一种高含量黄芩素的生产方法与流程

1.在本发明涉及一种高含量黄芩素的生产方法。


背景技术：

2.黄芩是唇形科植物黄芩的干燥根，具有清热解毒，止血的功效,黄芩的主要成份是黄芩苷，千层纸素和少量的白杨素等黄酮类成份,药物代谢研究发现，黄芩提取物吸收入血的主要成份为黄芩苷元，即黄芩素，黄芩苷很难被肠道吸收，生物利用率极低,黄芩素具有降低脑血管阻力，改善脑血循环，临床用于脑血管病后瘫痪的治疗，由于黄芩素在黄芩中的含量极低（一般为0.05-0.5%），因此直接提取分离非常困难。目前黄芩素的制备方法主要由内源酶联合硅胶柱层析法制备，内源酶法降解条件要求高，用时较长，降解后仍需采用硅胶柱以及大量有机溶剂才能分离得到黄芩素，因此，现有方法在转移率，可操作性，安全性，成本等方面存在一定的局限性，为了使黄芩素更为广泛的用于临床，对于黄芩素的大规模生产制备方法有待创新与突破。
3.本发明的目的是提供一种从黄芩为原料来生产高含量98%黄芩素的生产方法。本发明的技术解决方案是：一种高含量黄芩素的生产方法：以黄芩为原料，包括提取、酸沉、柱层析分离、浓缩、酸解反应、结晶、脱色等步骤:（1）提取：以黄芩为原料，用水或低级醇做溶剂，溶剂量为原料量的8-10倍，在80-90度热回流提取2-3小时，如此提取三次，过滤提取液;（2）酸沉：将三次提取液合并，沉降除去不溶物，分出上浊液即得黄芩提取液，加热后，调ph=1-3，沉降，沉淀物过滤即为黄芩苷粗品，上清液及过滤液合并返回上浊液;（3）柱层析分离：黄芩苷粗品用10-15倍量水溶解，，溶液上大孔吸附树脂层析分离，依次用去离子水，60%-70%乙醇，85%-90%乙醇梯度洗脱，将流出液分段收集;（4）浓缩：将收集的各流出液分别在70-80度，真空0.08-0.09mpa下减压浓缩至膏状，经检测60%-70%乙醇流出液部分黄芩苷含量92%;（5）酸解反应：浓缩膏状物黄芩苷中加入反应溶剂和酸催化剂，溶剂重量为原料量的5-10倍，催化剂量为原料量的2-6倍，在90度进行酸解反应1-2小时，降温;（6）结晶：将上述反应液放至常温进行冷析结晶，将结晶体过滤，即可得黄芩素粗品;（7）脱色：在黄芩素粗品中加入一定量的低级醇，加入脱色剂，加热溶解，过滤，滤液浓缩，结晶，过滤结晶体即可得黄芩素产品;所述提取步骤中提取溶剂为水、甲醇或乙醇;所述柱层析步骤中树脂为ab-8、d101或hpd-100;所述酸解反应步骤中酸催化剂为硫酸或盐酸，反应溶剂为水或甲醇;所述脱色步骤中低级醇为甲醇或乙醇，脱色剂为活性炭或白土。
4.

技术实现要素：
1.直接从黄芩中提取高纯度的黄芩苷，再将黄芩苷水解为黄芩素，避免了使用内
源酶联合硅胶柱层析法在转化率、可操作性、成本等方面的各种局限性，本发明具有很好的工业大生产价值；2.本发明使用了特定的无毒性有机溶剂和合适的工艺条件，大大提高了黄芩素的含量和收率，对环境无污染;3.其它副产物和溶剂可回收利用，充分利用资源，降低了生产成本。
5.实施例一：1.黄芩5公斤，投入100升不锈钢提取罐中，再加入40公斤水开动搅拌，加热至80度回流2小时，如此提取三次，并将提取液过滤。
6.2.将过滤液放置沉降，待出现明显的不溶物沉淀后，将上浊液分离出即为黄芩提取液，加热至85度，以30%盐酸调ph至1.9，沉降1小时，下层出现黄色沉淀物，将沉淀物过滤，水洗滤饼，得到黄色沉淀物滤饼，减压干燥得到黄芩苷粗品600克，黄芩苷含量82%。
7.3.将600克黄芩苷粗品溶于8公斤水中，溶液上ab-8层析柱层析，依次用去离子水，60%乙醇，90%乙醇梯度洗脱，将各流出液分段收集。
8.4.将收集的各流出液分别在70-80度，真空0.08-0.09mpa下减压浓缩至膏状，分别干燥称重，分别检测含量，测得60%乙醇组份含量为92%黄芩苷产品，称重400克。
9.5.将400克92%黄芩苷投20升反应釜中，加入4公斤水，加入2公斤盐酸，升温至90度搅拌反应1小时，降温。
10.6.将上述反应液放至常温进行冷析，20小时后，有黄色沉淀析出，将结晶体过滤干燥即得黄芩素粗品220克，检测含量96%。
11.7.把黄芩素粗品220克投入5升三颈瓶中，加入800克乙醇，加入20克白土，加热回流1小时，过滤，滤液浓缩至500毫升，放置常温结晶，24小时后，过滤结晶体，干燥，即可得黄芩素产品180克，经检测含量98.2%。
12.实施例二：1.黄芩500公斤，投入6立方的不锈钢提取罐中，再加入5立方水，加热升温至90度，搅拌回流2小时，如此提取三次，并将提取液过滤。
13.2.将过滤液放置沉降，放置一段时间后，底部出现沉淀，将上浊液分出即为黄芩提取液，加热至85度，用30%盐酸调ph至2，待下层出现黄色沉淀物，将沉淀物过滤，水洗滤饼至中性，得到黄色滤饼，真空干燥得到黄芩苷粗品70公斤，黄芩苷含量81%。
14.3.将70公斤黄芩苷粗品溶于800公斤水中，此溶液上ab-8层析柱（直径0.8米 高4米），依次用去离子水，60%乙醇，90%乙醇梯度洗脱，将各流出液分段收集。
15.4.将收集的各流出液分别在70-80度，真空0.08-0.09mpa下减压浓缩至膏状，分别干燥，分别液相检测其中主要成份含量，测得去离子水部分10公斤为多糖类物质，60%乙醇部分50公斤黄芩苷含量91%，90%乙醇部分10公斤为色素类物质。
16.5.将50公斤含量91%黄芩苷投入1立方的搪玻璃反应釜中，加入400公斤水，加入20公斤浓硫酸，升温至90度，搅拌反应2小时，降温。
17.6.将上述反应液放至常温进行冷析，20小时后，有黄色沉淀析出，将结晶体过滤，干燥，可得黄芩素粗品30公斤，检测含量97%。
18.7.把30公斤黄芩素粗品投入500升的反应釜中，加入120公斤乙醇，加入1.5公斤白土，加热回流1小时，抽滤，滤液浓缩至60公斤左右，放置常温，结晶，24小时后过滤结晶体，
干燥即可得黄芩素产品28公斤，经检测含量98.3%。


技术特征：
1.在一种高含量黄芩素的生产方法：以黄芩为原料，包括提取、酸沉、柱层析分离、浓缩、酸解反应、结晶、脱色等步骤，其特征在于：
①
提取：以黄芩为原料，用水或低级醇做溶剂，溶剂量为原料量的8-10倍，在80-90度热回流提取2-3小时，如此提取三次，过滤提取液;
②
酸沉：将三次提取液合并，沉降除去不溶物，分出上浊液即得黄芩提取液，加热后，调ph=1-3，沉降，沉淀物过滤即为黄芩苷粗品，上清液及过滤液合并返回上浊液;
③
柱层析分离：黄芩苷粗品用10-15倍量水溶解，，溶液上大孔吸附树脂层析分离，依次用去离子水，60%-70%乙醇，85%-90%乙醇梯度洗脱，将流出液分段收集;
④
浓缩：将收集的各流出液分别在70-80度，真空0.08-0.09mpa下减压浓缩至膏状，经检测60%-70%乙醇流出液部分黄芩苷含量92%;
⑤
酸解反应：浓缩膏状物黄芩苷中加入反应溶剂和酸催化剂，溶剂重量为原料量的5-10倍，催化剂量为原料量的2-6倍，在90度进行酸解反应1-2小时，降温;
⑥
结晶：将上述反应液放至常温进行冷析结晶，将结晶体过滤，即可得黄芩素粗品;
⑦
脱色：在黄芩素粗品中加入一定量的低级醇，加入脱色剂，加热溶解，过滤，滤液浓缩，结晶，过滤结晶体即可得黄芩素产品。2.如权利要求1所述的高含量黄芩素的生产方法：其特征在于:所述的提取步骤中的低级醇为甲醇或乙醇。3.如权利要求1所述的高含量黄芩素的生产方法：其特征在于：所述的柱层析步骤中大孔吸附树脂为ab-8、d101或hpd-100。4.如权利要求1所述的高含量黄芩素的生产方法：其特征在于：所述的酸解反应步骤中酸催化剂为盐酸、硫酸或磷酸，反应溶剂为水或甲醇。5.如权利要求1所述的高含量黄芩素的生产方法：其特征在于：所述的脱色反应步骤中低级醇为甲醇或乙醇，脱色剂为活性炭或白土。

技术总结
本发明提供一种从黄芩中提取生产黄芩素的方法，该方法以水为提取剂，对含有黄芩苷的黄芩进行提取，将提取液酸沉，柱层析纯化分离，将含有高含量黄芩苷的液体浓缩可得高含量的黄芩苷膏状物，再将黄芩苷膏状物中加入水做溶剂，硫酸做催化剂，在90度酸解反应2小时，再降温结晶，将结晶体过滤，水洗至中性，可得黄芩素粗品，再将黄芩素粗品进行脱色，可制得高含量黄芩素产品。本发明所述方法的技术效果很显著，不仅黄芩素含量可达98%，而且收率可达5%。而且收率可达5%。


技术研发人员：柳小军 杨小东 黄伟强
受保护的技术使用者：陕西百川康泽生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2023/10/8