一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法

1.本发明涉及一种对天然产物进行结构修饰方法，特别是涉及一种结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法。


背景技术：

2.结球菊苣(cichoricum intybus var. foliosum hegi.)，是菊苣属的一种多年宿根性草本植物。作为一种药食两用植物，红菊苣颜色鲜艳，营养价值很高，既可以直接食用也有很高的药用价值。结球菊苣含有多种活性成分，其中结球菊苣多糖含量最多。菊苣多糖具有抗氧化、消炎调节免疫系统、抗肿瘤、抗病毒等生物活性。
3.结构修饰可以改变多糖的分子量、取代基团类型和分子结构，从而影响多糖的生物活性。到目前为止，常见的几种化学改性方法包括羧甲基化、硫酸化、硒化、磷酸化、乙酰化等。磷酸化后的多糖与天然多糖比一些基团（例如羟基等）被磷酸根所取代，分子量也同时发生了改变，从而导致其多糖生物活性增强。linlang等对川牛膝多糖磷酸化研究发现磷酸化修饰后提高了其免疫活性；胡晓波等对桑葚多糖磷酸化修饰前后的抗氧化活性研究，实验表明磷酸化修饰后的桑葚多糖的抗氧化活性增强。
4.常用的磷酸化方法有三氯氧磷(pocl3)、磷酸及其酸酐、磷酸盐等。三氯氧磷法反应时间短、操作步骤简单的优点，但是氯化氧磷的使用可能会导致目标分子降解，反应过程中氢离子浓度增加，需要在反应过程中加入碱性试剂，如吡啶和三乙胺来中和，防止多糖降解；磷酸及其酸酐或二者混合物是最早使用的磷酸化试剂，磷酸基团活性大，但是磷酸及其酸酐主要的缺点是在反应过程中容易导致糖样降解，产物收率不高，取代度也不理想；磷酸盐法是一种温和的多糖磷酸化反应，常用于多糖磷酸化修饰的磷酸盐试剂主要有多聚磷酸钠、磷酸氢二钠、三偏磷酸钠、磷酸二氢钠及这些盐的混合物，磷酸盐法制备工艺简便、安全、经济效益高,产生的副产物和有毒有害物较少,在工业生产中应用最为普及。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，本发明选择三聚磷酸钠作为磷酸化试剂，制备磷酸化结球菊苣多糖。磷酸化后的多糖与天然多糖比一些基团（例如羟基等）被磷酸根所取代，分子量也同时发生了改变，从而导致其多糖生物活性增强。该反应无酸、碱、有机试剂参与，方便后续处理。
6.本发明的目的是通过以下技术方案实现的：一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，所述方法包括以下步骤：（1）结球菊苣多糖配制溶液加入硫酸钠，再加入磷酸化试剂，使结球菊苣多糖与磷酸化试剂的摩尔比为1:10；（2）调节溶液ph为7，在80℃条件下反应3h，取出冷却至室温；（3）用凝胶柱除盐；（4）冷冻干燥，得到磷酸化结球菊苣多糖。
g/ml的三聚磷酸钠水溶液（结球菊苣多糖与三聚磷酸钠的摩尔比为1:10），调ph到7.0，在80 ℃反应3小时后取出冷却,用预处理后的sephadex g-15凝胶柱除盐,冷冻干燥。得到磷酸化结球菊苣多糖，磷含量4.51%。


技术特征：
1.一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：（1）结球菊苣多糖配制溶液加入硫酸钠，再加入磷酸化试剂，使结球菊苣多糖与磷酸化试剂的摩尔比为1:10；（2）调节溶液ph为7，在80℃条件下反应3h，取出冷却至室温；（3）用凝胶柱除盐；（4）冷冻干燥，得到磷酸化结球菊苣多糖。2.根据权利要求1所述的一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，其特征在于，所述磷酸化试剂为三聚磷酸钠。3.根据权利要求1所述的一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，其特征在于，所述结球菊苣多糖与磷酸化试剂的摩尔比为1:10。4.根据权利要求1所述的一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，其特征在于，所述菊苣多糖为结球菊苣多糖。

技术总结
一种对天然产物结球菊苣多糖的磷酸化修饰方法，涉及一种对天然产物进行结构修饰的方法。本发明方法在结球菊苣多糖溶液中添加硫酸钠防止多糖溶液加热起泡，采用三聚磷酸钠作为磷酸化试剂对结球菊苣多糖进行磷酸化修饰，制备工艺简便、安全，反应无有机试剂参与，方便后续处理。投加结球菊苣多糖与磷酸化试剂的摩尔比为1:10,在pH7.0，温度80℃的反应条件下反应3h，反应条件较温和，更安全便捷。进一步采用SepHadex G-15凝胶柱除盐，再将磷酸化多糖进行冷冻干燥，得到磷酸化结球菊苣多糖的磷含量大于4.5%。本发明方法环保高效，反应条件温和，反应原料安全，反应过程简单便捷。反应过程简单便捷。


技术研发人员：朱建星 姜振浩 王红艳 张万忠
受保护的技术使用者：沈阳化工大学
技术研发日：2023.03.29
技术公布日：2023/7/18