测定装置及分析方法与流程

未命名 09-21 阅读:150 评论:0

测定装置及分析方法
【技术领域】
1.本发明涉及测定装置及分析方法。


背景技术:

2.非专利文献1公开了对从荧光的波长带区不同的多个荧光染料发出的信号进行分析的流式细胞仪。在非专利文献1中公开的利用流式细胞仪的测定中,使用由波长带区不同的多个荧光染料对试样进行染色的试剂(参照非专利文献2)。各自的荧光染料附加在抗体,通过各抗体与受试体中的测定对象物结合而对受试体进行染色。流式细胞仪使用分注探针及使此分注探针移动的机构从试剂容器抽吸抗体试剂,向收容具有测定对象物的受试体的反应容器内吐出抗体试剂。流式细胞仪对在反应容器内与抗体试剂混合而染色的测定对象物进行测定。
3.【现有技术文献】
4.【非专利文献】
5.【非专利文献1】aquios tetra system guide https://www.beckmancoulter.com/wsrportal/techdocs?docname=b26364ab.pdf
6.【非专利文献2】aquios tetra-1 panel and aquios tetra-2+panelhttps://www.beckman.jp/techdocs/b25337ag/wsr-161331
7.【发明的概要】
8.【发明要解决的课题】
9.在非专利文献1中公开的流式细胞仪,为了测定试样的调制,从试剂容器用管嘴抽吸试剂,向反应容器的配置场所移动抽吸试剂的管嘴,向反应容器吐出试剂。此时,由于要求用于试剂的抽吸
·
吐出的过程,测定试样的调制要求时间(在非专利文献1中,记载为测定通量是每小时25个受试体)。
10.本发明旨在提供能实现以高的处理能力使用多个荧光染料的测定的测定装置及分析方法。
11.【用于解决课题的手段】
12.本发明的测定装置是用于对受试体中所含的细胞进行分析的测定装置,其含:用于调制由从至少一个试剂容器供给的试剂中所含的第一及第二荧光染料对所述细胞进行染色的测定试样的室,用于经设在所述试剂容器和所述室之间的送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂的送液部,对应于向在流动池内流动的所述测定试样照射光,取得与从用所述第一及第二荧光染料染色的所述细胞释放的第一波长的荧光和第二波长的荧光各自相对应的第一及第二信号的检测部和基于所述第一及第二信号而对所述细胞进行分析的分析部。本发明的分析方法是对受试体中所含的细胞进行分析的分析方法,其经设在收容试剂的试剂容器和用于将所述受试体和所述试剂混合而调制测定试样的室之间的送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂,调制由从至少一个所述试剂容器供给的所述试剂中所含的第一及第二荧光染料对所述细胞进行染色的所述测定试样,向在流动池
内流动的所述测定试样照射光,对应于所述光的照射,取得与从用所述第一及第二荧光染料染色的所述细胞释放的第一波长的荧光和第二波长的荧光各自相对应的第一及第二荧光信号,基于所述第一及第二荧光信号而分析所述细胞。
13.【发明的效果】
14.由本发明可提供能实现以高的处理能力使用多个荧光染料的测定的分析装置。
15.【附图的简单的说明】
16.【图1】是显示本发明的第1实施方式涉及的分析系统的斜视图。
17.【图2】是显示本发明的第1实施方式的测定单元的构成的模式图。
18.【图3】是显示本发明的第1实施方式的由分析系统的测定试样调制处理的程序的流程图。
19.【图4】是显示本发明的第2实施方式的分析系统的测定单元的构成的框图。
20.【图5】是显示本发明的第2实施方式中的含受试体抽吸部、试样调制部及检测部的流体电路的图。
21.【图6】是显示本发明的第2实施方式中的第1试样调制部的其他一例的模式图。
22.【图7】是显示本发明的第2实施方式中的fcm检测部的光学系的一例的构成说明图。
23.【图8】是显示本发明的第2实施方式中的fcm检测部的光学系的其他例的构成说明图。
24.【图9】是显示从不同的2个荧光染料发出的荧光互相漏入的例的图。
25.【图10】是显示本发明的第2实施方式中的分析单元的构成的一例的框图。
26.【图11】是显示本发明的第2实施方式中的分析系统的其他构成例的斜视图。
27.【图12】是显示本发明的第2实施方式中的测定单元的其他一例的构成的框图。
28.【图13】是显示本发明的第2实施方式中的打开测定单元的盖的状态的图。
29.【图14】是显示本发明的第2实施方式中的测定单元的试剂容器支架的斜视图。
30.【图15】是显示图14中所示的试剂容器支架的正面图。
31.【图16】是用于对图14中所示的试剂容器支架的试剂容器保持部进行说明的模式图。
32.【图17】是显示图14中所示的试剂容器保持部装载有试剂容器的状态的模式图。
33.【图18】是显示图14中所示的试剂容器保持部装载有试剂容器的状态的模式图。
34.【图19】是模式地显示图14中所示的试剂容器支架的内部构成的纵截面图。
35.【图20】是用于对图19中所示的试剂容器支架的纵截面图中试剂容器的设置状态进行说明的图。
36.【图21】是用于对图20中所示的试剂容器支架的纵截面图中使盖下降的状态进行说明的图。
37.【图22】是显示根据本发明的第2实施方式的大型的试剂容器的斜视图。
38.【图23】是显示根据本发明的第2实施方式的大型的试剂容器的上表面图。
39.【图24】是显示根据本发明的第2实施方式的大型的试剂容器的纵截面图。
40.【图25】是显示根据本发明的第2实施方式的小型的试剂容器的斜视图。
41.【图26】是显示根据本发明的第2实施方式的小型的试剂容器的上表面图。
42.【图27】是显示根据本发明的第2实施方式的小型的试剂容器的纵截面图。
43.【图28】(a)是显示根据本发明的其他实施方式的试剂容器200设置于测定单元400的状态的图。(b)是显示在根据本发明的其他实施方式的试剂容器200从上方插入抽吸管252的状态的图。
44.【图29】是显示根据本发明的其他实施方式的试剂容器200具备试剂收容部10和框20的图。
45.【图30】是显示试剂收容部10以中空的袋状形成,框20具备开口部21、安装部件22及移动规制部23的图。
46.【图31】是移动规制部23的上表面图。
47.【图32】是显示试剂抽吸部250含能保持各自1个试剂容器200的多个试剂容器支架的图。
48.【图33】是显示收容部260含插入有试剂容器200的试剂收容部10的第1插入部261和插入试剂容器200的移动规制部23的第2插入部262的图。
49.【图34】是显示设置有试剂容器200的收容部260的图。
50.【图35】是试剂容器支架250a的纵截面图。
51.【图36】是对根据本发明的第4实施方式的分析方法进行说明的概念图。
52.【图37】是用于对第4实施方式的分析方法中使用的波形数据进行说明的模式图。
53.【图38】是模式地显示第4实施方式的分析方法中的由a/d变换部向数字信号变换的图。
54.【图39】是模式地显示第4实施方式的分析方法中的由采样得到的波形数据的图。
55.【图40】是显示用于训练用于判定第4实施方式的分析方法中的受试体中的成分的类别的深度学习算法的训练数据的生成方法的一例的模式图。
56.【图41】是显示第4实施方式的分析方法中的标签值的例的图。
57.【图42】是显示对第4实施方式的分析方法中的受试体中的成分的波形数据进行分析的方法的例的模式图。
58.【图43】是显示与图12中所示的试样调制部构成不同的其他试样调制部的构成例的框图。
59.【图44】是显示本分析方法的第1动作例的流程图。
60.【图45】是显示本分析方法的第2动作例的流程图。
61.【图46】是显示本分析方法的第3动作例的流程图。
62.【图47】是显示第5实施方式的构成例的框图。
63.【图48】是显示并列处理处理器的构成例的模式图。
64.【图49】是显示基于在处理器上运行的解析软件的控制而用并列处理处理器执行的计算处理的概要的第1图。
65.【图50】是继图49的第2图。
66.【图51】是继图50的第3图。
67.【图52】是显示使用第1荧光染料及第2荧光染料而将白细胞分类为亚集团的工序的流程图。
68.【图53】是显示第6实施方式的工序的流程图。
69.【图54】是显示第7实施方式的工序的流程图。
70.【图55】是显示第8实施方式的工序的流程图。
71.【图56(a)】是参考例1中的对嗜碱性粒细胞分离前受试体进行测定之时的侧方散射-红色荧光散点图。
72.【图56(b)】是参考例1中对嗜碱性粒细胞分离后受试体进行测定之时的侧方散射-红色荧光散点图。
73.【图56(c)】是参考例1中对嗜碱性粒细胞分离前受试体进行测定之时的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
74.【图56(d)】是参考例1中对嗜碱性粒细胞分离后受试体进行测定之时的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
75.【图57(a)】是参考例2中对采血后4小时的受试体进行测定之时的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
76.【图57(b)】是参考例2中对采血后48小时的受试体进行测定之时的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
77.【图57(c)】是参考例2中对采血后72小时的受试体进行测定之时的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
78.【图58(a)】是参考例2中在图57(a)的散点图中标绘选通的细胞的侧方散射-红色荧光散点图。
79.【图58(b)】是参考例2中在图57(b)的散点图中标绘选通的细胞的侧方散射-红色荧光散点图。
80.【图58(c)】是参考例2中在图57(c)的散点图中标绘选通的细胞的侧方散射-红色荧光散点图。
81.【图59(a)】是实施例1的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
82.【图59(b)】是实施例1的侧方散射-红色荧光散点图。
83.【图60(a)】是实施例2的蓝紫荧光直方图。
84.【图60(b)】是实施例2的侧方散射-蓝紫荧光散点图。
85.【图60(c)】是实施例2的侧方散射-红色荧光散点图。
86.【图61】是显示由采血后的时间经过的嗜碱性粒细胞数的变化的坐标图。
87.【图62】是实施例2及比较例1中的侧方散射-红色荧光散点图。
【具体实施方式】
88.以下,使用附图进一步详述本发明。再者,以下的说明在全部的点例示,不能被解释为限定本发明。
89.(第1实施方式)
90.图1是显示本发明的第1实施方式涉及的分析系统的斜视图。如图1所示,第1实施方式涉及的分析系统4000个别地具备测定装置(以下,称为测定单元)400和分析装置(以下,称为分析单元)300x。在本实施方式中,分析单元300x是例如,整合用于分析成为测定对象的受试体的软件的pc(个人计算机)。
91.测定单元400是用于对受试体进行测定的单元,含流式细胞仪。在测定单元400中,
将受试体和试剂混合,调制测定试样。在测定试样的调制中,使用含与多个波长各自相对应的多个荧光染料的试剂。测定试样中的多个细胞的各自用多个荧光染料染色。在由此分析系统的受试体中所含的细胞的分析中,对能由多个荧光染料染色的细胞进行分析。即,在本实施方式的测定试样的调制是指对于一个细胞染色多个荧光染料,作为成为测定对象的细胞,例如,淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞等。
92.用流式细胞仪测定调制的测定试样。从照射光的测定试样中的细胞取得与多个荧光染料的各自相对应的光学信号或前方散射光、侧方散射光涉及的多个信号。取得的光学信号的各自被a/d变换而取得数字数据。分析单元300x对用测定单元400取得的数字数据进行分析。在分析单元300x中,使用至少与侧方散射光及多个波长的荧光各自相对应的多个数字数据,执行受试体中的细胞的分类及计数的至少一个。分析单元300x还执行测定单元400的动作控制。
93.图2是显示本发明的第1实施方式的测定单元的构成的模式图。如图1和图2所示,测定单元400具备具有室420及送液机构430的试样调制部440、受试体抽吸机构450和作为取得从细胞发出的信号的检测部的流式细胞仪检测部(fcm检测部)460。
94.受试体抽吸部450是抽吸受试体容器t内的受试体的机构,具有受试体抽吸管嘴451。受试体抽吸管嘴451能贯通由盖封闭的受试体容器。受试体抽吸机构450,为了向受试体容器插入受试体抽吸管嘴451,以能移动受试体抽吸管嘴451,向室420的上方位置移动受试体抽吸管嘴451的方式能在xy方向移动。受试体抽吸机构450具有用于由受试体抽吸管嘴451抽吸吐出受试体的定量部452(例如,注射器泵)。
95.送液机构430具备送液管431和用于经送液管431将试剂12从试剂容器200注入室420的送液部432。送液机构430是经设在安装在后述的试剂容器支架60(参照图13~图15)的试剂容器200和室420之间的送液管431,从安装的试剂容器200向室420输送试剂的机构。在试剂容器支架60上,安装收容有含第1荧光染料及第2荧光染料两者的试剂12的试剂容器200。送液机构430从试剂容器200向室420输送试剂。由构成第1荧光染料的第一化合物及构成第2荧光染料的第二化合物对细胞进行染色。
96.在试剂容器200内插入构成送液管431的一端的抽吸管64。送液管431的另一端与室420连接。抽吸管64也可以可贯通安装在试剂容器支架60的试剂容器200所具有的封闭膜(也称为密封部件)的方式尖端锐利地形成。
97.送液机构430的送液部432具备作为生成用于从试剂容器200向送液管431引入试剂12的负压和用于向室420供给引入的试剂的正压的定量部的泵433。泵433可为例如,注射器泵或隔膜泵。送液机构430也可具备多个阀v1、v2。在例如由注射器泵或隔膜泵构成的定量部433从试剂容器抽吸试剂时,开阀v1,闭合阀v2。通过定量具433生成负压,向阀v1、阀v2、定量部433之间的流路填充试剂。在将填充的试剂供给到室420之时,闭合阀v1,开阀v2,定量部433生成正压。由此,试剂容器200中的试剂供给于室420。
98.室420是混合试剂和受试体,制成测定试样的容器。室420使含第1及第2荧光染料之任一者的1个试剂12与受试体混合,调制由第1及第2荧光染料对细胞进行染色的测定试样。在测定单元400中,具备一个或多个室420。室420经废液室36和阀37连接。由fcm检测部460的测定结束之后,残留在室420的测定试样废弃到废液室36。另外,室420在调制以下的测定试样之前,由未图示的清洗机构清洗,清洗后的液废弃到废液室。
99.在测定单元400中,具备一个或多个试剂容器支架60。在试剂容器支架60上安装收容含由光激发而释放第一波长的荧光的第1荧光染料及由光激发而释放第二波长的荧光的第2荧光染料的任何试剂的试剂容器200。在图2中所示的例中,含有第1荧光染料和第2荧光染料的试剂收容在一个试剂容器200。
100.试剂容器200是收容有试剂的容器。试剂容器200具有插入与送液机构430的送液管431的第一端连接的穿孔器(抽吸管)64的开口。试剂容器200在安装在试剂容器支架60之前的状态下,例如,开口被封闭膜覆盖。在安装在试剂容器支架60的试剂容器200的开口插入穿孔器64。插入的穿孔器64固定于试剂容器200内的指定位置。插入到试剂容器200的穿孔器64,例如,在试剂容器200安装在试剂容器支架60之间固定于上述的指定位置。另外,至少,在多个不同的受试体的测定被执行之间(即,调制不同的多个测定试样之间)固定于上述的指定位置。
101.fcm检测部460取得与从用第1及第2荧光染料染色的细胞发出的第一及第二波长的荧光各自相对应的第一及第二信号。在fcm检测部460中,向在流动池内流动的测定试样照射光。fcm检测部460可具备例如,与各波长各自相对应的多个光源,或者也可以照射单一波长的光,检测从单一波长的光激发自的多个荧光染料的荧光的方式构成。通过向测定试样照射光,检测到与第1荧光染料及第2荧光染料各自相对应的光学信号。各光学信号被a/d变换,取得数字数据。取得的数字数据用分析单元300x(参照图1)分析。
102.在第1实施方式中,在试剂容器200和室420之间设送液管431,送液部432将试剂容器410内的试剂经送液管431传送到室420。从而,在第1实施方式中,从试剂容器用管嘴抽吸试剂,向室的配置场所移动抽吸试剂的管嘴,无需向室吐出试剂的过程(参照例如,非专利文献1)。
103.分析单元300x(参照图1)基于与从用第1及第2荧光染料染色的细胞发出的第一及第二波长的荧光各自相对应的第一及第二信号的各自而进行细胞的分类及计数的至少一个。
104.图3是显示第1实施方式的由分析系统的测定试样调制处理的程序的流程图。参照图1、图2及图3而对于由分析系统4000的测定试样调制处理进行说明。在由分析系统4000的测定试样调制处理中,首先,在测定单元400中,将受试体分注于室420(步骤s1)。接下来,经将试剂容器410和室420连接的送液管431,将试剂注入到室420中(步骤s2)。接下来,在室420内,将受试体和含第1及第2荧光染料的试剂混合,调制测定试样(步骤s3)。接下来,向fcm检测部460输送在室420内调制的测定试样而照射光,取得侧方散射光及与第1及第2荧光染料各自相对应的光学信号(步骤s4)。接下来,将从取得的光学信号生成的数据由分析单元300x分析(步骤s5)。进而,分析单元300x提供分析结果(步骤s6)。
105.根据第1实施方式,可通过送液管431进行用于使第1及第2荧光染料和受试体反应的第1及第2荧光染料向室420的供给。送液管431是仅将含第1及第2荧光染料的试剂12供给到室420的专用的流路。送液管431的内部因为可常常由试剂12维持填满的状态,在可迅速地进行由定量部(泵)433的定量的点提高处理速度。再者,由于送液管431是用于供给试剂12的专用的流路,无防止不同的试剂之间的污染的必要,无需清洗。由于无需清洗,贡献于处理速度提升。
106.根据第1实施方式的益处,例如在与非专利文献1的比较中,变得再者明显。例如,
在非专利文献1中记载的流式细胞仪中,作为反应容器,使用96孔板。96孔板是消耗品,使用后从流式细胞仪取出而废弃。从而,非专利文献1中记载的流式细胞仪是将试剂容器和反应容器用送液管连接,无法除用于试剂的抽吸
·
吐出的过程的构成。
107.另外,在非专利文献1中记载的利用流式细胞仪的测定中,使用含有与血液受试体中的细胞中的4个标志物(cd45、cd3、cd4、cd8)相对应的4种荧光染料的试剂(非专利文献2:aquios tetra-1panel)。这些荧光染料的各自附在与上述的各标志物相对应的抗体。即,非专利文献2的试剂由抗体-抗原反应,对血液受试体中的细胞进行染色。在这样的试剂的情况中,由于反应要求时间,1个受试体的测定耗时间。具体而言,在非专利文献1中记载为,含测定试样的调制而1个受试体的测定要约20分钟。非专利文献1的技术由于每1受试体的测定时间(特别是,抗体-抗原反应要求的时间)变长,在作为消耗品的96孔板的多个孔并行执行多个受试体的测定试样的调制而缩短每受试体的延长处理时间。换言之,提升单位时间相当的处理能力(通量)。与此相比,在第1实施方式中,作为试剂12,使用含化合物本身对细胞的细胞质、核酸、dna进行染色的第1及第2荧光染料的试剂。这样的荧光染料与抗体试剂相比,用于染色的反应快速,例如1受试体的测定试样的调制要求的时间不足1分钟。从而,根据第1实施方式,可提供能将使用多个荧光标记的测定以高的处理能力实现的分析装置。
108.(第2实施方式)
109.第2实施方式的分析系统4000是执行血液受试体中的细胞的计数及分析的至少一个的多项目自动血细胞分析装置。图4是显示第2实施方式的分析系统4000(参照图1)的测定单元400的构成的框图。测定单元400具备试样调制部440、装置机构部455、受试体抽吸机构450、fcm检测部460、rbc/plt检测部461、hgb检测部462及测定单元控制部480。rbc/plt检测部461是通过向孔导入由血液和稀释液调制的测定试样,检测细胞通过孔时发生的电阻的变化来对红细胞(rbc)及血小板(plt)进行计数的电阻式检测部。hgb检测部462由sls血红蛋白法测量血液中的血红蛋白浓度。hgb检测部462通过向由血液和sls溶血剂调制的测定试样照射作为sls血红蛋白的吸收波长的波长555nm的光而测定吸光度,对血液中的血红蛋白浓度进行测定。以下,有时将fcm检测部460、rbc/plt检测部461及hgb检测部462总称为“检测部460~462”。
110.受试体抽吸机构450从受试体容器抽吸受试体,向试样调制部440的室吐出抽吸的受试体。试样调制部440含用于将受试体和试剂混合的室和设置有试剂容器的试剂容器支架60。试样调制部440从设置于试剂容器支架60的试剂容器,经后述的送液管而向室输送试剂。通过在室内混合受试体和试剂,调制测定试样。
111.装置机构部455含移动测定单元400的各部的电机或运作器。装置机构部455含例如向上下方向移动后述的采血管t(参照图5)的机构。
112.测定单元控制部480具备对从fcm检测部460输出的模拟信号进行处理的模拟处理部481,将从模拟处理部481输出的模拟信号变换为数字信号的a/d变换部481a,对从rbc/plt检测部461输出的模拟信号进行处理的模拟处理部482,将从模拟处理部482输出的模拟信号变换为数字信号的a/d变换部482a,对从hgb检测部462输出的模拟信号进行处理的模拟处理部483,将从模拟处理部483输出的模拟信号变换为数字信号的a/d变换部483a和与各a/d变换部481a、482a、483a电连接的if部(接口部)484。再者,测定单元控制部480具备与试样调制部440、装置机构部455、受试体抽吸机构450、fcm检测部460、rbc/plt检测部461及
hgb检测部462电连接的接口(if)部488,与各if部484、488电连接的总线485和将总线485和分析单元302x电连接的if部489。
113.图5显示含受试体抽吸机构450、试样调制部440及检测部460~462的流体电路。图4中所示的试样调制部440具备用于调制用于由fcm检测部460的光学测定的第1测定试样的第1试样调制部440a、用于调制用于由rbc/plt检测部的电抵抗式测定的第2测定试样及用于由hgb检测部462的血红蛋白测定的第3测定试样的第2试样调制部440b(参照图5)。
114.第1试样调制部440a具有第1室420。第1室420与试剂容器r1、r2连接。试剂容器r1收容使红细胞收缩的溶血剂。试剂容器200收容含有荧光染料的白细胞染色试剂。试剂容器r2收容稀释液。对于试剂容器r2而后述。
115.收容在试剂容器200的白细胞染色试剂含有第1荧光染料和第2荧光染料。对于第1荧光染料和第2荧光染料而后述。
116.第2试样调制部400b具有第2室55。第2室55与试剂容器r2和试剂容器r3连接。试剂容器r2与第1试样调制部440a共同设。试剂容器r3收容用于使红细胞溶血的同时调制用于由sls血红蛋白法的测定的试样的sls溶血剂。
117.收容白细胞染色试剂的试剂容器200保持在试剂容器支架60。在试剂容器支架60设用于抽吸试剂容器200内的核酸染色用试剂的抽吸管64和升降抽吸管64的抽吸管升降机构65。抽吸管64的尖端能贯通试剂容器200的密封材(穿刺)。在抽吸管升降机构65连接盖63。抽吸管升降机构65下降,在抽吸管64贯通(穿刺)试剂容器200的密封材的状态下,盖63也下降,盖63覆盖试剂容器200。当抽吸管升降机构65升高时,盖63也升高,变得试剂容器200能从外部拆下。
118.在抽吸管64和第1室420之间设送液机构430。送液机构430具备送液管431和定量块432。送液管431其一端由抽吸管64构成,另一端与第1室420连接。定量块432具备定量部30和电磁阀v1、v2。作为定量部30,使用注射器泵。再者,代替注射器泵而还能使用例如隔膜泵。电磁阀v1、v2开闭流路。在向室420输送试剂容器200内的白细胞染色试剂时,在电磁阀v1开,电磁阀v2闭合的状态下,定量部30向送液管431给负压。由此,从抽吸管64的尖端向送液管431抽吸白细胞染色试剂,向电磁阀v1、v2、及定量部30之间的流路填充一定量的白细胞染色试剂。接下来,在电磁阀v1闭合,电磁阀v2开的状态下,定量部30向送液管431给正压。由此,填充的一定量的白细胞染色试剂压出到电磁阀v1、v2、及定量部30之间的流路,通过送液管431向室420供给白细胞染色试剂。
119.在收容溶血剂的试剂容器r1和第1室420之间的流路设定量部22和电磁阀v3、v4。作为定量部22,使用注射器泵。再者,代替注射器泵而还能使用例如隔膜泵。电磁阀v3、v4开闭流路。定量部22及电磁阀v3、v4与前述的电磁阀v1、v2及定量部30同样地向第1室420定量送入试剂容器r1内的溶血剂。
120.在收容稀释液的试剂容器r2和第1室420之间的流路设定量部33和电磁阀v5、v6。作为定量部33,使用注射器泵。再者,代替注射器泵而还能使用例如隔膜泵。电磁阀v5、v6开闭流路。定量部33及电磁阀v5、v6向第1室420定量送入试剂容器r2内的稀释液。
121.收容变得不要的溶液的废液室36连接到第1室420。在第1室420和废液室36之间设开闭流路的电磁阀v7。
122.第1室420为了搅拌第1室420内的液体,与向第1室420内供给气的泵56a连接。
123.在收容稀释液的试剂容器r2和第2室55之间的流路设定量部38和电磁阀v8、v9。作为定量部38,使用注射器泵。再者,代替注射器泵而还能使用例如隔膜泵。电磁阀v8、v9开闭流路。定量部38及电磁阀v8、v9向第2室55定量送入试剂容器r2内的稀释液。收容变得不要的溶液的废液室41连接到第2室55。在第2室55和废液室41之间设在将流路从第2室55通到废液室41的流路和从第2室55通到rbc/plt检测部461及hgb检测部462的流路之间切换的电磁阀v10。对于电磁阀v13而后述。
124.在收容sls溶血剂的试剂容器r3和第2室55之间的流路设定量部39和电磁阀v11、v12。作为定量部39,使用注射器泵。再者,代替注射器泵而还能使用例如隔膜泵。电磁阀v11、v12开闭流路。定量部39及电磁阀v11、v12向第2室55定量送入试剂容器r3内的sls溶血剂。
125.第2室55为了搅拌第2室55内的液体,与向第2室55内供给气的泵56b连接。
126.受试体抽吸机构450具有抽吸管20及定量部21。抽吸管20尖端锐利地形成。通过受试体抽吸机构450下降采血管100,抽吸管20穿刺堵塞采血管100的盖100a,插入到内部。通过在抽吸管20插入到采血管100的内部的状态下定量部21生成负压,收容在采血管100的血液试样被抽吸到抽吸管20内。受试体抽吸机构450向上方移动抽吸管20,从采血管100拔出抽吸管20,向第1室420的上方水平移动抽吸管20。受试体抽吸机构450对于第1室420使抽吸管20下降,通过定量部21生成正压,向第1室420吐出抽吸的血液试样。受试体抽吸机构450向上方移动抽吸管20而向第2室55的上方水平移动,与第1室420之时同样地向第2室55吐出血液试样。
127.第1室420与fcm检测部460(参照图4)连接。吐出到第1室420的血液试样与收容在上述的试剂容器200的白细胞染色试剂及收容在试剂容器r1的溶血剂混合,调制测定试样。更具体而言,红细胞调制由溶血剂溶血,并且白细胞调制由第1荧光染料及第2荧光染料染色的测定试样。这样的测定试样如例如以下一样调制。首先,向第1室420供给溶血剂,接下来向第1室420吐出血液试样。向第1室420供给气,搅拌混合物。由此,由溶血剂溶血红细胞。接下来,向第1室420供给白细胞染色试剂。向第1室420供给气,搅拌混合物。在第1室420内推进反应,进行由荧光染料的染色。反应时间例如不足1分钟,更优选为不足50秒钟,更优选为不足45秒钟。由此,得到了血液中所含的白细胞由第1荧光染料及第2荧光染料染色的测定试样。fcm检测部460与未图示的泵连接,由泵的驱动而第1室420内的测定试样供给于fcm检测部460。fcm检测部460从白细胞取得含与第1荧光染料相对应的荧光及与第2荧光染料相对应的荧光的多个光信号。
128.第2室55与rbc/plt检测部461和hgb检测部462连接。电磁阀v13切换自第2室55的测定试样向rbc/plt检测部46的送液和向hgb检测部462的送液。rbc/plt检测部461和hgb检测部462与未图示的泵连接,由泵的驱动而第2室55内的测定试样供给于rbc/plt检测部461和hgb检测部462的各自。第2室55在用于rbc/plt检测的测定试样和用于hgb检测的测定试样两者的调制中使用。对这样的试样的调制程序的一例进行说明。首先,从试剂容器r2向第2室55供给稀释液。接下来,向第2室55吐出血液试样。由此,得到了稀释血液的测定试样。这成为用于rbc/plt检测的测定试样。第2室55的测定试样的一部分输送到rbc/plt检测部461,进行电阻式检测。接下来,向残留在第2室55的测定试样从试剂容器r3供给sls溶血剂。由此,红细胞溶血的同时,得到了血红蛋白转化为sls血红蛋白的测定试样。此测定试样输
送到hgb检测部462。再者,在图5的例中,将用于rbc/plt检测的测定试样和用于hgb检测的测定试样用共同的第2室55调制,但也可各自由分别的室调制。
129.具有这样的构成的分析系统4000(参照图1)也可构成为能测定由红细胞数(rbc)、白细胞数(wbc)、血小板数(plt)、血红蛋白浓度(hgb)、血细胞容量值(hct)、平均红细胞容积(mcv)、平均红细胞血染料量(mch)、及平均红细胞血染料浓度(mchc)的至少8个参数构成的cbc(complete blood count)项目。再者,分析系统4000也可构成为除了cbc项目之外,能测定将白细胞分类为多个亚集团的diff项目。
130.<关于试样调制部的变形例>
131.图6是显示第1试样调制部440a的其他一例的模式图。再者,在图6中,与图5中的要素同样的要素省略图示。在上述的图5中所示的例中,例示以将含第1荧光染料和第2荧光染料的试剂收容在1个试剂容器200内,将1个试剂容器200内的试剂由1个送液机构430输送到室420内的方式构成的第1试样调制部440a。在图6中所示的变形例的第1试样调制部440a中,以将含第1荧光染料的试剂和含第2荧光染料的试剂各自收容在个别的试剂容器200a、200b,将各试剂容器200a、200b内的试剂各自由个别的第1及第2送液机构430a、430b输送到室420内的方式构成。
132.在图6的第1试样调制部440a中,使含安装在试剂容器支架的第1及第2荧光染料的任何一方的2个试剂与受试体混合,具备调制由第1及第2荧光染料对细胞进行染色的测定试样的1以上的室420。收容含第1荧光染料的试剂的第1试剂容器200a安装在试剂容器支架442的第1支架部,收容有含第2荧光染料的试剂的第2试剂容器200b安装在试剂容器支架442的第2支架部。
133.第1送液机构430a为了向室54输送第1试剂容器200a的试剂而设。第1送液机构430a的构成如参照图3说明。第2送液机构430b为了向室54输送第2试剂容器200b的试剂而设。第2送液机构430b的构成与第1送液机构同样。2个送液机构430a、430b的送液管431在流路的途中合流,与室420连接。再者,在图6的例中,显示2个送液管合流的例,但2个送液管也可个别地与室420连接。
134.在图6的构成中,含第1荧光染料的试剂和含第2荧光染料的试剂收容在各自不同的试剂容器200a、200b,由不同的2个送液机构供给于室420,与受试体混合。由此构成构建,也可将受试体中所含的血细胞成分由2个荧光染料染色的体系。
135.图7是显示fcm检测部460的光学系的一例的构成说明图。如图7所示,fcm检测部460具备波长互相不同的第1光源4111a、第2光源4111b,流动池4113,二向色镜4118a、4118b、4118c,侧方散射光光接收元件4121a、4121b,前方散射光光接收元件4116和侧方荧光光接收元件4122a、4122b。在图7的例中,光源由用于激发第1荧光染料的第1光源4111a及用于激发第2荧光染料的第2光源4111b构成。
136.fcm检测部460取得由与自第1光源4111a的侧方散射光及侧方荧光各自相对应的多个信号构成的上述第1信号和由与由第2光源4111b的前方散射光、侧方散射光及侧方荧光各自相对应的多个信号构成的上述第2信号。如上所述,fcm检测部460与第1试样调制部440a的第1室420连接(参照图5)。在第1室420中调制的测定试样在fcm检测部460的流动池(鞘流池)4113流动。在图7的例中,使测定试样向相对于纸面垂直方向流。在测定试样在流动池4113内流动的状态下,第1光源4111a及第2光源4111b向流动池4113照射光。更具体而
言,从第1光源4111a发出的光由二向色镜4118a反射而照射到流动池4113。从第2光源4111b发出的光透过二向色镜4118a而照射到流动池4113。
137.fcm检测部460的第1光源4111a及第2光源4111b不特别限定,选择适宜于荧光染料的激发的波长的光源。第1光源4111a是例如,能照射第1波长的光,第2光源4111b是能照射作为比第1波长长的波长的第2波长的光。例如,第1波长是315~490nm,优选为400~450nm,更优选为400~410nm。第2波长是610~750nm,优选为620~700nm,更优选为633~643nm。作为这样的第1及第2光源4111a、4111b,能使用例如,半导体激光源、氩激光源、氦-氖激光等的气体激光源、汞弧光灯等。特别是,由于半导体激光源与气体激光源相比廉价,从而适宜。如上所述,通过对于第1光源4111a及第2光源4111b而选择照射的光的波长带区相离开的,变得容易选择与各光源各自相对应自的荧光染料的荧光的波长带区的重叠小的染料。在从荧光染料发出的荧光的波长带区的重叠大时,有对应于后述的漏入的必要,通过可选择荧光的波长带区的重叠小的(或无重叠)荧光染料,变得无需向漏入的对应。
138.前方散射光光接收元件4116以基于从第2光源4111b照射的光而接收从细胞发出的前方散射光的方式配置。前方散射光光接收元件4116,例如,以仅接收与从第2光源4111b照射的光相对应的前方散射光的方式构成。前方散射光光接收元件4116是例如光电二极管。在此例中,光接收元件4116接收从第2光源4111b照射的第2波长的前方散射光,但也可替代性地接收从第1光源4111a照射的第1波长的前方散射光。
139.侧方散射光光接收元件4121a以接收与自第1光源4111a的光相对应的侧方散射光的方式配置。与从第1光源4111a照射的光相对应的侧方散射光(第1侧方散射光)由二向色镜4118b反射,由侧方散射光光接收元件4121a接收。侧方散射光光接收元件4121a是例如光电二极管。
140.侧方散射光光接收元件4121b以接收与自第2光源4111b的光相对应的侧方散射光的方式配置。与从第2光源4111b照射的光相对应的侧方散射光(第2侧方散射光)由二向色镜4118c反射,由侧方散射光光接收元件4121b接收。侧方散射光光接收元件4121b是例如光电二极管。
141.侧方荧光光接收元件4122a以接收由与自第1光源4111a的光相对应的荧光、即自第1光源4111a的第1波长的光激发第1荧光染料而发生的光的方式配置。与从第1光源4111a照射的光相对应的侧方荧光(第1侧方荧光)透过二向色镜4118b而由侧方荧光光接收元件4122a接收。侧方荧光光接收元件4122a是例如雪崩光电二极管。
142.侧方荧光光接收元件4122b以接收由与自第2光源4111b的光相对应的荧光、即自第2光源4111b的第2波长的光激发第2荧光染料而发生的光的方式配置。与从第2光源4111b照射的光相对应的侧方荧光(第2侧方荧光)透过二向色镜4118c而由侧方荧光光接收元件4122b接收。侧方荧光光接收元件4122b是例如雪崩光电二极管。再者,也可作为前方散射光光接收元件4116、侧方散射光光接收元件4121a、4121b、侧方荧光光接收元件4122a、4122b,使用光电子增倍管。
143.前方散射光光接收元件4116、侧方散射光光接收元件4121a、4121b、侧方荧光光接收元件4122a、4122b各自输出含对应于光接收强度的脉冲的波形状的电信号(也称为光接收信号)。典型而言,光接收信号的各脉冲与一个细胞(例如白细胞)相对应。输出的光接收信号各自向模拟处理部481输入。模拟处理部481对于从fcm检测部460输入的模拟信号进行
噪声除去、平末端化等的处理,对于a/d变换部481a输出处理后的模拟信号。此外的模拟处理部482、483(参照图4)与模拟处理部481同样地构成。
144.a/d变换部481a将从模拟处理部481输出的模拟信号变换为数字信号。a/d变换部481a将受试体的测定开始至测定结束的模拟信号变换为数字信号。在由在某测定通道的测定生成多种模拟信号(例如,与前方散射光强度、第1侧方散射光强度、第1荧光强度、第2侧方散射光强度、及第2荧光强度各自相对应的模拟信号)时,a/d变换部481a将各自的模拟信号的测定开始至测定结束变换为数字信号。向a/d变换部481a输入例如,5种模拟信号(即前方散射光信号、第1侧方散射光信号、第1荧光信号、第2侧方散射光信号及第2荧光信号)。a/d变换部481a将输入的模拟信号的各自变换为数字信号。
145.a/d变换部481a例如,以指定的采样率(例如,以10纳秒间隔1024个点的采样、以80纳秒间隔128个点的采样、或者以160纳秒间隔64个点的采样等)采样模拟信号。a/d变换部481a通过例如,对于与在流动池4113内流动的各细胞相对应的5种模拟信号执行采样处理,对于各有形成分而生成前方散射光信号的波形数据、第1侧方散射光信号的波形数据、第1荧光信号的波形数据、第2侧方散射光信号的波形数据、及第2荧光信号的波形数据。a/d变换部481a向生成的波形数据的各自赋予指数。生成的波形数据成为例如,具有与一个受试体中所含的n个细胞各自相对应的信号的数字信号。由此,生成与从n个细胞得到的5种模拟信号(前方散射光信号、第1、第2侧方散射光信号及第1、第2荧光信号)相对应的5个数字信号(参照图39)。
146.a/d变换部481a除了从模拟信号生成波形数据之外,从模拟信号的脉冲计算表示各细胞的形态的特征的特征参数、例如,峰值、脉宽、脉冲面积。
147.图8是显示fcm检测部的光学系的其他例的构成说明图。如图8所示,fcm检测部460x的光源也可由激发第1荧光染料及第2荧光染料的一个光源4111构成。此时,fcm检测部460x取得由与自光源4111的前方散射光、侧方散射光及侧方荧光各自相对应的多个信号构成的上述第1信号和与由光源4111的侧方荧光相对应的第2信号。
148.此时,从一个光源4111,例如,指定波长的光对于流动池4113照射。流经流动池4113的测定试样中所含的细胞与上述的例同样地,用从激发的荧光染料释放的荧光的波长不同的多种荧光染料染色。在此例的情况中,多种荧光染料使用通过照射指定波长(例如488nm)的光而激发的波长不同的多种荧光染料。激发的波长不同的多种荧光染料是指例如,通过向各荧光染料照射自一个光源的光而激发而释放的荧光的色彩不同。
149.在图8中所示的fcm检测部460x的光学系中,可将测定试样中所含的细胞用多个荧光染料染色,从一个光源4111向细胞照射光而检测从多个荧光染料发出之时的各荧光。此时,由于从一个光源4111照射的光具有单一波长,从一个光源4111向细胞照射光之时,发出与该光的单一波长相对应的一个侧方散射光。从而,在图8中所示的fcm检测部460x的光学系中,对于二向色镜而设一个二向色镜4118,对于此外的构成而与图7中所示的光学系大致同样。
150.荧光染料的各自的荧光具有各自固有的光谱。因此,在由光学系统(例如,图7中的二向色镜4118、侧方荧光光接收元件4122a、4122b)与单一波长区域分离时,各自有从与一个细胞中的目标的分子结合的一个荧光染料以外的其他荧光染料发出的荧光漏入侧方荧光光接收元件4122a、4122b。例如,如图9所示的例一样,在通过向多个荧光染料照射单一波
长的光,激发各荧光染料时,有各荧光染料被激发而释放的各荧光的波长带区的重叠变大的情况。如显示荧光的波长带区的重叠的例的图9一样,在选择在荧光的波长带区有重叠的多个荧光染料时,例如,实施了对于荧光的漏入的对应。
151.图9是显示从不同的2个荧光染料发出的荧光互相漏入的例的图。在图9中所示的例中,显示从荧光染料f1和荧光染料f2的2个染料发出的各荧光互相漏入的例。图9中例示的坐标图的纵轴表示荧光高度,横轴表示波长。从荧光染料f1发出的光,图9的波长带区(a)的光由一方的侧方荧光光接收元件检测。另外,从荧光染料f2发出的光,图9的波长带区(b)的光由另一方的侧方荧光光接收元件检测。由与荧光染料f1相对应的一方的侧方荧光光接收元件检测的波长带区(a)含由荧光染料f2发出的荧光的波长带区。另外,由与荧光染料f2相对应的另一方的侧方荧光光接收元件检测的波长带区(b)含由荧光染料f1发出的荧光的波长带区。从而,通过在进行波长带区(a)的荧光(与荧光染料f1相对应)之中,除去与荧光染料f2相对应的部分的修正,可更正确地得到由荧光染料f1的荧光的测定值。另外,通过在波长带区(b)的荧光(与荧光染料f2相对应)之中,进行除去与荧光染料f1相对应的部分的修正,可更正确地得到由荧光染料f2的荧光的测定值。
152.为了修正图9中所示的荧光的漏入,使用荧光染料f1的阳性对照及荧光染料f2的阳性对照。在荧光染料f1的阳性对照中,例如,使用含有附加荧光染料f1的粒子的对照试剂。在荧光染料f2的阳性对照中,使用例如,含有附加荧光染料f2的粒子的对照试剂。
153.图8中所例示的由具备光学系的分析系统的荧光染料f1的阳性对照的测定在受试体的测定之前如以下一样进行。向在流动池4113内流动的阳性对照中的粒子照射自光源4111的光(单一波长的光)。通过向粒子照射光而发生的荧光由各侧方荧光光接收元件4122a、4122b检测。例如,侧方荧光光接收元件4122a与从荧光染料f1发出的荧光的检测相对应,侧方荧光光接收元件4122b与从荧光染料f2发生的荧光的检测相对应。此时,从荧光染料f1的阳性对照中的粒子发出的荧光之中,变得用侧方荧光光接收元件4122b检测的荧光漏入。例如,从荧光染料f1的阳性对照中的粒子发生的荧光之中,在用侧方荧光光接收元件4122a检测的荧光强度是“100”,用侧方荧光光接收元件4122b检测的荧光强度是“5”时,自荧光染料f1的荧光的5%漏入4122b。例如,从荧光染料f2的阳性对照中的粒子发出的荧光之中,在用侧方荧光光接收元件4122a检测的荧光强度是“10”,用侧方荧光光接收元件4122b检测的荧光强度是“100”时,自荧光染料f2的荧光的10%漏入侧方荧光光接收元件4122a。将结果综合,则如下述的表1一样。此表1在往后也有称为“补偿基质”的情况。
154.【表1】
155.侧方荧光光接收元件4122a侧方荧光光接收元件4122b荧光染料f1\5%荧光染料f210%\
156.接下来,对使用上述的补偿基质修正从含用各荧光染料f1、f2染色的细胞的测定试样得到的测定值的例进行说明。测定值的修正的例如下所述:
157.·
由侧方荧光光接收元件4122a的荧光染料f1的修正的荧光强度=用侧方荧光光接收元件4122a测定的荧光强度-(将荧光染料f2的阳性对照用侧方荧光光接收元件4122b测定之时的荧光强度的5%)
158.·
由侧方荧光光接收元件4122b的荧光染料f2的修正的荧光强度=用侧方荧光光
接收元件4122b测定的荧光强度-(将荧光染料f1的阳性对照用侧方荧光光接收元件4122a测定之时的荧光强度的10%)
159.在上述的例中,在将荧光染料f1的阳性对照的荧光用侧方荧光光接收元件4122a检测时的荧光强度是“100”,在将荧光染料f2的阳性对照的荧光用侧方荧光光接收元件4122b检测时的荧光强度是“100”。从而,修正后的荧光强度各自变得如下:
160.·
由侧方荧光光接收元件4122a的荧光染料f1的修正的荧光强度=用侧方荧光光接收元件4122a测定的荧光强度100-10
161.·
由侧方荧光光接收元件4122b的荧光染料f2的修正的荧光强度=用侧方荧光光接收元件4122b测定的荧光强度100-5
162.在图7及图8中所例示的光学系中,显示作为第1荧光染料及第2荧光染料被激发而发生的荧光,检测在相对于照射光的进行方向而侧方(在图7及图8的例中相对于进行方向约90
°
)发生的荧光(侧方荧光)的例,但不限于此例。例如,可检测相对于照射光的前进方向而前方发生的荧光,也可检测在相对于照射光的前进方向而不是直角的一定的角度、例如20~90
°
发生的荧光。
163.图10是显示分析单元300x的构成的一例的框图。如图10所示,分析单元300x经接口部3006而与测定单元400电连接。接口部3006是例如,usb接口。分析单元300x具备处理器3001、主存储器3017、总线3003、存储部3004、上述接口部3006、显示部3015及操作部3016。分析单元300x例如,由个人计算机(参照图1的分析单元300x)构成,通过执行储纳在存储部3004的程序,控制分析系统4000的测定单元400。分析单元300x例如,执行分析用的程序,对用测定单元400取得的数据进行分析。分析单元300x在显示部3015显示分析结果。分析单元300x,在参照例如图7说明的例中,也可通过向学习完的ai算法输入与测定单元400由fcm检测部460从各细胞取得的前方散射光强度、第1侧方散射光强度、第1荧光强度、第2侧方散射光强度、及第2荧光强度之中的至少1个,优选为多个相对应的波形数据来进行细胞的分类。或者,分析单元300x也可基于基于前方散射光强度、第1侧方散射光强度、第1荧光强度、第2侧方散射光强度、及第2荧光强度的各细胞的特征参数(峰值、脉宽、脉冲面积)而进行细胞的分类。例如,作为使用多个特征参数而将粒子分类为多个种类的方法,可采用通过将粒子标绘到以多个参数作为轴的多维的坐标空间,将至少若干的粒子分类为与多个种类相对应的多个集团,基于各集团的重心位置和粒子的距离而求出对于各集团的各粒子的归属度,基于归属度而再分类粒子来将多个粒子分类为多个种类的方法。这样的分类方法记载在例如美国专利第5,555,198号。美国专利第5,555,198号作为参照整合到本说明书中。或者,对于一个测定试样中所含的一部分的细胞进行基于ai算法的分类,对于其他细胞也可进行基于特征参数的分类。
164.处理器3001是cpu(central processing unit),执行从存储部3004向主存储器3017展开的程序。存储部3004是例如,硬盘、ssd(solid state drive)。在存储部3004中存储例如,用于控制测定单元400的程序、用于分析测定单元400取得的数据的程序等。显示部3015具备计算机筛选。显示部3015经接口部3006和总线3003与处理器3001电连接。在显示部3015显示例如,用测定单元400取得的数据的分析结果。
165.操作部3016具备含键盘、鼠标或触控面板的指示装置。医师或检查技师等的使用者通过操作操作部3016,可向分析系统4000输入测定量级,根据测定量级而输入测定指示。
操作部3016也可从使用者接受显示检查结果的指示。使用者可操作操作部3016,阅览关于检查结果的各种各样的信息、例如,坐标图、图、赋予受试体的标志信息。上述的测定单元400经接口部3006与分析单元300x电连接。
166.图11是显示分析系统4000的其他构成例的斜视图。在图1~图10中所示的构成例中例示设为测定单元400和分析单元300x分开的分析系统4000,如图11所示,分析系统4001也可在测定单元400内设分析部300x。由此构成,分析系统4001整体变得紧凑。
167.图12是显示测定单元的其他一例的构成的框图。在图2、图5及图6的例中显示能由fcm检测部460测定的测定系(也称为测定通道)是一个例。在图12的构成例中显示设5个测定通道的例。
168.第1试样调制部440a具备5个室54a~54e。室54a~54e各自在diff、ret、wpc、plt-f、wnr的测定通道中使用。能向各室54a~54e各自经流路输送收容作为与各测定通道相对应的试剂的溶血剂的溶血剂容器和收容染色液的染色液容器。由设为能输送到一个室及室的溶血剂容器及染色液容器构成一个测定通道。例如,diff测定通道由收容作为diff测定用试剂的diff溶血剂的溶血剂容器及收容diff染色液的染色液容器和与这些经流路关联的diff室54a构成。其他测定通道也同样地构成。再者,例示其中一个测定通道以将1种溶血剂和1种染色液两者供给到室的方式构成的情况,但不限定于此构成。例如,也可以将1种溶血剂和1种染色液两者供给到不同的多个室的方式构成多个测定通道。换言之,可以由多个测定通道共用一个试剂(1种溶血剂和1种染色液)的方式设置,例如,五个测定通道之中,二个可为diff的测定通道。再者,测定通道也可为一个,或者,例如,也可仅设二个diff的测定通道的构成。
169.受试体抽吸机构450(参照图2、图4、图5)从收容血液受试体的受试体容器t抽吸血液受试体,由利用装置机构部455(参照图4)的水平
·
上下移动移动至室54a~54e之中与量级相对应的测定通道的室的上方位置,向室内吐出抽吸的血液受试体。试样调制部440通过供给与血液受试体吐出的室相对应的溶血剂和染色液,在室内混合血液受试体、溶血剂和染色液来调制测定试样。调制的测定试样经流路从室供给于fcm检测部460,进行由流式细胞术的细胞的测定。
170.上述的测定通道(diff、ret、wpc、plt-f、wnr)与测定量级中所含的测定项目相对应。例如,diff与关于白细胞的分类的测定项目相对应。ret与关于网状红细胞(网织红细胞)的测定项目相对应。wpc与关于异常白细胞的测定的测定项目相对应。plt-f与关于血小板的光学测定的测定项目相对应。wnr与关于白细胞和有核红细胞的测定项目相对应。上述的测定通道(diff、ret、wpc、plt-f、wnr)由fcm检测部460测定。
171.图13是显示打开测定单元40的盖442的状态的图。图14是显示测定单元400的试剂容器支架60的斜视图,图15是显示图14中所示的试剂容器支架60的正面图。在分析系统4000的测定单元400(参照图1)的前面侧设能开闭的前面盖442(参照图13)。试剂容器支架60配置于测定单元400的前面上部,如图13所示,通过打开盖442,试剂容器支架60露出,由使用者的接入变得可能。即,使用者向试剂容器支架60的试剂容器200的设置和自试剂容器支架60的试剂容器200的取出变得可能。
172.如图14和图15所示,试剂容器支架60含五个支架部60a、60b、60c、60d及60e,以保持合计5个(5种)的试剂容器200(或者300)的方式构成。保持在试剂容器支架60的试剂容器
200(或者300)收容用于由fcm检测部460测定多个测定项目的各自不同的种类的试剂(染色液)。试剂容器的色彩是例如黑色。试剂容器对应于试剂的种类而使用大型(约100ml)的试剂容器200(参照图22)和小型(约20ml)的试剂容器300(参照图25)。试剂容器的容量不限定于上述的,也可例如,比20ml少的容量、比100ml少的容量、比100ml多的容量。例如,也可为约10ml、约40ml、约80ml、约300ml。各支架部60a~60e例如,以能保持试剂容器200或300之任一者的方式构成。从而,五个支架部60a~60e可各自具有同样的构成,在例如三个支架部60a~60c设置大型的试剂容器200的同时,在二个支架部60d及60e设置小型的试剂容器300。支架部60a~60e各自含底座61,试剂容器保持部62,用于开闭试剂容器保持部62的盖63,上述的抽吸管64和抽吸管升降机构65。
173.试剂容器保持部62设在底座61的下部(参照图14、图15)。试剂容器保持部62如图15所示,高度是h,如图16所示,含具有宽度w11的第1受入部621,与第1受入部621连续,从第1受入部621以指定角度θ2扩展的中间受入部622和与中间受入部622连续的第2受入部623。第1受入部621如图16和图17所示,具有能收纳试剂容器200(300)的后述的第1收容部210(310)的同时,禁止使用者的指进入的宽度(幅w11)。再者,指是指例如,具有平均的的粗度的成人的指,例如,宽度w11是10mm。另外,第2受入部623具有比宽度w11大的宽度w12。如图16和图17所示,第1受入部621配置于试剂容器保持部62的最内侧(箭头y2方向侧)。试剂容器200(300)从第1收容部210(310)的后述的进入部212(312)侧向试剂容器保持部62的内侧插入。从而,试剂容器保持部62以在以试剂容器200(300)的进入部212(312)成为最内侧(箭头y2方向侧)的方式插入的状态下保持试剂容器200(300)的方式构成。
174.另外,如图16~图18所示,试剂容器保持部62含引导试剂容器200(300)的第1收容部210(310)的两侧面214(314)而引导到第1受入部621的一对引导部件627。引导部件627具有向第1受入部621引导试剂容器200(300)的第1收容部210(310)的第1引导部627a,与中间受入部622相对应的中间引导部627b和向第2受入部623引导试剂容器200(300)的后述的第2收容部220(320)的第2引导部627c。再者,引导部件627由底座61的一部分(两内侧面)形成。上述的第1受入部621、中间受入部622及第2受入部623由各自对应的一对第1引导部627a之间的空间、一对中间引导部627b之间的空间及一对第2引导部627c之间的空间形成。从而,第1受入部621的宽度w11与一对第1引导部627a之间的宽度相等,第2受入部623的宽度w12与一对第2引导部627c之间的宽度相等。
175.一对引导部件627具有与试剂容器200(300)的第1收容部210(310)的两侧面214(314)的高度h1(参照图24和图27)大致相等的高度h(参照图14),构成为能经试剂容器200(300)的第1收容部210(310)的两侧面214(314)的下端至上端各自引导。再者,一对引导部件627具有反映第1收容部210(310)的外形形状的形状,以能引导试剂容器200(300)的第1收容部210(310)的两侧面214(314)整体的方式构成。另外,中间引导部627b和第2引导部627c具有反映大型的试剂容器200的外形形状的形状,以能引导第2收容部220的尖端侧(第1收容部210侧)一半的两侧面的方式构成。此大型的试剂容器200的第2收容部220具有比第1收容部210的宽度w21大的宽度w22,第1引导部627a以比第2收容部220的宽度w22小的宽度w11设置。
176.另外,如图18所示,试剂容器保持部62含支持试剂容器200(300)的支持部624和能转动地支持支持部624的转动机构625。支持部624是一体具有与试剂容器200(300)的前面
(第1收容部210(310)的尖端面、参照图16和图17)抵接的前侧部624a和与试剂容器200(300)的下表面抵接的下侧部624b的板状部件。即,支持部624以具有与试剂容器200(300)的形状相对应的形状的方式形成。转动机构625以能通过在设在底座61的内侧面的环状的轴承625a插入设在支持部624的突起部624c,以突起部624c(轴承625a)的位置作为转动中心转动支持部624的方式构成。
177.再者,在底座61的内部,通过与支持部624的前侧部624a抵接,设卡定转动的支持部624的卡定部626。在卡定部626设磁铁,以在与支持部624的前侧部624a抵接的状态下卡定部626保持前侧部624a(支持部624)的方式构成。由此,支持部624以向下侧部624b变得水平(试剂容器200(300)的下表面是水平)的装载位置p1(参照图19)和前侧部624a变得垂直的设置位置q1(参照图20)移动的方式构成。如图20所示,以在配置于此设置位置q1的状态下,试剂容器200(300)的后述的进入部212(312)(参照图16和图17)变得水平(相对于抽吸管64正交)的方式构成。
178.盖63,如图19所示,以从支架部60a~60e(底座61)的各自向近前侧(箭头y1方向侧)突出的方式配置,设置于抽吸管升降机构65。利用此抽吸管升降机构65,盖63能向打开试剂容器保持部62的升高位置p2(参照图19)和覆盖(闭锁)试剂容器保持部62的下降位置q2(参照图21)移动地构成。从而,盖63以在升高位置p2容许试剂容器200(300)的出入的同时,在下降位置q2禁止试剂容器200(300)的出入的方式构成。
179.另外,如图15所示,在盖63的指定位置设由开口构成的窗部631。如图21所示,以在位于盖63覆盖(闭锁)试剂容器保持部62的下降位置q2的状态下,使用者能经此窗部631目视确认贴附在试剂容器200(300)的标签250(参照350、图25)的方式构成。向能经标签250(350)的窗部631目视确认的位置印刷区别试剂容器200(300)的种类(试剂的种类)的标记。另外,在盖63贴附印刷有区别设置于试剂容器保持部62的试剂容器200(300)的种类(试剂的种类)的标记的标签632。即,为了在五个支架部60a~60e设置收容各自确定的种类的试剂的试剂容器200(300),与其相对应,在各支架部60a~60e的盖63贴附区别要设置的试剂的种类的标签632。由此,以能以在试剂容器保持部62设置试剂容器200(300)的状态(将盖63降到下降位置q2的状态),从附在盖63的标签632和经窗部631目视确认的标签250(350),确认正确的试剂是否设置于各支架部60a~60e的方式构成。
180.如图16和图20所示,抽吸管64以配置于试剂容器保持部62的第1受入部621的里面(箭头y2方向侧)的上方位置,由保持抽吸管64的抽吸管升降机构65在垂直方向(z方向)移动的方式构成。由此,抽吸管64以经插入到试剂容器保持部62的内侧的试剂容器200(300)的进入部212(312)而进入到第1收容部210(310),能抽吸试剂容器200(300)内部的试剂的方式构成。另外,抽吸管64以能贯通(穿刺)用于封闭在试剂容器200(300)的进入部212(312)形成尖端的开口部212a(312a)(参照图17和图18)的密封部件213(313)的方式形成。另外,如参照图2、图5及图6进行说明,抽吸管64构成送液管431的一端,抽吸管64的上端与至送液部430及室420的流路(图19~图21中省略图示)连接。
181.如图19和图20所示,抽吸管升降机构65以保持抽吸管26和盖63的方式构成。另外,抽吸管升降机构65能在垂直方向(z方向)移动地卡合到设在底座61的沟部611及612。由此,抽吸管升降机构65以与盖63的开闭(升降移动)连动而向垂直方向(z方向)一体移动抽吸管26的方式构成。进而,如图19所示,在盖63配置于升高位置p2的状态下,抽吸管26配置于试
剂容器保持部62的上方(试剂容器200(300)及第1受入部621的外部)的升高位置p3。另外,如图21所示,以在盖63配置于下降位置q2的状态下,抽吸管26配置于接近于试剂容器200(300)的进入部212(312)正下方的内底部的下降位置q3的方式构成。
182.插入到试剂容器内的抽吸管26的尖端成为送液管的第1端。抽吸管26的第1端,试剂容器配置于装置之间、固定于上述的下降位置q3。即,使用试剂容器内的试剂实施多个受试体的测定之间、抽吸管26的第1端固定于下降位置q3。
183.如图22和图25所示,以大型(容量约100ml)的试剂容器200和小型(容量约20ml)的试剂容器300与收容的试剂的种类相对应使用的方式构成。试剂容器200及300各自一体含设有抽吸管26能进入上部的进入部212(312)的第1收容部210(310)和与第1收容部210(310)连续的第2收容部220(320)。第1收容部210(310),如图17和图18所示,以在试剂容器200(300)设置于试剂容器保持部62的状态下配置于第1受入部621的内部的方式构成。第2收容部220(320),如图17和图18所示,以在试剂容器200(300)设置于试剂容器保持部62的状态下配置于第1受入部621的外部的方式构成。另外,如图23和图26所示,在各自的第1收容部210(310)内部设第1试剂收容空间211(311),在各自的第2收容部220(320)内部设与第1试剂收容空间211(311)连续的第2试剂收容空间221(321)。
184.第1收容部210(310)是具有长度l11的部分,这些形状在试剂容器200及300上大致共同。试剂容器200及300由于第1收容部210及310的形状大致共同,成为对具有相同形状的支架部60a~60e的试剂容器保持部62(第1受入部621)各自设置可能。
185.具体而言,如图17和图18所示,各自的第1收容部210(310)具有比第1受入部621的宽度w11略微小的一定的宽度w21。另外,在第1收容部210(310)中,各自在前侧(在试剂容器保持部62插入第1收容部210(310)的方向、图17和图18的箭头y2方向)的端部设进入部212(312)。从而,试剂容器200(300)以从第1收容部210(310)的进入部212(312)侧向试剂容器保持部62的内侧插入的方式构成。此进入部212(312),如图23和图26所示,以从外部上表面200b(300b)向上方突出的方式设置。如图22和图25所示,在突出的进入部212(312)形成与第1收容部210(310)内部连通的开口部212a(312a)。另外,在进入部212(312)中,以由铝箔等构成的密封部件213(313)堵塞开口部212a(312a)的方式设,以封闭试剂容器200(300)的方式构成。另外,进入部212(312)的外径与第1收容部210(310)的宽度w21相等,进入部212(312)以从第1收容部210(310)的前侧表面连续(在同一水平面上)突出的方式形成。
186.另外,如图23和图26所示,试剂容器200(300)各自以内部底面200a(300a)与外部上表面200b(300b)非平行,并且内部底面200a(300a)和外部上表面200b(300b)的距离随着接近于进入部212(312)而变大的方式构成。在第2实施方式中,以内部底面200a(300a)成为相对于外部上表面200b(300b)倾斜角度θ1(约10
°
)的倾斜面的方式构成。再者,在试剂容器200(300)的进入部212(312)的正下方的底面部存在与外部上表面200b(300b)大致平行的底部200c(300c),倾斜面200d(300d)从底部200c(300c)的端部开始。由此,试剂容器200(300)以在设置于图20中所示的设置位置q1的状态下,进入部212(312)位于最上方的同时,进入部212(312)的正下方的底部200c(300c)位于最下方的方式构成。
187.另外,在试剂容器200(300)的外部上表面200b(300b)各自设向上方(相对于外部上表面200b(300b)垂直方向)突出的突出部230(330)。突出部230(330)各自以具有在试剂容器200(300)的长边方向延伸的长度l1的板状形状的同时,成为与进入部212(312)略相等
的突出量(突出高度)的方式形成。突出部230(330)设在各自的第2收容部220(320)的后侧(图17和图18的箭头y1方向侧)端部附近的位置,以能容易地进行由使用者的试剂容器200(300)的设置作业或拆下作业的方式具有作为取手部的功能。
188.一方面,第2收容部220(320)的形状在试剂容器200和试剂容器300上不同。如图23所示,大型的试剂容器200的第2收容部220与第1收容部210连续,一体含随着从第1收容部210离开而宽度变大的第1部222和具有比宽度w21大的一定的宽度w22的第2部223。从而,如图23所示,在试剂容器200中,第2收容部220的内部的第2试剂收容空间221是经第1部222和第2部223两者连续而设的试剂收容空间。
189.如图23所示,第1部222以角度θ2(约60
°
)扩第1收容部210的宽度而与第2部223连续,将第1收容部210和第2部223连接。另外,以通过第2部223具有比宽度w21大的宽度w22,能以约100ml分确保第2试剂收容空间221的容量的方式构成。
190.再者,如图16和图17所示,试剂容器保持部62的中间受入部622和与中间受入部622连续而具有宽度w12的第2受入部623各自具有与此第1部222及具有宽度w22的第2部223相对应的形状。
191.如图26所示,小型的试剂容器300的第2收容部320具有一定且与第1收容部310的宽度w21相同的宽度w21。即,在小型的试剂容器300中,以第1收容部310及第2收容部320连续以直线状延伸的方式形成。再者,此第2收容部320的长度l22比大型的试剂容器200的第2收容部220的长度l21小的。小型的试剂容器300以通过含具有比大型的试剂容器200的第2收容部220小的宽度w21及长度l22的第2收容部320,具有整体约20ml的试剂容量的方式构成。
192.再者,如上所述,第1收容部310的长度l11,为了设置于第1受入部621,在试剂容器200及300上变得共同。从而,如图18所示,对于第1收容部310及第2收容部320以相同的宽度w21连续的小型的试剂容器300,收容在此第1受入部621的区域是第1收容部310,配置于第1受入部621外的区域是第2收容部320。
193.另外,小型的试剂容器300与大型的试剂容器200不同,在外部底面的倾斜面300d设沿试剂容器300的长边方向以直线状延伸的凹部340。由于在由此凹部340将倾斜面300d设置于水平面上时,成为凹部340的外周部分与水平面相接的接点,具有小的宽度w21的试剂容器300也能稳定直立。
194.另外,如图22和图25所示,在各试剂容器200(300)贴附各自印刷收容的试剂的名称、试剂的批编号、使用期限及区别用条码等的标签250(350)。此标签250(350)经各试剂容器200(300)的后侧表面和至少一方的横侧面贴附。另外,在标签250(350)的一部分(相当于各试剂容器200(300)的后侧表面的部分)或全部附显示收容的试剂的种类的色彩,以能由标签250(350)中显示的色彩区别试剂的种类的方式构成。能由此标签250(350)和贴附到试剂容器支架60的盖63的标签632(参照图15)的各自的色彩一致与否确认试剂容器200(300)设置于正确的支架部60a~60e与否。
195.试剂容器200(300)内的试剂能在分析系统4002设置的环境的温度保存。设置分析系统4002的环境温度是例如,20℃~35℃的范围的温度。例如,在环境温度中,试剂容器200(300)内的试剂是,试剂容器200设置于装置而开封进入部212的密封部件213之后,在装置内数个月间(例如,60天、90天、120天)、能在能保证性能的状态下保存。收容在试剂容器200
(300)的试剂,例如,含与从fcm检测部460的光源照射的多个波长的光各自相对应的多个荧光染料。这些荧光染料构成染料的化合物本身对细胞的细胞质、核酸、dna进行染色。作为对血液中的细胞进行染色的方法,知晓例如使用含与细胞的表面抗原(例如cd4或cd25)特异性地结合的标记抗体的抗体试剂的免疫染色,这样的抗体试剂使用一定时间(例如8小时)之后有在冰箱中冷却储存的必要。即,使用者有每一定时间从装置取出抗体试剂而返回冰箱,使用时再将抗体试剂设置于装置的必要。这方面、本实施方式的试剂构成染料的化合物(荧光染料)本身对细胞进行染色,由于不含抗体,无冷藏储存的必要,能在装置的使用环境温度储存。从而,在本实施方式中,只要是在保证性能的期间,一旦将试剂容器设置于装置,则至用尽试剂无需交换,试剂的交换频度低,削减由使用者的作业成本。
196.(第3实施方式)
197.在本实施方式中,试剂容器200以在设置于测定单元400后,抑制含有多个荧光染料的试剂的品质劣化,能在设置于测定单元400的状态下经更长期持续使用的方式构成。用于抑制品质劣化的主要的手段之一抑止试剂和空气的接触。为了抑止与空气的接触,在试剂容器200插入送液管的状态下密闭试剂容器200的开口。由于在通过密闭试剂容器200的开口来抑止空气和试剂的接触的状态下也能由送液管输送试剂,试剂容器200具备柔软的袋状的试剂收容部。
198.试剂的保存期间是例如,试剂容器200设置于测定单元400之后75天以上1年以内。保存期间是指能保证使用由测定单元400的试剂的测定精度的期间的长度。在本实施方式中,例如,在密闭试剂收容部10的内部的状态下,经75天以上1年以内的期间维持测定精度。由于可由试剂收容部10的密闭抑制试剂的劣化,可经更长期稳定维持试剂品质。结果,因为可降低含有多个荧光染料的试剂(试剂容器200)的交换频度,可降低关于交换作业的使用者的负担。多个荧光染料可各自收容在不同的试剂容器200,也可收容在一个试剂容器200。
199.参照图28及图29,对于根据其他实施方式的试剂容器200进行说明。试剂容器200,如图28(a)所示,设置于测定单元400。如图28(b)所示,在试剂容器200与对测定单元400的指定操作连动而从上方插入抽吸管252。抽吸管252构成上述的送液管的第一端。如图28(b)所示,在试剂容器200插入设在测定单元400的抽吸管252的状态下收容重复抽吸的试剂12。试剂容器200具备试剂收容部10和框20。以下,以上下方向作为z方向。如图29所示,水平方向之中,以试剂容器200的长边方向作为第1方向a,以试剂容器200的短边方向作为第2方向b。
200.试剂收容部10收容试剂12(参照图29)。如图29所示,试剂收容部10是袋状的液体收容部件。试剂收容部10的容量是例如,200ml以上500ml以下,20ml以上100ml以下。
201.试剂收容部10由膜状的材料以袋状形成。试剂收容部10具有柔软性而能变形。如图30所示,试剂收容部10通过使多个片状部件重合,将重合的膜材的互相的外边缘接合而以中空的袋状形成。也可通过将叠摞的1个膜材的外周部的内表面彼此接合而以袋状形成。
202.试剂收容部10由具有气体屏障性及遮光性的积层结构膜材11构成。气体屏障性是指使气体难透过的性质。在本说明书中,气体屏障性是指使空气、特别氧难透过。遮光性是指使光难透过的性质。由此,可抑制收容在试剂容器200的试剂12因外部的空气而劣化,及收容在试剂容器200的试剂12因日光等的外来光而劣化。结果,可经长期有效抑制试剂的劣化。
203.积层结构膜材11可含至少1层的基材层和至少1层的气体屏障层。积层结构膜材11可还含保护气体屏障层的外表面的保护层。积层结构膜材11也可具有由遮光性材料构成的遮光层。在气体屏障层中使用具有气体屏障性及遮光性两者的性质的材料时,气体屏障层和遮光层可为相同的层。积层结构膜材的层数是2以上,也可为3~9或10以上,不特别限定。
204.在试剂收容部10中使用的积层结构膜材11例如,可举出下述的构成。(袋外侧)/尼龙(15μm)/铝箔(9μm)/聚乙烯(9μm)/(袋内侧)。在此构成中,试剂收容部10是,尼龙作为保护层发挥功能,铝箔作为气体屏障层及遮光层发挥功能,聚乙烯是基材层。试剂收容部10由聚乙烯构成的基材层彼此由热焊接接合。此构成的积层结构膜材11是将由金属箔构成的气体屏障层积层到树脂基材层的结构的金属箔层压膜。
205.在积层结构膜材11中,也可使用例如,树脂系多层屏障膜、包被系膜、蒸镀膜、有机无机复合膜等。树脂系多层屏障膜是积层树脂材料的气体屏障层的结构的膜。在气体屏障性优良的树脂材料中,有例如pvdc(聚氯化亚乙烯)、pva(聚乙烯基醇)、evoh(亚乙基-乙烯基醇共聚物)等。包被系膜是在基材层包被气体屏障性材料(制膜)的结构的膜。制膜的气体屏障性材料有pvdc、pva、evoh等。蒸镀膜是在基材层蒸镀气体屏障性材料的结构的膜。在蒸镀的气体屏障性材料中,有铝等的金属、或者,氧化铝或氧化硅等的无机氧化物。在有机无机复合膜中,有分别积层有机材料(树脂材料)的气体屏障层和无机材料的气体屏障层的结构的积层膜或具备使无机材料分散到有机粘合剂中的气体屏障层的膜等。
206.框20含设置于试剂收容部10的开口21a。框20以与对测定单元400的指定操作连动而从上方插入抽吸管252之时密闭试剂收容部10的内部的方式构成。
207.如图28所示,试剂容器200由使用者以指定的设置姿势设置保持于测定单元400的容器保持部251。在试剂容器200设置于容器保持部251的设置位置ps的状态下,配置于试剂容器200的上方的抽吸管252从上方插入到开口21a内。设置位置ps是开口21a配置于抽吸管252的正下方的位置。框20以在插入抽吸管252的状态下,通过堵塞开口21a,密闭试剂收容部10的内部的方式构成。
208.由此,由于无在试剂容器200的设置前使用者进行在试剂容器200的开口21a内插入抽吸管252的作业的必要,可简便地进行向试剂容器200内插入抽吸管252。另外,由于插入抽吸管252之时密闭试剂收容部10的内部,可由密闭抑制试剂收容部10内的试剂与外部气体接触。因此,可抑制设置于测定单元400后的试剂的劣化。另外,通过把持例如框20的部分或设置于测定单元400,即使是具有柔软的袋状的试剂收容部10,也可简便地实施试剂容器200向测定单元400的设置作业。
209.当为不变形的硬质的试剂容器时,当在密闭状态下进行试剂的抽吸时,伴随试剂的减少而试剂容器的内部压力降低,变得与抽吸压力平衡而变得无法抽吸试剂,容器内部有使大气开放的必要,试剂容器内的试剂有因与空气的接触而劣化的可能性。
210.与此相比,在本实施方式中,由于具备能变形的袋状的试剂收容部10,可通过试剂收容部10本身收缩变形来回避内部压力的降低,结果,在密闭状态下也可进行试剂12的抽吸。从而,试剂容器100以由向开口21a的空气的流入抑制密闭试剂收容部10的内部的方式构成。可由向开口21a的空气的流入抑制抑制通过试剂收容部10的内部的试剂12与空气接触的试剂12的劣化。由于可抑制试剂的劣化,在将试剂容器200设置于测定单元400的状态下,可经更长期持续使用试剂容器200内的试剂。因此,使试剂收容部10的容量变大,通过能
从1个试剂容器200抽吸试剂更多次,可降低伴随测定单元400的运用的试剂容器200的交换频度。对于使用者,有可降低一定期间的试剂容器200的交换作业的执行次数这样的益处。
211.另外,在使用者不手动插入抽吸管252,由测定单元400的动作将抽吸管252插入开口21a内的构成中,开口21a的位置决定和开口21a的位置错开防止,对于不由抽吸管252伤试剂收容部10而确实地密闭试剂收容部10变得重要。本实施方式的试剂容器200在设置于测定单元400时,具备用于确实地进行开口21a的位置决定和开口21a的位置错开防止的框结构。
212.如图29所示,框20含具有开口21a的开口部21和以与测定单元400的一部分抵接而规制开口21a的移动的方式构成的移动规制部23。
213.通过移动规制部23与测定单元400的一部分抵接,可抑制开口21a移动。由此,可抑制插入抽吸管252时的抽吸管252和开口21a的位置错开。另外,由于可在抽吸管252从开口21a插入到试剂收容部10的内部的状态下,抑制抽吸管252和开口21a的位置错开,可有效维持试剂收容部10的内部的密闭状态。
214.开口部21是形成了开口21a的筒状部分。开口21a下端与试剂收容部10的内部关联,上端与试剂收容部10的外部关联。开口部21设在试剂收容部10的上部。
215.开口部21具有与设在抽吸管252的封闭体252a(参照图28)抵接而密闭开口21a的封闭面21b。由此,可由封闭体252a和封闭面21b的抵接容易并且有效密闭试剂收容部10。
216.封闭面21b可为开口部21的上端面、开口部21的内周面、开口部21的外周面之任一者。在图29的例中,封闭面21b是包围开口21a的开口部21的环状的上端面(即,开口21a的缘部),与设在抽吸管252的封闭体252a(图28(b)参照)上下抵接。
217.再者,在开口部21中,例如,可安装能装卸的帽。试剂容器200在由帽封闭开口21a的状态下提供于使用者,可拆下帽而设置于测定单元400。
218.另外,例如,可以能穿刺的密封膜覆盖开口21a的方式焊接到开口部21的上表面。试剂容器200在由密封膜封闭开口21a的状态下提供于使用者,在设置于测定单元400之后,可通过由抽吸管252穿刺密封膜来开封。
219.如图30所示,开口部21形成在设置于试剂收容部10的安装部件22。开口部21以从安装部件22的上表面向上方突出的方式一体形成在安装部件22。
220.安装部件22的外周部焊接到试剂收容部10的内周部。安装部件22以在试剂收容部10的上端部夹在构成试剂收容部10的2个积层结构膜材11的外边缘的方式设置,与2个积层结构膜材11的内面各自焊接。安装部件22的外周部和试剂收容部10之间由焊接密闭。由此,可在柔软的袋状的试剂收容部10容易地设具有用于与移动规制部23结合的刚性的安装部件22,并且,可容易地实现安装部件22和试剂收容部10之间的封闭。
221.安装部件22具有从开口部21在水平方向开间隔而配置的被支持部22a。安装部件22具有细长的六角形状,在安装部件22的长边方向的一方端部配置开口部21,在另一方端部配置被支持部22a。被支持部22a是以从安装部件22的上表面向上方突出的方式一体形成在安装部件22的突起。被支持部22a从a方向看,具有t字形状,根元部比上部细。
222.其中,开口部21配置于在水平方向的试剂收容部10的端部附近。即使是通过收容试剂12(参照图28)而试剂收容部10膨胀的状态,安装部件22的开口部21处于与试剂收容部10的内面比较近的位置。因此,抽吸管252相对于开口部21的中心轴线倾斜插入,则发生抽
吸管252的尖端与试剂收容部10的内面接触的可能性。
223.从而,开口部21具有从开口21a的下端向试剂收容部10的内部向下方突出的抽吸管引导部21c。抽吸管引导部21c一体形成在安装部件22,具有将筒状的开口部21的下端部部分向下方延长的形状。抽吸管引导部21c以将插入到开口21a内的抽吸管252和试剂收容部10的内面隔区的方式以壁状形成。由此,在抽吸管252相对于开口21a的中心轴线倾斜而插入到试剂收容部10的内部时,也可以抑制抽吸管252的尖端和试剂收容部10的内面的接触的方式引导抽吸管252的尖端。
224.返回图29,移动规制部23具有进行对于测定单元400的抽吸管252的开口21a的位置决定的功能。另外,移动规制部23具有进行开口21a的位置错开防止的功能。
225.移动规制部23以从开口部21向水平方向突出的方式固定于开口部21。由此,可固定移动规制部23和开口21a的相对位置。再者,由于由从移动规制部23的开口部21向水平方向突出的部分,可简单实现与测定单元400的一部分抵接而规制移动的构成的同时,由抵接防止开口21a的位置错开,可容易地得到必要的接触面积。
226.如图30所示,移动规制部23大致具有平板状形状。移动规制部23具有沿水平面内的第1方向a延伸的形状。移动规制部23具有含在第1方向a延伸的一对长边和在第2方向b延伸的一对短边的长方形状。如后所述,试剂容器200通过以配置有开口部21的移动规制部23的一端23a侧作为先头而沿第1方向a插入测定单元400的容器保持部251的内部,设置于容器保持部251。移动规制部23在移动规制部23的第1方向a的一端23a和中央部之间固定于开口部21。即,开口部21移动规制部23的一端23a和另一端23b之中,配置于接近一端23a侧的位置。由此,把持移动规制部23的另一端23b侧通过向第1方向a移动试剂容器200,可将形成在一端23a侧的开口部21的开口21a配置于抽吸管252的正下方位置。此时,由于开口部21从移动规制部23的另一端23b离开,可在试剂容器200的设置时抑制使用者的手指与抽吸管252接触。
227.移动规制部23以通过与测定单元400的一部分在水平方向抵接,规制开口21a的水平方向的移动的方式构成。由此,可由移动规制部23抑制开口21a和抽吸管252的水平方向的位置关系错开。移动规制部23含由移动规制部23形成的孔的内面、移动规制部23形成的缺口的内面、及移动规制部23的侧面之任一者构成的水平抵接面24。由此,可由简单的构成在移动规制部23设用于规制开口21a的水平方向的移动的水平抵接面24。
228.水平抵接面24含由在移动规制部23的第1方向a的一端23a形成的侧面(即,尖端面)构成的第1面24a。由此,在将试剂容器200设置于测定单元400时,可仅通过将试剂容器200向第1方向a推进至移动规制部23的一端23a触碰容器保持部251的内面,简单地实现在第1方向a的开口21a的对准和移动规制的两方。
229.水平抵接面24含由沿移动规制部23的第1方向a延伸的侧面构成的第2面24b、24c。第2面24b、24c是在平面视构成移动规制部23的长边的一对侧面,设在移动规制部23的第2方向b的一方侧和另一方侧。由此,可由移动规制部23的侧面简单地实现在第2方向b的开口21a的对准和移动规制的两方。
230.如图31所示,移动规制部23具有形成在侧面的缺口23c。水平抵接面24含由缺口23c的内面构成的第3面24d。第3面24d与进入缺口23c内的测定单元400的一部分抵接。由此,通过缺口23c内的第3面24d和测定单元400的一部分抵接,可使移动规制部23和测定单
元400卡合。可由卡合有效抑制开口21a的位置错开。另外,在将试剂容器200设置于测定单元400时,由于移动规制部23与测定单元400的一部分卡合而变得不动,即使使用者不目视确认试剂容器200设置于适当位置,也可用感触知觉。
231.移动规制部23具有在上表面形成移动规制部23的孔23d。水平抵接面24含由孔23d的内面构成的第4面24e。第4面24e与进入孔23d的内部的测定单元400的一部分(参照例如,后述的进入部件281、图35)抵接。由此,通过测定单元400的一部分进入在移动规制部23形成的孔23d,可使移动规制部23和测定单元400卡合。可由卡合有效抑制开口21a的位置错开。在图31中,孔23d设2个。2个孔23d沿第2方向b排列。孔23d也可仅1个。
232.移动规制部23具有引导将开口21a配置于测定单元400的抽吸管252的下方时的移动的引导部23e。引导部23e沿水平面内的第1方向a延伸。引导部23e通过在与测定单元400的一部分接触的状态下滑动,移动规制部23的移动方向根据第1方向a。由此,在将试剂容器200设置于测定单元400的容器保持部251时,可容易并且正确地在能插入抽吸管252的适当的位置配置开口21a。
233.移动规制部23以通过与测定单元400的一部分在上下方向(z方向)抵接,规制开口21a的上下方向的移动的方式构成。由此,即使具备易变形的袋状的试剂收容部10的试剂容器200,在向试剂收容部10的内部插入抽吸管252时及从试剂收容部10的内部抽离抽吸管252时,也可抑制开口21a向上下方向移动。
234.如图31所示,移动规制部23在移动规制部23的第1方向a的另一端23b具有用于把持移动规制部23的把持部25。由此,可容易地把持移动规制部23的另一端23b侧。另外,由于袋状的试剂收容部10容易变形而难把持,通过在移动规制部23设把持部25,试剂容器200的搬运变得容易。
235.如图30所示,移动规制部23含固定于开口部21的固定部26和在离开开口部21的位置支持试剂收容部10的上部的支持部27。由此,以在搬运试剂容器200时、在用手把持移动规制部23时,可在固定部26和支持部27的多个位置从移动规制部23垂挂试剂收容部10的方式支持。由于试剂收容部10的重量分散于移动规制部23的多个位置而发挥作用,即使使试剂收容部10的容量变大,也可稳定支持。另外,对于使用者而言,由于也可不把持易变形的袋状的部分,试剂容器200的对待变得容易。
236.如图29所示,移动规制部23含记录试剂的信息的信息记录介质28。信息记录介质28是rfid(radio frequency identifier)标签。由此,在将试剂容器200设置于测定单元400之时,测定单元400可从信息记录介质28读取试剂的信息。在易变形的袋状的试剂收容部10设信息记录介质28时,有难以赋予信息记录介质28,或信息记录介质28变得难以读取的可能性通过在移动规制部23设信息记录介质28,可容易地设信息记录介质28,可良好地进行读取。
237.如图32所示,试剂抽吸部250含能各自保持1个试剂容器200(或者小型的试剂容器300)的多个试剂容器支架。试剂抽吸部250例如,含合计5个试剂容器支架在图32中,为方便起见,仅显示3个试剂容器支架250a、250b及250c。多个试剂容器支架250a~250c在横方向排列设。
238.试剂容器支架250a~250c各自具备下部底座255a及上部底座255b,容器保持部251,抽吸管252,操作部253和移动机构254(参照图35)。以下,代表试剂容器支架250a~
250c,对于试剂容器支架250a的结构进行说明。容器保持部251设在下部底座255a。容器保持部251位于试剂容器支架250a的最下部。容器保持部251以保持含收容试剂的袋状的试剂收容部10和含开口21a的框20的试剂容器200的方式构成。
239.容器保持部251具有能将试剂容器200收容在内侧,在水平方向形成入口的箱状形状或筒状形状的收容部260。收容部260以具有在y1方向端部开口的入口,从入口向y2方向延伸的方式设置。
240.如图33所示,收容部260含插入有试剂容器200的试剂收容部10的第1插入部261和配置在第1插入部261的上方而插入试剂容器200的移动规制部23的第2插入部262。
241.第1插入部261是由与试剂收容部10的两侧面在宽度方向(x方向)面对的一对侧面部261a和与试剂收容部10的下表面在上下方向(z方向)面对的底面部261b隔区的空间。第1插入部261的上部和第2插入部262之间由连接通路263关联。
242.连接通路263是用于使试剂容器200之中的移动规制部23和试剂收容部10的连接部分(配置有安装部件22的部分)在y方向通过的空间。
243.第2插入部262以通过从收容部260的入口向抽吸管252的正下方的设置位置ps延伸的同时,与移动规制部23抵接来向设置位置ps(参照图34)引导试剂容器200的方式构成。由此,可使用移动规制部23,将试剂容器200从收容部260的入口引导到设置位置ps。结果,即使具备易变形的试剂收容部10的试剂容器200,使用者也可仅通过从收容部260的入口插入试剂容器200的简单的动作,高精度地引导至设置位置ps。第2插入部262例如,具有凸状的截面形状。即,第2插入部262由插入平板状的移动规制部23的广幅的下部和插入突出到移动规制部23的上侧的开口部21的幅狭的上部具有凸状的截面形状。
244.试剂抽吸部250具备抵接部270。抵接部270与设在配置在容器保持部251的试剂容器200的框20的移动规制部23抵接而规制开口21a的移动。由此,通过抵接部270与移动规制部23抵接,可抑制插入抽吸管252时的抽吸管252和开口21a的位置错开。另外,由于在抽吸管252从开口21a插入到试剂收容部10的内部的状态下,可抑制抽吸管252和开口21a的位置错开,可有效维持试剂收容部10的内部的密闭状态。
245.抵接部270与设在配置在容器保持部251的试剂容器200的框20的移动规制部23抵接而规制开口21a的移动。通过抵接部270与移动规制部23抵接,可抑制插入抽吸管252时的抽吸管252和开口21a的位置错开。另外,由于在抽吸管252从开口21a插入到试剂收容部10的内部的状态下,可抑制抽吸管252和开口21a的位置错开,可有效维持试剂收容部10的内部的密闭状态。
246.抵接部270以通过与固定在试剂容器200的开口21a的移动规制部23抵接,规制开口21a的移动的方式构成。由此,由于固定移动规制部23和开口21a的相对位置,通过使抵接部270与移动规制部23抵接,可确实并且正确地进行开口21a的位置决定及移动规制。
247.抵接部270的至少一部分设在收容部260。由此,通过从入口向收容部260的内部插入试剂容器200,可使抵接部270和移动规制部23抵接,规制收容部260内的开口21a的移动。
248.抵接部270配置于第2插入部262。由此,通过在与试剂容器200之中的移动规制部23相对应的第2插入部262设抵接部270,即使具备易变形的试剂收容部10的试剂容器200,也可以预先设定的相对位置关系抵接抵接部270和移动规制部23。结果,可正确地进行开口21a的位置决定及移动规制。
249.抵接部270以与在移动规制部23形成的孔、在移动规制部23形成的缺口,及移动规制部23的侧面之任一者抵接的方式构成。由此,可由简单的构成,使抵接部270与移动规制部23抵接而有效规制开口21a的水平方向的移动。
250.抽吸管252下方移动之时,进入部件281也与抽吸管252一同下方移动,进入到移动规制部23的孔23d的内部。通过进入部件281进入孔23d,抑止移动规制部23的移动。
251.抵接部270以通过与移动规制部23在上下方向抵接,规制开口21a的上下方向的移动的方式构成。由此,即使具备易变形的袋状的试剂收容部10的试剂容器200,在向试剂收容部10的内部插入抽吸管252时及从试剂收容部10的内部抽离抽吸管252时,也可抑制开口21a向上下方向移动。
252.如图35所示,抽吸管252尖端朝下配置在容器保持部251的收容部260的最奥部(y2方向侧端部)的上方位置。抽吸管252以保持在移动机构254,由移动机构254在上下方向(z方向)移动的方式构成。由此,抽吸管252经插入到容器保持部251的内侧的试剂容器200(200)的开口21a而进入到试剂收容部10(110)的内部,构成为能抽吸试剂容器200(200)内部的试剂。
253.抽吸管252具有在抽吸管252插入开口21a之时通过与开口21a接触来密闭开口21a的封闭体252a。由此,可由封闭体252a容易并且有效密闭试剂收容部10。
254.封闭体252a以包围抽吸管252的外周的方式设置,以通过与开口21a的缘部(即,开口部21的封闭面21b)接触弹性变形而密闭开口21a的方式构成。由此,可向开口21a插入抽吸管252的利用时的下方移动而由封闭体252a确实地密闭试剂收容部10。
255.封闭体252a由能弹性变形的橡胶材料构成。另外,在封闭体252a和保持抽吸管252的抽吸管保持部254a之间设用于将封闭体252a向开口21a施力的施力部件252b。施力部件252b由压缩弹簧构成。
256.移动机构254将抽吸管252能在升高位置p1和下降位置p2之间上下方向(z方向)移动地保持。移动机构254含抽吸管保持部254a和由线性轨道254b及固定滑动件254c构成的直动机构。在抽吸管保持部254a设置抽吸管252,抽吸管保持部254a经向y方向延伸的连接部254d而与线性轨道254b的上端部连接。线性轨道254b配置于试剂容器支架250a的前面(y1方向侧的侧面),向z方向延伸。固定滑动件254c固定于下部底座255a,能使线性轨道254b沿z方向移动地保持。由此,线性轨道254b相对于固定滑动件254c而向z方向移动。伴随线性轨道254b的z方向移动,抽吸管252在与线性轨道254b一体z方向移动。
257.这样,移动机构254以通过能使抽吸管252在上下方向移动地支持,与对操作部253的指定操作连动而移动抽吸管252,进行抽吸管252进入保持在容器保持部251的试剂容器200内及抽吸管252退避到试剂容器200外的方式构成。由此,可仅通过使抽吸管252上下移动,进行抽吸管252进入试剂容器200内及抽吸管252退避到试剂容器200外。由于抽吸管252的移动方向的自由度越少,越可正确且以高的再现性运行抽吸管252,由单纯的上下移动插入抽吸管252之时,可更高精度地执行密闭试剂收容部10的动作。
258.另外,如图35所示,移动机构254以抽吸管252和操作部253连动移动的方式保持操作部253。操作部253设在试剂容器支架250a的前面(y1方向侧的侧面),操作部253的背面侧(y2方向侧)设置于线性轨道254b。由此,线性轨道254b、抽吸管252及操作部253一体向z方向移动。
259.操作部253,如图32所示,配置于试剂容器支架250a~250c(下部底座255a)的各自的前面(箭头y1方向侧)。操作部253作为以能开闭试剂容器支架250a的容器保持部251的前面的方式覆盖的盖构成。
260.操作部253以使用者用手把持而移动的方式构成。在操作部253形成从操作部253的前面向前方(y1方向)突出的操作把持部253a。通过使用者把持此操作把持部253a而在z方向移动,可向z方向移动操作部253。
261.(第4实施方式)
262.在第1及第2实施方式中说明的分析系统4000、4001中,分析单元(分析部)300x也可以与从在流动池内流动的细胞发出的荧光相对应的第1信号的波形及第2信号的波形作为输入,在第1~第三分析的至少一部分中使用由与从分类的各种细胞发出的荧光相对应的信号的波形学习完的ai算法进行细胞的分类。如上所述,第1信号是指由与自第1光源的侧方散射光及侧方荧光各自相对应的多个信号构成的信号,第2信号是指由与自第2光源的前方散射光、侧方散射光及侧方荧光各自相对应的多个信号构成的信号。另外,第1分析是指基于第1信号的分析,第2分析是指基于第2信号的分析,第三分析是指基于第1信号和第2信号的分析。
263.在本实施方式中,在具备能向测定试样照射上述的多个波长的光的fcm检测部460的分析系统4000(参照图7)中,由测定单元400取得的数据由ai算法分析。由于向测定试样照射多个波长的光,测定单元400检测与各波长相对应的多种光学信号。通过检测的多种光学信号的各自被a/d变换来取得的数据由ai算法分析。由ai算法的分析被分析单元300x执行(参照图10)。ai算法例如,存储在分析单元300x的存储部3004。分析单元302x的处理器3001执行基于ai算法的分析。
264.如图36所示的例一样,由测定单元402取得的数据(往后有时称为“波形数据”)输入到ai算法50(或者60)。ai算法通过对输入的数据进行处理,对与输入的数据相对应的细胞的种类进行分类。在向测定试样照射单一波长的光时,对于测定试样中的某细胞得到的数据仅得到与单一波长的光相对应的数据。在向测定试样照射多个波长的光时,对于测定试样中的某细胞得到的数据得到了与多个波长的光各自相对应的多种数据。从而,在向测定试样照射多个波长的光时的方与向测定试样照射单一波长的光时相比,向ai算法输入的数据的量增加。通过向ai算法输入的数据的量增加,由ai算法的细胞的分类精度升高。
265.使用图37~图40中所示的例对训练数据75(参照图40)的生成方法及波形数据的分析方法进行说明。以下,以使用具有图7的构成的fcm检测部460时为例进行说明。
266.<波形数据>
267.图37是用于对本分析方法(第4实施方式)中使用的波形数据进行说明的模式图。如图37所示,使含细胞(成分)c的受试体在流动池fc内流动,向在流动池fc内流动的细胞c照射第1波长的光l1及第2波长的光l2,则在相对于光的前进方向而前方发生前方散射光(fsc)。在相对于光的进行方向而侧方发生与第1波长的光相对应的第1侧方散射光(ssc-1)和由第1波长的光激发的第1侧方荧光(sfl-1)。另外,在相对于光的进行方向而侧方发生与第2波长的光相对应的第2侧方散射光(ssc-2)和由第2波长的光激发的第2侧方荧光(sfl-2)。
268.前方散射光(fsc)由前方散射光光接收元件4116接收,输出对应于光接收量的信
号。第1侧方散射光(ssc-1)由侧方散射光光接收元件4121a接收,输出对应于光接收量的信号。第1侧方荧光(sfl-1)由侧方荧光光接收元件4122a接收,输出对应于光接收量的信号。第2侧方散射光(ssc-2)由侧方散射光光接收元件4121b接收,输出对应于光接收量的信号。第2侧方荧光(sfl-2)由侧方荧光光接收元件4122b接收,输出对应于光接收量的信号。由此,从各光接收元件输出表示伴随时间经过的信号的变化的模拟信号。将与前方散射光(fsc-1)相对应的模拟信号称为“前方散射光信号”、将与第1侧方散射光(ssc-1)相对应的模拟信号称为“第1侧方散射光信号”、将与第1侧方荧光(sfl-1)相对应的模拟信号称为“第1荧光信号”、将与第2侧方散射光(ssc-2)相对应的模拟信号称为“第2侧方散射光信号”、将与第2侧方荧光(sfl-2)相对应的模拟信号称为“第2荧光信号”。各模拟信号之一的脉冲与一个成分(例如1个细胞)相对应。
269.模拟信号经模拟处理部480向a/d变换部481a(参照图37)输入,变换为数字信号。图38是模式地显示由a/d变换部向数字信号的变换的图。这里,为了使说明简略化,作为向a/d变换部481a直接输入模拟信号的图。如图38所示,a/d变换部481a从各光接收元件输入的模拟信号之中,以至前方散射光信号的水平被设定为指定的阈值的水平的时间点作为始点,进行前方散射光信号、第1侧方散射光信号、第1侧方荧光信号、第2侧方散射光信号及第2侧方荧光信号的采样。a/d变换部481a以指定的采样率(例如,以10纳秒间隔1024个点的采样、以80纳秒间隔128个点的采样、或者以160纳秒间隔64个点的采样等)采样各自的模拟信号。
270.图39是模式地显示由采样得到的波形数据的图。由采样,作为与一个成分相对应的波形数据,得到了将以数字表示多个时间点的模拟信号水平的值作为要素的行列数据(也可称为一维的“序列数据”)。这样a/d变换部481a生成与一个成分相对应的前方散射光的数字信号、第1侧方散射光的数字信号、第1侧方荧光的数字信号、第2侧方散射光的数字信号、及第2侧方荧光的数字信号。a/d变换重复至数字信号化的细胞数达指定数,或者至使受试体在流动池4113中流动开始后经过指定时间。由此,如图39所示,得到了由一个受试体中所含的n个成分(细胞c)的波形数据构成的数字信号。将对于各成分的采样数据的集合(在图39的例中t=0ns至t=10240ns每10纳秒1024个的数字值的集合)可称为波形数据,也可将从一个受试体得到的波形数据的集合称为数字信号。由于通过向流动池4113照射多个波长的光而取得波形数据,取得与各波长相对应的多个波形数据。例如,在图37中所示的例中,取得与第1波长(例如,405nm)的光相对应的第1侧方散射光及与第1侧方荧光各自相对应的波形数据、及与第2波长(例如,638nm)的光相对应的前方散射光、与第2侧方散射光及第2侧方荧光各自相对应的波形数据。与第1波长的光相对应的侧方荧光基于第1荧光染料而取得,与第2波长的光相对应的侧方荧光基于第2荧光染料而取得。
271.也可向由a/d变换部481a生成的各自的波形数据赋予用于区别各自的成分的指数。指数例如,以生成的波形数据的顺序赋予1~n的整数,向从相同的成分得到的前方散射光的波形数据、第1/第2侧方散射光的波形数据、第1/第2侧方荧光的波形数据各自赋予相同的指数。由于各波形数据与一个成分相对应,指数与测定的成分相对应。通过向与相同的成分相对应的波形数据赋予相同的指数,后述的深度学习算法以与各成分相对应的前方散射光的波形数据,第1/第2侧方散射光的波形数据和第1/第2荧光的波形数据作为1组进行解析,可对成分的类别进行分类。
272.<训练数据的生成>
273.图40是显示用于训练用于判定受试体中的成分的类别的深度学习算法的训练数据的生成方法的一例的模式图。如图40所示,训练数据75是将受试体由流式细胞仪(参照测定单元400、图7)测定,基于对受试体中的成分得到的前方散射光(fsc)的模拟信号70a、第1侧方散射光(ssc-1)的模拟信号70b、第1侧方荧光(sfl-1)的模拟信号70c、第2侧方散射光(ssc-2)的模拟信号70d、第1侧方荧光(sfl-2)的模拟信号70e而生成的波形数据。波形数据的取得方法如上所述。
274.训练数据75可使用例如,由流式细胞仪测定受试体,将该受试体中所含的成分用计算处理分析的结果,判断为是特定的类别的可能性高的成分的波形数据。以下,在使用作为分析血液受试体的血细胞计数装置的分析系统4000(参照图4)的例中进行说明。将血液受试体用流式细胞仪(测定单元400)测定,蓄积受试体中所含的各成分的前方散射光、第1/第2侧方散射光、第1/第2侧方荧光的波形数据。基于第1/第2侧方散射光强度(侧方散射光信号的脉冲的高度)和第1/第2侧方荧光强度(侧方荧光信号的脉冲高度),将受试体中的细胞分类为嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、幼稚粒细胞、异常细胞的集团。通过向其细胞的波形数据赋予与分类的细胞类别相对应的标签值,得到了训练数据75。例如,可通过求出嗜中性粒细胞的集团中所含的细胞的侧方散射光强度及侧方荧光强度的最频值、平均值或中位值,基于它们的值而确定代表性的细胞,向它们的细胞的波形数据赋予与嗜中性粒细胞相对应的标签值“1”而得到训练数据75。训练数据的生成方法不限于此,例如也可通过由细胞分选仪仅回收特定的细胞,将该细胞由流式细胞仪测定,向得到的波形数据赋予细胞的标签值来得到训练数据。
275.各模拟信号70a~70e各自表示由流式细胞仪测定嗜中性粒细胞之时的前方散射光信号、第1/第2侧方散射光信号、第1/第2侧方荧光信号。当这些模拟信号如上所述a/d变换时,得到了前方散射光信号的波形数据72a、第1侧方散射光信号的波形数据72b、第1侧方荧光信号的波形数据72c、第2侧方散射光信号的波形数据72d、第2侧方荧光信号的波形数据72e。在波形数据72a~72e各自的内部邻接的池储纳以与采样率相对应的间隔、例如10纳秒间隔的信号水平。各波形数据72a~72e以与表示成为数据的基础的细胞的类别的标签值77组合,与各细胞相对应的5个波形数据、换言之5个信号强度(前方散射光的信号强度、第1/第2侧方散射光的信号强度、及第1/第2侧方荧光的信号强度)的数据成组的方式作为训练数据75向深度学习算法(神经网络50)输入。在图40的例中由于成为训练数据75的基础的细胞是嗜中性粒细胞,作为表示是嗜中性粒细胞的标签值77向各波形数据72a~72e赋予“1”,生成训练数据75。图41显示标签值77的例。训练数据75为了每细胞类别生成,标签值对应于细胞类别而赋予不同的标签值77。
276.<深度学习的概要>
277.以图40作为例,对神经网络的训练的概要进行说明。神经网络50是例如,具有卷积层的卷积神经网络。神经网络50中的输入层50a的节点数与输入的训练数据75的波形数据中所含的序列的要素数相对应。序列的要素数与对应于1个成分的前方散射光、第1/第2侧方散射光、第1/第2侧方荧光的波形数据72a~72e的要素数的总和相等。在图40的例中,波形数据72a~72e的各自含1024个要素。从而,输入层50a的节点数成为1024
×
5=5120个。各波形数据72a~72e向神经网络50的输入层50a输入。训练数据75的各波形数据的标签值77
向神经网络的输出层50b输入,训练神经网络50。图40的符号50c表示中间层。
278.<波形数据的分析方法>
279.图42显示对受试体中的成分的波形数据进行分析的方法的例。在图42中所例示的波形数据的分析方法中,从由分析对象的成分由流式细胞仪(参照测定单元400、图7)取得的前方散射光的模拟信号80a、第1侧方散射光的模拟信号80b、第1侧方荧光的模拟信号80c、第2侧方散射光的模拟信号80d、第2侧方荧光的模拟信号80e生成由上述的方法得到的波形数据构成的分析数据85。由于通过向流动池4113(参照图37)照射多个波长的光而取得波形数据,取得与各波长相对应的多个波形数据。例如,取得与和第1波长(例如,405nm)的光相对应的第1侧方散射光及第1侧方荧光各自相对应的波形数据、及与和第2波长(例如,638nm)的光相对应的前方散射光、第2侧方散射光及第2侧方荧光各自相对应的波形数据。与第1波长的光相对应的侧方荧光基于第1荧光染料而取得,与第2波长的光相对应的侧方荧光基于第2荧光染料而取得。
280.分析数据85和训练数据75优选至少使取得条件相同。取得条件含用于将受试体中的成分由流式细胞仪测定的条件、例如测定试样的调制条件、使测定试样在流动池内流动之时的流速、照射到流动池的光的强度、接收散射光及荧光的光接收元件的扩增率(增益)等。取得条件还含对模拟信号进行a/d变换之时的采样率。
281.当分析对象的成分在流动池4113中流动时,得到了前方散射光的模拟信号80a、第1侧方散射光的模拟信号80b、第1侧方荧光的模拟信号80c、第2侧方散射光的模拟信号80d、第2侧方荧光的模拟信号80e。这些模拟信号80a~80e如上述,当a/d变换时,每成分同步取得信号强度的时间点,成为前方散射光信号的波形数据82a、第1侧方散射光信号的波形数据82b、第1侧方荧光信号的波形数据82c、第2侧方散射光信号的波形数据82d、第2侧方荧光信号的波形数据82e。各波形数据82a~82e以各成分的信号强度(前方散射光的信号强度、第1/第2侧方散射光的信号强度、及第1/第2侧方荧光的信号强度)的数据成组的方式组合而作为分析数据85向深度学习算法51输入。在图42的例中,输入由波形数据82a、82b、82c、82d、82e的5个波形数据构成的数据集。
282.当向构成训练完的深度学习算法51的神经网络51的输入层51a输入分析数据85时,从输出层51b作为关于与分析数据85相对应的成分的类别的分类信息输出分析结果83。图42的符号51c表示中间层。关于成分的类别的分类信息是指例如,各成分属于多个细胞类别的各自的概率。再者,在此概率之中,也可判断为取得分析数据85的分析对象的成分属于值最高的分类,作为表示其类别的识别码的标签值82等含在分析结果83中。分析结果83,除了标签值本身之外,也可为将标签值置换为显示类别的信息(例如字符串)的数据。在图42中,基于分析数据85,输出深度学习算法51取得分析数据85的分析对象的成分所属的概率最高的标签值“1”,再者,显示与此标签值相对应的“嗜中性粒细胞”这样的文字数据作为分析结果83输出的例。标签值的输出可由深度学习算法51进行,也可由其他计算机程序基于深度学习算法51算出的概率而输出最优选的标签值。
283.图43显示与图12中所示的试样调制部440构成不同的其他试样调制部441的构成例。再者,在图43中,在与图12中的要素同样的要素附相同的符号。
284.图43的例表示,通过执行使用深度学习算法(ai算法)的分析,试样调制部440的测定通道的构成变更可能。在图43的例中,用于进行白细胞的计数、有核红细胞的计数、及嗜
碱性粒细胞的计数的测定通道(wnr)置换为用于进行白细胞的分类的测定通道(wdf)。即,在图43的例中,通过wnr通道被置换为wdf通道,测定单元400(参照图7)成为具备多个wdf通道的构成。在此例的情况中,作为wnr通道的测定项目的白细胞的计数、有核红细胞的计数、及,嗜碱性粒细胞的计数通过将在由wdf通道的测定中得到的波形数据用ai算法51分析来得到。例如,通过以可从由wdf通道的测定得到的波形数据,对白细胞、有核红细胞、嗜碱性粒细胞进行分类的方式使ai算法51学习,从wdf通道的波形数据向白细胞、有核红细胞、嗜碱性粒细胞的分类变得可能。例如,通过在wdf通道的测定中得到的波形数据之中,使ai算法51学习与白细胞、有核红细胞、嗜碱性粒细胞相对应的数据作为训练数据,生成能从在wdf通道测定的波形数据分类白细胞、有核红细胞、嗜碱性粒细胞的ai算法51。在图43的构成例中,例如,在多个wdf通道中,对于不同的受试体的测定被并行执行。例如,在多个wdf通道的各自的室中,不同的受试体的试样调制被并行执行。
285.如图43所示,通过将指定的测定通道的分析由由其他测定通道的数据的ai分析替代,将所述指定的测定通道置换为其他测定通道变得可能。由此,不增加设在分析系统4002(参照图7)的测定通道的总数,可增加要增设的测定通道的数。在图43的例中,通过将wnr通道用wdf通道置换,不增加设在分析系统4002的测定通道的总数,增加wdf通道的数变得可能。通过wdf通道的数增加,用多个wdf通道的各自并列测定不同的受试体变得可能。由并列测定,由wdf通道的测定的通量提升。根据图43的例,得到了还可提升受试体处理的通量这样的显著的效果。
286.对于将活用ai算法的测定通道置换为其他测定通道这样的例而要求基于将置换的对象的测定通道的测定项目(在图12的例中,wnr通道中的有核红细胞
·
嗜碱性粒细胞)用其他测定通道(在图12的例中,wdf通道)测定的数据而分析。变得可通过将在其他测定通道测定的数据用ai算法分析,分类被置换的对象的测定通道的测定项目。在本实施方式中,与多个波长的光各自相对应的多种光学信号由ai算法分析。通过使用与多个波长的光各自相对应的数据增加信息量,由ai的分析精度提升。由分析精度的提升,即使是其他测定通道(例如,wdf通道)的数据,置换对象的测定通道的测定项目(在图12的例中,wnr通道中的有核红细胞
·
嗜碱性粒细胞)的分类也变得可能。
287.在图43的例中的分析方法(第1例)中,例如,由在由wdf通道的测定中得到的波形数据的ai分析,除了nrbc(有核红细胞)的分类
·
计数及baso(嗜碱性粒细胞)的分类
·
计数之外,还执行baso以外的白细胞的分类(嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞)
·
计数。在此例的情况中,ai算法51以由波形数据,nrbc、baso及baso以外的白细胞(嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞)的分类变得可能的方式使学习。通过使用这样的ai算法51,将wnr通道置换为wdf通道变得可能。这些分析由分析单元302x(参照图7)如以下一样执行。
288.图44是显示本分析方法的动作例(第1动作例)的流程图。如图44所示,在第1动作例中,分析单元302x(参照图7)取得与在wdf通道检测的光学信号相对应的数据(步骤s0)。接下来,分析单元302x将本数据用ai算法51分析(步骤s1)。分析单元302x通过将在由wdf通道的测定中得到的数据用ai算法51分析,除了单核细胞、淋巴细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞的分类之外,还对在wdf通道分析的嗜碱性粒细胞和有核红细胞进行分类。接下来,分析单元302x提供wdf通道的数据的分析结果(步骤s2)。
289.在图45中所示的分析方法的其他例(第2动作例)中,例如,由在由wdf通道的测定中得到的波形数据的ai分析进行nrbc的分类
·
计数及baso的分类
·
计数。由ai算法51,与既未分类为nrbc又未分类为baso的细胞相对应的波形数据由散点图分析,执行嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞的分类
·
计数。在此例的情况中,ai算法51例如,以从波形数据进行nrbc、baso及其以外这样的分类的方式学习。由此例的ai算法51,与分类为nrbc及baso以外的细胞相对应的波形数据由散点图分析。例如,提取与分类为nrbc及baso以外的细胞相对应的波形数据的峰值,基于从与侧方荧光信号相对应的峰值和与侧方散射光相对应的峰值生成的2维坐标图而分类细胞类别。例如,基于散点图,分类细胞是嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞及其以外之任一者。由基于散点图的分析分类为嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞及单核细胞以外的细胞例如,分类为碎片(”debris”)。这些分析由分析单元302x(参照图7)如以下一样执行。
290.图45是显示本分析方法的动作例(第2动作例)的别的流程图。如图45所示,分析单元302x取得与在wdf通道检测的光学信号相对应的数据(步骤s10)。接下来,分析单元302x将本数据用ai算法51分析(步骤s11)。接下来,分析单元302x确定与nrbc及baso以外的细胞相对应的数据(步骤s12)。接下来,分析单元302x将确定的数据用散点图分析(步骤s13)。接下来,分析单元302x提供wdf通道的数据的分析结果(步骤s14)。
291.在图46中所示的分析方法的进一步的的其他例(第3例)中,例如,由在由wdf通道的测定中得到的波形数据的散点图分析执行淋巴细胞的分类
·
计数、单核细胞的分类
·
计数、嗜酸性粒细胞的分类
·
计数、及嗜中性粒细胞/嗜碱性粒细胞的分类
·
计数。在嗜中性粒细胞/嗜碱性粒细胞的分类
·
计数中,例如,计数分类为嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞之任一者的细胞。与不分类为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞/嗜碱性粒细胞之任一者的细胞、及,分类为嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞之任一者的细胞相对应的波形数据由ai算法51(参照图42)分析。例如,波形数据由ai算法51,分类为nrbc、嗜碱性粒细胞(baso)及其以外。例如,从在散点图分析中分类为是嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞之任一者的细胞的计数结果减去由ai算法60分类为baso的细胞的计数,各自算出嗜中性粒细胞的计数和嗜碱性粒细胞的计数。由ai分析不分类为nrbc及baso之任一者的细胞例如,分类为碎片(”debris”)。这些分析由分析单元302x(参照图7)如以下一样执行。
292.图46是显示本分析方法的动作例(第3动作例)的流程图。如图46所示,分析单元302x取得与在wdf通道检测的光学信号相对应的数据(步骤s20)。接下来,分析单元302x将本数据用散点图分析(步骤s21)。接下来,分析单元302x确定与(1)不分类为淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞/嗜碱性粒细胞之任一者的细胞、(2)分类为嗜中性粒细胞/嗜碱性粒细胞的细胞相对应的数据(步骤s22)。接下来,分析单元302x将确定的数据用ai算法60分析(步骤s23)。接下来,分析单元302x提供wdf通道的数据的分析结果(步骤s24)。
293.(第5实施方式)
294.第5实施方式公开了受试体分析方法,其包括:在含主处理器和并列处理处理器的受试体分析系统(含第1~第4实施方式的分析系统)中,基于利用上述主处理器的控制而取得关于受试体中的成分的各自的数据,用上述并列处理处理器执行关于上述数据的并列处理,基于上述并列处理的结果而生成关于上述成分的各自的类别的信息。
295.根据本实施方式,即使在对每1受试体达数百兆至数千兆的庞大的容量的数据进行分析时,可由与主处理器不同地设的并列处理处理器并列执行关于测定的数据的处理。因此,即使在例如将庞大的容量的数据由深度学习算法处理时,也在受试体分析系统内完结数据的处理。例如,无经互联网或内部网向储纳深度学习算法的分析用服务器发送数据的必要。从而,根据本实施方式,无从受试体分析系统向分析用服务器发送大容量的数据,取得从分析用服务器返回的分析结果的必要,可提升受试体中的成分的分类精度的同时维持受试体分析系统的处理能力。
296.图47显示本实施方式的构成例。再者,在图47中,在与图10中的要素同样的要素附相同的符号。图47的分析单元303x具备能代替主处理器处理由ai算法的计算处理的并列处理处理器。通过使用适宜于用ai算法(例如,深度学习算法)执行的矩阵计算的处理的并列处理处理器,改善ai分析要求的tat(turn around time)。再者,在以下的说明中,省略对于与上述的实施方式同样的构成
·
功能的说明。
297.图47中所示的分析单元302x,如图11所示,也可为以在测定单元401内设分析部301x的方式构成。
298.处理器3001使用并列处理处理器3002执行由深度学习算法60的波形数据的分析处理。即,处理器3001以根据深度学习算法60而执行波形数据的分析处理的方式程序。用于基于深度学习算法60而分析与受试体中的成分相对应的数据的解析软件3100也可储纳在存储部3004。此时,处理器3001通过执行储纳在存储部3004的解析软件3100,执行基于深度学习算法60的数据的分析处理。在本实施方式中,例如,ai分析由处理器3001和并列处理处理器3002执行,计算处理分析不使用并列处理处理器3002而由处理器3001执行。处理器3001是例如,cpu(central processing unit)。处理器3001也可使用例如intel公司制的core i9、core i7、core i5、amd公司制的ryzen 9、ryzen 7、ryzen 5、ryzen 3等。
299.处理器3001控制并列处理处理器3002。并列处理处理器3002对应于利用处理器3001的控制,执行例如关于矩阵计算的并列处理。即,处理器3001是并列处理处理器3002的主处理器,并列处理处理器3002是处理器3001的从处理器。处理器3001也称为主处理器(host processor)或主处理器(main processor)。
300.并列处理处理器3002并列执行作为关于波形数据的分析的处理的至少一部分的多个计算处理。并列处理处理器3002是例如,gpu(graphics processing unit)、fpga(field programmable gate array)、asic(application specific integrated circuit)。在并列处理处理器3002是fpga时,并列处理处理器3002也可例如,预先程序关于训练完的深度学习算法60的计算处理。在并列处理处理器3002是asic时,并列处理处理器3002可为例如,预先整合用于执行关于训练完的深度学习算法60的计算处理的电路,除了这样的整合电路之外,也可为内藏可编程的模块。并列处理处理器3002也可使用例如,nvidia公司制的geforce、quadro、titan、jetson等。作为jetson系列,使用例如,jetson nano、jetson tx2、jetson xavier、jetson agx xavier。
301.处理器3001执行例如关于测定单元402(参照图7)的控制的计算处理。处理器3001执行例如,关于在与装置机构部455、试样调制部440、受试体抽吸机构450之间发送接收的控制信号的计算处理。处理器3001执行例如,关于在与计算机310x之间的信息的发送接收的计算处理。计算机310x具有例如,基于处理器3001的处理而显示从分析单元303x发送的
分析结果的功能。计算机310x例如,向分析单元303x发送测定量级。测定量级由使用者经例如计算机310x的输入装置输入。测定量级例如,从主计算机发送到计算机310x。处理器3001执行例如,关于自存储部3004的程序数据的读取,向主存储器3017的程序的展开、与主存储器3017之间的数据的发送接收的处理。由处理器3001执行的上述的各处理要求例如,以指定的顺序执行。例如,当装置机构部455、试样调制部440、受试体抽吸机构450的控制要求的处理被设为a、b及c时,有时要求以b、a、c的顺序执行。为了处理器3001多执行依赖于这样的顺序的连续的处理,即使增加计算单元(有时称为“处理器核心”、“核心”等)的数,处理速度也未必升高。
302.一方面,并列处理处理器3002例如,含大量的要素的行列数据的如计算一样,定型执行大量的计算处理。在本实施方式中,并列处理处理器3002执行使根据深度学习算法60而分析波形数据的处理的至少一部分并列化的并列处理。在深度学习算法60中,例如,含大量的矩阵计算。在深度学习算法60中,例如,有含至少100的矩阵计算的情况,另外,还有含至少1000的矩阵计算的情况。并列处理处理器3002具有多个计算单元,这些计算单元的各自能同时执行矩阵计算。即,并列处理处理器3002作为并列处理,可并列执行由多个计算单元的各自的矩阵计算。例如,深度学习算法60中所含的矩阵计算可分割为无互相顺序依赖的多个计算处理。这样分割的计算处理变得多个计算单元的各自能并列执行。这些计算单元有时称为“处理器核心”、“核心”等。
303.通过执行这样的并列处理,使作为测定单元402整体的计算处理高速化变得可能。如深度学习算法60中所含的矩阵计算一样的处理例如,有时称为“单一命令多个数据处理”(simd:single instruction multiple data)。并列处理处理器3002适宜于例如这样的simd计算。这样的并列处理处理器3002有时称为向量处理器。
304.如上所述,处理器3001适宜于执行多样并且复杂的处理。一方面,并列处理处理器3002适宜于并列执行定型化的大量的处理。通过并列执行定型化的大量的处理,缩短计算处理要求的tat(turn around time)。再者,并列处理处理器3002执行的并列处理的对象不限于矩阵计算。例如,在并列处理处理器3002根据深度学习算法50而执行学习处理之时,关于学习处理的微分计算等成为并列处理的对象得。
305.处理器3001的计算单元的数是例如,双核心(核心数:2)、四核心(核心数:4)、八核心(核心数:8)。一方面,并列处理处理器3002例如有至少10个计算单元(核心数:10),可并列执行10的矩阵计算。并列处理处理器3002还有例如,有数十个计算单元的情况。另外,并列处理处理器3002有例如至少100个计算单元(核心数:100),还有可并列执行100的矩阵计算的情况。另外,并列处理处理器3002有例如至少1000个计算单元(核心数:1000),还有可并列执行1000的矩阵计算的情况。并列处理处理器3002还有例如,有数千个计算单元的情况。
306.图48显示并列处理处理器3002的构成例。并列处理处理器3002含多个计算单元3200、及ram3201。计算单元3200的各自并列执行行列数据的计算处理。ram3201存储关于计算单元3200执行的计算处理的数据。ram3201是具有至少1千兆的容量的存储器。ram3201也可为具有2千兆、4千兆、6千兆、8千兆、或者10千兆以上的容量的存储器。计算单元3200从ram3201取得数据,执行计算处理。计算单元3200有时称为“处理器核心”、“核心”等。
307.图49、图50及图51显示基于在处理器3001上运行的解析软件3100的控制而用并列
处理处理器3002执行的计算处理的概要。图49显示执行计算处理的并列处理处理器3002的构成例。并列处理处理器3002具有多个计算单元3200、ram3201。执行解析软件3100的处理器3001向并列处理处理器3002命令,使并列处理处理器3002执行用深度学习算法60分析波形数据时要求的至少一部分的计算处理。处理器3001对于并列处理处理器3002命令关于基于深度学习算法60的波形数据的分析的计算处理的执行。与用fcm检测部460(参照图4)检测的信号相对应的波形数据的全部或至少一部分存储在主存储器3017。存储在主存储器3017的数据转送到并列处理处理器3002的ram3201。存储在主存储器3017的数据例如,由dma(direct memory access)方式转送到ram3201。并列处理处理器3002的多个计算单元3200的各自并列执行对于存储在ram3201的数据的计算处理。多个计算单元3200的各自从ram3201取得必要的数据而执行计算处理。与计算结果相对应的数据存储在并列处理处理器3002的ram3201。与计算结果相对应的数据从ram3201以例如dma方式转送到主存储器3017。
308.图50显示并列处理处理器3002执行的矩阵计算的概要。相当于根据深度学习算法60分析波形数据,执行行列的积的计算(矩阵计算)。并列处理处理器3002例如,并列执行关于矩阵计算的多个计算处理。图50的(a)显示行列的积的计算式。在(a)中所示的计算式中,由n行n列的行列a和n行n列的行列b的积求出行列c。如图50中所例示,计算式以多阶层的循环句法记述。图50的(b)显示被并列处理处理器3002并列执行的计算处理的例。图50(a)中所例示的计算式可例如,分割为作为第1阶层的环用变量i第和2阶层的环用变量j的组合数的n
×
n个计算处理。由于这样分割的计算处理的各自是不互相依赖的计算处理,可并列执行。
309.图51是显示图50的(b)中所例示的多个计算处理被并列处理处理器3002并列执行的概念图。如图51所示,多个计算处理的各自分配在并列处理处理器3002所具备的多个计算单元3200之任一者。计算单元3200的各自互相并列执行分配的计算处理。即,计算单元3200的各自同时执行分割的计算处理。
310.由图51中例示的由并列处理处理器3002的计算求出例如,关于与波形数据相对应的细胞属于多个细胞类别的各自的概率的信息。基于计算的结果而执行解析软件3100的处理器3001进行关于与波形数据相对应的细胞的细胞种的解析。计算结果存储在并列处理处理器3002的ram3201,从ram3201转送到主存储器3017。处理器3001取得基于存储在主存储器3017的计算结果而解析的结果,储纳在存储部3004。
311.受试体中的成分属于多个分类类别的各自的概率的计算也可由与并列处理处理器3002不同的处理器进行。例如,利用并列处理处理器3002的计算结果也可从ram3201转送到主存储器3017,处理器3001基于从主存储器3017读取的计算结果而计算关于与各自的波形数据相对应的成分属于多个分类类别的各自的概率的信息。另外,利用并列处理处理器3002的计算结果也可从ram3201转送到分析单元303x(参照图47),搭载在分析单元303x的处理器计算关于与各自的波形数据相对应的成分属于多个分类类别的各自的概率的信息。
312.<白细胞的分类方法>
313.【1.第1荧光染料及第2荧光染料】
314.接下来,对于第1荧光染料及第2荧光染料的例进行说明。在此例中,对为了对受试体中的白细胞进行染色,使用第1荧光染料及第2荧光染料这2种荧光染料的例进行说明。以
下,特别是,对于即使是自采血起经过时间的血液受试体,也适宜于正确地对嗜碱性粒细胞进行计数的第1荧光染料及第2荧光染料的组合进行说明。
315.第2荧光染料是在与第1荧光染料不同的波长区域具有极大吸收的荧光染料。即,第2荧光染料是释放能与自第1荧光染料的荧光区别检测的波长的荧光的荧光染料。第1荧光染料及第2荧光染料可各自从具有与白细胞等的血液细胞的核酸结合的性质的公知的荧光染料适宜选择。
316.第1荧光染料及第2荧光染料由从具备流式细胞仪的光源照射的光激发。光可从1个光源照射,也可从2个光源照射。在从1个光源照射光时,从所述光源照射的光也可为能激发第1荧光染料及第2荧光染料两者的光。作为这样的光,优选含多个波长的光,可举出例如白色光。或者,在第1荧光染料及第2荧光染料在接近能用1个波长的光激发的程度的波长区域具有极大吸收时,从光源照射的光也可为所述1个波长的光。例如,可为第1荧光染料或第2荧光染料的一方在400~520nm的波长区域具有极大吸收,另一方在300~420nm的波长区域具有极大吸收时,由在400~420nm具有中心波长的光、例如455nm的光激发两方的荧光染料。或者,例如,可为第1荧光染料及第2荧光染料的极大吸收处于630~660nm的波长区域内,第1荧光染料或第2荧光染料的一方发在660~670nm的波长区域具有峰的荧光,另一方发在比670nm长波长区域具有峰的荧光时,由在630~655nm具有中心波长的光、例如633nm的光激发两方的荧光染料,并且,可区别检测从各自的荧光染料发生的光。
317.在从2个光源照射光时,照射的光也可为能激发第1荧光染料的第1波长的光、及能激发第2荧光染料的第2波长的光的2种光。第2波长与第1波长不同。波长可对应于荧光染料的种类而适宜确定。例如,第1波长是315~490nm,优选为400~450nm,更优选为400~410nm。第2波长是610~750nm,优选为620~700nm,更优选为633~643nm。
318.在使用2个激发光时,第1荧光染料优选在400~490nm的波长区域具有极大吸收,通过吸收所述波长区域的光激发而发荧光的染料,且具有与血液细胞的核酸(特别是dna)结合的性质的染料。例如,可举出具有吖啶骨架的荧光染料、4',6-二脒-2-苯基吲哚
·
二氢氯化物(dapi)、hoechst系列的hoechst3342、hoechst33258、hoechst334580等。
319.作为具有吖啶骨架的荧光染料,可举出原黄素、9-氨基吖啶、吖啶橙、吖啶黄g、吖啶黄素、碱性黄9、乳酸依沙吖啶、euchrysinegg(euchrysine ggnx)、原黄素半硫酸盐、3,6-双(二甲基氨基)吖啶(rhoduline orangen)、3,6-二氨基-2,7,10-三甲基-氯化吖啶鎓。在它们之中,也优选吖啶黄g。或者,第2荧光染料也可使用市售的荧光染料。
320.在使用2个激发光时,作为第2荧光染料,优选在610~750nm的波长区域具有极大吸收,通过吸收所述波长区域的光激发而发荧光的染料,且具有与血液细胞的核酸(特别是rna)结合的性质的染料。例如,可举出碘化丙啶、溴化乙锭、乙啶-吖啶异源二聚体、乙啶二叠氮化物、乙啶同源二聚体-1、乙啶同源二聚体-2、乙啶单叠氮化物、三亚甲基双[[3-[[4-[[(3-甲基苯并噻唑-3-鎓)-2-基]亚甲基]-1,4-二氢喹啉]-1-基]丙基]二甲基铵]
·
四碘化物(toto-1)、4-[(3-甲基苯并噻唑-2(3h)-亚基)甲基]-1-[3-(三甲基铵)丙基]喹啉鎓
·
二碘化物(to-pro-1)、n,n,n',n'-四甲基-n,n'-双[3-[4-[3-[(3-甲基苯并噻唑-3-鎓)-2-基]-2-亚丙烯基]-1,4-二氢喹啉-1-基]丙基]-1,3-丙烷二铵
·
四碘化物(toto-3)或2-[3-[[1-[3-(三甲基铵)丙基]-1,4-二氢喹啉]-4-亚基]-1-丙烯基]-3-甲基苯并噻唑-3-鎓
·
二碘化物(topro-3)、由下述的式(v)表示的荧光染料、及它们的组合等。
[0321]
【化1】
[0322][0323]
式(v)中,r1及r4是氢原子、甲基、乙基或碳原子数6~18的烷基,在任一方是碳原子数6~18的烷基之时,另一方是氢原子、甲基或乙基。r2及r3彼此相同或不同,是甲基、乙基、甲氧基或乙氧基。z是硫原子、氧原子或具有甲基的碳原子。n是0、1、2或3。x-是阴离子。
[0324]
在式(v)中,碳原子数6~18的烷基也可为直链状或分枝链状之任一者。在碳原子数6~18的烷基之中,也优选碳原子数6、8或10的烷基。
[0325]
在式(v)中,作为r1及r4的苄基的取代基,可举出例如碳原子数1~20的烷基、碳原子数2~20的烯基或碳原子数2~20的炔基。在它们之中,也特别优选甲基或乙基。
[0326]
在式(v)中,作为r2及r3的烯基,可举出例如碳原子数2~20的烯基。另外,作为r2及r3的烷氧基,可举出碳原子数1~20的烷氧基。在它们之中,也优选特别甲氧基或乙氧基。
[0327]
在式(v)中,作为阴离子x-,可举出如f-、cl-、br-及i-一样的卤素离子、cf3so
3-、bf
4-、clo
4-等。
[0328]
作为由上述的式(v)表示的荧光染料,优选由下述的式表示的荧光染料。
[0329]
【化2】
[0330][0331]
也可使用单独含上述的第2荧光染料的市售的染色试剂。例如,可举出fluorocellwdf(sysmex株式会社)、stromatolyser4ds(sysmex株式会社)。
[0332]
在使用1个激发光时,优选的第1荧光染料和第2荧光染料的组合也可不同。例如,在以例如633nm的光作为激发光使用时,考虑第1荧光染料及第2荧光染料的极大吸收处于630~660nm的波长区域内,第2荧光染料发在660~670nm的波长区域具有峰的荧光,第1荧光染料发在比670nm长波长区域具有峰的荧光的组合。作为这样的组合,例如,作为第1荧光染料,可使用draq5、draq7或draq9(biostatus公司),作为第2荧光染料,使用由上述的式(v)表示的荧光染料。
[0333]
第1荧光染料及第2荧光染料优选作为溶液使用。溶剂只要是可溶解上述的各荧光染料,就不特别限定。例如,可举出水、有机溶剂、及它们的混合物。作为有机溶剂,优选能与水混合的溶剂,可举出例如碳原子数1~6的醇、乙二醇、二乙二醇、聚乙二醇、dmso等。
[0334]
如参照图2及图5进行说明,第1荧光染料和/或第2荧光染料可收容在一个试剂容器200,也可替代性地,如参照图6进行说明,分别收容在不同的试剂容器200a、200b。
[0335]
【2.溶血试剂】
[0336]
上述的第1荧光染料及第2荧光染料与含溶血试剂、特别优选为表面活性剂的溶血
试剂组合使用。可由所述表面活性剂溶血受试体中的红细胞,并且,给白细胞的细胞膜能透过第1荧光染料及第2荧光染料的程度的损伤。作为表面活性剂,可举出例如非离子性表面活性剂、阳离子性表面活性剂及它们的组合。溶血试剂优选含非离子性表面活性剂。
[0337]
作为非离子性表面活性剂,可举出例如,由下述的式(i)所表示:
[0338]r1-r
2-(ch2ch2o)
n-h(i)
[0339]
(式中,r1是碳原子数8以上25以下的烷基、烯基或炔基;r2是氧原子、-(coo)-或下述的式(ii):
[0340]
【化3】
[0341][0342]
n是23以上25以下或30。)
[0343]
式(i)中,优选为n是23或25,更优选为n是23。在n是23以上25以下时,溶血试剂中的由式(i)表示的非离子表面活性剂的浓度是1700ppm以上,优选为1750ppm以上。另外,在n是23以上25以下时,测定试样中的由式(i)表示的非离子表面活性剂的浓度是2300ppm以下,优选为2200ppm以下。
[0344]
在n是30时,溶血试剂中的由式(i)表示的非离子表面活性剂的浓度是1900ppm以上,优选为2000ppm以上,更优选为2100ppm以上。另外,在n是30时,测定试样中的由式(i)表示的非离子表面活性剂的浓度是2300ppm以下,优选为2200ppm。
[0345]
作为由式(i)表示的非离子表面活性剂的具体例,可举出聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯甾醇、聚氧乙烯蓖麻子油、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、聚氧乙烯烷基胺、聚氧乙烯聚氧丙烯烷基醚、及它们的组合等。在它们之中,也优选聚氧乙烯烷基醚。聚氧乙烯烷基醚优选为选自聚氧乙烯(23)鲸蜡基醚、聚氧乙烯(25)鲸蜡基醚、聚氧乙烯(30)鲸蜡基醚及它们的组的至少1个。更优选为聚氧乙烯(23)鲸蜡基醚、聚氧乙烯(25)鲸蜡基醚及它们的组合,再优选为聚氧乙烯(23)鲸蜡基醚。溶血试剂中所含的非离子表面活性剂可为1种,也可为2种以上。另外,溶血试剂也可还含由式(i)表示的非离子表面活性剂以外的非离子表面活性剂。
[0346]
溶血试剂也可还含阳离子性表面活性剂。作为阳离子性表面活性剂,可举出例如季铵盐型表面活性剂、吡啶鎓盐型表面活性剂及它们的组合。作为季铵盐型表面活性剂,优选例如,由下述的式(iii)表示的总碳原子数9~30的表面活性剂。溶血试剂中所含的阳离子表面活性剂可为1种,也可为2种以上。
[0347]
【化4】
[0348][0349]
式(iii)中,r1是碳原子数6~18的烷基或烯基;r2及r3彼此相同或不同,是碳原子数1~4的烷基或烯基;r4是碳原子数1~4的烷基或烯基或苄基,x-是卤素离子。
[0350]
式(iii)中,r1优选碳原子数6、8、10、12及14的烷基或烯基,特别优选为直链的烷基。作为更具体性的r1,可举出辛基、癸基及十二烷基。r2及r3彼此相同或不同,优选为甲基、乙基及丙基。r4优选为甲基、乙基及丙基。
[0351]
作为吡啶鎓盐型表面活性剂,可举出例如,由式(iv)表示的表面活性剂。
[0352]
【化5】
[0353][0354]
式(iv)中,r1是碳原子数6~18的烷基或烯基;x-是卤素离子。
[0355]
式(iv)中,r1优选碳原子数6、8、10、12及14的烷基或烯基,特别优选为直链的烷基。作为更具体性的r1,可举出辛基、癸基及十二烷基。
[0356]
溶血试剂中的阳离子表面活性剂的浓度可由表面活性剂的种类适宜选择。阳离子表面活性剂的浓度是10ppm以上。阳离子表面活性剂的浓度优选为400ppm以上、更优选为500ppm以上、再优选为600ppm以上。另外,阳离子表面活性剂浓度是10000ppm以下。阳离子表面活性剂的浓度优选为1000ppm以下,更优选为800ppm以下,再优选为700ppm以下。
[0357]
溶血试剂也可含用于将ph设为一定的缓冲物质。例如,可举出无机酸盐类、有机酸盐类、good的缓冲剂、它们的组合等。作为无机酸盐类,可举出例如,磷酸盐、硼酸盐、它们的组合等。作为有机酸盐类,可举出柠檬酸盐、苹果酸盐、它们的组合等。作为good的缓冲剂,可举出例如,mes、bis-tris、ada、pipes、bis-tris-丙烷、aces、mops、mopso、bes、tes、hepes、hepps、tricine、tris、bicine、taps、它们的组合等。
[0358]
溶血试剂也可还含芳香族有机酸。在本说明书中,芳香族有机酸是指分子中具有至少1个芳香环的酸及其盐。作为芳香族有机酸,可举出例如,芳香族羧酸、芳香族磺酸等。作为芳香族羧酸,可举出例如,酞酸、安息香酸、水杨酸、马尿酸、它们的盐、它们的组合等。作为芳香族磺酸,可举出例如,p-氨基苯磺酸、苯磺酸、它们的盐、它们的组合等。溶血试剂中所含的芳香族有机酸可为1种,也可为2种以上。另外,有芳香族有机酸显示缓冲作用的情况。在使用显示缓冲作用的芳香族有机酸时,缓冲剂的添加是任意的,也可与上述的缓冲剂组合。
[0359]
在溶血试剂含芳香族有机酸时,芳香族有机酸的浓度不特别限定,从单核细胞和淋巴细胞的分类能的观点来看,优选20mm以上,更优选为25mm以上。另外,溶血试剂中所含的芳香族有机酸的浓度优选50mm以下,更优选为45mm以下。
[0360]
溶血试剂优选为液体试剂。溶剂只要是可溶解上述的表面活性剂等的各成分,就不特别限定。作为溶剂,可举出例如水、有机溶剂及它们的混合物。作为有机溶剂,优选能与水混合的溶剂,可举出例如碳原子数1~6的醇、乙二醇、二乙二醇、聚乙二醇、二甲基亚砜(dmso)等。
[0361]
溶血试剂的ph不特别限定,优选ph5.5以上。更优选为5.7以上,再优选为5.9以上。另外,优选ph7.2以下。更优选为6.9以下,再优选为6.6以下。在ph的调整中,可使用公知的碱基(氢氧化钠等)或酸(盐酸等)。
[0362]
在溶血试剂中,渗透压不特别限定,从红细胞的溶血效率的观点来看,优选150mosm/kg以下,更优选130mosm/kg以下,最优选110mosm/kg以下。也可添加适合于渗透压
的调整的渗透压调整剂。作为渗透压调整剂,可举出例如,糖、氨基酸、有机溶剂、氯化钠、它们的组合等。
[0363]
作为溶血试剂,也可使用市售的血细胞测定用的溶血试剂。例如,可举出lysercellwdf(sysmex株式会社)、lysercellwdfii(sysmex株式会社)等。
[0364]
溶血试剂例如收容在试剂容器r1(参照图5),由上述的方法输送到室420而与血液受试体混合。
[0365]
【3.白细胞分类方法】
[0366]
接下来,作为本发明的第6实施方式,对于使用上述的第1荧光染料及第2荧光染料将白细胞分类为亚集团的方法进行说明。此方法例如由图52的流程图中所示的工序实施。以下,对于各工序进行说明。图52是用于将白细胞分类为亚集团的方法的流程图的一例,图53是实现图52的方法的优选的一实施方式的流程图。
[0367]
[步骤s0:调制测定试样的工序]
[0368]
在此工序中,通过将含白细胞的受试体,含表面活性剂的溶血试剂,第1荧光染料和第2荧光染料混合来调制测定试样。作为溶血试剂、第1荧光染料及第2荧光染料,适宜地使用上述的。
[0369]
受试体是有含白细胞或含血液细胞的可能性的试样即可,不限于全血。血液细胞是指白细胞、红细胞及血小板等的已知全血中所含的细胞。作为有含白细胞或含血液细胞的可能性的试样,从哺乳动物、优选为人采集的体液试样。作为受试体,可举出例如全血、腹水、关节液、胸腔积液、脑脊髓液、骨髓液、支气管肺泡清洗液、腹腔清洗液、尿、及由单采血液成分法等采集的试样等。
[0370]
上述的第1荧光染料及第2荧光染料以测定试样中的浓度(终浓度)各自成为指定的范围内的浓度的方式与受试体及溶血试剂混合。测定试样中的第1荧光染料的优选的终浓度的上限是1000ppm以下,优选为100ppm以下,更优选为10ppm以下。测定试样中的第1荧光染料的优选的终浓度的下限是0.001ppm以上、优选为0.01ppm以上、更优选为0.1ppm以上。测定试样中的第2荧光染料的优选的终浓度的上限是1000ppm以下,优选为100ppm以下,更优选为10ppm以下。测定试样中的第2荧光染料的优选的终浓度的下限是0.001ppm以上、优选为0.01ppm以上、更优选为0.1ppm以上。
[0371]
溶血试剂和染色试剂和受试体的混合比优选例如,以体积比表示,1000:1以上:1以上。更优选为1000:10以上:10以上,再优选为1000:15以上:15以上。另外,溶血试剂和染色试剂和受试体的混合比优选为例如,以体积比表示,1000:50以下:50以下。更优选为1000:30以下:30以下,再优选为1000:25以下:25以下。荧光染料和受试体的混合比可相同,也可不同。
[0372]
[步骤s1:检测光学信息的工序]
[0373]
在此工序中,向调制的测定试样中的粒子照射光,检测含基于自第1荧光染料的荧光的第1荧光信息、基于自第2荧光染料的荧光的第2荧光信息和散射光信息的光学信息。光学信息优选由fcm检测部460(参照图2)检测。“测定试样中的粒子”是指可由fcm检测部460个个测定的测定试样中所含的粒状物体。具体而言,首先,向fcm检测部460的流动池4113导入测定试样,在所述测定试样中的粒子一一通过流动池之时向所述粒子照射光。进而,对从所述粒子发出的散射光及荧光进行测定而检测光学信息。在测定试样中的粒子中,不仅是
白细胞等的细胞,也可含溶血的红细胞的残骸(红细胞影)、血小板的凝集物、脂质粒子等的非细胞的粒子。
[0374]
检测的光学信息是散射光信息及荧光信息。由于此方法中使用2种荧光染料,检测到与从各自的荧光染料释放的荧光相对应的荧光信息。即,检测到基于自第1荧光染料的荧光的第1荧光信息和基于自第2荧光染料的荧光的第2荧光信息。在从1个光源照射光时,作为散射光信息,检测到由所述光的照射检测的散射光信息。在从2个光源各自照射第1波长的光及第2波长的光时,作为散射光信息,检测到由第1波长的光的照射检测的第1散射光信息及由第2波长的光的照射检测的第2散射光信息。
[0375]
作为散射光,可举出前方散射光(例如,光接收角度0
°
~约20
°
的散射光)及侧方散射光(例如,光接收角度约20
°
~约90
°
的散射光)。散射光信息及荧光信息可举出散射光及荧光的峰值(脉冲的峰的高度)、脉冲面积、脉宽、透过率、斯托克斯位移、比率、经时变化、与它们相关的值等。前方散射光信息只要是反映细胞的尺寸的信息,就不特别限定。侧方散射光信息只要是反映细胞结构的复杂性、颗粒特性、核结构、分叶度等的内部信息的信息,就不特别限定。作为散射光信息,优选前方散射光峰值及侧方散射光峰值,更优选侧方散射光峰高度。作为荧光信息,优选荧光峰高度。
[0376]
作为第1散射光信息,优选由第1波长的光的照射检测的侧方散射光峰值(以下,也称为“第1侧方散射光强度”)。作为第2散射光信息,优选由第2波长的光的照射检测的侧方散射光峰值(以下,也称为“第2侧方散射光强度”)。作为第1荧光信息,优选第1荧光染料的荧光峰值(以下,也称为“第1荧光强度”)。作为第2荧光信息,优选第2荧光染料的荧光峰值(以下,也称为“第2荧光强度”)。
[0377]
在光学信息的检测中,可使用例如,能检测基于自第1荧光染料的荧光的第1荧光信息,基于自第2荧光染料的荧光的第2荧光信息和散射光信息的fcm。作为这样的fcm检测部,使用例如,具备图7、图8中所示的光学系及检测系的fcm。
[0378]
[步骤s2:筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序]
[0379]
在此工序中,含基于第1荧光信息的光学信息而从测定试样中的粒子中筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团。认为可由此工序,预先去除影响嗜碱性粒细胞的级分的集团。如上所述,在自采集起经过时间的受试体中,可发生影响嗜碱性粒细胞的级分的集团。本发明人发现,在这样的集团和正常的嗜碱性粒细胞中,在第1荧光信息中有能区别的差异。例如,如后述的参考例1的图56(c)所示,正常的白细胞的各亚集团通常在以第1荧光强度(蓝紫色)及第2侧方散射光强度(红色)作为二轴的散点图中,具有大致同程度的荧光强度。其中,散点图上的点表示用fcm测定的各粒子。再者,侧方散射光也可为第1侧方散射光(蓝紫色)。一方面,如参考例2的图57(a)~图57(c)所示,在自采集起经过时间的受试体中,呈现第1荧光强度比正常的白细胞的亚集团低值的集团。由于此集团在以第2荧光强度及侧方散射光强度作为二轴的散点图上还确认到正常的嗜碱性粒细胞出现的区域,妨碍嗜碱性粒细胞的级分。从而,通过基于含第1荧光信息的光学信息而筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团,从测定的粒子除影响嗜碱性粒细胞的级分的集团变得可能。在第6实施方式中,含嗜碱性粒细胞的细胞集团优选为含嗜碱性粒细胞的白细胞的集团。
[0380]
在将正常的白细胞由溶血试剂及第1荧光染料染色时,如上所述,所述白细胞的各亚集团具有大致同程度的第1荧光强度。从而,可由第1荧光信息筛选含嗜碱性粒细胞的细
胞集团。具体而言,含第1荧光信息的光学信息是第1荧光强度之时,从测定试样中的粒子中筛选第1荧光强度比指定的阈值大的粒子的集团。此时认为,作为含嗜碱性粒细胞的细胞集团,筛选含淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞的细胞集团。
[0381]
或者,如图53的流程图的步骤s2-1及s2-2所示,也可制成基于第1荧光信息及散射光信息的散点图(也称为第1散点图),基于所述散点图而筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团。散射光信息也可为第1散射光信息。例如,含第1荧光信息的光学信息是第1荧光强度及侧方散射光强度之时,可在以第1荧光强度及侧方散射光强度作为二轴的散点图中筛选出现在第1荧光强度比指定的阈值大的指定的区域的粒子的集团。侧方散射光强度也可使用第1侧方散射光强度及第2侧方散射光强度之任一者。如例如图56(c)一样,在纵轴设第1荧光强度,在横轴设第2侧方散射光强度的散点图中,白细胞的各亚集团大致分布于横一列。即,还已知在所述散点图中各亚集团出现的区域。第1荧光强度比指定的阈值大的指定的区域可预先设定为含嗜碱性粒细胞的白细胞的亚集团出现的区域。这样的区域可为例如,淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞的5种亚集团出现的区域、淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞的4种亚集团出现的区域、淋巴细胞、单核细胞及嗜碱性粒细胞的3种亚集团出现的区域。认为通过将在这样的区域出现的粒子的集团由选通筛选,筛选含嗜碱性粒细胞的白细胞的细胞集团。
[0382]
与第1荧光强度相对应的指定的阈值不特别限定,可适宜确定。例如,也可预先使用上述的溶血试剂及第1荧光染料用fcm测定已知含嗜碱性粒细胞的血液或自采集起时间的经过的血液,取得对于白细胞的第1荧光强度,以得到的值作为指定的阈值使用。另外,也可通过从基于这样的测定制成的第1散点图蓄积关于白细胞的各亚集团出现的区域的数据,预先设定含所述阈值及嗜碱性粒细胞的细胞集团出现的区域。
[0383]
[步骤s3:将细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团的工序]
[0384]
在此工序中,基于第2荧光信息及散射光信息,将含嗜碱性粒细胞的细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团。散射光信息也可为第2散射光信息。为了由筛选上述的细胞集团的工序去除影响嗜碱性粒细胞的级分的集团,认为可将筛选的细胞集团中所含的白细胞高精度地分类为含嗜碱性粒细胞的各亚集团。在此工序中,例如,如图53的流程图的s3-1、s3-2所示,也可制成基于第2荧光信息及散射光信息的散点图(也称为第2散点图),基于所述散点图,将含嗜碱性粒细胞的细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团。散射光信息也可为第2散射光信息。具体而言,制成以第2荧光强度及侧方散射光强度作为二轴的散点图。侧方散射光强度也可为第2侧方散射光强度。筛选的细胞集团是含嗜碱性粒细胞的白细胞的集团、即含淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞及嗜碱性粒细胞的细胞集团之时,在所述散点图中,如例如图56(a)一样,各亚集团出现在不同的区域而可5分类。由于每亚集团的细胞的尺寸,核酸的量、内部结构等互相不同,对于各亚集团而检测的第2荧光强度及侧方散射光强度不同的结果,这样分类。从而,可将筛选的细胞集团分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜中性粒细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团及嗜碱性粒细胞的集团。
[0385]
或者,筛选的细胞集团是含淋巴细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞及嗜碱性粒细胞的细胞集团之时,在以第2荧光强度及侧方散射光强度作为二轴的散点图中,各亚集团出现在不同的区域而可4分类。即,可将筛选的细胞集团分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜中性粒细胞的集团及嗜碱性粒细胞的集团。
[0386]
或者,筛选的细胞集团是含淋巴细胞、单核细胞及嗜碱性粒细胞的细胞集团之时,在以第2荧光强度及侧方散射光强度作为二轴的散点图中,例如实施例1的如图59(b)一样,各亚集团出现在不同的区域而可3分类。即,可将筛选的细胞集团分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团及嗜碱性粒细胞的集团。
[0387]
[步骤s4:对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数的工序]
[0388]
在此工序中,如上所述分类的白细胞的亚集团之中,对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数。由于在筛选含上述的嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序中除影响嗜碱性粒细胞的级分的集团,认为分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞中实质上不含嗜碱性粒细胞以外的细胞(例如,劣化的嗜中性粒细胞或淋巴细胞等)。从而,可由所述计数工序更正确地对测定试样中的嗜碱性粒细胞进行计数。计数优选通过将上述的第2散点图用适当的解析软解析,取得分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞的数。
[0389]
[第7实施方式]
[0390]
第7实施方式的将白细胞分类为亚集团的方法例如由图54的流程图中所示的工序实施。可对于测定试样的调制(步骤s10)及光学信息的检测(步骤s11),与第6实施方式同样地进行。在第7实施方式中,在检测光学信息的工序(步骤s11)和筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序(步骤s14、s15)之间,进行基于第1荧光信息而从测定试样中的粒子中筛选含有核细胞的细胞集团的工序(步骤s12、s13)。第1荧光信息优选为第1荧光强度。具体而言,对于测定试样中的粒子,制成在纵轴设粒子数,在横轴设第1荧光强度的直方图(步骤s12)。由于第1荧光染料具有如上所述细胞的核酸结合的性质,在粒子是有核细胞时,与不具有核酸的粒子相比第1荧光强度变高。在上述直方图中,利用其将第1荧光强度处于指定的阈值以上或指定的范围内的粒子筛选为有核细胞(步骤s13)。可由这样的筛选,从测定试样中的粒子除不具有红细胞影等的核的粒子。其中的指定的阈值及指定的范围的下限也可除如红细胞影一样的第1荧光强度极其低值的粒子的程度的值。在第7实施方式中,也可从含有有核细胞的细胞集团筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团。筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序往后可与第6实施方式同样地进行。
[0391]
[第8实施方式]
[0392]
第8实施方式的将白细胞分类为亚集团的方法例如由图55的流程图中所示的工序实施。对于测定试样的调制(步骤s20)及光学信息的检测(步骤s21),可与第6实施方式同样地进行。对于含有有核细胞的细胞集团的筛选(步骤s22、s23),可与第7实施方式同样地进行。进行含有核细胞的细胞集团的筛选与否可任意地确定。在第8实施方式中,在检测光学信息的工序(步骤s21)和筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序(步骤s27、s28)之间,进行基于第2荧光信息及散射光信息而将含测定试样中的粒子或有核细胞的细胞集团分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团、及含嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞两者的集团这4个亚集团的工序(步骤s24、s25)。此分类本身可与第6实施方式中的将细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团的工序同样地进行。具体而言,基于第2荧光信息及散射光信息而制成第2散点图(步骤s24),基于所述散点图,将含测定试样中的粒子或有核细胞的细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团(步骤s25)。在自受试体的采集起经过时间时,所述受试体中的白细胞是级分不良,特别嗜碱性粒细胞和嗜中性粒细胞的级分变得困难。在测定的受试体是那样的级分不良的受试体时,在所述分类工序中,含测定试样中的粒子或
有核细胞的细胞集团分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团、及含嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞两者的集团这4个亚集团。例如,对分类为含嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞两者的集团的粒子进行计数。如果,在测定的受试体是级分良好的受试体时,在所述分类工序中,含测定试样中的粒子或有核细胞的细胞集团也可分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团、嗜中性粒细胞的集团、及嗜碱性粒细胞的集团这5个亚集团(步骤s26)。
[0393]
在第8实施方式中,在将含测定试样中的粒子或有核细胞的细胞集团分类为4个亚集团之后,与第6实施方式同样地,进行筛选含嗜碱性粒细胞的细胞集团的工序(步骤s27、s28)、将细胞集团中所含的白细胞分类为亚集团的工序(步骤s29)、及,对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数的工序(步骤s30)。进而,还进行基于由分类为4个亚集团的工序得到的结果和由对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数的工序得到的结果,将测定试样中的粒子分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团、嗜中性粒细胞的集团、及嗜碱性粒细胞的集团这5个亚集团的工序(步骤s31)。例如,通过从由分类为4个亚集团的工序(步骤s25)得到的含嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞两者的集团的粒子数减去由对分类为嗜碱性粒细胞的集团的细胞进行计数的工序(步骤s30)得到的粒子数,可得到分类为嗜中性粒细胞的集团的粒子数。结果,在第8实施方式中,可将测定试样中的粒子分类为淋巴细胞的集团、单核细胞的集团、嗜酸性粒细胞的集团、嗜中性粒细胞的集团、及嗜碱性粒细胞的集团这5个亚集团。再者,在可由分类为4个亚集团的工序的阶段将测定试样中的粒子分类为白细胞的5个亚集团时,也可对该分类结果和在第8实施方式中最终得到的分类结果进行比较。
[0394]
接下来,将本发明的白细胞分类方法由实施例详细地说明,但本发明不限定于这些实施例。
[0395]
【实施例】
[0396]
对于以下的例中使用的含白细胞的受试体、溶血试剂、染色染料、分析装置及测定方法进行说明。
[0397]
[含白细胞的受试体]
[0398]
(全血受试体)
[0399]
使用从健康自愿者用edta-2k采血管采集的全血5ml。采血后于室温(25
±
2℃)储存,在4小时后,24小时后,42小时后及72小时后,以由采血管分取的受试体作为受试体试样。
[0400]
(嗜碱性粒细胞分离前受试体及分离后受试体)
[0401]
准备嗜碱性粒细胞高值检受试体(>2%以上)1ml,以其中的0.5ml作为嗜碱性粒细胞分离前受试体。将其余使用hetasep(sct st-07906)除去红细胞,回收白细胞。其后,使用basophil isolation kit ii,human(miltenyi biotec 130-092-662)回收嗜碱性粒细胞细胞,以其作为嗜碱性粒细胞分离后受试体。
[0402]
[溶血试剂]
[0403]
使用lysercellwdfii(sysmex株式会社)。
[0404]
[染色试剂]
[0405]
(第1荧光染料)
[0406]
使用吖啶黄g(关东化学株式会社)。
[0407]
(第2荧光染料)
[0408]
作为第2荧光染料,使用美国专利第6004816号中记载的染料化合物a。美国专利第6004816号作为参照整合到本说明书中。染料化合物a是在上述的式(v)中,r1是甲基,r2及r3是氢原子,r4是n-辛基,n是1,z是硫原子,x-是cf3so
3-的化合物,结构式如以下。
[0409]
【化6】
[0410][0411]
如美国专利第6004816号中记载,染料化合物a可由以下的工序得到。将3-甲基-2-甲基苯并噻唑鎓甲烷硫酸酯1当量和n,n-二苯基甲脒3当量在醋酸中在90℃的油浴上加热1.5小时搅拌。将反应液倒入己烷中,将红色油状物进一步用己烷悬浮清洗,除醋酸。将粗生成物用醋酸乙酯-己烷再结晶(收率48%)。向其中加1-辛基勒皮啶鎓三氟甲磺酸盐1当量和吡啶,在90℃的油浴上加热3小时搅拌。浓缩反应液,将残留的蓝色粗制物利用快速层析用甲醇-氯仿纯化而得到浓暗蓝色粉末的染料化合物a(收率62%)。此浓暗蓝色粉末的染料化合物a的性质试验(tlc、1h-nmr、mass等)的结果记载在美国专利第6004816号。染料化合物a的极大吸收光谱是629nm。
[0412]
向特级乙二醇(1l)溶解上述的染料化合物a(27.5mg)和吖啶黄g(25mg)而调制染色试剂。
[0413]
[分析装置]
[0414]
制成多项目自动血细胞分析装置xn-1000(sysmex株式会社)的改造机。xn-1000具备发红色(633nm)的光的半导体激光源,红色的前方散射光的检测器,红色的侧方散射光的检测器和接收由红色的光激发的荧光(660nm以上的光)的检测器。对于xn-1000而进行进行发蓝紫色(405nm)的光的半导体激光源、蓝紫色的散射光的检测器、及检测由蓝色的光激发的荧光(450~600nm)的荧光检测器的增设的改造。另外,变得对于所述分析装置,解析对于红色及蓝紫色的散射光信息以及从第1荧光染料及第2荧光染料发生的荧光信息检测的测定数据,表示期望的散点图。用这样制作的分析装置进行测定。
[0415]
[测定方法]
[0416]
除了代替作为xn-1000(sysmex株式会社)用的染色试剂的fluorocellwdf(sysmex株式会社)而使用含如上所述调制的第1荧光染料及第2荧光染料的染色试剂的点之外,根据xn-1000附属的手册而进行测定试样的调制及试样的测定。数据解析由fcs再解析软(flowjo)实施。调制的测定试样作为溶血试剂,含1000μl的lysercellwdfii,17μl的全血和20μl的染色试剂。此时的染色试剂的稀释倍率是51.85,测定试样中的第1荧光染料及第2荧光染料的终浓度各自是0.53ppm、0.48ppm。
[0417]
【参考例1:嗜碱性粒细胞的出现位置】
[0418]
对于上述的嗜碱性粒细胞分离前受试体和嗜碱性粒细胞分离后受试体而进行测定。对于得到的光学信息而制成将横轴设为第2波长(红色波长)的侧方散射光强度、将纵轴
设为第1波长(蓝紫荧光)的散点图(第1散点图)和将横轴设为第2波长(红色波长)的侧方散射光强度、将纵轴设为第2波长(红色荧光)的散点图(第2散点图)。
[0419]
得到的散点图示于图56(a)~56(d)。在对于嗜碱性粒细胞分离前受试体的第2散点图(图56(a))中,得知白细胞的5种集团在二轴方向离散分布,级分良好。一方面得知,在对于嗜碱性粒细胞分离前受试体的第1散点图(图56(c))中,白细胞的5个集团在横轴(侧方散射)方向离散分布,在纵轴(蓝紫荧光)方向均出现在大致同等的荧光强度的区域。另外可确认,在对嗜碱性粒细胞分离后受试体进行测定的结果中,嗜碱性粒细胞也在第2散点图(图56(b))中出现在比淋巴细胞荧光强度低值的区域,在第1散点图(图56(d))中出现在与淋巴细胞或单核细胞同等的荧光强度位置,全血受试体中的级分状况。
[0420]
【参考例2:经时改变的聚类的出现位置】
[0421]
对于采血后4小时、采血后48小时、及采血后经过72小时的全血受试体而进行测定,检测光学信息。其后,筛选(选通)第1散点图中随着时间经过而增加的纵轴(蓝紫荧光)的低值区域中所含的集团,将该集团标绘于第2散点图上。
[0422]
第1散点图的结果示于图57(a)~57(c),第2散点图的结果示于图58(a)~58(c)。从图58(a)~58(c)得知随着采血后的时间的经过,嗜碱性粒细胞的出现区域中所含的细胞数增大。进而得知,此增大的原因是在第1散点图中选通(出现在图57(a)~57(c)中被四角形围的区域)细胞。即,在第2散点图中随着采血后的时间经过,嗜中性粒细胞在散射光低值侧变动,被认为与嗜碱性粒细胞的出现区域重叠的来源于嗜中性粒细胞的集团是在第1散点图中,出现在蓝紫荧光低值侧的集团变得明显。
[0423]
【实施例1:嗜碱性粒细胞的计数1(1阶段的选通(由蓝紫荧光的有核细胞的选通无))】
[0424]
对于采血后4小时、采血后24小时、采血后48小时、及采血后72小时的全血受试体而进行测定,检测光学信息。其后,首先,制成第1散点图,筛选蓝紫荧光比指定值大的预先设定的区域(图59(a)参照)中所含的集团。在出现在此区域的集团中,含淋巴细胞、单核细胞、及嗜碱性粒细胞,不含随着采血后的时间经过而移动到嗜碱性粒细胞的出现区域的来源于嗜中性粒细胞的细胞。对于此时的采血后24小时的受试体的第1散点图示于图59(a)。
[0425]
其后,对于筛选的集团制成第2散点图。在此第2散点图中对预先设定的嗜碱性粒细胞的出现区域中所含的集团进行计数。对于此时的采血后24小时的受试体的第2散点图示于图59(b)。
[0426]
【实施例2:嗜碱性粒细胞的计数2(与2阶段的选通(有由蓝紫荧光的有核细胞的选通)第2实施方式相对应)及比较例1】
[0427]
使用在实施例1中取得的光学信息进行以下的解析。首先,筛选得到的蓝紫荧光超指定的阈值的细胞(有核细胞)。对于此时的采血24小时后的受试体的直方图示于图60(a)。对于这往后而进行与实施例1同样的解析,对嗜碱性粒细胞进行计数。第1散点图和第2散点图示于图60(b)及图60(c)。
[0428]
一方面,取得的光学信息之中,基于以红色的侧方散射光强度和红色荧光强度制成的第2散点图而计数嗜碱性粒细胞(比较例1)。
[0429]
对于采血后的各经过时间的受试体,由实施例2得到的嗜碱性粒细胞的计数值和由比较例1得到的嗜碱性粒细胞的计数值示于图61。如从图61得知,通过采用本发明的方
法,即使是采血后经过时间的受试体,嗜碱性粒细胞的计数值的升高也与比较例相比被抑制。
[0430]
另外,对于采血后经过4小时的受试体及采血后经过48小时的受试体,用实施例2及比较例1的方法得到的第2散点图示于图62。如还可在散点图中明了得知,在本发明的方法中嗜碱性粒细胞的增大被抑制。
[0431]
【实施例3:白细胞的5分类】
[0432]
基于实施例1中取得的光学信息,将白细胞分类为5个亚集团。光学信息之中,利用红色的侧方散射光强度和红色荧光制成第2散点图,对预先设定的淋巴细胞的出现区域、单核细胞的出现区域、嗜酸性粒细胞的出现区域、及嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞组合出现区域的各自中所含的细胞进行计数。即,在此阶段将白细胞分类为4种集团而进行计数。
[0433]
往后,与实施例1同样地,在横轴设蓝紫色的侧方散射光、在纵轴设蓝紫荧光的第1散点图中的含淋巴细胞、单核细胞、及嗜碱性粒细胞的集团的筛选和对于选择的集团,进行在横轴设红色的侧方散射光强度、在纵轴设红色荧光的第2散点图的嗜碱性粒细胞的计数。通过从首先求出的4种之中的嗜中性粒细胞和嗜碱性粒细胞合并的集团的计数减去其中得到的嗜碱性粒细胞的计数对嗜中性粒细胞的集团进行计数,与在先的结果合并而对白细胞的5种亚集团进行计数。
[0434]
这样得到的随采血后经过时间的白细胞5分类的计数示于表2。一方面,取得的光学信息之中,制成红色的侧方散射光强度和用红色荧光制成的第2散点图,对预先设定的淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜中性粒细胞、及嗜碱性粒细胞的各自的出现区域中所含的细胞进行计数(比较例2)。即,由起初制成的第2散点图将白细胞分类为5个亚集团。得到的结果合并示于表2。
[0435]
【表2】
[0436][0437]
如从表2明了得知,由本发明,随采血后的时间经过的嗜碱性粒细胞数的升高被抑制。另外,得知可由1次的测定还同时高精度地进行白细胞的5分类。
[0438]
【符号的说明】
[0439]
54:室
[0440]
60、442:试剂容器支架
[0441]
60a、60b、60c、60d、60e:支架部
[0442]
62:试剂容器保持部
[0443]
64:穿孔器(抽吸管)
[0444]
100:采血管
[0445]
200、200a、200b、300:试剂容器
[0446]
300x、301x、302x、303x:分析装置(分析单元、分析部)
[0447]
310x:计算机
[0448]
400、400x、401、402:测定装置(测定单元)
[0449]
410、410a、410b:试剂容器
[0450]
420:室
[0451]
430、430a、430b:送液机构
[0452]
431、431a、431b:送液管
[0453]
431x、431ax、431bx:第1端
[0454]
431y、431ay、431by:第2端
[0455]
432、432a、432b:送液部
[0456]
433:泵(定量部)
[0457]
440、440a、440b、440x、441:试样调制部
[0458]
450:受试体抽吸机构
[0459]
451:受试体抽吸管嘴
[0460]
452:抽吸吐出机构(泵)
[0461]
460、460x:fcm检测部(检测部)
[0462]
4111:光源
[0463]
4111a:第1光源
[0464]
4111b:第2光源
[0465]
4113:流动池
[0466]
4116:前方散射光光接收元件
[0467]
4118、4118a、4118b、4118c:二向色镜
[0468]
4121a、4121b:侧方散射光光接收元件
[0469]
4122a、4122b:侧方荧光光接收元件
[0470]
c:细胞(成分)
[0471]
d1:第1光接收部
[0472]
d2:第2光接收部
[0473]
d3:第3光接收部
[0474]
f1、f2:荧光染料
[0475]
fc:流动池
[0476]
fsc:前方散射光
[0477]
sfl:侧方荧光
[0478]
ssc:侧方散射光。

技术特征:
1.用于对受试体中所含的细胞进行分析的测定装置,其包括:用于调制由从至少一个试剂容器供给的试剂中所含的第一及第二荧光染料对所述细胞进行染色的测定试样的室,用于经设在所述试剂容器和所述室之间的送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂的送液部,对应于向在流动池内流动的所述测定试样照射光,取得与从用所述第一及第二荧光染料染色的所述细胞释放的第一波长的荧光和第二波长的荧光各自相对应的第一及第二信号的检测部,及基于所述第一及第二信号而分析所述细胞的分析部。2.权利要求1所述的测定装置,其中所述送液部经具备配置于所述试剂容器内的第一端和与所述室连接的第二端的所述送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂。3.权利要求2所述的测定装置,其中所述送液管的所述第一端固定于所述试剂容器内的指定位置。4.权利要求3所述的测定装置,其中所述送液管的所述第一端在调制分别与多个受试体相对应的多个所述测定试样之间固定于所述指定位置。5.权利要求2~4之任一项所述的测定装置,其特征在于,含用于对于所述试剂容器插入所述送液管的所述第一端,将所述第一端配置于所述试剂容器内的指定位置的机构。6.权利要求1~5之任一项所述的测定装置,其中所述送液部还具有用于经所述送液管向所述室一定量输送所述试剂容器内的试剂的定量部。7.权利要求1~6之任一项所述的测定装置,其中所述试剂容器收容20ml以上100ml以下的所述试剂。8.权利要求1~7之任一项所述的测定装置,其中收容在所述试剂容器内的所述试剂的保存期间在设置所述测定装置的环境的温度下为60天以上90天以内。9.权利要求8所述的测定装置,其中收容在所述试剂容器内的所述试剂的保存期间在15℃~30℃的温度下为60天以上90天以内。10.权利要求1~9之任一项所述的测定装置,其中所述试剂容器具有收容所述试剂的袋状的试剂收容部。11.权利要求10所述的测定装置,其中所述试剂容器收容200ml以上500ml以下的所述试剂。12.权利要求10或11所述的测定装置,其中收容在所述试剂容器内的所述试剂的保存期间在设置所述测定装置的环境的温度下为75天以上1年以内。13.权利要求12所述的测定装置,其中收容在所述试剂容器内的所述试剂的保存期间在15℃~30℃的温度下为75天以上1年以内。14.权利要求1~13之任一项所述的测定装置,其中由构成所述第一荧光染料的第一化合物及构成所述第二荧光染料的第二化合物对所述细胞进行染色。15.权利要求1~14之任一项所述的测定装置,其中所述试剂不含抗体。16.权利要求1~15之任一项所述的测定装置,其中所述测定试样通过将与给细胞的膜所述第一及第二荧光染料能透过所述膜的损伤的溶血剂混合的所述受试体中的所述细胞用所述第一及第二荧光染料染色来调制。
17.权利要求1~16之任一项所述的测定装置,其中所述分析部基于使用所述第一信号的所述细胞的分类和使用所述第二信号的所述细胞的分类而分析所述细胞。18.权利要求1~17之任一项所述的测定装置,其中所述分析部由人工智能算法分析所述第一及第二信号和与对应于向所述测定试样照射光而发生的散射光相对应的第三信号。19.权利要求18所述的测定装置,其中所述分析部通过由并列处理处理器的并列处理执行由所述人工智能算法的矩阵计算。20.权利要求18或19所述的测定装置,其中所述人工智能算法是深度学习算法。21.对受试体中所含的细胞进行分析的分析方法,其包括:经设在收容试剂的试剂容器和用于将所述受试体和所述试剂混合而调制测定试样的室之间的送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂,调制由从至少一个所述试剂容器供给的所述试剂中所含的第一及第二荧光染料对所述细胞进行染色的所述测定试样,向在流动池内流动的所述测定试样照射光,对应于所述光的照射,取得与从用所述第一及第二荧光染料染色的所述细胞释放的第一波长的荧光和第二波长的荧光各自相对应的第一及第二荧光信号,基于所述第一及第二荧光信号而分析所述细胞。

技术总结
本发明提供测定的通量提升的测定装置。本发明提供用于对受试体中所含的细胞进行分析的测定装置,其含:用于调制由从至少一个试剂容器供给的试剂中所含的第一及第二荧光染料对所述细胞进行染色的测定试样的室,用于经设在所述试剂容器和所述室之间的送液管而从所述试剂容器向所述室输送所述试剂的送液部,对应于向在流动池内流动的所述测定试样照射光,取得与从用所述第一及第二荧光染料染色的所述细胞释放的第一波长的荧光和第二波长的荧光各自相对应的第一及第二信号的检测部和基于所述第一及第二信号而对所述细胞进行分析的分析部。的分析部。的分析部。


技术研发人员:水上利洋 木村考伸 滨田雄一 鸟家雄二 中西利志 长井孝明 久世雅人 田中宏典
受保护的技术使用者:希森美康株式会社
技术研发日:2023.03.15
技术公布日:2023/9/20
版权声明

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