一种降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法与流程

1.本发明涉及天然产物领域，具体地，本发明提供了一种降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法。


背景技术：

2.糖类或糖醇类，在自然界中广泛存在，因其具有令人愉悦的甜味而备受人们的喜爱。近年来，国内外的众多研究表明糖类或糖醇类具有保存生物活力的特殊功能，可以作为生物活性物质的稳定和保护剂，在食品、医药、分子生物化学等领域均显示出广阔的应用前景。现有的糖类或糖醇类制备工艺主要是以获得食品级原料为目标，所得的产品大多纯度较低(《98％)，内毒素含量超标，无法满足药用注射剂产品对于成分纯度以及内毒素含量的严格要求，因此不适合作为药用注射剂使用。内毒素又称之为“热原”，其化学成分有磷脂多糖-蛋白质复合物。可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素非常耐热。在100℃的高温下加热1小时也不会被破坏，只有在160℃的温度下加热2到4个小时，或用强碱、强酸或强氧化剂加温煮沸30分钟才能破坏它的生物活性。目前对于降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法鲜有报道，而常规的糖类或糖醇类生产工艺流程中没有涉及除菌、除热原的步骤，无法保证最终产品的无菌及细菌内毒素含量处于适合作为药用注射剂原料的范畴。
3.综上所述，本领域需要开发一种普适性的能够降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的是提供一种能够生产药用注射剂原料的糖类或糖醇类药物辅料的生产方法。
5.本发明的第一方面，提供了一种降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法，其特征在于：
6.(1)将食品级糖类或糖醇类药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至4.5-7.5，形成第一溶液；
7.(2)在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至20-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
8.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为40％-80％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料；
9.较佳地，所得的糖类或糖醇类药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，糖类或糖醇类药物辅料≥99％。
10.其中，所述的结晶溶剂选自下组：去离子水、乙醇，或其组合。
11.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，所述的结晶溶剂为去离子水。
12.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，所述的结晶溶剂为去离子水和乙醇的混合溶剂。
13.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，所述的结晶溶剂为去离子水和乙醇的混合溶剂，且去离子水：乙醇＝5-7:3-5(v/v)。
14.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干；较佳地，在40-60℃下对于所得到的过滤结晶进行烘干。
15.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在20-35℃下进行。
16.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph＝6-7下进行。
17.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
18.在另一优选例中，所述的糖类或糖醇类药物辅料选自下组：海藻糖、乳糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇，或其组合。
19.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，在溶液澄清后用酸调节ph为4.5
–
7。
20.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，所用的酸选自下组：盐酸、醋酸、柠檬酸，或其组合。
21.在另一优选例中，所述的步骤(1)中，所用的酸为盐酸。
22.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
23.(1)将食品级糖类或糖醇类药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至4.5-7.5，形成第一溶液；
24.(2)在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.5-1％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-70℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
25.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为50％-60％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料。
26.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
27.在另一优选例中，所述的方法还包括：将所述纯化的糖类或糖醇类药物辅料用无菌去离子水进行重结晶。
28.在另一优选例中，所得到的最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，糖类或糖醇类药物辅料≥99％。
29.本发明的第二方面，提供了一种如本发明第一方面所述的方法制备的纯化糖类或糖醇类药物辅料。
30.本发明的第三方面，提供了一种糖类或糖醇类药物辅料注射液，所述的注射液包括：如本发明第二方面所述的纯化的糖类或糖醇类药物辅料，和药学上可接受的载体。
31.在另一优选例中，所述的糖类或糖醇类药物辅料为海藻糖、乳糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇中的一种，或其组合。
32.在另一优选例中，所述的药学上可接受的载体为去离子水。
33.应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在
此不再一一累述。
附图说明
34.图1、三个批次海藻糖x粉末衍射图；
35.图2、海藻糖红外光谱图；
36.图3、海藻糖溶剂残留检测结果；
37.图4、乳糖激光粒度仪测试图；
38.图5、乳糖x粉末衍射图；
39.图6、乳糖dsc差示扫描显热法测试图；
40.图7、蔗糖红外光谱图。
具体实施方式
41.本发明人经过长期而深入的研究，开发了一种去除海藻糖内毒素的生产方法，所述的方法通过加入triton x-114吸附内毒素，然后通过两次析晶从而分离得到所需要的海藻糖内毒素。本发明的方法同样可以适用于其他注射制剂所需要的糖类或糖醇类药物辅料原料的内毒素去除，具有高收率和产物纯度高的特点。基于上述发现，发明人完成了本发明。
42.去除海藻糖内毒素的方法
43.本发明中，提供了一种去除糖类或糖醇类内毒素的生产方法，所述的方法包括：
44.(1)将糖类或糖醇类药物辅料用1-5倍质量倍数的去离子水搅拌溶解，溶液澄清后调节ph为4.5-7.5；
45.(2)加入0.1-1％的triton x-114，继续搅拌2-5小时，进而加热到40
–
70℃，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的糖类或糖醇类药物辅料；
46.(3)上清液在无菌室中浓缩至终浓度为40wt％-80wt％，静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干，无菌分装及包装，最终获得海藻糖≥99％高纯度药用注射用海藻糖产品。
47.在本发明的优选实施方式中，所述的步骤(3)之后还包括：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干，从而得到干燥的糖类或糖醇类药物辅料产品。
48.在本发明的优选实施方式下，当用食品级糖类或糖醇类药物辅料作为原料去内毒素时，所得到的产品指标为：内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，海藻糖≥99％。
49.在本发明中，对于不同的提取物，可以采用不同的优选条件，例如：
50.在提取海藻糖的情况下，优选的条件包括：
51.(1)将食品级海藻糖药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至4.5-7.5，形成第一溶液；
52.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至20-90℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
53.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为55wt％-65wt％，冷却析
晶并过滤结晶，从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料；所述的结晶溶剂为去离子水；
54.(4)所得的糖类或糖醇类药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，海藻糖≥99％。
55.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
56.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
57.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
58.(1)将食品级糖类或糖醇类药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至5.5-6.5，形成第一溶液；
59.(2)向所述的第一溶液中加入0.5-1％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-70℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
60.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为55％-65％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料。
61.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
62.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
63.在提取乳糖的情况下，优选的条件包括：
64.(1)将食品级乳糖药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6.5-7.5，形成第一溶液；
65.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
66.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为40wt％-60wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的乳糖；所述的结晶溶剂为去离子水；
67.所得的乳糖最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，乳糖≥99％。
68.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
69.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在15-25℃下进行。
70.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph为6.5-7.5下进行。
71.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
72.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
73.(1)将食品级乳糖与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至5.5-6.5，形成第一溶液；
74.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-50℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
75.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为45％-55wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的乳糖。
76.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
77.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
78.在提取蔗糖的情况下，优选的条件包括：
79.(1)将食品级蔗糖药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6-8，形成第一溶液；
80.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
81.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为50wt％-70wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的蔗糖；所述的结晶溶剂为去离子水和乙醇的混合溶剂，且去离子水：乙醇＝5-7:3-5(v/v)
82.所得的蔗糖辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，蔗糖≥99％。
83.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
84.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在20-30℃下进行。
85.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph＝6.5-7.5下进行。
86.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
87.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
88.(1)将食品级蔗糖药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6.5-7.5，形成第一溶液；
89.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-70℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
90.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为55％-65wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料。
91.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
92.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
93.在提取半乳糖的情况下，优选的条件包括：
94.(1)将食品级半乳糖药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6-8，形成第一溶液；
95.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到
第一上清液；
96.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为50wt％-70wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的半乳糖；所述的结晶溶剂为去离子水；
97.所得的半乳糖药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，半乳糖≥99％。
98.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
99.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在20-30℃下进行。
100.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph＝6.5-7.5下进行。
101.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
102.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
103.(1)将食品级半乳糖药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6.5-7.5，形成第一溶液；
104.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-50℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
105.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为55％-65wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的半乳糖药物辅料。
106.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
107.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
108.在提取麦芽糖的情况下，优选的条件包括：
109.(1)将食品级麦芽糖药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至5.5-7.5，形成第一溶液；
110.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
111.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为60wt％-80wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的麦芽糖；所述的结晶溶剂为去离子水；
112.所得的麦芽糖药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，麦芽糖≥99％。
113.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
114.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在15-35℃下进行。
115.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph为5.5-6.5下进行。
116.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
117.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
118.(1)将食品级麦芽糖药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至5.5-6.5，形成第一溶液；
119.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-50℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
120.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为65％-75wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的麦芽糖药物辅料。
121.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
122.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
123.在提取甘露醇的情况下，优选的条件包括：
124.(1)将食品级甘露醇药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至5.5-7.5，形成第一溶液；
125.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
126.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为35wt％-55wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的甘露醇；所述的结晶溶剂为去离子水；
127.所得的甘露醇药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，甘露醇≥99％。
128.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
129.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在15-35℃下进行。
130.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph为5.5-6.5下进行。
131.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
132.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
133.(1)将食品级甘露醇药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6-7，形成第一溶液；
134.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-50℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
135.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为40％-50wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的甘露醇药物辅料。
136.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
137.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
138.在提取山梨醇的情况下，优选的条件包括：
139.(1)将食品级山梨醇药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄
清，然后用酸调节ph至6-8，形成第一溶液；
140.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
141.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为60wt％-80wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的山梨醇；所述的结晶溶剂为去离子水和乙醇的混合溶剂，且去离子水：乙醇＝5-7:3-5(v/v)。
142.所得的山梨醇药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，山梨醇≥99％。
143.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在20-30℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
144.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在15-35℃下进行。
145.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph为6.5-7.5下进行。
146.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
147.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
148.(1)将食品级山梨醇药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6.5-7.5，形成第一溶液；
149.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-70℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
150.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为65％-75wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的山梨醇药物辅料。
151.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
152.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
153.在提取木糖醇的情况下，优选的条件包括：
154.(1)将食品级木糖醇药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6-8，形成第一溶液；
155.(2)向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至40-80℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；
156.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为70wt％-90wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的木糖醇；所述的结晶溶剂为去离子水；
157.所得的木糖醇药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，木糖醇≥99％。
158.在另一优选例中，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干。
159.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在20-30℃下进行。
160.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，所述的析晶在ph为6.5-7.5下进行。
161.在另一优选例中，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。
162.在另一优选例中，所述的方法包括步骤：
163.(1)将食品级木糖醇药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至6.5-7.5，形成第一溶液；
164.(2)向所述的第一溶液中加入0.4-0.6％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-80℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；
165.(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为75％-85wt％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的木糖醇药物辅料。
166.在另一优选例中，所述的步骤(2)包括：向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-80℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。
167.在另一优选例中，所述的步骤(3)中，析晶时间为9-11小时。
168.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
169.实施例1
170.以食品级海藻糖为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌2.5小时，进而加热到40
–
60℃继续搅拌2小时，进而加热到40
–
70℃，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的海藻糖，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表1中所述：
171.表1 triton x-114在不同参数下对海藻糖内毒素的影响
[0172][0173]
结果显示，当结晶浓度为60wt％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结
晶温度为25℃，结晶溶剂ph值为6的情况下，所得到的海藻糖具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，海藻糖≥99％的高纯度药用注射用海藻糖产品。
[0174]
采用4中所述的条件进行提取，所得到的产物(共三批次，混合)的x射线粉末衍射图如图1中所示，红外光谱如图2中所示，溶剂残留如图3中所示。
[0175]
实施例2
[0176]
以食品级乳糖为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌2.5小时，进而加热到40
–
50℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的乳糖，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表2中所述：
[0177]
表2triton x-114在不同参数下对乳糖内毒素的影响
[0178][0179]
结果显示，当结晶浓度为50wt％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为20℃，结晶溶剂ph值为7的情况下，所得到的乳糖具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，乳糖≥99％的高纯度药用注射用乳糖产品。
[0180]
采用5中所述的条件进行提取，所得到的产物的激光粒度仪测试图如图4中所示，x粉末衍射图如图5中所示，dsc差示扫描显热法测试图如图6中所示。
[0181]
实施例3
[0182]
以食品级蔗糖为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到40
–
60℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的蔗糖，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，
40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表3中所述：
[0183]
表3triton x-114在不同参数下对蔗糖内毒素的影响
[0184][0185]
结果显示，当结晶浓度为60％，h2o/etoh＝60:40的混合溶剂作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为25℃，结晶溶剂ph值为7的情况下，所得到的蔗糖具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，蔗糖≥99％的高纯度药用注射用蔗糖产品。
[0186]
采用4中所述的条件进行提取，所得到的产物的红外光谱图如图7中所示。
[0187]
实施例4
[0188]
以食品级半乳糖为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到40
–
60℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的半乳糖，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表4中所述：
[0189]
表4triton x-114在不同参数下对半乳糖内毒素的影响
[0190][0191]
结果显示，当结晶浓度为60wt％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为25℃，结晶溶剂ph值为7的情况下，所得到的半乳糖具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，半乳糖≥99％的高纯度药用注射用半乳糖产品。
[0192]
实施例5
[0193]
以食品级麦芽糖为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到40
–
70℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的麦芽糖，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表5中所述：
[0194]
表5triton x-114在不同参数下对麦芽糖内毒素的影响
[0195][0196]
结果显示，当结晶浓度为70wt％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为25℃，结晶溶剂ph值为6的情况下，所得到的麦芽糖具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，麦芽糖≥99％的高纯度药用注射用麦芽糖产品。
[0197]
实施例6
[0198]
以食品级甘露醇为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到30
–
45℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的甘露醇，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表6中所述：
[0199]
表6triton x-114在不同参数下对甘露醇内毒素的影响
[0200]
[0201][0202]
结果显示，当结晶浓度为45％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为20℃，结晶溶剂ph值为6.5的情况下，所得到的甘露醇具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，甘露醇≥99％的高纯度药用注射用甘露醇产品。
[0203]
实施例7
[0204]
以食品级山梨醇为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到40
–
70℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的山梨醇，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表7中所述：
[0205]
表7triton x-114在不同参数下对山梨醇内毒素的影响
[0206]
[0207][0208]
结果显示，当结晶浓度为70％，h2o/etoh＝60:40的混合溶剂作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为25℃，结晶溶剂ph值为7的情况下，所得到的山梨醇具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，山梨醇≥99％的高纯度药用注射用山梨醇产品。
[0209]
实施例8
[0210]
以食品级木糖醇为原料，加入结晶溶剂搅拌溶解，溶液澄清后。调节ph至对应的ph值，然后加入对应量的triton x-114，搅拌3小时，进而加热到40
–
80℃继续搅拌2小时，析出的悬浮物为表面活性剂triton x-114及吸附的内毒素；离心，上清液为去除内毒素的木糖醇，上清液在无菌室中浓缩至终浓度(即结晶浓度)，在结晶温度下静置析晶，过滤得结晶固体，40
–
90℃烘干。不同批次的实验结果如下表8中所述：
[0211]
表8triton x-114在不同参数下对木糖醇内毒素的影响
[0212]
[0213][0214]
结果显示，当结晶浓度为80wt％，无菌水作为结晶溶剂，triton-x用量为0.5％，结晶温度为35℃，结晶溶剂ph值为7的情况下，所得到的木糖醇具有最高的回收率和最低的杂质含量。因此，采用该条件作为优化条件，最终获得内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，木糖醇≥99％的高纯度药用注射用木糖醇产品。
[0215]
在本发明提及的所有文献都在本技术中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。

技术特征：
1.一种降低糖类或糖醇类药物辅料内毒素的方法，其特征在于：(1)将食品级糖类或糖醇类药物辅料与1-5倍质量倍数的结晶溶剂混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至4.5-7.5，形成第一溶液；(2)在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.1-1wt％的triton x-114，搅拌2-5小时使其充分吸附内毒素，然后加热至20-70℃从而析出吸附有内毒素的triton x-114，离心分离，得到第一上清液；(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为40wt％-80wt％，冷却析晶并过滤结晶，从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料；较佳地，所得的糖类或糖醇类药物辅料最终产品中，内毒素≤10eu/g，cl-离子≤100ppm，so
42-离子≤100ppm，triton x-114≤10ppm，糖类或糖醇类药物辅料≥99％；其中，所述的结晶溶剂选自下组：去离子水、乙醇，或其组合。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(3)后还包括步骤：在40-90℃下，对于所得到的过滤结晶进行烘干；较佳地，在40-60℃下对于所得到的过滤结晶进行烘干。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(2)中，加入0.4-0.6wt％的triton x-114，以第一溶液的总重量计。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的糖类或糖醇类药物辅料选自下组：海藻糖、乳糖、蔗糖、半乳糖、麦芽糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇，或其组合。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，在溶液澄清后用酸调节ph为4.5
–
7。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(1)中，所用的酸选自下组：盐酸、醋酸、柠檬酸，或其组合。7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的方法包括步骤：(1)将食品级糖类或糖醇类药物辅料与1-3倍质量倍数的去离子水混合并溶解至溶液澄清，然后用酸调节ph至4.5-7.5，形成第一溶液；(2)在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.5-1％的triton x-114，搅拌2-4小时，然后加热到40-70℃搅拌1-5小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液；(3)在无菌环境下，对所述的上清液进行浓缩至终浓度为50％-60％，析晶，过滤结晶从而得到纯化的糖类或糖醇类药物辅料。8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的步骤(2)包括：在无菌环境下，向所述的第一溶液中加入0.4-0.6wt％的triton x-114，继续搅拌2-3小时，然后加热到40-60℃搅拌1-3小时，然后进行离心分离从而得到第一上清液。9.如权利要求1-8任一所述的方法制备的纯化糖类或糖醇类药物辅料。10.一种糖类或糖醇类药物辅料注射液，其特征在于，所述的注射液包括：如权利要求9所述的纯化的糖类或糖醇类药物辅料，和药学上可接受的载体。

技术总结
本发明涉及一种降低糖类或糖醇类药用辅料内毒素的生产方法，具体地，本发明提供了一种降低糖类或糖醇类药用辅料内毒素的方法，所述方法可以显著降低糖类或糖醇类药用辅料的内毒素含量，从而制备适用于注射制剂原料的糖类或糖醇类药物辅料。类或糖醇类药物辅料。


技术研发人员：请求不公布姓名
受保护的技术使用者：广东省美答欣医药技术有限公司
技术研发日：2023.05.19
技术公布日：2023/10/6