青蒿素类化合物、其制备方法和应用

1.本发明属于药物化学领域，涉及一类青蒿素类化合物及其制备方法、药物组合物和在自身免疫疾病方面的应用。


背景技术：

2.多发性硬化症(multiple sclerosis,ms)、类风湿、红斑狼疮等自身免疫疾病对人类健康造成了严重的影响，其中多发性硬化症的主要发病人群为20-40岁的青壮年，是导致年轻人无创性神经系统瘫痪以及残疾的最重要的诱因之一，对患者生活质量产生严重影响，对患者身心健康构成严重威胁(annu rev immunol,2005,23:683-747)。ms作为一种常见的中枢神经系统脱髓鞘疾病，其特征是炎症浸润、脱髓鞘、轴突损伤、神经元信号中断和免疫细胞浸润的多灶区域。ms的发病机制尚不清楚，尚缺乏有效治疗ms的手段，临床所采用的药物主要多为免疫抑制剂和干扰素，这些对症的药物只能控制疾病的进一步恶化，并且免疫抑制剂存在明显的副作用，长期服用会导致免疫力低下及感染。而干扰素则会引起内分泌紊乱，治疗费用高且需要肌肉注射，给药十分繁琐。寻找新的有效的治疗靶点及药物成为ms领域的热点和难点(lancet,2008,372(9648):1502-1517)。
3.研究表明，cd4
+
t细胞(th1和th17细胞)介导的自身免疫已被认为是引发ms的重要原因，实验性自身免疫性脑脊髓炎(eae)与ms有许多病理学和组织学上的相似之处，导致瘫痪、生理和神经问题。产生干扰素-γ(ifn-γ)的th1 cd4
+
t细胞和分泌白细胞介素-17(il-17a)的th17 cd4
+
t细胞在eae模型中起着关键作用，t细胞极化、白细胞迁移和浸润到中枢神经系统是eae发病机制中非常重要的步骤(j autoimmun,2018,87:97
–
108)。越来越多的证据表明th17(以产生il-17为特征)在ms的发病中有着不亚于th1的作用，例如，th17细胞数量少的小鼠不易得eae(exp med,2005,201(2):233-240)，ms病人的脑组织病灶中鉴定出了th17细胞等(am j pathol,2008,172(1):146-155)。然而在ms的治疗方面依然没有特效药，揭示的调控因子大多是都是转录因子或者细胞因子(nat immunol,2009,10(12):1252-1259)，能调控th17细胞分化的小分子抗ms药物未见报道，而这为ms治疗提供了一种方案。
4.青蒿素是一种天然存在于菊科青蒿属植物中的抗疟疾药物,青蒿素衍生物也被发现对自身免疫性疾病有治疗作用，如ms、类风湿性关节炎、狼疮和溃疡性结肠炎等。青蒿素类衍生物在治疗自身免疫性疾病如多发性硬化症方面有巨大潜力，开发具有抑制th17分化效应的青蒿素类小分子候选化合物对于多发性硬化症的治疗具有重大意义。


技术实现要素：

5.为了解决现有技术中的不足，本发明的一个目的是提供一类青蒿素类化合物。
6.本发明的另一个目的是提供上述青蒿素类化合物的制备方法。
7.本发明的又一个目的是提供包含上述青蒿素类化合物的药物组合物。
8.本发明的又一个目的是提供上述青蒿素类化合物在制备治疗或预防自身免疫疾病的药物中的应用。
9.本发明一方面提供一种下述式(i)所表示的青蒿素类化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，
[0010][0011]
其中,
[0012]
r1为卤素、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基氧基、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基硫基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基氧基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基硫基，20元杂环基硫基，其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c20烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c20烷酰氨基、c1-c20卤代烷基、c1-c20羟烷基、c1-c20烷酰氧基；
[0013]
特别地，r1为卤素、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷基、或环状烃基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基、取代或未取代的c3～c10环烷基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷氧基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯氧基、取代或未取代的c3～c10环烷基氧基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷硫基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基硫基、取代或未取代的c3～c10环烷基硫基、取代或未取代的含1、2、3或4个氧原子的3-20元氧杂环基氧基、取代或未取代的含1、2、3或4个氧原子的3-20元氧杂环基硫基，其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c10烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c10烷酰氨基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、c1-c10烷酰氧基；
[0014]
更特别地，r1为卤素、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷基、或环状烃基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基、取代或未取代的c3～c10环烷基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷氧基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯氧基、取代或未取代的c3～c10环烷基氧基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷硫基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基硫基、取代或未取代的c3～c10环烷基硫基、取代或未取代的含1或2个氧原子的5-7元氧杂环烷基氧基、取代或未取代的含1或2个氧原子的5-7元氧杂环烷基硫基，
其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c6烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、c1-c6烷酰氧基；
[0015]
r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c20直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基、取代或未取代的c2-c20直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c10烷基、c1-c10烷氧基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c10烷酰氨基、c1～c10烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基，未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c20芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；
[0016]
特别地，r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；
[0017]
更特别地，r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基(例如)、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基(例如)、含1-3个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环
基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；
[0018]
r6选自c1-c20直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；
[0019]
特别地，r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的
[0020]
r2各自独立地选自氢、羟基、巯基、卤素、三氟甲基；
[0021]
或者r1、r2一起构成氧代(＝o)；
[0022]
r3、r4各自独立地为甲基、氢、羟基、卤素；优选两者不同时为氢、羟基、卤素；或
[0023]
r2、r3与其连接的碳原子一起形成-c＝c-双键；
[0024]
a各自独立地为氧或不存在。
[0025]
在一些实施方式中，
[0026]
r1选自卤素、三氟甲基；r2选自三氟甲基、氢、羟基、巯基、卤素，且r1和r2不同；
[0027]
r3、r4各自独立地为甲基、氢、卤素，且两者不同时为氢、卤素；或
[0028]
r2、r3与其连接的碳原子一起形成-c＝c-双键；
[0029]
a为氧原子或不存在。
[0030]
在一些实施方式中，
[0031]
r1选自取代的c1～c20直链或支链或环状烃基、取代的c1～c20直链或支链或环状烃基氧基、取代的c1～c20直链或支链或环状烃基硫基、取代的2-四氢呋喃基氧基、取代的2-四氢吡喃基氧基；所述取代的取代基选自羟基、c1-c20烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c20烷酰氨基、c1-c20卤代烷基、c1-c20烷酰氧基；
[0032]
r2为氢或卤素；
[0033]
r3、r4各自独立地为甲基、氢、羟基、卤素，且两者不同时为氢、羟基、卤素；
[0034]
a为氧原子或不存在。
[0035]
在一些实施方式中，
[0036]
r1选自
[0037]
r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c20直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基、取代
或未取代的c2-c20直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c10烷基、c1-c10烷氧基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c10烷酰氨基、c1～c10烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基，未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c20芳基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；
[0038]
特别地，r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基(例如)、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基(例如)、含1-3个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；
[0039]
r6选自c1-c20直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；
[0040]
特别地，r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的
[0041]
r2选自氢或卤素；
[0042]
r3、r4各自独立地为甲基、氢或卤素，且两者不同时为氢、卤素；
[0043]
a选自氧原子或不存在。
[0044]
在一些实施方式中，式(i)化合物选自下式(ii)所示的化合物：
[0045][0046]
其中，
[0047]
a1为o或s；
[0048]
r7选自h、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基；所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基；
[0049]
特别地，r7选自h、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；
[0050]
更特别地，r7选自
[0051]
在一些实施方式中，式(i)化合物选自下式(iii)所示的化合物：
[0052][0053]
其中，
[0054]
a1为o或s；
[0055]
r8选自r6oc(＝o)-、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基；所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基；
[0056]
特别地，r8选自r6oc(＝o)-、未取代或被羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的苯基；
[0057]
r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基(例如其中a、r2、r3、r4的定义如上所述)；
[0058]
特别地，r6选自c1-c4直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；
[0059]
更特别地，r6选自甲基、
[0060]
在一些实施方式中，式(i)化合物选自下式(iv)所示的化合物：
[0061][0062]
其中，
[0063]
a1为o或s；
[0064]
r9选自取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基，其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c4烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c10烷酰氨基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、c1-c10烷酰氧基；
[0065]
特别地，r9选自取代或未取代的2-四氢呋喃基、取代或未取代的2-四氢吡喃基、取代或未取代的其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c4烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、c1-c6烷酰氧基。
[0066]
在一些实施方式中，式(i)化合物选自下式(v)所示的化合物：
[0067][0068]
其中，
[0069]r10
选自取代或未取代的c1-c20直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；
[0070]
特别地，r
10
选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10
环状烷基、取代或未取代的苯基、取代或未取代的萘基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基。
[0071]
在一些实施方式中，式(i)化合物选自下式(vi)所示的化合物：
[0072][0073]
其中，
[0074]r11
选自取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；
[0075]
特别地，r
10
选自取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含氮的3-10元杂环基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基。
[0076]
本发明中，
[0077]
卤素是指氟、氯、溴或碘。
[0078]“直链或支链或环状烃基”包括直链或支链烷基、直链或支链烯基、环烷基、环烯基。
[0079]“烷基”非限制性地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等。
[0080]“烷氧基”是指上述烷基末端连接氧所得的基团，例如，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、仲丁氧基、叔丁基、正己氧基等。
[0081]“卤代烷基”是指上述烷基上的一个或多个氢被卤素取代所得的基团，例如，三氟甲基等。
[0082]“羟烷基”是指上述烷基上的一个或多个氢被羟基取代所得的基团，例如，羟甲基等。
[0083]“环烷基”是指环上仅包含碳的单环或多环饱和烷基，非限制性地包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、金刚烷基等。
[0084]“氨基”是指-nh2。
[0085]“烷酰氨基”是指rc(＝o)-n基团，其中，r为上述的烷基。
[0086]“烷酰氧基”是指rc(＝o)-o基团，其中，r为上述的烷基。
[0087]“芳基”是指环上仅包含碳的单环或多环芳香性基团，非限制性地包括苯基、萘基等。
[0088]“杂环基”是指环上包含有选自氧、氮、硫的杂原子的饱和或不饱和的单环或多环的非芳香性基团，非限制性地包括氮杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、哌啶基、氧杂环丙烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、吡喃基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、二氧杂环戊烷基、二氧杂环己烷基、哌嗪基、吗啉基、苯并二氧杂环戊烷基、基、二氧杂环己烷基、哌嗪基、吗啉基、苯并二氧杂环戊烷基、等，但不限于此。
[0089]“杂环基”包括杂螺环基、杂并环基、单环杂环基等。
[0090]“杂螺环基”是指环上包含有选自氧、氮、硫的杂原子的饱和或不饱和的螺环基团，例如
[0091]“杂并环基”是指环上包含有选自氧、氮、硫的杂原子的饱和或不饱和的并环，例如
[0092]“杂芳基”是指环上包含有选自氧、氮、硫的杂原子的单环或多环芳香性基团，非限制性地包括呋喃基、吡啶基、噻吩基、噻唑基、噻喃基、苯并呋喃基、苯并噻唑基等，但不限于此。
[0093]“药学上可接受的盐”包括与酸或碱形成的盐；所述酸包括无机酸、有机酸；优选地，所述无机酸包括盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、硝酸、磷酸、碳酸；优选地，所述有机酸包括甲酸、乙酸、丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、马来酸、乳酸、苹果酸、柠檬酸、枸橼酸、酒石酸、碳酸、苦味酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、谷氨酸、双羟萘酸；所述碱包括钠、钾、钙、铝、锂和铵的氢氧化物、碳酸盐、碳酸氢盐等。
[0094]
本技术所涉及的化合物及其药学上可接受的盐可具有异构体或消旋体，例如光学异构体(包括非对映异构体和对映异构体)、阻转异构体、几何异构体(顺反异构体)、构象异构体、互变异构体以及它们的混合物等，但不限于此。这些异构体也包含在本发明的权利要求所限定的范围中。
[0095]
在本文中，所有以数值范围形式界定的特征或条件仅是为了简洁及方便。据此，数值范围或百分比范围的描述应视为已涵盖且具体公开所有可能的次级范围及范围内的个别数值，特别是整数数值。举例而言，“3至20”的范围描述应视为已经具体公开如3至15、4至20、4至15、4至10、5至20、5至15等等所有次级范围，特别是由所有整数数值所界定的次级范围，且应视为已经具体公开范围内如3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19等个别数值。除非另有指明，否则前述解释方法适用于本发明全文的所有内容，不论范围广泛与否。
[0096]
若数量或其他数值或参数是以范围、优选范围或一系列上限与下限表示，则其应
理解成是本文已特定公开了由任一对该范围的上限或优选值与该范围的下限或优选值构成的所有范围，不论这些范围是否有分别公开。
[0097]
以上实施方式仅为本发明的示例性实施方式，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。
[0098]
在一些实施方式中，所述化合物选自以下结构的化合物：
[0099][0100]
本发明另一方面还提供了通式i化合物的制备方法，所述方法为如下方法之一。
[0101]
方法一：
[0102][0103]
以a1为原料，在氟代试剂存在条件下得到氟代产物i-1，
[0104]
其中，a、r3和r4如上文所定义。
[0105]
氟代试剂可以选自：二乙氨基三氟化硫、四丁基氟化铵、1-氯甲基-4-氟-1,4-二叠氮双环[2.2.2]辛烷双四氟硼酸盐、n-氟代双苯磺酰胺，但不限于此。
[0106]
方法二：
[0107][0108]
以a2为原料，与酸r5c(＝o)oh进行缩合反应得到缩合产物i-2，
[0109]
其中，a、r3、r4和r5如上文所定义。
[0110]
所述酸例如优选为生物素、硫辛酸、富马酸单甲酯、马来酸、阿魏酸，但不限于此。
[0111]
所述缩合反应可以在缩合剂存在下进行。缩合剂可选自：1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(edci)、二环己基碳二亚胺(dcc)、1-羟基苯并三唑(hobt)中一种或几种的组合，或可以使用本领域中类似机理的缩合试剂。
[0112]
方法三：
[0113][0114]
以a3为原料，与取代异氰酸酯r5nco或取代异硫氰酸酯r5ncs进行缩合反应得到氨基甲酸酯产物或氨基硫代甲酸酯产物i-3，
[0115]
其中，a、r3、r4和r5如上文所定义，a1和a2各自独立地选自氧或硫。
[0116]
所述取代异氰酸酯或取代异硫氰酸酯例如优选为正丁基异氰酸酯、环丙基异氰酸酯、对三氟甲氧基苯基异氰酸酯、对三氟甲氧基苯基异硫氰酸酯、1-金刚烷异氰酸酯、1-萘基异氰酸酯、3,4-(亚甲基二氧基)苯基异氰酸酯，但不限于此。
[0117]
所述缩合反应可以在碱存在下进行。常用的碱可以为：三乙胺、氨水、4-二甲氨基吡啶、二异丙基乙胺、1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-烯、n,n-二甲基氨基吡啶一种或几种的组合，或类似机理的试剂。
[0118]
方法四：
[0119][0120]
以a3为原料，与r9a1h缩合得到醚类产物i-4,
[0121]
其中，a、r3、r4和r9如上文所定义，
[0122]
a1选自氧或硫，
[0123]
所述缩合反应可以在缩合剂存在下进行。常用的缩合剂为三氟化硼乙醚或类似机理的试剂。
[0124]
方法五：
[0125][0126]
将环胺化合物与三光气(triphosgene)反应得到然后与a3进行缩合反应得到化合物i-5，
[0127]
其中，a、r3和r4如上文所定义，a1选自氧或硫。
[0128]
环胺可以为取代或未取代的3-20元，优选3-10元单环或多环环胺化合物，例如可以为单环烷胺、并环胺或螺环胺，除了至少含有一个环n原子外，所述环胺任选还包含选自氧、氮、硫的1-5个杂原子。所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c10烷基、c1-c10烷氧基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c10烷酰氨基、c1～c10烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基，未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c20芳基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；优选所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、氨基(-nh2)、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基(例如)、含1-3个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、未取代或被选自羟基、硝基、氨基(-nh2)、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基；
[0129]
r6如上文所定义。
[0130]
所述缩合反应可以在碱存在下进行。常用的碱可以为三乙胺或类似机理的试剂。
[0131]
本发明所用起始原料为商业购买或按照相似化合物的已知合成方法制备。
[0132]
本发明另一方面提供一种药物组合物，其包含有效量的选自上述根据本发明的化合物、其立体异构体、药学上可接收的盐和溶剂合物中的一种或多种，以及任选地，一种或多种药学辅料。
[0133]
本发明另一方面提供所述的化合物、其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物在制备用于治疗或预防自身免疫疾病的药物中的应用。
[0134]
本发明另一方面提供一种治疗或预防自身免疫疾病的方法，所述方法包括向有此需要的对象施用有效量的选自上述根据本发明的化合物、其立体异构体、药学上可接收的盐和溶剂合物中的一种或多种，或者上述药物组合物。
[0135]
所述自身免疫疾病可以为选自多发性硬化症、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、系统性血管炎、强直性脊柱炎、皮肌炎、硬皮病、天疱疮、混合性结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血、甲状腺自身免疫病、溃疡性结肠炎中的至少一种。
[0136]
有益效果
[0137]
本发明化合物具有以下有益效果：结构新颖、具有显著抗自身免疫疾病的作用。
具体实施方式
[0138]
为了进一步理解本发明，下面结合实施例对本发明作进一步的说明，这些实施例描述只是为进一步详细说明本发明的特征，而不是对本发明范围或本发明权利要求范围的限制。在本领域内技术人员对发明所做的简单替换或改进等均属于本发明所保护的技术方案之内。
[0139]
实施例1:化合物i1的合成
[0140][0141]
将200mg三氟甲基取代青蒿素、5ml二氯甲烷加入到25ml三口烧瓶中，0℃条件下将184mg二乙氨基三氟化硫(dast)加入到反应液中，升温至25℃反应10h。加入2ml水反应分层，有机相加入2ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:乙酸乙酯＝50:1-10:1)进行纯化，得到130mg白色固体产物i1，收率67.3％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)：δ5.83(d,j＝2.7hz,1h),2.75(ddt,j＝32.7,13.3,6.0hz,1h),2.23(ddd,j＝14.7,12.9,4.0hz,1h),2.06(ddd,j＝14.7,4.8,2.9hz,1h),1.87(ddt,j＝13.1,6.3,3.4hz,1h),1.33(s,3h),1.02(dd,j＝7.3,1.7hz,3h),0.91(d,j＝6.4hz,3h).esi-ms m/z 355.2(m+h)
+
.
[0142]
实施例2：化合物i2的合成
[0143][0144]
将200mg双氢青蒿素、172mg生物素、270mg edci、43mg 4-二甲氨基吡啶(dmap)、
3ml二甲基甲酰胺(dmf)加入到10ml三口烧瓶中，25℃反应10h。加入3ml水和10ml二氯甲烷后分层，有机相加入3ml水分层，有机相加入3ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:乙酸乙酯＝10:1-2:1)进行纯化，得到255mg白色固体产物i2，收率71.0％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ5.81(d,j＝9.8hz,1h),5.45(s,1h),5.32(s,1h),4.55(s,1h),4.35(s,1h),3.18(s,1h),2.99
–
2.90(m,1h),2.82(d,j＝12.8hz,1h),2.62
–
2.32(m,4h),2.05(ddd,j＝14.7,4.9,3.0hz,1h),1.91(ddt,j＝13.4,6.5,3.6hz,1h),1.45(s,3h),0.98(d,j＝5.9hz,3h),0.86(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 533.2(m+na)
+
.
[0145]
实施例3：化合物i3的合成
[0146][0147]
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于以硫辛酸代替生物素，收率47.0％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ5.81(d,j＝9.9hz,1h),5.45(s,1h),3.58(dq,j＝8.3,6.4hz,1h),3.24-3.08(m,2h),2.58(dqd,j＝9.8,7.1,4.5hz,1h),2.52-2.33(m,5h),2.05(ddd,j＝14.6,4.9,3.0hz,1h),1.97-1.88(m,2h),1.45(s,3h),0.98(d,j＝6.0hz,3h),0.86(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 495.2(m+na)
+
.
[0148]
实施例4：化合物i4的合成
[0149][0150]
按照实施例2中相同的方法，不同之处在于以富马酸单甲酯代替生物素，收率75.2％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ6.89(dd,j＝23.5,7.7hz,2h),5.85(d,j＝9.8hz,1h),5.47(s,1h),3.82(d,j＝4.6hz,3h),2.63(ddt,j＝14.4,11.3,5.6hz,1h),2.38(td,j＝14.0,4.0hz,1h),2.09-2.01(m,1h),1.90(ddt,j＝13.7,6.7,3.5hz,1h),1.76(ddt,j＝20.1,13.3,3.5hz,2h),1.65(dt,j＝13.6,4.4hz,1h),1.58-1.45(m,1h),1.45-1.23(m,6h),1.10-0.99(m,1h),0.97(d,j＝5.8hz,3h),0.86(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 419.4(m+na)
+
.
[0151]
实施例5：化合物i5的合成
[0152]
[0153]
将900mg双氢青蒿素、150mg马来酸、512mg edci、740mg hobt、80mg dmap、20ml二氯甲烷加入到100ml三口烧瓶中，25℃反应10h。加入5ml 1n盐酸分层，有机相加入5ml水分层，有机相加入5ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:乙酸乙酯＝10:1-3:1)进行纯化，得到140mg白色固体产物i5，收率17.1％。1h nmr(400mhz,dmso-d
6)：δ6.96(s,2h),5.79(d,j＝9.8hz,2h),5.64(s,2h),2.52(p,j＝1.9hz,2h),2.41(ddd,j＝9.7,7.2,4.3hz,2h),2.21(td,j＝14.0,3.9hz,2h),2.08-1.99(m,2h),1.84(ddt,j＝13.7,6.7,3.4hz,2h),1.30(s,6h),0.91(d,j＝6.4hz,6h),0.84(d,j＝7.1hz,6h).esi-ms m/z 671.3(m+na)
+
.
[0154]
实施例6：化合物i8的合成
[0155][0156]
将200mg双氢青蒿素、2ml乙腈加入到10ml三口烧瓶中，然后将110mg三乙胺、77mg正丁基异氰酸酯加入到反应液中，25℃反应10h。加入2ml 1n盐酸和5ml乙酸乙酯分层，有机相加入2ml水分层，有机相加入2ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:丙酮＝10:1-4:1)进行纯化，得到150mg油状产物i8，收率53.6％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ5.71(d,j＝9.8hz,1h),5.45(s,1h),4.92(t,j＝5.8hz,1h),3.19(qd,j＝6.9,2.8hz,2h),2.59
–
2.48(m,1h),2.38(ddd,j＝14.6,13.4,4.0hz,1h),2.03(ddd,j＝14.6,4.9,3.0hz,1h),1.89(ddt,j＝13.6,6.8,3.6hz,1h),1.44(s,3h),0.97(d,j＝6.1hz,3h),0.93(t,j＝7.3hz,3h),0.88(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 406.2(m+na)
+
.
[0157]
实施例7：化合物i9的合成
[0158][0159]
按照实施例6中相同的方法，不同之处在于以环己基异氰酸酯代替正丁基异氰酸酯，收率48.4％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ5.71(d,j＝9.8hz,1h),5.46(s,1h),4.79(d,j＝7.8hz,1h),3.51(td,j＝14.1,6.9hz,2h),2.53(ddd,j＝10.8,7.1,4.5hz,1h),2.39(ddd,j＝14.6,13.4,4.0hz,1h),2.04(ddd,j＝14.6,4.9,3.0hz,1h),2.00-1.86(m,3h),1.45(s,3h),0.98(d,j＝6.1hz,3h),0.89(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 432.3(m+na)
+
.
[0160]
实施例8：化合物i10的合成
[0161][0162]
将200mg哌啶和5ml二氯甲烷加入到25ml三口烧瓶中,0℃条件将231mg三光气(triphosgene)加入反应液中，25℃反应10h后浓缩干反应液。将670mg双氢青蒿素、730mg三乙胺和20ml二氯甲烷加入到上述反应瓶中，25℃反应10h。然后3ml 1n盐酸加入至反应液中，静置分层。有机相加入5ml饱和氯化钠，静置分层。无水硫酸钠干燥有机相后，浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚：丙酮＝30:1-4:1)纯化，得350mg白色固体产物i10，收率38.3％。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ5.69(d,j＝9.8hz,1h),5.44(s,1h),3.54-3.43(m,4h),2.66-2.51(m,1h),2.36(ddd,j＝14.6,13.4,4.0hz,1h),2.09-2.00(m,1h),1.88(ddt,j＝13.5,6.7,3.7hz,1h),1.81-1.45(m,12h),1.43(s,3h),1.39-1.19(m,2h),0.95(d,j＝6.1hz,3h),0.86(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 418.2(m+na)
+
.
[0163]
实施例9：化合物i11的合成
[0164][0165]
按照实施例8中相同的方法，不同之处在于以8-氮杂螺[4.5]癸烷代替哌啶，收率26.2％。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ5.69(d,j＝9.8hz,1h),5.44(s,1h),3.55-3.35(m,4h),2.56(dqd,j＝14.3,7.1,4.4hz,1h),2.43-2.31(m,1h),2.02(ddd,j＝14.7,4.9,3.0hz,1h),1.87(ddt,j＝13.5,6.6,3.6hz,1h),1.73(ddq,j＝22.1,16.5,3.4hz,2h),1.61(dq,j＝7.2,3.8hz,5h),1.54-1.19(m,15h),1.01(td,j＝13.6,13.1,3.5hz,1h),0.95(d,j＝6.1hz,3h),0.85(d,j＝7.1hz,3h).esi-ms m/z 450.22(m+h)
+
.
[0166]
实施例10：化合物i12的合成
[0167][0168]
按照实施例6中相同的方法，不同之处在于以1-金刚烷异氰酸酯代替正丁基异氰酸酯，收率16.3％。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ5.65(d,j＝9.8hz,1h),5.41(s,1h),4.76(s,1h),2.49(ddd,j＝10.3,7.2,4.4hz,1h),2.43-2.30(m,1h),2.06(dt,j＝5.7,2.9hz,3h),2.04-1.98(m,1h),1.93(d,j＝2.9hz,6h),1.87(ddd,j＝13.5,6.5,3.4hz,1h),
1.80-1.68(m,1h),1.67-1.63(m,6h),1.63-1.45(m,2h),1.43(s,3h),1.35-1.20(m,4h),1.06-0.97(m,1h),0.95(d,j＝6.0hz,3h),0.86(d,j＝7.2hz,3h).esi-ms m/z 484.1(m+na)
+
.
[0169]
实施例11：化合物i14的合成
[0170][0171]
按照实施例6中相同的方法，不同之处在于以3,4-(亚甲二氧基)苯基异氰酸酯代替正丁基异氰酸酯，收率37.9％。1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ7.19(s,1h),7.09(s,1h),6.70(t,j＝7.7hz,2h),5.91(s,2h),5.75(d,j＝9.8hz,1h),5.49(s,1h),2.69-2.54(m,1h),2.37(td,j＝14.0,3.9hz,1h),2.02(d,j＝14.7hz,2h),1.96-1.85(m,1h),1.85-1.56(m,3h),1.57-1.17(m,6h),1.05(d,j＝14.5hz,1h),0.96(d,j＝5.9hz,3h),0.93(d,j＝7.2hz,3h).esi-ms m/z 470.0(m+na)
+
[0172]
实施例12：化合物i15的合成
[0173][0174]
step1：将1000mg双氢青蒿素、100mg 10％钯碳和20ml二氯甲烷加入到50ml三口烧瓶中,氢气置换三次，40℃反应10h。硅藻土过滤钯碳，浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝50:1-10:1)纯化，得450mg中间体1，收率48.5％。
[0175]
step2：按照实施例6中相同的方法，不同之处在于以环己基异氰酸酯代替正丁基异氰酸酯，收率38.3％。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.15(d,j＝7.9hz,1h),5.49(d,j＝8.0hz,1h),5.33(s,1h),3.31-3.14(m,1h),2.32(td,j＝7.4,4.2hz,1h),1.73(dddd,j＝32.1,16.0,7.7,3.7hz,7h),1.62-1.44(m,2h),1.41(s,3h),1.16(ddt,j＝21.6,15.9,12.5hz,6h),1.02-0.87(m,1h),0.84(dd,j＝6.9,3.2hz,6h).esi-ms m/z 415.8(m+na)
+
.
[0176]
实施例13：化合物i17的合成
[0177][0178]
将100mg二甲基双氢青蒿素、3ml二氯甲烷加入到10ml三口烧瓶中，-25℃条件下将0.1ml三氟化硼乙醚溶液缓慢滴加至反应液中，-25℃反应10h。加入1ml饱和碳酸氢钠溶液
分层，有机相加入1ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:乙酸乙酯＝500:1-100:1)进行纯化，得到50mg白色固体产物i17，收率52.2％。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ5.89(s,1h),5.76(s,1h),5.37(d,j＝12.3hz,1h),4.80(s,1h),4.68(s,1h),2.36(tdd,j＝13.6,6.6,3.9hz,2h),2.02(dt,j＝13.4,3.5hz,3h),1.95-1.71(m,4h),1.55(s,3h),1.45(s,3h),1.43(d,j＝5.1hz,3h),1.39(d,j＝3.1hz,3h),1.02-0.85(m,12h).esi-ms m/z 596.4(m+nh4)
+
.
[0179]
实施例14:化合物i18的合成
[0180][0181]
将200mg巯基双氢青蒿素、194mg阿魏酸、176mg edci、40mg dmap、5ml dmf加入到25ml三口烧瓶中，25℃反应3h。加入10ml乙酸乙酯和2ml 1n盐酸分层，有机相加入5ml水分层，有机相加入5ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:丙酮＝10:1-2:1)进行纯化，得到125mg白色固体产物i18，收率39.3％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ7.55(d,j＝15.7hz,1h),7.09(dd,j＝8.3,1.9hz,1h),7.02(d,j＝1.9hz,1h),6.92(d,j＝8.2hz,1h),6.56(d,j＝15.8hz,1h),5.53(d,j＝11.4hz,1h),5.43(s,1h),3.94(s,3h),2.73(ddd,j＝11.2,7.3,4.0hz,1h),2.37(td,j＝13.9,4.0hz,1h),2.02(dd,j＝14.7,4.5hz,1h),1.96-1.84(m,1h),1.76(t,j＝7.0hz,1h),1.42(s,3h),0.97(d,j＝6.2hz,3h),0.92(d,j＝7.2hz,3h).esi-ms m/z 499.2(m+na)+.
[0182]
实施例15:化合物i19的合成
[0183][0184]
将200mg巯基双氢青蒿素、220mg富马酸单甲酯、412mg dcc、80mg dmap、5mldcm加入到25ml三口烧瓶中，25℃反应10h。加入2ml 1n盐酸分层，有机相加入2ml水分层，有机相加入2ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:丙酮＝10:1-4:1)进行纯化，得到148mg白色固体产物i19，收率53.8％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ7.07(d,j＝15.7hz,1h),6.78(d,j＝15.7hz,1h),5.51(d,j＝11.5hz,1h),5.42(s,1h),3.84(s,3h),2.74(ddd,j＝11.4,7.3,4.2hz,1h),2.38(td,j＝14.0,4.0hz,1h),2.19(s,1h),2.04(ddd,j＝14.6,4.9,2.9hz,1h),1.91(ddd,j＝13.9,6.8,3.5hz,1h),1.43(s,3h),,0.99(d,j＝6.3hz,3h),0.91(d,j＝7.2hz,3h).esi-ms m/z 435.2(m+na)
+
.
[0185]
实施例16：化合物i20的合成
[0186][0187]
将200mg巯基双氢青蒿素、280mg硫辛酸、220mg edci、40mg dmap、5ml dmf加入到25ml三口烧瓶中，25℃反应10h。加入10ml乙酸乙酯和2ml 1n盐酸分层，有机相加入5ml水分层，有机相加入5ml饱和食盐水分层，无水硫酸钠干燥有机相。浓缩有机相通过柱层析法(sio2，石油醚:丙酮＝10:1-5:1)进行纯化，得到180mg油状产物i20，收率55.2％。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ5.41(s,1h),5.39(s,1h),3.58(p,j＝6.5hz,1h),3.30-3.11(m,3h),2.52-2.33(m,2h),2.19(s,2h),2.14-1.99(m,1h),1.99-1.86(m,2h),1.84-1.66(m,4h),1.43(s,3h),0.98(d,j＝6.3hz,3h),0.89(d,j＝7.2hz,3h).esi-ms m/z 511.2(m+na)
+
.
[0188]
药理实验
[0189]
1、实验目的
[0190]
本研究首先通过cd4
+
t细胞体外分化体系检测化合物对cd4
+
t细胞向th17方向分化的抑制活性。
[0191]
2、实验方法
[0192]
2.1 cd4
+
t细胞分离和体外分化
[0193]
磁珠(invitrogen；11415d)分离7-8周c57bl/6小鼠脾中cd4
+
t细胞，6
×
105细胞/孔接种至96孔板中，加入200μl包含10％fbs、2mm l-谷氨酰胺和50μmβ-巯基乙醇的1640完全培养基进行培养，加入抗cd3(2μg/ml；bd pharmingen)和抗cd28(2μg/ml；bd pharmingen)抗体激活细胞。对于th17细胞分化，除了加入抗il-4(10μg/ml)和抗ifn-γ(10μg/ml，bd bioscience，551216)抗体外还需加入th17“细胞因子混合物”，包括il-6(30ng/ml)、tgf-β1(3ng/ml)、il-23(10ng/ml)、tnf-α(10ng/ml)和il-1β(10ng/ml)。不同浓度的化合物与细胞因子一同加入，培养3天后收集培养上清和细胞，评估其对各种t细胞亚型分化的影响。
[0194]
2.2细胞染色和流式分析
[0195]
体外cd4
+
t分化实验细胞用pma(50ng/ml；sigma-aldrich)、ionomycin(750ng/ml；sigma-aldrich)和brefeldin a(5μg/ml；sigma-aldrich)37℃刺激5小时。细胞用固定液重悬，避光固定30min，然后离心去除固定液。重悬细胞，进行胞内il-17a(biolegend，506904，1:100)染色。流式分析为bd facs verse系统，并用flow jo v10软件进行分析。结果如表1.所示。
[0196]
表1.青蒿素类化合物对th17的抑制活性
[0197][0198]
从以上表1中的数据可以看出，本技术实施例的化合物中除i15和i17外，il-17a的含量均随着化合物浓度增大而明显降低，表现出了较强的th17抑制活性，具有可被开发成抗多发性硬化症药物的潜力。

技术特征：
1.式(i)所示的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中,a为氧或不存在；r1为卤素、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基氧基、取代或未取代的c1～c20直链或支链或环状烃基硫基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基氧基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基硫基，20元杂环基硫基，其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c20烷基、卤素、-nh2、c1～c20烷酰氨基、c1-c20卤代烷基、c1-c20羟烷基、c1-c20烷酰氧基；r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c20直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基、取代或未取代的c2-c20直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c10烷基、c1-c10烷氧基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、卤素、-nh2、c1～c10烷酰氨基、c1～c10烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基，未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c20芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；r6选自c1-c20直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；r2选自氢、羟基、巯基、卤素、三氟甲基；或者r1、r2一起构成＝o；r3、r4各自独立地为甲基、氢、羟基、卤素；或r2、r3与其连接的碳原子一起形成-c＝c-双键。2.根据权利要求1所述的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中，
r1为卤素、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷基、或环状烃基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基、取代或未取代的c3～c10环烷基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷氧基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯氧基、取代或未取代的c3～c10环烷基氧基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷硫基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基硫基、取代或未取代的c3～c10环烷基硫基、取代或未取代的含1、2、3或4个氧原子的3-20元氧杂环基氧基、取代或未取代的含1、2、3或4个氧原子的3-20元氧杂环基硫基，其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c10烷基、卤素、-nh2、c1～c10烷酰氨基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、c1-c10烷酰氧基；r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、-nh2、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的a为氧原子或不存在。3.根据权利要求2所述的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中，r1为卤素、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷基、或环状烃基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基、取代或未取代的c3～c10环烷基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷氧基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯氧基、取代或未取代的c3～c10环烷基氧基、取代或未取代的c1～c10直链或支链烷硫基、取代或未取代的c2～c10直链或支链烯基硫基、取代或未取代的c3～c10环烷基硫基、取代或未取代的含1或2个氧原子的5-7元氧杂环烷基氧基、取代或未取代的含1或2个氧原子的5-7元氧杂环烷基硫基，
其中所述取代的取代基选自羟基、c1-c6烷基、卤素、-nh2、c1～c6烷酰氨基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、c1-c6烷酰氧基；r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、-nh2、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基、含1-3个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基、或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的a、r2、r3、r4如权利要求1所定义。4.根据权利要求1所述的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中，r1选自卤素、三氟甲基；r2选自三氟甲基、氢、羟基、巯基、卤素，且r1和r2不同；r3、r4各自独立地为甲基、氢、卤素，且两者不同时为氢、卤素；或r2、r3与其连接的碳原子一起形成-c＝c-双键；a为氧原子或不存在；或者r1选自取代的c1～c20直链或支链或环状烃基、取代的c1～c20直链或支链或环状烃基氧基、取代的c1～c20直链或支链或环状烃基硫基、取代的2-四氢呋喃基氧基、取代的2-四氢吡喃基氧基；所述取代的取代基选自羟基、c1-c20烷基、卤素、-nh2、c1～c20烷酰氨基、c1-c20卤代烷基、c1-c20烷酰氧基；r2为氢或卤素；r3、r4各自独立地为甲基、氢、羟基、卤素，且两者不同时为氢、羟基、卤素；a为氧原子或不存在；
或者r1选自r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c20直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基、取代或未取代的c2-c20直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c10烷基、c1-c10烷氧基、c1-c10卤代烷基、c1-c10羟烷基、卤素、-nh2、c1～c10烷酰氨基、c1～c10烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基，未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c20芳基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；特别地，r5各自独立地选自取代或未取代的c1-c10直链或支链烷基、取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元杂环基、取代或未取代的c6-c12芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂芳基、取代或未取代的c2-c10直链或支链烯基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基、c1-c6羟烷基、卤素、-nh2、c1～c6烷酰氨基、c1～c6烷酰氧基、r6oc(＝o)-、含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的3-7元单环杂环基、含1-3个选自氧、氮、硫的杂原子的5-10元杂螺环基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的c6-c10芳基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-2个选自氧、氮、硫的杂原子的5-6元单环杂环基；r6选自c1-c20直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；特别地，r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的r2选自氢或卤素；r3、r4各自独立地为甲基、氢或卤素，且两者不同时为氢、卤素；a选自氧原子或不存在。5.根据权利要求1所述的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中，
式(i)化合物选自下式(ii)所示的化合物：其中，a1为o或s；r7选自h、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基；所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、-nh2、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基；特别地，r7选自h、含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂螺环基、含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；更特别地，r7选自或者式(i)化合物选自下式(iii)所示的化合物：其中，a1为o或s；r8选自r6oc(＝o)-、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基；所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、-nh2、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基；特别地，r8选自r6oc(＝o)-、未取代或被羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的苯基；r6选自c1-c10直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；特别地，r6选自c1-c4直链或支链烷基、未取代或被选自羟基、硝基、-nh2、卤素、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基的取代基取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂并环基；
c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、-nh2、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；或者式(i)化合物选自下式(vi)所示的化合物：其中，r
11
选自取代或未取代的c3-c20环状烷基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的3-20元杂环基、取代或未取代的c6-c20芳基、取代或未取代的含1-6个选自氧、氮、硫的杂原子的5-20元杂芳基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4烷氧基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、-nh2、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基，或者两个相邻的取代基与相连接的环原子共同构成含1-4个选自氧、氮、硫的杂原子的3-10元单环杂环基；特别地，r
10
选自取代或未取代的c3-c10环状烷基、取代或未取代的含氮的3-10元杂环基，所述取代的取代基选自羟基、硝基、c1-c4烷基、c1-c4卤代烷基、c1-c4羟烷基、卤素、-nh2、c1～c4烷酰氨基、c1～c4烷酰氧基。6.根据权利要求1至5任一项所述的化合物，或其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合物，其中，所述化合物选自以下结构的化合物：
7.制备根据权利要求1-6任一项所述的化合物的方法，所述方法为如下方法之一。方法一：以a1为原料，在氟代试剂存在条件下得到氟代产物i-1，其中，a、r3和r4如相应权利要求所定义；方法二：以a2为原料，与酸r5c(＝o)oh进行缩合反应得到缩合产物i-2，其中，a、r3、r4和r5如相应权利要求所定义；方法三：
以a3为原料，与取代异氰酸酯r5nco或取代异硫氰酸酯r5ncs进行缩合反应得到氨基甲酸酯产物或氨基硫代甲酸酯产物i-3，其中，a、r3、r4和r5如相应权利要求所定义，a1和a2各自独立地选自氧或硫；方法四：以a3为原料，与r9a1h缩合得到醚类产物i-4,其中，a、r3、r4和r9如相应权利要求所定义，a1选自氧或硫，方法五：将环胺化合物与三光气反应得到然后与a3进行缩合反应得到化合物i-5，其中，a、r3和r4如相应权利要求所定义，a1选自氧或硫。8.一种药物组合物，其包含有效量的选自根据权利要求1-6任一项所述的化合物、其立体异构体、药学上可接收的盐和溶剂合物中的一种或多种，以及任选地，一种或多种药学辅料。9.根据权利要求1-6任一项所述的化合物、其立体异构体、药学上可接收的盐或溶剂合
物在制备用于治疗或预防自身免疫疾病的药物中的应用。10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述自身免疫疾病为选自多发性硬化症、类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、系统性血管炎、强直性脊柱炎、皮肌炎、硬皮病、天疱疮、混合性结缔组织病、自身免疫性溶血性贫血、甲状腺自身免疫病、溃疡性结肠炎中的至少一种。

技术总结
本发明涉及式(I)所示的青蒿素类化合物、其制备方法和应用。本发明化合物结构新颖、具有显著抗自身免疫疾病的作用。有显著抗自身免疫疾病的作用。有显著抗自身免疫疾病的作用。


技术研发人员：蒋翔锐 杜昌升 吕婕 张岩 张苏晴 赵庆杰 沈敬山
受保护的技术使用者：同济大学
技术研发日：2022.03.23
技术公布日：2023/10/7