一种CCR4小分子拮抗剂及其用途的制作方法

一种ccr4小分子拮抗剂及其用途
技术领域
1.本技术属于医药领域，具体地，涉及用于一种ccr4小分子拮抗剂及其用途。


背景技术：

2.ccr4(c-c趋化因子受体4型)属于g蛋白偶联受体，是趋化因子受体家族成员之一，广泛表达于免疫细胞表面，特别是th2细胞及treg细胞。ccr4主要的内源性配体包括ccl22(又名巨噬细胞衍生的趋化因子，mdc)以及ccl17(又名胸腺活化调节趋化因子，tarc)。ccr4与内源性配体结合，可激活偶联的g蛋白，进而发生级联细胞激活效应，通过一系列的信息传递实现趋化靶细胞向特定位置迁移，发挥生物学效应。
3.研究证实，ccr4与特性应皮炎、哮喘、过敏性鼻炎、异位性皮炎、系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎等免疫相关性疾病的发生发展密切相关。同时，ccr4在肿瘤微环境中起到调控作用，诱导肿瘤的免疫逃逸和促进肿瘤细胞的转移等。因此，ccr4已经成为治疗免疫相关性疾病和肿瘤免疫治疗的重要的药物靶标，研发选择性ccr4小分子拮抗剂将为上述疾病的治疗提供新的选择。
4.目前为止，只有一款ccr4的单克隆抗体mogamulizumab被批准上市，用于治疗复发或难治性ccr4阳性的成人t细胞白血病淋巴瘤，而仍未有小分子ccr4拮抗剂被批准上市。wo2018/022992涉及flx475，是目前临床进展最快的小分子ccr4拮抗剂，处于临床ii期研究。大部分小分子ccr4拮抗剂都处于生物活性测试或临床研究阶段。由此可见，研发小分子ccr4拮抗剂具有良好的应用前景。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种新型的ccr4小分子拮抗剂，此类化合物在抑制ccr4方面具有良好的活性，并表现出优异的效果和作用。
6.在第一方面，本技术提供了式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，
[0007][0008]
其中，
[0009]
x1、x2、x3和x4中的一者为羰基，其余各自独立地选自cra或n；
[0010]
r1各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基磺酰基、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基、-(ch2)
n-氰基或-(ch2)
n-羧基；
[0011]
r2选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基或-(ch2)
n-氰基；
[0012]
r3选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基或-(ch2)
n-氰基；
[0013]
r4选自
[0014]
x、y、v和w各自独立地选自crb或n；
[0015]
ra各自独立地选自h、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基、c
1-c6烷氧基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、苯基、氨基、氰基或酰胺基，其中所述c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、苯基、氨基或酰胺基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0016]
rb各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、羟基、氨基、氰基、羧基或酰胺基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、氨基或酰胺基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0017]
rc各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基、氨基、氰基或羧基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基或氨基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0018]
rd各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基、氨基、氰基或羧基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基或氨基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0019]
re为-l-rf；
[0020]
rf选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、rgc(o)nh-、rgs(o)2nh-、ch3(ch2)nc(o)nh-、ch3(ch2)nnhc(o)-、ch3(ch2)noc(o)nh-、ch3(ch2)ns(o)2nh-、ch3(ch2)nnhs(o)
2-、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基、-(ch2)
n-氰基或-(ch2)
n-羧基，其中所述c
1-c3烷基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、rgc(o)nh-、rgs(o)2nh-、ch3(ch2)nc(o)nh-、ch3(ch2)nnhc(o)-、ch3(ch2)ns(o)2nh-、ch3(ch2)nnhs(o)
2-、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基或-(ch2)
n-羧基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0021]
rg选自c
3-c6环烷基或3-6元杂环基；
[0022]
l选自键、-c(o)-、-s(o)
2-、-c(o)(ch2)
n-、-s(o)2(ch2)
n-、c
1-c3亚烷基或c
3-c6亚环烷基，其中所述c
1-c3亚烷基或c
3-c6亚环烷基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；
[0023]
z1是0至3的任一整数；
[0024]
z2是0至3的任一整数；
[0025]
z3是0至4的任一整数；
[0026]
z4是0至2的任一整数；并且
[0027]
n是0至3的任一整数。
[0028]
在本发明的另一个实施方式中，
[0029]
x1和x2中的一者为羰基；
[0030]
x1和x2中的另一者以及x3和x4各自独立地选自cra或n。
[0031]
在本发明的另一个实施方式中，
[0032]
z1是2；
[0033]
z2是0或1；
[0034]
z3是0或1；并且
[0035]
z4是1。
[0036]
在本发明的一个优选实施方式中，
[0037]
r1各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基磺酰基、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基或氰基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、正丙基、异丙基或甲磺酰基；
[0038]
r2选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基或c
3-c4环烷基，优选地选自h、甲基、乙基、正丙基或异丙基；并且
[0039]
r3选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基或c
3-c4环烷基，优选地选自h、甲基、乙基、正丙基或异丙基。
[0040]
在本发明的一个优选实施方式中，
[0041]
ra各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、4元杂环基、氨基、氰基或酰胺基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、4元杂环基、氨基或酰胺基任选被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代，rb优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、环丙基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、羟甲基、1，1-二甲基羟甲基、氰基或-c(o)nhch3；
[0042]
rb各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、羟基、氰基或羧基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基或氰基；
[0043]
rc各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基或氰基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、羟基或氰基；并且
[0044]
rd各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基或氰基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、羟基或氰基。
[0045]
在本发明的一个优选实施方式中，
[0046]
re为-l-rf；
[0047]
rf选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷基磺酰基、5-6元杂芳基、rgc(o)nh-、rgs(o)2nh-、ch3(ch2)nc(o)nh-、ch3(ch2)nnhc(o)-、ch3(ch2)ns(o)2nh-、ch3(ch2)nnhs(o)
2-、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基、-(ch2)
n-氰基或-(ch2)
n-羧基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、羟基、羧基、氧杂环丁烷基、乙酰胺基、甲磺酰基、甲磺酰胺基或ch3oc(o)nh-；
[0048]
rg选自c
3-c4环烷基或3-4元杂环基，优选地选自环丙烷基、环丁烷基或氧杂环丁烷基；并且
[0049]
l选自键、-c(o)-、-s(o)
2-、或者任选地被甲基或乙基取代的亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基或亚环己基。
[0050]
在本发明的一个优选实施方式中，所述式(i)化合物具有下式结构：
[0051][0052]
为了简明起见，后文所述“式(i)化合物”或“本技术的化合物”也可以涵盖式(i)化合物的任意同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物。
[0053]
术语“光学异构体”意指，当化合物具有一个或更多个手性中心时，每个手性中心可以存在r构型或s构型，由此构成的各种异构体为光学异构体。光学异构体包括所有的非对映异构体、对映异构体、内消旋体、外消旋体或其混合物形式。例如，通过手性色谱柱或通过手性合成可以分离光学异构体。
[0054]
术语“几何异构体”意指，当化合物中存在双键时，该化合物可以存在顺式异构体、反式异构体、e型异构体和z型异构体。几何异构体包括顺式异构体、反式异构体、e型异构体、z型异构体或其混合物形式。
[0055]
术语“互变异构体”指因分子中某一原子在两个位置迅速移动而产生的异构体。本领域技术人员可以理解：互变异构体之间可以互相转变，在某一状态下可能会达到一种平衡状态而共存。
[0056]
除非另有指明，本文提到“式(i)化合物”或“本发明的化合物”时也涵盖该化合物中任一个原子被其同位素原子代替而得到的同位素标记化合物。本发明包括式(i)化合物的所有药学上可接受的同位素标记化合物，其中，一个或者多个原子被具有与通常在自然界中所发现的原子相同原子序数但是不同原子质量或者质量数的原子所替换。
[0057]
适用于包含在本发明的化合物中的同位素的实例包括氢的同位素，诸如2h(d)和3h(t)，碳的同位素，诸如
11
c、
13
c和
14
c，氯的同位素，诸如
37
cl，氟的同位素，诸如
18
f，碘的同位素，诸如
123
i和
125
i，氮的同位素，诸如
13
n和
15
n，氧的同位素，诸如
15
o、
17
o和
18
o，以及硫的同位素，诸如
35
s。
[0058]
式(i)的同位素标记化合物一般可以通过本领域技术人员已知的常规技术或者通过使用合适的同位素标记试剂代替先前使用的非标记试剂以类似于在本文所附的实例和制备中所描述的方法，来进行制备。
[0059]
式(i)化合物可以药学上可接受的盐的形式存在，比如，式(i)化合物的酸加成盐和/或碱加成盐。除非另有指明，否则本文所用的“药学上可接受的盐”包括可出现于式(i)化合物内的酸加成盐或碱加成盐。
[0060]
式(i)化合物的药学上可接受的盐类包括其酸加成盐和碱加成盐。适当的酸加成盐是由形成无毒性盐的酸所形成的。其实例包括但不限于：乙酸盐、己二酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环己胺磺酸盐、乙二磺酸盐、甲酸盐、反丁烯二酸盐、葡萄庚糖酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、六氟磷酸盐、2-(4-羟苄基)苯甲酸盐、氢氯化物/氯化物、氢溴化物/溴化物、氢碘化物/碘化物、2-羟乙磺酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、顺丁烯二酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、萘酸盐、2-萘磺酸盐、烟碱酸盐、硝酸盐、乳清酸盐、草酸盐、十六酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、焦谷氨酸盐、葡萄糖二酸盐、硬脂酸盐、水杨酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐和三氟乙酸盐。适当的碱加成盐是由形成无毒性盐的碱所形成的。其实例包括但不限于：铝、精氨酸、钙、胆碱、二乙胺、二乙醇胺、甘氨酸、赖氨酸、镁、葡甲胺、乙醇胺、钾、钠、氨丁三醇和锌盐。还可形成酸和碱的半盐，例如半硫酸盐和半钙盐。关于合适的盐的综述，参见handbook of pharmaceutical salts：properties，selection and useby stahl and wermuth(wiley-vch，2002)。用于制备本文中所述的化合物的药学上可接受的盐的方法是本领域技术人员已知的。
[0061]
本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式(包括水合形式)存在。一般而言，式(i)化合物无论以溶剂化形式存在或以未溶剂化形式存在，其都包括在本发明的范围内。
[0062]
本发明的某些化合物可以不同晶型或不定型形式存在，无论以何种形式存在，式(i)化合物都包括在本发明的范围内。
[0063]
为了避免歧义，下面对本文中所使用的术语给出定义。除非另有说明，本文所用术语的含义如下。
[0064]
术语“药学上可接受的”是指相应的化合物、载体或分子适于给予人。优选地，该术语是指由管理机构例如cfda(中国)、emea(欧洲)、fda(美国)等任意国家管理机构认证的用于哺乳动物优选人。
[0065]“前体药”是指通过与酶、胃酸等在生理条件下在活体内例如通过各自在酶催化下进行的氧化、还原、水解等反应转化为本发明化合物的衍生物。
[0066]“代谢物”是指在细胞或有机体优选人中源自本发明任意化合物的所有分子。
[0067]
术语“羰基”是指-c(＝o)-；术语“羟基”是指-oh；术语“氨基”是指-nh2；术语“硝基”是指-no2；并且术语“氰基”是指-cn。
[0068]
术语“酰基”是指-c(＝o)-r；术语“酰胺基”是指-c(＝o)-nh2；术语“磺酰基”是指-s(＝o)
2-r；并且术语“磺酰胺基”是指-s(＝o)
2-nh2。
[0069]
在本文中使用时，术语“被取代”是指基团中的一个或多个(优选1至5个，更优选1至3个)氢原子独立地被相应数目的取代基所代替。
[0070]
在本文中使用时，术语“各自独立地”是指当取代基的个数超过一个时，这些取代基可以相同也可以不同。
[0071]
在本文中使用时，术语“任选”或“任选地”表示其所描述的事件可以发生或不发生。例如，一个基团“任选地被取代”表示：该基团可以是未被取代的，也可以是被取代的。
[0072]
在本文中使用时，术语“烷基”是指饱和的脂族烃，包括直链及支链。在一些实施方式中，烷基基团具有1-8个、或1-6个、或1-3个碳原子。例如，术语“c
1-8
烷基”是指具有1-8个碳原子的直链或支链原子团。术语“c
1-8
烷基”在其定义中包括术语“c
1-6
烷基”、“c
1-c3烷基”和“c
1-c4烷基”。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、3-戊基、异戊基、新戊基、(r)-2-甲基丁基、(s)-2-甲基丁基、3-甲基丁基、2，3-二甲基丙基、2，3-二甲基丁基、己基等。烷基基团可任选地被一或多个(例如，1至5个)适当的取代基所取代。
[0073]
在本文中使用时，术语“卤代烷基”是指具有一或多个卤素取代基的烷基基团(至多全卤代烷基，即，烷基基团的每个氢原子均被卤素原子所取代)。例如，术语“c
1-6
卤代烷基”是指具有一或多个卤素取代基的c
1-6
烷基基团(至多全卤代烷基，即，烷基基团的每个氢原子均被卤素原子所取代)。另举一例，术语“c
1-4
卤代烷基”是指具有一或多个卤素取代基的c
1-4
烷基基团(至多全卤代烷基，即，烷基基团的每个氢原子均被卤素原子所取代)；术语“c
1-3
卤代烷基”是指具有一或多个卤素取代基的c
1-3
烷基基团(至多全卤代烷基，即，烷基基团的每个氢原子均被卤素原子所取代)；且术语“c
1-2
卤代烷基”是指具有一或多个卤素取代基的c
1-2
烷基基团(即，甲基或乙基)(至多全卤代烷基，即，烷基基团的每个氢原子均被卤素原子所取代)。再另举一例，术语“c1卤代烷基”是指具有1、2或3个卤素取代基的甲基基团。卤代烷基基团的例子包括：cf3、c2f5、chf2、ch2f、ch2cf3、ch2cl等。
[0074]
在本文中使用时，术语“n元杂环基”是指具有m个形成环的碳原子和(n-m)个形成环的杂原子的杂环烷基，所述杂原子选自o、s及n。例如，4-7元杂环基包括但不限于氧杂环丁烷、硫杂环丁烷、氮杂环丁烷、四氢呋喃、四氢噻吩、吡咯烷、四氢吡喃、四氢噻喃、哌啶、吗啉、哌嗪、氧杂环庚烷、硫杂环庚烷、氮杂环庚烷。此外，杂环基可任选地被一或多个适当的
取代基所取代。
[0075]
在本文中使用时，术语“n元杂芳基”是指具有m个形成芳环的碳原子和(n-m)个形成芳环的杂原子的杂芳基，所述杂原子选自o、s及n。例如，5-6元杂芳基包括但不限于吡嗪、吡唑、吡咯、呋喃、噻吩、噻唑、吡啶。此外，杂芳基可任选地被一或多个适当的取代基所取代。
[0076]
本文中，与取代基个数、碳原子个数、环原子个数相关的数目范围表示该范围内所有整数的逐个列举，而范围仅是作为一种简化的表示法。例如：“1-4个取代基”表示1、2、3或4个取代基；“3-8个环原子”表示3个、4个、5个、6个、7个或8个环原子。因此，与取代基个数、碳原子个数、环原子个数相关的数目范围也涵盖其任意一个子范围，且每一个子范围也视为被本文公开。
[0077]
本技术化合物可按有机合成领域技术人员已知的多种方式制备。本领域技术人员可以参照本技术具体实施例的具体化合物的合成路线，对反应原料和反应条件进行适当调整而得到其它化合物的合成方法。
[0078]
在第二方面，本技术提供了一种药物组合物，其包含式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，以及药学上可接受的载体。
[0079]
药学上可接受的载体可以是有机或无机惰性载体材料，例如，合适的载体包括水、明胶、阿拉伯树胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油、聚亚烷基二醇、凡士林、甘露醇、纤维素、纤维素衍生物、糖精钠、葡萄糖、蔗糖、碳酸镁、盐水、甘油、乙醇等。此外，药物组合物还可含有其他药物添加剂，例如调味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲剂、稀释剂、黏合剂、润湿剂、崩解剂、润滑剂、助流剂等。
[0080]
本技术的药物组合物的剂型可以是液体剂型、固体剂型或半固体剂型。液体剂型可以是溶液剂(包括真溶液和胶体溶液)、乳剂(包括o/w型、w/o型和复乳)、混悬剂、注射剂(包括水针剂、粉针剂和输液)、滴眼剂、滴鼻剂、洗剂和搽剂等；固体剂型可以是片剂(包括普通片、肠溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡腾片、口腔崩解片)、胶囊(包括硬胶囊、软胶囊、肠溶胶囊)、颗粒剂、散剂、丸剂、栓剂、膜剂、贴片、气雾剂、喷雾剂等；半固体剂型可以是软膏剂、凝胶剂、糊剂等。本技术的药物组合物可以制成普通制剂、也制成是缓释制剂、控释制剂、靶向制剂及各种微粒给药系统。
[0081]
在一些实施方式中，所述药物组合物的剂型选自片剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂、吸入剂和注射剂。
[0082]
用于口服的固体剂型可以包括胶囊、片剂、丸剂、粉末和颗粒。在这种固体剂型中，将活性化合物与至少一种惰性赋型剂(或载体)(例如，柠檬酸钠或磷酸二钙)混合，其中还可以包括：(a)填料或混合剂(例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸)；(b)粘结剂(例如，羧基甲基纤维素、褐藻酸酯、凝胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯树胶)；(c)保湿剂(例如，丙三醇)；(d)崩解剂(例如，琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些合成的硅酸酯、碳酸钠)；(e)溶液阻滞剂(例如，石蜡)；(f)吸收促进剂(例如，季铵化合物)；(g)润湿剂(例如，十六烷醇和单硬脂酸丙三醇酯)；(h)吸附剂(例如，高岭土和斑脱土)和(i)润滑剂(例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠)或其混合物混合。
[0083]
适于肠胃外施用的制剂例如注射剂可以包括适于注射的水性和非水性等渗无菌溶液，以及水性和非水性无菌混悬剂。本文提供的肠胃外制剂任选地包含在单位剂量或多剂量密封容器(例如安瓿)中，并且可以储存在仅需要于即将使用前添加无菌液体载体(例如注射用水)的冷冻干燥(冻干)条件下。用于重构药物组合物(例如在注射前)的合适稀释剂的实例包括抑菌性注射用水、5％葡萄糖水溶液、磷酸盐缓冲盐水、林格氏(ringer
′
s)溶液、盐水、无菌水、去离子水及其组合。
[0084]
喷雾剂可含有赋形剂，如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉剂，或这些物质的混合物。喷雾剂可另外含有常规推进剂，例如氯氟烃和挥发性未经取代的烃，例如丁烷和丙烷。吸入剂可包含赋形剂如乳糖，或是包含如聚环氧乙烷-9-月桂基醚，甘氨胆酸盐和脱氧胆酸盐的含水溶液，或是油性溶液以鼻滴剂或喷雾，或凝胶形式施用。
[0085]
本技术的化合物在其药物组合物中的含量可以根据实际需要(例如剂型、施用方式、施用对象等)进行调整，例如为0.1-95重量％，例如1-95重量％，5-90重量％，10-80重量％等。
[0086]
具体地，本技术的药物组合物中可以特别地包含0.01-10g(例如0.05g、0.1g、0.5g、1g或5g等)的本技术的化合物。
[0087]
在第三方面，本技术提供了式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物在制备用于在有需要的受试者中治疗或预防由ccr4介导的疾病或病症的作为ccr4拮抗剂的药物中的用途。式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物可以用于在有需要的受试者中治疗或预防由ccr4介导的疾病或病症。
[0088]
本技术使用的术语“受试者”是指可潜在地从用式(i)化合物进行的治疗中受益的任何人类或非人类生物体。示例性受试者包括任何年龄的人类或哺乳动物。优选地，所述受试者是人。
[0089]
本文使用的术语“治疗”包括在哺乳动物、尤其人类中治疗疾病或病症且包括：(a)抑制感染、疾病或病症，即遏制或延缓感染、疾病或病症的发展；(b)缓解感染、疾病或病症，即引起疾病或病症的消退，和/或(c)感染、疾病或病症的治愈。
[0090]
本文使用的术语“预防”包括在哺乳动物、尤其人类中进行预防性疗法以旨在降低感染、疾病或病症发生的可能性。可以根据与一般群体相比感染或患有疾病或病症的风险增加为因素来选择接受预防性疗法的患者。“预防”可以包括对尚未呈现感染或临床病况的受试者进行处置，和预防相同或类似感染或临床病况的第二次出现。
[0091]
本技术的发明人发现，本技术的化合物能够实现对ccr4介导的细胞迁移的抑制。因此，本技术的化合物可以用于预防或治疗由ccr4介导的疾病或病症。
[0092]
在一些实施方式中，所述由ccr4介导的疾病或病症可以选自特性应皮炎、哮喘、过敏性鼻炎、异位性皮炎、系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎中的一种或多种免疫相关性疾病。在另一些实施方式中，所述由ccr4介导的疾病或病症可以为癌症。
[0093]
在第四方面，本技术提供了一种治疗或预防由ccr4介导的疾病或病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前
体药、或其代谢物。
[0094]
在一些实施方式中，本发明化合物可以通过口服、肠胃外、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、经肺、经呼吸道、经阴道、经直肠、腹膜内、病灶内、病灶周围等途径施用。
[0095]“治疗有效量”是指本技术化合物当单独或组合给药时有效治疗或预防由ccr4介导的疾病或病症的量。
[0096]
具体施用剂量将取决于施用途径、疾病的严重程度、患者的年龄和体重，以及主治医师在确定最适合特定患者的个体方案和剂量水平时通常考虑的其他因素。例如，本技术的化合物的日剂量可以特别地为0.001-150mg/kg体重(例如0.1mg/kg体重、1mg/kg体重、10mg/kg体重或100mg/kg体重等)。
[0097]
具体的施用频率可以由相关领域的技术人员确定，例如为1天1次、2天1次、3天1次、4天1次、5天1次、6天1次、1天2次、1天3次等。
[0098]
本领域技术人员能够理解，在本技术的一个方面中描述的定义和优选项同样适用于其他方面。本领域技术人员能够明了本技术各个方面的实施方式可以以各种方式组合，而不偏离本技术的主题和思想，这些组合也包括在本技术的范围内。
具体实施方式
[0099]
本技术式(i)化合物可以用有机合成领域的技术人员所熟悉的多种方法合成。以下具体实施例中给出了一些示例性的式(i)化合物的合成方法，这些方法是合成化学领域所公知的。显然，参照本专利中的示例性方案，本领域技术人员可以适当调整反应物、反应条件和保护基团而容易地设计其他式(i)化合物的合成路线。
[0100]
下面进一步结合实施例来阐述本发明；但这些实施例并不限制本发明的范围。除非另有声明，各实施例中所用的所有反应物均从商业途径获得；合成实验和产物分析检测中所用仪器设备等均为有机合成中通常使用的常规仪器和设备。
[0101]
中间体a的合成路线
[0102][0103]
1)化合物a-2的合成
[0104]
室温下，将s-扁桃酸(56.0g，368mmol)溶于异丙醇(420ml)和乙醇(280ml)的混合溶剂中。升温至60℃，缓慢滴加化合物a-1(70.0g，368mmol)。60℃搅拌30分钟，室温搅拌24小时。大量白色固体析出，过滤，滤饼用丙酮(105ml)洗涤，真空干燥。加入异丙醇(315ml)和乙醇(210ml)的混合溶剂，60℃搅拌30分钟。冷却至室温，搅拌12小时。大量白色固体析出，过滤，滤饼用丙酮(70ml)洗涤，真空干燥，得到化合物a-2。
[0105]
2)中间体a的合成
[0106]
室温下，将化合物a-2(45.0g，131mmol)溶于二氯甲烷(400ml)和氢氧化钠水溶液(4mol/l，120ml)。反应混合物在室温下搅拌1小时。静止分液，有机相用水(300ml
×
3)洗涤，
无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，得到中间体a。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.71(d，j＝8.8hz，1h)，7.48(d，j＝2.4hz，1h)，7.41(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，4.35-4.24(m，1h)，1.92(s，2h)，1.20(d，j＝6.4hz，3h)。
[0107]
中间体b的合成路线
[0108][0109]
1)化合物b-2的合成
[0110]
室温下，将2-氯-5-吡啶硼酸(25.0g，159mmol)和3-碘代氮杂丁烷-1-羧酸叔丁酯(25.0g，88.3mmol)溶于异丙醇(400ml)中。加入碘化镍(2.76g，8.83mmol)，(1r，2r)-2-氨基环己醇盐酸盐(1.34g，8.83mmol)和双(三甲基硅基)氨基钠(1mol/l四氢呋喃溶液，177ml，177mmol)。氮气保护下，80℃搅拌18小时。冷却至室温，缓慢倒入冰水(250ml)中淬灭。用甲基叔丁基醚萃取(250ml
×
4)，合并有机相。饱和食盐水洗涤(150ml
×
3)，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到化合物b-2。ms-esi∶m/z269.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ8.30(d，j＝2.4hz，1h)，7.71(dd，j＝8.0，2.4hz，1h)，7.35(d，j＝8.4hz，1h)，4.38(t，j＝8.8hz，2h)，3.96-3.88(m，2h)，3.78-3.69(m，1h)，1.47(s，9h)。
[0111]
2)化合物b-3的合成
[0112]
室温下，将化合物b-2(26.0g，96.8mmol)和(s)-4-异丙基恶唑烷-2-酮(25.0g，194mmol)溶于无水甲苯(400ml)中。加入三(二亚苄基丙酮)二钯(4.43g，4.84mmol)，2-二环己基磷-2，4，6-三异丙基联苯(2.31g，4.84mmol)和碳酸铯(31.5g，96.8mmol)。氮气置换，100℃搅拌16小时。冷却至室温，过滤。滤饼用甲基叔丁基醚(500ml)洗涤。有机相用饱和食盐水(500ml
×
4)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，所得粗品再用石油醚(200ml)打浆，过滤，滤饼用石油醚(30ml)洗涤，干燥，得到化合物b-3。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.29(d，j＝2.0hz，1h)，8.11(d，j＝8.8hz，1h)，7.88(dd，j＝8.4，2.4hz，1h)，4.92-4.85(m，1h)，4.47-4.41(m，1h)，4.40-4.33(m，3h)，3.98-3.90(m，2h)，3.89-3.81(m，1h)，2.51-2.40(m，1h)，1.47(s，9h)，0.94(d，j＝7.2hz，3h)，0.82(d，j＝6.8hz，3h)。
[0113]
3)化合物b-4的合成
[0114]
室温下，将化合物b-3(10.0g，27.7mmol)溶于无水乙酸(200ml)。氮气保护下，加入二氧化铂(1.00g，4.40mmol)。氢气置换，在氢气(15psi)氛围下室温反应15小时。过滤，滤饼用甲醇(100ml)洗涤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(100％甲醇)纯化得到粗品。粗品溶于二氯甲烷(50ml)，加入1mol/l的氢氧化钠水溶液(80ml)至ph～13。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得化合物b-4。1h nmr(400mhz，cd3od)δ4.00-3.88(m，2h)，3.70-3.60(m，2h)，3.00-2.89(m，2h)，2.51(td，j＝12.0，2.8hz，1h)，2.36-2.23(m，1h)，2.16(dd，j＝12.0，10.8hz，1h)，1.84-1.75(m，1h)，1.72-1.57(m，2h)，1.55-1.45(m，1h)，1.43(s，9h)，1.18-0.93(m，1h)。
[0115]
4)中间体b的合成
[0116]
室温下，将化合物b-4(43.0g，180mmol)溶于甲基叔丁基醚(1000ml)。回流状态下，分批加入s-扁桃酸(13.6g，89.5mmol)，搅拌16小时。冷却至室温，大量白色固体析出，过滤。滤饼用甲基叔丁基醚(400ml)洗涤，溶于二氯甲烷(500ml)和1mol/l的氢氧化钠水溶液(800ml)。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤。减压浓缩得到粗品。室温下，将该粗品溶于甲基叔丁基醚(500ml)。回流状态下，分批加入s-扁桃酸(8.23g，54.1mmol)，搅拌16小时。大量白色固体析出，过滤，滤饼用甲基叔丁基醚(300ml)洗涤后，溶于二氯甲烷(500ml)和1mol/l的氢氧化钠水溶液(800ml)。有机相用无水硫酸钠干燥，过滤。减压浓缩，得到中间体b。1h nmr(400mhz，cd3od)δ4.00-3.88(m，2h)，3.70-3.60(m，2h)，3.00-2.89(m，2h)，2.50(td，j＝12.0，2.8hz，1h)，2.35-2.23(m，1h)，2.15(dd，j＝12.0，10.4hz，1h)，1.85-1.75(m，1h)，1.72-1.56(m，2h)，1.55-1.45(m，1h)，1.43(s，9h)，1.07-0.93(m，1h)。
[0117]
中间体c的合成路线
[0118][0119]
1)化合物c-1的合成
[0120]
室温下，将中间体b(10.0g，36.1mmol)和2-碘乙醇(12.4g，72.3mmol)溶于乙腈(100ml)中。加入碳酸钾(15.0g，108mmol)。80℃搅拌16小时。冷却至室温后，加入二氯甲烷(200ml)稀释，过滤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(100％甲醇)纯化得到粗品。粗品用二氯甲烷(150ml)溶解，过滤。滤液减压浓缩，得到化合物c-1。1h nmr(400mhz，cd3od)δ4.01-3.85(m，2h)，3.70(t，j＝6.0hz，2h)，3.67-3.57(m，2h)，3.10-2.94(m，2h)，2.66(t，j＝6.0hz，2h)，2.37-2.16(m，2h)，1.95-1.52(m，5h)，1.39(s，9h)，0.98-0.81(m，1h)。
[0121]
2)中间体c的合成
[0122]
室温下，将化合物c-1(3.00g，9.49mmol)溶于二氧六环(25ml)中，缓慢加入盐酸二氧六环溶液(4mol/l，25ml)。室温下搅拌4小时，减压浓缩得到中间体c。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 185.1[m+h]
+
。
[0123]
中间体d的合成路线
[0124][0125]
1)化合物d-2的合成
[0126]
室温下，将化合物d-1(5.00g，35.2mmol)溶于四氢呋喃(30ml)和水(30ml)的混合物溶剂中，加入氢氧化锂(4.43g，106mmol)。25℃搅拌15小时。用1mol/l盐酸水溶液调节反应液至ph～4，二氯甲烷(50ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到化合物d-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ12.57(s，1h)，3.42-3.37(m，2h)，2.99-2.92(m，2h)，1.47(s，3h)。
[0127]
2)化合物d-3的合成
[0128]
室温下，将中间体b(3.00g，12.5mmol)，化合物d-2(1.76g，13.7mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(3.95g，18.7mmol)溶于1，2-二氯乙烷(150ml)中。-5℃下缓慢滴加醋酸(0.7ml，
12.5mmol)。20℃搅拌15小时。补加化合物d-2(800mg，6.24mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.32g，6.24mmol)。20℃搅拌3小时，补加化合物d-2(800mg，6.24mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(1.32g，6.24mmol)。室温下搅拌过夜，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝10/1)纯化，得到化合物d-3。1h nmr(400mhz，cd3od)δ4.04-3.95(m，2h)，3.77-3.67(m，2h)，3.24-3.16(m，1h)，2.77-2.68(m，2h)，2.61-2.53(m，1h)，2.43-2.36(m，1h)，2.29(t，j＝12.0hz，1h)，2.13-2.02(m，2h)，1.96-1.81(m，4h)，1.79-1.68(m，1h)，1.43(s，9h)，1.42-1.40(m，1h)，1.39(s，3h)，1.17-1.05(m，1h)。
[0129]
3)化合物d-4的合成
[0130]
室温下，将化合物d-3(2.60g，7.38mmol)溶于二氯甲烷(30ml)和甲醇(3ml)的混合溶剂中。0℃下缓慢加入三甲基硅基重氮甲烷(14.7ml，29.5mmol)。20℃搅拌2小时，加入醋酸至反应液的颜色由黄色变成无色且不再冒气泡。加水(30ml)，二氯甲烷(30ml)萃取。有机相用饱和氯化钠水溶液(25ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到化合物d-4。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。1h nmr(400mhz，cd3od)δ4.00-3.89(m，2h)，3.70(s，3h)，3.68-3.61(m，2h)，2.87-2.79(m，1h)，2.77-2.67(m，2h)，2.60-2.51(m，2h)，2.36-2.25(m，1h)，1.89-1.80(m，2h)，1.79-1.64(m，4h)，1.61-1.49(m，1h)，1.43(s，9h)，1.39(d，j＝10.8hz，1h)，1.36(s，3h)，0.93-0.78(m，1h)。
[0131]
4)中间体d的合成
[0132]
室温下，将化合物d-4(1.75g，4.78mmol)溶于1，4-二氧六环(30ml)中，缓慢加入盐酸二氧六环溶液(4mol/l，6ml，24.0mmol)。20℃搅拌15小时。减压浓缩，得到中间体d。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。
[0133]
中间体e的合成路线
[0134][0135]
1)中间体e的合成
[0136]
室温下，将化合物e-1(3.00g，8.79mmol)溶于无水四氢呋喃(50ml)中。-70℃下缓慢滴加正丁基锂(2.5mol/l正己烷溶液，3.9ml，9.67mmol)。-70℃下搅拌20分钟，加入硼酸三异丙酯(1.82g，9.67mmol)。升温至0℃搅拌30分钟。0℃下，将反应混合物缓慢倒入饱和氯化铵水溶液(50ml)中淬灭。用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取，合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，剩余物用二氯甲烷和乙酸乙酯的混合溶剂(1/1，20ml)打浆。过滤，滤饼用乙酸乙酯(5ml)洗涤，真空干燥，得到中间体e。ms-esi：m/z 307.3[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.72(s，2h)，7.66(d，j＝8.4hz，2h)，6.88(d，j＝8.4hz，2h)，3.47-3.42(m，4h)，3.18-3.10(m，4h)，1.42(s，9h)。
[0137]
中间体f的合成路线
[0138][0139]
1)化合物f-2的合成
[0140]
室温下，将化合物f-1(2.00g，8.29mmol)，碘乙烷(1.42g，9.12mmol)和碳酸钾(2.29g，16.5mmol)混于n，n-二甲基甲酰胺(10ml)。25℃搅拌18小时，加水(50ml)，析出大量白色絮状物。过滤，滤饼用水洗涤(15ml)。真空干燥，得到化合物f-2。ms-esi：m/z 269.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.39-7.31(m，2h)，6.84-6.77(m，2h)，3.19(t，j＝4.8hz，4h)，2.61(t，j＝4.8hz，4h)，2.48(q，j＝7.2hz，2h)，1.14(t，j＝7.2hz，3h)。
[0141]
2)中间体f的合成
[0142]
室温下，将化合物f-2(2.20g，8.17mmol)，联硼酸频那醇酯(2.08g，8.17mmol)，1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(598mg，0.82mmol)和醋酸钾(1.60g，16.3mmol)混于二氧六环(20ml)中。氮气保护下，100℃搅拌16小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析纯化(二氯甲烷/甲醇＝10/1)，得到中间体f。ms-esi：m/z317.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.71(d，j＝8.8hz，2h)，6.89(d，j＝8.8hz，2h)，3.38(t，j＝4.8hz，4h)，2.79(t，j＝4.8hz，4h)，2.67-2.59(m，2h)，1.33(s，12h)，1.19(t，j＝7.2hz，3h)。
[0143]
实施例1
[0144][0145]
1)化合物1-2的合成
[0146]
室温下，将化合物1-1(10.0g，54.5mmol)溶于二氧六环(150ml)中，加入氢氧化钠(5.45g，136mmol)的水溶液(50ml)。25℃搅拌2小时，减压浓缩。加入50ml沸水，加100℃，缓慢滴加沸水至溶液澄清。反应混合物冷却到室温，过滤，滤液减压浓缩至50ml左右后过滤，滤液冰浴下缓慢滴加浓盐酸至ph～2，震荡均匀后过滤，滤饼用水洗涤(15ml)，干燥得到化合物1-2。1h nmr(400mhz，cd3od)δ6.63(s，1h)。
[0147]
2)化合物1-3的合成
[0148]
室温下，将化合物1-2(2.00g，12.1mmol)和碳酸钾(3.35g，24.2mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(20ml)。加入碘甲烷(1.89g，13.3mmol)，25℃下搅拌16小时。加水(30ml)稀释，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。合并有机相依次用水(20ml)，饱和氯化钠水溶液(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到化合物1-3。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ6.47(s，1h)，3.65(s，3h)。
[0149]
3)化合物1-4的合成
[0150]
室温下，将化合物1-3(100mg，0.560mmol)，中间体a(106mg，0.550mmol)和二异丙基乙胺(86mg，0.67mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(5ml)。80℃搅拌16小时，冷却至室温。加水
(50ml)稀释，用乙酸乙酯萃取(50ml
×
3)。合并有机相，依次用水(30ml)，饱和氯化钠水溶液(20ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化得到化合物1-4。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.42(d，j＝2.0hz，1h)，7.31(d，j＝8.4hz，1h)，7.26(dd，j＝8.0，2.0hz，1h)，5.93(s，1h)，5.55-5.45(m，1h)，5.23-5.22(m，1h)，3.40(s，3h)，1.65(d，j＝6.8hz，3h)。
[0151]
4)实施例1的合成
[0152]
室温下，将化合物1-4(100mg，0.300mmol)和中间体c(166mg，0.900mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(2ml)，加入氟化铯(137mg，0.900mmol)。80℃搅拌16小时，冷却至室温。过滤，滤液经制备级高效液相色谱(碳酸氢铵/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(10mm碳酸氢铵)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-10min，35-65％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例1。ms-esi：m/z 480.2[m+1]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ7.43-7.36(m，2h)，7.28(d，j＝8.4hz，1h)，5.45-5.37(m，1h)，4.60(s，1h)，3.89(t，j＝8.8hz，1h)，3.82-3.74(m，1h)，3.68(t，j＝6.0hz，2h)，3.61-3.53(m，1h)，3.39(s，3h)，2.96-2.82(m，2h)，2.54(t，j＝5.6hz，2h)，2.38-2.30(m，1h)，2.09-1.97(m，1h)，1.77-1.54(m，6h)，1.50(d，j＝7.2hz，3h)，0.91-0.76(m，1h)。
[0153]
实施例2
[0154][0155]
1)化合物2-1的合成
[0156]
室温下，将化合物1-4(200mg，0.600mmol)，中间体d(219mg，0.720mmol)，氟化铯(183mg，1.20mm0l)和n，n-二异丙基乙胺(0.5ml，2.98mmol)溶于二甲基亚砜(2ml)。80℃搅拌3小时，冷却至室温。加水(20ml)，用二氯甲烷(20ml
×
2)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(乙酸乙酯/甲醇＝5/1)纯化，得到化合物2-1。ms-esi：m/z 562.3[m+h]
+
。
[0157]
2)实施例2的合成
[0158]
室温下，将化合物2-1(100mg，0.180mmol)，一水合氢氧化锂(37mg，0.89mmol)溶于无水四氢呋喃(5ml)和水(5ml)的混和溶剂中。室温下搅拌3小时，减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(碳酸氢铵/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(10mm碳酸氢铵)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-8min，21-51％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化得到实施例2。ms-esi：m/z 548.3[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.53(d，j＝2.0hz，1h)，7.50(d，j＝8.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.4，2.4hz，1h)，7.26(d，j＝6.4hz，1h)，5.35-5.26(m，1h)，4.36(s，1h)，3.74(t，j＝8.8hz，1h)，3.69-3.61(m，1h)，3.50-3.46(m，3h)，3.28(s，1h)，2.47-2.35(m，5h)，1.70-1.48(m，6h)，1.42(d，j＝7.2hz，3h)，1.38-1.29(m，2h)，1.25(s，3h)，1.33-1.17(m，1h)。
[0159]
实施例3
[0160][0161]
1)化合物3-1的合成
[0162]
室温下，将中间体b(500mg，2.08mmol)，碳酸氢钠(349mg，4.16mmol)溶于四氢呋喃(4ml)和水(2ml)的混和溶剂中。冰浴下，加入氯甲酸烯丙酯(830mg，6.87mmol)。室温下搅拌0.5小时。反应液用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(30ml
×
2)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，得到化合物3-1。粗品不经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 225.3[m-100+h]
+
。
[0163]
2)化合物3-2的合成
[0164]
室温下，将化合物3-1(600mg，1.85mmol，92.8％纯度)溶于二氯甲烷(3ml)，加入三氟乙酸(1ml)。室温下搅拌0.5小时。加入饱和碳酸氢钠溶液至ph～9，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(30ml
×
2)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，减压浓缩，得到化合物3-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 225.2[m+h]
+
。
[0165]
3)化合物3-3的合成
[0166]
室温下，将化合物1-4(300mg，0.90mmol)，化合物3-2(158mg，0.75mmol)和氟化铯(228mg，1.50mmol)混于二甲基亚砜(2ml)。氮气置换三次，40℃搅拌4小时。冷却至室温，反应液经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到化合物3-3。ms-esi：m/z 520.4[m+h]
+
。
[0167]
4)化合物3-4的合成
[0168]
室温下，将化合物3-3(140mg，0.28mmol)，四氢吡咯(19mg，0.27mmol)和四三苯基膦钯(32mg，0.028mmol)混于二氯甲烷(2ml)。氮气置换三次，室温搅拌0.5小时。反应液浓缩，剩余物经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到化合物3-4。ms-esi：m/z 436.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.54(d，j＝2.0hz，1h)，7.49(d，j＝8.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.27(d，j＝6.4hz，1h)，5.30-5.29(m，1h)，4.36(s，1h)，3.77-3.72(m，1h)，3.70-3.64(m，1h)，3.45-3.33(m，1h)，3.28(s，3h)，3.24-3.18(m，1h)，2.86-2.78(m，2h)，2.43-2.37(m，1h)，2.32-2.21(m，1h)，2.05(t，j＝10.8hz，1h)，1.62-1.53(m，2h)，1.42(d，j＝7.2hz，3h)，1.35-1.23(m，2h)，0.90-0.81(m，1h)。
[0169]
5)实施例3的合成
[0170]
室温下，将化合物3-4(200mg，0.46mmol)溶于甲醇(2ml)，依次加入(1-乙氧基环丙基氧基)三甲基硅烷(26mg，0.15mmol)，乙酸(27mg，0.46mmol)和氰基硼氢化钠(7mg，0.12mmol)。氮气置换三次，升温至80℃，搅拌2小时。冷却至室温，减压浓缩，将剩余物经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到实施例3。ms-esi：m/z 476.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.53(d，j＝2.0hz，1h)，7.49(d，j＝8.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.4，2.4hz，1h)，7.25(d，j＝6.4hz，1h)，5.33-5.29(m，1h)，4.36(s，1h)，3.76-3.65(m，2h)，3.47-3.41(m，1h)，3.27(s，3h)，3.22-3.15(m，1h)，2.79-2.70(m，2h)，2.37-2.28(m，1h)，2.10-2.05(m，1h)，1.76-1.69(m，1h)，1.58-1.48(m，3h)，1.42(d，j＝7.2hz，3h)，1.37-1.29(m，2h)，0.80-0.71(m，1h)，0.38-0.36(m，2h)，0.28-0.22(m，2h)。
[0171]
实施例4
[0172][0173]
实施例4参照实施例1的合成方法。ms-esi：m/z 494.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ7.44(d，j＝2.0hz，1h)，7.38(d，j＝8.4hz，1h)，7.31(dd，j＝8.0，2.0hz，1h)，5.49-5.40(m，1h)，4.61(s，1h)，4.14-4.01(m，2h)，3.95-3.87(m，1h)，3.88-3.81(m，1h)，3.74-3.63(m，3h)，3.62-3.54(m，1h)，2.98-2.90(m，1h)，2.88-2.81(m，1h)，2.54(t，j＝6.4hz，2h)，2.43-2.32(m，1h)，2.08-1.98(m，1h)，1.76-1.59(m，5h)，1.53(d，j＝7.2hz，3h)，1.26(t，j＝7.2hz，3h)，0.93-0.88(m，1h)。
[0174]
实施例5
[0175][0176]
1)化合物5-2的合成
[0177]
室温下，将化合物5-1(5.00g，28.1mmol)，甲基脲(2.10g，28.1mmol)和甲醇钠(3.80g，70.2mmol)溶于无水甲醇(50ml)。85℃搅拌4小时，冷却至室温。0℃下缓慢滴加浓盐酸至ph～2。减压浓缩，得到化合物5-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ11.68(s，1h)，6.10(d，j＝44.0hz，1h)，3.03(s，3h)。
[0178]
2)化合物5-3的合成
[0179]
室温下，将化合物5-2(3.00g，18.7mmol)和苄基三乙基氯化铵(5.98g，26.2mmol)溶于三氯氧磷(30ml)中。50℃搅拌4小时，冷却至室温。减压浓缩，剩余物倒入水(50ml)中，用二氯甲烷(50ml
×
3)萃取。合并有机相，用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化得到化合物5-3。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ12.43(br s，1h)，3.12(s，3h)。
[0180]
3)化合物5-4的合成
[0181]
室温下，将化合物5-3(1.20g，6.72mmol)和甲硫醇钠(4.71g，67.2mmol)溶于无水四氢呋喃(10ml)中。40℃搅拌16小时，冷却至室温，直接经硅胶柱层析(乙酸乙酯/甲醇＝10/1)纯化，再经反相柱(乙腈/水体系，流动相：水，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-6min，0％)；流速：60ml/min；柱温：室温)分离，得到化合物5-4。ms-esi：m/z 189.1[m-h]-。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ3.02(s，3h)，2.29(s，3h)。
[0182]
4)化合物5-5的合成
[0183]
室温下，将化合物5-4(700mg，3.68mmol)，苯并三唑-1-氧代-三(二甲氨基磷)六氟磷盐(4.88g，11.0mmol)和1.8-二氮杂二环[5.4.0]十一烷-7-烯(3.36g，22.08mmol)溶于无水四氢呋喃(10ml)中。20℃搅拌25分钟，加入中间体a(714mg，3.68mmol)。20℃搅拌16小时，加水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝0/1)纯化，再经反相柱(乙腈/水体系，流动相：水，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-15min，0-100％)；流速：35ml/min；柱温：室温)纯化，得到化合物5-5。
[0184]
5)化合物5-6的合成
[0185]
室温下，将化合物5-5(100mg，0.28mmol)，间氯过氧苯甲酸(168mg，0.83mmol，85％纯度)溶于二氯甲烷(3ml)。20℃搅拌1小时，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝0/1)分离，得到化合物5-6。ms-esi：m/z 394.0[m+h]
+
。
[0186]
6)实施例5的合成
[0187]
室温下，将化合物5-6(100mg，0.25mmol)，中间体c(112mg，0.77mmol)和n，n-二异丙基乙胺(0.4ml，2.54mmol)溶于乙腈(5ml)和二甲基亚砜(1ml)的混和溶剂中。50℃搅拌2小时，冷却至室温。减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(碳酸氢铵/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(10mm碳酸氢铵)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-8min，39-69％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例5。ms-esi：m/z 498.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，methanol-d4)δ7.42(d，j＝2.0hz，1h)，7.37(d，j＝8.4hz，1h)，7.27(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，5.39-5.29(m，1h)，4.08-3.91(m，2h)，3.81-3.73(m，1h)，3.68(t，j＝6.0hz，2h)，3.55-3.45(m，1h)，3.40(s，3h)，2.93(d，j＝10.8hz，1h)，2.82(d，j＝6.8hz，1h)，2.52(t，j＝6.0hz，2h)，2.45-2.29(m，1h)，2.02(d，j＝11.6hz，1h)，1.75-1.56(m，5h)，1.49(d，j＝7.2hz，3h)，0.90-0.76(m，1h)。
[0188]
实施例6
[0189][0190]
1)实施例6的合成
[0191]
室温下，将化合物1-4(70mg，0.19mmol)和中间体f(100mg，0.32mmol)溶于1，4-二氧六环(1ml)和水(0.2ml)的混合溶剂中，加入碳酸钾(90mg，0.65mmol)和[1，1
′‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(50mg，0.068mmol)。氮气保护，110℃下搅拌4小时。冷却至室温，混合物反相柱c18纯化(乙腈/水体系)纯化，得到实施例6。ms-esi：m/z 486.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.76(d，j＝9.6hz，2h)，7.60-7.56(m，2h)，7.49-7.45(m，1h)，7.39-7.37(m，1h)，6.91-6.86(m，2h)，6.12(s，1h)，5.63-5.54(m，1h)，3.43(s，3h)，3.22-3.20(m，4h)，2.47-2.44(m，4h)，2.36(q，j＝7.2hz，2h)，1.50(d，j＝7.2hz，3h)，1.03(t，j＝7.2hz，3h)。
[0192]
实施例7
[0193][0194]
1)化合物7-2的合成
[0195]
室温下，将化合物1-4(250mg，0.68mmol)，化合物7-1(395mg，1.02mmol)，[1，1
′‑
双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(50mg，0.068mmol)和碳酸钾(280mg，2.03mmol)溶于1，4-二氧六环(15ml)和水(3ml)的混合溶剂中。氮气保护，85℃下搅拌5小时。冷却至室温，过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析纯化(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到化合物7-2。ms-esi：m/z 558.4[m+h]
+
。
[0196]
2)化合物7-3的合成
[0197]
在冰浴下，将化合物7-2(290mg，0.47mmol)溶于二氯甲烷(6ml)，加入三氟乙酸(2ml)。室温搅拌3小时，减压浓缩，加入乙酸乙酯(20ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)洗涤。有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化，得到化合物7-3。ms-esi：m/z458.4[m+h]
+
。
[0198]
3)实施例7的合成
[0199]
在冰浴下，将化合物7-3(250mg，0.44mmol)，2-溴代乙醇(165mg，1.32mmol)和碳酸钾(181mg，1.31mmol)混于乙腈(10ml)。氮气置换3次，60℃搅拌3小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，再经反相柱c18纯化(乙腈/水体系)纯化，得到实施例7。ms-esi：m/z502.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.75(d，j＝8.8hz，2h)，7.41(d，j＝2.0hz，1h)，7.31(d，j＝8.4hz，1h)，7.21(d，j＝8.4，2.0hz，1h)，6.87(d，j＝8.8hz，2h)，6.29(s，1h)，5.67-5.61(m，1h)，4.99(d，j＝5.6hz，1h)，3.67(t，j＝5.2hz，2h)，3.50(s，3h)，3.31-3.29(m，4h)，2.68-2.66(m，4h)，2.62-2.60(m，2h)，1.61-1.60(m，3h)。
[0200]
实施例8
[0201][0202]
1)化合物8-2的合成
[0203]
室温下，将化合物1-4(50mg，0.15mmol)，化合物8-1(42mg，0.30mmol)，1，1
′‑
双二苯基膦二茂铁二氯化钯(44mg，0.060mmol)和碳酸钾(62mg，0.45mmol)混于水(0.5ml)和1，4-二氧六环(5ml)的混合溶剂中。氮气置换三次，100℃下搅拌6小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到化合物8-2。ms-esi：m/z 393.2[m+h]
+
。
[0204]
2)实施例8的合成
[0205]
室温下，将化合物8-2(52mg，0.13mmol)，乙基哌嗪(35mg，0.089mmol)溶于二甲基亚砜(2ml)。60℃下搅拌3小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(碳酸氢铵/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*19mm*5mm；流动相：水(5mm碳酸氢铵)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-8min，45-70％)；流速：15ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例8。ms-esi：m/z 487.3[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.62(d，j＝2.4hz，1h)，7.94(dd，j＝9.2，2.4hz，1h)，7.60(s，1h)，7.58(d，j＝6.8hz，1h)，7.50(d，j＝6.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，6.77(d，j＝8.8hz，1h)，6.16(s，1h)，5.61-5.54(m，1h)，3.56-3.53(m，4h)，3.43(s，3h)，2.43-2.40(m，4h)，2.35(q，j＝7.2hz，2h)，1.49(d，j＝7.2hz，3h)，1.02(t，j＝6.8hz，3h)。
[0206]
实施例9
[0207][0208]
1)实施例9的合成
[0209]
室温下，将化合物8-2(39mg，0.099mmol)和化合物9-1(65mg，0.50mmol)溶于二甲基亚砜(1ml)。60℃搅拌4小时，冷却至室温。将反应液经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到实施例9。ms-esi：m/z 503.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ8.61(d，j＝2.0hz，1h)，7.94(d，j＝8.8hz，1h)，7.59(s，1h)，7.57(d，j＝7.2hz，1h)，7.48(d，j＝6.4hz，1h)，7.38(dd，j＝8.4，2.4hz，1h)，6.77(d，j＝8.8hz，1h)，6.15(s，1h)，5.60-5.53(m，1h)，4.50-4.34(m，1h)，3.60-3.48(m，6h)，3.42(s，3h)，2.48-2.35(m，6h)，1.48(d，j＝7.2hz，3h)。
[0210]
实施例10
[0211][0212]
1)化合物10-2的合成
[0213]
室温下，将化合物10-1(1.00g，5.20mmol)溶于三氯氧磷(10ml)，依次加入五氯化磷(2.17g，10.4mmol)和n，n-二乙基苯胺(2ml)。130℃搅拌3小时，冷却到室温。减压浓缩，剩余物经四氯化碳萃取(20ml
×
3)。合并有机相，减压浓缩，得到化合物10-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。
[0214]
2)化合物10-3的合成
[0215]
室温下，将化合物10-2(960mg，5.20mmol)和三乙胺(2.63g，26.0mmol)溶于四氢呋喃(10ml)中。冰浴下缓慢滴加中间体a(799mg，4.16mmol)，0℃下搅拌2小时。加水(20ml)，用乙酸乙酯(40ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)纯化得到化合物10-3。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.40(d，j＝2.0hz，1h)，7.29(d，j＝8.4hz，1h)，7.25(d，j＝6.8hz，1h)，6.29(d，j＝6.8hz，1h)，5.56-5.47(m，1h)，1.65(d，j＝6.8hz，3h)。
[0216]
3)化合物10-4的合成
[0217]
室温下，将化合物10-3(500mg，1.47mmol)和苄基-1-哌嗪碳酸酯(358mg，1.62mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(10ml)中，加入n，n-二异丙基乙胺(382mg，2.95mmol)。65℃下搅拌1小时，冷却至室温。加水(30ml)，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到化合物10-4。ms-esi：m/z 521.1[m+h]
+
。
[0218]
4)化合物10-5的合成
[0219]
室温下，将化合物10-4(640mg，1.23mmol)溶于醋酸(4ml)和水(1ml)中。微波加热，150℃搅拌18小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物加入无水甲苯(10ml)打浆，过滤。固体干燥，得到化合物10-5。ms-esi：m/z 368.9[m+h]
+
。
[0220]
5)化合物10-6的合成
[0221]
室温下，将化合物10-5(400mg，0.66mmol，61％纯度)，(r)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-2-羧酸(166mg，0.72mmol)和二异丙基乙胺(170mg，1.32mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(10ml)，加入o-(7-氮杂苯并三氮唑-1-yl)-n，n，n，n-四甲基脲六氟膦盐(301mg，0.79mmol)。25℃搅拌30分钟。加水(30ml)稀释，用乙酸乙酯(50ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/2)纯化，得到化合物10-6。ms-esi：m/z580.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ12.03(s，1h)，8.99-8.92(m，1h)，7.60-7.56(m，1h)，7.55-7.50(m，1h)，7.42(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，5.44-5.34(m，1h)，4.95-4.78(m，1h)，3.78-3.71(m，2h)，3.54-3.36(m，5h)，3.25-3.08(m，4h)，1.46(d，j＝6.8hz，3h)，1.41-1.28(m，15h)。
[0222]
6)化合物10-7的合成
[0223]
室温下，将化合物10-6(200mg，0.18mmol，54％纯度)溶于n，n-二甲基甲酰胺(10ml)，加入碳酸钾(51mg，0.37mmol)和碘甲烷(23mg，0.16mmol)。25℃搅拌下16小时。加水(30ml)，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到化合物10-7。ms-esi：m/z 594.3[m+h]
+
。
[0224]
7)实施例10的合成
[0225]
室温下，将化合物10-7(90mg，0.15mmol)溶于盐酸二氧六环溶液(4mol/l，4ml)。25℃下搅拌10分钟，减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(盐酸/乙腈/水体系，色谱柱：3_phenomenex luna c1875*30mm*3μm；流动相：水(0.05％盐酸)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-31min，26-46％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例10。ms-esi：m/z 494.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ9.35(d，j＝10.8hz，1h)，9.05(d，j＝7.2hz，1h)，8.63-8.51
(m，1h)，7.58(d，j＝2.0hz，1h)，7.54(d，j＝8.4hz，1h)，7.42(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，5.46-5.34(m，1h)，4.38(t，j＝10.8hz，1h)，3.66-3.60(m，1h)，3.56-3.47(m，2h)，3.46-3.43(m，1h)，3.42-3.38(m，4h)，3.28-3.15(m，4h)，2.93-2.81(m，1h)，1.98-1.90(m，1h)，1.75-1.60(m，4h)，1.47(d，j＝6.8hz，3h)，1.45-1.36(m，1h)。
[0226]
实施例11
[0227][0228]
1)化合物11-2的合成
[0229]
室温下，将化合物11-1(3.00g，13.8mmol)溶于四氢呋喃(18ml)中，加入氢氧化钠溶液(1mol/l，18ml，18.00mmol)。40℃搅拌16小时。用稀盐酸(1mol/l)调节至ph～5，二氯甲烷(100ml)萃取。合并有机相，用水(80ml
×
3)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物用石油醚(20ml)打浆，得到化合物11-2。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ13.55-10.60(m，1h)。
[0230]
2)化合物11-3的合成
[0231]
室温下，将化合物11-2(1.10g，5.24mmol)和碳酸钾(1.45g，10.5mmol)加入n，n-二甲基甲酰胺(20ml)中，滴加碘甲烷(1.12g，7.86mmol)。0℃搅拌16小时。加乙酸乙酯(80ml)稀释，用饱和食盐水(60ml
×
3)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到化合物11-3。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ3.74(s，3h)。
[0232]
3)化合物11-4的合成
[0233]
室温下，将化合物11-3(500mg，2.23mmol)，中间体c(744mg，3.34mmol)和n，n-二异丙基乙胺(1.1ml，6.68mmol)溶于乙腈(10ml)和二甲基亚砜(5ml)的混合溶剂中。60℃搅拌3小时，冷却至室温，减压浓缩。剩余物经反相柱层析(乙腈/甲酸/水体系，色谱柱：spherical c1820-35μm，100a，40g；流动相：水(0.5％甲酸)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-15min，32-42％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到化合物11-4。ms-esi：m/z 361.1[m+h]
+
。
[0234]
4)实施例11的合成
[0235]
室温下，将化合物11-4(280mg，0.62mmol，80％纯度)溶于二甲基亚砜(8ml)，加入中间体a(180mg，0.93mmol)和氟化铯(188mg，1.24mmol)。80℃搅拌3小时，冷却至室温，减压浓缩。剩余物经硅胶柱层析(100％甲醇)纯化，再经制备级高效液相色谱(甲酸/乙腈/水体系，色谱柱：shim-pack c18150*25*10μm；流动相：水(0.5％甲酸)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-12min，12-42％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例11。ms-esi：m/z 514.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.52(s，1h)，7.44(d，j＝2.0hz，1h)，7.38(d，j＝8.4hz，1h)，7.28(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，5.55-5.43(m，1h)，4.18-4.06(m，2h)，3.89(dd，j＝8.4，6.4hz，1h)，3.82(t，j＝5.2hz，2h)，3.71(dd，j＝8.8，6.4hz，1h)，3.42-3.36(m，1h)，3.28(s，3h)，3.26-3.19(m，1h)，3.02(t，j＝4.0hz，2h)，2.69-2.58(m，1h)，2.49-2.28(m，2h)，1.96-1.89(m，1h)，1.86-1.69(m，3h)，1.49(d，j＝7.2hz，3h)，1.12-0.96(m，1h)。
[0236]
实施例12
[0237][0238]
1)化合物12-2的合成
[0239]
室温下，将化合物12-1(5.00g，14.61mmol)溶于二氧六环(100ml)中，加入双联嚬哪醇硼酸酯(4.45g，17.53mmol)，1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(1.07g，1.46mmol)和醋酸钾(4.30g，43.8mmol)。氮气置换，100℃下搅拌16小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(100％乙酸乙酯)纯化，得到化合物12-2。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ8.55(s，1h)，7.83(d，j＝8.4hz，1h)，6.59(d，j＝8.8hz，1h)，3.66-3.57(m，4h)，3.56-3.51(m，4h)，1.49(s，9h)，1.32(s，12h)。
[0240]
2)化合物12-3的合成
[0241]
室温下，将化合物10-3(500mg，1.46mmol)和化合物12-2(569mg，1.46mmol)，磷酸钾溶液(1.5mol/l，2.9ml，4.4mmol)加入正丁醇(10ml)中，加入甲磺酰氧基(二金刚烷基-正丁基膦基)-2-氨基-1，1-联苯-2-基)钯(187mg，0.15mmol)。氮气置换，60℃下搅拌8小时。冷却至室温，加水(40ml)稀释，用乙酸乙酯(30ml
×
3)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(30ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到化合物12-3。ms-esi：m/z 564.4[m+h]
+
。
[0242]
3)化合物12-4的合成
[0243]
室温下，将化合物12-3(200mg，0.29mmol，83％纯度)溶于醋酸(2ml)和水(0.5ml)中。微波下在150℃反应3小时。冷却到室温，减压浓缩，得到化合物12-4。粗品不经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 446.3[m+h]
+
。
[0244]
4)化合物12-5的合成
[0245]
室温下，将化合物12-4(158mg，0.27mmol，76％纯度)，(叔丁基碳酸)新戊酸酐(0.09ml，0.40mmol)和三乙胺(0.20ml，1.35mmol)溶于二氯甲烷(5ml)。25℃下搅拌12小时，加水(20ml)稀释，用二氯甲烷(10ml
×
2)萃取。合并有机相，用饱和氯化钠水溶液(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)纯化，得到化合物12-5。ms-esi：m/z546.2[m+h]
+
。
[0246]
5)化合物12-6的合成
[0247]
室温下，将化合物12-5(110mg，0.20mmol)和碳酸钾(55mg，0.40mmol)溶于乙腈(3ml)中，滴加碘甲烷(84mg，0.59mmol)。室温下搅拌12小时，加水(20ml)稀释，用乙酸乙酯(10ml
×
2)萃取。合并有机相，饱和氯化钠水溶液(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液
减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到化合物12-6。ms-esi：m/z 560.3[m+h]
+
。
[0248]
6)化合物12-7的合成
[0249]
室温下，将化合物12-6(82mg，0.15mmol)溶于盐酸二氧六环溶液(4mol/l，5ml)。25℃搅拌2小时，减压浓缩得到化合物12-7。粗品不经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 460.1[m+h]
+
。
[0250]
7)实施例12的合成
[0251]
室温下，将化合物12-7(25mg，0.05mmol)，乙醛(11mg，0.25mmol)，三乙胺(25mg，0.25mmol)，乙酸(3mg，0.01mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入氰基硼氢化钠(9.49mg，0.15mmol)。室温下搅拌8小时，加水(20ml)稀释，二氯甲烷(10ml
×
2)萃取。合并有机相，饱和氯化钠水溶液(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(乙腈/碳酸氢胺体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(0.1％碳酸氢胺)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-8min，43-73％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例12。ms-esi：m/z 488.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.28(d，j＝2.0hz，1h)，7.70(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.45(d，j＝2.0hz，1h)，7.37(d，j＝8.0hz，1h)，7.28(dd，j＝8.0，2.0hz，1h)，6.92(d，j＝8.8hz，1h)，5.63-5.58(m，1h)，3.66(t，j＝5.2hz，4h)，3.62(s，3h)，2.60(t，j＝4.8hz，4h)，2.54-2.47(m，2h)，1.51(d，j＝6.8hz，3h)，1.16(t，j＝7.2hz，3h)。
[0252]
实施例13
[0253][0254]
实施例13参照实施例12的合成方法。ms-esi：m/z 503.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ7.54-7.46(m，3h)，7.39(d，j＝8.4hz，1h)，7.31(d，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.14(d，j＝8.8hz，2h)，5.67-5.58(m，1h)，3.84(t，j＝4.8hz，2h)，3.65(s，3h)，3.51-3.43(m，4h)，3.15-3.06(m，4h)，3.03-2.93(m，2h)，1.53(d，j＝7.2hz，3h)。
[0255]
实施例14
[0256][0257]
1)实施例14的合成
[0258]
室温下，将化合物12-7(25mg，0.05mmol)，碘乙醇(26mg，0.15mmol)和碳酸钾(35mg，0.25mmol)溶于乙腈(5ml)。50℃下搅拌12小时，加水(20ml)稀释，用乙酸乙酯(10ml
×
2)萃取。合并有机相，用饱和食盐水(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(乙腈/碳酸氢胺/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(0.1％碳酸氢胺)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-8min，30-60％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例14。ms-esi：m/z 504.2[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.28(d，j＝2.4hz，1h)，7.70(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.45(d，j＝2.0hz，1h)，7.37(d，j＝8.4hz，1h)，7.28(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，6.92(d，j＝8.8hz，1h)，5.65-5.57(m，1h)，3.73(t，j＝6.0hz，2h)，3.66(t，j＝6.0hz，4h)，3.62(s，3h)，2.67(t，j＝4.8hz，4h)，2.61(t，j＝6.0hz，2h)，1.51(d，j＝6.8hz，3h)。
[0259]
实施例15
[0260][0261]
1)化合物15-2的合成
[0262]
室温下，将化合物15-1(1.00g，3.73mmol)和n，n-二异丙基乙胺(1.45g，11.2mmol)溶于乙腈(15ml)，加入中间体a(709mg，3.70mmol)。80℃下搅拌16小时，冷却至室温。减压浓缩，所得残余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化，得到化合物15-2。ms-esi：m/z 375.7[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.37(d，j＝2.0hz，1h)，7.28(d，j＝8.4hz，1h)，7.19(dd，j＝8.0，2.0hz，1h)，6.66(d，j＝7.2hz，1h)，6.58(s，1h)，5.44-5.35(m，1h)，3.44(s，3h)，1.55(d，j＝6.8hz，3h)。
[0263]
2)实施例15合成
[0264]
室温下，将化合物15-2(561mg，1.30mmol，87％纯度)和中间体f(300mg，0.86mmol)溶于二氧六环(9ml)和水(3ml)的混合物溶剂中，加入1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(126mg，0.17mmol)和碳酸钾(239mg，1.73mmol)。氮气保护下100℃搅拌16小时，冷却至室温。减压浓缩，剩余物经过薄层硅胶板(二氯甲烷/甲醇＝5/1)纯化，再经制备级高效液相色谱(乙腈/氨水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(0.5％氨水)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-11min，51-81％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到化合物实施例15。ms-esi：m/z 486.0[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.82(d，j＝7.2hz，1h)，7.58-7.52(m，4h)，7.36(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.34(s，1h)，6.86(d，j＝8.8hz，2h)，5.53-5.42
(m，1h)，3.45(s，3h)，3.18-3.09(m，4h)，2.48-2.44(m，4h)，2.38-2.32(m，2h)，1.48(d，j＝7.2hz，3h)，1.03(t，j＝7.2hz，3h)。
[0265]
实施例16
[0266][0267]
1)化合物16-1的合成
[0268]
室温下，将化合物15-2(750mg，1.79mmol)，中间体e(559mg，1.79mmol)，1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(262mg，0.36mmol)和碳酸钾(742mg，5.37mmol)混于二氧六环(12ml)和水(4ml)的混合溶剂中。氮气保护下100℃搅拌16小时，冷却至室温。减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝0/1)纯化，得到化合物16-1。ms-esi：m/z 558.1[m+h]
+
。
[0269]
2)化合物16-2的合成
[0270]
室温下，将化合物16-1(880mg，1.34mmol，85％纯度)溶于二氧六环(10ml)，加入盐酸二氧六环溶液(4mol/l，10ml)。室温搅拌4小时，减压浓缩，得到化合物16-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 458.0[m+h]
+
。
[0271]
3)实施例16的合成
[0272]
室温下，将化合物16-2(300mg，0.53mmol，87％纯度)溶于乙腈(8ml)中，加入2-碘乙醇(181mg，1.06mmol)和碳酸钾(219mg，1.58mmol)。80℃搅拌16小时，冷却至室温。加乙酸乙酯(100ml)稀释，用水(100ml
×
3)洗涤，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(氨水/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5μm；流动相：水(0.05％氨水)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-10min，41-71％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例16。1h nmr(400mhz，cd3od)δ7.54(d，j＝8.8hz，2h)，7.48-7.41(m，2h)，7.24(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.13(s，1h)，6.89(d，j＝8.8hz，2h)，5.57-5.47(m，1h)，3.73(t，j＝6.0hz，2h)，3.54(s，3h)，3.21(t，j＝4.8hz，4h)，2.69(t，j＝5.2hz，4h)，2.59(t，j＝6.0hz，2h)，1.55(d，j＝6.8hz，3h)。
[0273]
实施例17
[0274][0275]
1)化合物17-1的合成
[0276]
室温下，将化合物12-2(300mg，0.62mmol，80％纯度)溶于二氧六环(12ml)和水(4ml)的混合溶剂中，加入化合物15-2(240mg，0.62mmol)，1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(68mg，0.09mmol)和碳酸钾(256mg，1.85mmol)。氮气保护下100℃搅拌16小时。冷却至室温，
减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(乙酸乙酯/甲醇＝10/1)纯化，得到化合物17-1。ms-esi：m/z 559.1[m+h]
+
。
[0277]
2)化合物17-2的合成
[0278]
室温下，将化合物17-1(350mg，0.55mmol，88％纯度)溶于二氧六环(5ml)，加入盐酸二氧六环溶液(4mol/l，5ml)。20℃搅拌3小时。减压浓缩，得到化合物17-2。粗品不经纯化，直接用于下一步反应。ms-esi：m/z 459.0[m+h]
+
。
[0279]
3)实施例17的合成
[0280]
室温下，将化合物17-2(150mg，0.33mmol，91％纯度)溶于乙腈(6ml)，加入2-碘乙醇(112mg，0.65mm0l)和碳酸钾(135mg，0.98mmol)。80℃下搅拌16小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经制备级高效液相色谱(氨水/乙腈/水体系，色谱柱：waters xbridge 150*25mm*5mm；流动相：水(0.05％氨水)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-11min，37-67％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例17。ms-esi：m/z 503.0[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.40(d，j＝2.4hz，1h)，7.80(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.48-7.40(m，2h)，7.24(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.15(s，1h)，6.76(d，j＝8.8hz，1h)，5.56-5.46(m，1h)，3.73(t，j＝6.0hz，2h)，3.58-3.51(m，7h)，2.64(t，j＝4.8hz，4h)，2.58(t，j＝6.0hz，2h)，1.55(d，j＝6.8hz，3h)。
[0281]
实施例18
[0282][0283]
1)化合物18-2的合成
[0284]
室温下，将化合物18-1(10.0g，39.5mmol)溶于醋酸(60ml)中，加入浓硫酸(98％，12ml)。搅拌均匀，加入亚硝酸钠(5.46g，79.1mmol)的水(30ml)溶液。室温下搅拌2小时。倒入冰水(300ml)中，用乙酸乙酯(200ml)萃取。有机相用饱和食盐水(200ml
×
3)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，得到化合物18-2。粗品未经纯化，直接用于下一步反应。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ13.09(br s，1h)，7.94(s，1h)。
[0285]
2)化合物18-3的合成
[0286]
室温下，将化合物18-2(2.00g，7.48mmol)溶于丙酮(20ml)，加入碘乙烷(5.84g，37.4mmol)和碳酸钾(5.17g，37.4mmol)。20℃下搅拌16小时。减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化，得到化合物18-3。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.32(s，1h)，4.00(d，j＝7.2hz，2h)，1.42(t，j＝7.2hz，3h)。
[0287]
3)化合物18-4的合成
[0288]
室温下，将化合物18-3(600mg，2.02mmol)溶于乙腈(10ml)，加入中间体a(392mg，2.02mmol)和n，n-二异丙基乙胺(1ml，6.1mmol)。80℃下搅拌16小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到化合物18-4。ms-esi：m/z 389.9[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.38(d，j＝2.0hz，1h)，7.29(t，j＝8.0hz，1h)，7.21(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，6.63(d，j＝7.2hz，1h)，6.59(s，1h)，5.45-5.35(m，1h)，3.92-3.82
(m，2h)，1.56(d，j＝7.2hz，3h)，1.34(t，j＝7.2hz，3h)。
[0289]
4)实施例18的合成
[0290]
室温下，将化合物18-4(250mg，0.63mmol)和中间体f(297mg，0.86mmol)溶于二氧六环(12ml)和水(4ml)的混合溶剂中，加入1，1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(69mg，0.09mmol)和碳酸钾(260mg，1.88mmol)。氮气保护下100℃反应16小时。冷却至室温，减压浓缩，剩余物经过薄层硅胶板(乙酸乙酯/甲醇＝10/1)纯化，再经制备级高效液相色谱(盐酸/乙腈/水体系，色谱柱：3_phenomenex luna c1875*30mm*3μm；流动相：水(0.05％盐酸)，乙腈；梯度配比：乙腈相(0-10min，27-47％)；流速：25ml/min；柱温：室温)纯化，得到实施例18。ms-esi：m/z 500.1[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cd3od)δ7.57(d，j＝8.8hz，2h)，7.53-7.47(m，2h)，7.31(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.18(s，1h)，7.02(d，j＝8.8hz，2h)，5.59-5.51(m，1h)，4.07-3.97(m，2h)，3.96-3.87(m，2h)，3.68(d，j＝12.0hz，2h)，3.28-3.17(m，4h)，3.14-3.05(m，2h)，1.61(d，j＝6.8hz，3h)，1.44-1.35(m，6h)。
[0291]
实施例19
[0292][0293]
1)化合物19-2的合成
[0294]
室温下，将化合物19-1(500mg，1.87mmol)，中间体a(533mg，2.80mmol)，4，5-双二苯基膦-9，9-二甲基氧杂蒽(162mg，0.28mmol)，三(二亚苄基丙酮)二钯(256mg，0.28mmol)和碳酸钾(778mg，5.63mmo1)混于1，4-二氧六环(5ml)。氮气保护下90℃搅拌5小时。冷却至室温，过滤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到化合物19-2。
[0295]
2)化合物19-3的合成
[0296]
室温下，将化合物19-2(500mg，1.20mmol)，化合物7-1(620mg，1.60mmol)，[1，1
′‑
双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(195mg，0.27mmol)，碳酸钾(550mg，3.98mmol)混于1，4-二氧六环(20ml)和水(2ml)的混合溶剂中。氮气保护下90℃反应7小时。冷却至室温，过滤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，再经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到化合物19-3。ms-esi：m/z 557.4[m+h]
+
。
[0297]
3)化合物19-4的合成
[0298]
在0℃下，将化合物19-3(460mg，0.74mmol)溶于二氯甲烷(9ml)，加入三氟乙酸(3ml)。室温搅拌2小时，减压浓缩。加入乙酸乙酯(20ml)，用饱和碳酸氢钠水溶液(10ml)洗涤，无水硫酸钠干燥。过滤，滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(二氯甲烷/甲醇＝20/1)纯化，得到化合物19-4。ms-esi：m/z 457.4[m+1]
+
。
[0299]
4)实施例19的合成
[0300]
在0℃下，将化合物19-4(291mg，0.57mmol)溶于二氯甲烷(10ml)，加入三乙胺(195mg，1.93mmol)和碘乙烷(150mg，0.96mmol)。室温下搅拌5小时。减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(石油醚/乙酸乙酯＝1/l)纯化，再经反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到实施例
19。ms-esi：m/z 485.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，cdcl3)δ7.37-7.33(m，2h)，7.18-7.13(m，3h)，6.89(d，j＝4.4hz，2h)，6.75(d，j＝2.0hz，1h)，6.05(d，j＝2.0hz，1h)，5.51(d，j＝5.6hz，1h)，4.86-4.82(m，1h)，3.62(s，3h)，3.23(t，j＝4.8hz，4h)，2.61(t，j＝4.8hz，4h)，2.48(q，j＝7.2hz，2h)，1.54(d，j＝6.8hz，3h)，1.13(t，j＝7.2hz，3h)。
[0301]
实施例20
[0302][0303]
1)化合物20-2的合成
[0304]
室温下，将化合物20-1(900mg，4.30mmol)溶于n，n-二甲基甲酰胺(10ml)，加入碳酸铯(4.00g，12.3mmol)和碘甲烷(900mg，6.34mmol)。室温搅拌4小时，减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)纯化，得到化合物20-2。ms-esi：m/z 223.0[m+h]
+
。
[0305]
2)化合物20-3的合成
[0306]
室温下，将化合物20-2(400mg，1.79mmol)，中间体a(400mg，2.10mmol)和碳酸铯(1.80g，5.53mmol)混于n，n-二甲基甲酰胺(6ml)。微波加热160℃下搅拌4小时。冷却至室温，过滤。滤液减压浓缩，剩余物经硅胶柱层析(乙酸乙酯/石油醚＝1/1)纯化，得到化合物20-3。ms-esi：m/z 332.0[m+h]
+
。
[0307]
3)实施例20的合成
[0308]
室温下，将化合物20-3(60mg，0.18mmol)和中间体f(100mg，0.32mmol)溶于1，4-二氧六环(1ml)和水(0.2ml)的混合溶剂中，加入碳酸钾(100mg，0.724mmol)和[1，1
′‑
双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(25mg，0.034mmol)。氮气保护下110℃搅拌4小时。冷却至室温，反相柱c18(乙腈/水体系)纯化，得到实施例20s。ms-esi：m/z 486.4[m+h]
+
。1h nmr(400mhz，dmso-d6)δ7.62(d，j＝2.0hz，1h)，7.56-7.53(m，1h)，7.51-7.47(m，2h)，7.42(dd，j＝8.4，2.0hz，1h)，7.35-7.32(m，1h)，6.98-6.92(m，2h)，6.10(s，1h)，4.97-4.90(m，1h)，3.68(s，3h)，3.19-3.17(m，4h)，2.48-2.45(m，4h)，2.35(q，j＝7.2hz，2h)，1.54(d，j＝6.8hz，3h)，1.03(t，j＝7.2hz，3h)。
[0309]
生物学评价
[0310]
以下结合测试例进一步描述解释本公开的内容，但这些测试例并非意味着限制本公开的范围。
[0311]
测试例：体外ccr4钙流活性检测实验
[0312]
1.1、实验材料
[0313][0314]
1.2、实验步骤
[0315]
体外ccr4受体细胞功能性实验通过使用稳定表达ccr4的细胞株及flipr实验检测待测化合物活性。实验中，受试化合物测试起始浓度为10000nm，3倍稀释，共10个浓度，复孔测试。
[0316]
配置250mm flipr实验缓冲液，2
×
fluo-4 directtm加样缓冲液。收集并重悬ccr4-hek293细胞至1x106/ml，在384孔板的每个反应孔中加入20μl细胞悬液。细胞培养过夜。第二天，细胞反应板弃上清，加入20μl实验缓冲液和20μl fluo-4 directtm加样缓冲液。从化合物板取10μl待测化合物稀释液加到细胞反应板，在37℃5％二氧化碳环境中孵育50分钟，再在室温孵育10分钟。将反应板转移到fliprtetra。取10μl 6
×
ec
80 ccl17稀释液加到细胞反应板，震荡2次。读取荧光值，使用graphpadprism软件分析数据，计算化合物对ccr4受体细胞钙流抑制活性的ic
50
。
[0317]
公开的实施例对ccr4受体细胞钙流抑制活性通过以上的试验进行测定，测得的ic
50
值见表1。
[0318]
表1
[0319]
编号ic
50
(nm)实施例117实施例547实施例610实施例725实施例158实施例1627实施例1932实施例2015比较例1(flx475)19。

技术特征：
1.式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，其中，x1、x2、x3和x4中的一者为羰基，其余各自独立地选自cr
a
或n；r1各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基磺酰基、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基、-(ch2)
n-氰基或-(ch2)
n-羧基；r2选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基或-(ch2)
n-氰基；r3选自h、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c4环烷基、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基或-(ch2)
n-氰基；r4选自x、y、v和w各自独立地选自cr
b
或n；r
a
各自独立地选自h、卤素、c
1-c6烷基、c
1-c6卤代烷基、c
1-c6烷氧基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、苯基、氨基、氰基或酰胺基，其中所述c
1-c6烷基、c
1-c6烷氧基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基磺酰基、4-7元杂环基、5-6元杂芳基、苯基、氨基或酰胺基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；r
b
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、羟基、氨基、氰基、羧基或酰胺基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、氨基或酰胺基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；r
c
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基、氨基、氰基或羧基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基或氨基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；r
d
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基、氨基、氰基或羧基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基或氨基任选地被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代；r
e
为-l-r
f
；r
f
选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
3-c6环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、c
3-c6环烷基
烷基磺酰基、4元杂环基、氨基、氰基或酰胺基，其中所述c
1-c3烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、4元杂环基、氨基或酰胺基任选被卤素、羟基、氨基、氰基或c
1-c3烷基取代，r
a
优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、环丙基、二氟甲基、三氟甲基、三氟乙基、羟甲基、1，1-二甲基羟甲基、氰基或-c(o)nhch3；r
b
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、c
1-c3烷基磺酰基、羟基、氰基或羧基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、异丙基、环丙基、三氟甲基或氰基；r
c
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基或氰基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、羟基或氰基；并且r
d
各自独立地选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷氧基、c
3-c4环烷基、羟基或氰基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、羟基或氰基。6.根据权利要求1所述的式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，其中，r
e
为-l-r
f
；r
f
选自h、卤素、c
1-c3烷基、c
1-c3卤代烷基、c
1-c3烷基磺酰基、5-6元杂芳基、r
g
c(o)nh-、r
g
s(o)2nh-、ch3(ch2)
n
c(o)nh-、ch3(ch2)
n
nhc(o)-、ch3(ch2)
n
s(o)2nh-、ch3(ch2)
n
nhs(o)
2-、-(ch2)
n-羟基、-(ch2)
n-氨基、-(ch2)
n-氰基或-(ch2)
n-羧基，优选地选自h、氟、氯、溴、甲基、乙基、二氟甲基、三氟甲基、羟基、羧基、氧杂环丁烷基、乙酰胺基、甲磺酰基、甲磺酰胺基或ch3oc(o)nh-；r
g
选自c
3-c4环烷基或3-4元杂环基，优选地选自环丙烷基、环丁烷基或氧杂环丁烷基；并且l选自键、-c(o)-、-s(o)
2-、或者任选地被甲基或乙基取代的亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚环丙基、亚环丁基、亚环戊基或亚环己基。7.根据权利要求1-6中任一项所述的式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，其具有下式结构：
8.一种药物组合物，其包含根据权利要求1-7中任一项所述的式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，以及药学上可接受的载体。9.根据权利要求8所述的药物组合物，其剂型选自片剂、颗粒剂、散剂、糖浆剂、吸入剂和注射剂。10.根据权利要求1-7中任一项所述的式(i)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物在制备作为ccr4拮抗剂的药物中的用途，所述药物用于在有需要的受试者中治疗或预防由ccr4介导的疾病或病症。11.根据权利要求10所述的用途，其中所述由ccr4介导的疾病或病症选自特性应皮炎、哮喘、过敏性鼻炎、异位性皮炎、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎中的一种或多种免疫相关性疾病。
12.根据权利要求10所述的用途，其中所述由ccr4介导的疾病或病症为癌症。

技术总结
本申请涉及一种CCR4小分子拮抗剂及其用途。具体地，本申请涉及式(I)化合物或其同位素标记化合物、或其光学异构体、几何异构体、互变异构体或异构体混合物、或其药学上可接受的盐、或其前体药、或其代谢物，以及其在制备用于治疗或预防由CCR4介导的疾病或病症的药物中的用途。的用途。的用途。


技术研发人员：陈鑫德 柳梦林 郝欣
受保护的技术使用者：瑞石生物医药有限公司
技术研发日：2023.01.13
技术公布日：2023/7/13