一种防治棉花枯萎病菌剂及其制备方法与流程

1.本发明属于防治棉花枯萎病技术领域，特别是涉及一种防治棉花枯萎病菌剂及其制备方法。


背景技术：

2.棉花枯萎病是由尖孢镰刀菌引起的、发生在棉花的病害，棉花枯萎病对棉株生育影响很大，在苗期即可发生，严重时大量死苗，造成缺株断垄，特别是在定苗以后，大量棉株发病，叶片变黄、干枯脱落、直至萎蔫枯死，导致结铃稀少，铃重减轻，同样造成棉花减产，纤维品质降低。
3.现有棉花枯萎病的防治大多都是农业工作者把防治枯萎病的农药直接打在农作物上，这样虽然在一定程度上对棉花枯萎病起到了防治作用，但是一部分农药会残留在农作物上对农作物产生一定的损害，防治效果不好，影响农作物的品质和产量，而且现有的农药不能改善农作物的根际微环境，促进根系的生长，提高养分吸收。


技术实现要素：

4.本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种防治棉花枯萎病菌剂及其制备方法。
5.本发明通过以下技术方案来实现上述目的：一种防治棉花枯萎病菌剂法，包括枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵液30%～50%份、丛枝菌根真菌10%～20%份、木霉菌1%～5%份、乳酸菌发酵液5%～20%份和填料补足100%。
6.优选的，所述枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵后有效活菌数在100亿/ml以上。
7.优选的，所述木霉菌包括哈茨木霉、绿色木霉和长枝木霉。
8.优选的，所述乳酸菌包括乳酸片球菌、植物胚芽乳杆菌、酪蛋白乳杆菌和粪链球菌。
9.优选的，所述填料包括水、膨润土和秸秆粉中的至少一种。
10.一种防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株按照发酵工艺进行液体发酵得到枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液；步骤二、将丛枝菌根真菌经过培养工艺后的进行粉碎备用；步骤三、将枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液、粉碎后的丛枝菌根真菌、木霉菌、乳酸菌发酵液和填料按照比例进行混合即可得到菌剂。
11.优选的，所述步骤一中的发酵工艺包括以下工序：、在氮源、碳源 和中微量元素组成的培养基，灭菌后接种zd328菌株；2）、在配方12小时后，添加尖孢镰刀菌灭活发酵液，按照发酵液总量的10%添加，继续发酵至产芽孢率95以上，芽孢脱落率80%以上，即可停罐备用。
12.优选的，所述步骤二中的培养工艺包括以下工序：
1）、将泥炭土的培养基质高温灭菌后套种棉花和紫花苜蓿；2）、棉花和紫花苜蓿出苗后一周，接种丛枝菌根真菌；3）、培养一个月后，用尖孢镰刀菌灭活发酵液稀释50倍浇灌，连续两次，间隔一周；4）、培养3个月后检测根内泡囊和根外孢子数，检测合格后，去除地上部分，植物根系和基质一起收获，粉碎后备用。
13.优选的，所述发酵工艺工序1中接种的zd328菌株温度设置在35℃，培养12小时。
14.优选的，所述培养工艺工序2中接种的丛枝菌根真菌每周用霍格兰德营养液浇灌一次。
15.有益效果在于：1、采用多种不同类型的菌进行混配，提高了菌剂的适应性，特别是丛枝菌根真菌的加入，保证了在恶劣土壤环境中，微生物依然可以发挥较好的作用。
16.2、枯草芽孢杆菌和丛枝菌根真菌在培养过程使用病原菌尖孢镰刀菌进行诱导，使其发酵液代谢物中含有较高浓度的抗病因子，菌剂对病原菌有较好的适应性，对病原菌的防治效果更好。
17.3、使用后可改善作物根际微环境，促进根系的生长，提高养分吸收。
18.4、降低化肥的使用，有效的提高了肥料的利用率，无污染无残留。
19.5、可提高作物品质，提高产量。
具体实施方式
20.对本发明的技术方案作进一步阐释：一种防治棉花枯萎病菌剂，包括枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵液30%～50%、丛枝菌根真菌10%～20%份、木霉菌1%～5%份、乳酸菌发酵液5%～20%份、填料补足100%；填料包括水、膨润土和秸秆粉中的至少一种，枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵后有效活菌数在100亿/ml以上；木霉菌包括但不限于哈茨木霉、绿色木霉和长枝木霉；乳酸菌包括但不限于乳酸片球菌、植物胚芽乳杆菌、酪蛋白乳杆菌和粪链球菌。
21.一种防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株按照发酵工艺进行液体发酵得到枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液。
22.发酵工艺包括以下工序：1）、在氮源、碳源 和中微量元素组成的培养基，灭菌后接种zd328菌株，zd328菌株温度设置在35℃，培养12小时；2）、在配方12小时后，添加尖孢镰刀菌灭活发酵液，按照发酵液总量的10%添加，继续发酵至产芽孢率95以上，芽孢脱落率80%以上，即可停罐备用。
23.步骤二、将丛枝菌根真菌经过培养工艺后的进行粉碎备用。
24.培养工艺包括以下工序：1）、将泥炭土的培养基质高温灭菌后套种棉花和紫花苜蓿；2）、棉花和紫花苜蓿出苗后一周，接种丛枝菌根真菌，接种的丛枝菌根真菌每周用霍格兰德营养液浇灌一次；3）、培养一个月后，用尖孢镰刀菌灭活发酵液稀释50倍浇灌，连续两次，间隔一周；4）、培养3个月后检测根内泡囊和根外孢子数，检测合格后，去除地上部分，植物根系和基质一起收获，粉碎后备用。
25.步骤三、将枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液、粉碎后的丛枝菌根真菌、木霉菌、乳酸菌发酵液和填料按照比例进行混合即可得到菌剂。
实施例
26.本发明的制备生产工艺：1、将防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株按照发酵工艺进行液体发酵，要求发酵液中有效活菌数在100亿/ml，芽孢率在98%以上，其制备方法为：a、在氮源、碳源和中微量元素组成的培养基，灭菌后接种zd328菌株，35℃培养12小时；b、在配方12小时后，添加尖孢镰刀菌灭活发酵液，按照发酵液总量的10%添加，继续发酵至产芽孢率95%以上，芽孢脱落率80%以上，即可停罐备用。
27.2、丛枝菌根真菌，需要先进行培养，制备方法如下：（1）培养基质为泥炭土，寄主植物为棉花和紫花苜蓿套种；（2）首先将培养基质高温灭菌，种上棉花和紫花苜蓿，出苗后一周，接种丛枝菌根真菌。期间每周用霍格兰德营养液浇灌一次。
28.（3）培养一个月后，用尖孢镰刀菌灭活发酵液稀释50倍浇灌，连续两次，间隔一周。
29.（4）培养3个月后检测根内泡囊和根外孢子数，检测合格后，去除地上部分，植物根系和基质一起收获，粉碎后备用。
30.3、防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，该方法包括：（1）、将以下物料按照比例混合均匀，防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液
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50kg丛枝菌根真菌
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15kg木霉菌
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2.5kg乳酸菌发酵液
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10kg自来水
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22.5kg产品配制好后，经检验合格灌装。
31.（2）、本发明应用：将本发明与枯草芽孢杆菌菌剂做对比，作物棉花，地点新疆阿克苏。方法如下：棉花出苗后用本发明300倍稀释，进行滴灌，连续使用3次，每次间隔20天。
32.使用效果如下：处理方案枯萎病发病率（%）本发明+常规管理1.01枯草菌剂+常规管理3.21常规管理7.75使用本发明后，枯萎病发病率显著降低。
实施例
33.本发明的制备生产工艺1和2同实施例1，物料准备好后，按一下工艺配制：1、将防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液低温真空冷冻干燥，制成菌粉备用。
34.2、将以下物料按照比例混合均匀，冻干菌粉
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30kg
丛枝菌根真菌
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15kg木霉菌
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5kg乳酸菌发酵液
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5kg膨润土
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20kg葡萄糖
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25kg产品配制好后，经检验合格灌装。
35.3、本发明应用：将本发明与枯草芽孢杆菌菌剂做对比，作物棉花，地点新疆石河子。方法如下：棉花出苗后用本发明300倍稀释，进行滴灌，连续使用3次，每次间隔20天。
36.使用效果如下：处理方案枯萎病发病率（%）本发明+常规管理2.34枯草菌剂+常规管理5.20常规管理9.18使用本发明后，枯萎病发病率显著降低。
实施例
37.本发明的制备同实施例1本发明应用：将本发明与枯草芽孢杆菌菌剂做对比，作物棉花，地点新疆阿克苏市。方法如下：棉花出苗水开始使用，稀释300倍滴灌。连续使用3次，间隔20天。
38.使用效果如下：处理方案枯萎病发病率（%）本发明+常规管理0.28枯草菌剂+常规管理3.71常规管理5.69使用本发明后，枯萎病发病率显著降低。
39.工作原理：本发明制备的菌剂可以作为底肥使用，与其他有机肥复合肥混合后使用即可；也可以追肥使用，在作物苗期或者萌芽期开始，将本产品稀释200~300倍或者2~3kg/亩，灌根或滴灌，作物生育期使用3~5次，对棉花枯萎病发病率控制在2%以下，同时可显著提高作物根系的生长，促进养分吸收，植株生长更健康，增产提质。
40.以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。

技术特征：
1.一种防治棉花枯萎病菌剂，其特征在于：包括枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵液30%～50%份、丛枝菌根真菌10%～20%份、木霉菌1%～5%份、乳酸菌发酵液5%～20%份和填料补足100%。2.根据权利要求1所述的防治棉花枯萎病菌剂，其特征在于：所述枯草芽孢杆菌zd328菌株发酵后有效活菌数在100亿/ml以上。3.根据权利要求1所述的防治棉花枯萎病菌剂，其特征在于：所述木霉菌包括哈茨木霉、绿色木霉和长枝木霉。4.根据权利要求1所述的防治棉花枯萎病菌剂，其特征在于：所述乳酸菌包括乳酸片球菌、植物胚芽乳杆菌、酪蛋白乳杆菌和粪链球菌。5.根据权利要求1所述的防治棉花枯萎病菌剂，其特征在于：所述填料包括水、膨润土和秸秆粉中的至少一种。6.一种如权利要求1所述的用于防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、将防病型枯草芽孢杆菌zd18菌株按照发酵工艺进行液体发酵得到枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液；步骤二、将丛枝菌根真菌经过培养工艺后的进行粉碎备用；步骤三、将枯草芽孢杆菌zd18菌株发酵液、粉碎后的丛枝菌根真菌、木霉菌、乳酸菌发酵液和填料按照比例进行混合即可得到菌剂。7.根据权利要求6所述的防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤一中的发酵工艺包括以下工序：在氮源、碳源 和中微量元素组成的培养基，灭菌后接种zd328菌株；2）、在配方12小时后，添加尖孢镰刀菌灭活发酵液，按照发酵液总量的10%添加，继续发酵至产芽孢率95以上，芽孢脱落率80%以上，即可停罐备用。8.根据权利要求6所述的防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于：所述步骤二中的培养工艺包括以下工序：1）、将泥炭土的培养基质高温灭菌后套种棉花和紫花苜蓿；2）、棉花和紫花苜蓿出苗后一周，接种丛枝菌根真菌；3）、培养一个月后，用尖孢镰刀菌灭活发酵液稀释50倍浇灌，连续两次，间隔一周；4）、培养3个月后检测根内泡囊和根外孢子数，检测合格后，去除地上部分，植物根系和基质一起收获，粉碎后备用。9.根据权利要求6所述的防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于：所述发酵工艺工序1中接种的zd328菌株温度设置在35℃，培养12小时。10.根据权利要求8所述的防治棉花枯萎病菌剂的制备方法，其特征在于：所述培养工艺工序2中接种的丛枝菌根真菌每周用霍格兰德营养液浇灌一次。

技术总结
本发明属于防治棉花枯萎病技术领域，具体涉及一种防治棉花枯萎病菌剂及其制备方法，包括枯草芽孢杆菌ZD328菌株发酵液30%～50%份、丛枝菌根真菌10%～20%份、木霉菌1%～5%份、乳酸菌发酵液5%～20%份、填料补足100%，其制备方法包括步骤一、将防病型枯草芽孢杆菌ZD18菌株按照发酵工艺进行液体发酵得到枯草芽孢杆菌ZD18菌株发酵液；步骤二、将丛枝菌根真菌经过培养工艺后的进行粉碎备用；步骤三、将枯草芽孢杆菌ZD18菌株发酵液、粉碎后的丛枝菌根真菌、木霉菌、乳酸菌发酵液和填料按照比例进行混合即可得到菌剂。有益效果在于：使用后可改善作物根际微环境，促进根系的生长，提高养分吸收；降低化肥的使用，有效的提高了肥料的利用率，无污染无残留。无污染无残留。


技术研发人员：唐世建 王怀明 闫朝选 梁文飞
受保护的技术使用者：河南正达作物保护有限公司
技术研发日：2023.06.26
技术公布日：2023/9/20