一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法与流程

1.本发明涉及药物提取技术领域，具体为一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法。


背景技术：

2.5-羟基色氨酸，是一种氨基酸类物质。它在人体内可作为5-羟色胺的前体物质；其中，5-羟色胺又名血清素，广泛存在于哺乳动物组织中，特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高，它也是一种抑制性神经递质。能产生愉悦情绪的信使，因此被广泛应用于抗抑郁药。
3.目前5-羟基色氨酸主要有天然提取法、化学合成和发酵法制得。天然提取法是从非洲加纳籽中提取得来研究发现，其主要活性物质5-羟基色氨酸含量可达到10％以上。
4.目前，5-羟基色氨酸的提取方法主要为：将加纳籽粉碎，加水回流提取，提取液加入g6104阳离子树脂吸附，30％氨水洗脱(如现有技术201010549785.x)。其产品的最终回收率为60％-70％。然而，5-羟基色氨酸在碱性条件下不稳定；且仍然含有较大量的5-羟基色氨酸没被分离出来，未分离出的5-羟基色氨酸占整个5-羟基色氨酸的含量的30％-40％，从而导致产品收率较低。


技术实现要素：

5.本发明提供一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，用以解决上述提出的至少一项技术问题。
6.为解决上述技术问题，本发明公开了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括：
7.s1：原料预处理
8.在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；
9.s2：浓缩脱脂处理
10.对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；
11.s3：提纯处理
12.对浓缩物进行纯化水稀释沉淀，高速离心过滤；得上清液和沉积固体；对上清液进行大孔树脂吸附；纯净水洗涤，再对沉积固体和吸附树脂分别进行乙醇洗脱；回收乙醇，放冷结晶，分别收取结晶物；
13.s4：干燥制备
14.对结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶进行恒温干燥。
15.优选的，s1中乙醇的体积百分比为百分之50；
16.乙醇和加纳籽粉的质量占比为1：6。
17.优选的，s1中至少使用乙醇对加纳籽粉末超声介入提取一次，提取温度为65-75摄
氏度，提取时间为0.9-1.1小时，乳化时间为30分钟。
18.优选的，s2中真空浓缩回收乙醇的真空浓缩温度小于等于70摄氏度，真空度为-0.07mpa-0.88mpa。
19.优选的，s2中脱脂剂为石油醚、正乙烷、乙醚中的任一种。
20.优选的，s3中大孔树脂为d-101,d-130,ab-8,lx-38,nka-9,hpd-400,xda-8树脂中的一种或二种组合；
21.乙醇洗脱中的乙醇的体积百分比为百分之40-45。
22.优选的，s3中大孔树脂xda-8,
23.优选的，s4中恒温干燥的温度小于等于60摄氏度。
24.优选的，s1中超声提取采用的仪器为超声波提取仪。
25.优选的，还包括，s11：在进行超声提取的过程中对超声波提取仪的运行状态进行自检，有效保证超声提取的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率θ：
26.其中，θ为超声波提取仪的实际提取效率θ，c
x
为用可见光谱法检测出的母液滤液中5-羟基色氨酸的浓度，v
x
为加入超声波提取仪内的乙醇的体积，m
x
为加入超声波提取仪的加纳籽粉粉末的质量，为每克加纳籽粉粉末在v
x
体积的乙醇中提取时得到的基准5-羟基色氨酸浓度，β为5-羟基色氨酸在乙醇中的扩散系数，π为圆周率，d为超声波提取仪腔体的平均直径，t为超声提取时长；
27.若θ》θ0，则超声波提取仪正常运行，若θ≤θ0，则此时超声波提取仪异常，会导致超声提取效率低于预设水平，此时超声波提取仪发出报警提示；其中θ0为超声波提取仪的预设提取效率。
28.优选的，s4后对得到的产品进行抽样质检，抽样质检包括纯度检测、残留溶剂检测、重金属和微生物检测和5-羟基色氨酸含量检测中的一种或多种。
29.下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
30.与现有技术对比，本发明具备以下有益效果：
31.1.本发明将加纳籽磨成细粉或者加纳籽粉加入乳化剪切机的提取罐中，然后加入加纳籽粉重量的六倍量的百分之50体积浓度的乙醇；并超声提取两次(或使用超声波提取仪提取两次)，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间为1h；然后启动乳化剪切机运动30分钟，并对乳化后的液体使用100-200目筛进行过滤；以得到母液滤液；在此使用环境下，并未引入碱性物质对加纳籽粉进行提取，从而提高了5-羟基色氨酸的稳定性和回收性；
32.2.本发明将乳化后的母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa-0.88mpa，真空浓缩温度小于等于70摄氏度的情况下对母液滤液中的乙醇进行回收，回收完成后，添加石油醚脱脂，分离出石油醚层；回收的乙醇可以二次利用，分离出的石油醚层经过离心除杂后可以得到加纳籽油；回收后二次利用的乙醇可以节省溶剂的使用成本，加纳籽油可以提高附加产品的价值，从而增加收益；
33.3.本发明将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用离心机对第一混合溶液进行过高速离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；再用
纯净水洗涤吸附树脂，再使用45％乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将其浓缩至有晶体开始析出时取出放冷沉淀析晶；回收的乙醇可以二次利用，从而减少资源浪费，降低成本；
34.4.本发明将沉淀析晶放冷后，使用乙醇溶解，并重结晶，然后使用干燥机在温度小于等于60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。重结晶过程中可以使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，从而降低资源损耗，降低成本；
35.5.本发明在实验过程中5-羟基色氨酸含量均高于80％；总5-羟基色氨酸的提取率均高于85％，表明提取效益高，该提取方法回报率高。
附图说明
36.附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例一起用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。在附图中：
37.图1为本实施例提供的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法的流程示意图；
具体实施方式
38.以下结合附图对本发明的优选实施例进行说明，应当理解，此处所描述的优选实施例仅用于说明和解释本发明，并不用于限定本发明。
39.另外，在本发明中如涉及“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，并非特别指称次序或顺位的意思，亦非用以限定本发明，其仅仅是为了区别以相同技术用语描述的组件或操作而已，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，各个实施例之间的技术方案以及技术特征可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当认为这种技术方案的结合不存在，也不在本发明要求的保护范围之内。
40.本发明提供如下实施例
41.实施例1
42.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
43.将1000g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-40目筛；将百分之50体积浓度的乙醇6000ml和1000g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用100-200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
44.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度≤60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.2。然后加入约300ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
45.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤
吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至有晶体开始析出时，取出放冷沉淀析晶；分别滤取结晶物；
46.用百分之50体积浓度的乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
47.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为83.5％，总5-羟基色氨酸的提取率为86.3％。
48.实施例2
49.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
50.将200g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-40目筛；将百分之50体积浓度的乙醇1200ml和200g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用100-200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
51.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约60ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
52.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
53.用乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
54.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为82.5％，总5-羟基色氨酸的提取率为85.6％。
55.实施例3
56.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
57.将400g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-20目筛；将百分之50体积浓度的乙醇2400ml和400g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用100-200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
58.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约120ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
59.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用离心机对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
60.用百分之50体积浓度的乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
61.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为84.7％，总5-羟基色氨酸的提取率为85.1％。
62.实施例4
63.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
64.将600g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-20目筛；将百分之50体积浓度的乙醇3600ml和600g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
65.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约120ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
66.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
67.用百分之50体积浓度的乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
68.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为84.3％，总5-羟基色氨酸的提取率为87.2％。
69.实施例5
70.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
71.将800g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-20目筛；将百分之50体积浓度的乙醇6000ml和800g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
72.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜70℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约240ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
73.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
74.用百分之50体积浓度的乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤
60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
75.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为86.2％，总5-羟基色氨酸的提取率为91.9％。
76.实施例6
77.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
78.将5000g5-羟基色氨酸花粉碎成粗粉，粉碎后过10-20目筛；将百分之50体积浓度的乙醇30000ml和5000g5-羟基色氨酸花粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
79.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约1500ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
80.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
81.用乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
82.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为86.5％，总5-羟基色氨酸的提取率为93.3％。
83.实施例7
84.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括如下步骤：
85.将10000g加纳籽粉碎成粗粉，粉碎后过10-20目筛；将百分之50体积浓度的乙醇60000ml和10000g加纳籽粉放入超声波提取仪超声提取两次，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间均为1h；得到提取溶液，然后使用200目筛对提取溶液进行过滤，然后启动乳化剪切机运行30分钟，得母液滤液；
86.将母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa～0.088mpa，且浓缩温度＜60℃的情况下，对母液滤液进行真空浓缩，并回收乙醇。回收乙醇后，浓缩物比重为1.15-1.4。然后加入约3000ml的石油醚脱脂，分离出石油醚层；得浓缩物；
87.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
88.用百分之50体积浓度的乙醇溶解沉淀析晶并重结晶；使用传导干燥机，在温度≤60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。
89.产品中的5-羟基色氨酸含量，约为86.9％，总5-羟基色氨酸的提取率为87.5％。
90.实施例8
91.本发明实施例提供了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，s1中超声提取采用的仪器为超声波提取仪；
92.还包括，s11：在进行超声提取的过程中对超声波提取仪的运行状态进行自检，有效保证超声提取的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率θ：
93.其中，θ为超声波提取仪的实际提取效率θ，c
x
为用可见光谱法检测出的母液滤液中5-羟基色氨酸的浓度，v
x
为加入超声波提取仪内的乙醇的体积，m
x
为加入超声波提取仪的加纳籽粉粉末的质量，为每克加纳籽粉粉末在v
x
体积的乙醇中提取时得到的基准5-羟基色氨酸浓度，β为5-羟基色氨酸在乙醇中的扩散系数，π为圆周率，d为超声波提取仪腔体的平均直径，t为超声提取时长；
94.若θ》θ0，则超声波提取仪正常运行，若θ≤θ0，则此时超声波提取仪异常，会导致超声提取效率低于预设水平，此时超声波提取仪发出报警提示；其中θ0为超声波提取仪的预设提取效率。
95.一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括：
96.s1：原料预处理
97.在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；
98.s2：浓缩脱脂处理
99.对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；
100.s3：提纯处理
101.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；
102.s4：干燥制备
103.对s3结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶进行恒温干燥。
104.上述技术方案的工作原理：将加纳籽磨成细粉或者加纳籽粉加入乳化剪切机的提取罐中，然后加入加纳籽粉重量的六倍量的百分之50体积浓度的乙醇；并超声提取两次(或使用超声波提取仪提取两次)，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间为1h；然后启动乳化剪切机运动30分钟，并对乳化后的液体使用100-200目筛进行过滤；以得到母液滤液；在此使用环境下，并未引入碱性物质对加纳籽粉进行提取，从而提高了5-羟基色氨酸的稳定性和回收性。
105.将乳化后的母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa-0.88mpa，真空浓缩温度小于等于70摄氏度的情况下对母液滤液中的乙醇进行回收，回收完成后，添加石油醚
脱脂，分离出石油醚层；回收的乙醇可以二次利用，分离出的石油醚层经过离心除杂后可以得到加纳籽油；回收后二次利用的乙醇可以节省溶剂的使用成本，加纳籽油可以提高附加产品的价值，从而增加收益。
106.将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用管式分离机(15000r/min)对第一混合溶液进行过离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；用纯净水洗涤吸附树脂，再使用百分之45体积浓度的乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将浓缩至开始有晶体析出时取出放冷沉淀析晶；分别收取结晶物；回收的乙醇可以二次利用，从而减少资源浪费，降低成本。
107.将沉淀析晶放冷后，使用乙醇溶解，并重结晶，然后使用干燥机在温度小于等于60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。重结晶过程中可以使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，从而降低资源损耗，降低成本。
108.对超声波提取仪的实际提取效率θ的实时检测可有效保证超声提取的提取效率，从而从源头上确保5-羟基色氨酸提取分离的效果，还可以避免因超声波提取仪故障造成加纳籽粉粉末原材料的浪费，当超声波提取仪发出报警提示时，工作人员及时将超声波提取仪内的加纳籽粉粉末进行回收再利用，若没有对超声波提取仪的监测，很可能导致大量未完全提取的加纳籽粉粉末被浪费，同时也会直接导致5-羟基色氨酸最终的提取率异常。
109.其中，纯度检测可使用高效液相色谱法(hplc)或气相色谱法(gc)等技术，检测5-htp产品中杂质的含量，及其它同分异构体；残留溶剂检测：如果在制备过程中使用了有机溶剂，请使用气相色谱法或类似方法来检测溶剂残留量(即乙醇的残留量)；重金属和微生物检测：通过常规的重金属和微生物检测，检测产品是否安全可靠，符合规定的标准；含量测定：采用紫外-visible光谱法或荧光分析法等方法测定产品中5-htp的含量；
110.其中，
111.上述技术方案有益效果为：各实施例中使用加纳籽制作5-羟基色氨酸，在实验过程中5-羟基色氨酸含量均高于80％；总5-羟基色氨酸的提取率均高于85％，表明提取效益高，改提取方法回报率高。
112.显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

技术特征：
1.一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，包括：s1：原料预处理在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；s2：浓缩脱脂处理对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；s3：提纯处理对浓缩物进行纯化水稀释沉淀，高速离心过滤；得上清液和沉积固体；对上清液进行大孔树脂吸附；纯净水洗涤，再对沉淀固体和吸附树脂分别进行乙醇洗脱；回收乙醇，放冷结晶，分别收取结晶物；s4：干燥制备对结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶物进行恒温干燥。2.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s1中乙醇的体积百分比为百分之50；乙醇和加纳籽粉的质量占比为1：6。3.根据权利要求2所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s1中至少使用乙醇对加纳籽粉末超声介入提取一次，提取温度为65-75摄氏度，提取时间为0.9-1.1小时，乳化时间为30分钟。4.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s2中真空浓缩回收乙醇的真空浓缩温度小于等于70摄氏度，真空度为-0.07mpa-0.88mpa。5.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s2中脱脂剂为石油醚、正乙烷、乙醚中的任一种。6.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s3中大孔树脂为d-101,d-130,ab-8,lx-38,nka-9,hpd-400,xda-8树脂中的一种或二种组合；乙醇洗脱中的乙醇的体积百分比为百分之40-45。7.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s4中恒温干燥的温度小于等于60摄氏度。8.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，s1中超声提取采用的仪器为超声波提取仪。9.根据权利要求9所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，还包括，s11：在进行超声提取的过程中对超声波提取仪的运行状态进行自检，，有效保证超声提取的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率其中，为超声波提取仪的实际提取效率c
x
为用
可见光谱法检测出的母液滤液中5-羟基色氨酸的浓度，v
x
为加入超声波提取仪内的乙醇的体积，m
x
为加入超声波提取仪的加纳籽粉粉末的质量，为每克加纳籽粉粉末在v
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体积的乙醇中提取时得到的基准5-羟基色氨酸浓度，β为5-羟基色氨酸在乙醇中的扩散系数，π为圆周率，d为超声波提取仪腔体的平均直径，t为超声提取时长；若则超声波提取仪正常运行，若则此时超声波提取仪异常，会导致超声提取效率低于预设水平，此时超声波提取仪发出报警提示；其中为超声波提取仪的预设提取效率。10.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，s4后对得到的产品进行抽样质检，抽样质检包括纯度检测、残留溶剂检测、重金属和微生物检测和5-羟基色氨酸含量检测中的一种或多种。

技术总结
本发明公开了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括：S1：在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；S2：对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；S3：对浓缩物进行纯化水稀释沉淀，高速离心过滤；得上清液和沉积固体；对上清液进行大孔树脂吸附；先用纯水洗涤吸附后的树脂，再对树脂和沉积固体分别进行乙醇洗脱；回收乙醇，放冷结晶，得结晶物；S4：对结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶物进行恒温干燥。本发明未使用碱性溶剂对5-羟基色氨酸进行提取，提高了提取后5-羟基色氨酸的稳定性。的稳定性。的稳定性。


技术研发人员：刘星勋 方植伟 王志
受保护的技术使用者：湖南华康生物资源有限公司
技术研发日：2023.06.19
技术公布日：2023/9/20