粟酒裂殖酵母及其改善皮肤状况的应用的制作方法

1.本发明涉及微生物技术领域，特别涉及一种粟酒裂殖酵母及其改善皮肤状况的应用。


背景技术：

2.皮肤基底层角质形成细胞经历定向分化后所形成的角质层可以防止各种物理、化学性损伤。皮肤屏障功能通过防止水分、营养物质等的丢失，来保持皮肤生理功能的正常运行，同时也保证机体内器官组织免受外界有害物质的侵袭，对机体内环境稳态的维持起着重要作用。
3.皮肤老化是机体老化的一部分，是衰老过程中表现最为直观的器官。目前对皮肤衰老的研究主要是对皮肤成纤维细胞和角质形成细胞衰老的研究。皮肤衰老真皮的组织学改变主要为皮肤基质成分的改变，即胶原成分减少和异常弹性纤维沉积。分子学改变主要为表皮增生和分化性标志表达异常，基质金属蛋白酶(mmp)表达增加，如mmp1为胶原蛋白分解酶，也是分解皮肤胶原纤维的主要因子，能造成皮肤真皮的衰老，是皮肤衰老的指标之一。在衰老机制的研究中发现，减少细胞凋亡，降低细胞炎症，增加细胞外基质的合成以及减少其降解，提升细胞的抗氧化能力等都已被证实能够减缓皮肤细胞衰老。
4.皮肤是一个复杂而动态的生态系统，居住着细菌、古细菌、真菌和病毒。这些微生物统称为皮肤微生物群，是皮肤生理和免疫的基础。大多数生活在皮肤上的微生物在稳态条件下表现为共生或互利共生。细菌栖息于皮肤的所有层，从外部的角质层到内部真皮组织。微生物维持皮肤屏障完整性对体内平衡和疾病预防至关重要。因此，提供一种利用微生物技术开发的皮肤微生态相关产品，在改善皮肤状态方面具有广大的应用价值。


技术实现要素：

5.有鉴于此，本发明提供了一种粟酒裂殖酵母菌株及其改善皮肤状况的应用。
6.本发明公开了一种粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe），具体为粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）seuneu-120，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no: m 20221432。
7.本发明另一方面还公开了上述粟酒裂殖酵母在制备改善肌肤状况的产品中的应用。
8.进一步的，上述应用，其中，所述改善皮肤状况包括促进细胞增殖、修复皮肤屏障、保湿、抗衰老中的至少一种。
9.本发明中，所述的修护皮肤屏障包括修复sds诱导的细胞损伤和/或上调屏障修护相关基因的表达；所述屏障修护相关基因包括flg、ivl、ovol1和ocln中的至少一种。
10.进一步的，本发明以hacat角质细胞为受试对象，对所述的粟酒裂殖酵母的sds损伤修复能力进行了研究，结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可修复sds引起的细胞损伤，提高细胞增殖率，并上调非损伤细胞的屏障修护相关基因的表达。
11.本发明中，所述的保湿包括但不限于上调保湿相关基因的表达，所述的保湿相关基因为gba。本发明以hacat角质细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母的对皮肤的保湿效果，结果显示，所述的粟酒裂殖酵母可上调保湿相关基因gba的表达，促进皮肤细胞保湿。
12.进一步的，上述应用，其中，所述抗衰老包括如下所示的至少一种：上调细胞外基质合成相关基因的表达，所述细胞外基质合成相关基因包括col1a1、col13a1、sptssa、smad3和mkx中的至少一种；下调降解细胞外基质相关基因的表达；所述降解细胞外基质相关基因包括mmp家族基因中的至少一种；上调细胞抗氧化相关基因的表达，所述细胞抗氧化相关基因包括nrf2、pten和sirt-1中的至少一种；上调细胞免疫调节因子相关基因mor的表达；下调细胞凋亡相关基因bax和/或caspase-9的表达；上调细胞自噬相关基因lc3b的表达；上调抑制细胞凋亡相关基因bcl-2的表达；上调细胞生长因子相关基因的表达，所述细胞生长因子相关基因包括fgf1、fgf2、fgf7、fgf21和hgf中的至少一种；清除dpph自由基；抗氧化。
13.为了探究所述的粟酒裂殖酵母的抗衰老效果，本发明对细胞衰老相关的指标进行了测定，所述的指标包括细胞外基质合成、细胞外基质降解、细胞抗氧化、细胞免疫调节因子、细胞凋亡、细胞自噬、抑制细胞凋亡、细胞生长因子、清除dpph自由基以及抗氧化中的至少一个。
14.本发明中，所述促细胞增殖为促进皮肤角质细胞的增殖。本发明以hacat角质细胞为受试对象，对所述的粟酒裂殖酵母的促进细胞增殖效果进行研究。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可促进可修复sds引起的hacat角质细胞损伤，提高细胞增殖率，促进增殖率为10.16~13.45%。
15.本发明以hacat角质细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hacat细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调细胞外基质合成相关基因col1a1的表达，促进细胞外基质的合成，下调降解细胞外基质相关基因mmp1的表达，抑制细胞外基质的降解。
16.本发明以hacat角质细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hacat细胞自噬的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调细胞自噬相关基因lc3b的表达，促进细胞自噬以清除老化细胞。
17.本发明以hacat角质细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hacat细胞抗氧化相关基因的表达的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调抗氧化相关基因nrf2的表达，增强细胞的抗氧化能力。
18.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞外基质合成相关基因和降解相关基因的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调细胞外基质
合成相关基因col13a1、sptssa、smad3和mkx的表达，促进细胞外基质的合成，下调降解细胞外基质相关基因mmp3的表达，抑制细胞外基质的降解。
19.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞凋亡的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可下调细胞凋亡相关基因bax和caspase-9的表达，抑制细胞凋亡。
20.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞抑制细胞凋亡的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调抑制细胞凋亡相关基因bcl-2的表达，抑制细胞凋亡。
21.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞抗氧化相关基因的表达的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调抗氧化相关基因pten和sirt-1的表达，增强细胞的抗氧化能力。
22.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞免疫调节因子相关基因的表达的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调免疫调节因子相关基因mor的表达，增强细胞的免疫调节能力。
23.本发明以hff成纤维细胞为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对hff细胞生长因子相关基因的表达的影响。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可上调细胞生长因子相关基因fgf1、fgf2、fgf7、fgf21和hgf的表达，增强细胞的生长能力。
24.本发明以粟酒裂殖酵母为受试对象，研究所述的粟酒裂殖酵母对清除dpph自由基和总抗氧化力的检测。结果表明，所述的粟酒裂殖酵母可清除dpph自由基且具备抗氧化能力，减少细胞的氧化损伤。
25.进一步的，上述应用，其中，所述产品为食品、药品或化妆品。
26.本发明还公开了一种改善皮肤状况的产品，由包括上述粟酒裂殖酵母的原料制成。
27.进一步的，上述产品包括粟酒裂殖酵母的上清液和菌体裂解液。
28.更进一步的，本发明所述的产品的剂型包括但不限于膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类、冻干类中的至少一种，本发明对此不做限定。
29.本发明还提供了一种改善肌肤状态的方法，其包括使用本发明所述从产品。所述使用的方法包括涂抹、外敷、熏蒸或注射，本发明对此不做限定。
30.本发明提供了粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe），其保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为 cctcc no: m 20221432。实验表明，本发明提供的粟酒裂殖酵母具有促进细胞增殖、修护皮肤屏障、保湿、抗衰老的功能，可用于制备食品、药品、化妆品等。
31.生物保藏说明粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）seuneu-120，于2022年9月14日保藏在中国典型培养物保藏中心，地址为:中国，武汉，武汉大学，保藏编号为cctcc no: m 20221432。
具体实施方式
32.本发明提供了粟酒裂殖酵母及其应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当
改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
33.本发明的粟酒裂殖酵母菌株seuneu-120，来源于广西壮族自治区来宾市甘蔗糖蜜，经26s rdna鉴定为粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）。菌株seuneu-120，显微镜下呈圆形或椭圆形；在麦芽汁固体平板上生长，可形成乳白色，无光泽菌落，边缘整齐；在麦芽汁液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀，最适生长温度28℃。
34.粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）seuneu-120，保藏单位：中国典型培养物保藏中心，地址：湖北省武汉市武昌区八一路299号武汉大学校内，保藏日期：2022年9月14日，保藏编号为 cctcc no: m 20221432。
35.进一步的，本发明提供的粟酒裂殖酵母seuneu-120在本发明所述的应用或产品中，存在形式是活的或死的或经间歇灭菌的，或为裂解物和/或提取物的形式，或为酵母产物的形式或为上清液形式或衍生物形式。优选地，粟酒裂殖酵母seuneu-120存在形式选自上清液或菌体裂解液。所述衍生物形式优选地选自：代谢产物、代谢生物产物、外泌体、益生素、细胞壁及其成分、胞外多糖，和含有免疫原性成分的化合物。
36.本发明采用的试材皆为普通市售品，均可市售购买得到，下面结合实施例，进一步阐述本发明。
37.实施例1 seuneu-120的分离于甘蔗糖蜜中采样。将样品适当处理后于生理盐水中震荡混匀，取上清划线于麦芽汁固体平板，28℃恒温培养48h后，挑取白色菌落反复接种筛选，直至得到均匀的单个菌落，命名为seuneu-120。
38.镜检：菌株seuneu-120，显微镜下呈圆形或椭圆形；在麦芽汁固体平板上生长，可形成乳白色，无光泽菌落，边缘整齐；在麦芽汁液体培养基中呈均匀浑浊生长，久置菌体呈白色沉淀。
39.实施例2 seuneu-120的核酸鉴定1、26s rdna基因序列分析：挑取单菌落置麦芽汁液体培养基中，28℃培养过夜后，12000转离心2min收集菌体，按照酵母基因组dna提取试剂盒步骤进行操作。引物采用酵母菌通用引物nl1，nl4，pcr扩增体系为50μl体系，95℃预变性5min；94℃ 1min，52℃ 1min，72℃ 90s，36个循环；72℃延伸10min。
40.2、结果pcr产物测序结果与genbank中已发表的标准序列进行同源性比较（blastn）后得出seuneu-120菌株为粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）。
41.实施例3 seuneu-120促进sds诱导的人永生化角质形成细胞hacat损伤修复实验1、seuneu-120上清液和菌体裂解液制备：挑取粟酒裂殖酵母seuneu-120单菌落于麦芽汁液体培养基，28℃摇床培养16~18h，酶标仪检测并以pbs稀释调整od
600
=0.2，12000转离心2min 使菌体分离沉淀，取出上清液以121℃，30min高压灭活，经0.22μm滤膜过滤为灭活上清液。其离心沉淀菌体以pbs清洗
两次后加入液氮研磨破碎，收集破碎菌泥以pbs重悬至离心时体积，再以超声波破碎20分钟，121℃，30min高压灭活，即得菌体裂解液。
42.2、促进hacat细胞修复实验接种hacat细胞（5
×
104cells/孔）至96孔板，过夜培养至细胞贴壁。配制50μg/ml sds，每孔加入100μl，5%二氧化碳培养箱37℃培养8h。各孔分别添加5%（v/v）上清液，10%（v/v）菌体裂解液（对照组分别以等体积pbs替代上清液或菌体裂解液）培养24h。向每孔加入10μl的cck-8溶液，培养4h，检测450nm处吸亮度a。
43.细胞增殖率计算公式为：细胞增殖率=（实验组a-对照组a）/对照组a*100%，计算结果如表1所示。
44.表1 seuneu-120促进hacat细胞修复根据表1结果可知，seuneu-120上清液及菌体裂解液均可促进可修复sds引起的hacat角质细胞损伤，提高细胞增殖率，促进增殖率为 10.16~13.45%。
45.实施例4 seuneu-120促进hacat屏障修护相关基因表达实验1、seuneu-120上清液和菌体裂解液制备：制备方法参照实施例3。
46.2、促进hacat屏障修护相关基因表达实验接种人永生化角质形成细胞hacat（2ml/孔，内含5
×
105细胞）至6孔板，5%二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。分别加入5%(v/v) 上清液， 10%(v/v)菌体裂解液（对照组分别以等体积pbs替代上清液或菌体裂解液），培养24h后，加入裂解液，提取细胞总rna，检测rna浓度及纯度后反转录为cdna，以gapdh为内参基因，采用实时qpcr检测flg、ivl、ovol1和ocln基因的表达。分别以添加等体积pbs处理组为对照（基因相对表达倍数f=1），利用2-δδct
法计算各样品f值。seuneu-120上清液和菌体裂解液上调修复基因的表达计算结果分别见表2和表3。
47.公式：f=2-δδct
，其中：
△
ct
实验
=ct
实验-ct
内参（实验）;
△
ct
对照
=ct
对照-ct
内参（对照）;
△△
ct=
△
ct
实验
‑△
ct
对照。
48.表2 seuneu-120上清液上调修复基因的表达表3 seuneu-120菌体裂解液上调修复基因的表达体外细胞实验表明，本发明的粟酒裂殖酵母seuneu-120上清液和菌体裂解液具有上调皮肤屏障修护相关因子丝聚合蛋白基因flg、内皮蛋白基因ivl、ovo样转录因子1基因ovol1和紧密连接蛋白基因ocln表达的作用，基因表达量上调1.11~2.81倍。表明seuneu-120具有促进皮肤屏障修护的作用。
49.实施例5 seuneu-120上调hacat保湿相关基因表达实验1、seuneu-120菌体裂解液制备：制备方法参照实施例3。
50.2、上调hacat保湿相关基因表达实验接种人永生化角质形成细胞hacat（2ml/孔，内含5
×
105细胞）至6孔板，5%二氧化碳培养箱37℃过夜培养至细胞贴壁。加入10%(v/v) 菌体裂解液（对照组以等体积pbs替代），培养24h后，加入裂解液，提取细胞总rna，检测rna浓度及纯度后反转录为cdna，以gapdh为内参基因，采用实时qpcr检测gba基因的表达。以等体积pbs处理组为对照（基因相对表达倍数f=1），利用2-δδct
法计算各样品f值。检测结果如表4所示。
51.表4 seuneu-120菌体裂解液上调保湿基因的表达体外细胞实验表明，本发明的粟酒裂殖酵母seuneu-120具有上调保湿相关的葡萄糖脑苷脂酶基因gba表达的作用，基因表达量上调1.15~1.30倍。表明seuneu-120具有促进皮肤保湿的作用。
52.实施例6 seuneu-120调节光老化hacat细胞外基质/抗氧化/细胞自噬/降解细胞
外基质相关基因表达实验1、seuneu-120上清液及菌体裂解液制备：制备方法参照实施例3。
53.2、hacat细胞制备及紫外线损伤将hacat细胞消化后以0.5ml/孔（内含2
×
105细胞）接种至24孔板，5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。对孔内细胞进行总剂量为2j/cm2的紫外线uvb照射损伤。
54.3、seuneu-120添加将5%（v/v）上清液、10%（v/v）菌体裂解液分别加入刺激过的hacat细胞（对照组分别以等体积pbs替代上清液/菌体裂解液）。每组3平行，37℃培养过夜。
55.4、qpcr法检测细胞外基质/抗氧化/细胞自噬/降解细胞外基质相关基因相对表达倍数将上述细胞弃去培养基后，加入裂解液，提取细胞总rna，检测rna浓度及纯度后反转录为cdna，以gapdh为内参基因，采用实时qpcr检测细胞外基质相关基因col1a1，抗氧化相关基因nrf2，细胞自噬相关基因lc3b，以及降解细胞外基质相关基因mmp1的表达。以对照组基因相对表达倍数f=1，利用2-δδct
法计算各样品f值。
56.上清液上调细胞自噬相关基因lc3b；下调降解细胞外基质相关基因mmp1。结果见表5。
57.表5 seuneu-120上清液调节细胞自噬/降解细胞外基质相关基因的表达菌体裂解液上调细胞外基质相关基因col1a1，抗氧化相关基因nrf2，细胞自噬基因lc3b；下调降解细胞外基质相关基因mmp1。结果见表6。
58.表6 seuneu-120菌体裂解液调节细胞外基质/抗氧化/细胞自噬/降解细胞外基质相关基因的表达
体外细胞实验表明，本发明的粟酒裂殖酵母seuneu-120具有上调hacat细胞外基质相关的i型胶原α1链基因col1a1，抗氧化相关的核因子e2相关因子2基因nrf2，细胞自噬相关的微管相关蛋白1轻链3β基因lc3b表达的作用，基因相对表达倍数1.19~1.93；具有下调降解细胞外基质相关的基质金属蛋白酶家族基因mmp1表达的作用，基因相对表达倍数0.18~0.82。
59.实施例7 seuneu-120调节氧化损伤hff细胞外基质/抗氧化/免疫调节因子/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因表达实验1、seuneu-120上清液及菌体裂解液制备：制备方法参照实施例３。
60.2、hff细胞制备及h2o2诱导氧化损伤将dmem培养的hff细胞消化后以0.5ml/孔（内含2
×
105细胞）接种至24孔板，5%二氧化碳培养箱37℃培养过夜。每孔加入终浓度为200μm的h2o2进行刺激，37℃静置1h。
61.3、seuneu-120添加将5%（v/v）上清液、10%（v/v）菌体裂解液分别加入刺激过的hff细胞（对照组分别以等体积pbs替代上清液/菌体裂解液）。每组3平行，37℃培养过夜。
62.4、qpcr法检测细胞外基质/抗氧化/免疫调节因子/抑制细胞凋亡/细胞生长因子/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因相对表达倍数将上述细胞弃去培养基后，加入裂解液，提取细胞总rna，检测rna浓度及纯度后反转录为cdna，以gapdh为内参基因，采用实时qpcr检测细胞外基质相关基因col13a1、sptssa、mkx和smad3，抗氧化相关基因pten和sirt-1，免疫调节因子mor，抑制细胞凋亡相关基因bcl-2，细胞生长因子相关基因fgf1、fgf2、fgf7、fgf21和hgf，降解细胞外基质相关基因mmp3，以及细胞凋亡相关基因bax和caspase-9的表达。以对照组基因相对表达倍数f=1，利用2-δδct
法计算各样品f值。
63.上清液上调细胞外基质相关基因smad3，抗氧化相关基因sirt-1，抑制细胞凋亡基因bcl-2；下调降解细胞外基质相关基因mmp3，细胞凋亡相关基因bax和caspase-9，结果见表7。
64.表7 seuneu-120上清液调节细胞外基质/抗氧化/抑制细胞凋亡/降解细胞外基质/细胞凋亡相关基因的表达
菌体裂解液上调细胞外基质相关基因col13a1、mkx和sptssa，免疫调节因子相关基因mor，抗氧化相关基因pten和sirt-1，抑制细胞凋亡相关基因bcl-2，细胞生长相关基因fgf1、fgf2、fgf7、fgf21和hgf。结果见表8。
65.表8 seuneu-120 菌体裂解液上调细胞外基质/免疫调节因子/抗氧化/抑制细胞凋亡/细胞生长因子相关基因的表达
体外细胞实验表明，本发明的粟酒裂殖酵母seuneu-120具有上调hff细胞外基质相关的类胶原膜蛋白13α链基因col13a1、丝氨酸棕榈酰转移酶基因sptssa、莫霍克蛋白基因mkx和信号转导蛋白基因smad3，免疫调节因子相关的β-内啡肽受体基因mor，抗氧化相关的10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物基因pten和sirtuins蛋白家族基因sirt-1，抑制细胞凋亡相关的b淋巴细胞瘤-2基因bcl-2，以及细胞生长因子相关的成纤维细胞生长因子基因fgf1、fgf2、fgf21、角质细胞生长因子基因fgf7和肝细胞生长因子基因hgf表达的作用，基因相对表达倍数1.06~2.81倍；具有下调降解细胞外基质相关的基质金属蛋白酶家族基因mmp3，以及细胞凋亡相关的bcl2-associated x蛋白基因bax和半胱氨酸蛋白酶家族基因caspase-9，基因相对表达倍数0.43~0.80。
66.实施例8 seuneu-120 dpph自由基清除能力实验1、seuneu-120上清液制备：上清液制备方法参照实施例3。
67.2、dpph自由基清除能力检测试剂配制和检测方法按照索莱宝dpph 自由基清除能力检测试剂盒说明书进行。测定各样品515nm吸亮度，求平均值并计算各样品自由基清除率。计算公式：d%=[（a空白-（a测定-a对照）]
÷
a空白
×
100%，计算结果如表9所示。
[0068]
表9 seuneu-120 dpph自由基清除率（%）上述结果显示，粟酒裂殖酵母seuneu-120具有dpph自由基清除能力，dpph自由基清除率为84.26%~87.39%。
[0069]
实施例9 seuneu-120总抗氧化能力测定实验1、seuneu-120上清液制备：上清液制备方法参照实施例3。
[0070]
2、总抗氧化能力测定试剂配制和检测方法按照索莱宝总抗氧化能力（t-aoc）检测试剂盒说明书进行，其中反应总体积为0.204ml，反应中样本体积0.006ml。测定各样品593nm吸亮度a，根据公式：a测-a空白=6.1464x
ꢀ‑ꢀ
0.0009计算得到x值，进而计算得到总抗氧化能力。
[0071]
总抗氧化能力计算公式为：总抗氧化能力（μmol/ml）=x
×
v反总
÷
v样，计算结果见
表10。
[0072]
表10 seuneu-120上清液总抗氧化能力（μmol/ml）上述结果显示，粟酒裂殖酵母seuneu-120具有抗氧化能力，总抗氧化能力为5.610~5.814 μmol/ml。
[0073]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、
ꢀ“
示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不一定指的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任何的一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。
[0074]
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

技术特征：
1.粟酒裂殖酵母（schizosaccharomyces pombe）seuneu-120，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no: m 20221432。2.权利要求1所述的粟酒裂殖酵母在制备改善肌肤状况的产品中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述改善皮肤状况包括促进细胞增殖、修复皮肤屏障、保湿、抗衰老中的至少一种。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述促进细胞增殖为促进皮肤角质细胞增殖。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述修复皮肤屏障包括恢复细胞活力和/或上调屏障修护相关基因的表达，所述屏障修护相关基因包括flg、ivl、ovol1和ocln中的至少一种。6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述保湿为上调保湿相关基因gba的表达。7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述抗衰老包括如下所示的至少一种：上调细胞外基质合成相关基因的表达，所述细胞外基质合成相关基因包括col1a1、col13a1、sptssa、smad3和mkx中的至少一种；下调降解细胞外基质相关基因的表达；所述降解细胞外基质相关基因包括mmp家族基因中的至少一种；上调细胞抗氧化相关基因的表达，所述细胞抗氧化相关基因包括nrf2、pten和sirt-1中的至少一种；上调细胞免疫调节因子相关基因mor的表达；下调细胞凋亡相关基因bax和/或caspase-9的表达；上调细胞自噬相关基因lc3b的表达；上调抑制细胞凋亡相关基因bcl-2的表达；上调细胞生长因子相关基因的表达，所述细胞生长因子相关基因包括fgf1、fgf2、fgf7、fgf21和hgf中的至少一种；清除dpph自由基；抗氧化。8.根据权利要求2~7任一项所述的应用，其特征在于，所述产品为食品、药品或化妆品。9.一种改善皮肤状况的产品，其特征在于，由包括权利要求1所述粟酒裂殖酵母的原料制成。10.根据权利要求9所述的产品，其特征在于，包括权利要求1所述的粟酒裂殖酵母的上清液和菌体裂解液。

技术总结
本发明公开了一种粟酒裂殖酵母及其改善皮肤状况的应用，该菌株为粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）SEUNEU-120，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20221432。本发明提供的粟酒裂殖酵母具有促进细胞增殖、修护皮肤屏障、保湿、抗衰老的功能，可用于制备食品、药品、化妆品等。化妆品等。


技术研发人员：郭青青 陈奕兴 王熠 孙夏慧 张玉
受保护的技术使用者：山东锦鲤生物工程有限公司
技术研发日：2023.06.15
技术公布日：2023/7/22