N2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物、其制备方法及医药用途

n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物、其制备方法及医药用途
技术领域
1.本发明涉及药物领域，尤其涉及一种n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物、光学异构体、盐及制备方法，以及作为fms样酪氨酸激酶3(flt3)、细胞周期检查点激酶1(chk1)或双靶向flt3/chk1抑制剂在抗肿瘤药物中的运用。


背景技术：

2.flt3(fms样酪氨酸激酶3)基因位于人第13号染色体长臂1区2带(13q12)，全长约100kb，包括24个外显子，其中16个与c-kit基因具有高度保守性，它编码一种造血因子受体酪氨酸激酶-flt3激酶。flt3激酶属于ⅲ型受体酪氨酸激酶，主要表达于cd34
+
造血干细胞和未成熟造血祖细胞表面，在调节造血祖细胞的存活、增殖和分化中起着重要作用。flt3的异常激活与多种肿瘤特别是急性髓性白血病(acute myeloid leukemia,aml)的发生发展密切相关。研究表明，在aml中，flt3基因突变占据了约30％的患者，是aml中最常见的基因学突变。根据突变形式不同，flt3突变主要包括位于近膜结构域的内部串联重复突变(flt3-itd)和位于激酶结构域的点突变(flt3-tkd)。它们各占据了aml患者的20％和10％。flt3-itd和flt3-tkd均可配体非依赖性地激活flt3及下游信号通路，导致aml的发生、发展和较差的预后。基于flt3突变与aml的关系，靶向flt3已经成为了aml的研究热点。
3.目前已有多款flt3抑制剂处于临床研究中，个别药物已经上市，flt3抑制剂的运用在一定程度上改善了aml患者的生存和预后。然而，治疗应答通常是短暂的，疾病通常会在几周之内复发，这主要是由于flt3-激酶结构域的突变(获得性耐药)和旁路途径的激活(适应性耐药)导致的。近期文献报道，ⅰ型的flt3抑制剂可以克服大部分的获得性耐药，而能有效克服适应性耐药的治疗方法是迫切需要的。
4.靶向细胞周期已经成为抗肿瘤研究的热点。当dna发生损伤时，引起g1期，s期或g2/m期细胞周期阻滞，其中细胞周期检查点激酶1(chk1)主要负责s和g2/m期检查点的调控。研究表明，chk1的过度表达与多种肿瘤的发生发展密切相关。在aml中，chk1高表达与患者更短的总生存期、无进展生存期和无复发生存期有关。同时，flt3和chk1双靶向可以改善flt3突变的aml患者的治疗效果。开发具有优异flt3/chk1激酶抑制活性的新型骨架的小分子抑制剂对血液系统恶性肿瘤的治疗具有重要意义。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一类具有flt3和chk1抑制活性且具有抗肿瘤作用的n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物，该类化合物生物活性优良、同时提升了化合物的分子多样性和新颖性；本发明的另一目的在于提供此类含n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物的制备方法及其运用。
6.本发明的技术方案如下：
7.通式(i)的化合物或其药学上可接受的盐：
[0008][0009]
或其光学异构体或其药学上可接受的盐。
[0010]
其中：
[0011]
x表示nh、o；
[0012]
a是式ia、式ib或式ic所示的基团：
[0013][0014]
其中代表取代基连接处；
[0015]
y选自n、cr
x
；r
x
选自h、卤素、ch3、cf3；
[0016]
m、n独立地选自0、1、2或3；
[0017]
o选自0、1、2、3、4或5；
[0018]
r1选自-l-nrarb、-l-r8、
[0019]
l为化学键、c
1-8
的烷基、c
3-10
的环烷基，所述基团(烷基、环烷基)可独立地任选被0、1、2、3个r
10
取代，被多个r
10
取代时，多个r
10
相互独立可以相同也可以不相同；
[0020]
p、q独立地选自0、1、2、3、4、5、6、7、8；
[0021]
ra、rb独立地选自氢、氘、羟基、c
1-4
的烷基、环丙基、环丁基、-c(＝o)-(c
1-3
的烷基)、-cho、-s(＝o)
2-(c
1-3
的烷基)；
[0022]
w为酰基、磺酰基、亚砜基、酯基；
[0023]
r2选自c
1-5
的烷基、c
3-8
的环烷基、c
1-5
的烷氧基，所述基团(烷基、环烷基、烷氧基)可独立地被0、1或2个r
11
取代，被多个r
11
取代时，多个r
11
相互独立可以相同也可以不相同；
[0024]
r3、r4、r5、r6独立地选自氢、羟基、卤素、c
1-3
的烷基、或r3和r4，r5和r6分别独立地形成c
3-5
的环烷基或杂环烷基；
[0025]
r7为氢、卤素、羟基、甲基、甲氧基；
[0026]
r8选自氢、羟基、氰基、卤素、c
1-3
的烷基、c
1-3
的卤代烷烃；
[0027]
当r1选自-l-r8，且o为0，l为环丙基时，r8不为氢；
[0028]
r9选自氢、c
1-3
烷基、-c(＝o)-(c
1-3
的烷基)、-cho、s(＝o)
2-(c
1-3
的烷基)；
[0029]r10
为氢、氘、卤素、羟基、氰基、硝基、c
1-3
的烷氧基；或者取代在同一个碳原子上的两个r
10
构成3-6元环；
[0030]r11
为氢、羟基、卤素、硝基、氰基、c
1-4
的烷基、c
1-3
的烷氧基、c
3-6
的环烷基；
[0031]
a选自以下任意结构：
[0032]
其中ia、ib、ic中的结构
[0033]
选自以下任意结构：
[0034][0035]
作为优选，具有通式ii所示的结构：
[0036][0037]
l为化学键、c
1-8
的烷基、c
3-10
的环烷基，所述烷基、环烷基可独立地任选被0、1、2、3个r
10
取代，被多个r
10
取代时，多个r
10
相互独立可以相同也可以不相同；
[0038]
ra、rb独立地选自氢、氘、羟基、c
1-4
的烷基、环丙基、环丁基、-c(＝o)-(c
1-3
的烷基)、-c(＝o)h、-s(＝o)
2-(c
1-3
的烷基)；
[0039]
w为酰基、磺酰基或酯基；
[0040]
r2选自c
1-5
的烷基、c
3-8
的环烷基、c
1-5
的烷氧基，所述烷基、环烷基、烷氧基可独立地被0、1或2个r
11
取代，被多个r
11
取代时，多个r
11
相互独立可以相同也可以不相同。
[0041]
作为进一步优选，所述ra、rb各自独立的选自氢、氘、-c(＝0)-(c
1-3
的烷基)、-cho、s(＝0)
2-(c
1-3
的烷基)；w为-c(o)-；r2选自c
1-5
的烷基，该烷基可进一步被羟基取代。
[0042]
作为一种优选的方案，所述化合物具有如下结构：
[0043]
w为-c(o)-；r2选自c
1-5
的烷基，该烷基可进一步被羟基取代。
[0044]
本发明中，“烷基”以及其他基团的烷基部分(如，烷氧基)可以是直链或支链，一般指c
1-5
的烷基(例如，甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等)。
[0045]
本发明中，“环烷基”是指单环或多环烃环基团，一般指3-10元的环烃基团，包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基、环辛烯基、环己二烯基、环庚三烯基、冰片基、norpinyl、norcaryl、金刚烷基、菔烷基、十氢萘基、降莰基(norbornyl)、螺[4.5]癸基等。环烷基可以是未取代的或被一个或多个合适的取代基取代。
[0046]
本发明中，“卤素”包括氟、氯、溴或碘，或氟化物、氯化物、溴化物或碘化物。
[0047]
本发明中，“杂环烷基”、“芳杂环”是指在环系中至少一个碳原子成员被至少一个杂原子如氮、硫和氧取代。
[0048]
本本发明中，“杂环烷基”是指包含碳原子和氢原子以及至少一个杂原子(优选自氮、氧、硫、砜或亚砜的1-4个杂原子)的非芳族单环或多环。杂环烷基在环基团中可以具有一个或多个碳碳双键或碳-杂原子双键，只要环基团不因其存在而呈芳香性即可。环上碳原子和杂原子总数一般为3-12个。
[0049]
在本发明的一种实施方式中，x具体可选nh、o。
[0050]
在本发明的一种实施方式中，y具体可选nh、ch。
[0051]
在本发明的一种实施方式中，ra、rb具体可分别独立的选自氢、羟基、甲基、甲磺酰基、甲酰基、乙酰基。
[0052]
在本发明的一种实施方式中，w具体可选酰基、磺酰基或酯基。
[0053]
在本发明的一种实施方式中，r7具体可选氢。
[0054]
在本发明的一种实施方式中，ia、ib、ic中的结构具体可选自以下任意结构：
[0055][0056]
在本发明的一种实施方式中，通式i的化合物可以选自以下具体化合物：
[0057]
[0058]
[0059][0060]
上述52个化合物下方的编号为其相应的代号，为叙述方便和表达简洁，上述括代号在本说明书以下内容中将被直接应用。
[0061]
本发明还提供了上述n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物及其光学异构体或其药学上可接受的盐的制备方法，通过以下步骤实现：
[0062]
所述制备方法的反应路线如下式所示：
[0063][0064]
其中，z＝br、cl；b环选自：
[0065][0066]
中任意一种；r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、x、y、m、n、o的定义如权利要求1所述；r1’
为r1或r1的boc保护前体；所述制备方法包括以下步骤：
[0067]
(3)将酸类化合物(比如乙酸、乙醇酸、l-乳酸、d-乳酸、2-甲基-2-羟基丙酸、β-羟基异戊酸)溶于dmf中，0℃(比如可以采用冰浴)下加入hobt、edci、化合物1和dipea，20℃～50℃下(比如可以直接采用室温条件下反应)进行反应，反应完成，后处理得化合物2；
[0068]
步骤(3)中，利用tlc检测反应完成后，反应液经乙酸乙酯萃取和饱和食盐水洗涤后，减压蒸馏除溶剂，硅胶柱层析，最终得到所述化合物2；
[0069]
(4)将化合物2，化合物3溶于反应溶剂中，惰性气体(比如氮气保护下)保护下，加入pd2(dba)3，xant-phos和cs2co3，100℃～120℃反应(比如在110℃反应)，反应完成后处理得化合物i或化合物i的boc保护前体，其中boc保护前体进一步用三氟乙酸脱除boc基团得化合物i。
[0070]
步骤(4)中，采用tlc检测反应完成后减压蒸馏除溶剂，硅胶柱层析纯化得化合物i或化合物i的boc保护前体。
[0071]
具体讲，可以采用如下方法：
[0072]
方法一：n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物的合成路线如下：
[0073][0074]
上述n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物的制备方法包括以下步骤：
[0075]
1)原料1与相应的酸在hobt、edci和dipea条件下20℃～50℃下(比如可以直接采用室温条件下反应)过夜得到中间体1，反应溶剂为dmf；
[0076]
2)原料2在氨水条件下低温反应1h得到中间体2，反应溶剂为乙腈，反应温度为冰浴；
[0077]
3)中间体2与相应的醇在碱性条件下室温过夜反应得到中间体3，所使用的碱为双(三甲基硅烷基)氨基钾，反应溶剂为thf或dmf中任意一种；
[0078]
4)中间体3与中间体1在n2保护、碱、钯和相应的配体催化条件下发生buchwald-hartwig偶联，紧接着脱除boc保护基得到式i化合物-1，buchwald-hartwig偶联所用的溶剂为无水二氧六环，碱为碳酸铯、催化剂为pd2(dba)3,配体为xantphos；
[0079]
5)中间体2与相应的胺在碱性条件下加热反应过夜得到中间体4，反应溶剂为甲醇、二氧六环或乙腈中任意一种，所用的碱为dipea或tea中任意一种,反应温度为80℃；
[0080]
6)中间体4与中间体1在n2保护、碱、钯和相应的配体催化条件下发生buchwald-hartwig偶联直接得式i化合物-2或经脱除boc保护基得式i化合物-2，buchwald
–
hartwig偶联所用的溶剂为无水二氧六环，碱为碳酸铯、催化剂为pd2(dba)3，配体为xantphos；
[0081]
7)式i化合物-2中含伯胺或仲胺的部分化合物(定义为式i化合物-3)在碱性条件下与相应的酸或烷基磺酰氯经缩合或取代反应得式i化合物-4。与酸缩合时，缩合剂为hobt、edci，碱为dipea，溶剂为dmf，反应条件为室温过夜反应；与烷基磺酰氯发生取代时，碱为tea，反应溶剂为thf，反应条件为60℃过夜反应。
[0082]
方法二：
[0083]
将本发明化合物溶于异丙醇中，室温下缓慢滴加入含1～1.5倍比如当量(1.2倍当
量)有机酸或无机酸的异丙醇溶液。滴加完成后，反应液于40℃搅拌过夜。将上述反应液冷却至室温后，抽滤，固体用乙醚洗涤，干燥即得相应的盐。
[0084]
上述制备流程中，z为氯或溴原子，r1、r2、l、rb的定义如上文所示，r’为r1或r1脱除boc保护基之前的基团，b环选自以下任意结构：
[0085][0086]
本领域技术人员可根据实际制备需要，采用本领域常规获得的各种起始化合物为原料，制备本发明的化合物。
[0087]
本发明又提供了制备上述n
2-取代双环-2-氨基嘧啶类衍生物及其光学异构体或其药学上可接受的盐过程中的关键中间体，其结构如下所示：
[0088][0089]
本发明的第二个目的是提供一种组合物，含有上述5-三氟甲基-嘧啶-2，4-二胺类化合物。
[0090]
在本发明的一种实施方式中，所述组合物包含通式i的5-三氟甲基-嘧啶-2，4-二胺类化合物或其药学可接受的盐以及至少一种药学可接受的赋形剂、载体和稀释剂。
[0091]
在本发明的一种实施方式中,药学上可接受的盐为有机盐和无机盐，有机盐包括乙酸盐、甲酸盐、丙酸盐、丙酮酸盐、羟乙酸盐、乙二酸盐、丙二酸盐、丁二酸盐、戊二酸盐、扁桃酸盐、枸橼酸盐、柠檬酸盐、三氟乙酸盐、富马酸盐、草酸盐、苹果酸盐、l-苹果酸盐、d-苹果酸盐、乳酸盐、樟脑磺酸盐、对甲苯磺酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、苯磺酸盐、水杨酸盐、苯甲酸盐、酒石酸盐、l-酒石酸盐，d-酒石酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、抗坏血酸盐、氨基酸盐(如天冬氨酸盐)等；无机酸盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、氢碘酸盐、高氯酸盐等。
[0092]
在本发明的一种实施方式中,化合物或药学上可接受的盐可以接受辅助性成分而制备成制剂。所述制剂为片剂、胶囊、粉末、颗粒、软膏剂、溶液、混悬液、注射剂、吸入剂、凝胶、微球或气雾剂。所述的辅助性成分如环糊精、精氨酸或葡甲胺。所述的环糊精选自α-环糊精、β-环糊精、γ-环糊精、(c
1-4
烷基)-α-环糊精、(c
1-4
烷基)-β-环糊精、(c
1-4
烷基)-γ-环糊精、(羟基-c
1-4
烷基)-α-环糊精、(羟基-c
1-4
烷基)-β-环糊精、(羟基-c
1-4
烷基)-γ-环糊精、(羧基-c
1-4
烷基)-α-环糊精、(羧基-c
1-4
烷基)-β-环糊精、(羧基-c
1-4
烷基)-γ-环糊精、α-环糊精的糖类醚、β-环糊精的糖类醚、γ-环糊精的糖类醚、α-环糊精的磺丁基醚、β-环糊精的磺丁基醚和γ-环糊精的磺丁基醚。所述的辅助性成分还包含医学上可接受的载体、佐剂或媒剂。可用于药学上可接受的药物组合物还包括离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵凝脂；缓冲物质包括磷酸盐、甘氨酸、精氨酸、山梨酸等。
[0093]
在本发明的一种实施方式中,本发明提供包含式(i)的化合物和药学上可接受的载体的药物组合物可配制成用于静脉内给药、皮下注射给药、吸入、口服给药、直肠给药、肠胃外给药、玻璃体内给药、肌内给药、鼻内给药、经皮给药、局部给药、眼部给药、眼内给药、口腔给药、管内给药、支气管给药或舌下给药。在其它实施方式中，将这些药物组合物配制成作为片剂、丸剂、胶囊剂、液体剂、吸人剂、鼻腔喷雾溶液、栓剂、溶液剂、凝胶剂、乳剂、软膏剂，滴眼剂或滴耳剂。
[0094]
本发明提供了一种上述化合物或者组合物或者制剂作为fms样酪氨酸激酶3(flt3)、细胞周期检查点激酶1(chk1)或双靶向flt3/chk1抑制剂在抗肿瘤药物中的运用。
[0095]
进一步，本发明提供了一种上述化合物或者组合物或者制剂在制备从fms样酪氨酸激酶3(flt3)、细胞周期检查点激酶1(chk1)或双靶向flt3/chk1抑制中获益的疾病的药物中的抗肿瘤药物中的应用。
[0096]
在本发明的一种实施方式中，本发明提供治疗蛋白激酶介导的疾病或病症的方法，包括向需要这种治疗的个体施用治疗有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐、药物组合物或药剂。该蛋白激酶包括但不限于flt3(包括突变形式flt3-itd、flt3-d835y/v/f/i/n、flt3-f691l/i、flt3-itd-d835y/v/f、flt3-itd-f691l/i、flt3-n676d、flt3-y842h/r、flt3-g697r、flt3-d815h/n、flt3-k633q)和chk1。
[0097]
在本发明的一种实施方式中，与上述激酶有关的疾病包括肿瘤和自身免疫性疾病。所述肿瘤为膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、表皮癌、肝癌、肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌或皮肤癌；淋巴谱系造血肿瘤如急性淋巴细胞性白血病、b-细胞淋巴瘤、t-细胞淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴
瘤、burkett氏淋巴瘤、骨髓谱系造血肿瘤、急性与慢性髓性白血病、急性与慢性粒细胞白血病、脊髓发育不良综合征、前髓细胞性白血病、甲状腺滤泡癌、间质来源肿瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、中枢或外周神经系统肿瘤、星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤、神经鞘瘤、黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角质黄色瘤、甲状腺滤泡癌、卡波西肉瘤。
[0098]
在本发明的一种实施方式中，免疫性疾病选自关节炎、狼疮、炎性肠病、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病、青少年关节炎、糖尿病、重症肌无力症、桥本甲状腺炎、奥德甲状腺炎、格雷夫斯病、类风湿性关节炎综合征、多发性硬化症、传染性神经元炎、急性传播性脑脊髓炎、阿狄森病、再生障碍性贫血、自身免疫性肝炎、视神经炎、银屑病、移植物抗宿主病、移植、输血过敏反应、变态反应、i型超敏反应、过敏性结膜炎、过敏性鼻炎、特应性皮炎。
[0099]
在本发明的一种实施方式中，本发明的活性化合物或其药学上可接受的盐可作为唯一的抗肿瘤药物单独使用，或者可以与其他治疗剂联合使用。所述的其他治疗剂选自idh1抑制剂、idh2抑制剂、bcl-2抑制剂、低甲基化剂、抗代谢剂。
[0100]
本发明化合物具有flt3和chk1抑制活性，对多种白血病细胞株有增值抑制活性，且对aml多种突变如近膜结构域的内部串联重复突变和激酶结构域中活化环的d835点突变有效，可以克服临床上点突变带来的耐药，可在制备抗肿瘤药物中的应用。
附图说明
[0101]
图1是化合物19对人急性髓细胞白血病mv-4-11nu/nu小鼠移植瘤的治疗作用。
具体实施方式
[0102]
本发明结合附图和实施例作进一步的说明。
[0103]
化合物制备在以下的实施例中将进一步举例说明本发明，这些实施例仅用于举例说明本发明，但不以任何方式限制本发明。
[0104]
制备实施例1：1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)乙基-1-酮(化合物1)
[0105]
步骤1：1-(2-氯-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)乙-1-酮(中间体1-1)的合成
[0106][0107]
将2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐(300mg,1.80mmol)溶于dmf中(8ml)，冰浴条件下依次加入hobt(246mg,1.80mmol)，edci(348mg,1.80mmol)，dipea(474mg,3.65mmol)和乙酸(1.80mmol)。室温搅拌过夜。将反应液用乙酸乙酯和水萃取3次，用饱和食盐水洗涤3次，有机层经无水硫酸钠干燥，减压回收溶剂得残留物，用硅胶柱层析纯化，以pe:ea＝1:1为洗脱液，得黄色油状物(265mg，71％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.43(d,j＝8.5hz,1h),7.20(d,j＝8.5hz,1h),4.74(s,2h),3.78(t,j＝6.0hz,2h),3.06(t,j＝6.0hz,2h),2.21(s,3h)；esi-ms:m/z＝211[m+h]
+
。
[0108]
步骤2：4-氯-5-(三氟甲基)嘧啶-2-胺(中间体1-2)的合成
[0109][0110]
将2，4-二氯-5三氟甲基-嘧啶(7.8g,35.94mmol)溶于30ml乙腈中，冰浴下逐滴加入氨水(28ml)超过45min，滴加完成后继续冰浴反应30min,减压蒸馏回收溶剂得残余物,用硅胶板纯化，以pe:ea＝7:1为洗脱液，得白色固体1-2(3116mg，44％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.56(s,1h),7.96(s,2h)；esi-ms:m/z＝198[m+h]
+
。
[0111]
步骤3：叔丁基((1s，4s)-4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨基甲酸酯(中间体1-3)的合成
[0112][0113]
室温下，取中间体1-2(2.14g,10.84mmol)溶于无水甲醇(40ml)，并在搅拌下向其中依次加入三乙胺(1.65g,16.26mmol)和n-boc-顺式环己二胺(1.91g,13.55mol)。将上述反应液回流过夜反应，减压回收溶剂得残余物，用硅胶柱层析纯化，以pe:ea＝2:1为洗脱液，得白色固体1-3(3666mg,90％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.03(d,j＝1.0hz,1h),5.46
–
5.13(br,2h),5.01(d,j＝7.0hz,1h),4.16
–
4.13(m,1h),3.64(s,1h),1.81
–
1.75(m,4h),1.67
–
1.63(m,2h),1.53
–
1.50(m,2h),1.44(s,9h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0114]
步骤4：1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)乙基-1-酮(化合物1)
[0115][0116]
氮气保护下，向中间体1-1(250mg,0.67mmol)，中间体1-3(0.80mmol)，三(二亚苄基茚丙酮)二钯(97mg,0.17mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(61mg,0.067mmol)，碳酸铯(436mg,1.34mmol)的混合物加入无水二氧六环中(8ml)，110℃过夜反应，抽滤，减压回收溶剂得残留物，用硅胶板柱层析纯化，以pe:ea＝1:1为洗脱液，得305mg淡黄色固体。将其溶于dcm(2ml)中，于冰浴下逐滴加入0.5ml三氟乙酸，混合物室温反应5h后，减压蒸馏回收溶剂得黄色粗品，用硅胶板柱层析分离纯化，以dcm:nh3/etoh(30:1-20:1)为洗脱剂，得白色固体(153mg,51％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.29(s,1h),8.15(t,j＝8.5hz,1h),7.40(d,j＝8.5hz,1h),4.64(s,1h),4.57(s,1h),4.20(m,1h),3.86(t,j＝6.0hz,1h),3.76(t,j＝6.0hz,1h),2.92(t,j＝6.0hz,2h),2.86(m,1h),2.16(d,j＝7.5hz,3h),1.91
–
1.79(m,2h),1.75(m,4h),1.39(m,2h)；esi-ms:m/z＝450[m+1]
+
。
[0117]
制备实施例2 1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物2)
[0118]
步骤1：1-(2-氯-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(2-1)
[0119][0120]
根据中间体1-1制备方法，以2-甲基-2-羟基丙酸代替乙酸得黄色油状物(60％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.41(d,j＝8.5hz,1h),7.18(d,j＝8.5hz,1h),4.80(s,2h),4.00(t,j＝6.0hz,2h),3.04(t,j＝6.0hz,2h),1.53(s,6h)；esi-ms:m/z＝255[m+h]
+
。
[0121]
步骤2：1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物2)
[0122][0123]
以中间体1-3和2-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体(42％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.19(d,j＝1.0hz,1h),8.14(d,j＝8.5hz,1h),7.47(d,j＝8.5hz,1h),4.62(s,2h),4.26
–
4.23(m,2h),3.91(s,1h),3.04
–
2.82(m,3h),1.90
–
1.75(m,6h),1.46(q,j＝4.5hz,8h)；esi-ms:m/z＝494[m+h]
+
。
[0124]
制备实施例3：1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物3)
[0125]
步骤1：1-(2-氯-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(3-1)
[0126][0127]
根据中间体1-1制备方法，以β-羟基异戊酸代替乙酸得黄色油状物(72％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.71(d,j＝8.5hz,1h),7.35(d,j＝8.5hz,1h),4.75(s,0.8h),4.66(s,1.2h),3.83(t,j＝6.0hz,1.2h),3.79(t,j＝6.0hz,0.8h),2.92(t,j＝6.0hz,1.2h),2.82(t,j＝6.0hz,0.8h),2.56(s,1h),2.54(s,1h),1.19(s,3h),1.16(s,3h)；esi-ms:m/z＝269[m+h]
+
。
[0128]
步骤2：1-(2-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-7,8-二氢-1,6-萘啶-6(5h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物3)
[0129][0130]
以中间体1-3和3-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体(58％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ10.42(s,1h),8.48(d,j＝4.5hz,1h),8.03(t,j＝8.0hz,1h),7.56(t,j＝9.0hz,1h),6.02(br,1h),4.86(s,1h),4.69(s,1h),4.60(s,1h),4.17
–
4.12(m,1h),3.84
–
3.79(m,2h),3.32
–
3.26(m,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.74(t,j＝6.0hz,1h),2.56(d,j＝9.0hz,2h),1.92
–
1.88(m,2h),1.83
–
1.63(m,6h),1.20(s,3h),1.17(s,3h)；esi-ms:m/z＝508[m+h]
+
。
[0131]
制备实施例4：1-(5-((4-((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)乙烷-1-酮(化合物4)
[0132]
步骤1：1-(5-溴代异吲哚啉-2-基)乙烷-1-酮(中间体4-1)
[0133][0134]
根据中间体1-1制备方法，以5-溴异二氢吲哚代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐得黄色油状物(84％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.45
–
7.38(m,2h),7.14(dd,j＝17.5,8.0hz,1h),4.87
–
4.64(m,4h),2.16(s,ch3,3h)；esi-ms:m/z＝240[m+h]
+
。
[0135]
步骤2：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)乙烷-1-酮(化合物4)
[0136][0137]
以中间体1-3和4-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体60％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.71(s,1h),8.20(s,1h),7.83(d,j＝2.0hz,0.5h),7.74(d,j＝2.0hz,0.5h),7.63(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.54(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.23(t,j＝8.5hz,1h),6.17(d,j＝7.5hz,1h),4.78(s,1h),4.75(s,1h),4.58(s,1h),4.54(s,1h),4.15
–
4.07(m,1h),3.00
–
2.93(m,1h),2.04(s,3h),1.92-1.82(m,2h),1.61-1.42(m,6h)；esi-ms:m/z＝435[m+h]
+
。
[0138]
制备实施例5：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)-2-羟基乙烷-1-酮(化合物5)
[0139]
步骤1：1-(5-溴代异吲哚啉-2-基)-2-羟基乙烷-1-酮(中间体5-1)
[0140][0141]
根据中间体1-1制备方法，以5-溴异二氢吲哚和羟乙酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(70％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.51
–
7.41(m,2h),7.21(d,j＝8.5hz,0.5h),7.15(d,j＝8.5hz,0.5h),4.86(s,1h),4.82(s,1h),4.67(s,1h),4.63(s,1h),4.21(s,2h)；esi-ms:m/z＝256[m+h]
+
。
[0142]
步骤2：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)-2-羟基乙烷-1-酮(化合物5)
[0143][0144]
以中间体1-3和5-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体58％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.72(s,1h),8.20(s,1h),7.84(s,0.5h),7.74(s,0.5h),7.71
–
7.61(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.55(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.26(d,j＝8.5hz,0.5h),7.22(d,j＝8.5hz,0.5h),6.16(d,j＝7.5hz,1h),4.72(s,1h),4.68(s,1h),4.65(s,1h),4.61(s,1h),4.13(s,2h),4.12
–
4.06(m,1h)2.99
–
2.96(m,1h),1.94
–
1.80(m,2h),1.62
–
1.48(m,6h)；esi-ms:m/z＝451[m+h]
+
。
[0145]
制备实施例6：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)异吲哚-2-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物6)
[0146]
步骤1：1-(5-溴异吲哚喹啉-2-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(中间体6-1)
[0147][0148]
根据中间体1-1制备方法，以5-溴异二氢吲哚和2-甲基-2-羟基丙酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(72％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.46
–
7.40(m,2h),7.18(d,j＝8.5hz,0.5h),7.12(d,j＝8.5hz,0.5h),5.02(s,1h),4.98(s,1h),4.86(s,1h),4.82(s,1h),3.93(br,1h),1.54(s,6h)；esi-ms:m/z＝284[m+h]
+
。
[0149]
步骤2：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物6)
[0150][0151]
以中间体1-3和6-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体59％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.69(s,1h),8.20(t,j＝9.0hz,1h),7.88
–
7.80(m,1h),7.65
–
7.41(m,1h),7.24(t,j＝7.5hz,1h),6.17(br,1h),5.35(s,1h),5.11(d,j＝8.0hz,2h),4.66(d,j＝9.5hz,2h),4.12(s,1h),2.98(s,1h),2.00
–
1.80(m,2h),1.73
–
1.48(m,6h),1.36(s,6h)；esi-ms:m/z＝479[m+h]
+
。
[0152]
制备实施例7：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)异吲哚-2-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物7)
[0153]
步骤1：1-(5-溴异吲哚啉-2-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(中间体7-1)
[0154][0155]
根据中间体1-1制备方法，以5-溴异二氢吲哚和β-羟基异戊酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(82％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.50
–
7.39(m,2h),7.19(d,j＝8.5hz,0.5h),7.13(d,j＝8.5hz,0.5h),4.79(d,j＝6.5hz,2h),4.78
–
4.74(m,2h),2.51(d,j＝1.0hz,2h),1.33(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝298[m+h]
+
。
[0156]
步骤2：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基嘧啶-2-基)氨基)异吲哚啉-2-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物7)
[0157][0158]
以中间体1-3和7-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体44％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.71(s,1h),8.19(s,1h),7.85(s,0.5h),7.73(s,0.5h),7.64(d,j＝8.5hz,0.5h),7.54(d,j＝8.5hz,0.5h),7.23
–
7.18(m,1h),6.13(s,1h),4.84(s,1h),4.79(s,1h),4.61(s,1h),4.58(s,1h),4.10(s,1h),2.97(s,1h),2.47(s,2h),1.90
–
1.82(m,2h),1.61
–
1.49(m,6h),1.22(s,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0159]
制备实施例8：1-(5-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吲哚啉-1-基)乙烷-1-酮(化合物8)
[0160]
步骤1：1-(5-溴代吲哚啉-1-基)乙烷-1-酮(中间体1-14)
nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.16(d,j＝8.5hz,1h),8.14
–
8.12(m,1h),7.56
–
7.27(m,3h),5.28
–
5.12(m,1h),4.20(s,1h),4.05(t,j＝8.5hz,2h),3.20(t,j＝8.5hz,2h),2.98(s,1h),2.56(s,2h),1.87
–
1.85(m,3h),1.83
–
1.65(m,5h),1.35(s,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0173]
制备实施例10：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吲哚啉-1-基)乙烷-1-酮(化合物10)
[0174]
步骤1：1-(6-溴吲哚-1-基)乙烷-1-酮(中间体10-1)
[0175][0176]
根据中间体1-1制备方法，以5-溴二氢吲哚代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐，得黄色油状物(95％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.43(d,j＝2.0hz,1h),7.16(dd,j＝8.0,2.0hz,1h),7.04(d,j＝8.0hz,1h),4.17
–
3.97(m,2h),3.15(t,j＝8.5hz,2h),2.18(s,ch3,3h)；esi-ms:m/z＝240[m+h]
+
。
[0177]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)吲哚啉-1-基)乙烷-1-酮(化合物10)
[0178][0179]
以中间体1-3和10-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体55％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.56(s,1h),8.46(s,1h),8.16(s,1h),7.32(d,j＝8.0hz,1h),7.09(d,j＝8.0hz,1h),6.04(d,j＝8.0hz,1h),4.23(s,1h),4.08(t,j＝8.5hz,2h),3.06(t,j＝8.5hz,2h),2.92(s,1h),2.14(s,3h),1.84
–
1.72(m,2h),1.56
–
1.54(m,4h),1.47
–
1.41(m,2h)；esi-ms:m/z＝435[m+h]
+
。
[0180]
制备实施例11：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(化合物11)
[0181]
步骤1：1-(7-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(中间体11-1)
[0182][0183]
根据中间体1-1制备方法，以7-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐，得黄色油状物(56％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.33
–
7.27(m,2h),7.05
–
7.00(m,1h),4.69(s,1h),4.58(s,1h),3.80(t,j＝6.0hz,1h),3.69
–
3.63(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.79(t,j＝6.0hz,1h),2.17(d,j＝2.0hz,3h)；esi-ms:m/z＝254[m+h]
+
。
[0184]
步骤2：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨
基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(化合物11)
[0185][0186]
以中间体1-3和11-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体66％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.07(d,j＝7.5hz,1h),7.68
–
7.52(m,2h),7.50
–
7.18(m,2h),7.04
–
7.00(m,1h),5.15(d,j＝7.5hz,1h),4.65(s,1h),4.53(s,1h),4.16(s,1h),3.75(t,j＝6.0hz,1h),3.61(t,j＝6.0hz,1h),2.92(s,1h),2.80(t,j＝6.0hz,1h),2.74(t,j＝6.0hz,1h),2.11(s,3h),1.87
–
1.61(m,8h)；esi-ms:m/z＝449[m+h]
+
。
[0187]
制备实施例12：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物12)
[0188]
步骤1：1-(7-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(中间体12-1)
[0189][0190]
根据中间体1-1制备方法，以7-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉和2-甲基-2-羟基丙酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(37％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.31(dd,j＝8.5,2.0hz,1h),7.28(d,j＝2.0hz,1h),7.02(d,j＝8.5hz,1h),4.78(s,2h),3.88(t,j＝6.0hz,2h),2.85(t,j＝6.0hz,2h),1.53(s,6h)；esi-ms:m/z＝298[m+h]
+
。
[0191]
步骤2：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物12)
[0192][0193]
以中间体1-3和12-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体59％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.12(s,1h),7.56
–
7.44(m,2h),7.33(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),7.07(d,j＝8.5hz,1h),5.23(d,j＝7.0hz,1h),4.81(s,2h),4.24
–
4.21(m,1h),3.90(t,j＝6.0hz,2h),2.97
–
2.93(m,1h),2.87(t,j＝6.0hz,2h),1.89
–
1.85(m,2h),1.78
–
1.73(m,4h),1.54(s,6h),1.45
–
1.35(m,2h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0194]
制备实施例13：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物13)
[0195]
步骤1：1-(7-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(中间体13-1)
[0196][0197]
根据中间体1-1制备方法，以7-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉和β-羟基异戊酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(97％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.36
–
7.28(m,2h),7.05
–
7.02(m,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.66(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.52(d,j＝4.0hz,2h),1.30(s,6h)；esi-ms:m/z＝312[m+h]
+
。
[0198]
步骤2：1-(7-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物13)
[0199][0200]
以中间体1-3和13-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体52％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.51(s,1h),8.07(s,1h),7.54(d,j＝14.0hz,1h),7.34(d,j＝8.5hz,1h),6.94(t,j＝6.0hz,1h),6.01(s,1h),4.56(s,1h),4.49(s,1h),3.58(d,j＝6.0hz,2h),2.85(s,1h),2.66(d,j＝6.0hz,1h),2.57(d,j＝6.0hz,1h),2.41
–
2.38(m,3h),1.76
–
1.71(m,2h),1.51
–
1.46(m,4h),1.38(s,2h),1.06(d,j＝5.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0201]
制备实施例14:1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(化合物14)
[0202]
步骤1：1-(6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(中间体14-1)
[0203][0204]
根据中间体1-1制备方法，以6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐，得黄色油状物(84％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.31
–
7.26(m,2h),6.99(d,j＝8.0hz,0.6h),6.98
–
6.94(d,j＝8.0hz,0.4h),4.64(s,1h),4.54(s,1h),3.77(t,j＝6.0hz,1h),3.64(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.80(t,j＝6.0hz,1h),2.16(d,j＝2.5hz,3h)；esi-ms:m/z＝254[m+h]
+
。
[0205]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(化合物14)
[0206][0207]
以中间体1-3和14-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体72％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.60(s,1h),8.19(s,1h),7.61(dd,j＝10.0,2.0hz,1h),7.53(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.48(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.08(dd,j＝8.5,4.0hz,1h),6.13(d,j＝7.5hz,1h),4.57(s,1h),4.52(s,1h),4.13(s,1h),3.64(t,j＝6.0hz,2h),2.97
–
2.95(m,1h),2.82(t,j＝6.0hz,1h),2.71(t,j＝6.0hz,1h),2.07(s,3h),1.97
–
1.81(m,2h),1.64
–
1.52(m,4h),1.52
–
1.46(m,2h)；esi-ms:m/z＝449[m+h]
+
。
[0208]
制备实施例15：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基乙烷-1-酮(化合物15)
[0209]
步骤1：1-(6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基乙烷-1-酮(中间体15-1)
[0210][0211]
根据中间体1-1制备方法，以6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉和羟乙酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(69％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.43
–
7.35(m,2h),7.19(d,j＝8.5hz,0.5h),7.13(d,j＝8.5hz,0.5h),4.57(s,1h),4.51(s,1h),4.16(d,j＝3.5hz,2h),3.66(t,j＝6.0hz,1h),3.55(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.78(t,j＝6.0hz,1h)；esi-ms:m/z＝270[m+h]
+
。
[0212]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基乙烷-1-酮(化合物15)
[0213][0214]
以中间体1-3和15-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体74％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.82
–
9.50(m,1h),8.19(s,1h),7.62(d,j＝8.0hz,1h),7.51(d,j＝8.5hz,1h),7.09(d,j＝8.5hz,1h),6.14(s,1h),4.56(s,1h),4.49(s,1h),4.17(s,2h),4.17
–
4.11(m,1h)3.68(t,j＝6.0hz,1h),3.55(t,j＝6.0hz,1h),2.96(s,1h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.74(t,j＝6.0hz,1h),1.90
–
1.83(m,2h),1.64
–
1.42(m,6h)；esi-ms:m/z＝465[m+h]
+
。
[0215]
制备实施例16：(s)-1-(6-(((4-((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基丙烷-1-酮(化合物16)
基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基丙烷-1-酮(化合物17)
[0227][0228]
以中间体1-3和17-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体30％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.61(s,1h),8.18(s,1h),7.66
–
7.56(m,1h),7.50(dd,j＝8.5,2.0hz,1h),7.08(t,j＝7.5hz,1h),6.12(d,j＝8.5hz,1h),4.78
–
4.47(m,3h),4.13(s,1h),3.74(t,j＝6.0hz,2h),2.97
–
2.94(m,1h),2.82(t,j＝6.0hz,1h),2.74(t,j＝6.0hz,1h),1.90
–
1.82(m,2h),1.64
–
1.43(m,6h),1.20(d,j＝6.5hz,3h)；esi-ms:m/z＝479[m+h]
+
。
[0229]
制备实施例18：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物18)
[0230]
步骤1：1-(6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(中间体18-1)
[0231][0232]
根据中间体1-1制备方法，以6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉和2-甲基-2-羟基丙酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(75％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.35
–
7.30(m,2h),7.00(d,j＝8.5hz,1h),4.75(s,2h),3.88(t,j＝6.0hz,2h),2.89(t,j＝6.0hz,2h),1.52(s,6h)；esi-ms:m/z＝298[m+h]
+
。
[0233]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-2-羟基-2-甲基丙烷-1-酮(化合物18)
[0234][0235]
以中间体1-3和18-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体55％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.05(s,1h),7.57(s,1h),7.40(s,1h),7.30(d,j＝8.5hz,1h),6.98(d,j＝8.5hz,1h),5.15(d,j＝6.5hz,1h),4.72(s,2h),4.14(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,2h),2.89(s,1h),2.82(d,j＝6.0hz,2h),1.83
–
1.78(m,2h),1.70
–
1.65(m,6h),1.46(s,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0236]
制备实施例19：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物19)
[0237]
步骤1：1-(6-溴-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(中间体
19-1)
[0238][0239]
根据中间体1-1制备方法，以6-溴-1,2,3,4-四氢异喹啉和β-羟基异戊酸分别代替2-氯-5,6,7,8-四氢-1,6-萘啶盐酸盐和乙酸，得黄色油状物(82％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ7.33
–
7.27(m,2h),7.00(d,j＝8.5hz,0.6h),6.95(d,j＝8.5hz,0.4h),5.16(s,1h),4.65(s,1h),4.53(s,1h),3.79(t,j＝6.0hz,1h),3.64(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.50(d,j＝6.5hz,2h),1.27(d,j＝2.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝312[m+h]
+
。
[0240]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，4s)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物19)
[0241][0242]
以中间体1-3和19-1为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体74％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.61(s,1h),8.18(s,1h),7.62(d,j＝12.0hz,1h),7.53
–
7.48(m,1h),7.07(dd,j＝8.5,3.5hz,1h),6.10(br,1h),4.65(s,1h),4.57(s,1h),4.13(s,1h),3.70(t,j＝6.0hz,2h),3.02
–
2.90(m,1h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.72(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝5.0hz,2h),1.87
–
1.83(m,2h),1.62
–
1.46(m,6h),1.18(d,j＝9.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0243]
制备实施例20：n-((1s，4s)-4-((2-((2-(3-羟基-3-甲基丁酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基环己基)甲磺酰胺(化合物20)
[0244][0245]
化合物19(100mg,0.23mmol)溶于3ml无水四氢呋喃中，冰浴下加入三乙胺(63ul,0.46mmol)后，逐滴加入甲磺酰氯(59mg,0.46mmol)的无水四氢呋喃溶液(1ml)超过30min,滴加完成后，反应液与室温反应1h,60℃加热反应3h。减压回收溶剂得残余物，用硅胶柱层析纯化，以dcm:ch3oh＝40:1为洗脱液，得白色固体20(60mg,52％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.14(s,1h),7.54(br,1h),7.49
–
7.35(m,2h),7.06(d,j＝8.5hz,1h),5.20
–
5.13(br,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.20
–
4.17(m,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.68(t,j＝6.0hz,1h),3.63
–
3.54(m,1h),3.01(s,3h),2.88(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝
6.0hz,1h),2.54(d,j＝6.0hz,2h),2.00
–
1.57(m,8h),1.30(d,j＝2.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝585[m+h]
+
。
[0246]
制备实施例21：n-((1s，4s)-4-((2-((2-(3-羟基-3-甲基丁酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)乙酰胺(化合物21)
[0247][0248]
化合物19(50mg,0.10mmol)溶于dmf中(2ml)，冰浴下依次加入hobt(17mg,0.12mmol)，edci(24mg,0.12mmol)，乙酸(7mg,0.12mg)和dipea(30mg,0.23mmol)。混合物于室温反应过夜，加水和乙酸乙酯萃取2-3次后，合并有机层，加饱和食盐水洗3次，无水硫酸钠干燥，减压回收溶剂得残余物，用硅胶柱层析纯化，以dcm:ch3oh＝50:1为洗脱液，得白色固体21(35mg,65％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.19
–
8.09(m,1h),7.91(d,j＝8.5hz,0.5h),7.68(d,j＝8.5hz,0.5h),7.54
–
7.43(m,2h),7.41
–
7.35(m,1h),7.10(d,j＝8.45hz,0.5h),7.06(d,j＝8.5hz,0.5h),5.61(d,j＝7.5hz,1h),5.21(d,j＝7.0hz,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.23(s,1h),4.04
–
3.93(m,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.68(t,j＝6.0hz,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.00(s,3h),1.94
–
1.75(m,6h),1.54
–
1.51(m,2h),1.31(d,j＝3.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝549[m+h]
+
。
[0249]
制备实施例22：1-(6-((4-(((1r，4r)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物22)
[0250]
步骤1：叔丁基((1r，4r)-4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨基甲酸酯(中间体22-3)
[0251][0252]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-反式环己二胺替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(92％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(d,j＝1.0hz,1h),5.08(s,2h),4.88(d,j＝7.5hz,1h),4.00
–
3.92(m,1h),3.51
–
3.45(m,1h),2.18
–
2.00(m,4h),1.40(s,9h),1.33
–
1.21(m,4h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0253]
步骤2：1-(6-((4-(((1r，4r)-4-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物22)
[0254][0255]
以中间体19-1和22-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体42％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.57(s,1h),8.16(d,j＝1.5hz,1h),7.61
–
7.55(m,1.5h),7.47(dd,j＝8.5,2.0hz,0.5h),7.09(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),6.41(d,j＝7.0hz,1h),4.66(s,1h),4.58(s,1h),4.14
–
3.99(m,1h),3.73(t,j＝6.0hz,1h),3.69(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.74(t,j＝6.0hz,1h),2.54(d,j＝9.0hz,3h),1.91
–
1.72(m,4h),1.60
–
1.44(m,2h),1.18(d,j＝8.0,6h),1.15
–
1.08(m,2h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0256]
制备实施例23：(s)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-3-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物23)
[0257]
步骤1：(s)-3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体23-3)
[0258][0259]
根据中间体1-3的制备方法，以(s)-1-boc-3-氨基哌啶替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(82％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.06(s,1h),5.29
–
4.94(m,3h),4.16
–
4.14(m,1h),3.73
–
3.32(m,4h),1.95(s,1h),1.87
–
1.81(m,1h),1.77
–
1.71(m,1h),1.69
–
1.63(m,1h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝362[m+h]
+
。
[0260]
步骤2：(s)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-3-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物23)
[0261][0262]
以中间体19-1和23-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体62％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.15(s,1h),7.55(d,j＝2.0hz,0.5h),7.50(d,j＝2.0hz,0.5h),7.41
–
7.32(m,1h),7.26(s,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.05(d,j＝8.5hz,0.5h),5.84(br,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.22(d,j＝8.5hz,1h),3.90
–
3.78(m,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.12(t,j＝6.0hz,1h),2.91(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),
2.84
–
2.82(m,2h),2.76
–
2.73(m,1h),2.53(d,j＝8.5hz,2h),1.87
–
1.64(m,4h),1.30(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0263]
制备实施例24：(r)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-3-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物24)
[0264]
步骤1：(r)-3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体24-3)
[0265][0266]
根据中间体1-3的制备方法，以(r)-1-boc-3-氨基哌啶替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(69％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.06(s,1h),5.29
–
4.94(m,3h),4.16
–
4.14(m,1h),3.73
–
3.32(m,4h),1.95(s,1h),1.87
–
1.81(m,1h),1.77
–
1.71(m,1h),1.69
–
1.63(m,1h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝362[m+h]
+
。
[0267]
步骤2：(r)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-3-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物24)
[0268][0269]
以中间体19-1和24-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体61％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.15(s,1h),7.55(d,j＝2.0hz,0.5h),7.50(d,j＝2.0hz,0.5h),7.37
–
7.33(m,1h),7.23(d,j＝6.0hz,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.05(d,j＝8.5hz,0.5h),5.78(s,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.32
–
4.16(m,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.13(d,j＝11.5hz,1h),2.91(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.85
–
2.82(m,2h),2.76
–
2.73(m,1h),2.53(d,j＝8.5hz,2h),1.94
–
1.65(m,4h),1.31(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0270]
制备实施例25：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-4-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物25)
[0271]
步骤1：4-(2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体25-3)
[0272][0273]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-4-氨基哌啶替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(80％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.05(d,j＝1.0hz,1h),5.12(s,2h),4.89(d,j＝7.5hz,1h),4.21
–
4.14(m,1h),4.10
–
3.97(m,2h),2.92(s,2h),2.10(s,1h),2.06
–
1.96(m,2h),1.46(s,9h),1.40
–
1.37(m,1h)；esi-ms:m/z＝362[m+h]
+
。
[0274]
步骤2：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-(哌啶-4-基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物25)
[0275][0276]
以中间体19-1和25-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体58％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ7.99(s,1h),7.39
–
7.34(m,2h),6.98(t,j＝9.0hz,1h),4.60(s,1h),4.55(s,1h),4.16
–
4.11(m,1h),3.68(t,j＝6.0hz,2h),2.98(d,j＝12.5hz,2h),2.76(t,j＝6.0hz,2h),2.58
–
2.52(m,4h),1.90
–
1.84(m,2h),1.46
–
1.38(m,2h),1.20(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0277]
制备实施例26：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-4-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物26)
[0278]
步骤1：4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(中间体26-3)
[0279][0280]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-4-甲基氨基甲基哌啶替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(98％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.03(s,1h),5.23(s,2h),5.14(d,j＝6.5hz,1h),4.11(s,2h),3.36(t,j＝6.5hz,2h),2.68(s,2h),1.80
–
1.73(m,1h),1.70
–
1.64(m,2h),1.44(s,9h),1.18
–
1.10(m,2h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0281]
步骤2：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-4-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物26)
[0282][0283]
以中间体19-1和26-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体57％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.07(s,1h),7.52(dd,j＝8.5,2.5hz,1h),7.47(dd,j＝6.5,2.5hz,1h),7.08(t,j＝9.0hz,1h),4.71(s,1h),4.66(s,1h),3.79(t,j＝6.0hz,2h),3.39(d,j＝7.0hz,2h),3.06
–
3.02(m,2h),2.90(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.65(d,j＝6.5hz,2h),2.55
–
2.50(m,2h),1.92
–
1.87(m,1h),1.71(d,j＝13.0hz,2h),1.30(d,j＝9.5hz,6h),1.23
–
1.15(m,2h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0284]
制备实施例27：1-(6-((4-((1s，2r)-2-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物27)
[0285]
步骤1：叔丁基((1r，2s)-2-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨基甲酸酯(中间体27-3)
[0286][0287]
根据中间体1-3的制备方法，以(1r,2s)-2-氨基环己基氨基甲酸叔丁酯替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(87％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(s,1h),5.52(s,1h),5.07(s,2h),4.33(s,1h),3.98
–
3.93(m,1h),1.99
–
1.72(m,3h),1.65
–
1.47(m,5h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0288]
步骤2：1-(6-((4-(((1s，2r)-2-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物27)
[0289][0290]
以中间体19-1和27-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体62％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.12(s,1h),7.53
–
7.35(m,3h),7.09(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),6.19(br,1h),5.29(s,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.13
–
4.08(m,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.13(q,j＝4.0hz,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.0hz,2h),1.90
–
1.85(m,1h),1.69
–
1.65
(m,3h),1.54
–
1.49(m,4h),1.30(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0291]
制备实施例28：1-(6-((4-((1r，2s)-2-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物28)
[0292]
步骤1：叔丁基((1s，2r)-2-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环己基)氨基甲酸酯(中间体28-3)
[0293][0294]
根据中间体1-3的制备方法，以(1s,2r)-2-氨基环己基氨基甲酸叔丁酯替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(75％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(s,1h),5.54(s,1h),5.07(s,2h),4.33(s,1h),3.97
–
3.94(m,1h),2.00
–
1.72(m,3h),1.65
–
1.45(m,5h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0295]
步骤2：1-(6-((4-(((1r，2s)-2-氨基环己基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物28)
[0296][0297]
以中间体19-1和28-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体69％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.12(s,1h),7.55
–
7.35(m,3h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),6.19(br,1h),5.29(s,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),4.12
–
4.09(m,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.13(q,j＝4.0hz,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.0hz,2h),1.96
–
1.81(m,1h),1.69
–
1.65(m,3h),1.59
–
1.44(m,4h),1.30(d,j＝1.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0298]
制备实施例29：(s)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-3-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物29)
[0299]
步骤1：叔丁基(r)-3-(((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸酯(中间体29-3)
[0300][0301]
根据中间体1-3的制备方法，以(r)-1-boc-3-氨甲基哌啶替代n-boc顺式环己二
胺，得白色固体(95％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(s,1h),5.14(s,2h),3.92
–
3.63(m,2h),3.45
–
3.40(m,1h),3.37
–
3.31(m,1h),2.97(s,1h),2.80
–
2.75(m,1h),1.85
–
1.80(m,2h),1.65(s,1h),1.44(s,9h),1.27
–
1.23(m,2h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0302]
步骤2：(s)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-3-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物29)
[0303][0304]
以中间体19-1和29-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体59％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.13(t,j＝1.0hz,1h),7.52
–
7.39(m,3h),7.09(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),5.50(d,j＝7.0hz,1h),4.70(s,1h),4.58(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.49
–
3.42(m,1h),3.41
–
3.36(m,1h),3.10
–
3.04(m,1h),2.99
–
2.95(m,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.62
–
2.57(m,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h),2.44
–
2.40(m,1h),1.91
–
1.79(m,2h),1.72
–
1.68(m,1h),1.53
–
1.41(m,1h),1.30(d,j＝1.0hz,6h),1.23
–
1.15(m,1h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0305]
制备实施例30：(r)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-3-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物30)
[0306]
步骤1：(s)-3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)甲基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(30-3)
[0307][0308]
根据中间体1-3的制备方法，以(s)-1-boc-3-氨甲基哌啶替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(99％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.96(s,1h),6.93
–
6.64(m,3h),3.87
–
3.72(m,2h),3.28
–
3.17(m,2h),2.73
–
2.63(m,1h),1.78(s,1h),1.72
–
1.65(m,1h),1.63
–
1.59(m,1h),1.46
–
1.24(m,11h),1.14
–
1.02(m,1h)；esi-ms:m/z＝376[m+h]
+
。
[0309]
步骤2：(r)-3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((哌啶-3-基甲基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物30)
[0310][0311]
以中间体19-1和30-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体55％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.18
–
8.10(m,1h),7.51
–
7.34(m,3h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),5.50(s,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.51
–
3.43(m,1h),3.41
–
3.36(m,1h),3.10
–
3.06(m,1h),2.97(dt,j＝12.0,4.0hz,1h),2.90(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.62
–
2.57(m,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h),2.47
–
2.36(m,1h),1.92
–
1.81(m,2h),1.71(dt,j＝13.5,4.0hz,1h),1.53
–
1.39(m,1h),1.30(d,j＝1.0hz,6h),1.25
–
1.14(m,1h)；esi-ms:m/z＝507[m+h]
+
。
[0312]
制备实施例31：1-(6-((4-((2-氨基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物31)
[0313]
步骤1：叔丁基(2-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)乙基)氨基甲酸酯(中间体31-3)
[0314][0315]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-乙二胺替代n-boc顺式环己二胺，得白色固体(99％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(s,1h),5.78(s,1h),5.20(s,2h),3.54(q,j＝6.0hz,2h),3.37(q,j＝6.0hz,2h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝322[m+h]
+
。
[0316]
步骤2：1-(6-((4-((2-氨基乙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物31)
[0317][0318]
以中间体19-1和31-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体45％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.09(t,j＝1.0hz,1h),7.50(d,j＝2.5hz,1h),7.46
–
7.43(m,1h),7.10(dd,j＝8.4,5.5hz,1h),4.71(s,1h),4.66(s,1h),3.79(t,j＝6.0hz,2h),3.57(t,j＝6.5hz,2h),2.90(t,j＝6.0hz,1h),2.87(t,j＝6.5hz,2h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),
2.65(d,j＝6.0hz,2h),1.30(d,j＝9.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝453[m+h]
+
。
[0319]
制备实施例32：1-(6-((4-((2-氨基-2-甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物32)
[0320]
步骤1：叔丁基(1-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基丙烷-2-基)氨基甲酸酯(中间体32-3)
[0321][0322]
根据中间体1-3的制备方法，以(2-氨基-叔丁基)氨基甲酸叔丁酯替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(99％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(d,j＝1.0hz,1h),5.17(s,2h),5.08(s,1h),3.66(d,j＝5.5hz,2h),1.42(s,9h),1.30(s,6h)；m/z＝350[m+h]
+
。
[0323]
步骤2：1-(6-((4-((2-氨基-2-甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物32)
[0324][0325]
以中间体19-1和32-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体45％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.15(s,1h),7.54(d,j＝2.0hz,0.5h),7.50(d,j＝2.0hz,0.5h),7.37(ddd,j＝8.5,6.5,2.0hz,1h),7.26(s,1h),7.11(d,j＝8.5hz,0.5h),7.05(d,j＝8.5hz,0.5h),5.98(d,j＝6.5hz,1h),5.27(br,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.40(dd,j＝5.0,1.5hz,2h),2.90(t,j＝6.0hz,1h),2.86(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h),1.30(s,6h),1.18(s,6h)；esi-ms:m/z＝481[m+h]
+
。
[0326]
制备实施例33：1-(6-((4-((3-氨基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物33)
[0327]
步骤1：叔丁基(3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丙基)氨基甲酸酯(中间体33-3)
[0328]
[0329]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-丙二胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(94％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.04(s,1h),5.61(s,1h),5.24(s,2h),3.53(q,j＝6.5hz,2h),3.18(q,j＝6.5hz,2h),1.79
–
1.65(m,2h),1.45(s,9h)；esi-ms:m/z＝336[m+h]
+
。
[0330]
步骤2：1-(6-((4-((3-氨基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物33)
[0331][0332]
以中间体19-1和33-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体59％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.13(s,1h),7.53
–
7.39(m,2h),7.33(d,j＝7.5hz,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),6.72(s,1h),4.70(s,1h),4.57(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.68
–
3.62(m,3h),2.89(t,j＝6.0hz,3h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝10.0hz,2h),1.77(p,j＝6.5hz,2h),1.30(s,6h)；esi-ms:m/z＝467[m+h]
+
。
[0333]
制备实施例34：1-(6-((4-((3-氨基-2,2-二甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物34)
[0334]
步骤1:叔丁基(3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2,2-二甲基丙基)氨基甲酸酯(中间体1-41)
[0335][0336]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-氨基-2,2-二甲基1,3-丙烷二胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(78％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.06(s,1h),5.12(s,1h),5.12(s,2h),3.32(d,j＝7.0hz,2h),2.88(d,j＝7.0hz,2h),1.45(s,9h),0.90(s,6h)；esi-ms:m/z＝364[m+h]
+
。
[0337]
步骤2：1-(6-((4-((3-氨基-2,2-二甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物34)
[0338][0339]
以中间体19-1和34-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体40％)。
h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.11(s,1h),7.78(s,0.5h),7.73(s,0.5h),7.60(d,j＝2.0hz,0.5h),7.55(d,j＝2.0hz,0.5h),7.42
–
7.28(m,2h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.47(dd,j＝4.5,1.5hz,2h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.68(s,2h),2.53(d,j＝10.5hz,2h),1.30(s,6h),0.97(s,6h)；esi-ms:m/z＝495[m+h]
+
。
[0340]
制备实施例35：1-(6-((4-((3-氨基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物35)
[0341]
步骤1：叔丁基(4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基丁烷-2-基)氨基甲酸酯(中间体35-3)
[0342][0343]
根据中间体1-3的制备方法，以3-n-boc-3-甲基丁烷-1,3-二胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(95％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.05(s,1h),6.37(s,1h),5.41(s,2h),3.54-3.42(m,2h),1.87-1.65(m,2h),1.48(s,9h),1.33(s,6h)；esi-ms:m/z＝364[m+h]
+
.
[0344][0345]
以中间体19-1和35-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体56％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.11(t,j＝1.0hz,1h),7.97(br,1h),7.53
–
7.46(m,1h),7.43(dd,j＝8.5,2.0hz,1h),7.40
–
7.31(br,1h),7.09(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),5.28(br,1h),4.70(s,1h),4.57(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.66(t,j＝6.0hz,1h),3.65
–
3.61(m,2h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝10.0hz,2h),1.68(t,j＝6.5hz,2h),1.30(s,6h),1.20(s,6h)；esi-ms:m/z＝495[m+h]
+
。
[0346]
制备实施例36：1-(6-((4-((4-氨基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物36)
[0347]
步骤1:叔丁基(4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丁基)氨基甲酸酯(中间体36-3)
[0348][0349]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-丁二胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(99％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.03(d,j＝1.0hz,1h),5.25(s,1h),5.13(s,1h),4.91(s,1h),3.48(q,j＝6.5hz,2h),3.19(t,j＝6.5hz,2h),1.67
–
1.61(m,2h),1.56
–
1.50(m,2h),1.44(s,9h)；esi-ms:m/z＝350[m+h]
+
。
[0350]
步骤2：1-(6-((4-((4-氨基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物36)
[0351][0352]
以中间体19-1和36-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体42％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.13(s,1h),7.49(d,j＝2.5hz,0.5h),7.46(d,j＝2.5hz,0.5h),7.43
–
7.40(m,1h),7.33(d,j＝7.5hz,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.05(d,j＝8.5hz,0.5h),5.81(br,1h),4.71(s,1h),4.58(s,1h),3.84(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.59
–
3.50(m,2h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.76(t,j＝6.5hz,2h),2.53(d,j＝9.0hz,2h),1.76
–
1.68(m,2h),1.58
–
1.51(m,2h),1.30(s,6h)；esi-ms:m/z＝481[m+h]
+
。
[0353]
制备实施例37：1-(6-((4-((5-氨基戊基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物37)
[0354]
步骤1：叔丁基(5-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)戊基)氨基甲酸酯(中间体37-3)
[0355][0356]
根据中间体1-3的制备方法，以n-boc-戊二胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固
体(99％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.01(d,j＝1.0hz,1h),5.30(br,2h),5.08(s,1h),3.50
–
3.36(m,2h),3.13(q,j＝6.5hz,2h),1.65
–
1.57(m,2h),1.55
–
1.49(m,2h),1.42(s,9h),1.40
–
1.33(m,2h)；esi-ms:m/z＝364[m+h]
+
。
[0357]
步骤2：1-(6-((4-((5-氨基戊基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物37)
[0358][0359]
以中间体19-1和37-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体48％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.13(s,1h),7.54(s,1h),7.49(d,j＝2.0hz,0.5h),7.44(d,j＝2.0hz,0.5h),7.44
–
7.38(m,1h),7.09(d,j＝8.5hz,0.5h),7.04(d,j＝8.5hz,0.5h),5.23(br,1h),4.70(s,1h),4.57(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.52(q,j＝6.5hz,2h),2.88(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.70(t,j＝6.5hz,2h),2.53(d,j＝9.5hz,2h),1.67(p,j＝7.0hz,2h),1.48(q,j＝7.0hz,2h),1.41(q,j＝8.5hz,2h),1.30(s,6h)；esi-ms:m/z＝495[m+h]
+
。
[0360]
制备实施例38：1-(6-((4-((2-(1-氨基环丙基)乙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物38)
[0361]
步骤1：叔丁基(1-(2-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)乙基)环丙基)氨基甲酸酯(中间体38-3)
[0362][0363]
根据中间体1-3的制备方法，以n-[1-(2-氨基乙基)环丙基]氨基甲酸叔丁酯替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(98％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.08(d,j＝1.0hz,1h),5.32(br,2h),3.62(td,j＝6.5,5.0hz,2h),1.80(t,j＝6.5hz,2h),1.43(s,9h),0.51
–
0.46(m,2h),0.38
–
0.35(m,2h)；esi-ms:m/z＝362[m+h]
+
。
[0364]
步骤2：1-(6-((4-((2-(1-氨基环丙基)乙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁烷-1-酮(化合物38)
[0365][0366]
以中间体19-1和38-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体50％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.15(s,1h),7.50(s,1h),7.49(d,j＝2.0hz,0.5h),7.44(d,j＝2.0hz,0.5h),7.40
–
7.33(m,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.06(d,j＝8.5hz,0.5h),5.23(br,1h),4.70(s,1h),4.57(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.62(td,j＝6.5,5.0hz,2h),2.80(t,j＝6.0hz,1h),2.75(t,j＝6.0hz,1h),2.54(d,j＝9.5hz,2h),1.80(t,j＝6.5hz,2h),1.29(s,6h),0.51
–
0.46(m,2h),0.38
–
0.35(m,2h)；esi-ms:m/z＝493[m+h]
+
。
[0367]
制备实施例39：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((3-(甲基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物39)
[0368]
步骤1：叔丁基(3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丙基)(甲基)氨基甲酸酯(中间体39-3)
[0369][0370]
据中间体1-3的制备方法，以n-(3-氨基丙基)-n-甲基氨基甲酸叔丁酯替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(98％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.96(s,1h),6.74(br,3h),3.73
–
3.68(m,2h),2.56
–
2.53(m,2h),2.24(s,3h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.42(s,9h)；esi-ms:m/z＝350[m+h]
+
.
[0371]
步骤2：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((3-(甲基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁酮(化合物39)
[0372][0373]
以中间体19-1和39-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体69％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.54(s,1h),8.15(s,1h),7.76(s,1h),7.65(s,1h),7.51(d,j＝
8.5hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,4.5hz,1h),4.90(s,1h),4.64(s,1h),4.56(s,1h),3.73
–
3.68(m,2h),3.50(t,j＝6.0hz,2h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.73(t,j＝6.0hz,1h),2.56
–
2.53(m,4h),2.24(s,3h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.18(d,j＝9.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝481[m+h]
+
。
[0374]
制备实施例40：3-羟基-1-(6-((4-((3-(异丙基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁-1-酮(化合物40)
[0375]
步骤1：叔丁基(3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丙基)(异丙基)氨基甲酸酯(中间体40-3)
[0376][0377]
据中间体1-3的制备方法，以n-(3-氨基丙基)-n-(丙-2-基)氨基甲酸叔丁基酯替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(90％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.28(s,1h),5.12(s,2h),5.08(s,1h),3.73
–
3.68(m,2h),3.55
–
3.51(m,1h),2.56
–
2.53(m,2h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.42(s,9h),1.23(d,j＝7.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝378[m+h]
+
。
[0378]
步骤2：3-羟基-1-(6-((4-((3-(异丙基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁烷-1-酮(化合物40)
[0379][0380]
以中间体19-1和40-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体55％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.54(s,1h),8.15(s,1h),7.76(s,1h),7.65(s,1h),7.51(d,j＝8.5hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,4.5hz,1h),4.90(s,1h),4.64(s,1h),4.56(s,1h),3.73
–
3.68(m,2h),3.55
–
3.51(m,1h),3.50(t,j＝6.0hz,2h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.73(t,j＝6.0hz,1h),2.56
–
2.53(m,4h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.23(d,j＝7.5hz,6h)，1.18(d,j＝9.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝509[m+h]
+
。
[0381]
制备实施例41：3-羟基-1-(6-((4-((3-(羟基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁-1-酮(化合物41)
[0382]
步骤1：叔丁基(3-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丙基)(羟基)氨基甲酸酯(中间体41-3)
[0383][0384]
据中间体1-3的制备方法，以叔丁基(3-氨基丙基)(羟基)氨基甲酸酯替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(90％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.25(s,1h),5.12(s,
2h),5.10(s,1h),3.75
–
3.66(m,2h),2.56
–
2.53(m,2h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.43(s,9h)；esi-ms:m/z＝352[m+h]
+
。
[0385]
步骤2：3-羟基-1-(6-((4-((3-(羟基氨基)丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁-1-酮(化合物41)
[0386][0387]
以中间体19-1和41-3为原料，根据实施例1步骤4的方法制备得到白色固体39％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.54(s,1h),8.15(s,1h),7.76(s,1h),7.65(s,1h),7.51(d,j＝8.5hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,4.5hz,1h),4.90(s,1h),4.64(s,1h),4.56(s,1h),3.75
–
3.66(m,2h),3.50(t,j＝6.0hz,2h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.73(t,j＝6.0hz,1h),2.56
–
2.53(m,4h),1.71(p,j＝6.0hz,2h),1.18(d,j＝9.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝483[m+h]
+
。
[0388]
制备实施例42：n-(3-((2-((2-(3-羟基-3-甲基丁酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)丙基)乙酰胺(化合物42)
[0389][0390]
根据实施例21，用化合物33替代化合物19，得白色固体(59％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.05(s,1h),7.51(d,j＝2.5hz,1h),7.44
–
7.41(m,1h),7.08(dd,j＝8.5,3.5hz,1h),4.67(s,2h),3.80(d,j＝6.0hz,1h),3.74(t,j＝6.0hz,1h),3.54(t,j＝6.5hz,2h),3.23(t,j＝6.5hz,2h),2.90(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.59(d,j＝8.0hz,2h),1.92(d,j＝2.5hz,3h),1.78(t,j＝6.5hz,2h),1.29(d,j＝5.0hz,6h)；esi-ms:m/z＝509[m+h]
+
。
[0391]
制备实施例43：n-(3-((2-((2-(3-羟基-3-甲基丁酰基)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基丙基)甲磺酰胺(化合物43)
[0392][0393]
根据实施例20，用化合物33替代化合物19，得白色固体(63％)1h nmr(500mhz,
methanol-d4)δ8.05(s,1h),7.47(d,j＝2.5hz,0.5h),7.45(d,j＝2.5hz,0.5h),7.41(dd,j＝8.5,2.5hz,0.5h),7.39(dd,j＝8.5,2.5hz,0.5h),7.08(d,j＝8.5hz,0.5h),7.06(d,j＝8.5hz,0.5h),4.65(s,1h),4.59(s,1h),3.78(t,j＝6.0hz,1h),3.69(t,j＝6.0hz,1h),3.62(t,j＝6.5hz,2h),3.10(t,j＝6.5hz,2h),2.89(d,j＝6.0hz,1h),2.87(d,j＝2.0hz,3h),2.83(t,j＝6.0hz,1h),2.54(d,j＝9.5hz,2h),1.89
–
1.77(m,2h),1.27(d,j＝2.5hz,6h)；esi-ms:m/z＝545[m+h]
+
。
[0394]
制备实施例44：n-(4-((2-((2-(3-羟基-3-甲基丁酰)-1,2,3,4-四氢异喹啉-6-基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基丁烷-2-基)乙酰胺(化合物44)
[0395][0396]
根据实施例21，用化合物35替代化合物19，得白色固体(70％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),8.15(s,1h),7.60(dd,j＝7.0,3.0hz,1h),7.51(dd,j＝5.0,2.0hz,1h),7.36(d,j＝3.0hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,5.0hz,1h),6.92(s,1h),4.88(d,j＝8.5hz,1h),4.65(s,1h),4.56(s,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.45(q,j＝7.0hz,2h),2.81(t,j＝6.0hz,1h),2.72(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝7.0hz,2h),1.98
–
1.93(m,2h),1.75(d,j＝2.0hz,3h),1.25(d,j＝2.0hz,6h),1.17(d,j＝1.2hz,6h)；esi-ms:m/z＝537[m+h]
+
。
[0397]
制备实施例45：3-羟基-1-(6-((4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁烷-1-酮(化合物45)
[0398]
步骤1：1-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基丙烷-2-醇(中间体45-3)
[0399][0400]
据中间体1-3的制备方法，以1-氨基-2-甲基-2-丙醇替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(90％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.01(s,1h),6.82(s,2h),5.92(t,j＝5.5hz,1h),4.82(s,1h),3.34(s,2h),1.10(s,6h)；esi-ms:m/z＝251[m+h]
+
。
[0401]
步骤2：3-羟基-1-(6-((4-((2-羟基-2-甲基丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁烷-1-酮化合物45)
[0402][0403]
氮气保护下，向中间体19-1(0.67mmol),中间体45-3(0.80mmol),三(二亚苄基茚丙酮)二钯(97mg,0.17mmol),4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(61mg,0.067mmol),碳酸铯(436mg,1.34mmol)的混合物加入无水二氧六环中(8ml),110℃过夜反应，抽滤，减压回收溶剂得残留物，用硅胶板柱层析纯化，以dcm:ch3oh＝30:1为洗脱液，得白色固体(66％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.16(s,1h),7.47(d,j＝2.5hz,0.5h),7.44(d,j＝2.5hz,0.5h),7.40(s,1h),7.33(dt,j＝8.5,2.5hz,1h),7.10(d,j＝8.5hz,0.5h),7.05(d,j＝8.5hz,0.5h),5.66(d,j＝6.0hz,1h),5.28(d,j＝13.5hz,1h),4.70(s,1h),4.58(s,1h),3.83(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),3.56(dd,j＝5.5,2.0hz,2h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h),1.30(s,6h),1.27(s,6h)；esi-ms:m/z＝482[m+h]
+
。
[0404]
制备实施例46：3-羟基-1-(6-((4-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁烷-1-酮(化合物46)
[0405]
步骤1：4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-2-甲基丁烷-2-醇(中间体46-3)
[0406][0407]
据中间体1-3的制备方法，以4-氨基-2-甲基-丁-2-醇替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(95％)。1h nmr(500mhz,chloroform-d)δ8.02(d,j＝1.0hz,1h),6.22(s,1h),5.09(s,2h),3.60(td,j＝6.5,5.0hz,2h),1.78(t,j＝6.5hz,2h),1.30(s,6h)；esi-ms:m/z＝265[m+h]
+
。
[0408]
步骤2：3-羟基-1-(6-((4-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁烷-1-酮(化合物46)
[0409][0410]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体46-3替代中间体45-3，得白色固体
(57％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.03(s,1h),7.56
–
7.41(m,2h),7.17
–
7.02(m,1h),4.67(s,2h),3.80(d,j＝6.0hz,1h),3.78
–
3.73(m,1h),3.64(t,j＝7.0hz,2h),2.91(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.61(dd,j＝9.5,2.5hz,2h),1.78(t,j＝7.0hz,2h),1.29(d,j＝5.5hz,6h),1.25(d,j＝1.2hz,6h)；esi-ms:m/z＝496[m+h]
+
。
[0411]
制备实施例47：1-(6-((4-((3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙烷-1-酮(化合物47)
[0412][0413]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体46-3和中间体14-1分别替代中间体45-3和中间体19-1，得白色固体(68％)。1h nmr(500mhz,methanol-d4)δ8.06(s,1h),7.56
–
7.51(m,1h),7.49(d,j＝2.0hz,1h),7.11(d,j＝8.5hz,0.5h),7.09(d,j＝8.5hz,0.5h),4.65(s,1h),4.63(s,1h),3.76(t,j＝6.0hz,1h),3.73(t,j＝6.0hz,1h),3.64(t,j＝7.5hz,2h),2.92(t,j＝6.0hz,1h),2.84(t,j＝6.0hz,1h),2.18(d,j＝3.5hz,3h),1.79(t,j＝7.5hz,2h),1.25(s,6h)；esi-ms:m/z＝438[m+h]
+
。
[0414]
制备实施例48：(s)-1-(6-((4-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲丁-1-酮(化合物48)
[0415]
步骤1：(s)-4-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)-3-氟-2-甲基丁-2-醇(中间体48-3)
[0416][0417]
据中间体1-3的制备方法，以(s)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁烷-2-醇替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(97％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.01(s,1h),6.82(s,2h),5.92(t,j＝5.5hz,1h),4.03
–
4.18(m,1h),2.93
–
2.71(m,2h),1.09
–
1.07(m,6h)；esi-ms:m/z＝283[m+h]
+
。
[0418]
步骤2：(s)-1-(6-((4-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲丁-1-酮(化合物48)
[0419][0420]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体48-3替代中间体45-3，得白色固体
(77％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),8.15(s,1h),7.60(dd,j＝7.0,3.0hz,1h),7.51(dd,j＝5.0,2.0hz,1h),7.36(d,j＝3.0hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,5.0hz,1h),6.92(s,1h),4.88(d,j＝8.5hz,1h),4.65(s,1h),4.18-4.03(m,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),2.93
–
2.73(m,3h),2.72(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝7.0hz,2h),1.25(d,j＝1.2hz,6h),1.09
–
1.07(m,6h)；esi-ms:m/z＝514[m+h]
+
。
[0421]
制备实施例49：(s)-1-(6-((4-((2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)乙基-1-酮(化合物49)
[0422][0423]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体48-3和14-1分别替代中间体45-3和中间体19-1，得白色固体(70％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),8.15(s,1h),7.60(dd,j＝7.0,3.0hz,1h),7.51(dd,j＝5.0,2.0hz,1h),7.36(d,j＝3.0hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,5.0hz,1h),6.92(s,1h),4.88(d,j＝8.5hz,1h),4.65(s,1h),4.18-4.03(m,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),2.93
–
2.73(m,3h),2.72(t,j＝6.0hz,1h),2.07(s,3h),1.09
–
1.07(m,6h)；esi-ms:m/z＝456[m+h]
+
。
[0424]
制备实施例50：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((1-甲基环丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁-1-酮(化合物50)
[0425]
步骤1：n
4-(1-甲基环丙基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2,4-二胺(中间体50-3)
[0426][0427]
据中间体1-3的制备方法，以1-甲基环丙胺替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(97％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.10(s,1h),6.88(s,2h),6.05(s,1h),1.33(s,3h),0.89
–
0.72(m,2h),0.47
–
0.43(m,2h)；esi-ms:m/z＝233[m+h]
+
。
[0428]
步骤2：3-羟基-3-甲基-1-(6-((4-((1-甲基环丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)丁-1-酮(化合物50)
[0429][0430]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体50-3替代中间体45-3，得白色固体(68％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),8.10(s,1h),7.60(dd,j＝7.0,3.0hz,1h),7.51(dd,j＝5.0,2.0hz,1h),7.36(d,j＝3.0hz,1h),7.07(dd,j＝8.5,5.0hz,1h),4.88(s,1h),4.65(s,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),
2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h)，1.33(s,3h),1.25(d,j＝1.2hz,6h),0.89
–
0.72(m,2h),0.47
–
0.43(m,2h)；esi-ms:m/z＝464[m+h]
+
。
[0431]
制备实施例51：3-羟基-1-(6-((4-((1-羟基环丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁-1-酮(化合物51)
[0432]
步骤1：1-((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氨基)环丙烷-1-醇(中间体51-3)
[0433][0434]
据中间体1-3的制备方法，以1-氨基环丙醇替代n-boc-顺式环己二胺，得白色固体(97％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.10(s,1h),6.88(s,2h),6.05(s,1h),6.02(s,1h),0.89
–
0.72(m,2h),0.47
–
0.43(m,2h)；esi-ms:m/z＝235[m+h]
+
。
[0435]
步骤2：3-羟基-1-(6-((4-((1-羟基环丙基)氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-甲基丁-1-酮(化合物51)
[0436][0437]
根据实施例45步骤2的制备方法，以中间体51-3替代中间体45-3，得白色固体(50％)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ9.52(s,1h),8.10(s,1h),7.60(dd,j＝7.0,3.0hz,1h),7.51(d,j＝7.0hz,1h),7.36(d,j＝3.0hz,1h),6.02(s,1h),4.88(s,1h),4.65(s,1h),3.71(t,j＝6.0hz,1h),3.67(t,j＝6.0hz,1h),2.89(t,j＝6.0hz,1h),2.85(t,j＝6.0hz,1h),2.53(d,j＝9.5hz,2h)，1.25(d,j＝1.2hz,6h).0.89
–
0.72(m,2h),0.47
–
0.43(m,2h)；esi-ms:m/z＝466[m+h]
+
。
[0438]
制备实施例52：1-(6-((4-((1-氨基环丙基)甲氧基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-3,4-二氢异喹啉-2(1h)-基)-3-羟基-3-甲基丁-1-酮(化合物52)
[0439]
步骤1：叔丁基(1-(((2-氨基-5-(三氟甲基)嘧啶-4-基)氧基)甲基)环丙基)氨基甲酸酯(中间体52-3)
[0440][0441]
双(三甲基硅烷基)氨基钾(3.5ml,3.35mmol)溶于无水thf(5ml)中，冰浴下逐滴加入叔丁基(1-(羟甲基)环丙基)氨基甲酸酯(343mg,1.83mmol)的thf溶液(1ml)，冰浴反应1h后，加入1-2(300mg,1.52mmol)，混合物于室温反应过夜。减压回收溶剂得残余物，用硅胶柱层析纯化，以dcm:ea＝2:1为洗脱液，得白色固体(318mg,60％)。1h nmr(500mhz,
993)，flt3活性检测试剂盒kinease
tm
tk，购自cisbio公司；人源重组flt3-d835y，购自eurofins公司，融合gst的flt3蛋白片断(含有d835y突变)(aa564-end)，flt3-d835y活性检测试剂盒kinease
tm
tk，购自cisbio公司；人源重组chk1，购自sino biological公司，融合gst的chk1蛋白片断(aa1-476)。
[0455]
样品处理：dmso溶解，低温保存，dmso在最终体系中的浓度控制在不影响检测活性的范围之内。
[0456]
实验步骤：flt3，flt3-d835y和底物(特异性生物素标记的多肽tk substrate)分别用htrf激酶缓冲溶液(1.25x kinase buffer、6.25mm mgcl2、1.25mm mncl2、1.25mm dtt)稀释，chk1和底物用htrf激酶缓冲溶液(1x kinase buffer,5mm mgcl2,1mm dtt)稀释。将4μl酶、4μl底物和2μl不同浓度的待测化合物分别加入384反应板中(proxiplatetm-384plus,perkinelmer)，具体反应体系为flt3：2％ dmso、0.5ng/系为etm-3、1 5ng/系为，2 5ng/系；flt3-d835y：2％ dmso、0.4ng/μl flt3-d835y、1 4ng/μl、1 4ng/μ；chk1:2％ dmso，0.075ng/flt3-d，1 075ng/，50 7m atp。室温孵育1个小时后，加入抗体进行检测。同时设以dmso替代待测化合物的溶剂对照组和空白对照组，每个样品每个浓度设3个复孔。初筛选择单一浓度条件下，例如10选择，对样品的活性进行测试。对于在一定条件下表现出活性的样品，例如抑制率％inhibition大于50，测试活性剂量依赖关系，即ic
50
值，通过样品活性对样品浓度进行非线性拟和得到，计算所用软件为graphpad prism 8，拟合所使用的模型为sigmoidal dose-response(varible slope)，对于大多数抑制剂筛选模型，将拟合曲线底部和顶部设定为0和100。
[0457]
表1本发明化合物对flt3、flt3-d835y、chk1激酶的抑制活性
[0458]
[0459]
[0460][0461]
ic
50
:半数抑制浓度
[0462]
α：ic
50
《20nμ；β:20nμ《ιc
50
《100nμ；c:100nμ《ιc
50
《1000nμ；d:
[0463]
ιc
50
》1000nμ
[0464]
表1的结果表明大部分化合物都表现出良好的flt3及chk1激酶抑制活性，说明这类化合物具有治疗flt3、chk1、flt3/chk1相关疾病的潜力。
[0465]
实施例55.细胞增殖的抑制活性测试
[0466]
细胞株：mv-4-11(人急性髓性单核细胞白血病，表达flt3-itd纯合突变)，molm-13(人急性髓性单核细胞白血病，flt3-itd杂合突变)，baf3-flt3-itd(人急性髓性单核细胞工程细胞系，表达flt3-itd纯合突变)。
[0467]
实验步骤：mts法测定待测化合物对mv-4-11以及其他细胞株的抗增殖活性(ic
50
)：将处于对数生长期的细胞用胰酶消化，计数，以1
×
104细胞/孔的密度接种在96孔板中，每孔100每孔，置于含5％ co2的37℃培养箱中过夜培养，每一待测化合物设六个浓度梯度，每一浓度设三组复孔，加入后，培养72h，加入20μ0mts。37℃下孵育2h后，用spectramax 340酶标仪测490nm(l1)下的光吸收值，参考波长690nm(l2)，将(l1-l2)值对抑制剂的不同浓度作图，用graphpad prism 5软件计算化合物的ic
50
(抑制率＝(对照组od值-给药组od值)/对照组od值*100％)。
[0468]
表2本发明化合物对急性髓细胞白血病细胞mv-4-11的抑制活性
[0469]
化合物编号mv4-11化合物编号mv4-111a2a3b4a5a6a7a8a9a10b11a12a
13a14a15a16a17a18a19a20a21a24a32b33a34b35a36a37b38a39a41a42a43a46a47a48a49a51a52a53a54a55a56a57a58a59a60a61a62a63a64a65a66acct245737c
[0470]
ic
50
:半数抑制浓度
[0471]
α：ic
50
《10nμ；β:10nμ《ιc
50
《100nμ；c:100nμ《ιc
50
《1000nμ；d:ιc
50
》1000nμ
[0472]
cct245737：
[0473]
表3本发明化合物对急性髓细胞白血病细胞molm-13的抑制活性
[0474]
化合物编号molm-13化合物编号molm-131b2b3b4a5a6a7a8a9a10b11a12a13a14a
15a16a17a18a19a20b21b24a33b35b36b37b38a53a54a55a56a57a58a59a60a61a62a63a64a65a66acct245737c
[0475]
ic
50
:半数抑制浓度
[0476]
α：ic
50
《10nμ；β:10nμ《ιc
50
《100nμ；c:100nμ《ιc
50
《1000nμ；d:ιc
50
》1000nμ
[0477]
表4本发明化合物对急性髓细胞白血病细胞baf3-flt3-itd的抑制活性
[0478]
化合物编号baf3-flt3-itd化合物编号baf3-flt3-itd4a5a6b7a8a9a10b11a12b13a14a15a16a17a18a19a20a21b24a33b35a36a37b38a53c54a55a56a57a58a59a60a61a62a63a64a65a66acct245737c
ꢀꢀ
[0479]
ic
50
:半数抑制浓度
[0480]
α：ic
50
《10nμ；β:10nμ《ιc
50
《100nμ；c:100nμ《ιc
50
《1000nμ；d:ιc
50
》1000nμ
[0481]
上述表2、3、4表明，本发明的化合物对mv-4-11，molm-13和baf3-flt3-itd细胞增殖具有较好的抑制活性。
[0482]
表5本发明优选化合物19对其他细胞株的抑制活性
[0483]
cell linesic
50
(nm)z-138114.55jeko-1260.03mm.1s1096.67rec-13424
[0484]
结果表明，本发明优选化合物19对z-138和jeko-1细胞系具有优异的抗增殖活性。
[0485]
体内抗肿瘤活性测试
[0486]
实施例56.mv-4-11移植瘤模型
[0487]
实验方法：nu/nu小鼠皮下注射人mv-4-11细胞，细胞接种量为5
×
106/只，待肿瘤长至100-300mm3后，依据动物体重和肿瘤大小，将动物按体重分为将动物随机分成0.5％ cmc-na溶媒对照组，阿糖胞苷(arac)对照组和给药组，每组6只，开始进行每日1mg/kg，3mg/kg化合物19的治疗，对照组每日皮下注射阿糖胞苷(20mg/kg)，阴性对照组则给等量溶媒持续22天，实验过程中，每周测量2次肿瘤体积同时称量小鼠体重。实验结果如图1所示
[0488]
从图1可以看出，发明提供的化合物19对人急性髓性白血病mv-4-11有显著抑制肿瘤生长作用。

技术特征：
1.一种化合物，其特征在于，具有通式(i)所示的结构：或其光学异构体或其药学上可接受的盐；其中：x选自nh、o；a是式ia、式ib或式ic所示的基团；其中代表取代基连接处；y选自n、cr
x
；r
x
选自h、卤素、ch3、cf3；m、n独立地选自0、1、2或3；o选自0、1、2、3、4或5；r1选自-l-nr
a
r
b
、-l-r8、l为化学键、c
1-8
的烷基、c
3-10
的环烷基，所述烷基、环烷基可独立地任选被0、1、2、3个r
10
取代，被多个r
10
取代时，多个r
10
相互独立可以相同也可以不相同；p、q独立地选自0、1、2、3、4、5、6、7、8；r
a
、r
b
独立地选自氢、氘、羟基、c
1-4
的烷基、环丙基、环丁基、-c(＝o)-(c
1-3
的烷基)、-cho、-s(＝o)
2-(c
1-3
的烷基)；w为酰基、磺酰基、亚砜基或酯基；r2选自c
1-5
的烷基、c
3-8
的环烷基、c
1-5
的烷氧基，所述烷基、环烷基、烷氧基可独立地被0、1或2个r
11
取代，被多个r
11
取代时，多个r
11
相互独立可以相同也可以不相同；r3、r4、r5、r6独立地选自氢、羟基、卤素、c
1-3
的烷基、或r3和r4，r5和r6分别独立地形成c
3-5
的环烷基或杂环烷基；r7为氢、卤素、羟基、甲基、甲氧基；r8选自氢、羟基、氰基、卤素、c
1-3
的烷基、c
1-3
的卤代烷烃；当r1选自-l-r8，且o为0，l为环丙基时，r8不为氢；r9选自氢、c
1-3
烷基、-c(＝o)-(c
1-3
的烷基)、-cho、s(＝o)
2-(c
1-3
的烷基)；r
10
为氢、氘、卤素、羟基、氰基、硝基、c
1-3
的烷氧基；或者取代在同一个碳原子上的两个r
10
构成3-6元环；
r
11
为氢、羟基、卤素、硝基、氰基、c
1-4
的烷基、c
1-3
的烷氧基、c
3-6
的环烷基。2.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，其中ia、ib、ic中的结构选自以下任意结构：3.如权利要求1所述的化合物，其特征在于，具有通式(ii)所示的结构：所述l、r
a
、r
b
、w、r2定义同权1。4.如权利要求3所述的化合物，其特征在于，所述l为c
4-8
的环烷基；所述r
a
、r
b
各自独立的选自氢、氘、-c(＝0)-(c
1-3
的烷基)、-cho、s(＝0)
2-(c
1-3
的烷基)；w为-c(o)-；r2选自c
1-5
的烷基，该烷基可进一步被羟基取代。5.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于，选自下列化合物：
及光学异构体或药学上可接受的盐。6.如权利要求1的化合物，其特征在于，其中药学上可接受的盐包括通式(i)化合物与下列酸形成的酸加成盐：甲酸、乙酸、丙酸、丙酮酸、羟乙酸、乙二酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、扁桃酸、枸橼酸、柠檬酸、三氟乙酸、富马酸、草酸、苹果酸、l-苹果酸、d-苹果酸、乳酸、樟脑磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、水杨酸、苯甲酸、酒石酸、l-酒石酸、d-酒石酸、草酸、琥珀酸、马来酸、抗坏血酸、氨基酸、盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、氢碘酸或高氯酸。7.一种权利要求1-6中任意一项所述的化合物的制备方法，所述制备方法的反应路线如下式所示：
其中，z＝br、cl；b环选自：中任意一种；r1、r2、r3、r4、r5、r6、r7、x、y、m、n、o的定义如权利要求1所述；r1’
为r1或r1的boc保护前体；所述制备方法包括以下步骤：(1)将酸类化合物溶于dmf中，0℃下加入hobt、edci、化合物1和dipea，20℃～50℃下进行反应，反应完成，后处理得化合物2；(2)将化合物2，化合物3溶于反应溶剂中，惰性气体保护下，加入pd2(dba)3，xant-phos和cs2co3，100℃～120℃反应，反应完成后处理得化合物i或化合物i的boc保护前体，其中boc保护前体进一步用三氟乙酸脱除boc基团得化合物i。8.一种制备权利要求1-6中任意所述化合物的关键中间体，其特征在于，所述中间体选自以下任意结构：
9.一种药物组合物，其特征在于，包括权利要求1-6中任一项所述的化合物一种或多种。10.一种药物制剂，其特征在于，包括权利要求1-6中任一项所述的化合物一种或多种。11.根据权利要求10所述的药物制剂，其特征在于，所述制剂为片剂、胶囊、粉末、颗粒、软膏剂、溶液、混悬液、注射剂、吸入剂、凝胶、微球或气雾剂。12.一种权利要求1-6任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备用于预防或治疗与flt3和/或chk1有关的临床疾病的药物的应用。13.一种权利要求1-6任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐在制备抗肿瘤药物或免疫性疾病药物中的应用。14.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述肿瘤为膀胱癌、乳腺癌、结肠癌、肾癌、表皮癌，肝癌、肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌或皮肤癌；淋巴谱系造血肿瘤如急性淋巴细胞性白血病、b-细胞淋巴瘤、t-细胞淋巴瘤、何杰金氏淋巴瘤、非何杰金氏淋巴瘤、毛细胞淋巴瘤、burkett氏淋巴瘤、骨髓谱系造血肿瘤、急性与慢性髓性白血病、急性与慢性粒细胞白血病、脊髓发育不良综合征、前髓细胞性白血病、甲状腺滤泡癌、间质来源肿瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、中枢或外周神经系统肿瘤、星形细胞瘤、成神经细胞瘤、神经胶质瘤、神经鞘瘤、黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎癌、骨肉瘤、着色性干皮病、角质黄色瘤、卡波西肉瘤。15.根据权利要求13所述的应用，其特征在于，所述免疫性疾病选自关节炎、狼疮、炎性肠病、类风湿性关节炎、银屑病性关节炎、骨关节炎、斯蒂尔病、青少年关节炎、糖尿病、重症
肌无力症、桥本甲状腺炎、奥德甲状腺炎、格雷夫斯病、类风湿性关节炎综合征、多发性硬化症、传染性神经元炎、急性传播性脑脊髓炎、阿狄森病、再生障碍性贫血、自身免疫性肝炎、视神经炎、银屑病、移植物抗宿主病、移植、输血过敏反应、变态反应、i型超敏反应、过敏性结膜炎、过敏性鼻炎、特应性皮炎。16.根据权利要求14所述的应用，其特征在于，其中所述化合物是单独用或与一种或多种其他治疗剂联合使用。17.根据权利要求16所述的应用，其特征在于，所述其他治疗剂选自idh1抑制剂、idh2抑制剂、bcl-2抑制剂、低甲基化剂、抗代谢剂。

技术总结
发明公开了一种式(I)所示的化合物、其制备方法及医药用途，包括其光学异构体及药学上可接受的盐。本发明化合物具有FLT3和CHK1抑制活性，对多种白血病细胞株有增值抑制活性，且对AML多种突变如近膜结构域的内部串联重复突变和激酶结构域中活化环的D835点突变有效，可以克服临床上点突变带来的耐药，可在制备抗肿瘤药物中的应用。瘤药物中的应用。瘤药物中的应用。


技术研发人员：刘滔 李佳 周宇波 李学梅 王培培 王畅 许冉 胡小蓓 盛丽
受保护的技术使用者：中国科学院上海药物研究所
技术研发日：2023.03.14
技术公布日：2023/9/20