一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法与流程

1.本发明涉及一种油脂中酸价的测定领域，具体涉及一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法。


背景技术：

2.酸价是指中和一克油脂中游离脂肪酸所需的氢氧化钾的毫克数。酸价可以说明油脂的新鲜程度，还与油脂的安全贮藏有密切关系。蜂胶软胶囊为一款功能性保健食品，其内容物主要由蜂胶、植物油、蜂蜡、抗氧化剂等组成，其主要功效成分为蜂胶，具有提升人体免疫力的功效。
3.专利cn 109580613 a公开了一种冷溶剂指示剂滴定法测定糕点、面包中酸价的方法，包括以下步骤：(1)提取液体油脂：将样品粉碎，加入样品体积3-5倍体积的提取剂，并搅拌30-60min，然后静置浸提，过滤后蒸干提取剂，得到液体油脂；(2)测定酸价：将步骤(1)得到的液体油脂用乙醚—异丙醇混合液进行溶解，然后通过滴定法进行酸价测定。本发明通过滴定法对酸价进行测定，提取过程更简洁快捷，且实验数据可靠、重现性好。
4.专利cn 103776825 a公开了一种深颜色油脂酸价的测定方法。所述方法包括以下步骤：准确称取油脂样品适量，置于250ml锥形瓶中，加入50ml的中性乙醚-乙醇混合溶剂，充分摇匀，使油样完全溶解。加入2-3滴1％的酚酞-乙醇溶液，再添加50ml的饱和中性盐水溶液，充分振摇。用已标定的koh标准溶液滴定至盐水溶液层的颜色呈微红色，30s不消失为止。根据消耗koh标准溶液的体积可以计算得到酸价。
5.蜂胶内含有大量的黄酮类和酚酸类物质，本技术的发明人在蜂胶软胶囊留样试验过程中偶然发现蜂胶中的黄酮类和酚酸类物质会慢慢的迁移到油脂中，而黄酮类和酚酸类物质本身能够与碱反应，导致油脂中的酸价逐渐升高。因黄酮类和酚酸类物质并不属于游离脂肪酸一类的物质，为准确表征油脂中的酸价，需要将黄酮类和酚酸类物质从油脂中分离出来。
6.目前，针对蜂胶软胶囊中酸价的测定，最常用的检测方法为《gb 5009.229-2016食品安全国家标准食品中酸价的测定》，方法为先用石油醚i提取软胶囊中的油脂，减压挥去石油醚然i，得到油脂，再采用滴定法测试油脂中的酸价。如专利cn 109430782 a所述，但采用石油醚i提取油脂的方法，无法去除迁移至油脂中黄酮类和酚酸类物质，导致酸价检测结果虚高，无法准确表征油脂中的酸价。查阅相关文献，尚未有将黄酮类和酚酸类物质从油脂中分离后再测定油脂中酸价的文献出现。
7.为解决现有酸价测定方法不能有效去除蜂胶软胶囊中黄酮类和酚酸类物质对油脂中酸价的干扰的问题，本发明针对蜂胶软胶囊，提供了一种油脂中酸价的测定方法，该方法能将大量的黄酮类和酚酸类物质从油脂中分离出来，以降低黄酮类和酚酸类物质对酸价测定的干扰，进而准确表征油脂中的酸价。


技术实现要素：

8.本发明的目的是提供一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，通过将大量的黄酮类和酚酸类物质从油脂中分离出来，以降低黄酮类和酚酸类物质对酸价测定的干扰，进而准确表征油脂中的酸价。
9.为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
10.提供了一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，包含以下步骤：
11.1)提取：蜂胶软胶囊内容物用提取溶剂提取，分离，得到含油脂的提取液1；
12.2)洗涤：提取液1加入无水硫酸钠和洗涤液的混合物，萃取，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤1-5次，得到提取液2；
13.3)油脂制备：将提取液2脱水过滤，减压旋蒸去除溶剂，得到油脂；
14.4)采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
15.优选地，步骤(1)中，所述提取溶剂的体积为蜂胶内容物质量的8-12倍，进一步优选地，为10倍。
16.优选地，步骤1)中所述提取溶剂选自石油醚、正己烷、环己烷。
17.优选地，步骤1)中所述石油醚为石油醚ⅰ，沸程为30-60℃。
18.优选地，步骤1)中所述分离为离心、萃取、过滤、分液中的至少一种，进一步优选地，为离心。
19.优选地，步骤2)中所述的洗涤液选自醇类和水的混合物。进一步优选地，所述醇类为乙醇、甲醇和异丙醇中的至少一种。
20.优选地，步骤2)中所述的洗涤液中醇类的体积份数为30-70％，进一步优选地，为40-60％，最优选地，为50％。
21.优选地，步骤2)中所述洗涤液的用量为提取液1的2-3倍，进一步优选地，为2倍。
22.优选地，步骤3)中所述脱水所用的干燥剂为无水硫酸钠。
23.优选地，步骤4)所述的电位滴定法具体步骤为：称取0.5-2g油脂样品置于滴定杯中，加入60-80ml中性乙醚-乙醇(2：1)混合液，搅拌使油溶解，按照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液滴定至终点；进一步优选地，步骤5)所述的电位滴定法具体步骤为：称取0.8-1.4g油脂样品置于滴定杯中，加入60ml中性乙醚-乙醇(2：1)混合液，搅拌使油溶解，按照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液滴定至终点。
24.优选地，所述氢氧化钠滴定液的浓度为0.05mol/l。
25.相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
26.1)该专利能够将蜂胶软胶囊油脂中的黄酮类和酚酸类物质进行有效的分离，降低黄酮类和酚酸类物质对酸价检测的干扰，进而准确表征油脂中的酸价。
27.2)该专利的专属性好，不会对油脂本身的酸价产生不良影响。
具体实施方式
28.为了使本发明实现的技术手段、创作特征、达成目的与功效易于明白了解，下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，但下述实施例仅为本发明的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本发明的保护范围。值得说明的是，本发明中使用的原料均为普通市售产品，对
其来源不做具体限定。实施例中的所用的技术和科学术语具有与本发明所属技术领域的普通技术人员通常理解的含义。
29.实施例组1
30.实施例1-1：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品9份，每份5g，加50ml石油醚i(30-60℃)，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
31.实施例1-2：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品9份，每份5g，加50ml正己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
32.实施例1-3：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品9份，每份5g，加50ml环己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
33.实施例1-4：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品7g，加56ml石油醚i(30-60℃)，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入112ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％的乙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤4次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
34.实施例1-5：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品10g，加100ml正己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入250ml含饱和无水硫酸钠的体积比为50％的甲醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
35.实施例1-6：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品5g，加60ml环己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入180ml含饱和无水硫酸钠的体积比为60％的异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤2次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到去除黄酮类和酚酸类物质的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
36.对比例1：取混合均匀的蜂胶软胶囊样品3份，每份5g，分别用50ml石油醚i(30-60℃)、正己烷、环己烷溶解，剧烈振摇使充分分散。离心，将离心液转移至100ml平底烧瓶中，
于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到含蜂胶的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
37.表1.实施例1-1、1-2、1-3的酸价结果
[0038][0039][0040]
表2.实施例1-4、1-5和1-6的酸价结果
[0041]
样品酸价，mg/g实施例1-41.03实施例1-51.12实施例1-61.25
[0042]
表3.对比例1的酸价结果
[0043]
提取溶剂石油醚i(30-60℃)正己烷环己烷酸价，mg/g2.021.962.01
[0044]
由表1和表2，可以明显看出，相关变量下，蜂胶软胶囊酸价测定结果差异非常小，说明专利方法具备良好的适用性。
[0045]
由实施例1-1-1-6与对比例1比较可以明显看出，本发明提供的方法明显降低了黄酮类和酚酸类物质对油脂中酸价的影响，分离黄酮类和酚酸类物质的效果明显；并且通过调整相关参数，蜂胶软胶囊酸价测定结果差异非常小，说明专利方法具备良好的适用性。
[0046]
对比例组2：
[0047]
按蜂胶软胶囊的工艺配制，制成不含蜂胶的蜂胶软胶囊阴性样品。
[0048]
对比例2-1：取混合均匀的蜂胶软胶囊阴性样品3份，每份5g，分别用50ml石油醚i(30～60℃)、正己烷、环己烷溶解，剧烈振摇使充分分散。离心，将离心液转移至100ml平底
烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得到油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
[0049]
对比例2-2：取混合均匀的蜂胶软胶囊阴性样品9份，每份5g，加50ml石油醚i(30～60℃)，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得经洗涤的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
[0050]
对比例2-3：取混合均匀的蜂胶软胶囊阴性样品9份，每份5g，加50ml正己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得经洗涤的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
[0051]
对比例2-4：取混合均匀的蜂胶软胶囊阴性样品9份，每份5g，加50ml环己烷，剧烈振摇，使样品充分分散均匀。离心，将离心液转移至萃取漏斗中，每份加入100ml含饱和无水硫酸钠的体积比为40％、50％、60％的乙醇水、甲醇水、异丙醇水洗涤液，剧烈振摇萃取约1min，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤3次。将提取溶剂层经无水硫酸钠脱水过滤，转移至100ml平底烧瓶中，于50℃水浴下减压旋转蒸干，得经处理的油脂。取油脂采用电位滴定法测定油脂中的酸价。
[0052]
表4.对比例2-1的酸价结果
[0053]
提取溶剂石油醚i(30-60℃)正己烷环己烷酸价，mg/g1.241.231.19
[0054]
表5.对比例2-2、2-3、2-4的酸价结果
[0055]
[0056][0057]
由表4、表5结果可知，与对比例2-1数据相比，各对比试验数据下的酸价差异很小，确定专利方法对油脂本身的酸价影响非常小，说明专利方法具备良好的专属性。
[0058]
最后应当说明的是，以上内容仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，本领域的普通技术人员对本发明的技术方案进行的简单修改或者等同替换，均不脱离本发明技术方案的实质和范围。

技术特征：
1.一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，包含以下步骤：1)提取：蜂胶软胶囊内容物用提取溶剂提取，分离，得到含油脂的提取液1；2)洗涤：提取液1加入无水硫酸钠和洗涤液的混合物，萃取，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤1-5次，得到提取液2；3)油脂制备：将提取液2脱水过滤，减压旋蒸去除溶剂，得到油脂；4)采用电位滴定法测定油脂中的酸价。2.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤1)中所述提取溶剂的用量为8-12倍；优选地，所述提取溶剂的用量为10倍。3.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤1)中所述提取溶剂选自石油醚、正己烷、环己烷中的至少一种；优选地，所述石油醚为石油醚ⅰ，沸程为30-60℃。4.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤1)中所述分离为离心、萃取、过滤、分液中的至少一种；优选地，所述分离为离心。5.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤2)中所述洗涤液为醇类和水的混合物。6.根据权利要求5所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤2)中所述醇类选自乙醇、甲醇和异丙醇中的至少一种。7.根据权利要求5所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤2)中所述洗涤液中醇类体积份数为30-70％；优选地，所述洗涤液中醇类体积份数为40-60％。8.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤2)中所述洗涤液的用量为提取液1的2-3倍。9.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤3)所述脱水所用的干燥剂为无水硫酸钠。10.根据权利要求1所述的一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，其特征在于，步骤4)所述的电位滴定法具体步骤为：称取0.5-2g油脂样品置于滴定杯中，加入60-80ml中性乙醚-乙醇(2：1)混合液，搅拌使油溶解，按照电位滴定法，用氢氧化钠滴定液滴定至终点；所述氢氧化钠滴定液的浓度为0.05mol/l。

技术总结
本发明提供了一种测定蜂胶软胶囊中酸价的方法，涉及一种油脂中酸价的测定领域领域。具体包含以下步骤：1)提取：蜂胶软胶囊内容物用提取溶剂提取，分离，得到含油脂的提取液1；2)洗涤：提取液1加入无水硫酸钠和洗涤液的混合物，萃取，静置分层，弃去下层洗涤液，同法洗涤1-5次，得到提取液2；3)油脂制备：将提取液2脱水过滤，减压旋蒸去除溶剂，得到油脂；4)采用电位滴定法测定油脂中的酸价。该方法将蜂胶软胶囊油脂中的黄酮类和酚酸类物质进行有效的分离，降低黄酮类和酚酸类物质对酸价检测的干扰，进而准确表征油脂中的酸价。进而准确表征油脂中的酸价。


技术研发人员：杨祖伟 方文凯 黄玲 李珍 付小蓉 苏杜威 黄双庆 陈翠婷 黄晓仪 吴振知
受保护的技术使用者：汤臣倍健股份有限公司
技术研发日：2023.03.06
技术公布日：2023/7/11