h),7.56(s,1h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),6.96(d,j＝6.9hz,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),2.33(s,3h)。esi-ms m/z:478.1[m+h]
+
，500.1[m+na]
+
。
[0131]
实施例11：4-(5-[(3-三氟甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物11)
[0132]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.09g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.01(s,1h),8.73(s,1h),8.72(d,j＝5.3hz,1h),8.36(d,j＝8.9hz,1h),8.14(d,j＝8.2hz,1h),8.05(d,j＝8.3hz,2h),7.98(d,j＝2.5hz,1h),7.89(s,1h),7.85(dd,j＝7.2,1.1hz,1h),7.78(s,1h),7.76(s,1h),7.70(dd,j＝8.3,7.2hz,1h),7.62(d,j＝2.5hz,1h),7.60(d,j＝2.5hz,1h),7.57(s,1h),6.65(d,j＝5.1hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:532.1[m+h]
+
，554.1[m+na]
+
。
[0133]
实施例12：4-(5-[(3，5-二甲基苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物12)
[0134]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.09g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.49(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.33(d,j＝9.2hz,1h),8.09(d,j＝8.2hz,1h),7.95(d,j＝2.3hz,1h),7.89(s,1h),7.76(d,j＝7.1hz,2h),7.70～7.64(m,1h),7.59(dd,j＝9.1,2.3hz,1h),7.56(s,1h),7.45(s,2h),6.78(s,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),2.28(s,6h)。esi-ms m/z:492.1[m+h]
+
，514.1[m+na]
+
。
[0135]
实施例13：4-(5-[(3-氟苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物13)
[0136]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.09g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.86(s,1h),8.73(s,1h),8.71(d,j＝5.2hz,1h),8.35(d,j＝9.2hz,1h),8.12(d,j＝8.3hz,1h),7.96(d,j＝2.6hz,1h),7.89(s,1h),7.82(dd,j＝7.1,1.1hz,2h),7.77(s,1h),7.69(dd,j＝8.2,7.2hz,1h),7.62～7.57(m,2h),7.56(s,1h),7.42(td,j＝8.3,6.9hz,1h),6.98(tdd,j＝9.1,2.6,0.8hz,1h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:482.1[m+h]
+
，504.1[m+na]
+
。
[0137]
实施例14：4-(5-[(3，5-二氯苯基)氨基甲酰基)]萘-2-氧基)-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺(化合物14)
[0138]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，得0.09g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.98(s,1h),8.73(s,1h),8.71(d,j＝5.2hz,1h),8.37(d,j＝9.3hz,1h),8.14(d,j＝8.3hz,1h),7.97(d,j＝2.5hz,1h),7.92(d,j＝1.8hz,2h),7.89(s,1h),7.84(d,j＝6.4hz,2h),7.77(s,1h),7.74～7.67(m,1h),7.60(dd,j＝9.3,2.6hz,1h),7.56(s,1h),7.39(s,1h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。esi-ms m/z:533.1[m+h]
+
，555.1[m+na]
+
。
[0139]
实施例15：4-((5-((环丙基甲基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物15)
[0140]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)8.73(d,j＝2.5hz,2h),8.69(d,j＝5.3hz,1h),8.38(d,j＝9.3hz,1h),8.04(dd,j＝6.4,3.2hz,1h),7.93
–
7.87(m,2h),7.78(s,1h),7.62(q,j＝3.6hz,2h),7.60
–
7.54(m,2h),6.60(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),3.24(t,j＝6.3hz,2h),1.12(d,j＝17.0hz,1h),0.51
–
0.45(m,2h),0.31
–
0.27(m,2h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)168.16,165.74,161.23,158.05,153.25,151.59,151.44,135.04,134.22,129.28,128.38,127.62,126.04,125.17,124.89,124.61,121.13,117.64,114.60,107.85,103.76,56.12,43.22,10.91,3.17(2c)。ms[m+h]
+
442.18.。
[0141]
实施例16：7-甲氧基-4-((5-((3-甲氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物16)
[0142]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：10.61(s,1h),8.71
–
8.65(m,2h),8.31(d,j＝9.3hz,1h),8.07(d,j＝8.3hz,1h),7.92(d,j＝2.6hz,1h),7.86(s,1h),7.75(d,j＝7.8hz,2h),7.51(d,j＝8.1hz,2h),7.35(d,j＝8.2hz,1h),6.59(d,j＝5.2hz,1h),4.02(s,3h),3.73(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)：165.48,164.21,159.58,157.89,156.50,151.76,150.12,150.08,138.82,133.17,132.71,128.23,127.90,126.56,125.92,124.54,123.81,123.67,123.05,119.92,116.17,113.08,110.55,107.61,106.36,104.07,102.30,54.59,53.41。ms[m+h]
+
494.18。
[0143]
实施例17：4-((5-((4-乙氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物17)
[0144]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：10.50(s,1h),8.80
–
8.68(m,2h),8.36(d,j＝9.1hz,1h),8.10(d,j＝8.3hz,1h),7.96(d,j＝2.5hz,1h),7.90(s,1h),7.80
–
7.65(m,5h),7.62
–
7.50(m,2h),6.95(d,j＝9.1hz,2h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.08
–
3.98(m,5h),1.33(t,j＝7.0hz,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)166.52,165.69,161.47,158.22,154.80,153.01,151.53,151.06,134.99,134.26,132.22,129.62,128.79,128.23,127.58,126.12,125.33,124.69,121.35(2c),120.65,117.75,114.62,114.31(2c),107.52,103.83,63.04,56.16,14.60。ms[m+h]
+
508.19。
[0145]
实施例18：7-甲氧基-4-((5-((5-甲基噻唑-2-基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物18)
[0146]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：12.68(s,1h),8.76(dt,j＝6.9,2.7hz,2h),8.55(dd,j＝8.4,1.4hz,1h),8.42(d,j＝9.1hz,1h),8.17(s,1h),8.03
–
7.99(m,1h),7.95
–
7.88(m,2h),7.82(s,1h),7.57(s,1h),7.53(dd,j＝8.4,4.4hz,1h),7.25(d,j＝1.2hz,1h),6.71(d,j＝5.5hz,1h),4.07(s,3h),2.42(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)168.09,165.70,161.30,158.15,153.13,151.63,151.40,151.05,139.54,134.56,131.61,130.80,127.99,127.62,125.95,125.31,124.62,121.75,120.64,119.76,117.87,114.61,107.69,
103.86,56.15,11.06。ms[m+h]
+
485.13。
[0147]
实施例19：7-甲氧基-4-((5-((4-甲基噻唑-2-基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物19)
[0148]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：12.77(s,1h),8.77(dd,j＝4.4,1.4hz,1h),8.74(s,1h),8.70(d,j＝5.3hz,1h),8.55(dd,j＝8.4,1.4hz,1h),8.43(d,j＝9.2hz,1h),8.15(d,j＝8.4hz,1h),7.98(d,j＝2.6hz,1h),7.93
–
7.87(m,2h),7.79(s,1h),6.89(d,j＝1.1hz,1h),6.64(d,j＝5.3hz,1h),6.25
–
6.22(m,1h),4.06(s,3h),2.09(d,j＝1.1hz,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)166.55,165.72,161.15,158.07,153.25,151.64(d,j＝7.2hz),146.70,134.31,131.51,130.89,128.00,127.62,126.68,125.94,125.23,124.61,121.78,117.85,114.62,108.10,107.86,103.84,56.13,16.78。ms[m+h]
+
485.13。
[0149]
实施例20：7-甲氧基-4-((5-(甲基氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物20)
[0150]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：8.75(s,1h),8.72(d,j＝5.4hz,1h),8.56(d,j＝4.5hz,1h),8.40(d,j＝9.2hz,1h),8.08
–
8.01(m,1h),7.93(d,j＝2.6hz,1h),7.92
–
7.90(m,1h),7.80(s,1h),7.64
–
7.60(m,2h),7.58
–
7.55(m,2h),6.64(d,j＝5.4hz,1h),4.06(s,3h),2.89
–
2.86(m,4h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)：169.26(2c),166.28,161.89,158.68,153.71,152.00,135.44,134.80,129.95,129.05,128.20,126.61,125.80,125.50,125.20,121.68,118.20,115.17,108.29,104.32,56.70,26.66。ms[m+h]
+
402.14。
[0151]
实施例21：7-甲氧基-4-((5-(4-甲基哌嗪-1-羰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物21)
[0152]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)：9.30(s,1h),8.63(s,1h),7.95(d,j＝9.0hz,1h),7.82(d,j＝8.3hz,2h),7.63(d,j＝2.2hz,1h),7.53(s,1h),7.52
–
7.48(m,1h),7.41(dd,j＝7.1,1.3hz,1h),7.36(dd,j＝9.1,2.2hz,1h),6.47(d,j＝5.0hz,1h),6.29(d,j＝3.9hz,1h),4.10(s,3h),4.04(brs,2h),3.31(q,j＝5.5hz,2h),2.61(brs,2h),2.34(brs,5h)。
13
c nmr(151mhz,chloroform-d)δ(ppm)：168.99,166.21,162.73,158.40,153.72,152.60,152.06,134.63,134.20,128.89,128.60,127.66,126.34,123.79,121.99,121.84,118.43,116.02,108.32(2c),103.72,56.40,55.43,54.81,47.04,45.89,41.58。ms[m+h]
+
471.20。
[0153]
实施例22：7-甲氧基-4-((5-(吗啉-4-羰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物22)
[0154]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)：9.33(s,1h),8.67(d,j＝5.3hz,1h),8.00(d,j＝9.1hz,1h),7.87(d,j＝8.4hz,2h),7.68(d,j＝2.5hz,1h),7.59(d,j＝5.0hz,1h),7.55(d,j＝8.3hz,1h),7.47(s,1h),7.41(dd,j＝9.0,2.4hz,1h),6.52(d,j＝5.1hz,1h),6.47(s,1h),4.14(s,3h),4.09
–
3.92(m,1h),3.87(t,j＝5.4hz,2h),3.59(dddd,j＝17.5,11.2,8.4,3.1hz,2h),3.48(s,1h),3.38
–
3.24(m,2h)。
13
c nmr(151mhz,chloroform-d)δ
(ppm)：169.12,166.21,162.77,158.47,153.59,152.48,152.09,134.65,133.87,129.02,128.59,127.64,127.54,126.36,123.88,122.10,121.91,118.48,115.99,108.24,103.70,67.15,67.02,56.42,47.75,42.31。ms[m+h]
+
458.17。
[0155]
实施例23：4-((6-((3,5-二甲氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物23)
[0156]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：10.60(s,1h),8.74(s,1h),8.71(d,j＝5.2hz,1h),8.35(d,j＝9.2hz,1h),8.11(d,j＝8.2hz,1h),7.96(d,j＝2.6hz,1h),7.91(s,1h),7.82
–
7.75(m,2h),7.68(dd,j＝8.3,7.1hz,1h),7.61(dd,j＝9.2,2.6hz,1h),7.57(s,1h),7.12(d,j＝2.3hz,2h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),6.31(t,j＝2.3hz,1h),4.06(s,3h),3.75(s,3h)。
13
cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)：167.05,165.74,161.18,160.40(2c),158.07,153.23,151.60,151.55,140.85,134.64,134.24,129.81,128.09,127.46,126.06,125.38,125.23,124.60,121.46,117.73,114.61,107.81,103.83,98.14(2c),95.70,56.14,55.05(2c)。ms[m+h]
+
524.17。
[0157]
实施例24：7-甲氧基-4-((5-(萘-2-基氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物24)
[0158]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：10.89(s,1h),8.73(d,j＝14.0hz,1h),8.60(s,1h),8.43(d,j＝9.2hz,1h),8.14(d,j＝8.0hz,1h),7.99(s,1h),7.91(dd,j＝16.8,9.9hz,5h),7.81(s,2h),7.72(s,1h),7.62(d,j＝8.6hz,1h),7.57(s,1h),7.52(s,1h),7.46(s,1h),6.65(s,1h),4.06(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm)：167.81,166.29,161.73,158.64,153.83,152.24,152.19,137.33,135.30,134.87,133.89,130.55,130.42,128.85,128.71,128.09,127.99,127.96,126.98,126.69,125.98,125.79,125.33,125.20,122.09,121.00,118.31,116.61,115.21,108.43,104.44,56.70。ms[m+h]
+
514.18。
[0159]
实施例25：7-甲氧基-4-((5-((3-甲氧基苯基)(甲基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物25)
[0160]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)：8.74(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.17(d,j＝9.0hz,1h),7.90(s,1h),7.79(d,j＝8.9hz,3h),7.55(d,j＝10.7hz,2h),7.38(s,2h),7.03(s,1h),6.77(s,2h),6.63(s,1h),6.52(s,1h),4.05(s,3h),3.51(s,6h)。
13
c nmr(101mhz,dmso-d6)δ(ppm)：169.40,166.33,161.75,159.77,158.65,153.83,152.27,151.99,145.33,135.55,134.31,130.04,128.92,128.81,127.93,126.38,126.18,125.80,125.56,125.22,121.79,119.35,118.17,115.23,113.08,108.51,104.29,56.74,55.54,37.48。ms[m+h]
+
508.18。
[0161]
实施例26：7-甲氧基-4-((5-(噁唑-2-基氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物26)
[0162]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.85(s,1h),8.73(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.40(d,j＝8.9hz,1h),8.14(d,j＝8.4hz,1h),8.02
–
7.95(m,2h),7.90(s,1h),7.87(s,
1h),7.78(s,1h),7.70
–
7.60(m,2h),7.56(s,1h),7.21(s,1h),6.63(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h)。
13
cnmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):167.00,166.31,161.65,158.61,153.87,153.52,152.27,152.23,137.21,134.88,132.80,131.34,128.43,128.01,127.42,126.84,126.50,125.77,125.16,122.33,118.38,115.19,108.47,104.47,56.69。ms[m+h]
+
455.14。
[0163]
实施例27：7-甲氧基-4-((5-((2-甲氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物27)
[0164]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.73(s,1h),8.75(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.47(d,j＝9.2hz,1h),8.10(d,j＝8.3hz,1h),7.95(d,j＝2.6hz,1h),7.90(d,j＝6.8hz,2h),7.84
–
7.77(m,2h),7.67(t,j＝7.6hz,1h),7.61(dd,j＝9.2,2.5hz,1h),7.56(s,1h),7.27
–
7.18(m,1h),7.12(d,j＝8.2hz,1h),7.02(t,j＝7.5hz,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),3.85(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):167.53,166.28,161.79,158.64,153.83,152.19,152.14,152.10,135.24,134.85,130.32,128.88,128.23,127.29,126.65,126.46,125.85,125.74,125.22,124.89,121.94,120.73,118.27,115.20,112.05,108.43,104.38,56.69,56.23。ms[m+h]
+
494.18。
[0165]
实施例28：7-甲氧基-4-((5-((5-甲基异恶唑-3-基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物28)
[0166]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.60(s,1h),8.74(s,1h),8.70(d,j＝5.2hz,1h),8.37(d,j＝9.2hz,1h),8.16
–
8.09(m,1h),7.97(d,j＝2.5hz,1h),7.90(s,1h),7.83(dd,j＝7.2,1.2hz,1h),7.79(s,1h),7.66(dd,j＝8.3,7.1hz,1h),7.61(dd,j＝9.3,2.5hz,1h),7.56(s,1h),6.86(s,1h),6.62(d,j＝5.2hz,1h),4.05(s,3h),2.45(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):170.12,167.45,166.29,161.68,158.83,158.61,153.85,152.24,152.21,134.83,133.38,131.07,128.51,128.05,126.70,126.51,125.76,125.18,122.22,118.37,115.19,108.48,104.43,97.29,56.69,12.63。ms[m+h]
+
469.15。
[0167]
实施例29：7-甲氧基-4-((5-((3-甲基异恶唑-5-基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物29)
[0168]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.25(s,1h),8.75(s,1h),8.72(d,j＝5.2hz,1h),8.40(d,j＝9.2hz,1h),8.17(d,j＝8.3hz,1h),7.98(d,j＝2.5hz,1h),7.90(d,j＝6.0hz,1h),7.77(s,1h),7.70(t,j＝7.7hz,1h),7.64(dd,j＝9.3,2.6hz,1h),7.58(s,1h),6.65(d,j＝5.3hz,1h),6.45(s,1h),4.07(s,3h),2.28(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.72,165.07,161.16,161.06,160.66,158.05,153.29,151.76,151.67,134.31,131.95,130.91,127.84,127.46,126.44,125.92,125.22,124.59,121.83,117.82,114.63,107.91,103.93,89.61,56.13,11.32。ms[m+h]
+
469.15。
[0169]
实施例30：7-甲氧基-4-((5-(3-(3-甲氧基苯基)脲基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物30)
[0170]
方法参照实施例1，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比20:1)，黄色固体，0.06g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.10(s,1h),8.87(s,1h),8.78(s,1h),8.71(d,j＝
5.2hz,1h),8.31(d,j＝9.2hz,1h),8.05(dd,j＝7.6,1.1hz,1h),7.92
–
7.86(m,2h),7.78(s,1h),7.69(d,j＝8.2hz,1h),7.62(dd,j＝9.2,2.5hz,1h),7.59
–
7.53(m,2h),7.27(t,j＝2.2hz,1h),7.23(t,j＝8.1hz,1h),7.01(dt,j＝8.1,1.0hz,1h),6.64(d,j＝5.3hz,1h),6.60(ddd,j＝8.3,2.5,0.9hz,1h),4.08(s,3h),3.77(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.75,161.32,159.69,158.05,153.29,152.78,151.63,151.39,140.88,134.81,134.61,129.57,127.06,125.10,124.72,124.49,123.89,122.67,120.12,117.92,117.37,114.64,110.41,107.86,107.29,103.84,103.68,56.13,54.86。ms[m+h]
+
509.16。
[0171]
实施例31：4-((6-((环丙基甲基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物31)
[0172]
31.1 6-((6-氨基甲酰基-7-甲氧基喹啉-4-基)氧基)-2-萘甲酸(10)
[0173]
将6-羟基-2-萘甲酸(1.91g,10.17mmol)溶于二甲亚砜(35ml)，加入碳酸铯(8.26g,25.42mmol)，室温搅拌10min后，加入化合物5(2.00g,8.5mmol)，加热至95℃反应10h。tlc监测化合物5反应完全，将反应液自然冷却至室温后，将反应用水稀释后用乙酸乙酯萃取，收集水层，用1n hcl调ph至6.5，有大量固体产生，抽滤，滤饼用水洗3次，风干得产物粗品，粗品用meoh重结晶得目标产物，橙黄色固体，2.91g，产率88.5％。ms 1
h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):13.13(s,1h),8.69
–
8.62(m,3h),8.27(d,j＝8.9hz,1h),7.98(s,2h),7.86(t,j＝3.1hz,2h),7.74(s,1h),7.55(dd,j＝8.8,2.3hz,1h),7.51(s,1h),6.61(d,j＝5.2hz,1h),4.00(s,3h)。[m+h]
+
388.20。
[0174]
31.2 4-((6-((环丙基甲基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺
[0175]
将化合物10(0.30g,0.77mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入hatu(0.59g,1.55mmol)和dipea(0.25g,1.93mmol)，室温反应30min后，加入环丙基甲基胺(0.07g,0.93mmol)，继续室温反应4h。tlc监测化合物10反应完全，反应中有固体产生，抽滤，滤饼风干后用柱层析(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)纯化得目标产物，白色固体，0.11g，产率32.1％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):8.75(t,j＝5.7hz,1h),8.68(s,1h),8.66(d,j＝5.2hz,1h),8.51(d,j＝1.2hz,1h),8.17(d,j＝9.0hz,1h),7.96(d,j＝1.2hz,2h),7.85(dd,j＝5.3,2.3hz,2h),7.74(d,j＝2.4hz,1h),7.54(d,j＝2.4hz,1h),7.52(d,j＝2.2hz,1h),6.61(d,j＝5.2hz,1h),4.01(s,3h),3.22
–
3.12(m,2h),1.10
–
0.99(m,1h),0.47
–
0.38(m,2h),0.27
–
0.19(m,2h).
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):166.43,166.27,161.72,158.67,153.77,153.25,152.06,135.61,132.39,132.26,130.57,128.01,127.94,125.82,125.66,125.21,121.71,117.51,115.23,108.32,104.61,56.70,44.20,11.52,3.87(2c)。ms[m+h]
+
442.1760。
[0176]
实施例32：7-甲氧基-4-((6-((5-甲基噻唑-2-基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物32)
[0177]
方法参照实施例31，经柱色谱分离(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)，黄色固体，0.11g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.60(s,1h),8.80(d,j＝1.8hz,1h),8.68(s,1h),8.66(d,j＝5.2hz,1h),8.21(d,j＝9.0hz,1h),8.12(dd,j＝8.6,1.8hz,1h),8.01(d,j＝8.7hz,1h),7.88(d,j＝2.4hz,1h),7.86
–
7.84(m,1h),7.74(s,1h),7.57(dd,j＝8.9,2.4hz,1h),7.52(s,1h),7.22(q,j＝1.2hz,1h),6.63(d,j＝5.3hz,1h),4.01(s,3h),2.36(d,j＝1.2hz,
3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.71,164.79,160.91,158.06,153.36,153.31,151.69(2c),135.69,132.08,129.82,129.42,129.02,127.75,126.39,125.24,124.62,121.42,116.95(2c),114.69,107.92(2c),104.21,56.13,11.06。ms[m+h]
+
485.12。
[0178]
实施例33：7-甲氧基-4-((6-((3-甲氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物33)
[0179]
方法参照实施例31，经柱色谱分离(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)，黄色固体，0.11g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.39(s,1h),8.71
–
8.67(m,2h),8.64(d,j＝1.4hz,1h),8.24(d,j＝8.9hz,1h),8.04(d,j＝1.7hz,2h),7.88(d,j＝2.5hz,1h),7.85(s,1h),7.72(s,1h),7.57(dd,j＝8.9,2.5hz,1h),7.53(s,1h),7.50(t,j＝2.2hz,1h),7.41(dd,j＝8.1,1.8hz,1h),7.25(t,j＝8.1hz,1h),6.68(dd,j＝9.0,2.5hz,1h),6.65(d,j＝5.2hz,1h),4.02(s,3h),3.75(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.73,165.36,160.96,159.41,158.07,153.32,153.05,151.71,140.34,135.31,132.05,131.84,129.89,129.37,127.98,127.64,125.33,125.23,124.65,121.31,116.91,114.73,112.50,109.15,107.93,105.98,104.20,56.13,54.95。ms[m+h]
+
494.16.
[0180]
实施例34：4-((6-((4-乙氧基苯基)氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物34)
[0181]
方法参照实施例31，经柱色谱分离(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)，黄色固体，0.11g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.34(s,1h),8.75
–
8.69(m,2h),8.66(s,1h),8.27(d,j＝9.0hz,1h),8.12
–
8.02(m,2h),7.92(d,j＝2.5hz,1h),7.89(s,1h),7.78(s,1h),7.75
–
7.70(m,2h),7.60(dd,j＝8.9,2.5hz,1h),7.57(s,1h),6.98
–
6.91(m,2h),6.68(d,j＝5.2hz,1h),4.08
–
3.98(m,3h),1.34(t,j＝7.0hz,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.70,164.85,161.12,158.13,154.78,153.19,152.89,151.48,135.19,132.20,132.09,131.80,129.94,127.80,127.58,125.31,124.65,121.89(2c),121.25,116.95,114.69,114.21(2c),107.74(2c),104.14,63.00,56.14,14.63。ms[m+h]
+
508.18。
[0182]
实施例35：7-甲氧基-4-((6-(噻唑-2-基氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物35)
[0183]
方法参照实施例31，经柱色谱分离(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)，黄色固体，0.11g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):12.79(s,1h),8.88(d,j＝1.8hz,1h),8.72(d,j＝6.7hz,2h),8.27(d,j＝8.9hz,1h),8.19(dd,j＝8.6,1.8hz,1h),8.08(d,j＝8.7hz,1h),7.93(d,j＝2.5hz,1h),7.90(s,1h),7.78(s,1h),7.65
–
7.59(m,2h),7.57(s,1h),7.32(d,j＝3.6hz,1h),6.69(d,j＝5.2hz,1h),4.06(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):165.72,164.94,160.90,158.76,158.06,153.42,153.32,151.70,135.74,132.11,129.81,129.26,129.09,127.80,125.24,125.21,124.62,121.45,116.95,114.70,113.81,107.93(2c),104.23,56.14.ms[m+h]
+
471.11。
[0184]
实施例36：4-((6-(异恶唑-3-基氨基甲酰基)萘-2-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(化合物36)
[0185]
方法参照实施例31，经柱色谱分离(meoh/ch2cl2,1/80to 1/40)，黄色固体，0.11g。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.67(s,1h),8.90(s,1h),8.80(s,1h),8.74(d,j＝4.9hz,2h),8.27(d,j＝8.9hz,1h),8.12(d,j＝8.8hz,1h),8.07(d,j＝8.6hz,1h),7.94(d,j＝
2.4hz,1h),7.91(s,1h),7.80(s,1h),7.63(dd,j＝8.8,2.4hz,1h),7.58(s,1h),7.13(s,1h),6.71(d,j＝5.1hz,1h),4.06(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):171.96,165.72,165.25,160.94,160.08,158.07,153.34,153.30,151.65,135.66,132.05,130.16,129.78,128.90,127.74,125.27,124.62,121.42,116.93,114.70,107.88(2c),104.23,99.74,56.14。ms[m+h]
+
455.13。
[0186]
实施例37：7-甲氧基-4-((1-((5-甲基异恶唑-3-基)氨基甲酰)-1h-吲哚-5-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物37)
[0187]
37.1 4-((1h-吲哚-5-基)氧基)-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(13)
[0188]
将5-羟基吲哚(0.29g，2.11mmol)溶于二甲亚砜(7ml)，加入碳酸铯(2.07g，6.36mmol)，室温反应30min后，加入4-氯-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(0.5g，2.11mmol)，升温至90℃反应3h后。tlc监测原料反应完全，冷却至室温，加入100ml水，析出大量固体，抽滤得棕色固体，烘干。棕色固体通过硅胶柱层析(meoh/ch2cl2/et3n＝80/1/0.01)纯化，得目标产物，黄色固体，0.35g，产率49.0％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.32(s,1h),8.76(s,1h),8.60(d,j＝5.3hz,1h),7.82(d,j＝50.0hz,1h),7.53(dt,j＝8.7,0.7hz,1h),7.51(s,1h),7.49
–
7.43(m,2h),7.00(dd,j＝8.7,2.4hz,1h),6.48(ddd,j＝2.9,1.9,0.9hz,1h),6.39(d,j＝5.3hz,1h),4.04(s,3h)。ms[m+h]
+
334.10。
[0189]
37.2 7-甲氧基-4-((1-((5-甲基异恶唑-3-基)氨基甲酰)-1h-吲哚-5-基)氧基)喹啉-6-甲酰胺
[0190]
将化合物13(0.20g，0.60mmol)溶于n,n二甲基甲酰胺(5ml)，冰浴下加入koh(0.05g，0.90mmol)，冰浴反应30min后，加入化合物14(0.20g，0.90mmol)，室温反应4h。tlc监测化合物13反应完全，用乙酸乙酯稀释反应液，再用水萃取，饱和nh4cl水溶液洗一次，饱和nacl水溶液洗一次，收集有机层，无水na2so4干燥后浓缩得粗品，将粗品用meoh/ch2cl2打浆得目标化合物，白色固体，0.12g，产率42.0％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):11.31(s,1h),8.75(s,1h),8.66(d,j＝5.4hz,1h),8.39(d,j＝8.9hz,1h),8.22(d,j＝3.8hz,1h),7.94
–
7.73(m,2h),7.59(d,j＝2.5hz,1h),7.54(s,1h),7.28(dd,j＝9.0,2.5hz,1h),6.81(d,j＝3.7hz,1h),6.73(s,1h),6.49(d,j＝5.3hz,1h),4.05(s,3h),2.45(s,3h)。
13
c nmr(151mhz,dmso-d6)δ(ppm):169.69,165.69,162.55,158.43,158.19,152.84,150.86,148.94(2c),133.20,131.05,126.88,125.14,124.77,117.42,116.80,114.45,112.76,107.27(2c),102.97,96.76,56.13,12.06。ms[m+h]
+
458.13。
[0191]
实施例38：n-苄基-n'-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物38)
[0192]
38.1n-苄基-n'-(4-羟基苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺(20)
[0193]
将1.0g(7.69mmol)1,1-环丙基二羧酸、4.40g edci(23.07mmol)、3.11ghobt(23.07mmol)、dmf(15.0ml)放入茄型瓶中，氮气保护，冰浴条件下搅拌。1h后tlc监测反应完全。然后往茄型瓶中缓慢加入苄胺，加入后继续冰浴3h后tlc监测反应完全。然后往然后往茄型瓶中缓慢加入对羟基苯胺，加入后撤去冰浴，常温下反应5h，tlc监测反应完全。将50.0ml蒸馏水加入到反应液中搅拌30min，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤(10.0ml
×
3)，真空干燥得白色固体后经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比60:1)，得0.59g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),9.34(s,1h),9.21(s,1h),7.65(dd,j＝8.6,1.0hz,
2h),7.44～7.37(m,2h),7.33～7.24(m,2h),7.05(t,j＝7.3hz,1h),6.72～6.64(m,2h),2.63(t,j＝7.9hz,4h),1.91～1.71(m,2h)。esi-ms m/z:311.1[m+h]
+
，333.1[m+na]
+
，643.2[2m+na]
+
。
[0194]
38.2n-苄基-n'-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-1,1-环丙烷二甲酰胺将n-苄基-n'-(4-羟基苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺(20)(0.55g，1.78mmol)、dmf(5.0ml)、碳酸铯(0.62g，1.90mmol)分别加入至茄型瓶(氮气保护)中常温搅拌10min，然后将4-氯-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(5)(0.3g，1.27mmol)加入至茄型瓶中缓慢升温至75℃，恒温反应24h后tlc监测反应完全，将反应液冷却至室温后加入20.0ml蒸馏水，有大量固体析出。抽滤，滤饼用少量水洗涤，真空干燥得到棕色固体。经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.84(s,1h),9.65(s,1h),8.69(s,1h),8.66(d,j＝5.3hz,1h),7.88(s,1h),7.87～7.83(m,2h),7.77(s,1h),7.70(d,j＝1.0hz,1h),7.68(d,j＝0.7hz,1h),7.52(s,1h),7.33(s,1h),7.32(s,1h),7.30～7.25(m,2h),7.11～7.04(m,1h),6.51(d,j＝5.4hz,1h),4.04(s,3h),2.69(t,j＝7.8hz,4h),1.86(dt,j＝15.5,7.8hz,2h)。esi-ms m/z:511.2[m+h]
+
，533.1[m+na]
+
。
[0195]
实施例39：n-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-n'-(4-甲基苯基)-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物39)
[0196]
方法参照实施例38，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.21(s,1h),9.95(s,1h),8.69(s,1h),8.66(d,j＝5.2hz,1h),7.87(s,1h),7.77(t,j＝7.3hz,3h),7.52(s,2h),7.49(s,1h),7.29～7.24(m,2h),7.12(d,j＝8.2hz,2h),6.47(d,j＝5.3hz,1h),4.03(s,3h),3.26(s,3h),2.48(t,j＝7.9hz,4h)。esi-ms m/z:511.2[m+h]
+
，533.1[m+na]
+
。
[0197]
实施例40：n-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-n'-(3，5-二甲基苯基)-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物40)
[0198]
方法参照实施例38，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.52(s,1h),9.34(s,1h),9.21(s,1h),7.65(dd,j＝8.6,1.0hz,2h),7.44～7.37(m,2h),7.33～7.24(m,2h),7.05(t,j＝7.3hz,1h),3.35(s,6h)2.63(t,j＝7.9hz,4h)。esi-ms m/z:325.1[m+h]
+
，347.1[m+na]
+
。
[0199]
实施例41：n-苯基-n'-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物41)
[0200]
方法参照实施例38，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.19(s,1h),10.07(s,1h),8.69(s,1h),8.67(d,j＝5.1hz,1h),7.88(s,1h),7.80(s,1h),7.78(s,2h),7.63(d,j＝8.3hz,2h),7.52(s,1h),7.37～7.21(m,4h),7.07(t,j＝7.4hz,1h),6.48(d,j＝5.2hz,1h),4.04(s,3h),1.48(s,4h)。esi-ms m/z:497.1[m+h]
+
，519.1[m+na]
+
。
[0201]
实施例42：n-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-n'-(3，4-二甲基苯基)-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物42)
[0202]
方法参照实施例38，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.20(s,1h),9.91(s,1h),8.68(s,1h),8.66(d,j＝5.3hz,1h),7.87(s,1h),7.79(s,1h),7.77(s,2h),7.52(s,1h),7.39(s,1h),7.35(d,j＝
8.0hz,1h),7.29～7.27(m,1h),7.25(t,j＝2.7hz,1h),7.06(d,j＝8.3hz,1h),6.47(d,j＝5.2hz,1h),4.03(s,3h),2.19(s,3h),2.17(s,3h),1.48(s,4h)。esi-ms m/z:524.1[m+h]
+
，537.1[m+na]
+
。
[0203]
实施例43：n-[4-[(6-甲酰胺基-7-甲氧基-4-喹啉基)氧基]苯基]-n'-(4-甲氧基苯基)-1,1-环丙烷二甲酰胺(化合物43)
[0204]
方法参照实施例38，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.24(s,1h),9.83(s,1h),8.65(s,1h),8.62(d,j＝5.2hz,1h),7.84(s,1h),7.74(d,j＝8.9hz,3h),7.48(t,j＝4.5hz,3h),7.28～7.17(m,2h),6.90～6.78(m,2h),6.43(d,j＝5.3hz,1h),3.99(s,3h),3.68(s,3h),1.43(s,4h)。esi-ms m/z:527.1[m+h]
+
，549.1[m+na]
+
，1053.3[2m+h]
+
。
[0205]
实施例44：7-甲氧基-4-(4-(3-甲基苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物44)
[0206]
44.1n-(4-羟基苯基)-3-甲基苯甲酰胺(23)的合成
[0207]
将1.0g(7.30mmol)4-氨基苯甲酸(22)、1.67g edci(8.76mmol)、1.17g hobt(8.76mmol)、dmf(10.0ml)放入茄型瓶中，氮气保护，冰浴条件下搅拌。1h后tlc监测反应完全。然后往茄型瓶中加入对氨基苯酚，加入后撤去冰浴，常温下反应5h,tlc监测反应完全。将50.0ml蒸馏水加入到反应液中搅拌30min，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤(10.0ml
×
3)，真空干燥得白色固体0.87g。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):9.92(s,1h),9.22(s,1h),7.84(d,j＝8.2hz,2h),7.55～7.49(m,2h),7.31(d,j＝8.0hz,2h),6.77～6.69(m,2h),2.38(s,3h)。esi-ms m/z:228.1[m+h]
+
，250.1[m+na]
+
。
[0208]
44.2 7-甲氧基-4-(4-(3-甲基苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺
[0209]
将n-(4-羟基苯基)-3-甲基苯甲酰胺(23)0.30g(1.32mmol)、dmf(5.0ml)、碳酸铯0.56g(1.71mmol)分别加入至茄型瓶(氮气保护)中常温搅拌10min，然后将4-氯-7-甲氧基喹啉-6-甲酰胺(5)(0.3g，1.27mmol)加入至茄型瓶中缓慢升温至75℃，恒温反应24h后tlc监测反应完全，将反应液冷却至室温后加入20.0ml蒸馏水，有大量固体析出。抽滤，滤饼用少量水洗涤，真空干燥得到棕色固体。经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.36(s,1h),8.70(s,1h),8.67(d,j＝5.3hz,1h),7.97～7.92(m,2h),7.90(d,j＝8.2hz,3h),7.78(s,1h),7.53(s,1h),7.36(d,j＝8.4hz,2h),7.34～7.28(m,2h),6.51(d,j＝5.2hz,1h),4.04(s,3h),2.40(s,3h)。esi-ms m/z:428.1[m+h]
+
，450.1[m+na]
+
。
[0210]
实施例45：7-甲氧基-4-(4-(4-甲基苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物45)
[0211]
方法参照实施例44，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.38(s,1h),8.71(s,1h),8.68(d,j＝5.2hz,1h),7.96～7.93(m,2h),7.86(s,1h),7.79(s,1h),7.77(dd,j＝8.2,2.4hz,1h),7.74(s,1h),7.53(s,1h),7.43(dd,j＝4.6,2.3hz,2h),7.33～7.30(m,2h),6.52(d,j＝5.2hz,1h),4.04(s,3h),2.42(s,3h)。esi-ms m/z:428.1[m+h]
+
，450.1[m+na]
+
。
[0212]
实施例46：7-甲氧基-4-(4-(4-硝基苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物46)
[0213]
方法参照实施例44，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.77(s,1h),8.72
–
8.67(m,2h),8.41(d,j＝9.5hz,2h),8.22(d,j＝7.9hz,2h),7.95(d,j＝9.0hz,2h),7.90(s,1h),7.79(s,1h),7.53(s,1h),
7.36(d,j＝8.2hz,2h),6.52(d,j＝5.0hz,1h),4.04(s,3h)。esi-ms m/z:459.1[m+h]
+
，481.1[m+na]
+
。
[0214]
实施例47：7-甲氧基-4-(4-(4-氯苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物47)
[0215]
方法参照实施例44，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.51(s,1h),8.70(s,1h),8.68(d,j＝5.3hz,1h),8.04～7.99(m,2h),7.96～7.92(m,2h),7.89(s,1h),7.78(s,1h),7.67～7.65(m,1h),7.64～7.62(m,1h),7.53(s,1h),7.36～7.33(m,1h),7.33～7.30(m,1h),6.51(d,j＝5.2hz,1h),4.04(s,3h)。esi-ms m/z:448.1[m+h]
+
，470.0[m+na]
+
。
[0216]
实施例48：7-甲氧基-4-(4-(4-氯-3-氟苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物48)
[0217]
方法参照实施例44，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.54(s,1h),8.70(s,1h),8.68(d,j＝5.3hz,1h),8.23(dd,j＝7.1,2.3hz,1h),8.02(ddd,j＝8.7,4.8,2.3hz,1h),7.93(d,j＝2.2hz,1h),7.92(d,j＝2.2hz,1h),7.89(s,1h),7.78(s,1h),7.67～7.60(m,1h),7.53(s,1h),7.35(d,j＝2.2hz,1h),7.33(d,j＝2.2hz,1h),6.52(d,j＝5.2hz,1h),4.04(s,3h)。esi-ms m/z:465.1[m+h]
+
，487.1[m+na]
+
。
[0218]
实施例49：7-甲氧基-4-(4-(4-氟-3-溴苯甲酰基)苯氧基)喹啉-6-甲酰胺(化合物49)
[0219]
方法参照实施例44，经柱色谱分离(二氯甲烷-甲醇，体积比40:1)，得0.09g白色固体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm):10.49(s,1h),10.43(d,j＝8.8hz,1h),8.66(s,1h),8.64(d,j＝5.2hz,1h),8.30(dd,j＝6.6,2.2hz,1h),7.90(d,j＝4.2hz,1h),7.88(d,j＝4.2hz,1h),7.84(s,1h),7.80(d,j＝9.0hz,1h),7.73(s,1h),7.49(s,1h),7.31～7.27(m,2h),6.48(dt,j＝5.2,1.1hz,1h),4.00(s,3h)。esi-ms m/z:511.0[m+h]
+
，433.0[m+na]
+
。
[0220]
实施例50：化合物对vegfr-2激酶活性的抑制能力
[0221]
测定化合物对酪氨酸激酶vegfr的抑制活性
[0222]
1、实验材料和仪器
[0223][0224]
2、实验步骤
[0225]
1)化合物储液的制备
[0226]
所有化合物溶于dmso，制备成适当浓度的储液。三个月内使用的化合物室温储存于干燥器内，其它的可以在-20℃长期储存。
[0227]
2)工作液的制备
[0228]
化合物储液用dmso稀释，进行3倍梯度稀释，12个浓度点。起始浓度依据化合物的初筛活性确定，0.05mm，或1mm起等。
[0229]
3)制备1x kinase buffer
[0230]
1个体积的5x enzymatic buffer(为htrf kinease-tk kit中的试剂)加4个体积的蒸馏水配制成1x kinase buffer；
[0231]
配置后的1x kinase buffer中含有：5mm mgcl2；1mm dtt；1mm mncl2；
[0232]
4)激酶vegfr-2的滴定(100μm atp，1μm tk-substrate-biotin，均为htrf kinease-tk kit中的试剂)
[0233]
用1x kinase buffer制备5ng/μl的5x vegfr-2。
[0234]
用1x kinase buffer对5ng/μl的5x vegfr-2进行2倍梯度稀释,稀释8次得8个浓度点。
[0235]
将梯度稀释的vegfr-2加入384实验板中(784075,greiner)，2μl/孔。每孔再加4μl 1x kinase buffer，1000g离心30s。
[0236]
用1x kinase buffer制备5μm的5x tk-substrate-biotin和500μm的5x atp。上述384实验板每孔加2μl的5x tk-substrate-biotin和2μl的5x atp。
[0237]
激酶vegfr-2的最终起始浓度为1ng/μl；tk-substrate-biotin和atp的浓度分别为1μm和100μm，1000g离心30s，封板，室温放置40min。
[0238]
用htrf detection buffer(为htrf kinease-tk kit中的试剂)制备250nm的4xsa-xl 665。上述的384实验板每孔加制备的5μl sa-xl665和5μl tk-antibody-cryptate(为htrf kinease-tk kit中的试剂)。1000g离心30s,室温放置60min。
[0239]
envision 2104plate reader读取荧光值。激发光：320nm；发射光：620nm(cryptate)和665nm(xl665)。
[0240]
5)atp km值的确定
[0241]
用1x kinase buffer制备0.156ng/μl的5x vegfr-2。384实验板中每孔加2μl的5x vegfr-2。384实验板中每孔再加4μl 1x kinase buffer，1000g离心30s。
[0242]
用1x kinase buffer制备5μm的5x tk-substrate-biotin。用1x kinase buffer对atp进行3倍梯度稀释，起始浓度300μm,稀释12次得12个浓度点。
[0243]
前述的384实验板每孔加2μl的5x tk-substrate-biotin和2μl梯度稀释的atp，1000g离心30s，封板，室温放置40min。
[0244]
用htrf detection buffer制备250nm的4x sa-xl 665。前述的384实验板每孔加5μl的sa-xl 665和5μl的tk-antibody-cryptate。1000g离心30s，室温放置60min。
[0245]
envision 2104plate reader读取荧光值。激发光：320nm；发射光：620nm(cryptate)和665nm(xl665)。
[0246]
6)化合物的筛选
[0247]
用echo550转移步骤2)中制备的10nl化合物稀释液到384实验板中(784075,greiner)，1000g离心1min，封板。用1x kinase buffer制备0.156ng/μl的5x vegfr-2，将5x vegfr-2到上面的384孔实验板中，2μl/well，1000g离心30s，室温放置10min。用1x kinase buffer制备5μm的5x tk-substrate-biotin和500μm的5xatp。加tk-substrate-biotin和atp到前述的384孔实验板中，每孔各2μl，1000g离心30s，封板，室温放置40min。
[0248]
用htrf detection buffer制备250nm的4x sa-xl 665。前述的384实验板每孔加5μl的sa-xl665和5μl的tk-antibody-cryptate。1000g离心30s，室温放置60min.
[0249]
envision 2104plate reader读取荧光值。激发光：320nm；发射光：620nm(cryptate)和665nm(xl665)。
[0250]
7)数据分析
[0251]
a.计算每孔665/620的比值；
[0252]
b.计算抑制百分比：
[0253]
抑制百分比＝1-100％
×
(signal
cmpd-signal
ave_pc
)/(signal
ave_vc-signal
ave_pc
).
[0254]
其中，signal
cmpd
表示实验孔的665/620比值；signal
ave_pc
表示空白孔的665/620比值(不含细胞和化合物)；signal
ave_vc
表示对照孔的665/620比值(不含化合物)；
[0255]
c.绘制曲线和计算化合物的ic
50
；
[0256]
用graphpad 5.0通过非线性回归(剂量响应-可变斜率)的方法，对抑制百分比和化合物浓度的对数的关系进行拟合。
[0257]
y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic
50-x)*hill slope))
[0258]
y为抑制百分比，x为化合物浓度的对数值，bottom为最大抑制百分比，top为最小抑制百分比，hillslope为取现斜率系数。
[0259]
8)试验结果
[0260]
htrf实验结果(表1)显示47个化合物对vegfr2的抑制活性，其中28个化合物ic
50
值小于10nm，19个化合物酶抑制活性优于阳性对照lenvatinib，其中化合物6，16，26，28酶抑制活性超过lenvatinib的4倍。
[0261]
表1化合物的vegfr2酶抑制活性(ic
50
值)
[0262][0263]
实施例51：化合物对其他酪氨酸激酶的抑制
[0264]
参照实施例50方法，测定化合物对其他酪氨酸激酶的抑制活性，包括kit，fgfr1，fgfr2，fgfr3，flt1，pdgfβ，met，egfr，flt4，pdgfα，ret。
[0265]
1、实验材料和仪器
[0266][0267][0268]
2、试验结果如表2所示。
[0269]
表2.受试化合物对kit，fgfr1等酪氨酸激酶抑制的ic
50
(μm)
[0270][0271][0272]
注：编号为实施例号。bibf-1120，xl-184，aee787，lenvatinib(乐伐替尼)为阳性对照药。
[0273]
实施例52：化合物抗hepg2、a549和huvecs细胞增殖活性评价
[0274]
本实施例中的细胞模型选取人肺癌a549、人肝癌hepg2和人脐静脉血管内皮细胞huvecs，基于vegfr2酶抑制活性评价结果，测定本发明的部分化合物对a549、hepg2和huvecs细胞的增殖抑制活性。
[0275]
1、实验材料和仪器
[0276][0277][0278]
2、实验步骤
[0279]
(1)溶液的配置
[0280]
①
将筛选出的化合物分别溶于dmso，制备成10mm的储液。三个月内使用的化合物室温储存于干燥器内，其它的可以在-20℃长期储存。
[0281]
②
将上述化合物储液及阳性参比化合物lenvatinib都用dmso稀释，起始浓度10μm，在a549、hepg2、huvecs细胞实验中，进行2倍梯度稀释，8个浓度点，最低为0.078μm。振荡器上震荡5min。
[0282]
(2)细胞加药
[0283]
①
处于对数生长期的a549、hepg2、huvecs细胞种于96孔板中，每孔3000-4000细胞量，将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃、5％co2的条件下)。
[0284]
②
更换孔板中的培养基，向培养板加入100μl相应浓度的化合物及阳性对照。
[0285]
③
将培养板在培养箱孵育72小时，向每孔加入10μl cck-8溶液，再将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
[0286]
④
用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
[0287]
(3)数据处理
[0288]
①
计算抑制百分比：
[0289]
抑制百分比＝1-100％
×
(signal
cmpd-signal
ave_pc
)/(signal
ave_vc-signal
ave_pc
).
[0290]
其中，signal
cmpd
表示实验孔吸光度；signal
ave_pc
表示空白孔吸光度(不含细胞和化合物)；signal
ave_vc
表示对照孔吸光度(不含化合物)；
[0291]
②
计算化合物的ic
50
和plot效应剂量曲线：
[0292]
使用graphpad 6.0，通过将抑制百分比和化合物浓度的对数拟合为非线性回归(剂量响应-可变斜率)来计算ic
50
值。
[0293]
y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic
50-x)*hillslope))
[0294]
y为抑制百分比，x为化合物浓度的对数值，bottom为最大抑制百分比，top为最小抑制百分比，hillslope为取现斜率系数。
[0295]
3、实验结果
[0296]
上述化合物及阳性参比化合物lenvatinib对a549、hepg2、huvecs细胞的测试结果表3所示：在a549细胞系中，化合物普遍具有较好的抗增殖活性，30个化合物的抗a549细胞增殖活性优于阳性对照药lenvatinib，其中化合物1、10、13、27、44的活性超过lenvatinib的5倍。在hepg2细胞系中，27个化合物的抗a549细胞增殖活性优于阳性对照药lenvatinib，其中化合物1、2、3、5、8、10、12、14、23、39、45、46、49的活性超过lenvatinib的10倍。在huvecs中，7个化合物的抗huvecs增殖活性优于lenvatinib。
[0297]
表3.化合物抗a549、hepg2、huvecs细胞抗增殖活性(ic
50
值)
[0298]
[0299][0300]
nd：not detected。化合物10μm浓度下抑制率＜50％的未拟合出ic
50
值。
[0301]
实施例53：化合物的抗多种肿瘤细胞增殖活性评价
[0302]
参照实施例52方法，测定化合物对多种肿瘤细胞的抑制活性，包括人肺癌(ebc-1、nci-h1975)，人肝癌(smmc-7721、plcprf5)，人乳腺癌(mcf7、zr75-1、hs578t、mda-mb-231、hcc-38)，人卵巢癌(a2780、skov3)，人肾癌786-o，人结肠直肠癌(ht-29、nci-h23、hct-116)，人胃癌hs746t和人宫颈癌hela细胞。
[0303]
1、实验材料和仪器
[0304]
[0305][0306]
2、试验结果如表4所示：5个化合物对所测试的8类肿瘤细胞均具有较好的抗增殖活性，其中，化合物12和45对17种肿瘤细胞的抗增殖活性均优于lenvatinib。
[0307]
表4.优选化合物对多种肿瘤细胞的抗增殖活性(ic
50
值)
[0308]
[0309][0310]
nd：not detected。化合物最高浓度27μm下抑制率＜50％的未拟合出ic
50
值。
[0311]
实施例54：化合物在体外的抗新生血管形成活性
[0312]
本实施例中的细胞模型选取huvecs，测定本发明的部分化合物对huvecs细胞新生血管的抑制活性。
[0313]
1、实验材料和仪器
[0314][0315]
2、实验步骤
[0316]
(1)准备基质胶
[0317]
①
实验前一天将matrigengel置于冰盒中，放入4℃冰箱，使胶能过夜缓慢融化。
[0318]
②
开始实验前，将matrigengel始终保持放在冰盒中。
[0319]
③
冰上操作。matrigengel用预冷枪头混匀。
[0320]
(2)铺基质胶
[0321]
提前将96孔板和枪头预冷，准备两个预冷1.5ml离心管用于稀释matrigengel。按照1:1的比例，用基础dmem培养基稀释matrigengel后，于每孔中加入50μl matrigengel，避免产生气泡。在37℃培养箱中放置45min-1h。
[0322]
(3)铺细胞及溶液的配置、加药
[0323]
①
当huvec细胞长满70～80％时，消化下来，并用含10％fbs的dmem重悬，计数，使每孔加入50μl重悬液，浓度为30000个细胞/孔，重复三孔。
[0324]
②
将化合物12、28分别溶于dmso，制备成10mm的储液。三个月内使用的化合物室温
储存于干燥器内，其它的可以在-20℃长期储存。
[0325]
③
将上述化合物储液及阳性参比化合物lenvatinib都用dmso稀释，设置3个浓度点，分别为0.1、1和10μm。振荡器上震荡5min。37℃培养箱孵育，四小时后可见血管形成，并采集图像。
[0326]
3、实验结果
[0327]
以受试化合物浓度的对数为横坐标，血管生成数量为纵坐标绘制剂量效应曲线，如图1显示：上述化合物及阳性参比化合物lenvatinib均能显著抑制huvecs细胞体外血管形成，其中同等剂量下，化合物12和28的抑制活性显著优于lenvatinib。
[0328]
实施例55：化合物在体内的抗人肝癌hepg2裸鼠移植肿瘤活性
[0329]
本实施例中细胞模型选取肝癌hepg2细胞株，测定化合物对肿瘤细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用。评价方法和结果如下文所述。
[0330]
1.实验材料和仪器
[0331][0332]
2.肿瘤模型的建立
[0333]
将人肝癌细胞hepg2(来源于atcc)用含10％胎牛血清的高糖dmem于37℃、5％co2培养箱中常规培养，体外传三代后，待细胞生长至80％以上且融合率达到所需量时，消化收集细胞，细胞经过pbs洗涤后计数，调整细胞浓度至约5x107个/ml置于4ml离心管中置冰上备用。
[0334]
选雌性4～5周龄的balb/c裸鼠，皮下异位接种人肝癌细胞系hepg2肿瘤细胞。抓取小鼠，使其侧位，用75％酒精消毒前肢腋部，用1ml注射器吸取100μl细胞悬液注射至腋部皮下，即5x106个细胞/只/100μl。
[0335]
3.实验动物分组及给药
[0336]
待肿瘤生长至90～150mm3后，将动物随机分组，每组6只，按不同的给药形式喂养，分别为：
[0337]
模型对照组：每天灌胃相同体积的空白溶媒(dmso：0.5％羧甲基纤维素钠：蒸馏水＝1:1:8)；
[0338]
受试组：每天灌胃30mg/kg(小鼠体重)的化合物12、28溶液。
[0339]
阳性对照组：每天灌胃30mg/kg(小鼠体重)的lenvatinib溶液。
[0340]
给药途经为经口灌胃，给药频率为每天一次，连续给药25天，首次给药当天定义为
试验第1天，两天一次测量并记录小鼠的肿瘤体积变化。肿瘤体积测量使用游标卡尺，测量肿瘤的长径(a)和短径(b)，计算肿瘤体积，肿瘤体积v(mm3)＝a x b^2/2。实验结束后，解剖小鼠，称量肿瘤重量。数据经graphpad prism 6软件进行录入与统计分析。数据均用mean
±
sem(standard error of mean，标准误)表示，采用单因素方差分析(one-way anova)，p≤0.05被认为差异有统计学意义。
[0341]
4.实验结果
[0342]
如图2及表5所示，实验结果表明，化合物12，28显著抑制hepg2移植瘤的生长，同等剂量下，效果优于阳性药lenvatinib。
[0343]
表5.化合物12，28对肝癌hepg2裸鼠异种移植瘤的抑制作用
[0344]
化合物平均体积(mm3)(day 11)抑瘤率tgi(％)control2099.7
±
360.4—lenvatinib367.0
±
61.087.32％12160.5
±
23.898.01％28183.2
±
33.996.74％
[0345]
实施例56：化合物在体内的抗人甲状腺癌8305c移植肿瘤活性
[0346]
本实施例中细胞模型选取人甲状腺癌8305c细胞株，测定化合物对肿瘤细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用。评价方法和结果如下文所述。
[0347]
1.实验材料和仪器
[0348][0349]
2.肿瘤模型的建立
[0350]
将人肝癌细胞hepg2(来源于atcc)用含10％胎牛血清的高糖dmem于37℃、5％co2培养箱中常规培养，体外传三代后，待细胞生长至80％以上且融合率达到所需量时，消化收集细胞，细胞经过pbs洗涤后计数，调整细胞浓度至约5x107个/ml置于4ml离心管中置冰上备用。
[0351]
选雌性4～5周龄的balb/c裸鼠，皮下异位接种人肝癌细胞系hepg2肿瘤细胞。抓取小鼠，使其侧位，用75％酒精消毒前肢腋部，用1ml注射器吸取100μl细胞悬液注射至腋部皮下，即5x 106个细胞/只/100μl。
[0352]
2.实验动物分组及给药
[0353]
待肿瘤生长至90～150mm3后，将动物随机分组，每组6只，按不同的给药形式喂养，
分别为：
[0354]
模型对照组：每天灌胃相同体积的空白溶媒(dmso：0.5％羧甲基纤维素钠：蒸馏水＝1:1:8)；
[0355]
受试组：灌胃60mg/kg(小鼠体重)的化合物12、28溶液，每两天一次。
[0356]
阳性对照组：灌胃60mg/kg(小鼠体重)的lenvatinib溶液，每两天一次。
[0357]
给药途经为经口灌胃，给药频率为每两一次，连续给药20天，首次给药当天定义为试验第1天，两天一次测量并记录小鼠的肿瘤体积变化。肿瘤体积测量使用游标卡尺，测量肿瘤的长径(a)和短径(b)，计算肿瘤体积，肿瘤体积v(mm3)＝a x b^2/2。实验结束后，解剖小鼠，称量肿瘤重量，并选取代表性肿瘤进行血管内皮分化标志物cd31和增殖标志物ki67免疫组化染色。数据经graphpad prism 6软件进行录入与统计分析。数据均用mean
±
sem(standard error of mean，标准误)表示，采用单因素方差分析(one-way anova)，p≤0.05被认为差异有统计学意义。
[0358]
3.实验结果
[0359]
如图3及表6所示，实验结果表明，化合物12、28显著抑制人甲状腺癌8305c移植瘤的生长，同等剂量下，效果优于阳性药lenvatinib。随着给药时间的的延长，化合物12、28组均未出现明显的肿瘤增长的现象。如图4的(a)至(c)免疫组化结果显示，化合物12、28显著抑制人甲状腺癌8305c移植瘤新生血管的生成，等剂量下，效果显著优于阳性药lenvatinib。
[0360]
表6.化合物12、28对人甲状腺癌8305c裸鼠异种移植瘤的抑制作用
[0361]
化合物平均体积(mm3)(day 12)抑瘤率tgi(％)control1637.5
±
387.1—lenvatinib402.6
±
103.083.4％12191.3
±
13.897.9％28195.5
±
41.895.3％
[0362]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，并不用于限制本发明，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本发明的保护范围。

技术特征：
1.式(i)所示的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物；其中，r1和r2各自独立地选自氢，烷基，烷氧基，烷氧羰基，氨基烷酰基，烷氨基羰基；r3选自其中，r4选自-(nr6)
n1-c(o)-(nr7)
n2-,r6和r7各自独立地选自h，烷基；n1和n2各自独立地选自0，1；r5选自取代或未取代的烷基，取代或未取代的芳基，取代或未取代的杂芳基，取代或未取代的杂环基，环烷基，环烯基，h，链烯基，炔基，烷氨基羰基，氨基羰基，氰基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：卤素，烷基，烷氧基，卤代烷基，硝基，环烷基，芳基。2.根据权利要求1所述的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物，其中，r1和r2各自独立地选自氢，c
1-c6直链或支链烷基，c
1-c6烷氧基，c
1-c6烷氧羰基，氨基c
1-c6烷酰基，c
1-c6烷氨基羰基；优选地，r1和r2各自独立地选自氨基c
1-c6烷酰基，c
1-c6烷氧基，c
1-c6烷氨基羰基；更优选地，r1和r2各自独立地选自氨基甲酰基，甲氧基。3.根据权利要求1或2所述的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物，其中，r3选自其中，r4选自-(nr6)
n1-c(o)-(nr7)
n2-,r6和r7各自独立地选自h，c
1-c6烷基；n1和n2各自独立地选自0，1；r5选自取代或未取代的c
1-c6烷基，取代或未取代的5-10元芳基，取代或未取代的5-10元杂芳基，取代或未取代的5-10元杂环基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：卤素，c
1-c6烷基，c
1-c6烷氧基，卤代c
1-c6烷基，硝基，3-6元环烷基，5-10元芳基；优选地，r3选自其中，r4选自-c(o)nh-，-c
(o)-，-c(o)n(ch3)-，-nh(co)nh-，r5选自取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，乙基，取代或未取代的噻唑基，取代或未取代的甲基，取代或未取代的哌嗪基，取代或未取代的吗啉基，取代或未取代的萘基，取代或未取代的噁唑基，取代或未取代的异噁唑基；所述取代为被如下的一个或多个取代基所取代：氟，甲基，氯，甲氧基，三氟甲基，乙氧基，硝基，溴，环丙基，苯基；更优选地，r3选自其中，r4选自-c(o)nh-，-c(o)-，-c(o)n(ch3)-，-nh(co)nh-，r5选自苯基，苯基，乙基，乙基，甲基，甲基，苄基，苄基，进一步优选地，r3选自
4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物，其中，所述化合物选自：
5.制备权利要求1至4中任一项所述的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍
生物、异构体、溶剂化物或多晶型物的方法，其为如下的方法a至方法e中的任意一种方法；所述方法a包括：将1-萘甲酸经过甲磺酸化和碱融反应，得到中间体4；将中间体4与中间体5反应，得到中间体6，然后以hobt、edci为缩合剂，将中间体6与胺反应，得到目标化合物8；或者，以hobt、edci为缩合剂，将中间体4与胺反应，得到中间体7，然后将中间体7与中间体5反应，得到目标化合物8；所述方法b包括：将中间体5与2-羟基-6-萘甲酸反应，得到中间体10；将中间体10与氨基化合物进行酰胺缩合，得到目标化合物11；所述方法c包括：将中间体5与5-羟基吲哚反应，得到中间体13；将中间体13与中间体14反应，得到目标化合物15；
所述方法d包括：将原料中间体16与hobt、edci反应，得到中间体17；将中间体17与nh2r5反应，得到中间体18；将中间体18与4-羟基苯胺反应，得到中间体20；将中间体20与中间体5反应，得到目标化合物21；所述方法e包括：将原料化合物22缩合酰化，得到中间体23；将中间体23与中间体5进行亲核取代反应，得到目标化合物24；上述的r1、r2和r5的定义如权利要求1至4任一项中所述。6.一种药物组合物，包含权利要求1至4中任一项所述的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物；任选地，所述药物组合物还包含药学上可接受的载体或赋形剂。7.根据权利要求6所述的药物组合物，其还包含用于治疗肿瘤的其它药物和/或免疫调节剂(比如选自免疫检查点抑制剂、抗生素类药、烷化剂、抗代谢药、激素药、免疫活性剂、干扰素类活性剂中的一种或多种)。8.权利要求1至4中任一项所述的化合物、其药学上可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物或者权利要求6或7所述的药物组合物在制备用于预防和/或治疗与vegf/vegfr通路有关疾病的药物中的用途。9.根据权利要求8所述的用途，其中，所述与vegf/vegfr通路有关疾病选自动脉粥样硬化、肺纤维化、视网膜病、子宫内膜异位症、关节炎和癌症中的一种或多种。10.根据权利要求9所述的用途，其中，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌(例如小细胞肺癌、非小细胞肺癌)、骨癌、脑癌、直肠癌、食管
癌、肾癌(例如肾实质癌)、舌癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、睾丸癌、黑色素瘤、淋巴瘤、甲状腺瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、肝细胞癌中的一种或多种。

技术总结
本发明属于医药领域，具体涉及式(I)所示的化合物、其药学可接受的盐、前药、稳定同位素衍生物、异构体、溶剂化物或多晶型物；还涉及化合物的制备方法、包含上述化合物的药用组合物、它们的医药用途。本发明化合物可阻断VEGF/VEGFR通路，能够预防或治疗与VEGF/VEGFR通路有关的疾病，例如显著抑制VEGF等蛋白激酶活性，具有抗肿瘤活性。具有抗肿瘤活性。具有抗肿瘤活性。具有抗肿瘤活性。


技术研发人员：郑志兵 李鹏运 李松 刘彦东 肖军海 钟武 李行舟 周辛波 樊士勇 肖典
受保护的技术使用者：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
技术研发日：2023.06.28
技术公布日：2023/9/16