用于治疗呼吸系统疾病的苯并咪唑衍生物的制作方法

用于治疗呼吸系统疾病的苯并咪唑衍生物
1.本发明涉及化合物，包括某些新颖化合物，这些化合物具有作为钙活化氯离子通道(cacc)tmem16a的正调节剂的活性。本发明还涉及制备这些化合物和含有这些化合物的药物组合物的方法，以及这些化合物在治疗由tmem16a调节的疾病和病症，特别是呼吸系统疾病和病症中的用途。


背景技术：

2.人类每天可以吸入多达12,000l的空气，随之而来的是空气传播的病原体(如细菌、病毒和真菌孢子)进入呼吸道的可能性。为了防止这些空气传播的病原体，肺已经进化出先天防御机制，以最大限度地减少呼吸道感染和定植的可能性。一种这样的机制是粘液清除系统，其中分泌的粘液借由该系统通过纤毛连同咳嗽的协调跳动清除被向上推出气道。这种持续的肺部“清洁”不断除去吸入的颗粒和微生物，从而降低感染风险。
3.近年来，越来越明确的是粘液凝胶的水合作用对于清除粘液至关重要(boucher 2007；matsui等人,1998)。在正常、健康的气道中，粘液凝胶通常含有97％的水和3％w/v的固体，在这种情况下，粘液会通过粘膜纤毛作用清除。气道粘膜的水合作用受许多离子通道和转运蛋白的协同活动调节。经由囊性纤维化跨膜传导调节蛋白(cftr)和钙激活氯离子传导(cacc；tmem16a)介导的阴离子(cl-/hco
3-)分泌平衡以及通过上皮na
+
通道(enac)的na
+
吸收决定了气道粘膜的水合状态。当离子通过上皮细胞运输时，水必须渗透性地跟随，因此液体要么被分泌，要么被吸收。
4.在呼吸系统疾病诸如慢性支气管炎和囊性纤维化中，随着水合作用减少和粘液清除率降低，粘液凝胶的固体百分比增加(boucher,2007)。在囊性纤维化中，cftr功能丧失突变减弱了气道分泌液体的能力，固体％可以增加至15％，据信这会导致小气道堵塞和粘液清除失败。增加气道粘液水合作用的策略包括刺激阴离子，并由此刺激液体分泌或抑制na
+
吸收。为此，刺激tmem16a通道的活性将增加阴离子分泌，从而增加气道粘膜中的积液，使粘液水合并增强粘液清除机制。
5.tmem16a，也称为anoctamin-1(ano1)，是钙激活氯离子通道的分子标识(caputo等人,2008；yang等人,2008)。tmem16a通道响应细胞内钙水平的升高而打开，并允许氯离子、碳酸氢根离子和其他阴离子跨细胞膜双向流动。已经提出功能性tmem16a通道调节经上皮离子转运、胃肠蠕动、伤害感受和细胞移行/增殖(pedemonte和galietta，2014)。
6.tmem16a通道由包括肺、肝、肾、胰腺和唾液腺的不同器官的上皮细胞表达。在气道上皮中，tmem16a在产生粘液的杯状细胞、纤毛细胞和粘膜下腺中高水平表达。从生理学方面讲，tmem16a被动员细胞内钙的刺激激活，特别是嘌呤能激动剂(atp、utp)，其由呼吸上皮响应于呼吸和其他机械刺激(诸如咳嗽)引起的周期性剪切应力而释放。除了增加阴离子分泌导致气道水合作用增强外，tmem16a的激活在碳酸氢盐分泌中也起着重要作用。据报道，碳酸氢盐分泌是粘液特性和控制气道腔ph值的重要调节因子，因此可以控制天然抗菌剂(诸如防御素)的活性(pezzulo等人，2012)。
7.通过细胞内钙的升高间接调节tmem16a已经在临床上进行了探索，例如地纽福索
(kunzelmann&mall,2003)。尽管在小型患者队列中观察到了令人鼓舞的初步结果，但这种方法在较大的患者队列中并未带来临床益处(accurso等人2011；kellerman等人2008)。这种缺乏临床效果的原因是阴离子分泌的仅短暂升高，这是由于地纽福索在上皮细胞表面的半衰期短和受体/通路脱敏，以及升高细胞内钙的不良影响，诸如增加杯状细胞释放的粘液(moss,2013)。在低钙升高水平下直接作用于tmem16a以增强通道开放的化合物有望持久增强患者的阴离子分泌和粘液纤毛清除并改善先天防御。由于tmem16a活性与cftr功能无关，tmem16a正向调节剂有可能为所有cf患者和以粘液充血为特征的非cf呼吸系统疾病(包括慢性支气管炎和重度哮喘)提供临床益处。
8.tmem16a调节被认为是一种治疗口干(口干症)的方法，口干症是由sjorgen综合征和放射治疗中的唾液腺功能障碍、干眼症、胆汁淤积和胃肠动力障碍引起的。
9.wo 2019/145726涉及如下化合物，这些化合物是tmem16a正调节剂，并且因此可用于治疗tmem16a的调节在其中起作用的疾病和病症，特别是呼吸系统疾病和病症。本发明人开发了另外的化合物，其是tmem16a的正向调节剂。


技术实现要素：

10.在本发明的第一方面，提供了一种通式(i)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：
[0011][0012]
其中：
[0013]
r1为
[0014]
i.[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9；
[0015]
n为1或2；
[0016]
每个r7独立地为h、苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基；
[0017]
r8为h、任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；
[0018]
r9为c
2-4
烷基；或者
[0019]
ii.ch(r
11
)(r
12
)；
[0020]r11
为h、oh、ch3、ch2oh或与如下定义的r
12
上的取代基组合的基团；
[0021]r12
选自任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的环己基；和苯基或5元或6元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述取代基选自oh、甲氧基、甲基、氟、氯和如下的取代基，该取代基和r
11
与它所连接的原子一起形成与苯基或杂芳基基团r
12
稠合的5元或6元含氧杂环；或
[0022]
iii.任选地被or
15
取代的c
2-6
烷基；
[0023]r15
为甲基或乙基；或者
[0024]
iv.6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其中的任一者任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代；
[0025]
z选自-nh-c(o)-和-c(o)-nh-；
[0026]
y选自键、-ch
2-和-ch(ch3)-；或者y与如下定义的r2组合；并且r2选自：
[0027]
3元至10元碳环体系或6元至10元芳基或5元至10元杂芳基环体系，其中所述芳基、杂芳基或碳环体系任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：氟；氯；cn；硝基；oh；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的c
1-6
烷基；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的o(c
1-6
烷基)；以及任选地被一个或多个选自卤代和oh的取代基取代的ch2nh-c(o)o-c
1-6
烷基；或者
[0028]
y和r2一起形成未取代的c
3-8
烷基基团或基团ch
2-c(r
17
)(r
18
)-ch
2-n(r
19
)r
20
；
[0029]
其中r
17
、r
18
和r
19
中的每一者独立地为h或c
1-4
烷基；并且
[0030]r20
为c
1-4
烷基或c
1-4
卤代烷基；
[0031]
r3、r4和r5各自独立地为h或f；
[0032]
条件是：
[0033]
a.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
11
为h或甲基，并且r
12
为未取代的或被1或2个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代和甲氧基时：
[0034]
i.r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1或2个选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和5元杂芳基环的取代基取代；并且
[0035]
b.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
12
为苯基，r
11
连同r
12
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：
[0036]
i.r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1、2或3个取代基取代，其中所述取代基选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基和c
1-4
烷氧基；并且
[0037]
ii.y和r2不组合形成c
3-10
烷基；
[0038]
c.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
11
为h，并且r
12
为环己基时：
[0039]
r2不为任选地被1、2或3个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代、甲基、甲氧基；未取代的5元至8元杂芳基。
[0040]
任选地，通式(i)的化合物选自：
[0041]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-环己基-乙酰胺(化合物1.1)；
[0042]
2-苄基-n-(环己基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2)；
[0043]
n-(1-金刚烷基甲基)-2-苄基-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.1)；
[0044]
2-苄基-n-[(1-甲基环戊基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.2)；
[0045]
2-苄基-n-[(1r)-1-环己基乙基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.3)；
[0046]
n-(环庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3)；
[0047]
n-(环庚基甲基)-2-[(1-羟基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3.1)；
[0048]
n-(环庚基甲基)-2-(2-羟基-1-苯基-乙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3.2)；
[0049]
n-(环己基甲基)-2-[(3-羟基苯基)甲基]-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.4)；
[0050]
2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5)；
[0051]
n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]-2-(1-甲基环己基)乙酰胺(化合物1.5.1)；
[0052]
2-环庚基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5.2)；
[0053]
2-环己基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5.3)；
[0054]
2-(1-金刚烷基)-n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺(化合物1.5.4)；
[0055]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酰胺(化合物1.6)；
[0056]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7)；
[0057]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(1s)-1-苯基乙基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.1)；
[0058]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(1r)-1-苯基乙基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.2)；
[0059]
n-[[5-[[2-(1-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物1.7.3)；
[0060]
2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(2-甲氧基-3-吡啶基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.4)；
[0061]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.8)；
[0062]
2-叔丁基-n-[(5-氯-2-羟基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.9)；
[0063]
n-[[5-(环庚基甲基氨基甲酰基)-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物1.10)；
[0064]
2-苄基-n-[(1-甲基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.10.1)；2-苄基-n-(环辛基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.10.2)；
[0065]
n-[[1-[2-[(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)氨基]-2-氧代-乙基]环己基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物2.1)；
[0066]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(4,4-二氟环己基)乙酰胺(化合物2.1.1)；
[0067]
n-[1-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2)；
[0068]
n-[(r)-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯化合物2.2.1；
[0069]
n-[(s)-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.2)；
[0070]
n-[[6-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-乙基-氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.3)；
[0071]
n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.4)；
[0072]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-(2-甲氧基乙基)-3h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.2.5)；
[0073]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-(3-甲氧基丙基)-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.2.6)；
[0074]
n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(化合物2.3)；
[0075]
n-(环庚基甲基)-2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物2.4)；
[0076]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[羟基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.5)；
[0077]
2-环己基-n-(2-苯基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺(化合物3.1)；
[0078]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)金刚烷-1-甲酰胺(化合物3.2)；
[0079]
n-(环庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3)；
[0080]
n-(环庚基甲基)-6-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3.1)；
[0081]
n-(环庚基甲基)-4-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3.2)；
[0082]
n-[2-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(化合物3.4)；
[0083]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3,5-二甲基异噁唑-4-基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物3.4.1)；
[0084]
2-苄基-n-(2,2-二甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.5)；
[0085]
2-苄基-n-(1,1,2,2-四甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.5.1)；
[0086]
n-(环庚基甲基)-2-[(5-氟-2-甲氧基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺；
[0087]
n-(环庚基甲基)-2-[(3-氟-2-甲氧基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺；
[0088]
以及它们的对映体、盐和溶剂化物。
[0089]
通式(i)的化合物是tmem16a的调节剂，因此可用于治疗或预防受tmem16a的调节影响的疾病和病症。
附图说明
[0090]
图1是生物实例中使用的全细胞膜片钳(qpatch)tmem16a增效剂测定的示例性迹线，并说明了该测定中使用的方法。
具体实施方式
[0091]
在整个说明书和随后的权利要求中，除非上下文另有要求，否则词语“包括”以及诸如“包含”和“含有”的变体应被理解为暗示包括所陈述的整数、步骤、整数组或步骤组，但
不排除任何其他整数、步骤、整数组或步骤组。
[0092]
在本说明书中，提及的“药物用途”是指用于向人类或动物，特别是人类或哺乳动物，例如家养或家畜哺乳动物施用以治疗或预防疾病或医学病症的用途。术语“药物组合物”是指适用于药物用途的组合物，而“药用的”是指适用于药物组合物的药剂。其他类似术语应相应地解释。
[0093]
在本说明书中，术语“c
1-6”烷基是指具有1至6个碳原子的直链或支链完全饱和烃基团。该术语包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。其他烷基基团，例如c
1-10
烷基如上文所定义，但包含不同数量的碳原子。
[0094]
除非另有说明，否则术语“碳环”和“碳环基”是指包含3至10个环碳原子和任选的一个或多个双键的非芳族烃环体系。碳环基团可以是单环或者可以包含两个或三个可以稠合或桥接的环，其中桥中的碳原子包括在环碳原子的数目中。实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环戊烯基和环己烯基以及桥接系统，诸如双环[1.1.1]戊基、双环-[2.2.1]庚基、双环-[2.2.2]辛基和金刚烷基。
[0095]
在本说明书的上下文中，除非另有说明，否则术语“杂环”和“杂环基”是指包含3至10个环原子的非芳香环体系，包括至少一个选自n、o和s的杂原子。杂环基团可以是单环或者可以包含两个或三个可以稠合或桥接的环，其中桥原子包括在环原子的数目中。实例包括四氢呋喃基、四氢吡喃基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基和硫代吗啉基，以及稠合体系诸如环丙基稠合吡咯烷。提及含氧杂环包括其中仅有的杂原子是氧的环，例如四氢呋喃和四氢吡喃，以及其中存在选自n和s的另外的杂原子的环，或例如吗啉。
[0096]
除非另有说明，否则本说明书上下文中的术语“芳基”和“芳族”是指具有5至14个环碳原子的芳族特征并且包含至多三个环的环体系。当芳基基团包含多于一个环时，并非所有环都必须是完全芳族的。芳族部分的实例是苯、萘、芴、四氢萘、茚满和茚。
[0097]
除非另有说明，否则本说明书上下文中的术语“杂芳基”和“杂芳族”是指这样的环体系，其具有5至14个环原子的芳族特征，其中至少一个环原子是选自n、o和s的杂原子，并且包含至多三个环。当杂芳基基团包含多于一个环时，并非所有环都必须是芳族的。杂芳基基团的实例包括吡啶、嘧啶、吲哚、吲唑、噻吩、苯并噻吩、苯并噁唑、苯并呋喃、二氢苯并呋喃、四氢苯并呋喃、苯并咪唑、苯并咪唑啉、喹啉和吲哚。
[0098]
术语“卤素”是指氟、氯、溴或碘，而术语“卤代”是指氟、氯、溴或碘基团。类似地，“卤离子”是指氟化物、氯化物、溴化物或碘化物。
[0099]
如本文所用的术语“c
1-6
卤代烷基”是指如上文定义的c
1-6
烷基基团，其中一个或多个氢原子被卤代基团替代。可以替代任何数量的氢原子，直至全卤取代。示例包括三氟甲基、氯乙基和1,1-二氟乙基。氟烷基基团是其中卤代为氟的卤代烷基基团。
[0100]
术语“同位素变体”是指同位素标记的化合物，其与式(i)中所述的那些相同，但一个或多个原子被具有原子质量或质量数不同于自然界中最常见的原子质量或质量数的原子替代，或者其中具有在自然界中不太常见的原子质量或质量数的原子的比例已经增加(后一个概念被称为“同位素富集”)。可掺入本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、氟、碘和氯的同位素，诸如2h(氘)、3h、11c、13c、14c、18f、123i或125i(例如3h、11c、14c、18f、123i或125i)，其可为天然存在的或非天然存在的同位素。
[0101]
通式(i)的化合物也可以是互变异构形式：
[0102][0103]
在本发明的一些化合物中，r1为[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9，其中n、r7、r8和r9如上文针对通式(i)所定义。
[0104]
在该类型的一些化合物中，n为1，而在其他此类化合物中，n为2。
[0105]
更合适地，在此类化合物中，r7选自h、苯基、甲基、ch2oh和ch2och3，还更合适地h、甲基、苯基和ch2och3。
[0106]
r8更合适地选自h、任选地被甲氧基取代的甲基和任选地被甲氧基取代的乙基。
[0107]
r9更合适地选自c
3-4
烷基，尤其是正丁基、异丁基和叔丁基，特别是叔丁基。
[0108]
在其中r1为[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9的一些化合物中，其中n为1，r7和r8不都为h。例如，在一些情况下，r7为h并且r8为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基，尤其是甲基或乙基。在其他情况下，r7为苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基，尤其是苯基、甲基或ch2och3，并且r8为h。在又一些情况下，r7为苯基或任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基，并且r8为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；例如r7为ch2och3或苯基，并且r8为甲基或乙基。
[0109]
在一些通式(i)的化合物中，r1为ch(r
11
)(r
12
)，其中r
11
和r
12
如上文针对通式(i)所定义。
[0110]
在该类型的一些合适的化合物中，r
12
为任选地被oh取代的环己基。
[0111]
在其他此类化合物中，r
12
为苯基、吡啶基或噁唑基，它们中的任一者为任选地被一个或多个选自oh、甲氧基、氟和氯的取代基取代。
[0112]
在一些情况下，例如，r
12
为苯基，所述苯基任选地在2位被oh或甲氧基取代并且任选地具有选自氟和氯的一个或两个另外的取代基，优选地一个另外的取代基。此类r
12
基团的例子包括苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-2-甲氧基苯基、4-氟-2-甲氧基苯基、5-氟-2-甲氧基苯基和5-氯-2-甲氧基苯基。
[0113]
在其他情况下，r
12
为任选地被oh或甲氧基取代的吡啶基基团，例如2-甲氧基-吡啶-3-基，或任选地被一个或两个甲基基团取代的噁唑基基团，尤其是二甲基噁唑基基团。
[0114]
可替代地，r
12
为具有如下取代基的苯基，该取代基连同r
11
和它所连接的原子一起形成与苯基基团r
12
稠合的5元或6元含氧杂环。苯基基团r
12
也可含有如上文列出的其他取代基。合适地，组合r
11
的r
12
取代基位于在苯基基团r
12
上跟苯基基团r
12
与ch(r
11
)所连接的位置邻近的位置处，并且所组合的取代基为其中ch2部分任选地被-o-替换的2或3元烃链。例如，r
11
和在r
12
上的取代基可组合以形成基团-o-ch
2-、-ch
2-o-、-o-ch
2-ch
2-、-ch
2-ch
2-o-。该类型的组合的r
11
和r
12
基团的一个例子为2,3-二氢苯并呋喃-3-基。
[0115]
在一些通式(i)的化合物中，r1为任选地被or
15
取代的c
2-6
烷基，其中r
15
如在通式
(i)中所定义。在该类型的一些更合适的化合物中，r1为未取代的c
3-6
烷基，尤其是支链未取代的c
3-6
烷基和更特别地支链未取代的c
4-6
烷基基团。在该类型的其他更合适的化合物中，r1为被or
15
取代、尤其是被甲氧基取代的甲基或乙基。
[0116]
在又一些通式(i)的化合物中，r1为6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其任一个任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代。更合适地，r1为苯基或5元或6元杂芳基基团，合适地含氮或氧的杂芳基基团。苯基或杂芳基基团可为任选地如上文所定义的取代的，但更合适地为未取代的。未取代的苯基为该类型的r1基团的例子。
[0117]
在一些通式(i)的化合物中，r2为任选地如上文所定义的取代的3元至10元碳环体系。
[0118]
在该类型的一些化合物中，r2为桥接碳环体系，诸如双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.1.1]己烷基、双环-[2.2.1]庚烷基、双环-[2.2.2]辛烷基或金刚烷基，尤其是双环-[2.2.1]庚烷基或金刚烷基。其中r2为金刚烷基的化合物是特别合适的。在一些情况下，当r2为桥接碳环体系时，它是未取代的。可替代地，桥接碳环体系r2可以被取代，例如被oh取代。这样的r2基团的例子是被oh取代的金刚烷基。
[0119]
在该类型的其他化合物中，r2为碳环体系，特别是选自以下各项的5至8元碳环体系：环戊基、环己基、环庚基和环辛基，它们中的任一者为未取代的或如上文所定义的取代的。此类r2基团的更合适的取代基包括oh、氟、c
1-6
烷基、o(c
1-6
烷基)和nh-c(o)o-c
1-6
烷基，尤其是oh、c
1-4
烷基、o(c
1-4
烷基)和nh-c(o)o-c
1-4
烷基，以及还更合适地c
1-4
烷基(尤其是甲基)氟和nh-c(o)o-c
1-4
烷基。
[0120]
在该类型的其他更合适的化合物中，r2为未取代的环戊基、环己基或环庚基环，尤其是未取代的环己基或环庚基。
[0121]
在其他通式(i)的化合物中，r2为任选地如上文所定义的取代的6元至10元芳基或5元至10元杂芳基环体系。在这种情况下，更合适地，r2为任选地被一个或多个选自以下的取代基取代的苯基或5元或6元杂芳基环：氟、氯、oh、任选地被一个或多个选自oh和卤代的取代基取代的c
1-6
烷基、o(c
1-6
烷基)和o(c
1-6
卤代烷基)，再更合适地氟、氯、oh、c
1-4
烷基、被oh取代的c
1-4
烷基和o(c
1-4
烷基)；尤其是氟、氯、oh、c
1-4
烷基、被oh和甲氧基取代的c
1-4
烷基。特别地，r2为在2位被oh取代和任选地具有选自氟和氯的另外的取代基的苯基。
[0122]
在一些通式(i)的化合物中，y和r2一起形成未取代的c
3-8
烷基基团，更合适地c
5-8
烷基基团。
[0123]
在一些通式(i)的化合物中，y和r2一起形成基团ch
2-c(r
17
)(r
18
)-ch
2-n(r
19
)r
20
；
[0124]
其中r
17
、r
18
、r
19
和r
20
中的每一者如上文所定义。
[0125]
更合适地，r
17
、r
18
和r
19
中的每一者独立地为h或甲基，并且r
20
为c
1-4
卤代烷基。还更合适地，r
17
和r
18
中的每一者独立地为h或甲基，r
19
为h并且r
20
为c
1-4
卤代烷基。
[0126]
在一些特别优选的通式(i)的化合物中、r2为未取代的环己基，并且r1为ch(r
11
)(r
12
)，其中r
11
和r
12
如上文所定义。更特别地，r
11
如上文所定义，并且r
12
为任选地被oh或甲氧基取代的苯基。其中r2为未取代的环己基并且r1为未取代的苄基的化合物是特别合适的，特别是n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-环己基-乙酰胺；2-苄基-n-(环己基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺，以及其盐和溶剂化物。
[0127]
在一些通式(i)的化合物中，r3、r4和r5不均为h。
[0128]
在一些通式(i)的化合物中，r3、r4和r5中的一者为卤代，其他为h。在某些化合物中，r3为卤代，r4和r5为h。在某些化合物中，r4为卤代，r3和r5为h。在某些化合物中，r5为卤代，r3和r4为h。
[0129]
在其他通式(i)的化合物中，r3、r4和r5中的一者或多者为f。例如：
[0130]
r3为f，并且r4和r5为h；或者
[0131]
r4为f，并且r3和r5为h；或者
[0132]
r5为f，并且r3和r4为h。
[0133]
在一些通式(i)的化合物中，z为-nh-c(o)-。
[0134]
在一些通式(i)的化合物中，z为-c(o)nh-。
[0135]
在一些通式(i)的化合物中，y为键。
[0136]
在一些通式(i)的化合物中，y为-ch
2-。
[0137]
在一些通式(i)的化合物中，y为-ch(ch3)-。
[0138]
在一个实施例中，式(i)的化合物为式(ia)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：
[0139][0140]
其中r2、r3、r4、r5、y和z如针对通式(i)所定义，并且：
[0141]r1a
为
[0142]
i.[ch(r
7a
)]
n-n(r
8a
)-c(o)or
9a
；
[0143]
n为1或2；
[0144]
每个r
7a
独立地为h、苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3取代基取代的c
1-3
烷基；
[0145]r8a
为h、任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；
[0146]
条件是当n为1时，r
7a
和r
8a
不均为h；
[0147]r9a
为c
2-4
烷基；或者
[0148]
ii.ch(r
11a
)(r
12a
)；
[0149]r11a
为h、oh、ch3、ch2oh或与如下定义的r
12a
上的取代基组合的基团；
[0150]r12a
选自苯基或5元或6元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自oh、甲氧基、甲基、氟、氯以及连同r
11a
和它所连接的原子一起形成与苯基或杂芳基基团r
12a
稠合的5元或6元含氧杂环的取代基；条件是当r
12a
为任选地被一个或多个选自oh、甲氧基、甲基、氟或氯的取代基取代的苯基或6元杂芳基时，r
11a
不为h；或者
[0151]
iii.被or
15a
取代的甲基、乙基或正丙基；
[0152]r15a
为甲基或乙基；或者
[0153]
iv.6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其中的任一者任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代；
[0154]
条件是：
[0155]
a.当r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)；其中r
11a
为h或甲基，并且r
12a
为未取代的或被1或2个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代和甲氧基时：
[0156]
i.r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1或2个选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和5元杂芳基环的取代基取代；并且
[0157]
b.当r
1a
为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
12a
为苯基，并且r
11a
连同r
12a
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12a
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：
[0158]
i.r
2a
不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1、2或3个取代基取代，其中所述取代基选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基和c
1-4
烷氧基；并且
[0159]
ii.y和r2不组合形成c
3-10
烷基。
[0160]
在一些通式(ia)的化合物中，r
1a
为[ch(r
7a
)]
n-n(r
8a
)-c(o)or
9a
，其中n、r
7a
、r
8a
和r
9a
如上文针对通式(ia)所定义。
[0161]
在该类型的一些化合物中，n为1，而在其他此类化合物中，n为2。
[0162]
更合适地，在此类化合物中，r
7a
选自h、苯基、甲基、ch2oh和ch2och3，还更合适地h、甲基、苯基和ch2och3。
[0163]r8a
更合适地选自h、任选地被甲氧基取代的甲基和任选地被甲氧基取代的乙基。
[0164]r9a
更合适地选自c
3-4
烷基，尤其是正丁基、异丁基和叔丁基，特别是叔丁基。
[0165]
在通式(ia)的化合物中，其中r1为[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9，并且n为1，r
7a
和r
8a
不均为h。在一些情况下，r
7a
为h并且r
8a
为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基，尤其是甲基或乙基。在其他情况下，r
7a
为苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基，尤其是苯基、甲基或ch2och3，并且r
8a
为h。在又一些情况下，r
7a
为苯基或任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基，并且r
8a
为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；例如r
7a
为ch2och3或苯基，并且r
8a
为甲基或乙基。
[0166]
在一些通式(ia)的化合物中，r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)，其中r
11a
和r
12a
如上文针对通式(ia)所定义。
[0167]
在一些此类化合物中，r
12a
为苯基或6元杂芳基基团诸如吡啶基，其中任一者任选地被一个或多个选自oh、甲氧基、氟和氯的取代基取代；并且r
11a
为oh、ch3或ch3oh。
[0168]
例如，r
12a
为苯基，所述苯基任选地在2位被oh或甲氧基取代并且任选地具有选自氟和氯的一个或两个另外的取代基，优选地一个另外的取代基。此类r
12a
基团的例子包括苯基、2-羟基苯基、3-羟基苯基、4-羟基苯基、2-甲氧基苯基、3-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、3-氟-2-甲氧基苯基、4-氟-2-甲氧基苯基、5-氟-2-甲氧基苯基和5-氯-2-甲氧基苯基。
[0169]
在其他此类化合物中，r
12a
为任选地被oh或甲氧基取代的吡啶基基团，例如2-甲氧基-吡啶-3-基。
[0170]
在其他通式(ia)的化合物中，其中r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)、r
12a
为任选地被一个或两个
甲基基团取代的5元杂芳基基团诸如噁唑基，尤其是二甲基噁唑基基团。在这种情况下，r
11a
可为h、oh、ch3或ch3oh。
[0171]
在又一些通式(ia)的化合物中，其中r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)，r
12a
为具有如下取代基的苯基，该取代基连同r
11a
和它所连接的原子一起形成与苯基基团r
12a
稠合的5元或6元含氧杂环。苯基基团r
12a
也可含有如上文列出的其他取代基。合适地，组合r
11a
的r
12a
取代基位于在苯基基团r
12a
上跟苯基基团r
12a
与ch(r
11a
)所连接的位置邻近的位置处，并且所组合的取代基为其中ch2部分任选地被-o-替换的2或3元烃链。例如，r
11a
和在r
12a
上的取代基可组合以形成基团-o-ch
2-、-ch
2-o-、-o-ch
2-ch
2-、-ch
2-ch
2-o-。该类型的组合的r
11
和r
12
基团的一个例子为2,3-二氢苯并呋喃-3-基。
[0172]
在一些通式(ia)-的化合物中，r
1a
为被or
15
取代、尤其是被甲氧基取代的甲基、乙基或正丙基，尤其是乙基或正丙基。
[0173]
在通式(ia)的又一些化合物中，r
1a
为6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其任一个任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代。更合适地，r
1a
为苯基或5元或6元杂芳基基团，合适地含氮或氧的杂芳基基团。苯基或杂芳基基团可为任选地如上文所定义的取代的，但更合适地为未取代的。未取代的苯基为该类型的r
1a
基团的例子。
[0174]
在通式(ia)的化合物中，r2、r3、r4、r5、y和z的更合适的值如上文针对通式(i)的化合物所定义。
[0175]
在进一步的实施例中，通式(i)的化合物为通式(ib)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：
[0176][0177]
其中r1、r3、r4、r5、y和z如针对通式(i)所定义，并且：
[0178]r2b
选自：
[0179]
i.任选地被一个或多个选自以下的取代基取代的3元至10元碳环体系：氟；氯；cn；硝基；oh，任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的c
1-6
烷基；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的o(c
1-6
烷基)；以及任选地被一个或多个选自卤代和oh的取代基取代的ch2nh-c(o)o-c
1-6
烷基；或者
[0180]
y和r
2b
一起形成未取代的c
3-8
烷基基团或基团ch
2-c(r
17b
)(r
18b
)-ch
2-n(r
19b
)r
20b
；
[0181]
其中r
17b
、r
18b
和r
19b
中的每一者独立地为h或c
1-4
烷基；并且
[0182]r20b
为c
1-4
烷基或c
1-4
卤代烷基；
[0183]
条件是：
[0184]
当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
12
为苯基，r
11
连同r
12
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：
[0185]
y和r
2b
不组合形成c
3-8
烷基。
[0186]
在一些通式(ib)的化合物中，r
2b
为如上文所定义的取代的3元至10元碳环体系。
[0187]
在该类型的一些化合物中，r
2b
为桥接碳环体系，诸如双环[1.1.1]戊烷基、双环[2.1.1]己烷基、双环-[2.2.1]庚烷基、双环-[2.2.2]辛烷基或金刚烷基，尤其是双环-[2.2.1]庚烷基或如上文所定义的取代的金刚烷基。其中r2为取代的金刚烷基、尤其是被oh取代的金刚烷基的化合物是特别合适的。
[0188]
在其他通式(ib)的化合物中，r
2b
为碳环体系，特别是选自以下各项的5至8元碳环体系：环戊基、环己基、环庚基和环辛基，它们中的任一者为如上文所定义的取代的。此类r2基团的更合适的取代基包括oh、氟、c
1-6
烷基、o(c
1-6
烷基)和nh-c(o)o-c
1-6
烷基，尤其是oh、c
1-4
烷基、o(c
1-4
烷基)和nh-c(o)o-c
1-4
烷基，以及还更合适地c
1-4
烷基(尤其是甲基)氟和nh-c(o)o-c
1-4
烷基。
[0189]
在一些通式(ib)的化合物中，y和r
2b
一起形成未取代的c
3-8
烷基基团，更合适地c
5-8
烷基基团。
[0190]
在一些通式(i)的化合物中，y和r
2b
一起形成基团ch
2-c(r
17b
)(r
18b
)-ch
2-n(r
19b
)r
20b
；
[0191]
其中r
17b
、r
18b
、r
19b
和r
20b
中的每一者如上文所定义。
[0192]
更合适地，r
17b
、r
18b
和r
19b
中的每一者独立地为h或甲基并且r
20b
为c
1-4
卤代烷基。还更合适地，r
17b
和r
18b
中的每一者独立地为h或甲基，r
19b
为h并且r
20b
为c
1-4
卤代烷基。
[0193]
在以下讨论中，提及通式(i)的化合物包括通式(ia)和(ib)的化合物。
[0194]
通式(i)的化合物(其中z为nh-c(o)-)可以通过使通式(ii)的化合物：
[0195][0196]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义；
[0197]
与通式(iii)的化合物反应：
[0198][0199]
其中y和r2如针对通式(i)所定义并且r
11
为oh或卤素，特别是cl。
[0200]
当r
11
为卤素时，反应可以在有机溶剂中并在碱诸如二异丙基乙胺的存在下进行。
[0201]
当r
11
为oh时，反应可以在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。
[0202]
合适的偶联试剂包括已知的肽偶联剂，诸如o-(苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n
’‑
四甲
基脲鎓六氟磷酸盐(hbtu)、o-(苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲鎓四氟硼酸盐(tbtu)、o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲鎓六氟磷酸盐(hatu)、o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n’,n
’‑
四甲基脲鎓四氟硼酸盐(tatu)、(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)磷鎓六氟磷酸盐(bop)、(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷磷鎓六氟磷酸盐(pybop)、碳二亚胺(诸如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edci))和三唑(诸如1-羟基-7-氮杂苯并三唑(hoat)或羟基苯并三唑(hobt))。合适地，反应在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。
[0203]
通式(iii)的化合物可商购获得或可以通过已知的方法制备。对于一些通式(ii)的化合物也是这种情况。然而，当通式(ii)的化合物不可商购获得时，它们可以通过还原通式(iv)的化合物来制备：
[0204][0205]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义。
[0206]
还原可以通过在钯催化剂上氢化来进行。合适地，该类型的氢化反应将在醇溶剂(例如乙醇)中进行。
[0207]
可替代地，还原可以使用金属诸如锌和酸诸如乙酸进行。
[0208]
如果通式(iii)的r1含有oh基团，则它可以在反应期间被保护，例如作为苄氧基基团。特别是当使用氢化时，保护基团可以在还原期间除去。
[0209]
通式(iv)的化合物可以通过使通式(v)的化合物：
[0210][0211]
其中r1如针对通式(i)所定义；
[0212]
与通式(vi)的化合物的反应来制备：
[0213]
[0214]
其中r3、r4和r5如针对通式(i)所定义。
[0215]
该反应有两个步骤。合适地，第一步骤在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。第二步骤是环化步骤，其中将第一步骤的产物在约50℃至100℃的温度下在酸性条件下(合适地在乙酸中)加热。
[0216]
通式(v)和(vi)的化合物可商购获得或可以使用已知方法制备。
[0217]
合成通式(i)的化合物(其中z为-nh-c(o)-)的替代方法是通过使如上文所定义的通式(v)的化合物与通式(vii)的化合物反应：
[0218][0219]
其中r2、r3、r4和r5如上文针对通式(i)所定义。
[0220]
关于通式(v)和(vi)的化合物之间的反应，该反应为两步骤过程。第一步骤在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。第二步骤是环化步骤，并且通过在约50℃至100℃的温度下将第一步骤的产物与酸诸如乙酸一起加热来进行。
[0221]
通式(vii)的化合物可以通过还原通式(viii)的化合物来制备：
[0222][0223]
其中r2、r3、r4和r5如上文针对通式(i)所定义。
[0224]
还原可以是催化氢化，例如在醇溶剂诸如乙醇中使用钯催化剂。
[0225]
通式(viii)的化合物可以通过使如上文所定义的通式(iii)的化合物与通式(ix)的化合物反应来制备：
[0226][0227]
其中r2、r3、r4和r5如上文针对通式(i)所定义。
[0228]
合适地，反应在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。
[0229]
通式(ix)的化合物可商购获得或可通过已知方法制备。
[0230]
通式(i)的化合物(其中z为-c(o)-nh-)可以通过使通式(xii)的化合物：
[0231][0232]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义；
[0233]
与通式(xiii)的化合物的反应来制备：
[0234][0235]
其中r2和y如针对通式(i)所定义。
[0236]
合适地，反应在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如4-二甲基氨基吡啶(dmap)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出，其中1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edci)是特别合适的。
[0237]
通式(xiii)的化合物可商购获得或可通过已知方法制备。一些通式(xii)的化合物也可商购获得。
[0238]
不可商购获得的通式(xii)的化合物可以通过通式(xiv)的化合物的水解来制备：
[0239][0240]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义，并且r
15
为c
1-6
烷基或苄基。
[0241]
水解合适地是碱水解，例如在水溶液中使用碱金属氢氧化物，特别是氢氧化锂。
[0242]
通式(xiv)的化合物可以通过使如上文所定义的通式(v)的化合物与通式(xv)的化合物反应来制备：
[0243][0244]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义，并且r
15
如针对通式(xiv)所定义。
[0245]
合适地，两步骤反应的第一步骤在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。然后用酸诸如乙酸处理第一步骤的产物。
[0246]
通式(xv)的化合物可商购获得或可通过已知方法制备。
[0247]
其中z为-c(o)-nh-的通式(i)的化合物也可以通过使如上文所定义的通式(xiii)的化合物与通式(xvi)的化合物和一氧化碳反应来制备：
[0248][0249]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义，并且r
16
为卤素，尤其是溴。
[0250]
一氧化碳可以如下文实例3.3中所述原位产生。
[0251]
通式(xvi)的化合物可以通过使如上文所定义的通式(v)的化合物与通式(xix)的化合物反应来制备：
[0252][0253]
其中r1、r3、r4和r5如针对通式(i)所定义,并且r
16
如针对通式(xvi)所定义。
[0254]
合适地，反应的第一步在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。通过在约50℃至100℃的温度下用酸诸如乙酸处理第一步骤的产物来实现环化。
[0255]
其中z为-c(o)-nh-的通式(i)的化合物也可以通过使如上文所定义的通式(v)的化合物与通式(xx)的化合物反应来制备：
[0256][0257]
其中r2、r3、r4和r5如上文针对通式(i)所定义。
[0258]
合适地，反应的第一步在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。通过在约50℃至100℃的温度下用酸诸如乙酸处理第一步骤的产物来实现环化。
[0259]
通式(xx)的化合物可以通过使如上定义的通式(xiii)的化合物与通式(xviii)的化合物反应来制备：
[0260][0261]
其中r1、r3、r4和r5如上文针对通式(i)所定义。
[0262]
合适地，反应在偶联剂的存在下和在碱性条件下进行，例如在胺诸如二异丙基乙
胺(dipea)或三乙胺(tea)的存在下和在有机溶剂诸如dmf中进行。合适的偶联剂如上文针对通式(ii)和(iii)的化合物的反应所列出。
[0263]
通式(xviii)的化合物可以通过通式(xv)的化合物的水解制备，特别是例如在醇溶剂(诸如甲醇或者甲醇、四氢呋喃和水的混合物)中使用碱金属氢氧化物诸如氢氧化锂通过碱水解制备。
[0264]
在通式(i)的化合物的合成中，在必要时可以使用保护基团。合适的保护基团是熟知的(参见greene’s protective groups in organic synthesis,peter g.m.wuts,编辑,john wiley&sons,inc,2014)。例如，如果r1或r2基团包含被oh取代的芳环，则可能需要保护。例如，当r1基团是ch(r
11
)(r
12
)，其中r
12
是被oh取代的苯基时，oh基团可以被保护为内酯，其可以通过用还原剂(诸如硼氢化钠或硼氢化锂)处理开环，得到所需的r
12
基团。可替代地，oh基团可以被保护为o(c
1-6
)烷基，尤其是甲氧基或苄氧基。当保护基团是甲氧基时，可以通过与三溴化硼反应来进行脱保护。如实例1.4、1.5和3.3所示，可以通过催化氢化除去苄氧基基团。作为进一步的替代选择，oh基团可以被三(c
1-6
烷基)甲硅烷基基团保护，其可以在含水后处理中被去除。
[0265]
通式(i)化合物是tmem16a的正调节剂，因此，在本发明的另一方面，提供了如上定义的通式(i)化合物用于医学，特别是用于治疗或预防受tmem16a的调节影响的疾病和病症。
[0266]
还提供了通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防受tmem16a调节影响的疾病和病症的药物中的用途。
[0267]
还提供了一种用于治疗或预防受tmem16a调节影响的疾病和病症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0268]
受tmem16a调节影响的疾病和病症包括呼吸系统疾病和病症、口干(口干症)、肠道过度活动、胆汁淤积和眼部病症。
[0269]
还提供了：
[0270]
·
用于在治疗或预防呼吸系统疾病和病症中使用的通式(i)的化合物。
[0271]
·
用于在治疗或预防口干(口干症)中使用的通式(i)的化合物。
[0272]
·
用于在治疗或预防肠过度活动中使用的通式(i)的化合物。
[0273]
·
用于在治疗或预防胆汁淤积中使用的通式(i)的化合物。
[0274]
·
用于在治疗或预防眼部病症中使用的通式(i)的化合物。
[0275]
本发明还提供了：
[0276]
·
通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防呼吸系统疾病和病症的药物中的用途。
[0277]
·
通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防口干(口干症)的药物中的用途。
[0278]
·
通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防肠过度活动的药物中的用途。
[0279]
·
通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防胆汁淤积的药物中的用途。
[0280]
·
通式(i)的化合物在制备用于治疗或预防眼部病症的药物中的用途。
[0281]
进一步提供了：
[0282]
·
一种用于治疗或预防呼吸系统疾病和病症的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0283]
·
一种用于治疗或预防口干(口干症)的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0284]
·
一种用于治疗或预防肠过度活动的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0285]
·
一种用于治疗或预防胆汁淤积的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0286]
·
一种用于治疗或预防眼部病症的方法，该方法包括向需要这种治疗的患者施用有效量的通式(i)的化合物。
[0287]
可由通式(i)的化合物治疗或预防的呼吸系统疾病和病症包括囊性纤维化、慢性阻塞性肺疾病(copd)、慢性支气管炎、肺气肿、支气管扩张，包括非囊性纤维化支气管扩张、哮喘和原发性纤毛运动障碍。
[0288]
可由通式(i)的化合物治疗或预防的口干(口干症)是由sjorgens综合征、放疗治疗和引起口腔干燥的药物导致。
[0289]
可由通式(i)的化合物治疗或预防的肠道过度活动可能与胃消化不良、胃轻瘫、慢性便秘和肠易激综合征有关。
[0290]
可由通式(i)的化合物治疗或预防的眼部病症包括干眼病。
[0291]
本发明的化合物通常作为药物组合物的一部分施用，因此本发明进一步提供包含通式(i)的化合物连同药用赋形剂的药物组合物。
[0292]
药物组合物可以配制成用于口服、直肠、鼻、支气管(吸入)、局部(包括皮肤、经皮、滴眼液、口腔和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌内、静脉内和皮内)施用，并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。
[0293]
该组合物可以通过将上述定义的活性剂与赋形剂结合来制备。一般而言，配制品的制备方法是使活性剂与液态载体或细分的固体载体或二者均匀而紧密地结合，然后，如有必要，将产物成型。本发明涉及用于制备药物组合物的方法，包括将通式(i)的化合物与药用载体或媒介物结合或缔合。
[0294]
本发明中用于口服施用的配制品可以表示为：离散单元，诸如胶囊、小袋或片剂，每一个都含有预定量的活性剂；作为粉末或颗粒；作为活性剂在水性液体或非水性液体中的溶液或悬浮液；或作为水包油液体乳液或油包水液体乳液；或作为丸剂等。
[0295]
对于口服施用的组合物(例如片剂和胶囊剂)，术语“可接受的载体”包括媒介物，诸如常见的赋形剂，例如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯树胶、明胶、山梨糖醇、黄蓍胶、聚乙烯吡咯烷酮(聚维酮)、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、蔗糖和淀粉；填充剂和载体，例如玉米淀粉、明胶、乳糖、蔗糖、微晶纤维素、高岭土、甘露醇、磷酸二钙、氯化钠和海藻酸；以及润滑剂，诸如硬脂酸镁、硬脂酸钠和其他硬脂酸金属盐、硬脂酸甘油酯、硬脂酸、硅油、滑石蜡、油类和胶体二氧化硅。也可以使用调味剂，诸如薄荷、冬青油、樱桃调味剂等。可能需要添加着色剂以使剂型易于识别。片剂也可以通过本领域公知的方法进行包衣。
[0296]
片剂可通过压缩或模塑制成，任选地与一种或多种辅助成分一起。可通过在合适的机器中压缩以自由流动形式(诸如粉末或颗粒)任选地与粘结剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂混合的活性剂而制备压缩片剂。模制片剂可通过在合适的机器
中塑模用惰性液体稀释剂润湿的粉末状化合物的混合物而制成。该片剂可以任选地被包衣或刻痕，并可以经配制使得可从中缓释或控释活性剂。
[0297]
适于口服施用的配制品包括在调味基料(通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)中包含活性剂的锭剂；在惰性基料(诸如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)中包含活性剂的含片；以及在合适的液体载体中包含活性剂的漱口水。
[0298]
对于局部施用于皮肤，可以将通式(i)的化合物制成乳膏、软膏、胶剂、溶液或悬液等。可用于药物的乳膏或软膏制剂是本领域熟知的常规配制品，例如在如british pharmacopoeia的标准药学教科书中所描述的。
[0299]
可以通过使用气雾剂配制品实现对肺的局部施用。气雾剂配制品通常包含悬浮或溶解在合适的气雾剂推进剂(诸如氯氟烃(cfc)或氢氟烃(hfc))中的活性成分。合适的cfc推进剂包括三氯单氟甲烷(推进剂11)、二氯四氟甲烷(推进剂114)、和二氯二氟甲烷(推进剂12)。合适的hfc推进剂包括四氟乙烷(hfc-134a)和七氟丙烷(hfc-227)。推进剂通常占总吸入组合物重量的40％-99.5％，例如40％-90％。配制品可包含赋形剂，包括共溶剂(例如乙醇)和表面活性剂(例如卵磷脂、脱水山梨糖醇三油酸酯等)。其他可能的赋形剂包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油等。气雾剂配制品包装在罐中，并通过计量阀(例如由bespak、valois或3m提供或可替代地由aptar、coster或vari提供)的方式递送合适的剂量。
[0300]
也可以通过使用非加压配制品诸如水溶液或悬浮液来实现对肺的局部施用。这些可以通过雾化器的方式施用，例如一种可以手持和便携或供家庭或医院使用(即非便携)的。配制品可以包含赋形剂，诸如水、缓冲剂、张力调节剂、ph调节剂、表面活性剂和共溶剂。悬浮液和气雾剂配制品(无论是加压的还是未加压的)通常会含有细碎形式的本发明化合物，例如具有0.5-10μm的d
50
，例如大约1-5μm。粒度分布可以使用d
10
、d
50
和d
90
值表示。粒度分布的d
50
中值定义为将分布一分为二的以微米计的粒度。来自激光衍射的测量更准确地描述为体积分布，因此使用此方法获得的d
50
值更有意义地称为dv
50
值(体积分布的中值)。如本文所用的dv值是指使用激光衍射测量的粒度分布。类似地，在激光衍射上下文中使用的d
10
和d
90
值被认为是指dv
10
和dv
90
值，并且指的是粒度，分别其中分布的10％低于d
10
值，而分布的90％低于d
90
值。
[0301]
也可以通过使用干粉配制品实现对肺的局部施用。干粉配制品将含有细碎形式的本公开的化合物，通常具有1-10μm的质量平均直径(mmad)或0.5-10μm，例如约1-5μm的d
50
。细碎形式的本发明化合物的粉末可以通过微粉化方法或类似的尺寸减小方法制备。微粉化可以使用喷射磨机诸如由hosokawa alpine制造的喷射磨机进行。可以使用激光衍射(例如使用malvern mastersizer 2000s仪器)测量所得粒度分布。配制品通常含有局部可接受的稀释剂，诸如乳糖、葡萄糖或甘露醇(优选乳糖)，通常具有相对大的粒径，例如质量平均直径(mmad)为50μm或更大，例如100μm或更大或d
50
为40-150μm。如本文所用，术语“乳糖”是指含乳糖的组分，包括α-乳糖一水合物、β-乳糖一水合物、α-无水乳糖、β-无水乳糖和无定形乳糖。乳糖组分可通过微粉化、筛分、研磨、压缩、凝聚或喷雾干燥进行加工。还涵盖各种形式的可商购形式的乳糖，例如(吸入级乳糖；dfe pharma)、(用于干粉吸入器的筛分乳糖；meggle)、(dfe pharma)和(筛分吸入级乳糖；dfe pharma)产品。在一个实施例中，该乳糖组分选自由以下组成的组：α-乳糖一水
合物、α-无水乳糖和无定形乳糖。优选地，该乳糖是α-乳糖一水合物。
[0302]
干粉配制品也可能含有其他赋形剂。因此，在一个实施例中，根据本披露的干粉配制品包含硬脂酸镁或硬脂酸钙。此类配制品可具有优异的化学和/或物理稳定性，尤其是当此类配制品还包含乳糖时。
[0303]
通常使用干粉吸入器(dpi)装置递送干粉配制品。干粉递送系统的示例包括通常使用干粉吸入器(dpi)装置递送干粉配制品。干粉递送系统的示例包括和干粉递送系统的进一步示例包括eclipse、next、rotahaler、handihaler、aeroliser、cyclohaler、breezhaler/neohaler、monodose、flowcaps、twincaps、x-caps、turbospin、elpenhaler、miathaler、twisthaler、novolizer、pressair、ellipta、oriel干粉递送系统、microdose、pulvinal、easyhaler、ultrahaler、taifun、pulmojet、omnihaler、gyrohaler、taper、conix、xcelovair和prohaler。
[0304]
在一个实施例中，通式(i)的化合物作为例如包含合适等级的乳糖的微粉化干粉配制品提供。
[0305]
因此，作为本发明的一个方面，提供了包含颗粒形式的通式(i)的化合物与颗粒乳糖组合的药物组合物，所述组合物任选地包含硬脂酸镁。
[0306]
在一个实施例中，通式(i)的化合物作为包含合适等级的乳糖和硬脂酸镁的微粉化干粉配制品提供，其被填充到诸如diskus的装置中。合适地，这样的装置是多剂量装置，例如将配制品填充到泡罩中以用于在多单位剂量装置诸如diskus中使用。
[0307]
在另一个实施例中，通式(i)的化合物作为微粉化干粉配制品提供，例如包含合适等级的乳糖，将其填充到硬壳胶囊中以用于在单剂量装置诸如aeroliser中使用。
[0308]
在另一个实施例中，通式(i)的化合物作为包含合适等级的乳糖和硬脂酸镁的微粉化干粉配制品提供，其被填充到硬壳胶囊中以用于在单剂量装置诸如aeroliser中使用。
[0309]
在另一个实施例中，通式(i)的化合物以细粉形式提供，用于在吸入剂型中使用，其中该粉末是d
50
为0.5-10μm的细颗粒，例如约1-5μm，是通过除喷射磨机微粉化以外的尺寸减小方法生产的，例如喷雾干燥、喷雾冷冻、微流化、高压均化、超临界流体结晶、超声结晶或这些方法的组合，或本领域已知的用于生产空气动力学粒度为0.5-10μm的细颗粒的其他合适的颗粒形成方法。可以使用激光衍射(例如使用malvern mastersizer2000s仪器)测量所得粒度分布。该颗粒可单独包含化合物或与可有助于加工的合适的其他赋形剂组合。所得细粒可形成用于递送给人类的最终配制品或可任选地与其他合适的赋形剂进一步配制以促进以可接受的剂型递送。
[0310]
本发明的化合物也可以直肠施用，例如以栓剂或灌肠剂的形式，其包括水性或油性溶液以及悬浮液和乳液和泡沫。这种组合物按照本领域技术人员公知的标准程序制备。例如，栓剂可以通过将活性成分与常规栓剂基质如可可油或其他甘油酯混合来制备。在这种情况下，将药物与合适的无刺激性赋形剂混合，该赋形剂在常温下为固体，但在直肠温度下为液体，因此会在直肠中融化以释放药物。此类材料是可可油和聚乙二醇。
[0311]
通常，对于旨在以滴眼剂或眼药膏的形式局部施用于眼睛的组合物，通式(i)的化合物的总量将为约0.0001％(w/w)至小于4.0％(w/w)。
[0312]
优选地，对于局部眼部施用，根据通式(i)施用的组合物将被配制成溶液、悬浮液、
乳液和其他剂型。基于配制的容易性以及患者通过将一到两滴溶液滴入受影响的眼睛的方式容易地施用此类组合物的能力，通常优选水溶液。然而，该组合物也可以是悬浮液、粘性或半粘性凝胶、或其他类型的固体或半固体组合物。对于微溶于水的化合物，可以优选悬浮液。
[0313]
对眼睛施用的替代方法是玻璃体内注射通式(i)的化合物的溶液或悬浮液。此外，通式(i)的化合物也可以通过眼部植入物或插入物引入。
[0314]
根据通式(i)施用的组合物还可包括各种其他成分，包括但不限于张力剂、缓冲液、表面活性剂、稳定聚合物、防腐剂、共溶剂和增粘剂。通式(i)的合适的药物组合物包括用张力剂和缓冲剂配制的本发明化合物。通式(i)的药物组合物可以进一步任选地包括表面活性剂和/或缓和剂和/或稳定聚合物。
[0315]
可以使用各种张力剂来调节组合物的张力，优选调节眼用组合物至天然泪液的张力。可将例如，氯化钠、氯化钾、氯化镁、氯化钙、单糖(诸如葡聚糖)、果糖、半乳糖和/或简单的多元醇(诸如糖醇甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、异麦芽糖醇、麦芽糖醇和氢化淀粉的水解物)添加到组合物中以接近生理张力。这种张力剂的量将根据要添加的特定药剂而变化。然而，一般而言，组合物将具有足以使最终组合物具有眼科可接受的渗透压(通常约150-450mosm，优选250-350mosm，最优选约290mosm)的量的张力剂。一般而言，本发明的张力剂将以2％w/w至4％w/w的范围存在。本发明优选的张力剂包括单糖或糖醇，诸如d-甘露醇。
[0316]
可将合适的缓冲系统(例如磷酸钠、乙酸钠、柠檬酸钠、硼酸钠或硼酸)添加到组合物中以防止储存条件下的ph值漂移。具体浓度将根据所使用的药剂而变化。然而优选地，选择缓冲液以将目标ph值维持在ph 5至8的范围内，并且更优选地维持在ph 5至7的目标ph值。
[0317]
可以任选地使用表面活性剂以递送更高浓度的通式(i)的化合物。表面活性剂起到溶解化合物和稳定胶体分散体的作用，诸如胶束溶液、微乳液、乳液和悬浮液。可任选地使用的表面活性剂的示例包括聚山梨醇酯、泊洛沙姆、聚乙二醇40硬脂酸酯、聚氧乙烯蓖麻油、泰洛沙泊、triton和山梨醇酐月桂酸酯。用于本发明的优选表面活性剂具有12.4至13.2范围内的亲水/亲油/平衡“hlb”并且对于眼用是可接受的，诸如tritonx114和泰洛沙泊。
[0318]
可以添加到通式(i)的化合物的眼用组合物中的另外的药剂是用作稳定聚合物的缓和剂。稳定聚合物应该是离子/带电示例，优先用于局部眼部使用，更具体地，是一种表面带有负电荷的聚合物，可以表现出(
–
)10
–
50mv的ζ电位以实现物理稳定性，并且能够在水中形成分散体(即水可溶性)。本发明优选的稳定聚合物是一种或多种来自交联聚丙烯酸酯家族的聚合电解质，诸如卡波姆和pemulen(r)，特别是0.1％
–
0.5％w/w的卡波姆974p(聚丙烯酸)。
[0319]
还可以将其他化合物添加至通式(i)的化合物的眼科组合物中以增加载体的粘度。粘度增强剂的示例包括但不限于：多糖，诸如透明质酸及其盐、硫酸软骨素及其盐、葡聚糖、纤维素家族的各种聚合物；乙烯基聚合物；和丙烯酸聚合物。
[0320]
局部眼科产品通常以多剂量形式包装。因此需要防腐剂来防止使用过程中的微生物污染。合适的防腐剂包括：苯扎氯铵、氯丁醇、苯度溴铵、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯乙醇、依地酸二钠、山梨酸、聚季铵盐-1、或本领域技术人员已知的其他试剂。此
类防腐剂通常以0.001％至1.0％w/v的水平使用。通式(i)的单位剂量组合物将是无菌的，但通常未防腐。因此，此类组合物通常不含有防腐剂。
[0321]
肠胃外配制品通常是无菌的。
[0322]
医师或其他技术人员将能够确定通式(i)的化合物的合适剂量，并因此确定应包含在任何特定药物配制品中的本发明化合物的量(无论是单位剂量或其他)。
[0323]
通式(i)的化合物可以与一种或多种用于治疗或预防呼吸系统疾病和病症的其他活性剂组合使用。
[0324]
这种类型的另外的活性剂可以包含在上述药物组合物中，但任选地，它可以与通式(i)的化合物同时或在更早或更晚的时间单独施用。
[0325]
因此，在本发明的另一方面，提供了一种产品，该产品包含用于治疗或预防呼吸系统病症的通式(i)的化合物和另外的药剂，其在受tmem16a调节的影响的疾病或病症，并且尤其是呼吸系统疾病或病症，例如上述疾病和病症之一的治疗中用作同时、按顺序或分开使用的组合制剂。
[0326]
还提供了一种通式(i)的化合物，该化合物与用于治疗或预防呼吸系统病症的另外的药剂组合，在受tmem16a调节的影响的疾病或病症，并且尤其是呼吸系统疾病或病症，例如上述疾病和病症之一的治疗中用作同时、按顺序或分开使用的组合制剂。
[0327]
可包含在药物组合物或与通式(i)的化合物的组合制剂中的合适的另外的活性剂包括：
[0328]
β2肾上腺素能受体激动剂，诸如间羟异丙肾上腺素、异丙基肾上腺素、异丙肾上腺素、舒喘宁、沙丁胺醇、福莫特罗、沙美特罗、茚达特罗、特布他林、异丙喘宁、甲磺酸比托特罗、吡布特罗、奥达特罗、维兰特罗和阿贝特罗；
[0329]
抗组胺药，例如组胺h1受体拮抗剂，诸如氯雷他定、西替利嗪、地氯雷他定、左西替利嗪、非索非那定、阿司咪唑、氮卓斯汀和氯苯那敏或h4受体拮抗剂；
[0330]
阿法链道酶；
[0331]
皮质类固醇，诸如泼尼松、泼尼松龙、氟尼缩松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松、糠酸莫米松和糠酸氟替卡松；
[0332]
白三烯拮抗剂，诸如孟鲁司特和扎鲁司特；
[0333]
抗胆碱能化合物，特别是毒蕈碱拮抗剂，诸如异丙托溴铵、噻托溴铵、格隆溴铵、阿地溴铵和芜地溴铵；
[0334]
cftr修复疗法(例如cftr增效剂、校正剂或放大剂)，诸如依伐卡托、qbw251、巴马卡托(bamacaftor)(vx659)、依来卡托(elexacaftor)(vx445)、vx561/cpt-656、vx152、奥莱卡托(vx440)、glp2737、glp2222、glp2451、pti438、pti801、pti808、fdl-169和fdl-176，以及cftr校正剂，诸如鲁玛卡托和特扎卡托或其组合(例如依伐卡托、特扎卡托和依来卡托的组合)；
[0335]
enac调节剂，特别是enac抑制剂；
[0336]
抗生素；
[0337]
抗病毒药诸如利巴韦林，和神经氨酸酶抑制剂诸如扎那米韦；
[0338]
抗真菌剂，诸如pur1900；
[0339]
气道保湿剂(渗透剂)，诸如高渗盐水和甘露醇以及黏液溶解剂，
诸如n-乙酰半胱氨酸。
[0340]
当另外的活性剂是enac调节剂时，其可以是enac抑制剂，例如阿米洛利、vx-371、azd5634、qbw276、spx-101、bi443651、bi1265162和etd001。在wo 2017/221008、wo 2018/096325、wo 2019/077340和wo 2019/220147中公开了其他合适的enac阻断剂，并且这些申请的任何示例化合物可以与通式(i)的化合物组合使用。与通式(i)化合物组合使用的特别合适的化合物包括具有选自以下的阳离子的化合物：2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)乙基]-6-(4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}哌啶-1-羰基)-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0341]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-{[2-(4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}哌啶-1-基)乙基]氨基甲酰基}-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0342]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-5-[4-({双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}甲基)哌啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0343]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-[(3r)-3-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}吡咯烷-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0344]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-[(3s)-3-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}吡咯烷-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0345]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1r,4r)-4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}环己基]氨基甲酰基}-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0346]
2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1s,4s)-4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}环己基]氨基甲酰基}-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；
[0347]
合适的阴离子为例如卤离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、富马酸根、柠檬酸根、酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、扁桃酸根、甲磺酸根或对甲苯磺酸根。
[0348]
通过以下实例说明本发明。
[0349]
实例
[0350]
本发明通过以下非限制性实例进行说明。
[0351]
实例
[0352]
一般条件：
[0353]
使用电喷雾离子化在lc-ms系统上运行质谱。使用配备waters pda和els检测器的waters acquity uplc系统或shimadzu lcms-2010ev系统运行质谱。[m+h]+是指单一同位素分子量。
[0354]
使用溶剂作为内部氘锁，在配备5mm宽带反向探针的bruker avance iii hd 500mhz、配备5mm broad band observed smartprobe的bruker avance iii hd 250mhz或
400mhzavanceiiihdnanobay上记录nmr谱。除非另有说明，在室温下记录光谱，并使用溶剂峰作为参考。
[0355]
参考以下示例，优选实施例的化合物使用本文所述的方法或本领域已知的其他方法合成。
[0356]
优选实施例的各种起始物质、中间体和化合物可以在适当时使用常规技术诸如沉淀、过滤、结晶、蒸发、蒸馏和色谱法分离和纯化。除非另有说明，所有起始物质均从商业供应商处获得，无需进一步纯化即可使用。这些盐可以通过已知的成盐方法由化合物制备。
[0357]
使用适当的snap柱或柱和梯度，在isolera体系上通过正相硅胶快速柱色谱法纯化化合物。可替代地，使用带有适当snapc18或c18柱和反相洗脱液的isolera或selekt体系在反相硅胶上或通过制备型hplc(诸如果另有说明)纯化化合物。
[0358]
制备型hplc，使用酸性ph值，早期洗脱方法
[0359]
如下进行纯化：在gilsonlc系统waterssunfirec18柱(30mmx100mm，10μm；温度：rt)；梯度：10％-95％b(a＝在水中的0.1％甲酸；b＝在乙腈中的0.1％甲酸)历经14.44min然后95％b持续2.11min；注射体积：1500μl；流速：40ml/min。使用gilson检测器在215nm处记录紫外光谱。
[0360]
制备型hplc，使用酸性ph值，标准洗脱方法
[0361]
通过制备型hplc(酸性ph值，标准洗脱方法)如下进行纯化：在gilsonlc系统waterssunfirec18柱(30mmx100mm，10μm；温度：rt)；梯度：30％-95％b(a＝在水中的0.1％甲酸；b＝在乙腈中的0.1％甲酸)历经11min然后95％b持续2.11min；注射体积：1500μl；流速：40ml/min。使用gilson检测器在215nm处记录紫外光谱。
[0362]
制备型hplc，使用碱性ph值，早期洗脱方法
[0363]
通过制备型hplc(碱性ph值，早期洗脱方法)如下进行纯化：在gilsonlc系统watersxbridgec18柱(30mmx100mm，10μm；温度：rt)；梯度：10％-95％(a＝在水中的0.2％氢氧化铵；b＝在乙腈中的0.2％氢氧化铵)历经14.44min然后95％b持续2.11min；注射体积：1500μl；流速：40ml/min。使用gilson检测器在215nm处记录紫外光谱。
[0364]
制备型hplc，使用碱性ph值，标准洗脱方法
[0365]
通过制备型hplc(碱性ph值，标准洗脱方法)如下进行纯化：在gilsonlc系统watersxbridgec18柱(30mmx100mm，10μm；温度：rt)；梯度：30％-95％(a＝在水中的0.2％氢氧化铵；b＝在乙腈中的0.2％氢氧化铵)历经11min然后95％b持续2.11min；注射体积：1500μl；流速：40ml/min。使用gilson检测器在215nm处记录紫外光谱。
[0366]
如果没有另外说明，分析hplc条件如下：
[0367]
方法a
[0368]
柱：phenomenexkinetix-xbc182.1x100mm，1.7μm
[0369]
柱温：40℃
[0370]
洗脱液：a：h2o+0.1％甲酸，b：乙腈+0.1％甲酸
[0371]
流速：0.6ml/min
[0372]
梯度：0-5.3min5％-100％b，5.3-5.8min100％b，5.8-5.82min
[0373]
100％-5％b，5.82-7.00min5％b
[0374]
方法b
[0375]
柱：waterscsh
tm
c182.1x100mm，1.7μm
[0376]
柱温：40℃
[0377]
洗脱液：a：2mm碳酸氢铵，缓冲至ph10，b：乙腈
[0378]
流速：0.6ml/min
[0379]
梯度：0-5.3min5％-100％b，5.3-5.8min100％b，5.8-5.82min
[0380]
100％-5％b，5.82-7.00min5％b
[0381]
方法c
[0382]
柱：watersbeh
tm
c182.1x100mm，1.7μm
[0383]
柱温：40℃
[0384]
洗脱液：a：2mm碳酸氢铵，缓冲至ph10，b：乙腈
[0385]
流速：0.6ml/min
[0386]
梯度：0-5.3min5％-100％b，5.3-5.8min100％b，5.8-5.82min
[0387]
100％-5％b，5.82-7.00min5％b
[0388]
方法e
[0389]
柱：kinetexcore-shellc182.1x50mm，5μm
[0390]
柱温：40℃
[0391]
洗脱液：a：h2o+0.1％甲酸，b：乙腈+0.1％甲酸
[0392]
流速：1.2ml/min
[0393]
梯度：0-1.20min5％-100％b，1.20-1.30min100％b，1.30-1.31min
[0394]
100％-5％b,1.31-1.7min5％b
[0395]
方法f
[0396]
柱：phenomenexgemini-nxc182x50mm，3μm
[0397]
柱温：40℃
[0398]
洗脱液：a：2mm碳酸氢铵，缓冲至ph10，b：乙腈
[0399]
流速：1ml/min
[0400]
梯度：0-1.80min1％-100％b，1.80-2.10min100％b，2.10-2.30min
[0401]
100％-1％b,2.30-3.50min1％b
[0402]
以下实例旨在说明本发明而不应解释为对其的限制。温度以摄氏度表示。如果没有另外提及，所有蒸发都在真空中进行，优选在约15mmhg和100mmhg(＝20-133mbar)之间。最终产物、中间体和起始材料的结构通过标准分析方法确认，例如微量分析和光谱特性，例如ms、ir和nmr。所用的缩写是本领域常规的缩写。如果未定义，这些术语具有其普遍接受的含义。
[0403]
缩写
[0404]
acoh乙酸
[0405]
aq.水性
[0406]
br宽峰
[0407]
d双重峰
[0408]
dd双重峰的双重峰
[0409]
dce二氯乙烷
[0410]
dcm二氯甲烷
[0411]
dipea二异丙基乙胺
[0412]
dmap4-二甲基氨基吡啶
[0413]
dmfn,n-二甲基甲酰胺
[0414]
edci1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺
[0415]
etoac乙酸乙酯
[0416]
etoh乙醇
[0417]
hoat1-羟基-7-氮杂苯并三唑
[0418]
hatu2-(7-氮杂-1h-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐
[0419]
hplc高压液相色谱
[0420]
ipa异丙醇
[0421]
mecn乙腈
[0422]
meohmeoh
[0423]
ms质谱
[0424]
m多重峰
[0425]
min分钟
[0426]
ml毫升
[0427]
m/z质荷比
[0428]
nmr核磁共振
[0429]
q四重峰
[0430]
rt保留时间
[0431]
s单峰
[0432]
t三重峰
[0433]
tbtun,n,n
′
,n
′‑
四甲基-o-(苯并三唑-1-基)脲鎓四氟硼酸盐tea三乙胺
[0434]
thf四氢呋喃
[0435]
实例的制备
[0436]
实例1.1
[0437]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-环己基-乙酰胺
[0438][0439]
向2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)(75mg，0.34mmol)和dipea(70μl，0.40mmol)在dcm(2ml)中的冷却(0℃)溶液中加入2-环己基乙酰氯(57μl，0.37mmol)。将溶液加热至室温并搅拌1小时。所得混合物用dcm(5ml)稀释并用水(5ml)、盐水(5ml)洗涤，经
na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在meoh(2ml)和7mnh3的meoh溶液(0.5ml)中并允许混合物静置5分钟。将甲醇溶液通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0440]
lc-ms(方法a)：rt 2.10min；ms m/z 348.2＝[m+h]+
[0441]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.16
–
12.08(m,1h),9.80
–
9.68(m,1h),7.97
–
7.83(m,1h),7.42
–
7.09(m,7h),4.13(s,2h),2.17(d,j＝7.0hz,2h),1.82
–
1.74(m,1h),1.72
–
1.59(m,5h),1.27
–
1.11(m,3h),1.02
–
0.93(m,2h)。
[0442]
实例1.2
[0443]
2-苄基-n-(环己基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0444][0445]
向可商购获得的2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸(75mg，0.30mmol)在dmf(2ml)中的溶液中加入edci(63mg，0.33mmol)、dmap(40mg，0.33mmol)和hoat(45mg，0.33mmol)。在室温搅拌5分钟后，加入环己基甲胺(67mg，0.59mmol)并在惰性气氛下继续搅拌16小时。所得混合物用etoac(20ml)稀释，用水(2x10ml)、盐水(2x10ml)洗涤并在真空中浓缩。将粗物质通过制备型hplc(酸性ph，标准洗脱方法)纯化，得到标题化合物，为无色固体。
[0446]
lc-ms(方法a)：rt 2.21min；ms m/z 348.2＝[m+h]+
[0447]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.43(t,j＝5.7hz,1h),8.01(s,1h),7.70(dd,j＝8.5,1.6hz,1h),7.54(d,j＝8.4hz,1h),7.35
–
7.30(m,4h),7.28
–
7.23(m,1h),4.26(s,2h),3.26
–
3.21(m,2h),1.85
–
1.73(m,4h),1.71
–
1.62(m,2h),1.34
–
1.17(m,3h),1.07
–
0.97(m,2h)。
[0448]
实例1.2.1
[0449]
n-(1-金刚烷基甲基)-2-苄基-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0450][0451]
类似于实例1.2由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和1-金刚烷基甲胺制备标题化合物。
[0452]
lc-ms(方法a)：rt 2.67min；ms m/z 400.3＝[m+h]+
[0453]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.47(br.s,1h),8.21
–
8.15(m,1h),8.02(br.s,1h),7.67(d,j＝8.4hz,1h),7.56
–
7.39(m,1h),7.35
–
7.29(m,4h),7.26
–
7.20(m,1h),4.20(s,2h),3.00(d,j＝6.3hz,2h),1.96
–
1.89(m,3h),1.69
–
1.56(m,6h),1.54
–
1.46(m,6h)。
[0454]
实例1.2.2
[0455]
2-苄基-n-[(1-甲基环戊基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0456][0457]
类似于实例1.2由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和(1-甲基环戊基)甲胺制备标题化合物。
[0458]
lc-ms(方法a)：rt 2.22min；ms m/z 348.2＝[m+h]+
[0459]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.48(br s,1h),8.26(t,j＝6.0hz,1h),8.19
–
7.80(m,1h),7.67(d,j＝8.1hz,1h),7.61
–
7.39(m,1h),7.38
–
7.29(m,4h),7.28
–
7.19(m,1h),4.20(s,2h),3.22(d,j＝6.3hz,2h),1.69
–
1.51(m,6h),1.32
–
1.17(m,2h),0.98(s,3h)。
[0460]
实例1.2.3
[0461]
2-苄基-n-[(1r)-1-环己基乙基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0462][0463]
类似于实例1.2由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和(1r)-1-环己基乙胺制备标题化合物。
[0464]
lc-ms(方法a)：rt 2.38min；ms m/z 362.3＝[m+h]+
[0465]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.45(br s,1h),8.15
–
7.83(m,2h),7.66(d,j＝8.5hz,1h),7.47(br s,1h),7.36
–
7.28(m,4h),7.27
–
7.17(m,1h),4.19(s,2h),3.89
–
3.79(m,1h),1.78
–
1.66(m,4h),1.63
–
1.57(m,1h),1.46
–
1.38(m,1h),1.24
–
1.07(m,6h),1.00
–
0.89(m,2h)。
[0466]
实例1.3
[0467]
n-(环庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0468][0469]
步骤1：3,4-二氨基-n-(环庚基甲基)苯甲酰胺
[0470]
[0471]
向环庚基甲胺(2.27ml，15.77mmol)和3,4-二氨基苯甲酸(2.0g，13.14mmol)在thf(50ml)和dmf(20ml)中的溶液中加入tbtu(5.06g，15.77mmol)和tea(5.5ml，39.43mmol)。在室温搅拌19小时后，在真空中浓缩混合物。将粗物质溶解在etoac(50ml)中并用水(2x25ml)洗涤。用etoac(3x50ml)反萃取含水部分，并将合并的有机萃取物用盐水(2x25ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到深棕色浆液。将粗产物通过c18反相色谱法纯化，用在水中的10％-100％mecn洗脱，得到标题化合物，其为浅棕色固体。
[0472]
lc-ms(方法e)：rt 0.96min；ms m/z 262.1＝[m+h]+
[0473]
1h nmr(250mhz,氯仿-d)δ7.22(d,j＝1.9hz,1h),7.08(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),6.67(d,j＝8.0hz,1h),6.13
–
5.92(m,1h),3.81
–
2.90(m,6h),1.85
–
1.33(m,11h),1.32
–
1.14(m,2h)。
[0474]
步骤2：n-(环庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0475]
将2,2-二甲基丁酸(34μl，0.28mmol)、hatu(105mg，0.28mmol)和tea(80μl，0.46mmol)在dmf(1.9ml)中的混合物在室温搅拌1小时，然后用3,4-二氨基-n-(环庚基甲基)苯甲酰胺(步骤1)(60mg，0.23mmol)的dmf(1ml)溶液处理。在室温搅拌24小时后，将混合物用etoac(10ml)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(2x10ml)洗涤。将有机部分经na2so4干燥并在真空中浓缩，并将粗物质通过硅胶色谱法纯化，用庚烷中的0-100％etoac洗脱。将所得残余物溶解在乙酸(1.9ml)中并在60℃搅拌3小时。将混合物用etoac(20ml)稀释并用饱和碳酸氢钠水溶液(3x20ml)洗涤。有机部分经na2so4干燥，并且在真空中浓缩。通过制备型hplc(低ph，早期洗脱方法)纯化残留物，得到标题化合物，其为无色固体。
[0476]
lc-ms(方法a)：rt 2.22min；ms m/z 342＝[m+h]+
[0477]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.27
–
12.17(m,1h),8.41
–
8.25(m,1h),8.11
–
7.86(m,1h),7.70
–
7.58(m,1h),7.58
–
7.39(m,1h),3.11(t,j＝6.3hz,2h),1.79
–
1.69(m,5h),1.67
–
1.59(m,2h),1.58
–
1.44(m,4h),1.43
–
1.33(m,8h),1.22
–
1.13(m,2h),0.70(t,j＝7.4hz,3h)。
[0478]
实例1.3.1
[0479]
n-(环庚基甲基)-2-[(1-羟基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0480][0481]
类似于实例1.3步骤2由3,4-二氨基-n-(环庚基甲基)苯甲酰胺(实例1.3步骤1)和2-(1-羟基环己基)乙酸制备标题化合物。
[0482]
lc-ms(方法a)：rt 2.19min；ms m/z 384.4＝[m+h]+
[0483]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.21(br.s,1h),8.35(t,j＝5.6hz,1h),8.02(s,1h),7.65(d,j＝8.3hz,1h),7.50(d,j＝7.7hz,1h),4.67(br.s,1h),3.10(t,j＝6.3hz,2h),2.92(s,2h),1.80-1.70(m,3h),1.68
–
1.34(m,17h),1.23-1.12(m,3h)。
[0484]
实例1.3.2
[0485]
n-(环庚基甲基)-2-(2-羟基-1-苯基-乙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0486][0487]
类似于实例1.3步骤2由3,4-二氨基-n-(环庚基甲基)苯甲酰胺(实例1.3步骤1)和3-羟基-2-苯基-丙酸制备标题化合物。
[0488]
lc-ms(方法a)：rt 2.46min；ms m/z 392.4＝[m+h]+
[0489]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.56
–
12.39(m,1h),8.40
–
8.28(m,1h),8.19
–
7.89(m,1h),7.70
–
7.63(m,1h),7.61
–
7.40(m,1h),7.39
–
7.34(m,2h),7.34
–
7.28(m,2h),7.25
–
7.20(m,1h),5.00(br s,1h),4.35(t,j＝7.2hz,1h),4.24
–
4.17(m,1h),3.98
–
3.91(m,1h),3.10(t,j＝6.3hz,2h),1.82
–
1.68(m,3h),1.67
–
1.59(m,2h),1.57
–
1.34(m,6h),1.23
–
1.12(m,2h)。
[0490]
实例1.4
[0491]
n-(环己基甲基)-2-[(3-羟基苯基)甲基]-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0492][0493]
步骤1：2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯
[0494][0495]
将2-(3-苄基氧基苯基)乙酸(2.01g，8.3mmol)、hatu(3.16g，8.3mmol)和dipea(3.19ml，18.27mmol)在dmf(50ml)中的溶液在室温搅拌45分钟，然后用3,4-二氨基苯甲酸甲酯(1.38g，8.3mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌18h。在真空中浓缩所得混合物并将残余物在饱和nahco3(100ml)与etoac(125ml)之间分配。将有机层分离，用水(2x75ml)、盐水(2x75ml)洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。将粗物质用meoh(40ml)研磨，过滤固体并在真空烘箱中在40℃干燥3小时。将所得固体悬浮在acoh(25ml)中并在70℃搅拌6小时。在真空中浓缩混合物，并将残余物在饱和nahco3(100ml)与etoac(125ml)之间分配。将有机层用水(2x75ml)、盐水(2x75ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0496]
lc-ms(方法e)：rt 1.05min；ms m/z 373.0＝[m+h]+
[0497]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.10(d,j＝0.9hz,1h),7.79(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.56(d,j＝8.4hz,1h),7.44
–
7.40(m,2h),7.38
–
7.33(m,2h),7.32
–
7.28(m,1h),7.24(t,j＝7.9hz,1h),7.03
–
7.00(m,1h),6.93
–
6.87(m,2h),5.07(s,2h),4.19(s,2h),3.85(s,3h)。
[0498]
步骤2：2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯
[0499][0500]
向2-[(3-苄氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯(步骤1)(95％，700mg，1.79mmol)在etoh(20ml)中的悬浮液中加入10％pd-c(10％，150mg，0.14mmol)。将反应混合物置于氢气气氛下并在室温搅拌6小时。将所得混合物通过塞(过滤材料)过滤，用etoh(45ml)彻底洗涤。真空浓缩滤液，得到标题化合物，其为浅橙色/棕色固体。
[0501]
lc-ms(方法e)：rt 0.83min；ms m/z 283.1＝[m+h]+
[0502]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.09(s,1h),7.78(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.55(d,j＝8.4hz,1h),7.10(t,j＝7.8hz,1h),6.74(d,j＝7.7hz,1h),6.72
–
6.69(m,1h),6.62(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),4.12(s,2h),3.85(s,3h)。
[0503]
步骤3：2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-羧酸
[0504][0505]
将2mlioh水溶液(2.53ml，5.06mmol)加入到2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯(步骤2)(95％，501mg，1.69mmol)在thf(8ml)中的溶液中，并将反应混合物在50℃搅拌4小时。在真空中除去挥发性有机物，然后将所得水性混合物酸化至ph 4。用3:1氯仿:ipa(3x30ml)萃取混合物，并将合并的有机萃取物经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为浅橙色粉末。
[0506]
lc-ms(方法e)：rt 0.73min；ms m/z 269.1＝[m+h]+
[0507]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.48
–
11.55(m,2h),9.37(s,1h),8.10(d,j＝0.8hz,1h),7.81(dd,j＝8.4,1.5hz,1h),7.57(d,j＝8.4hz,1h),7.12(t,j＝7.8hz,1h),6.75(d,j＝7.7hz,1h),6.73
–
6.70(m,1h),6.64(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),4.16(s,2h)。
[0508]
步骤4：n-(环己基甲基)-2-[(3-羟基苯基)甲基]-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0509]
将2-[(3-羟基苯基)甲基]-3h-苯并咪唑-5-羧酸(步骤3)(50mg，0.19mmol)、edci(33mg，0.21mmol)、dmap(46mg，0.37mmol)和hoat(28mg，0.21mmol)在dmf(1ml)中的溶液搅
拌5分钟，然后用环己基甲胺(48.5μl，0.37mmol)处理。将所得混合物在室温搅拌2小时，并在真空中浓缩。将残余物吸收在etoac(5ml)中并将有机物用水(3x5ml)和盐水(5ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过制备型hplc(碱性ph，标准洗脱方法)纯化，随后通过制备型hplc(酸性ph，标准洗脱方法)进一步纯化，得到标题化合物，其为灰白色固体。
[0510]
lc-ms(方法a)：rt 2.00min；ms m/z 364.2＝[m+h]+
[0511]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.52
–
12.34(m,1h),9.33(s,1h),8.39
–
8.28(m,1h),8.13
–
7.84(m,1h),7.76
–
7.60(m,1h),7.60
–
7.33(m,1h),7.11(t,j＝7.8hz,1h),6.74(d,j＝7.6hz,1h),6.71
–
6.66(m,1h),6.63(dd,j＝8.0,2.1hz,1h),4.11(s,2h),3.12(t,j＝6.4hz,2h),1.77
–
1.65(m,4h),1.65
–
1.51(m,2h),1.28
–
1.08(m,3h),1.00
–
0.85(m,2h)。
[0512]
实例1.5
[0513]
2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0514][0515]
步骤1：2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-5-硝基-1h-苯并咪唑
[0516][0517]
将2-(3-苄基氧基苯基)乙酸(2.99g，12.34mmol)、hatu(4.69g，12.34mmol)和dipea(5.27ml，30.17mmol)在dmf(50ml)中的溶液在室温搅拌45分钟，然后用4-硝基苯-1,2-二胺(2.1g，13.71mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌60小时，然后用饱和nahco3(50ml)和etoac(100ml)稀释。分离各相并将有机部分用水(2x50ml)、盐水(2x50ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将残余物溶解在乙酸(40ml)并在70℃搅拌2.5小时。加入另外的acoh(20ml)并在70℃继续搅拌1小时。将反应混合物在真空中浓缩，并将残余物在饱和nahco3(50ml)与etoac(100ml)之间分配。分离有机部分，用水(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过硅胶色谱法用20％-75％etoac的庚烷溶液洗脱来纯化，然后通过c18反相色谱法用10％-100％mecn的水溶液(0.1％甲酸)洗脱来纯化，得到标题化合物，其为亮橙色固体。
[0518]
lc-ms(方法e)：rt 1.17min；ms m/z 360.0＝[m+h]+
[0519]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.94(br s,1h),8.41(br s,1h),8.07(d,j＝8.6hz,
1h),7.65(br s,1h),7.47
–
7.19(m,6h),7.01(s,1h),6.94
–
6.88(m,2h),5.07(s,2h),4.23(s,2h)。
[0520]
步骤2：3-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]苯酚
[0521][0522]
向2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-5-硝基-1h-苯并咪唑(步骤1)(89％，250mg，0.62mmol)在etoh(30ml)中的悬浮液中加入10％pd-c(10％，66mg，0.06mmol)。将反应置于氢气气氛下并在室温搅拌6小时。将所得混合物通过塞(过滤材料)并用etoh(约35ml)彻底洗涤。在真空中浓缩滤液，然后与et2o(3x15ml)一起共沸，得到标题化合物，其为灰色粉末。
[0523]
lc-ms(方法f)：rt 1.19min；ms m/z 240.2＝[m+h]+
[0524]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.61(br.s,1h),9.28(br.s,1h),7.22
–
7.04(m,2h),6.75
–
6.37(m,5h),4.74(br.s,2h),3.95(s,2h)。
[0525]
步骤3：2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0526]
将hatu(119mg，0.31mmol)、2-(1-金刚烷基)乙酸(55mg，0.28mmol)和dipea(109μl，0.63mmol)在dmf(2ml)中的溶液在室温搅拌30分钟，然后用3-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]苯酚(步骤2)(80％，85mg，0.28mmol)处理。将反应混合物在室温搅拌1小时并在真空中浓缩。将残余物吸收在etoac(5ml)中，用水(3x5ml)和盐水(5ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过制备型hplc(碱性ph，标准洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0527]
lc-ms(方法a)：rt 2.28min；ms m/z 416.3＝[m+h]+
[0528]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.14
–
12.03(m,1h),9.73
–
9.57(m,1h),9.31(s,1h),7.99
–
7.81(m,1h),7.46
–
7.04(m,3h),6.75
–
6.56(m,3h),4.03(s,2h),2.05(s,2h),1.93(s,3h),1.71
–
1.52(m,12h)。
[0529]
实例1.5.1
[0530]
n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]-2-(1-甲基环己基)乙酰胺
[0531][0532]
类似于实例1.5步骤3由3-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]酚(实例1.5步骤2)和2-(1-甲基环己基)乙酸制备标题化合物。
[0533]
lc-ms(方法a)：rt 2.11min；ms m/z 378.3＝[m+h]+
[0534]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.07(br s,1h),9.69(s,1h),9.39(br s,1h),7.90(s,1h),7.36(d,j＝8.2hz,1h),7.25
–
7.12(m,1h),7.08(t,j＝7.8hz,1h),6.71(d,j＝
7.6hz,1h),6.69
–
6.66(m,1h),6.60dd,j＝8.0,1.9hz,1h),4.03(s,2h),2.21(s,2h),1.53
–
1.38(m,7h),1.35
–
1.26(m,3h),1.03(s,3h)。
[0535]
实例1.5.2
[0536]
2-环庚基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0537][0538]
类似于实例1.5步骤3由3-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]苯酚(实施例1.5步骤2)和2-环庚基乙酸制备标题化合物。
[0539]
lc-ms(方法a)：rt 2.11min；ms m/z 378.3＝[m+h]+
[0540]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.17
–
12.04(m,1h),9.80
–
9.68(m,1h),9.30(s,1h),7.96
–
7.83(m,1h),7.45
–
7.10(m,2h),7.08(t,j＝7.8hz,1h),6.71(d,j＝7.6hz,1h),6.69
–
6.65(m,1h),6.63
–
6.58(m,1h),4.05
–
4.00(m,2h),2.24
–
2.13(m,2h),2.06
–
1.92(m,1h),1.75
–
1.65(m,2h),1.65
–
1.51(m,4h),1.51
–
1.34(m,4h),1.27
–
1.16(m,2h)。
[0541]
实例1.5.3
[0542]
2-环己基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0543][0544]
类似于实例1.5步骤3由3-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]苯酚(实施例1.5步骤2)和2-环己基乙酸制备标题化合物。
[0545]
lc-ms(方法a)：rt 1.89min；ms m/z 364.3＝[m+h]+
[0546]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.12
–
12.04(m,1h),9.80
–
9.67(m,1h),9.30(s,1h),7.96
–
7.83(m,1h),7.45
–
7.04(m,3h),6.72(d,j＝7.5hz,1h),6.69
–
6.65(m,1h),6.61(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),4.05
–
4.01(m,2h),2.20
–
2.15(m,2h),1.86
–
1.55(m,6h),1.32
–
1.06(m,3h),1.06
–
0.91(m,2h)。
[0547]
实例1.5.4
[0548]
2-(1-金刚烷基)-n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺
[0549][0550]
类似于实例1.5步骤3由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)和2-(1-金刚烷基)
乙酸制备标题化合物。
[0551]
lc-ms(方法c)：rt 3.51min；ms m/z 400.3＝[m+h]+
[0552]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.10(s,1h),9.84
–
9.40(m,1h),8.02
–
7.78(m,1h),7.48
–
7.05(m,7h),4.13(s,2h),2.04(s,2h),1.93(s,3h),1.75
–
1.48(m,12h)。
[0553]
实例1.6
[0554]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酰胺
[0555][0556]
步骤1：2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酸
[0557][0558]
向在-78℃的二异丙基胺(350μl，2.5mmol)在thf(4ml)中的溶液中加入正buli(1.6m于己烷中)(1.56ml，2.5mmol)。将混合物升温至0℃，搅拌30分钟，然后再冷却至-78℃。加入乙酸(95μl，1.66mmol)，随后加入正buli(1.6m于己烷中)(1.04ml，1.66mmol)。将溶液升温至0℃，搅拌30分钟，然后再冷却至-78℃，并加入在thf(1.5ml)中的金刚烷-2-酮(751mg，5.0mmol)。允许所得溶液升温至室温并搅拌1小时。反应通过加入饱和nh4cl溶液(1ml)猝灭。将混合物用二乙醚(10ml)稀释，并且用2m naoh溶液(10ml)洗涤。分离醚层并丢弃。使用2m hcl溶液将水层酸化至ph 2并用etoac(10ml)萃取。将etoac溶液用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为无色粉末。
[0559]
lc-ms(方法e)：rt 0.98min；ms m/z 209.0＝[m-h]-[0560]
1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ11.99(br s,1h),4.48(br s,1h),2.55(s,2h),2.20(d,j＝12.5hz,2h),1.92
–
1.57(m,10h),1.40(d,j＝12.2hz,2h)。
[0561]
步骤2：n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酰胺
[0562][0563]
向2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酸(步骤1)(120mg，0.57mmol)、dipea(209μl，1.2mmol)和2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)(127mg，0.57mmol)在dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(239mg，0.63mmol)并将混合物在室温搅拌1小时。将所得混合物用etoac(10ml)稀释并用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗残余物用混合物
mecn/meoh/水(1:1:1)研磨，并通过过滤收集所得固体。用mecn/水(1:1)和醚洗涤固体，然后在氮气流下干燥，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0564]
lc-ms(方法a)：rt 2.20min；ms m/z 416.3＝[m+h]+
[0565]
1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ12.23
–
12.11(m,1h),10.01
–
9.89(m,1h),7.96
–
7.80(m,1h),7.46
–
7.10(m,7h),5.13
–
5.03(m,1h),4.14(s,2h),2.69(s,2h),2.28
–
2.19(m,2h),1.92(d,j＝12.4hz,2h),1.80(s,1h),1.75
–
1.61(m,7h),1.42(d,j＝11.9hz,2h)。
[0566]
实例1.7
[0567]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0568][0569]
将2-(3-甲氧基苯基)乙酸(83mg，0.50mmol)、hatu(210mg，0.55mmol)和dipea(0.18ml，1.00mmol)溶解在dmf(1.5ml)中，并将混合物在室温搅拌30分钟。加入2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)(150mg，0.50mmol)在dmf(1ml)中的溶液并将反应混合物在室温搅拌过夜。将另外的2-(3-甲氧基苯基)乙酸(42mg，0.25mmol)、hatu(105mg，0.28mmol)和dipea(0.09ml，0.5mmol)在dmf(0.5ml)中搅拌10分钟，然后加入到主反应混合物中。在室温搅拌4.5小时后，将所得混合物用etoac(10ml)和饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)稀释。分离各相并将有机部分用水(2x20ml)、盐水(10ml)洗涤，并在真空中浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱法纯化，用在庚烷中的0-100％etoac的梯度洗脱，得到棕色油状物。将油状物在etoac中研磨，产生灰白色固体。将固体悬浮在乙酸(1ml)中并在60℃搅拌5小时。在冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩并将残余物在etoac(5ml)与饱和碳酸氢钠水溶液(5ml)之间分配。分离各层，将有机层用饱和碳酸氢钠水溶液(3x5ml)洗涤，通过疏水性玻璃料并在真空中浓缩。将所得油状物与mecn一起屡次共沸，得到标题化合物，其为无色固体。
[0570]
lc-ms(方法a)：rt 2.83min；ms m/z 430＝[m+h]+
[0571]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.12(s,1h),9.91
–
9.70(m,1h),8.06
–
7.79(m,1h),7.49
–
7.05(m,3h),6.97
–
6.85(m,2h),6.84
–
6.74(m,1h),4.10(s,2h),3.73(s,3h),2.45(d,j＝7.5hz,2h),2.28
–
2.21(m,1h),1.99
–
1.65(m,12h),1.56
–
1.49(m,2h)。
[0572]
以下制表的实例(表ex1.7)的化合物类似于实例1.7由2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)和适当的可商购获得的酸制备。
[0573][0574]
实例1.7.3
[0575]
n-[[5-[[2-(1-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
[0576][0577]
类似于实例1.7由2-(1-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体c)和2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸制备标题化合物。
[0578]
lc-ms(方法a)：rt 2.69min；ms m/z 439.3＝[m+h]+
[0579]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.02(br.s,1h),9.67(s,1h),7.94(s,1h),7.46
–
7.26(m,2h),7.19(s,1h),4.31(d,j＝5.8hz,2h),2.05(s,2h),1.94(s,3h),1.71
–
1.57(m,12h),1.41(s,9h)。
[0580]
实例1.7.4
[0581]
2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(2-甲氧基-3-吡啶基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0582]
[0583]
类似于实例1.7由2-(1-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体c)和2-(2-甲氧基-3-吡啶基)乙酸制备标题化合物。
[0584]
lc-ms(方法a)：rt 2.37min；ms m/z 431.3＝[m+h]+
[0585]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.03(br s,1h),9.73
–
9.59(m,1h),8.09(dd,j＝5.0,1.8hz,1h),8.01
–
7.79(m,1h),7.55(dd,j＝7.2,1.7hz,1h),7.41
–
7.07(m,2h),6.96(dd,j＝7.2,5.0hz,1h),4.09(s,2h),3.87(s,3h),2.05(s,2h),1.94(s,3h),1.69
–
1.58(m,12h)。
[0586]
实例1.8
[0587]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0588][0589]
将1m bbr3的dcm(0.20ml，0.20mmol)溶液滴加到2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(实例1.7)(44mg，0.10mmol)在dcm(3ml)中的冰冷溶液中。将混合物在冰浴中搅拌5分钟，然后在室温搅拌过夜。将反应混合物在冰浴中再冷却，用另外的1m bbr3的dcm溶液(0.10ml，0.10mmol)处理，并在室温继续搅拌6小时。将水(5ml)缓慢加入到搅拌的反应混合物中。用移液管小心除去大部分水层。在真空中过滤剩余的dcm/水性悬浮液，得到白色固体。将固体溶解在meoh中并通过c18反相色谱法纯化，用10％-100％mecn的水(+0.1％甲酸)溶液洗脱，得到标题化合物，其为无色固体。
[0590]
lc-ms(方法a)：rt 2.57min；ms m/z 416＝[m+h]+
[0591]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.10(s,1h),9.82(s,1h),9.33(s,1h),7.92(s,1h),7.48
–
7.04(m,3h),6.74
–
6.70(m,1h),6.69
–
6.66(m,1h),6.62
–
6.58(m,1h),4.03(s,2h),2.45(d,j＝7.7hz,2h),2.26
–
2.19(m,1h),1.99
–
1.91(m,2h),1.88
–
1.63(m,10h),1.56
–
1.46(m,2h)。
[0592]
实例1.9
[0593]
2-叔丁基-n-[(5-氯-2-羟基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0594][0595]
步骤1：2-叔丁基-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯
[0596][0597]
向3,4-二氨基苯甲酸甲酯(200mg，1.2mmol)、2,2-二甲基丙酸(148mg，1.44mmol)
和dipea(0.25ml，1.44mmol)在dmf(7ml)中的溶液中加入hatu(503mg，1.32mmol)，并将混合物在室温搅拌1小时。加入另外的2,2-二甲基丙酸(148mg，1.44mmol)、dipea(0.25ml，1.44mmol)和hatu(503mg，1.32mmol)，并继续搅拌过夜。将所得混合物用etoac(15ml)稀释并用水(10ml)和盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在乙酸(7ml)中并在60℃加热2小时，然后在70℃加热2小时。在冷却至室温后，将混合物在真空中浓缩.将残余物溶解在etoac(10ml)中，然后用饱和nahco3溶液(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。粗制残余物通过硅胶色谱法纯化，用30％-100％etoac在庚烷中的溶液洗脱，以得到标题化合物，其为浅棕色玻璃状固体。
[0598]
lc-ms(方法e)：rt 0.80min；ms m/z 233.3＝[m+h]+
[0599]
1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ10.01(br s,1h),8.48
–
8.10(m,1h),7.96
–
7.90(m,1h),7.79
–
7.32(m,1h),3.92(s,3h),1.52(s,9h)。
[0600]
步骤2：2-叔丁基-1h-苯并咪唑-5-羧酸
[0601][0602]
向2-叔丁基-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯(步骤1)(213mg，0.92mmol)在meoh(1.5ml)、thf(1.5ml)和水(1.5ml)中的溶液中加入lioh(26mg，1.1mmol)，并将混合物在室温搅拌过夜。加入另外的lioh(26mg，1.1mmol)并将反应在室温搅拌8小时。加入进一步的lioh(79mg，3.3mmol)，并将混合物搅拌30小时。将反应通过加入1m hcl溶液至ph 4猝灭。用etoac(10ml)、chcl3/ipa(1:1)(10ml)萃取含水混合物，并将合并的有机萃取物经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为浅粉色粉末。
[0603]
lc-ms(方法e)：rt 0.77min；ms m/z 219.0＝[m+h]+
[0604]
步骤3：(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲胺
[0605][0606]
在0℃将5-氯-2-甲氧基-苯甲腈(2.0g，11.93mmol)在thf(30ml)中的溶液逐滴加入到氢化铝锂(2.4m于thf中，7.46ml，17.9mmol)在thf(22.5ml)中的溶液中。一旦加入完成，就将混合物升温至室温并搅拌1小时。反应通过在0℃缓慢加入1m naoh溶液(10ml)猝灭。将所得混合物用etoac(50ml)和1m naoh溶液(50ml)稀释并过滤以除去悬浮的固体。将有机层分离，用盐水洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为黄色油状物。
[0607]
lc-ms(方法e)：rt 0.72min；ms m/z 172.0,174.0＝[m+h]+
[0608]
1h nmr(250mhz,氯仿-d)δ7.23
–
7.13(m,2h),6.77(d,j＝8.5hz,1h),3.83(s,3h),3.78(s,2h)。
[0609]
步骤4：2-叔丁基-n-[(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0610][0611]
向2-叔丁基-1h-苯并咪唑-5-羧酸(步骤2)(80mg，0.37mmol)在dmf(1ml)中的溶液中加入dipea(57mg，0.44mmol)和hatu(167mg，0.44mmol)，随后加入(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲胺(步骤3)(90％，84mg，0.44mmol)在dmf(1ml)中的溶液，并将混合物在室温搅拌1小时。所得混合物用etoac(10ml)稀释并用水(10ml)、盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。粗制残余物通过硅胶色谱法纯化，用50％-100％etoac在庚烷中的溶液洗脱，以得到标题化合物，其为浅粉色玻璃状物。
[0612]
lc-ms(方法e)：rt 1.02min；ms m/z 372.0/374.0＝[m+h]+
[0613]
1h nmr(250mhz,甲醇-d4)δ8.08(br s,1h),7.75(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.63
–
7.52(m,1h),7.27
–
7.18(m,2h),6.97(d,j＝8.4hz,1h),4.57(s,2h),3.89(s,3h),1.49(s,9h)。
[0614]
步骤5：2-叔丁基-n-[(5-氯-2-羟基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0615]
向在0℃的2-叔丁基-n-[(5-氯-2-甲氧基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(步骤4)(94％，124mg，0.31mmol)在dcm(1ml)中的溶液中加入1m bbr3的dcm溶液(0.47ml，0.47mmol)，并允许反应混合物在室温搅拌过夜。反应通过逐滴加入饱和nahco3溶液(5ml)猝灭并将所得混合物用etoac(10ml)和饱和nahco3溶液(5ml)稀释。将有机部分分离，用盐水(10ml)洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。通过制备型hplc(碱性ph，标准洗脱方法)纯化粗残留物，得到标题化合物，其为无色粉末。
[0616]
lc-ms(方法a)：rt 1.77min；ms m/z 358.1/360.1＝[m+h]+
[0617]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.08(s,1h),7.74(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.57(d,j＝8.3hz,1h),7.21(d,j＝2.6hz,1h),7.08(dd,j＝8.6,2.6hz,1h),6.79(d,j＝8.6hz,1h),4.54(s,2h),1.49(s,9h)。
[0618]
实例1.10
[0619]
n-[[5-(环庚基甲基氨基甲酰基)-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
[0620][0621]
步骤1：2-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯
[0622][0623]
向2-(叔丁氧基羰基氨基)乙酸(3.45g，19.70mmol)在dmf(100ml)中的搅拌溶液中加入hatu(8.24g，21.67mmol)和dipea(3.78ml，21.67mmol)，并将混合物在室温搅拌10分钟。加入3,4-二氨基苯甲酸甲酯(3.60g，21.67mmol)，并将混合物搅拌17小时。将所得混合物用水(100ml)稀释并用etoac(6x100ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(3x100ml)洗涤，经na2so4干燥，并且在真空中浓缩。将中间体溶解在乙酸(50ml)中并加热至60℃持续80分钟。在真空中浓缩所得混合物并将残余物溶解在etoac(50ml)中。将有机物用饱和碳酸氢钠水溶液(2x30ml)、盐水(2x30ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。通过二氧化硅色谱纯化，用庚烷中的50-100％etoac洗脱，提供标题化合物。
[0624]
lc-ms(方法e)：rt 0.91min；ms m/z 306.1＝[m+h]+
[0625]
1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ12.54(br s,1h),8.12(d,j＝1.1hz,1h),7.80(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.58(d,j＝8.5hz,1h),7.47(t,j＝5.4hz,1h),4.38(d,j＝5.9hz,2h),3.86(s,3h),1.41(s,9h)。
[0626]
步骤2：2-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-羧酸
[0627][0628]
将2-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯(步骤1)(500mg，1.64mmol)加入到lioh(39mg，1.64mmol)在meoh(5ml)、thf(5ml)和水(5ml)的混合物中的溶液中，并在50℃搅拌1小时持续40分钟。加入另外的lioh(39mg，1.64mmol)，在50℃继续搅拌3小时35分钟。加入进一步的lioh(117mg mg，4.91mmol)，将温度增加至60℃并允许反应继续过夜。加入另外的lioh(390mg，16.4mmol)并在60℃继续搅拌6小时。加入最后一部分的lioh(390mg，16.4mmol)，并将混合物搅拌并在60℃加热另外23小时。将所得混合物用1m hcl酸化至ph 4并用etoac(5x10ml)萃取。合并的有机萃取物在真空中浓缩，得到标题化合物，其为无色粉末。
[0629]
lc-ms(方法e)：rt 0.83min；ms m/z 292.0＝[m+h]+
[0630]
1h nmr(250mhz,甲醇-d4)δ8.47
–
8.38(m,1h),8.28
–
8.16(m,1h),7.90
–
7.81(m,1h),4.80
–
4.70(m,2h),1.68
–
1.07(m,9h)。
[0631]
步骤3：n-[[5-(环庚基甲基氨基甲酰基)-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
[0632]
向环庚基甲胺(74μl，0.51mmol)和2-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-羧酸(步骤2)(85％，160mg，0.47mmol)在dmf(3ml)中的溶液中加入hatu(195mg，0.51mmol)，并将混合物搅拌10分钟。加入dipea(90μl，0.51mmol)并将反应混合物在室温搅拌3小时30分钟。将所得混合物用水(5ml)稀释，并用etoac(3x5ml)萃取。将合并的有机萃取
物用盐水(2x5ml)洗涤，经na2so4干燥并真空浓缩。将残余物再溶解于etoac(2ml)中，用饱和碳酸氢钠水溶液(2x2ml)洗涤并在真空中浓缩。通过c18反相色谱法纯化，用在mecn(0.1％氢氧化铵)中的10％-100％水洗脱，得到标题化合物，其为无色固体。
[0633]
lc-ms(方法a)：rt 2.52min；ms m/z 401.3＝[m+h]+
[0634]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.03(s,1h),7.71(dd,j＝8.4,1.3hz,1h),7.57(d,j＝8.4hz,1h),4.51(s,2h),3.24(d,j＝7.0hz,2h),1.91
–
1.78(m,3h),1.76
–
1.68(m,2h),1.67
–
1.59(m,2h),1.59
–
1.42(m,12h),1.33
–
1.23(m,3h)。
[0635]
实例1.10.1
[0636]
2-苄基-n-[(1-甲基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0637][0638]
类似于实例1.10步骤3由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和(1-甲基环己基)甲胺制备标题化合物。
[0639]
lc-ms(方法a)：rt 2.43min；ms m/z 362.2＝[m+h]+
[0640]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.46(br s,1h),8.17(t,j＝6.2hz,1h),8.01(br s,1h),7.70
–
7.61(m,1h),7.57
–
7.39(m,1h),7.36
–
7.28(m,4h),7.27
–
7.20(m,1h),4.20(s,2h),3.17(d,j＝6.4hz,2h),1.55
–
1.46(m,2h),1.46
–
1.18(m,8h),0.88(s,3h)。
[0641]
实例1.10.2
[0642]
2-苄基-n-(环辛基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0643][0644]
类似于实例1.10步骤3由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和环辛基甲胺制备标题化合物。
[0645]
lc-ms(方法a)：rt 2.62min；ms m/z 376.2＝[m+h]+
[0646]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.36(t,j＝5.7hz,1h),8.01(br s,1h),7.67(dd,j＝8.4,1.3hz,1h),7.49(d,j＝8.0hz,1h),7.35
–
7.31(m,4h),7.28
–
7.20(m,1h),4.20(s,2h),3.10(t,j＝6.6hz,2h),1.86
–
1.78(m,1h),1.70
–
1.60(m,4h),1.57
–
1.38(m,8h),1.30
–
1.22(m,2h)。
[0647]
实例2.1
[0648]
n-[[1-[2-[(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)氨基]-2-氧代-乙基]环己基]甲基]氨基甲酸叔丁酯
[0649][0650]
将2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)(50 mg，0.22 mmol)加入到2-[1-[(叔丁氧基羰基氨基)甲基]环己基]乙酸(67 mg，0.25 mmol)、hatu(102 mg，0.27 mmol)和dipea(0.12 ml，0.67 mmol)在dmf(2ml)中的溶液中，并将反应混合物搅拌18小时。将所得混合物在etoac(10 ml)与水(10 ml)之间分配，并分离各相。将有机相用1m lioh水溶液(10 ml)和盐水(10 ml)洗涤。将合并的有机萃取物经mgso4干燥并在真空中浓缩，得到黄色油状物。该油状物通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为无色固体。
[0651]
lc-ms(方法a)：rt 2.61 min；ms m/z 477.3＝[m+h]+
[0652]
1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ7.95(s,1h),7.59
–
7.15(m,7h),4.23(s,2h),3.21(s,2h),2.33(s,2h),1.67
–
1.55(m,4h),1.53
–
1.44(m,13h),1.44
–
1.31(m,2h)。
[0653]
实例2.1.1
[0654]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(4,4-二氟环己基)乙酰胺
[0655][0656]
类似于实例2.1由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)和2-(4,4-二氟环己基)乙酸制备标题化合物。
[0657]
lc-ms(方法a)：rt 1.95 min；ms m/z 384.2＝[m+h]+
[0658]
1h nmr(500 mhz,甲醇-d4)δ7.92(s,1h),7.43(br.s,1h),7.34
–
7.28(m,4h),7.28
–
7.11(m,2h),4.20(s,2h),2.32(d,j＝7.2 hz,2h),2.10
–
1.92(m,3h),1.91
–
1.70(m,4h),1.44
–
1.31(m,2h)。
[0659]
实例2.2
[0660]
n-[1-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯
[0661][0662]
向2-(叔丁氧基羰基氨基)-3-甲氧基-丙酸(36mg，0.16mmol)、2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)(95％，50mg，0.16mmol)和dipea(36μl，0.21mmol)在
dmf(1ml)中的搅拌溶液中加入hatu(60mg，0.16mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2小时。将所得混合物在真空中浓缩，并将残余物用饱和nahco3(10ml)和etoac(10ml)稀释。将有机层分离，用水(2x5ml)、盐水(2x5ml)洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。将粗物质溶解在乙酸(1ml)中并在70℃搅拌2小时。在真空中浓缩所得混合物并将残余物在饱和nahco3(10ml)与etoac(10ml)之间分配。将有机层分离，用水(2x5ml)洗涤并经na2so4干燥。将粗物质通过制备型hplc(酸性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0663]
lc-ms(方法a)：rt 2.80min；ms m/z 483.3＝[m+h]+
[0664]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ7.98(d,j＝1.4hz,1h),7.47(d,j＝8.7hz,1h),7.25(dd,j＝8.7,1.8hz,1h),5.16
–
4.97(m,1h),3.85
–
3.65(m,2h),3.36(s,3h),2.56(d,j＝7.7hz,2h),2.36(t,j＝7.6hz,1h),2.09
–
2.01(m,2h),1.96
–
1.82(m,6h),1.82
–
1.74(m,4h),1.68
–
1.58(m,2h),1.52
–
1.24(m,9h)。
[0665]
以下制表的实例(表ex2.2)的化合物类似于实例2.2由2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)和适当的可商购获得的酸制备。
[0666]
[0667][0668]
实例2.3
[0669]
n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯
[0670][0671]
步骤1：n-甲基-n-[(5-硝基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯
[0672][0673]
将2-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]乙酸(1.4g，7.4mmol)和hatu(3.38g，8.88mmol)在dmf(15ml)中的溶液用4-硝基苯-1,2-二胺(1.36g，8.88mmol)和dipea(2.58ml，14.8mmol)处理，并将混合物在室温搅拌16小时。将所得混合物用etoac(25ml)稀释并用水(3x25ml)洗涤。用etoac(25ml)反萃取合并的含水部分并将合并的有机萃取物用饱和nahco3水溶液(25ml)、盐水(25ml)洗涤，经mgso4干燥并在真空中浓缩。将残余物溶解在乙酸(10ml)中并在70℃搅拌3小时。在真空中浓缩所得混合物并将残余物在nahco3(50ml)与etoac(50ml)之间分配。将有机层分离，用水(3x50ml)、盐水(50ml)洗涤，经mgso4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过硅胶色谱法纯化，用庚烷中的0-100％etoac洗脱，得到标题化合物，其为橙色固体。
[0674]
lc-ms(方法a)：rt 2.67min；ms m/z 307＝[m+h]+
[0675]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.97(br.s,1h),8.43(s,1h),8.08(dd,j＝8.9,2.3hz,1h),7.70(d,j＝8.4hz,1h),4.66(s,2h),2.96(s,3h),1.58
–
1.19(m,9h)。
[0676]
步骤2：n-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯
[0677][0678]
将n-甲基-n-[(5-硝基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]氨基甲酸叔丁酯(步骤1)(99％，500mg，1.62mmol)在etoh(10ml)中的溶液用氮气吹扫(3次)，并用10％pd/c(50％湿的)(5％，86mg，0.04mmol)处理。将混合物置于氢气气氛下并在室温搅拌16小时。将所得混合物通过(过滤材料)过滤并在真空中浓缩，得到标题化合物。
[0679]
lc-ms(方法e)：rt 0.71min；ms m/z 277.1＝[m+h]+
[0680]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.84
–
11.53(m,1h),7.27
–
7.05(m,1h),6.75
–
6.40(m,2h),4.91
–
4.60(m,2h),4.46(s,2h),2.86(s,3h),1.53
–
1.25(m,9h)。
[0681]
步骤3：n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-甲
基-氨基甲酸叔丁酯
[0682]
将2-(2-金刚烷基)乙酸(中间体b步骤3)(103mg，0.53mmol)和hatu(243mg，0.64mmol)在dmf(3ml)中的溶液用dipea(0.19ml，1.06mmol)和n-[(5-氨基-1h-苯并咪唑-2-基)甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(步骤2)(98％，150mg，0.53mmol)处理，并将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物用etoac(20ml)稀释并用水(3x20ml)洗涤。将有机部分经mgso4干燥并在真空中浓缩。通过c18反相色谱法纯化，用在水(0.1％甲酸)中的10％-100％mecn洗脱，得到标题化合物，其为灰白色固体。
[0683]
lc-ms(方法a)：rt 2.86min；ms m/z 453.4＝[m+h]+
[0684]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ7.98(s,1h),7.47(d,j＝8.8hz,1h),7.30
–
7.22(m,1h),4.65(s,2h),3.06
–
2.94(m,3h),2.57(d,j＝7.7hz,2h),2.40
–
2.33(m,1h),2.09
–
2.01(m,2h),1.96
–
1.83(m,6h),1.82
–
1.75(m,4h),1.64(d,j＝12.6hz,2h),1.57
–
1.29(m,9h)。
[0685]
实例2.4
[0686]
n-(环庚基甲基)-2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0687][0688]
向2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-羧酸(中间体d)(90％，61mg，0.20mmol)在dmf(1ml)中的溶液中加入dipea(38μl，0.22mmol)和hatu(82mg，0.22mmol)，随后加入环庚基甲胺(27mg，0.22mmol)在dmf(1ml)中的溶液，并将混合物在室温搅拌1小时。所得混合物用水稀释并用etoac(5ml)萃取。将有机萃取物用盐水(5ml)洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。将粗残余物通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为无色粉末。
[0689]
lc-ms(方法a)：rt 2.91min；ms m/z 390.2＝[m+h]+
[0690]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.38(t,j＝5.2hz,1h),8.04(br s,1h),7.69(d,j＝8.5hz,1h),7.52(d,j＝8.2hz,1h),7.29(d,j＝7.4hz,1h),7.18(t,j＝7.7hz,1h),6.90
–
6.84(m,2h),5.08(dd,j＝9.6,6.9hz,1h),5.05
–
5.00(m,1h),4.98
–
4.93(m,1h),3.11(t,j＝6.3hz,2h),1.80
–
1.70(m,3h),1.66
–
1.61(m,2h),1.58
–
1.52(m,2h),1.51
–
1.43(m,2h),1.42
–
1.35(m,2h),1.21
–
1.14(m,2h)。
[0691]
实例2.5
[0692]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[羟基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0693][0694]
步骤1：2-(2-金刚烷基)-n-[2-[甲氧基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0695][0696]
类似于实例2.2由2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)和2-甲氧基-2-苯基-乙酸制备标题化合物。
[0697]
lc-ms(方法a)：rt 2.88min；ms m/z 430.3＝[m+h]+
[0698]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.42
–
12.32(m,1h),9.94
–
9.70(m,1h),8.06
–
7.80(m,1h),7.51
–
7.06(m,7h),5.61
–
5.49(m,1h),3.36(s,3h),2.48
–
2.41(m,2h),2.27
–
2.19(m,1h),1.98
–
1.91(m,2h),1.88
–
1.64(m,10h),1.56
–
1.47(m,2h)。
[0699]
步骤2：2-(2-金刚烷基)-n-[2-[羟基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0700]
将1m bbr3的dcm溶液(0.37ml，0.37mmol)逐滴加入到2-(2-金刚烷基)-n-[2-[甲氧基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(步骤1)(53mg，0.12mmol)在dcm(3ml)中的溶液中，并将混合物在室温搅拌过夜。允许所得混合物在室温静置2天，此时溶剂蒸发，得到白色/黄色固体。将固体悬浮在水(5ml)中并进行超声处理。使用饱和碳酸氢钠水溶液将酸性含水部分调节至ph 8。加入etoac(10ml)并将混合物进行超声处理直到全部固体溶解。将有机层分离，用水洗涤并通过相分离柱。将混合物在真空中浓缩，并将粗产物悬浮在meoh(1ml)中并过滤。将滤液在真空中浓缩，然后将残余物悬浮在meoh(1ml)中，短暂加热并进行超声处理。在冷却至室温后，过滤悬浮液，丢弃固体，并将滤液通过c18反向色谱法纯化，用在水(+0.1％甲酸)中的10％-100％mecn洗脱，得到标题化合物，其为无色固体。
[0701]
lc-ms(方法a)：rt 2.53min；ms m/z 416.3＝[m+h]+
[0702]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ7.93(d,j＝1.8hz,1h),7.53
–
7.48(m,2h),7.45(d,j＝8.6hz,1h),7.38
–
7.31(m,2h),7.31
–
7.25(m,1h),7.25
–
7.20(m,1h),5.97(s,1h),2.59
–
2.52(m,2h),2.39
–
2.32(m,1h),2.09
–
2.00(m,2h),1.95
–
1.73(m,10h),1.68
–
1.58(m,2h)。
[0703]
实例3.1
[0704]
2-环己基-n-(2-苯基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺
[0705][0706]
向2-苯基-1h-苯并咪唑-5-胺(50mg，0.24mmol)和dipea(84μl，0.48mmol)在dcm(5ml)中的冷却的(0℃)溶液逐滴加入2-环己基乙酰氯(42mg，0.26mmol)，并将混合物在室温搅拌1小时。将所得混合物用饱和碳酸氢钠溶液(5ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化得到标题化合物。
[0707]
lc-ms(方法a)：rt 2.29min；ms m/z 334.2＝[m+h]+
[0708]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ＝12.96
–
12.55(m,1h),9.98
–
9.71(m,1h),8.27
–
7.95(m,3h),7.66
–
7.06(m,5h),2.29
–
2.15(m,2h),1.88
–
1.54(m,6h),1.38
–
1.09(m,3h),1.06
–
0.90(m,2h)。
[0709]
实例3.2
[0710]
n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)金刚烷-1-甲酰胺
[0711][0712]
向2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺(中间体a)(60mg，0.27mmol)和dipea(56μl，0.32mmol)在dmf(1ml)中的冷却的(0℃)溶液中加入金刚烷-1-羰基氯化物(59mg，0.30mmol)。将溶液加热至室温并搅拌1小时。所得混合物用etoac(5ml)稀释并用水(5ml)、盐水(5ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将残余物悬浮在水(1.5ml)和mecn(0.5ml)中并过滤，用醚和庚烷洗涤，然后在氮气流下干燥，得到标题化合物。
[0713]
lc-ms(方法a)：rt 2.50min；ms m/z 386.3＝[m+h]+
[0714]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.14(s,1h),9.06
–
8.97(m,1h),7.92
–
7.82(m,1h),7.41
–
7.21(m,7h),4.13(s,2h),2.04
–
1.99(m,3h),1.93
–
1.90(m,6h),1.72
–
1.69(m,6h)。
[0715]
实例3.3
[0716]
n-(环庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0717][0718]
步骤1：2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-5-溴-7-氟-1h-苯并咪唑
[0719][0720]
向2-(3-苄基氧基苯基)乙酸(650mg，2.68mmol)在dmf(10ml)中的溶液中加入hatu(1113mg，2.93mmol)，随后加入dipea(0.85ml，4.88mmol)。将混合物在氮气下在室温搅拌30分钟，然后加入5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺(500mg，2.44mmol)。在室温搅拌过夜后，将所得混合物用etoac(50ml)稀释并用水(3x50ml)和盐水(3x50ml)洗涤。有机部分经na2so4干燥，并且在真空中浓缩。将所得黑色油状物吸收在乙酸(10ml)中并在70℃加热3小时，然后允许冷却至室温。将混合物用水(100ml)稀释，然后用etoac(50ml)萃取。将有机萃取物用水(2x50ml)、饱和nahco3水溶液(50ml)、盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过二氧化硅色谱法纯化，用在庚烷中的0-100％etoac洗脱，得到标题化合物，其为淡棕色固体。
[0721]
lc-ms(方法e)：rt 1.31min；ms m/z 411.0/413.0＝[m+h]+
[0722]
1h nmr(250mhz,dmso-d6)δ12.71(br.s,1h),7.51(s,1h),7.45
–
7.29(m,5h),7.28
–
7.19(m,2h),7.01-6.97(m,1h),6.93-6.86(m,2h),5.07(s,2h),4.15(s,2h)。
[0723]
步骤2：2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-n-(环庚基甲基)-7-氟-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0724][0725]
所有试剂根据以下程序装入coware设备(一氧化碳生成系统)；
[0726]
向a室中装入2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-5-溴-7-氟-1h-苯并咪唑(步骤1)(83％，200mg，0.40mmol)、碳酸钠(128mg，1.21mmol)和xantphos pd-g3(第三代g3 buchwald预催化剂)(19mg，0.020mmol)。加入甲苯(5ml)，然后加入环庚基甲胺(77mg，0.61mmol)。将混合物用氮气脱气5分钟。该时间后将在甲苯(5ml)中的甲酸(46μl，1.21mmol)加入到b室中，然后加入甲磺酰氯(94μl，1.21mmol)。将装置用氮气再脱气2分钟，然后密封。将tea(338μl，2.42mmol)加入到b室中(以产生co气体)。将密封的体系在100℃加热过夜。将来自室a的所得混合物在真空中浓缩，并将残余物吸收在etoac(50ml)中。将混合物用水(2x25ml)、盐水(25ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。将粗物质通过二氧化硅色谱法纯化，用在庚烷中的0-100％etoac洗脱，得到标题化合物，其为淡黄色固体。
[0727]
lc-ms(方法e)：rt 1.35min；ms m/z 486.2＝[m+h]+
[0728]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ13.20-12.70(m,1h),8.46(t,j＝5.6hz,1h),8.00
–
7.74(m,1h),7.48(d,j＝11.5hz,1h),7.43(d,j＝7.1hz,2h),7.36(t,j＝7.3hz,2h),7.33-7.29(m,1h),7.25(t,j＝7.9hz,1h),7.01(s,1h),6.94
–
6.88(m,2h),5.08(s,2h),4.19(s,2h),3.11(t,j＝6.3hz,2h),1.80
–
1.67(m,3h),1.67-1.59(m,2h),1.58
–
1.34(m,6h),1.22-1.13(m,2h)。
[0729]
步骤3：n-(环庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0730]
向2-[(3-苄基氧基苯基)甲基]-n-(环庚基甲基)-7-氟-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(步骤2)(75mg，0.15mmol)在etoh(25ml)中的溶液中加入10％pd/c(50％湿的)(5％，33mg，0.015mmol)，将混合物置于在氢气气氛下并在室温搅拌16小时。将所得混合物通过(过滤材料)过滤，用etoh(20ml)彻底洗涤。将滤液在真空中浓缩，将粗产物通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为白色固体。
[0731]
lc-ms(方法a)：rt 2.96min；ms m/z 396.2＝[m+h]+
[0732]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.69(br.s,1h),9.35(s,1h),8.45(t,j＝5.7hz,1h),7.83(br.s,1h),7.47(d,j＝11.8hz,1h),7.11(t,j＝7.8hz,1h),6.74(d,j＝7.7hz,1h),6.71-6.69(m,1h),6.63(dd,j＝8.0,1.9hz,1h),4.12(s,2h),3.10(t,j＝6.3hz,2h),1.80
–
1.67(m,3h),1.67-1.58(m,2h),1.58
–
1.33(m,6h),1.21-1.12(m,2h)。
[0733]
实例3.3.1
[0734]
n-(环庚基甲基)-6-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0735][0736]
通过用4-溴-5-氟-苯-1,2-二胺代替5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺(步骤1)，类似于实例3.3(步骤1-3)制备标题化合物。
[0737]
lc-ms(方法a)：rt 2.71min；ms m/z 396.2＝[m+h]+
[0738]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.44(br s,1h),8.28
–
8.23(m,1h),7.75(d,j＝6.2hz,1h),7.48(d,j＝10.5hz,1h),7.13(t,j＝7.8hz,1h),6.75(d,j＝7.7hz,1h),6.73
–
6.71(m,1h),6.67(dd,j＝8.0,1.8hz,1h),4.21(s,2h),3.10(t,j＝6.2hz,2h),1.75
–
1.70(m,3h),1.67
–
1.61(m,2h),1.57
–
1.52(m,2h),1.50
–
1.45(m,2h),1.42
–
1.36(m,2h),1.22
–
1.15(m,2h)。
[0739]
实例3.3.2
[0740]
n-(环庚基甲基)-4-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0741][0742]
通过用4-溴-3-氟-苯-1,2-二胺代替5-溴-3-氟-苯-1,2-二胺(步骤1)，类似于实施例3.3(步骤1-3)制备标题化合物。
[0743]
lc-ms(方法a)：rt 2.90min；ms m/z 396.2＝[m+h]+
[0744]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.35(br s,1h),8.14(br s,1h),7.37
–
7.33(m,1h),7.31
–
7.26(m,1h),7.10(t,j＝7.8hz,1h),6.73(d,j＝7.7hz,1h),6.71
–
6.67(m,1h),6.62(dd,j＝8.0,1.9hz,1h),4.10(s,2h),3.11(t,j＝6.2hz,2h),1.77
–
1.70(m,3h),1.67
–
1.60(m,2h),1.58
–
1.52(m,2h),1.51
–
1.44(m,2h),1.43
–
1.35(m,2h),1.22
–
1.14(m,2h)。
[0745]
实例3.4
[0746]
n-[2-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯
[0747][0748]
向3-(叔丁氧基羰基氨基)丙酸(75mg，0.40mmol)、2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨
基苯基)乙酰胺(中间体b)(95％，125mg，0.40mmol)和dipea(90μl，0.52mmol)在dmf(2ml)中的搅拌溶液中加入hatu(151mg，0.40mmol)，并将反应混合物在室温搅拌2小时。将所得混合物在真空中浓缩，并将残余物在饱和nahco3(10ml)与etoac(10ml)之间分配。将有机层分离，用水(2x5ml)、盐水(2x5ml)洗涤，经na2so4干燥，并在真空中浓缩。将所得粗物质溶解在乙酸(2ml)中并在70℃搅拌2小时。在真空中浓缩混合物并将残余物在饱和nahco3(10ml)与etoac(10ml)之间分配。将有机层用水(2x5ml)洗涤并经na2so4干燥。将粗物质通过制备型hplc(碱性ph，早期洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为灰白色粉末。
[0749]
lc-ms(方法a)：rt 2.46min；ms m/z 453.3＝[m+h]+
[0750]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ7.92(s,1h),7.43(br s,1h),7.18(br s,1h),3.50(t,j＝7.0hz,2h),3.02(t,j＝6.9hz,2h),2.56(d,j＝7.7hz,2h),2.36(t,j＝7.7hz,1h),2.05(d,j＝14.6hz,2h),1.98
–
1.83(m,6h),1.83
–
1.73(m,4h),1.64(d,j＝12.5hz,2h),1.45
–
1.20(m,9h)。
[0751]
实例3.4.1
[0752]
2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3,5-二甲基异噁唑-4-基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺
[0753][0754]
类似于实例3.4由2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺(中间体b)和2-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)乙酸制备标题化合物。
[0755]
lc-ms(方法a)：rt 2.56min；ms m/z 419.4＝[m+h]+
[0756]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.06(br.s,1h),9.82(br.s,1h),8.07
–
7.78(m,1h),7.48
–
7.03(m,2h),3.90(s,2h),2.45(d,j＝7.7hz,2h),2.32(s,3h),2.26
–
2.20(m,1h),2.08(s,3h),1.98
–
1.90(m,2h),1.89
–
1.66(m,10h),1.56
–
1.47(m,2h)。
[0757]
实例3.5
[0758]
2-苄基-n-(2,2-二甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺
[0759][0760]
将2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸(75mg，0.3mmol)在dmf(2ml)中的溶液用edci(63mg，0.33mmol)、dmap(40mg，0.33mmol)和hoat(45mg，0.33mmol)处理。在室温搅拌5分钟后，加入2,2-二甲基丙-1-胺(52mg，0.59mmol)，并将反应混合物在惰性气氛下在室温搅拌16小时。所得混合物用etoac(20ml)稀释并用水(2x10ml)、盐水(2x10ml)洗涤并在真空中浓
缩。将粗产物通过hplc(酸性ph，标准洗脱方法)纯化，得到标题化合物，其为无色固体。
[0761]
lc-ms(方法a)：rt 1.89min；ms m/z 322.2＝[m+h]+
[0762]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.69
–
12.33(m,1h),8.29
–
8.20(m,1h),8.16
–
7.86(m,1h),7.67(d,j＝8.3hz,1h),7.59
–
7.39(m,1h),7.36
–
7.28(m,4h),7.27
–
7.20(m,1h),4.20(s,2h),3.12(d,j＝6.4hz,2h),0.90(s,9h)。
[0763]
实例3.5.1
[0764]
2-苄基-n-(1,1,2,2-四甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺et4146
[0765][0766]
类似于实例3.5由2-苄基-1h-苯并咪唑-5-羧酸和2,3,3-三甲基丁-2-胺制备标题化合物。
[0767]
lc-ms(方法a)：rt 2.31min；ms m/z 350.2＝[m+h]+
[0768]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.45(s,1h),7.89(s,1h),7.55(dd,j＝8.4,1.4hz,1h),7.47(d,j＝8.3hz,1h),7.34
–
7.29(m,4h),7.26
–
7.21(m,1h),7.05(s,1h),4.19(s,2h),1.42(s,6h),0.99(s,9h)。
[0769]
中间体的制备
[0770]
中间体a
[0771]
2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺
[0772][0773]
步骤1：2-苄基-6-硝基-1h-苯并咪唑
[0774][0775]
将dipea(4.56ml，26.12mmol)、2-苯基乙酸(1.60g，11.75mmol)、hatu(4.47g，11.75mmol)和4-硝基苯-1,2-二胺(2.0g，13.06mmol)在dmf(50ml)中的溶液在室温搅拌72小时。所得混合物用etoac(60ml)稀释并用水(2x50ml)、盐水(2x50ml)洗涤，经mgso4干燥并在真空中浓缩。将粗物质吸收在乙酸(50ml)中并在60℃搅拌20小时。将混合物在真空中浓缩，并将所得残余物在etoac(30ml)与冷的饱和nahco3水溶液(30ml)之间分配。分离各相并将有机物用水(2x30ml)、盐水(30ml)洗涤，经mgso4干燥并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为红色粘稠油状物。
[0776]
lc-ms(方法e)：rt 1.00min；ms m/z 254.0＝[m+h]+
[0777]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ12.98(br s,1h),8.40(s,1h),8.07(dd,j＝8.9,2.3hz,1h),7.66(d,j＝8.9hz,1h),7.40
–
7.30(m,4h),7.30
–
7.21(m,1h),4.26(s,2h)。
[0778]
步骤2：2-苄基-1h-苯并咪唑-5-胺
[0779]
向2-苄基-5-硝基-1h-苯并咪唑(步骤1)(3.1g，12.24mmol)在meoh(40.5ml)和乙酸(13.5ml)中的冷却的(0℃)溶液中加入锌粉(4.8g，73.44mmol)，并允许反应混合物升温至室温并搅拌20分钟。将所得混合物通过(过滤材料)过滤，用meoh彻底洗涤。在真空中浓缩滤液，粗残余物溶解在etoac(50ml)和饱和nahco3水溶液(50ml)中。过滤所得两相混合物，然后分离滤液的各相。用chcl3/ipa(2:1,3x20ml)萃取水层，在真空中浓缩合并的有机部分。将粗物质溶解在3m hcl水溶液中(溶解需要加热)，然后用2m naoh处理直到存在固体沉淀物。过滤无法分离产物，所以将合并的固体和滤液在真空中浓缩，得到棕色油状物。通过c18反相柱色谱法纯化，用在水(0.1％甲酸)中的10％-100％mecn洗脱，得到标题化合物，其为粉色玻璃状固体。
[0780]
lc-ms(方法e)：rt 0.65min；ms m/z 224.2＝[m+h]+
[0781]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.41
–
7.28(m,6h),6.82(d,j＝1.7hz,1h),6.78(dd,j＝8.7,2.0hz,1h),4.35(s,2h)。
[0782]
中间体b
[0783]
2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺
[0784][0785]
步骤1：2-(2-金刚烷亚基)乙酸乙酯
[0786][0787]
将2-二乙氧基磷酰基乙酸乙酯(7.26ml，36.61mmol)滴加到冷却的(0℃)nah的悬浮液中，60％分散在矿物油(1.86g，46.6mmol)的thf(100ml)溶液中。在0℃搅拌30min后，加入金刚烷-2-酮(5.0g，33.28mmol)，并使混合物升温至室温并搅拌2小时。将所得混合物用dcm(100ml)稀释，并用水(100ml)洗涤。用dcm(100ml)萃取含水部分，并将合并的有机萃取物经mgso4干燥并真空浓缩，得到无色油状物。将油状物通过硅胶色谱法纯化，用0-20％etoac的庚烷溶液洗脱，得到标题化合物，其为无色油状物。
[0788]
lc-ms(方法b)：rt 1.43min；ms m/z 221.3＝[m+h]+
[0789]
1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ5.58(s,1h),4.14(q,j＝7.1hz,2h),4.06(s,1h),2.43(s,1h),2.00
–
1.90(m,6h),1.88
–
1.78(m,6h),1.27(t,j＝7.1hz,3h)。
[0790]
步骤2：2-(2-金刚烷基)乙酸乙酯
[0791][0792]
将2-(2-金刚烷亚基)乙酸乙酯(步骤1)(95％，14.0g，60.37mmol)和pd/c(10％，6.42g，6.04mmol)在etoh(125ml)中的悬浮液置于氢气气氛下并搅拌18小时。将所得混合物通过玻璃滤纸过滤并用etoh(2x10ml)洗涤滤饼。真空浓缩滤液，得到标题化合物，其为无色油状物。
[0793]
lc-ms(方法b)：rt 1.47min；ms m/z 223.0＝[m+h]+
[0794]
1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ4.12(q,j＝7.1hz,2h),2.44(d,j＝7.6hz,2h),2.23(t,j＝7.6hz,1h),1.91
–
1.75(m,8h),1.71(d,j＝10.9hz,4h),1.62
–
1.50(m,3h),1.25(t,j＝7.1hz,3h)。
[0795]
步骤3：2-(2-金刚烷基)乙酸
[0796][0797]
将2-(2-金刚烷基)乙酸乙酯(步骤2)(100％，18.3g，82.31mmol)在meoh(200ml)中的溶液和2m氢氧化钠水溶液(82.31ml，164.63mmol)在70℃搅拌2小时。使混合物冷却至室温并真空浓缩。将所得溶液用水(200ml)稀释并加入6m hcl水溶液(～30ml)，使得形成白色沉淀物。加入etoac(300ml)并分离各相。用etoac(200ml)进一步萃取含水部分，并将合并的有机萃取物用盐水(200ml)洗涤，经mgso4干燥并真空浓缩，得到标题化合物，其为白色固体。
[0798]
lc-ms(方法b)：rt 1.15min；ms m/z 193.4＝[m+h]+
[0799]
1h nmr(500mhz,氯仿-d)δ2.50(d,j＝7.6hz,2h),2.24(t,j＝7.5hz,1h),1.93
–
1.77(m,8h),1.74(d,j＝11.2hz,4h),1.56(d,j＝12.5hz,2h)。
[0800]
步骤4：2-(2-金刚烷基)-n-(4-氨基-3-硝基-苯基)乙酰胺
[0801][0802]
将hatu(13.66g，35.91mmol)加入到2-(2-金刚烷基)乙酸(步骤3)(6.34g，32.65mmol)在dmf(60ml)中的冷却(0℃)溶液中。经1分钟逐滴加入dipea(8.53ml，48.97mmol)并将所得溶液在0℃搅拌5分钟和在室温搅拌10分钟。将溶液冷却回到0℃并加入2-硝基苯-1,4-二胺(5.0g，32.65mmol)。将所得溶液在0℃搅拌1小时，并在升温至室温后，用水(60ml)稀释。加入etoac(100ml)和更多的水(40ml)，并分离各层。用etoac(100ml)萃取水层，并将合并的有机萃取物用饱和碳酸氢钠水溶液(2x100ml)、10％碳酸钾溶液(2x100ml)洗涤并真空过滤。将双相滤液放入分液漏斗中并分离各层。将有机层通过相分离小柱并真空浓缩，得到深黑色/棕色/红色胶状物。加入dcm(～80ml)并搅拌悬浮液。加入更多的dcm，并将悬浮液真空过滤，用dcm洗涤并真空干燥，得到标题化合物，其为红
色/棕色固体。
[0803]
lc-ms(方法b)：rt 1.22min；ms m/z 330.2＝[m+h]+
[0804]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.88(s,1h),8.40(d,j＝2.5hz,1h),7.52(dd,j＝9.1,2.5hz,1h),7.31(s,2h),7.03
–
6.90(m,1h),2.41(d,j＝7.6hz,2h),2.21(t,j＝7.5hz,1h),1.95
–
1.60(m,12h),1.56
–
1.46(m,2h)。
[0805]
步骤5：2-(2-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺
[0806][0807]
将2-(2-金刚烷基)-n-(4-氨基-3-硝基-苯基)乙酰胺(步骤4)(4.0g，12.14mmol)在etoh(60ml)中的溶液用氮气吹扫并用pd/c(10％，1.03g，0.97mmol)处理。将混合物置于氢气气氛下并在室温搅拌过夜。将所得混合物通过(过滤材料)过滤，用etoac洗涤，并在真空中浓缩，得到标题化合物，其为棕色泡沫。
[0808]
lc-ms(方法b)：rt 0.97min；ms m/z 300.2＝[m+h]+(100％于215nm处)
[0809]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.27(s,1h),6.81(d,j＝2.3hz,1h),6.53(dd,j＝2.3,6.5hz,1h),6.38(d,j＝6.4hz,1h),4.60
–
4.07(m,4h),2.33(d,j＝7.6hz,2h),2.20
–
2.13(m,1h),1.95
–
1.62(m,12h),1.55
–
1.42(m,2h)。
[0810]
中间体c
[0811]
2-(1-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺
[0812][0813]
步骤1：2-(1-金刚烷基)-n-(4-氨基-3-硝基-苯基)乙酰胺
[0814][0815]
将2-硝基苯-1,4-二胺(3.15g，20.59mmol)加入到2-(1-金刚烷基)乙酸(4.0g，20.59mmol)、hatu(8.61g，22.65mmol)和dipea(5.38ml，30.88mmol)在dmf(20ml)中的溶液中。在室温搅拌18小时后，将反应混合物在etoac(100ml)和水(100ml)之间分配。黑色沉淀物在双相混合物中形成。滤出固体并将其丢弃。分离各相，并将有机层用水(100ml)和盐水(2x50ml)洗涤，经mgso4干燥，真空浓缩，得到棕色/黑色油状物。将油状物在dcm(～40ml)中研磨，并过滤所得悬浮液，得到标题化合物，其为红色/黑色固体。
[0816]
lc-ms(方法b)：rt 1.24min；ms m/z 330.2＝[m+h]+
[0817]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.73(s,1h),8.39(d,j＝2.5hz,1h),7.50(dd,j＝9.1,2.5hz,1h),7.29(s,2h),6.96(d,j＝9.1hz,1h),2.00(s,2h),1.93(s,3h),1.69
–
1.63(m,3h),1.63
–
1.54(m,9h)。
[0818]
步骤2：2-(1-金刚烷基)-n-(3,4-二氨基苯基)乙酰胺
[0819][0820]
将2-(1-金刚烷基)-n-(4-氨基-3-硝基-苯基)乙酰胺(步骤1)(4.82g，14.63mmol)和pd/c(10％，1.24g，1.17mmol)在etoh(50ml)中的悬浮液置于氢气气氛下并搅拌18小时。将所得混合物通过(过滤材料)过滤并用etoh(3x10ml)洗涤固体。真空浓缩滤液，得到标题化合物，其为紫色固体。
[0821]
lc-ms(方法b)：rt 0.93min；ms m/z 300.3＝[m+h]+
[0822]
1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.12(s,1h),6.83(d,j＝2.3hz,1h),6.52(dd,j＝8.2,2.3hz,1h),6.38(d,j＝8.2hz,1h),4.54
–
4.22(m,4h),1.96
–
1.88(m,5h),1.70
–
1.54(m,12h)。
[0823]
中间体d
[0824]
2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-羧酸
[0825][0826]
步骤1：2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯
[0827][0828]
向2,3-二氢苯并呋喃-3-羧酸(50mg，0.30mmol)在dmf(2ml)中的溶液中加入dipea(59μl，0.34mmol)和hatu(127mg，0.34mmol)，然后加入3,4-二氨基苯羧酸甲酯(56mg，0.34mmol)，并将混合物在室温搅拌16小时。所得混合物用水(5ml)稀释并用etoac(2x5ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(5ml)洗涤并在真空中浓缩。将粗残余物溶解在乙酸(2ml)中并在60℃加热3小时。所得混合物用etoac(10ml)稀释并用饱和nahco3溶液(2x10ml)洗涤，经na2so4干燥并在真空中浓缩。粗制残余物通过硅胶色谱法纯化，用0-100％etoac在庚烷中的溶液洗脱，以得到标题化合物，其为淡橙色玻璃状物。
[0829]
lc-ms(方法e)：rt 0.97min；ms m/z 294.9＝[m+h]+
[0830]
1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.22(br s,1h),7.91(d,j＝8.5hz,1h),7.55(br s,1h),7.23
–
7.14(m,2h),6.92
–
6.84(m,2h),5.09
–
5.03(m,1h),4.96(t,j＝9.4hz,1h),4.87-4.83(模糊的m,1h),3.91(s,3h)。
[0831]
步骤2：2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-羧酸
[0832]
向2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-甲酸甲酯(步骤1)(90％，69mg，
0.21mmol)在meoh(0.3ml)、thf(0.3ml)和水(0.3ml)中的溶液中加入lioh(5.6mg，0.23mmol)，并将混合物在室温搅拌2小时。加入进一步的lioh(5.6mg，0.23mmol)并将混合物加热至50℃过夜。将所得混合物冷却至室温，并使用1m hcl酸化至ph 4。将混合物用水稀释并用氯仿/ipa(2:1)萃取。将合并的有机萃取物通过疏水性玻璃料并在真空中浓缩，得到标题化合物。
[0833]
lc-ms(方法e)：rt 0.84min；ms m/z 280.9＝[m+h]+
[0834]
生物实例
[0835]
用于检测重组细胞中的tmem16a活性的自动化全细胞膜片钳测定细胞培养和制备
[0836]
在t-75烧瓶中在hams f-12培养基中用补充有10％(v/v)胎牛血清、青霉素-链霉素(10,000u/ml/10000μg/ml)、g-418(750μg/ml)、l-谷氨酰胺(2mm)和碳酸氢钠溶液(7.5％v/v)的coon’s modification(sigma)培养稳定表达人类tmem16a(tmem16aabc变体；dr luis galietta，insituto giannina，意大利)的fisher大鼠甲状腺(frt)细胞。通过使用detachin(bms biotechnology)和0.25％(w/v)胰蛋白酶-edta的2:1(v/v)混合物分离，收获约90％汇合细胞用于实验。使用由cho-s-sfm ii(sigma)、25mm hepes(sigma)和大豆胰蛋白酶抑制剂(sigma)组成的培养基将细胞稀释至3.5
–
4.5x106个细胞/ml的密度。
[0837]
全细胞膜片钳记录
[0838]
frt-tmem16a细胞使用全自动平面膜片钳系统(qpatch,sophion)进行全细胞膜片钳。简而言之，一旦在细胞和平面记录阵列之间建立高电阻(gohm)密封，则使用抽吸脉冲使膜片破裂，以建立膜片钳技术的全细胞记录配置。该测定使用以下溶液(所有试剂来自sigma)：
[0839]
细胞内溶液(mm)：n-甲基-d-葡糖胺130、cacl
2 18.2、mgcl
2 1、hepes 10、egta 10、bapta 20、mg-atp 2，ph 7.25，325mosm，含蔗糖。
[0840]
细胞外溶液(mm)：n-甲基-d-葡糖胺130、cacl
2 2、mgcl
2 1、hepes 10，ph 7.3,320mosm，含蔗糖。
[0841]
细胞内溶液将细胞内钙离子缓冲至所需水平，以给出tmem16a介导的最大电流的约20％激活(钙离子的ec
20
)。将细胞电压钳位于-70mv的钳制电压，并在0.05hz下施加组合电压阶跃(至+70mv)/斜坡(-90mv至+90mv)。在电流稳定一段时间后，将溶解在100％(v/v)dmso中并随后稀释到细胞外溶液中的测试化合物用于生成累积浓度响应曲线。在添加下一浓度之前，将每个浓度的测试化合物孵育5分钟。在测试最终浓度为已知活性正向调节剂或tmem16a抑制剂的超最大浓度后，添加caccinha01(del la fuente等人,2008)以定义测定的上限和下限。
[0842]
通过测量添加化合物后电流的增加并将其表示为基线tmem16a电流水平的增加百分比来定量化合物活性。确定每个浓度的电流增加百分比，并使用qpatch软件或graphpad prism v6.05将数据绘制为浓度的函数，提供产生其最大效应(ec
50
)和最大功效(基线增加百分比)的50％的浓度。
[0843]
计算结果的方法如图1所示，其显示了来自qpatch tmem16a测定的示例迹线。在图1中，i
bl
等于基线电流，i
[#1]
等于测试化合物浓度1孵育期的峰值电流，依此类推。
[0844]
将+70mv处的峰值tmem16a电流绘制为测定期间时间的函数。在稳定一段时间后测量基线电流(i
bl
)。每次化合物添加的电流的增加通过在温育期间取峰值电流并减去前一记
录期间电流，然后将其表示为基线电流的百分比来确定。对于图1中的测试化合物浓度1：
[0845]
(i
[#1]-i
bl
/i
bl
)x100
[0846]
对于每个另外测试的浓度，电流的增加是通过从前一个孵育期减去电流并标准化基线值来确定的——对于图1中的测试浓度2：
[0847]
(i
[#2]
–i[#1}
/i
bl
)x100
[0848]
将每个测试浓度的值作为浓度的累积函数作图，例如对于测试浓度二，这将是在浓度一加上浓度二期间测量的峰值变化的总和。
[0849]
对于示例化合物在3.33μm下所获得的增强作用％结果显示于表2，从中可以看出本发明的化合物能够显著提高tmem16a电流水平。
[0850]
表2
–
3.33μm测试化合物溶液显示的增强作用和计算的ec
50
值
[0851]
[0852][0853]
绵羊粘液纤毛清除(mcc)
[0854]
如coote等人,"nvp-qbe170：an inhaled blocker of the epithelial sodium channel with a reduced potential to induce hyperkalaemia,"br jpharmacol.2015年6月；172(11)：2814
–
2826所描述的测量绵羊的mcc。简而言之，用作为干粉乳糖混合物递送的测试化合物对成年母羊进行鼻插管。将高渗盐水和水对照通过经由气管内管的雾化施用于绵羊。将雾化的锝标记的硫胶体(
99m
tc-sc)用于通过伽马闪烁扫描法测量不同剂量的测试化合物或对照对mcc的影响。在施用测试物质后，以选定的时间间隔向母羊施用
99m
tc-sc。定期拍摄系列图像，并对从右肺的计数进行衰变校正，并表示为相对于基线图像所清除的放射性百分比(清除％)。在放射性气雾剂施用后以一定时间间隔比较
99m
tc-sc清除的差异。还参见hirsh等人,“pharmacological properties ofn-(3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carbonyl)-n'-4-[4-(2,3-dihydroxypropoxy)phenyl]butyl-guanidine methanesulfonate,anovel epithelial sodium channel blocker with potential clinical efficacy for cystic fibrosis lung disease,”j pharmacol exp ther.2008年4月；325(1):77-88；和coote等人,“camostat attenuates airway epithelial sodium channel function in vivo through the inhibition of a channel-activating protease,”j pharmacol exp ther.2009年5月；329(2):764-74。
[0855]
本文引用的所有文献和专利文件都尽可能完整地以引用方式并入。
[0856]
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–
1215.

技术特征：
1.一种通式(i)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：其中：r1为i.[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9；n为1或2；每个r7独立地为h、苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基；r8为h、任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；r9为c
2-4
烷基；或者ii.ch(r
11
)(r
12
)；r
11
为h、oh、ch3、ch2oh或与如下定义的r
12
上的取代基组合的基团；r
12
选自任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的环己基；以及苯基或5元或6元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自oh、甲氧基、甲基、氟、氯以及连同r
11
和它所连接的原子一起形成与苯基或杂芳基基团r
12
稠合的5元或6元含氧杂环的取代基；或者iii.任选地被or
15
取代的c
2-6
烷基；或者r
15
为甲基或乙基；或者iv.6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其中的任一者任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代；z选自-nh-c(o)-和-c(o)-nh-；y选自键、-ch
2-和-ch(ch3)-；或者y与如下定义的r2组合；并且r2选自：i.3元至10元碳环体系或6元至10元芳基或5元至10元杂芳基环体系，其中所述芳基、杂芳基或碳环体系任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：氟；氯；cn；硝基；oh；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的c
1-6
烷基；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的o(c
1-6
烷基)；以及任选地被一个或多个选自卤代和oh的取代基取代的ch2nh-c(o)o-c
1-6
烷基；或者y和r2一起形成未取代的c
3-8
烷基基团或基团ch
2-c(r
17
)(r
18
)-ch
2-n(r
19
)r
20
；其中r
17
、r
18
和r
19
中的每一者独立地为h或c
1-4
烷基；并且r
20
为c
1-4
烷基或c
1-4
卤代烷基；r3、r4和r5各自独立地为h或f；
条件是：a.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
11
为h或甲基，并且r
12
为未取代的或被1或2个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代和甲氧基时：r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1或2个选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和5元杂芳基环的取代基取代；并且b.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
12
为苯基，并且r
11
连同r
12
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：i.r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1、2或3个取代基取代，其中所述取代基选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基和c
1-4
烷氧基；并且ii.y和r2不组合形成c
3-10
烷基；并且c.当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
11
为h，并且r
12
为环己基时：r2不为任选地被1、2或3个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代、甲基、甲氧基；未取代的5元至8元杂芳基。2.根据权利要求1所述的化合物，其中r2为未取代的环己基，并且r1为ch(r
11
)(r
12
)，其中r
11
和r
12
如权利要求1中所定义。3.根据权利要求2所述的化合物，其中r
12
为任选地被oh或甲氧基取代的苯基。4.根据权利要求3所述的化合物，其中r1为未取代的苄基，并且r2为未取代的环己基。5.根据权利要求4所述的化合物，其选自：n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-环己基-乙酰胺；2-苄基-n-(环己基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺；以及其盐和溶剂化物。6.根据权利要求1所述的化合物，其中r3、r4和r5中的一者或多者为f。7.根据权利要求6所述的化合物，其中：r3为f，并且r4和r5为h；或者r4为f，并且r3和r5为h；或者r5为f，并且r3和r4为h。8.根据权利要求1所述的化合物，其中y为键。9.一种通式(i)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：其中：r1为
i.[ch(r7)]
n-n(r8)-c(o)or9；n为1或2；每个r7独立地为h、苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基；r8为h、任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；r9为c
2-4
烷基；或者ii.ch(r
11
)(r
12
)；r
11
为h、oh、ch3、ch3oh或与如下定义的r
12
上的取代基组合的基团；r
12
选自任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的环己基；以及苯基或5元或6元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自oh、甲氧基、甲基、氟、氯以及连同r
11
和它所连接的原子一起形成与苯基或杂芳基基团r
12
稠合的5元或6元含氧杂环的取代基；或者iii.任选地被or
15
取代的c
2-6
烷基；r
15
为甲基或乙基；或者iv.6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其中的任一者任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代；z选自-nh-c(o)-和-c(o)-nh-；y选自键、-ch
2-和-ch(ch3)-；或者y与如下定义的r2组合；并且r2选自：i.3元至10元碳环体系或6元至10元芳基或5元至10元杂芳基环体系，其中所述芳基、杂芳基或碳环体系任选地被一个或多个选自以下的取代基取代：氟；氯；cn；硝基；oh；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的c
1-6
烷基；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的o(c
1-6
烷基)；以及任选地被一个或多个选自卤代和oh的取代基取代的ch2nh-c(o)o-c
1-6
烷基；或者y和r2一起形成未取代的c
3-8
烷基基团或基团ch
2-c(r
17
)(r
18
)-ch
2-n(r
19
)r
20
；其中r
17
、r
18
和r
19
中的每一者独立地为h或c
1-4
烷基；并且r
20
为c
1-4
烷基或c
1-4
卤代烷基；r3、r4和r5各自独立地为h或f；其中所述通式(i)的化合物选自：n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-环己基-乙酰胺(化合物1.1)；2-苄基-n-(环己基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2)；n-(1-金刚烷基甲基)-2-苄基-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.1)；2-苄基-n-[(1-甲基环戊基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.2)；2-苄基-n-[(1r)-1-环己基乙基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.2.3)；n-(环庚基甲基)-2-(1,1-二甲基丙基)-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3)；n-(环庚基甲基)-2-[(1-羟基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3.1)；n-(环庚基甲基)-2-(2-羟基-1-苯基-乙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.3.2)；n-(环己基甲基)-2-[(3-羟基苯基)甲基]-3h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.4)；2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5)；
n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]-2-(1-甲基环己基)乙酰胺(化合物1.5.1)；2-环庚基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5.2)；2-环己基-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.5.3)；2-(1-金刚烷基)-n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺(化合物1.5.4)；n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(2-羟基-2-金刚烷基)乙酰胺(化合物1.6)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-甲氧基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(1s)-1-苯基乙基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.1)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(1r)-1-苯基乙基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.2)；n-[[5-[[2-(1-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物1.7.3)；2-(1-金刚烷基)-n-[2-[(2-甲氧基-3-吡啶基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.7.4)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物1.8)；2-叔丁基-n-[(5-氯-2-羟基-苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.9)；n-[[5-(环庚基甲基氨基甲酰基)-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物1.10)；2-苄基-n-[(1-甲基环己基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.10.1)；2-苄基-n-(环辛基甲基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物1.10.2)；n-[[1-[2-[(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)氨基]-2-氧代-乙基]环己基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(化合物2.1)；n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)-2-(4,4-二氟环己基)乙酰胺(化合物2.1.1)；n-[1-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-2-甲氧基-乙基]氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2)；n-[(r)-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯化合物2.2.1；n-[(s)-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]-苯基-甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.2)；n-[[6-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-乙基-氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.3)；n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-(2-甲氧基乙基)氨基甲酸叔丁酯(化合物2.2.4)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-(2-甲氧基乙基)-3h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.2.5)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-(3-甲氧基丙基)-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.2.6)；n-[[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸
叔丁酯(化合物2.3)；n-(环庚基甲基)-2-(2,3-二氢苯并呋喃-3-基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物2.4)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[羟基(苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物2.5)；2-环己基-n-(2-苯基-1h-苯并咪唑-5-基)乙酰胺(化合物3.1)；n-(2-苄基-1h-苯并咪唑-5-基)金刚烷-1-甲酰胺(化合物3.2)；n-(环庚基甲基)-7-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3)；n-(环庚基甲基)-6-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3.1)；n-(环庚基甲基)-4-氟-2-[(3-羟基苯基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.3.2)；n-[2-[5-[[2-(2-金刚烷基)乙酰基]氨基]-1h-苯并咪唑-2-基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(化合物3.4)；2-(2-金刚烷基)-n-[2-[(3,5-二甲基异噁唑-4-基)甲基]-1h-苯并咪唑-5-基]乙酰胺(化合物3.4.1)；2-苄基-n-(2,2-二甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.5)；2-苄基-n-(1,1,2,2-四甲基丙基)-1h-苯并咪唑-5-甲酰胺(化合物3.5.1)；以及其盐和溶剂化物。10.一种通式(ia)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：其中r2、r3、r4、r5、y和z如权利要求1中针对通式(i)所定义，并且：r
1a
为i.[ch(r
7a
)]
n-n(r
8a
)-c(o)or
9a
；n为1或2；每个r7独立地为h、苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基；r8为h、任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；条件是当n为1时，r
7a
和r
8a
不均为h；r
9a
为c
2-4
烷基；或者ii.ch(r
11a
)(r
12a
)；r
11a
为h、oh、ch3、ch2oh或与如下定义的r
12a
上的取代基组合的基团；r
12a
选自苯基或5元或6元杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被一个或多个取代基取代，所述一个或多个取代基选自oh、甲氧基、甲基、氟、氯以及连同r
11a
和它所连接的原子
一起形成与苯基或杂芳基基团r
12a
稠合的5元或6元含氧杂环的取代基；条件是当r
12a
为任选地被一个或多个选自oh、甲氧基、甲基、氟或氯的取代基取代的苯基或6元杂芳基时，r
11a
不为h；或者iii.被or
15a
取代的甲基或乙基；或者r
15a
为甲基或乙基；或者iv.6元至10元芳基或5元至10元杂芳基，其中的任一者任选地被一个或多个选自氟、氯、oh或甲氧基的取代基取代；条件是：a.当r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)；其中r
11a
为h或甲基，并且r
12a
为未取代的或被1或2个取代基取代的苯基，其中所述取代基选自卤代和甲氧基时：i.r2不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1或2个选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
烷氧基和5元杂芳基环的取代基取代；并且b.当r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)；其中r
12a
为苯基，并且r
11a
连同r
12a
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12a
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：i.r
2a
不为苯基或杂芳基，其中所述苯基或杂芳基任选地被1、2或3个取代基取代，其中所述取代基选自卤代、c
1-4
烷基、c
1-4
卤代烷基和c
1-4
烷氧基；并且ii.y和r2不组合形成c
3-10
烷基。11.根据权利要求10所述的化合物，其中r
1a
为[ch(r
7a
)]
n-n(r
8a
)-c(o)or
9a
，其中n、r
7a
、r
8a
和r
9a
如权利要求10中所定义。12.根据权利要求11所述的化合物，其中r
7a
选自h、苯基、甲基、ch2oh和ch2och3。13.根据权利要求11所述的化合物，其中r
8a
选自h、任选地被甲氧基取代的甲基和任选地被甲氧基取代的乙基。14.根据权利要求11所述的化合物，其中r
9a
为c
3-4
烷基。15.根据权利要求11所述的化合物，其中n为1，并且r
7a
和r
8a
不均为h。16.根据权利要求15所述的化合物，其中：r
7a
为h，并且r
8a
为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基；或者r
7a
为苯基或任选地被一个或多个选自oh和och3的取代基取代的c
1-3
烷基，并且r
8a
为h；或者r
7a
为苯基或任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基，并且r
8a
为任选地被一个或多个选自oh和甲氧基的取代基取代的c
1-3
烷基。17.根据权利要求10所述的化合物，其中r
1a
为ch(r
11a
)(r
12a
)，其中r
11a
和r
12a
如权利要求10中所定义。18.根据权利要求17所述的化合物，其中：r
12a
为苯基或6元杂芳基基团，其中的任一者任选地被一个或多个选自oh、甲氧基、氟和氯的取代基取代；并且r
11a
为oh、ch3或ch3oh。19.根据权利要求17所述的化合物，其中r
12a
为任选地被oh或甲氧基取代的吡啶基基团。
20.根据权利要求17所述的化合物，其中r
12a
为任选地被一个或两个甲基基团取代的5元杂芳基基团，并且r
11a
为h、oh、ch3或ch3oh。21.根据权利要求17所述的化合物，其中r
12a
为具有取代基的苯基，所述取代基连同r
11a
和它所连接的原子一起形成与苯基基团r
12a
稠合的5元或6元含氧杂环，并且其中所述苯基基团r
12a
任选地含有其他如权利要求10中所定义的取代基。22.根据权利要求21所述的化合物，其中与r
11a
组合的r
12a
取代基位于所述苯基基团r
12a
上与所述苯基基团r
12a
与ch(r
11a
)连接的位置相邻的位置处，并且组合的取代基为2元或3元烃链，其中ch2部分任选地被-o-替换。23.根据权利要求10所述的化合物，其中r
1a
为被or
15
取代的乙基或被or
15
取代的正丙基。24.根据权利要求10所述的化合物，其中r
1a
为未取代的苯基。25.一种通式(ib)的化合物，包括其所有互变异构形式、所有对映体和同位素变体以及盐和溶剂化物：其中r1、r3、r4、r5、y和z如权利要求1中针对通式(i)所定义，并且：r
2b
选自：任选地被一个或多个选自以下的取代基取代的3元至10元碳环体系：氟；氯；cn；硝基；oh；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的c
1-6
烷基；任选地被一个或多个选自卤代、oh和cn的取代基取代的o(c
1-6
烷基)；以及任选地被一个或多个选自卤代和oh的取代基取代的ch2nh-c(o)o-c
1-6
烷基；或者y和r
2b
一起形成未取代的c
3-8
烷基基团或基团ch
2-c(r
17b
)(r
18b
)-ch
2-n(r
19b
)r
20b
；其中r
17b
、r
18b
和r
19b
中的每一者独立地为h或c
1-4
烷基；并且r
20b
为c
1-4
烷基或c
1-4
卤代烷基；条件是：当r1为ch(r
11
)(r
12
)；其中r
12
为苯基，并且r
11
连同r
12
上的取代基和它们所连接的原子一起组合形成与苯环r
12
稠合的5元或6元环，其中所述5元或6元环任选地被c
1-3
烷基取代时：y和r
2b
不组合形成c
3-8
烷基。26.根据权利要求25所述的化合物，其中r
2b
为如权利要求25中所定义的被取代的3元至10元碳环体系。27.根据权利要求26所述的化合物，其中r
2b
为被oh取代的金刚烷基。28.根据权利要求26所述的化合物，其中r
2b
为碳环体系，其选自环戊基、环己基、环庚基
和环辛基，其中的任一者被一个或多个选自以下的取代基取代：oh、氟、c
1-6
烷基、o(c
1-6
烷基)和nh-c(o)o-c
1-6
烷基，尤其是oh、c
1-4
烷基、o(c
1-4
烷基)和ch2nh-c(o)o-c
1-4
烷基。29.根据权利要求25所述的化合物，其中y为键。30.根据权利要求25所述的化合物，其中：y和r
2b
一起形成未取代的c
3-8
烷基基团；或者y和r
2b
一起形成基团ch
2-c(r
17b
)(r
18b
)-ch
2-n(r
19b
)r
20b
；其中r
17b
、r
18b
和r
19b
中的每一者独立地为h或甲基，并且r
20b
为c
1-4
卤代烷基。31.一种用于治疗或预防受tmem16a的调节影响的疾病和病症的方法，所述方法包括向需要此类治疗的患者施用有效量的根据权利要求1至30中任一项所述的化合物。32.根据权利要求31所述的方法，其中受tmem16a的调节影响的所述疾病和病症选自呼吸系统疾病和病症、口干(口干症)、肠道过度活动、胆汁淤积和眼部病症。33.根据权利要求32所述的方法，其中：所述呼吸系统疾病和病症选自囊性纤维化、慢性阻塞性肺疾病(copd)、慢性支气管炎、肺气肿、包括非囊性纤维化支气管扩张在内的支气管扩张、哮喘以及原发性纤毛运动障碍；并且/或者所述口干(口干症)是由sjorgens综合征、放疗治疗或引起口腔干燥的药物导致；并且/或者所述肠道过度活动与胃消化不良、胃轻瘫、慢性便秘或肠易激综合征有关；并且/或者所述眼部疾病是干眼症。34.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至30中任一项所述的化合物以及药用赋形剂。35.根据权利要求34所述的药物组合物，其进一步包含用于治疗或预防呼吸系统病症的另外的活性药剂，在受tmem16a的调节影响的疾病或病症的治疗中用作同时、按顺序或分开使用的组合制剂。36.根据权利要求35所述的药物组合物，其中所述另外的活性药剂选自：β2肾上腺素能受体激动剂，诸如间羟异丙肾上腺素、异丙基肾上腺素、异丙肾上腺素、舒喘宁、沙丁胺醇、福莫特罗、沙美特罗、茚达特罗、特布他林、异丙喘宁、甲磺酸比托特罗、吡布特罗、奥达特罗、维兰特罗和阿贝特罗；抗组胺药，例如组胺h1受体拮抗剂，诸如氯雷他定、西替利嗪、地氯雷他定、左西替利嗪、非索非那定、阿司咪唑、氮卓斯汀和氯苯那敏或h4受体拮抗剂；阿法链道酶；皮质类固醇，诸如泼尼松、泼尼松龙、氟尼缩松、曲安奈德、二丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸氟替卡松、糠酸莫米松和糠酸氟替卡松；白三烯拮抗剂，诸如孟鲁司特和扎鲁司特；抗胆碱能化合物，特别是毒蕈碱拮抗剂，诸如异丙托溴铵、噻托溴铵、格隆溴铵、阿地溴铵和芜地溴铵；cftr修复疗法(例如cftr增效剂、校正剂或放大剂)，诸如依伐卡托、qbw251、巴马卡托(vx659)、依来卡托(vx445)、vx561/cpt-656、vx152、奥莱卡托(vx440)、glp2737、glp2222、glp2451、pti438、pti801、pti808、fdl-169和fdl-176，以及cftr校正剂，诸如鲁玛卡托和特
扎卡托或其组合(例如依伐卡托、特扎卡托和依来卡托的组合)；enac调节剂，特别是enac抑制剂，诸如阿米洛利、vx-371、azd5634、qbw276、spx-101、bi443651、bi1265162和etd001以及具有阳离子和合适的阴离子的化合物，所述阳离子选自：2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)乙基]-6-(4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}哌啶-1-羰基)-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-{[2-(4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}哌啶-1-基)乙基]氨基甲酰基}-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-5-[4-({双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}甲基)哌啶-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-[(3r)-3-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}吡咯烷-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-6-[(3s)-3-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}吡咯烷-1-羰基]-1,3-二乙基-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1r,4r)-4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}环己基]氨基甲酰基}-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；2-[({3-氨基-5h-吡咯并[2,3-b]吡嗪-2-基}甲酰胺基)甲基]-1,3-二乙基-6-{[(1s,4s)-4-{双[(2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5,6-五羟基己基]氨基}环己基]氨基甲酰基}-1h-1,3-苯并二唑-3-鎓；所述合适的阴离子为例如卤离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、甲酸根、乙酸根、三氟乙酸根、富马酸根、柠檬酸根、酒石酸根、草酸根、琥珀酸根、扁桃酸根、甲烷磺酸根或对甲苯磺酸根；抗生素；抗病毒药诸如利巴韦林，和神经氨酸酶抑制剂诸如扎那米韦；抗真菌剂，诸如pur1900；气道保湿剂(渗透剂)，诸如高渗盐水和甘露醇以及黏液溶解剂，诸如n-乙酰半胱氨酸。37.一种用于制备根据权利要求1所述的通式(i)的化合物的方法，所述方法包括：a.对于通式(i)的化合物，其中z为-nh-c(o)-：使通式(ii)的化合物：
其中r1、r3、r4和r5如权利要求1中所定义，与通式(iii)的化合物反应：其中y和r2如权利要求1中所定义，并且r
11
为oh或卤素，特别是cl；并且其中当r
11
为oh时，反应是在偶联试剂存在下且在碱性条件下进行；或者b.对于通式(i)的化合物，其中z为-nh-c(o)-：使通式(v)的化合物：其中r1如权利要求1中所定义；与通式(vii)的化合物反应，其中r2、r3、r4和r5如上文权利要求1中所定义；其中反应是两步过程，所述两步过程包括在偶联试剂存在下在碱性条件下使所述通式(v)的化合物和所述通式(vii)的化合物反应，然后用酸处理产物；或者c.对于通式(i)的化合物，其中z为-c(o)-nh-：使通式(xii)的化合物：
其中r1、r3、r4和r5如权利要求1中所定义；与通式(xiii)的化合物：其中r2和y如权利要求1中所定义；在偶联试剂存在下且在碱性条件下反应；或者d.对于通式(i)的化合物，其中z为-c(o)-nh-：使在本权利要求中如上所定义的通式(xiii)的化合物与通式(xvi)的化合物：其中r1、r3、r4和r5如权利要求1中所定义，并且r
16
为卤素；和一氧化碳反应；或者e.对于通式(i)的化合物，其中z为-c(o)-nh-：使在本权利要求中如上所定义的通式(v)的化合物与通式(xx)的化合物反应，其中r2、r3、r4和r5如上文权利要求1中所定义；其中反应是两步过程，所述两步过程包括在偶联试剂存在下在碱性条件下使所述通式
(v)的化合物和所述通式(xx)的化合物反应，然后用酸处理产物。38.根据权利要求1所述的化合物，其中所述化合物选自：
以及或其对映体或药用盐。

技术总结
本发明涉及通式(I)的化合物，其中R1、R2、R3、R4、R5、Y和Z如本文所定义，所述化合物用于治疗由TMEM16A调节的呼吸系统疾病以及其他疾病和病症。病症。


技术研发人员：S
受保护的技术使用者：跨膜蛋白16A有限公司
技术研发日：2021.12.10
技术公布日：2023/9/13