一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂及其应用的制作方法

1.本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂及其应用。


背景技术：

2.枸杞属茄科枸杞属是重要的名贵中药材，多年生落叶灌木，具有抗旱、耐盐碱、耐高温和耐瘠薄的特点，因其生长期长，生长量大，对矿质元素的需求量多，现生产上多以大量施用化学肥料维持枸杞的产量。虽然传统农家肥可在一定程度上弥补单施化肥的缺陷，但仍存在着肥效低而不稳等问题。但化学肥料尤其是氮肥施用量过多，极易导致产品质量下降、药残留过高，环境污染等问题。随着人们对环境保护的日益重视及生态意识的逐渐提高，依据生物固氮和有益微生物能改善肥力状况的原理，微生物肥料逐渐成为现代农林业生产的重要用肥之一，并且将在末来的农林业生产中发挥重大作用。
3.乳酸菌是食品微生物大量利用的菌类，它们广泛分布于自然界中。大量研究表明，乳酸菌能够调节机体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡，提高食物消化率和生物价，降低血清胆固醇，控制内毒素，抑制肠道内腐败菌生长繁殖和腐败产物的产生，制造营养物质，刺激组织发育，从而对机体的营养状态、生理功能、细胞感染、药物效应、毒性反应、免疫反应、肿瘤发生、衰老过程和突然的应急反应等产生作用。众所周知，乳酸菌在食品中发挥实际作用的消息已经司空见惯。随着科学技术的不断发展，乳酸菌的应用越来越多。一些乳酸菌被用于干肉制品中，由于其自身的安全性而被推广使用，发挥了巨大的作用。
4.另外，有些乳酸菌可以产生抗菌物质，大多数的抗菌谱均比较窄。通过已被鉴定的乳酸菌产生的细菌素，把这些乳酸菌分为两类，一类是仅对相关的菌有抑制作用的窄抗菌谱的乳酸菌，第二类是具有广谱抗菌活性的乳酸菌，它们对致病菌，如肉毒梭菌、利斯特菌等有抑制作用。通过检索，目前尚未见采用乳酸菌及其代谢产物提高枸杞品质和产量的文献报道。


技术实现要素：

5.鉴于现有技术的不足，本发明提供一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂及其应用。
6.为了实现上述技术目的，本发明人结合多年对各类乳酸菌的研究经验，通过大量试验筛(lactobacillusplantarum)p-8、格氏乳杆菌g098以及乳酸片球菌zpa017组成的乳酸菌制剂。将该乳酸菌制剂的菌液喷施于枸杞植株的根部后，结果显示枸杞产量和品质大大提高。本发明提供的技术解决方案如下：
7.一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂，其特殊之处在于，所述乳酸菌制剂中的活性菌为乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017中的至少一种组成。
8.需要说明的是，本发明所采用的乳双歧杆菌(bifidobacteriumlactis)v9，分离自
内蒙古草原上健康蒙古族儿童肠道中，具有良好的耐酸、耐胆盐特性，具有调节肠道菌群平衡、拮抗体内致病菌、防止腹泻、增强免疫的功能。该菌株已于2011年11月18日，保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其微生物保藏编号为cgmccno.5470。
9.本发明所采用的植物乳杆菌(lactobacillusplantarum)p-8，分离自内蒙古传统自然发酵酸牛奶中，具有优异的抗胃肠道消化液耐受能力，能够存活于动物肠道内；该菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2012年06月28日，保藏编号为cgmccno.6312。
10.本发明所采用的格氏乳杆菌g098是从西藏自治区拉萨市一个健康婴儿的肠道中分离出来的菌株，该菌株对人工胃肠液和胆汁盐表现出良好的耐受性，是一株潜在的益生菌株。该菌株已于2021年7月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmccno.22909。
11.本发明所采用的乳酸片球菌zpa017是从健康仔猪中筛选出一株性能优良的乳酸片球菌菌株，该菌株具有耐酸、耐胆盐、黏附性强、抑菌性好的特点。该乳酸菌菌株于2014年04月14日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101)进行保藏，菌株名称为乳酸片球菌(pediococcusacidilactici)zpa017，保藏编号为：cgmccno.9040。
12.在一个实施例中，乳酸菌制剂中所述乳酸菌制剂中的活性菌为所述乳双歧杆菌v9和所述植物乳杆菌p-8，所述乳双歧杆菌v9和所述植物乳杆菌p-8的活菌数比为(3～5)：1。
13.在另一个实施例中，所述乳酸菌制剂中的活性菌为所述乳双歧杆菌v9和所述格氏乳杆菌g098，所述乳双歧杆菌v9和所述格氏乳杆菌g098的活菌数比为(2～9)：1
14.本发明的目的是这样实现的：一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂，该乳酸菌制剂按照如下方法制备而成：
15.(1)将所述乳双歧杆菌v9、所述植物乳杆菌p-8、所述格氏乳杆菌g098、以及所述乳酸片球菌zpa017中的至少一种接种于mrs液体培养基中，在39
±
1℃、ph值为5.4～5.0条件下培养24～35小时，经离心洗涤后，在菌体沉淀上加入10％-12％灭菌脱脂牛乳液，并调整其菌数为1.9～2.3
×
10
10
cfu/ml，混匀后倾注培养；
16.(2)将步骤(1)得到的菌株培养物分别接种于mrs培养液，在39
±
1℃条件下培养30～36小时，再分别接种10％～12％的灭菌脱脂牛乳液，在39
±
1℃条件下培养10～18小时，调整活菌数为3.5～5.4
×
10
10
cfu/ml，ph值为6.5。
17.进一步地，所述mrs液体培养基按如下配方配制而成：1升蒸馏水中溶解下列组分：蛋白胨10克，牛肉膏10克，酵母提取物5克，磷酸氢二钾2克，柠檬酸氢二铵2克，乙酸钠5克，葡萄糖20克，吐温80 1毫升，硫酸镁0.58克，硫酸锰0.25克，琼脂粉18.0克，调ph值6.2-6.6，高压灭菌。
18.同时，本发明还提供了一种上述乳酸菌制剂在提高枸杞产量和品质中的应用。
19.进一步地，将所述乳酸菌制剂配制成菌液后浇施于枸杞植株的根部。
20.进一步地，所述菌液的活菌浓度为4
×
108～5
×
109cfu/ml。
21.进一步地，所述菌液的ph为6.5。
22.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
23.本发明提供一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂，与现有技术相比，乳酸菌
制剂可提高了枸杞叶片内保护酶活性，有效的抑制膜质过氧化，使细胞质膜免受过度伤害，从而防止叶片早衰，提高植株抗性和适应能力为枸杞生长创造良好的生长环境条件，为高产、稳产、优质打下坚实基础，施加了乳酸菌制剂的枸杞在产量和质量方面大大提高。乳酸菌制剂可以改善作物生长发育情况，减少发病率，可以广泛应用于枸杞作物。同时，乳酸菌制剂也是生产无公害食品、有机食品的重要生产资料之一，值得大面积推广应用。
具体实施方式
24.为使本技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本技术实施例，对本技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，下面所描述的实施例是本技术的一部分实施例，而不是全部的实施例。通常在此处描述和示出的本技术实施例的组件可以以各种不同的配置来布置和设计。
25.因此，以下结合提供的本技术实施例的详细描述旨在仅仅表示本技术的选定实施例，并非限制本技术要求保护的范围。基于本技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动的前提下所获得的其他所有实施例，都属于本技术保护的范围。
26.实施例1：乳酸菌制剂的制备
27.1.mrs液体培养基的制备：1升蒸馏水中溶解下列组分：蛋白胨10克，牛肉膏10克，酵母提取物5克，磷酸氢二钾2克，柠檬酸氢二铵2克，乙酸钠5克，葡萄糖20克，吐温80 1毫升，硫酸镁0.58克，硫酸锰0.25克，琼脂粉18.0克。调ph值6.2-6.6，高压灭菌(101kpa，121℃)15min。
28.2.脱脂乳培养基配制：将脱脂乳粉按照11％比例复原为脱脂乳，自然ph，再经115℃灭菌20min制得。
29.3.菌种的活化及发酵乳制备：
30.(1)将乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017按照中的至少一种接种量划线接种于mrs液体培养基中，在39
±
1℃、ph值为5.4～5.0条件下培养24～35小时，经离心洗涤后，在菌体沉淀上加入10％-12％灭菌脱脂牛乳液，并调整其菌数为1.9～2.3
×
10
10
cfu/ml，混匀后倾注培养；
31.(2)将步骤(1)得到的菌株培养物分别接种于mrs培养液，在39
±
1℃条件下培养30～36小时，再分别接种10％～12％的灭菌脱脂牛乳液，在39
±
1℃条件下培养10～18小时，调整活菌数为3.5～5.4
×
10
10
cfu/ml，ph值为6.5。
32.4.接种量的确定：
33.发酵过程中接种量的大小会影响菌种的生长繁殖速度。小量接种，会导致发酵前期菌体生长缓慢，延长发酵周期，增加染菌机会。大量接种，耗费功力，增加成本，可以缩短菌种的延迟期，过大的接种量容易造成菌体生长过快，导致基质营养缺乏。因此，控制好接种量是保证发酵正常的一个关键因素，不同接种量对乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017增殖的影响不同。经过发明人多次试验，发现乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017分别按照1％～8％：的接种量接种时，效果比较好，且此浓度范围内的细菌增殖差异不大。因此为了便于操作，将不同菌种均按照3％的接种量进行接种。
34.5.最佳初始ph的确定
35.ph会影响微生物原生质膜的改变，同时ph会对发酵液中的部分营养中间产物的离解造成影响，因此每种微生物都有适宜自己的ph范围。如果环境中的氢离子浓度超过了微生物的适应范围，微生物的生命活动就会受到抑制。为了确定最佳初始ph，将乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017全部一起进行接种，分别测定了培养基在初始ph为5.2、5.5、5.7、6.0、6.3时，培养14h后的活菌数。初始ph对乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017的生长情况影响很大，初始ph为5.2时，培养14h的乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017活菌数最高，初始ph过高或过低都不利于乳酸菌的生长，由此可以确定ph5.2为乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017在mrs液体培养基中培养的最佳初始ph值，因此可以将培养过程中的ph值设置为5.4～5.0。
36.将乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017全部一起进行接种进行最佳温度确定，经过发明人多次试验，确定了培养过程中的乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017的最佳培养温度为39℃。
37.实施例2：乳酸菌制剂对枸杞生长、产量和品质的影响实验
38.1.试验方法
39.本试验于2022年5月至10月在内蒙古巴彦淖尔市乌拉特前旗先锋镇进行。供试枸杞品种为蒙杞一号。乳酸菌制剂按照实施例1方法制备，制备6种乳酸菌制剂，分别由1-6进行编号，如表1所示。枸杞种植地理化性质：耕层厚度≥40厘米，有机质含量≥10克/千克，ph值7.0至8.5，含盐量《0.6％。
40.选择一块理化性质差异比较小的种植基地，选择一批生长年份相同、高度相差不大、直径相仿、间距相近的枸杞植株，将其分为数量相等的7组，每组1-5颗，在常规施肥的基础上，其中第1-6组分别施加对应1-6的乳酸菌制剂，第7组施加清水。其中，乳酸菌制剂和清水每次的施加量均相同。在2022年的6-8月的每月的同一天分别对7组实验枸杞的根部施加对应的乳酸菌制剂和水。施加的次数为2次左右，施加量为每次10ml左右。然后测定试验植株叶片中的叶绿素、可溶性蛋白质、脯氨酸、过氧化物酶、丙二醛等含量的平均值，以及枸杞病害以及土壤有机质和土壤酶活性。
41.表1
42.编号乳酸菌制剂的活菌种类1格氏乳杆菌g0982乳双歧杆菌v93植物乳杆菌p-84乳酸片球菌zpa0175乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-86乳双歧杆菌v9、格氏乳杆菌g098
43.2.实验结果
44.2.1乳酸菌制剂对枸杞叶片中可溶性蛋白质含量的影响(μg/g)
45.在每次施加乳酸菌制剂或者水后的两周左右，从每组试验的枸杞树上摘取相同高度位置的相同数量的叶片，选取各组叶片的一部分分别进行杀青、烘干以及粉碎后，采用考马斯亮蓝法对各组枸杞叶片可溶性蛋白质含量进行定测。试验过程汇总，各组枸杞叶质量
相等。结果见表2：
46.表2
[0047][0048]
2.2乳酸菌制剂对枸杞叶片中脯氨酸含量的影响
[0049]
选取上述摘取的各组叶片的一部分采用酸性茚三酮显色法进行脯氨酸含量的测定，测定结果如表3所示：
[0050]
表3
[0051][0052]
通过表3可以看到，施加6种乳酸菌制剂的枸杞叶片脯氨酸含量均高于对照，其中施加第1组的格氏乳杆菌g098的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为28.36μg/g，其中施加第2组乳双歧杆菌v9的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为29.88μg/g，其中施加第3组植物乳杆菌p-8的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为31.57μg/g，其中施加第4组乳酸片球菌zpa017的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为31.32μg/g，其中施加第5组乳双歧杆菌v9和植物乳杆菌p-8的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为34.01，其中施加第6组乳双歧杆菌v9和格氏乳杆菌g098的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量为33.16，第七组对照组中枸杞叶中脯氨酸含量为26.41μg/g，各组含量分别较对照高7.4％、13.1％、19.5％、18.2％、28.8％、25.6％。且施加不同乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸含量也不相同，施加了第5组和第6组的乳酸菌制剂的枸杞叶中脯氨酸的含量最高。
[0053]
2.3乳酸菌制剂对枸杞叶片中过氧化物酶(pod)活性的影响
[0054]
pod是植物体内担负清除h2o2的主要酶类之一，pod能催化h2o分解成h2o和o2。一般认为，pod活性升高是植物抗性的表现形式。通过用愈创木酚法方法，对各组枸杞叶片中过氧化物酶(pod)活性进行检测，如表4所示，施加不同的乳酸菌制剂后枸杞叶片过氧化物酶活性呈上升趋势，第1组的枸杞叶片中pod活性较低，有3种乳酸菌制剂极显著增加了枸杞叶
片过氧化物酶活的活性。与空白对照相比，格氏乳杆菌g098(1)、乳双歧杆菌v9(2)、植物乳杆菌p-8(3)、乳酸片球菌zpa017(4)、乳双歧杆菌v9和植物乳杆菌p-8(5)、乳双歧杆菌v9和格氏乳杆菌g098(6)，分别使枸杞叶片过氧化物酶活性提高4.40％、30.98％、30.31％、20.87％、36.6％和27.00％。
[0055]
表4
[0056][0057]
2.4乳酸菌制剂对枸杞叶片中超氧化物歧化酶(sod)活性的影响
[0058]
植物在逆境中产生自由基，导致脂膜过氧化作用加强，造成膜脂破坏和植物伤害。植物在长期的进化适应过程中，形成了一套活性氧的清除体系，sod是植物体内清除自由基的最关键酶之一，sod能将o2转化成o2与h2o2。
[0059]
本实施例中，通过用分光光度方法，检测乳酸菌制剂对枸杞叶片中超氧化物歧化酶(sod)活性的影响，如表4所示，施加了乳酸菌制剂的枸杞叶片中sod活性均逐渐增强，且施加了不同的乳酸菌制剂的差异逐渐加大。第5组施加了乳双歧杆菌v9和植物乳杆菌p-8的乳酸菌制剂的枸杞叶中sod活性最强为第7组的1.24倍。
[0060]
2.5乳酸菌制剂对枸杞叶片中过氧化氢酶(cat)活性的影响
[0061]
cat也是生物体内极为重要的保护酶之一，它能清除细胞内过多的h2o2，使其维持在低水平上，保护膜的结构。本实施例中，通过用愈创木酚法方法，检测乳酸菌制剂对枸杞叶片过氧化氢酶(cat)活性的影响，如表4所示，由统计分析得知：与各对照相比，不同乳酸菌制剂对枸杞叶片过氧化氢酶活性都有不同程度的影响，差异达到了显著。第1-6组施加了不同乳酸菌制剂的枸杞叶片中cat活性分别比对照分别增加0.70u/(g
·
min)、3.46u/(g
·
min)、3.67u/(g
·
min)、2.85u/(g
·
min)、3.66u/(g
·
min)和3.37u/(g
·
min)。
[0062]
2.6乳酸菌制剂对枸杞叶片中丙二醛(mda)含量的影响
[0063]
本实施例中，通过用mda检测试剂盒(微量法)方法，检测不同乳酸菌制剂对枸杞叶片中丙二醛(mda)含量的影响，结果如表5所示，通过表5看出，第1-6组施加了不同乳酸菌制剂的枸杞叶片中mda含量依次为6.89umol/g、5.04bumol/g、4.13umol/g、5.65umol/g、3.86umol/g和4.04umol/g，分别比对照低出5.2％、30.8％、43.2％、22.3％、46.9％和44.4％。第5组的枸杞叶片中丙二醛(mda)含量则处于较低水平，第2组居中。
[0064]
表5
[0065][0066]
2.7乳酸菌制剂对枸杞发病率的影响
[0067]
对试验区内各组的枸杞进行根腐病、黑果病、叶斑病(灰斑病和霉斑病)和病毒病发生情况进行调查，结果见表6。由表6可知，第1组、第3组和第4组的根病毒病发生率均为0，施用乳酸菌制剂后明显的降低了枸杞根腐病的发病率。从表6看出施用乳酸菌制剂的枸杞病害有所减轻。
[0068]
表6
[0069][0070]
2.8乳酸菌制剂对枸杞叶片营养的影响
[0071]
乳酸菌制剂改善植株营养状况，保证植株健壮生长植株营养状况是产量的基础，对枸杞叶片中氮、磷、钾、钙、镁含量进行分析判定，可以判断增产的潜力。从表7看出，施用生物肥的枸杞，其功能叶中氮、磷、钾、钙、镁均比对照组高，其中第5组增加的相对较多，分别比对照组增加19.68％、26.24％、51.38％、28.45％、64.48％。说明施用一定量的乳酸菌制剂可以协调n的吸收，促进p、k、ca、mg元素的吸收，n、p、k是枸杞生长发育需要量最大的营养元素，均衡地供应n、p、k营养是施肥的关键。乳酸菌制剂中的有益菌可以将土壤中难溶的p、k分解出来转变为作物能吸收利用的p、k化合物，可促进农作物吸收营养，钾和钙的增加有助于提高植株抗逆性，镁的增加为叶绿素的合成创造了物质条件。
[0072]
表7
[0073]
[0074][0075]
2.9乳酸菌制剂对枸杞植物学性状的影响
[0076]
枸杞的第1次开花结实是在上一年形成的枝条上(习惯称其为“老眼枝”，所结的果实称“老眼果”)，第2次开花结实是在春季生长的枝条上，第3次开花结实是在秋季生长的枝条上，老眼果采摘结束后，老眼枝经过一段时间的养分积累，又会长出新的枝条。按时间划分，老眼枝果实和春七寸果枝上的果实称为夏果，秋七寸果枝上的果实称为秋果。
[0077]
对试验区各组的枸杞树进行测量春七寸果枝和秋七寸果枝的长度和粗度，观察功能叶颜色。另外，每株选取10条老眼果枝，每条老眼果枝随机选10片功能叶，测量叶片大小和厚度。在叶片厚度与其他处理相同的情况下，第5组的老眼果枝功能叶分别较第6组，第5组，第4组及对照组大，表明使用微生物肥料有利于叶片光合作用的进行和光合产物的积累。测量春七寸果枝和秋七寸果枝长度和粗度发现，施用生物肥的枸杞，春七寸果枝和秋七寸果枝普遍增长、增粗；老眼果枝功能叶叶色浓绿，叶片增大、增厚。
[0078]
2.10乳酸菌制剂土壤微生物数量的影响
[0079]
在枸杞的三大时期，分别取各组枸杞根部同一深度的土壤进行微生物数量测定，结果如表8所示，施加过乳酸菌制剂的土壤样品中细菌数量增加，盛长期施加了第1组和第2组乳酸菌制剂后的土壤中的细菌数量分别是对照组的
[0080]
1.83、2.13倍。放线菌和真菌数量较为细菌的少，但经乳酸菌制剂处理的总菌数均高于对照组。
[0081]
表8
[0082][0083][0084]
2.11乳酸菌制剂对枸杞产量指标的影响
[0085]
施加不同乳酸菌制剂的枸杞单株产量如表9所示，实验结果表明，施加乳酸菌制剂的枸杞单株产量均高于对照组，其中第5组的枸杞单株产量最高，第1组的枸杞单株产量最
低。
[0086]
表9
[0087][0088]
2.12乳酸菌制剂对枸杞感官品质和营养品质指标的影响
[0089]
通过对各组采摘的枸杞进行果形指数和营养评测，发现施加乳酸菌制剂的枸杞果肉厚度(横径)均高于对照组，其中第3组的枸杞果肉横径最大为7mm。单果重量方面，施加乳酸菌制剂的枸杞单果重量均超过对照组。其中第5组的枸杞单果重量最大，为11.35mg。
[0090]
在营养方面，对各组所得枸杞的枸杞多糖进行检测，发现施加乳酸菌制剂的枸杞的枸杞多糖含量均高于对照组。
[0091]
综上所述，本发明提供了一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂，与对照组相比，该乳酸菌制剂可提高了枸杞叶片内保护酶活性，有效的抑制膜质过氧化，使细胞质膜免受过度伤害，从而防止叶片早衰，提高植株抗性和适应能力为枸杞生长创造良好的生长环境条件，为高产、稳产、优质打下坚实基础，施加了乳酸菌制剂的枸杞在产量和质量方面大大提高。乳酸菌制剂可以改善作物生长发育情况，减少发病率，可以广泛应用于枸杞作物。同时，乳酸菌制剂也是生产无公害食品、有机食品的重要生产资料之一，值得大面积推广应用。
[0092]
以上所述，仅为本技术的最优具体实施方式，但本技术的保护范围并不局限于此，任何在本技术揭露的技术范围内的变化或替换，都应涵盖在本技术的保护范围之内。因此，本技术的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。

技术特征：
1.一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂，其特征在于，所述乳酸菌制剂中的活性菌为乳双歧杆菌v9、植物乳杆菌p-8、格氏乳杆菌g098、以及乳酸片球菌zpa017中的至少一种组成。2.根据权利要求1所述的乳酸菌制剂，其特征在于：所述乳酸菌制剂中的活性菌为所述乳双歧杆菌v9和所述植物乳杆菌p-8，所述乳双歧杆菌v9和所述植物乳杆菌p-8的活菌数比为(3～5)：1。3.根据权利要求1所述的乳酸菌制剂，其特征在于：所述乳酸菌制剂中的活性菌为所述乳双歧杆菌v9和所述格氏乳杆菌g098，所述乳双歧杆菌v9和所述格氏乳杆菌g098的活菌数比为(2～9)：1。4.根据权利要求1-3任一所述的乳酸菌制剂，其特征在于，所述乳酸菌制剂按照如下方法制备而成：(1)将所述乳双歧杆菌v9、所述植物乳杆菌p-8、所述格氏乳杆菌g098、以及所述乳酸片球菌zpa017中的至少一种接种于mrs液体培养基中，在39
±
1℃、ph值为5.4～5.0条件下培养24～35小时，经离心洗涤后，在菌体沉淀上加入10％-12％灭菌脱脂牛乳液，并调整其菌数为1.9～2.3
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cfu/ml，混匀后倾注培养；(2)将步骤(1)得到的菌株培养物分别接种于mrs培养液，在39
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1℃条件下培养30～36小时，再分别接种10％～12％的灭菌脱脂牛乳液，在39
±
1℃条件下培养10～18小时，调整活菌数为3.5～5.4
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cfu/ml，ph值为6.5。5.根据权利要求4所述的乳酸菌制剂，其特征在于：所述mrs液体培养基按如下配方配制而成：1升蒸馏水中溶解下列组分：蛋白胨10克，牛肉膏10克，酵母提取物5克，磷酸氢二钾2克，柠檬酸氢二铵2克，乙酸钠5克，葡萄糖20克，吐温80 1毫升，硫酸镁0.58克，硫酸锰0.25克，琼脂粉18.0克，调ph值6.2-6.6，高压灭菌。6.权利要求4所述的乳酸菌制剂在提高枸杞产量和品质中的应用。7.根据权利要求6所述的乳酸菌制剂在提高枸杞产量和品质中的应用，其特征在于，将所述乳酸菌制剂配制成菌液后浇施于枸杞植株的根部。8.根据权利要求7所述的乳酸菌制剂在提高枸杞产量和品质中的应用，其特征在于，所述菌液的活菌浓度为4
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109cfu/ml。9.根据权利要求7或8所述的乳酸菌制剂在提高枸杞产量和品质中的应用，其特征在于，所述菌液的ph为6.5。

技术总结
本发明公开了一种能提高枸杞产量和品质的乳酸菌制剂及其应用，该乳酸菌制剂中的活性菌为乳双歧杆菌V9、植物乳杆菌P-8、格氏乳杆菌G098、以及乳酸片球菌ZPA017中的至少一种组成。将该乳酸菌制剂的菌液喷施于枸杞植株的根部后，通过可溶性蛋白质、脯氨酸、过氧化物酶等相关检测，结果显示乳酸菌制剂可以提高植株抗性和适应能力为枸杞生长创造良好的生长环境条件，为高产、稳产、优质打下坚实基础，施加了乳酸菌制剂的枸杞在产量和质量方面大大提高。乳酸菌制剂的枸杞在产量和质量方面大大提高。


技术研发人员：杨雷 贺润晶 李建武 陈升富
受保护的技术使用者：内蒙古中峰生物科技有限公司
技术研发日：2023.04.13
技术公布日：2023/8/5