取代的三环化合物的制作方法

1.本发明涉及新型式(i)的化合物或其药学上可接受的盐。本发明还涉及一种制备本发明化合物的方法、这些化合物作为激酶抑制剂的用途以及包含本发明化合物的组合物。


背景技术：

2.蛋白激酶(ptk)是通过以atp作为磷酸源磷酸化特定氨基酸来调节蛋白质生物活性从而诱导蛋白质从非活性形式到活性形式的构象变化的酶。它们用于协调几乎所有细胞过程的活动并且因此是细胞功能的关键调节因子。激酶在诸如细胞周期等复杂功能的信号转导和协调方面特别突出。有时蛋白激酶基于它们磷酸化的底物进行分类。例如，丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶磷酸化丝氨酸或苏氨酸氨基酸残基，而酪氨酸激酶磷酸化酪氨酸氨基酸残基。
3.酪氨酸激酶是信号转导过程的重要介质，导致细胞增殖、分化、迁移、代谢和程序性细胞死亡。它们与肿瘤发展和进展的几个步骤有关。酪氨酸激酶信号传导通路通常阻止失调的增殖或有助于对凋亡刺激的敏感性。两面神激酶(janus kinase)(称为jak)是酪氨酸激酶，其参与细胞因子信号从膜受体到信号转导子和转录激活因子(stat)的转导。细胞因子在控制细胞生长和免疫反应中起着关键作用。许多细胞因子通过结合并且激活i型和ii型细胞因子受体发挥作用。这些受体进而依赖于两面神激酶(jak)的酶家族进行信号转导。目前，存在四种已知哺乳动物jak家族成员：jak1(两面神激酶-1)、jak2(两面神激酶-2)、jak3(又称为两面神激酶白细胞；jakl；l-jak和两面神激酶-3)以及tyk-2(又称为蛋白酪氨酸激酶2)。jak的突变或功能异常可能导致信号传导通路发生遗传或表观遗传学改变，从而赋予癌细胞选择优势。此类异常还可能导致由免疫和神经系统的不适当激活引起的疾病，诸如炎性病症、自身免疫性疾病、增殖性疾病、移植排斥、涉及软骨更新受损的疾病、先天性软骨畸形和/或与il6分泌过多相关的疾病。
4.通过抑制激酶的活性来预防或治疗激酶介导的疾病。jak抑制剂干扰jak-stat信号传导通路。因此，抑制这些两面神激酶的活性的药物阻断针对免疫反应有效的细胞因子信号传导(current opinion in pharmacology.12(4):464-70)。
5.美国专利号re41783公开了一些吡咯并嘧啶化合物，所述吡咯并嘧啶化合物是jak抑制剂，更具体地是jak3抑制剂。美国专利8962629和8088764中公开的三环和三唑并吡啶化合物分别是特定的jak1抑制剂，而us8158616中公开的氮杂环丁烷衍生物是混合的jak1和jak2抑制剂。虽然这些jak抑制剂已被显示是令人满意的，但jak相关疾病需要更有效和强效的治疗。仍然需要研究和鉴定可有效治疗由两面神激酶突变和功能障碍引起的疾病的新化合物。
6.因此，本发明的目的是以新颖化合物的形式提供替代方案，所述化合物有效预防和/或治疗由jak功能异常引起的疾病。又一个目的是提供制备这些新颖化合物的方法、它们的药物配制品以及使用本发明化合物治疗由jak异常引起的疾病的方法。本发明的另一
个目的是提供廉价且可负担的jak抑制剂。本发明的另一个目的是提供一种治愈或减轻由jak功能异常引起的疾病的影响的方法。


技术实现要素：

7.本发明涉及一种式(i)的化合物
[0008][0009]
或其药学上可接受的盐；
[0010]
其中q是式q1或q2的基团；
[0011][0012]
(波浪键)表示连接点；
[0013]
其中r1是-nrarb；
[0014]
r2是氢或c
1-c
10
烷基；
[0015]
ra和rb独立地表示氢或c
1-c
10
烷基。
[0016]
本发明的另一个实施方案提供了一种特别优选的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自由以下项组成的组：
[0017]
n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0018]
n-乙基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0019]
1-甲基-n-丙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0020]
1-甲基-n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0021]
n-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0022]
n-乙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0023]
n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0024]
n,3-二甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0025]
n-乙基-3-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0026]
3-甲基-n-丙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0027]
3-甲基-n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0028]
n-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；
[0029]
n-乙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；和
[0030]
n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺。
[0031]
本发明的另一个实施方案提供了一种特别优选的式(i)的化合物，所述化合物是n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐。
[0032]
本发明的另一个实施方案提供了一种特别优选的式(i)的化合物，所述化合物是n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐。
[0033]
本发明的另一个实施方案提供了制备一种式i的化合物或其药学上可接受的盐的方法。
[0034]
在本发明的另一个实施方案中，提供了包含式(i)的化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。
[0035]
在本发明的又一个实施方案中，提供了式(i)的化合物或其药学上可接受的盐或者包含此类化合物或其盐的组合物，其用于治疗或预防由激酶，尤其是两面神激酶的功能异常引起的疾病或病症。
[0036]
在另一个实施方案中，本发明提供了式(i)的化合物或其药学上可接受的盐或者包含此类化合物或其盐的组合物在制备用于治疗或预防由激酶，尤其是两面神激酶的功能异常引起的疾病或病症的药物中的用途。
[0037]
在又一个实施方案中，本发明提供了治疗或预防有需要的受试者的由激酶(尤其是两面神激酶)的功能异常引起的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的式(i)的化合物或其药学上可接受的盐或者包含此类化合物或其盐的组合物。
具体实施方式
[0038]
下列反应方案说明了本发明化合物的制备。
[0039]
方案i说明了式(i)的化合物的制备，其中q、r1和r2如上定义，并且l1和l2表示x或离去基团。x可以是离去基团，其与l1或l2的离去基团相同或不同于l1和l2的离去基团。x也可以是可容易被-cor1取代或转化成-cor1的基团。
[0040]
[0041]
方案i
[0042]
根据本发明的一个方面，离去基团l1、l2或x是可以容易地被所需的基团或原子取代的基团。离去基团可以选自卤素原子、烷氧基和磺酰氧基。磺酰氧基的实例包括但不限于烷基磺酰氧基(例如，甲基磺酰氧基(甲磺酸酯基)和三氟甲基磺酰氧基(三氟甲磺酸酯基))和芳基磺酰氧基(例如，/-甲苯磺酰氧基(甲苯磺酸酯基)和/-硝基磺酰氧基(硝基苯磺酸酯基))。为了本发明的目的，l2和x可以特别选自卤素诸如溴、氯或碘和三氟甲磺酸酯基。x的选择将完全在技术人员的理解和知识范围内。
[0043]
在方案i的上述反应中，式i-1的化合物通过以下方式转化为式i-2的化合物：使式i-1的化合物与氨溶液在合适的溶剂(诸如水、thf、1,4-二噁烷、二甲基甲酰胺(dmf)、二甲基亚砜(dmso)或乙腈(acn)或其混合物)中在45℃至120℃范围内的温度下进行置换反应0.5h至20h以形成式i-2的化合物。
[0044]
式i-2的化合物通过以下方式转化为式i-3的化合物：使式i-2的化合物与三氟甲磺酰化剂(诸如三氟甲磺酸酐或卤化剂)在合适的溶剂(诸如乙腈、氯仿或四氢呋喃)中在-20℃至回流温度范围内的温度下反应约1小时至约10小时的时间段。
[0045]
根据本发明的卤化剂是作为卤素源的试剂。例如，所述试剂可以是氯化剂，诸如氯、亚硫酰氯、n-氯琥珀酰亚胺、草酰氯；或溴化剂，诸如溴、n-溴琥珀酰亚胺、四溴化碳；或碘化剂，诸如碘、氢碘酸或n-碘琥珀酰亚胺。卤化剂可以根据技术人员的知识和理解来选择。
[0046]
使用合适的催化剂使式i-3的化合物和乙炔衍生物进行薗头反应(sonogashira reaction)提供了式i-4的化合物。薗头反应的反应条件根据起始材料、溶剂和过渡金属催化剂而变化。反应条件没有特别限制，只要它们是类似于本反应的条件，并且可以使用本领域技术人员众所周知的方法。优选溶剂的实例包括乙腈、四氢呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷、苯、甲苯、二甲苯、1-甲基-2-吡咯烷酮、n,n-二甲基甲酰胺和二甲基亚砜、二氯甲烷或其混合物。反应温度应是足以完成偶联反应的温度，并且优选为室温至100℃。本反应可以在惰性气体气氛下进行并且也可以在氮气或氩气气氛下进行。在优选的反应条件下，此反应在1至24小时内完成。过渡金属催化剂优选是钯络合物。钯络合物的实例包括但不限于乙酸钯(ii)、二氯双(三苯基膦)钯(ii)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)和四(三苯基膦)钯(0)。此外，在本反应中，为了获得令人满意的结果，可以添加磷螯合剂，诸如三苯基膦、三邻甲苯基膦或三叔丁基膦。此外，可以使用金属卤化物或季铵盐或其他此类盐(优选碘化铜(i)、氯化锂、四丁基氟化铵或氧化银(i))来加速反应。在碱的存在下也可以获得优选的结果；所用的碱没有特别限制，只要它用于类似于本反应的偶联反应中即可，此类碱的实例包括但不限于二乙胺、三乙胺、n,n-二异丙基乙胺、哌啶和吡啶。
[0047]
在碱或过渡金属催化剂的存在下，在合适的溶剂(诸如醇溶剂或thf或dma)的存在下，式i-4的化合物可以容易地进行5-endo-dig环化，以得到式i-5的化合物。示例性地，所述碱可以选自叔丁醇钾、氢化锂、氢化铝锂和正丁基锂，并且所述过渡金属催化剂可以选自钯和铜催化剂。
[0048]
式i-5的化合物可以可选地通过将其用保护基团处理来保护，以提供式i-6的化合物。
[0049]
示例性地，通过在碱(诸如氢化钠或碳酸钾)和极性非质子溶剂(诸如二甲基甲酰
胺或四氢呋喃)的存在下将式i-5的化合物用苯磺酰氯、苄基氯或苄基溴处理，将式i-5的化合物转化成相应的式i-6的化合物，其中r3是苯磺酰基或苄基。将反应混合物在约0℃至约70℃、优选约30℃的温度下搅拌约1小时至约3小时、优选约2小时的时间段。
[0050]
r3是保护基团，诸如苯磺酰基、取代的苯磺酰基、甲磺酰基、苄基或氨基甲酸酯保护基团，诸如boc(叔丁氧基羰基)和cbz(羧苄基)或其他基团，诸如苯甲酰基、异丁酰基、乙酰基、苯氧基乙酰基、4-(叔丁基)苯甲酰基、4-(叔丁基)苯氧基乙酰基、4-(甲氧基)苯甲酰基、2-(4-硝基苯基)乙氧基羰基、2-(2,4-二硝基苯基)乙氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、二苯基氨基甲酰基或甲脒基团。特别优选的是苯甲酰基、异丁酰基、4-(叔丁基)苯甲酰基、2-(4-硝基-苯基)乙氧基羰基、2-(2,4-二硝基苯基)乙氧基羰基、9-芴基甲氧基羰基、4-(甲氧基)-苯甲酰基或对-(叔丁基)苯氧基乙酰基、对硝基苯基-2-乙氧基羰基或具有6-0-二苯基氨基甲酰基的2-n-乙酰基。
[0051]
可以以类似于制备式i-3的化合物的方法将式i-5和i-6的化合物分别转化为式i-8和i-7的化合物。
[0052]
可以通过本领域技术人员已知的方法将式i-8的化合物转化为式(i)的化合物。此类方法可以包括将式i-8的x直接转化为酰胺基团，或者经由形成酯、酸酐、醛、酮、氰化物、酸或可转化为酰胺基团的任何此类基团，这完全在技术人员的理解和知识范围内。
[0053]
例如，当将x转化为酯基并且连续转化为酰胺时，可以在碱的存在下将式i-8的化合物用酯化剂在极性非质子溶剂(如thf、1,4-二噁烷、dmf、dmso和acn)中在-75℃至100℃的温度下处理0.5h至20h，这导致酯衍生物的形成。酯衍生物与三烷基铝(如三甲基铝)和所需的胺衍生物或氨溶液在溶剂(如甲苯、氯仿、甲醇、乙醇、thf、1,4-二噁烷、dmf、dmso和acn)的存在下在-10℃至100℃的温度下反应0.5h至20h得到具有式i的酰胺。
[0054]
使用可用于将式i-8的化合物转化为式i的化合物的类似方法，可以将式i-7的化合物转化为式i-9的化合物。
[0055]
通过切割保护基团r3，可以将式i-9的化合物转化为式i的化合物。如本领域技术人员所理解的，可以通过脱保护剂来切割式i-9的化合物的保护基团，从而获得式i的化合物。用于氨基保护基团的脱保护剂的实例是酸，诸如三氟乙酸、三氯乙酸、二氯乙酸、对甲苯磺酸；或碱(base)，诸如强碱(alkali)或碱性碱(alkaline base)。例如，对于其中r3是苯磺酰基的式i-9的化合物，通过用碱(alkali base)(诸如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、叔丁醇钾、叔丁醇钠)在醇溶剂(诸如甲醇或乙醇)或混合溶剂(诸如醇/四氢呋喃或醇/水)中处理i-9来进行脱保护。将反应在室温或至回流温度下进行约15分钟至约1小时、优选30分钟的时间段。当r3是苄基时，通过将i-9用钠的氨溶液在约-78℃的温度下处理约15分钟至约1小时的时间段或者通过使用氢气和催化剂(诸如碳载氢氧化钯、pd/c、雷尼镍、雷尼镍与nh
2-nh2或氢气的组合)进行脱保护。其他合适的脱保护剂是路易斯酸，例如三氟化硼乙醚络合物或溴化锌的二氯甲烷/异丙醇溶液、hcl水溶液、hbr水溶液、hbr的乙酸溶液、硫酸。
[0056]
方案ii还说明了式(i)的化合物的制备，其中q、r1、r2、r3和x如上所定义。r表示烷氧基(-or)或cx3，z是no2。
[0057][0058]
方案ii
[0059]
在上述方案ii的反应中，可以通过在碱(诸如氢化钠、碳酸钾、氢氧化钠、氢氧化钾或碳酸铯或烷基锂诸如正丁基锂、仲丁基锂、叔丁基锂或二异丙基氨基锂)的存在下将式i-10的化合物用保护基团r3(诸如苯磺酰氯、苄基氯或苄基溴)处理，将式i-10的化合物转化为相应的式i-11的化合物。此类反应可以在溶剂(诸如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氢呋喃、六甲基磷酰胺、二甲基亚砜、1,4-二噁烷、乙腈、水、二氯甲烷、甲苯、dmso或其混合物)中进行。将反应混合物在约0℃至约70℃、优选约10℃的温度下搅拌约1小时至约10小时、优选约4小时的时间段。
[0060]
r3是如上定义的保护基团。
[0061]
可以通过以下方式将式i-11的化合物转化为式i-12的化合物：使式i-11的化合物与酰化剂(诸如三氟乙酸酐、三氯乙酰氯、酰卤、酸酐)在合适的溶剂(诸如乙腈、氯仿、n-甲基吡咯烷酮、甲苯、四氢呋喃、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、二甲基乙酰胺、1,4-二噁烷、氯化烷基或芳基溶剂(诸如二氯甲烷或氯苯、二氯苯或二氯乙烷)或其混合物)中在-20℃至回流温度范围内的温度下反应约1小时至约15小时的时间段，优选在65℃-75℃下反应4-5小时。
[0062]
可以通过以下方式将式i-12的化合物转化为式i-13的化合物：用硝化剂(诸如烷基硝酸铵，例如四丁基硝酸铵或四甲基硝酸铵)并使用三氟乙酸酐在溶剂(诸如二氯甲烷、甲苯、乙腈、四氢呋喃、氯苯、硝基苯、二氯乙烷、1,4-二噁烷、乙腈、水、二甲基亚砜其混合物)中在-10℃至100℃范围内的温度下将式i-12的化合物处理约1小时至约30小时、优选5小时的时间段。
[0063]
可以通过以下方式将式i-13的化合物转化为式i-14的化合物：与氨或与伯胺(诸如甲胺、乙胺、异丙胺、正丙胺、异丁胺或正丁胺)在合适的溶剂(诸如四氢呋喃、二氯甲烷、1,4-二噁烷、甲苯、二甲基甲酰胺、水、醇溶剂、dmso、乙腈或其混合物)中在-10℃至回流温度范围内的温度下反应约1小时至约25小时、优选8-10小时的时间段。
[0064]
可以通过以下方式将式i-14的化合物转化为式i-15的化合物：使用金属催化剂(诸如碳载钯、雷尼镍、雷尼镍与nh
2-nh2或氢气的组合、氯化铁/铵、碳载铂、氯化锌/铵、fe/acoh或连二亚硫酸钠)在合适的醇溶剂(诸如甲醇、乙醇或水或环状/无环醚(诸如四氢呋喃
或1,4-二噁烷)或乙腈)和水中或在合适的醇溶剂(诸如甲醇、乙醇或环状/无环醚(诸如四氢呋喃或1,4-二噁烷)或乙腈)和水的混合物中在-10℃至回流温度范围内的温度下、优选在室温下将硝基还原1至10小时的时间段。
[0065]
通过将式i-15的化合物用烷基化试剂处理或用醛、酮处理，随后用本领域技术人员已知的方法还原，将式i-15的化合物可选转化为式i-15a的化合物。
[0066]
可以通过以下环化方法将式i-15或i-15a的化合物转化为式i-16的化合物：使用试剂(诸如原甲酸三乙酯)和酸催化剂(即对甲苯磺酸或二甲基甲酰胺或甲酸)和金属催化剂(诸如乙酸锌)，使用溶剂(诸如甲苯、卤苯(诸如氯苯、1,2-二氯苯)、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、四氢呋喃、乙腈、1,4-二噁烷、水、乙酸、甲酸、甲酰胺或其混合物)，在室温至回流温度范围内的温度下(优选在0℃-100℃下)进行1至10小时(优选5小时)的时间段。
[0067]
可以通过以下方式将式i-16的化合物转化为式i-17的化合物：使用碱金属氢氧化物(诸如氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化锂或其水溶液)或如技术人员理解的任何其他试剂在合适的醇溶剂(诸如甲醇或乙醇或水)中或者在合适的醇溶剂(诸如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、异丁醇或环状/无环醚(诸如四氢呋喃或1,4-二噁烷)或乙腈)和水的混合物中在从室温至回流温度范围内的温度下、优选在80℃的温度下水解30分钟至10小时的时间段以获得式i-17的化合物。
[0068]
通过切割保护基团r3，可以将式i-17的化合物转化为式i-18的化合物。如技术人员所理解的，可以通过脱保护剂来切割式i-17的化合物的保护基团，从而获得式i的化合物。用于氨基保护基团的脱保护剂的实例是酸，诸如三氟乙酸、三氯乙酸、二氯乙酸、对甲苯磺酸、hcl、hbr、h2so4；或碱(base)，诸如强碱或碱性碱(alkaline base)。例如，对于其中r3是苯磺酰基的式i-17的化合物，通过用强碱(alkali base)(诸如氢氧化钠或氢氧化钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯)在醇溶剂(诸如甲醇或乙醇)或混合溶剂(诸如醇/四氢呋喃或醇/水、mdc、thf、甲苯、can、水或其混合物)中处理i-17来进行脱保护。将反应在室温至回流温度下进行约15分钟至约1小时、优选30分钟的时间段。当r3是苄基时，通过将i-17用钠的氨溶液在约-78℃的温度下处理约15分钟至约10小时的时间段或者通过使用氢气和催化剂(诸如碳载氢氧化钯、pd/c)在醚溶剂(诸如四氢呋喃和醇(诸如叔丁醇)、mdc、thf、甲苯、can、水或其混合物)中进行脱保护。其他合适的脱保护剂是路易斯酸，诸如三氟化硼乙醚络合物或溴化锌的二氯甲烷/异丙醇溶液、hcl、hbr、h2so4。
[0069]
可以通过使用溶剂(诸如二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺、二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、苯、甲苯、卤代苯(即1,2-二氯苯)或乙腈)的混合物使酸衍生物(式i-18)与氯化剂(诸如亚硫酰氯、草酰氯)在0℃至回流温度范围内的温度下、优选在70℃-80℃下反应0.5小时至15小时(优选5.0小时)的时间段以形成酰氯衍生物，将式i-18的化合物转化为式i的化合物。这种酰基氯衍生物可以通过与氨或合适的伯胺、仲胺(诸如甲胺、乙胺、正丙胺、异丙胺、异丁胺、正丁胺、环丙胺、环戊胺、环己胺)反应，转化为所需的式-i的酰胺化合物。胺可以是任何伯或仲烷基胺，例如，“c
1-10
烷基”旨在包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9和c
10
烷基，在溶剂(诸如二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、1,4-二噁烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或其混合物)中，在0℃至回流温度范围内的温度下(优选在室温下)，反应0.5小时至10小时、优选5.0小时的时间段。
[0070]
通过使用偶联剂诸如pybop、edc、hcl、dcc、hobt或本领域技术人员已知的偶联剂
将式i-18的化合物用氨或合适的伯胺、仲胺(诸如甲胺、乙胺、正丙胺、异丙胺、异丁胺、正丁胺、环丙基胺、环戊基胺、环己基胺)处理，可以将式i-18的化合物转化为式i的化合物。胺可以是伯或仲烷基烷基胺，例如，“c
1-10
烷基”旨在包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9和c
10
烷基，在溶剂(诸如二氯甲烷、二氯乙烷、四氢呋喃、乙腈、1,4-二噁烷、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺或其混合物)中，在0℃至回流温度范围内的温度下(优选在室温下)，反应0.5小时至15小时、优选10.0小时的时间段。
[0071]
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐可以在分离或不分离中间体的情况下制备。
[0072]
式(i)的化合物或其药学上可接受的盐以及其中间体的分离可以通过本领域已知的任何方法诸如冷却、过滤、离心、洗涤、干燥及其组合进行。
[0073]
由于已知前药会增强药物的许多所需品质(例如溶解度、生物利用度、制造等)，本发明的化合物可以前药形式递送。因此，本发明旨在涵盖当前要求保护的化合物的前药、递送其的方法和含有其的组合物。“前药”旨在包括任何共价结合的载体，当向哺乳动物受试者施用此类前药时，所述载体在体内释放本发明的活性母体药物。本发明的前药是通过修饰化合物中存在的官能团来制备的，其方式使得在常规操作中或在体内切割修饰以得到母体化合物。
[0074]
如本文所用，术语“烷基”旨在包括具有指定碳原子数的支链和直链饱和脂族烃基和环烷基。例如，“c
1-10
烷基”旨在包括c1、c2、c3、c4、c5、c6、c7、c8、c9和c
10
烷基。优选的烷基具有1-6个、尤其是1-4个碳原子。示例烷基包括但不限于甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如正丙基和异丙基)、丁基(例如正丁基、异丁基、叔丁基)、戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)。所述烷基可以进一步被烷基、卤素、酰胺、酯、酸、氰化物、胺取代。
[0075]
术语“环烷基”是指环化烷基，包括单环体系。c
3-13
环烷基旨在包括c3、c4、c5、c6和c7环烷基。优选的环烷基具有3-8个、尤其是3-6个碳原子。示例环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
[0076]
如本文所用的术语“保护基团”是指本领域已知用于保护反应性基团(包括但不限于羟基、氨基和硫醇基团)的不稳定化学部分，以防止合成程序中不希望的反应。保护基团典型地选择性地和/或正交地用于在其他反应位点的反应期间保护位点，并且然后可以去除保护基团，以使未保护基团保持原样或可用于进一步反应。另外，如本领域技术人员将显而易见的，常规保护基团可能是必要的，以防止某些官能团发生不希望的反应。为特定官能团选择合适的保护基团以及保护和脱保护的合适条件是本领域众所周知的。例如，许多保护基团以及其引入和去除描述在t.w.greene和p.g.m.wuts,protecting groups in organic synthesis,second edition,wiley,new york,1991以及其中引用的参考文献中。
[0077]
式(i)的化合物可以游离形式存在(没有电离)或可以形成也在本发明范围内的盐。药学上可接受的(即无毒、生理学上可接受的)盐是优选的，尽管其他盐也有用于例如分离或纯化本发明的化合物。
[0078]
本发明的化合物可以具有一个或多个不对称中心。除非另有指示，否则本发明化合物的所有手性(对映异构体和非对映异构体)和外消旋形式均包括在本发明中。烯烃、c＝n双键等的许多几何异构体也可以存在于化合物中，并且所有此类稳定的异构体都考虑在本发明中。描述了本发明化合物的顺式和反式几何异构体，并且可以作为异构体的混合物
或作为分离的异构体形式分离。本发明涉及本发明化合物的所有光学异构体和立体异构体及其混合物的用途，以及可能利用或含有它们的所有药物组合物和治疗方法。本发明化合物可以光学活性或外消旋形式分离。如何制备光学活性形式是本领域中众所周知的，诸如通过拆分外消旋形式或通过从光学活性起始材料合成。除非特别指示了特定的立体化学或异构体形式，否则意指结构的所有手性(对映异构体和非对映异构体)和外消旋形式以及所有几何异构体形式。
[0079]
本发明的化合物包括所有构象异构体(例如顺式和反式异构体)。本发明的化合物具有不对称中心，并且因此以不同的对映异构体和非对映异构体形式存在。本发明涉及本发明化合物的所有光学异构体和立体异构体及其混合物的用途，以及可能利用或含有它们的所有药物组合物和治疗方法。在这方面，本发明包括e和z构型。式i的化合物也可以互变异构体的形式存在。本发明涉及所有此类互变异构体及其混合物的用途。应当理解，本发明不仅限于所说明的一种互变异构体形式。
[0080]
本文中使用的短语“药学上可接受的”在本文中用来指那些化合物、材料、组合物和/或剂型，其在合理的医学判断范围内，适用于与人类和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的益处/风险比相称。
[0081]
如本文所用，“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸或碱盐而被修饰。
[0082]
式i的化合物可以与碱金属诸如钠、钾和锂；与碱土金属诸如钙和镁；与有机碱诸如二环己胺、三丁胺、吡啶和氨基酸(诸如精氨酸、赖氨酸等)形成盐。此类盐可以如本领域技术人员所知来形成。
[0083]
式i的化合物可以与各种有机酸和无机酸形成盐。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性残基(诸如胺)的矿物酸盐或有机酸盐；酸性残基(诸如羧酸)的碱或有机盐；等等。药学上可接受的盐包括例如由无毒的无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。例如，此类常规的无毒盐包括那些衍生自无机酸(诸如盐酸、氢溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸、硼酸盐等)的盐，；以及由有机酸(诸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸等)制备的盐。
[0084]
另外，可以形成两性离子(“内盐”)。
[0085]
技术人员将会理解，由于本发明的化合物具有多于一个的碱性位点，因此它们具有与多于一个酸分子形成盐的能力。本发明体现了本公开中的化合物的单、二或三盐。
[0086]
本发明的药学上可接受的盐可以由含有碱性或酸性部分的母体化合物通过常规化学方法合成。通常，此类盐可以通过以下方式来制备：使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适当的碱或酸在水或有机溶剂或两者的混合物中反应；通常，非水性介质如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈是优选的。合适的盐的列表见于remington's pharmaceutical sciences,17th ed.,mack publishing company,easton,pa.,1985,p.1418，将其公开内容通过引用并入本文。可以在存在或不存在溶剂的情况下制备盐。
[0087]“稳定的化合物”、“稳定的异构体”和“稳定的结构”意为这样的化合物，其足够稳健，从而能够从反应混合物中分离到有用的纯度并配制成有效的治疗剂。
[0088]
诸如“约”、“通常”、“实质上”等术语应解释为修饰术语或值，使得其不是绝对的。此类术语将由环境和它们所修饰的术语来定义，因为这些术语是本领域技术人员所理解的。这至少包括用于测量值的给定技术的预期实验误差、技术误差和仪器误差的程度。
[0089]
根据一个实施方案，本发明的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐可以配制成药物用途的组合物的合适形式。
[0090]
术语
‘
配制品’、
‘
组合物’、
‘
药物配制品’和
‘
药物组合物’可互换使用，并且是指其形式允许活性成分的生物活性有效的制剂，并且因此可以施用于受试者用于治疗用途，其中受试者优选是人类。如本文所用的
‘
活性成分’是指本发明的化合物。
[0091]
如技术人员所理解的，组合物的合适形式可以由组合物的施用途径来确定。因此，组合物的合适形式可以包括但不限于用于静脉内(推注或输注)、动脉内、腹膜内、皮下(推注或输注)、脑室内(intramuscular)、肌内或蛛网膜下腔途径的注射剂；用于口服摄取的片剂、胶囊、凝胶、锭剂或液体；作为吸入喷雾剂的溶液、混悬液或气雾剂；用于局部应用的凝胶、喷雾剂或乳膏；经由口腔、鼻腔或直肠粘膜施用的跨粘膜组合物；通过以透皮贴剂、皮下植入物的形式或以栓剂的形式递送。所述化合物也可以配制成直肠组合物，诸如栓剂或保留灌肠剂。对于经颊施用，所述组合物可以采取以常规方式配制的片剂或锭剂的形式。所述组合物可以是囊泡药物递送系统，诸如但不限于胆盐体(bilosomes)、脂质体、泡囊(niosomes)、转移体(transferosomes)、醇质体(ethosomes)、鞘磷脂脂质体(sphingosomes)、药质体(pharmacosomes)、多层囊泡、微球等。
[0092]
根据另一个实施方案，本发明的组合物可以包含式i的化合物和药学上可接受的赋形剂。如本文所用的术语
‘
赋形剂’是指添加到配制品中的非活性或通常惰性的物质，其不影响活性成分的治疗作用但用作活性成分的媒介或介质。它可以用于提供所需的稠度，提高稳定性，和/或调节组合物的同渗重摩。赋形剂可以选自技术人员已知的以组合物形式使用的物质，这取决于施用途径。示例性的赋形剂包括稀释剂、载体、粘合剂、填充剂、润滑剂、崩解剂、润湿剂、合适的包衣、稳定剂、无菌水、生理盐水、合适的推进剂可可脂、甘油酯、助悬剂、乳化剂、防腐剂、聚合物、增溶剂、冷冻保护剂、冻干保护剂、增量剂和/或药学上可接受的缓冲剂或其混合物。用于制备本发明组合物的赋形剂的选择完全在技术人员的范围和理解内，并且合适的赋形剂列在标准参考文献诸如handbook of pharmaceutical excipients(rowe rc,sheskey p,quinn m.pharmaceutical press；2009)；the theory and practice of industrial pharmacy(lachman,l.,lieberman,h.a.,&kanig,j.l.1976).the science and practice of pharmacy(remington jp 2006)and pharmaceutical dosage forms and drug delivery systems(allen l,ansel hc 2013dec 23)中。
[0093]
本发明的组合物可以通过如技术人员已知的常规方法制备。
[0094]
根据本发明的一个方面，提供了一种治疗或预防通过抑制受试者中的两面神激酶来治疗或预防疾病的方法。此类异常可以包括但不限于增殖性疾病、涉及软骨更新受损的疾病或涉及软骨细胞的合成代谢刺激的疾病、自身免疫性疾病、先天性软骨畸形、炎性病症或移植排斥。
[0095]
增殖性疾病是指由不适当高水平的细胞分裂、不适当低水平的细胞凋亡或两者引起或导致的病症，诸如癌症。例如，诸如淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌
和肺癌等癌症是增殖性疾病的实例。此外jak2激活突变(真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、和髓系化生伴骨髓纤维化)、银屑病、再狭窄、硬皮病或纤维化也是增殖性疾病的一些实例。
[0096]
如本文所用，术语
‘
涉及软骨更新受损的疾病’或“涉及软骨细胞的合成代谢刺激的疾病”包括诸如以下的病症：骨关节炎、银屑病性关节炎、幼年类风湿性关节炎、痛风性关节炎、脓毒性或感染性关节炎、反应性关节炎、反射性交感神经营养不良、痛觉营养不良、泰齐综合征(tietze syndrome)或肋软骨炎、纤维肌痛、骨软骨炎、神经源性或神经性关节炎、关节病、地方性形式的关节炎如畸形性骨关节炎、姆塞莱病(mseleni disease)和汉迪戈杜病(handigodu disease)；由纤维肌痛、系统性红斑狼疮、硬皮病和强直性脊柱炎引起的变性。
[0097]
术语
‘
先天性软骨畸形’包括诸如以下的病症：遗传性软骨溶解、软骨发育异常和假性软骨发育异常，特别是但不限于小耳畸形、无耳畸形、干骺端软骨发育异常和相关障碍。
[0098]
本发明的预防或治疗方法包括向受试者施用治疗有效量的式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐。
[0099]
受试者可以是哺乳动物受试者。在一些实施方案中，受试者是人。特别地，受试者可以是患有与激酶异常相关的疾病或寻求预防所述疾病的人类受试者。
[0100]
根据本发明的另一个方面，提供了式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐，用于治疗或预防两面神激酶介导的疾病的方法中。
[0101]
根据本发明的再另一个方面，提供了式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐，用作两面神激酶抑制剂。
[0102]
在一个实施方案中，本发明提供了一种用于使用式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐预防受试者中两面神激酶相关疾病或其发作或进展的方法。本发明进一步提供了一种使用式i的化合物或其药学上可接受的盐治愈或减轻受试者中由两面神激酶异常引起的疾病的影响的方法。
[0103]
治疗或预防可以包括向受试者施用治疗有效量的式i的化合物、其立体异构体、互变异构体、前药或药学上可接受的盐本身或其药学上可接受的形式。在一些实施方案中，化合物的施用剂量为0.01至1000mg/kg、0.1至100mg/kg、0.5至100mg/kg或1至50mg/kg。技术人员将有能力根据待治疗的病症；所选择的施用途径；施用的实际化合物；个体患者的年龄、体重和反应；患者症状的严重程度等来确定待施用化合物的量。
[0104]
在一些实施方案中，本发明的化合物通过肠内、肠胃外或局部施用于受试者。特别地，本发明的化合物可以通过合适的途径施用，所述途径包括但不限于注射(包括静脉内(推注或输注)、动脉内、腹膜内、皮下(推注或输注)、脑室内、肌内或蛛网膜下腔)、口服摄取(例如片剂、凝胶、锭剂或液体)、吸入、局部、经由粘膜(诸如口腔、鼻腔或直肠粘膜)、通过以喷雾剂、片剂、透皮贴剂、皮下植入物或栓剂的形式递送。
[0105]
基于无细胞的测定(jak-1、jak-2、jak-3测定)
[0106]
将本发明的化合物溶解在300μl dmso中以制备50mm储备溶液。将储备溶液在dmso中进一步稀释，以便在上进行无细胞测定。
[0107]
已经使用纯化的jak 1、jak 2、jak 3激酶通过生化测定评价了本发明化合物对
jak激酶活性的作用。为了进行测定，使用50mm ph 6.5hepes、0.01％ brij-35、10mm mgcl2、1mm egta、0.02％ nan3和由激酶缓冲液中的纯化酶和荧光团缀合底物组成的激酶混合物制备激酶缓冲液。此外，将测试板用包含100nl 100x化合物+2.4μl激酶缓冲液的测定混合物；5μl激酶混合物(10μl由激酶缓冲液中的21.2ng jak1和2μm tyr 06组成的激酶反应物)；2.5μl atp溶液包被，并且包括不含本发明化合物的测定混合物作为对照。将板在室温下孵育1h，并且孵育1h后，添加5μl 1:128稀释度的显影试剂a。将板在室温下孵育1h。在荧光板读数器上测量荧光。
[0108]
当在0.001μm至10μm范围内的浓度下测试时，本发明的化合物证明了jak-1jak-2和jak-3的抑制作用。由本发明化合物展示的对jak-1的抑制百分比在20％至99％之间，特别是在0.1μm至10μm的浓度下。与jak-1相比，jak-2的抑制百分比略低。在0.1μm至10μm的浓度范围内，所述化合物将jak-2抑制了10％至95％。浓度为0.1μm至10μm的本发明化合物对jak-3的抑制百分比为8％至99％。具有较高级烷基(例如，在酰胺氮上具有c3至c
10
碳的烷基)的化合物即使在较低浓度范围(诸如0.001μm至0.03μm)下也展现出较高的抑制百分比。例如，在此氮上具有丙基或异丙基的化合物在0.001μm至0.03μm的浓度下将jak-1抑制5％至25％。并且在0.03μm的浓度下将jak-3抑制25％。
[0109]
制备和实施例
[0110]
应当理解，以下实施例不限制本发明，并且仅意在表明实践本发明的方法。本领域技术人员将认识到，所描述的化学反应可以容易地适于制备其他式i的化合物，并且用于制备式i的化合物的替代方法也在本发明的范围内。例如，根据本发明的非示例性化合物的合成可以通过本领域技术人员显而易见的修改成功地进行，例如，通过适当地保护干扰基团，通过使用除所述试剂之外的本领域已知的其他合适试剂，和/或通过对反应条件进行常规修改。可替代地，本文公开的或本领域中已知的其他反应将被认为可应用于制备本发明的其他化合物。
[0111]
实施例1：n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0112][0113]
步骤a：2-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-4-胺
[0114][0115]
将2,4-二氯-5-硝基吡啶(15mmol)的甲胺(甲苯的2m溶液，15ml)溶液在40℃-50℃下搅拌18h。将反应混合物通过真空蒸发浓缩，然后通过过滤分离残余物并通过己烷洗涤液(3x 30ml)纯化，提供呈固体的标题化合物(产率68％)。
[0116]
步骤b：6-氯-n-4-甲基吡啶-3,4-二胺
[0117][0118]
将2-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-4-胺(15mmol)的乙醇(100ml)悬浮液用pd/c(10％ pd)处理并在大气压下氢化12h。将反应混合物通过硅藻土塞过滤，将滤液真空浓缩并通过制备型hplc纯化，产生标题化合物(产率72％)。
[0119]
步骤b1：6-氯-n-4-甲基吡啶-3,4-二胺
[0120]
向2-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-4-胺(25mmol)的etoac(100ml)溶液中添加雷尼镍(10％pd)，随后在室温下在氢气下搅拌2h。将反应混合物过滤并将滤液减压浓缩，得到(80％)粗6-氯-n-4-甲基吡啶-3,4-二胺(产率74％)。
[0121]
步骤c：6-氯-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶
[0122][0123]
将2-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-4-胺(25mmol)的乙醇(100ml)悬浮液用pd/c(10％ pd)处理并在大气压下氢化12h。将反应混合物通过硅藻土塞过滤，并将滤液真空浓缩以得到6-氯-n-4-甲基吡啶-3,4-二胺。将所得油状物用(50mmol)乙酸二乙氧基甲酯处理，在室温下搅拌4h，并在90℃下搅拌一小时。使反应混合物冷却至室温，添加50ml二氯甲烷，并将有机层用水(4x 20ml)洗涤。将合并的有机层浓缩至10ml的体积并通过制备型hplc纯化，产生标题化合物(产率70％)。
[0124]
步骤d：1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0125][0126]
将6-氯-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶化合物(6.5g)和20ml 28％氨水置于50ml高压釜中，将混合物在100℃下反应24小时，并进一步在125℃下反应5小时(内压：约2atm)。反应完成后，使反应产物冷却，获得晶体。然后将由此获得的晶体用水洗涤并干燥，获得标题化合物(产率74％)。
[0127]
步骤d1：1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0128]
在氮气下，向6-氯-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶(6.5mmol)的甲苯溶液中添加外消旋binap(0.4mmol)、pd2(dba)3(0.13mmol)和叔丁醇钠(9.1mmol)，添加二苯甲酮亚胺(7.81mmol)并将混合物加热至80℃持续3h，冷却至室温。将反应混合物用醚稀释，通过硅藻土过滤，并用醚洗涤。将滤液浓缩，将残余物溶解于甲醇(90ml)中并用羟胺(19.5mmol)处理。将混合物在环境温度下搅拌18h并浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化(95％-100％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(84％产率)。
[0129]
步骤e：7-碘-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0130][0131]
在圆底烧瓶中，将1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(19.08mmol)溶解在mecn(200ml)中并且冷却至0℃。将n-碘琥珀酰亚胺(20.03mmol)溶解在剩余的mecn(50ml)中，并且经40min逐滴添加到反应混合物中。将反应混合物在0℃下再搅拌10min，并且用2m亚硫酸氢钠(125ml)淬灭。维持搅拌和温度50min。将混合物转移到分液漏斗中。将水层用mdc(3x 100ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物通过色谱法纯化，用20％-100％乙酸乙酯/庚烷洗脱，提供标题化合物(产率72％)。
[0132]
步骤f：7-乙炔基-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0133][0134]
经由套管将三甲基甲硅烷基乙炔(700mmol)的thf(150ml)溶液中添加到冷却(0℃-5℃)、脱气的7-碘-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(465mmol)、双(三苯基膦)二氯钯(0)(23.2mmol)、碘化铜(i)(27.9mmol)和三乙胺(1.4mol)的thf(1.25l)混合物中。将混合物在0℃-5℃下搅拌30分钟，然后在环境温度下再搅拌30分钟。通过过滤除去固体，并且将滤饼用thf洗涤。将滤液用乙酸乙酯稀释并且用2m盐酸萃取。将合并的酸提取物用乙醚洗涤，然后通过小心添加碳酸钾使其呈碱性，然后用乙醚萃取。将合并的有机层干燥(na2so4)，过滤并蒸发。将所得残余物溶解于四氢呋喃溶液(300ml)中。将四丁基氟化铵(20mmol，在1m四氢呋喃溶液中)添加在反应物质中，并在室温下搅拌2-3h。将水添加到反应溶液中，然后将其用乙酸乙酯萃取四次。将有机层经无水硫酸钠干燥，并减压蒸发溶剂。将残余物通过硅胶色谱法纯化(庚烷:乙酸乙酯＝1:1，然后1:2)，得到标题化合物(72％)。
[0135]
步骤g：1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0136][0137]
向反应器中添加150g dmf，缓慢添加70g叔丁醇钾，将反应混合物搅拌至60℃-70℃，并缓慢添加50g 7-乙炔基-1-甲基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺。控制温度不高于80℃，并通过在80℃-85℃下孵育3h完成反应，tlc监测反应完成(pe/dcm＝1/1)。反应完成后冷却，将反应体系缓慢添加到400g冰水中，冷却至10℃，搅拌2h，抽滤，得到固体粗品，湿重约75g。将湿产物添加到500ml反应容器中，添加300g乙酸乙酯(ea)，添加5g活性炭，并且将混合物回流加热30分钟，然后抽滤。将滤饼用适量的ea洗涤，然后将滤液和洗涤液体合并，并减压蒸发ea至约250g，冷却至0℃-5℃，持续2h，抽滤，将滤饼用适量的冷ea洗涤，在60℃下干燥，获得固体产物标题化合物(80％)。
[0138]
步骤h：8-溴-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0139][0140]
在室温下将1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(0.9mmol)溶解在thf(25ml)中，并向所得溶液中添加n-溴琥珀酰亚胺(1.08mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌14小时，然后用饱和硫代硫酸钠水溶液(10ml)淬灭。将反应物真空浓缩，并且将所得残余物用乙酸乙酯(50ml)稀释。将水层用乙酸乙酯(50ml)萃取，并将合并的有机层用1n碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，提供标题化合物(85％)，其经纯化或不经纯化进一步使用。
[0141]
步骤i：1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯
[0142][0143]
在-78℃下，在干四氢呋喃(500ml)中添加8-溴-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(173mmol)，并经2小时的时间段添加正丁基锂(2.5m的己烷溶液，487mmol)。将反应混合物在-78℃下再搅拌30分钟。经30分钟添加氯甲酸乙酯(186mmol)，并且将反应混合物在-60℃下搅拌2小时。将温度缓慢升高至30℃，并且允许混合物在30℃下搅拌12小时。通过tlc监测反应进程。然后在0℃下将反应混合物用氯化铵饱和溶液(150ml)淬灭，并且将反应混合物用乙酸乙酯(3x 300ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，经无水硫酸钠(50g)干燥，过滤并且在减压下浓缩以得到粗反应混合物。将残余物通过色谱法纯化，提供标题化合物(52％)。
[0144]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ:1.26(t,3h),3.23(s,3h),4.14(q,2h),7.90(s,1h),8.42(s,1h),8.95(s,1h),12.84(br s,1h)。
[0145]
步骤j：n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0146][0147]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到甲胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，然后冷却至室温，然后倒入水中并用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0148]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:2.96(s,3h),4.15(s,3h),7.74(s,1h),8.16(s,1h),8.64(s,1h)。
[0149]
步骤j-1：用于制备n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺的替代方法
[0150][0151]
在圆底烧瓶中，在-60℃至-80℃下将氨气冷凝成液氨(10-50体积)。在上述反应物质中分批添加金属钠(25mmol)。搅拌至完全溶解后，观察到深蓝色着色。在-60℃至-80℃下将6-苄基-n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(5mmol)加入反应物质中，将反应混合物在-60℃至-80℃下再搅拌60min。将反应混合物加热至-30℃，缓慢添加饱和氯化铵溶液(25体积)并搅拌30min。将反应混合物加热至室温并搅拌1.0h。将反应物质用5％甲醇的mdc溶液萃取，然后将合并的有机层经硫酸镁干燥。将粗残余物通过色谱法纯化，用2％-30％甲醇/mdc洗脱，提供标题化合物(35％产率)。
[0152]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:2.96(s,3h),4.15(s,3h),7.74(s,1h),8.16(s,1h),8.64(s,1h)。
[0153]
实施例2：n-乙基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0154][0155]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到乙胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，并且然后冷却至室温，然后倒入水中并用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0156]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:1.27(t,3h),3.44(q,2h),4.14(s,3h),7.73(s,1h),8.13(s,1h),8.63(s,1h)。
[0157]
实施例3：1-甲基-n-丙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0158]
[0159]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到正丙胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，然后冷却至室温，然后倒入水中并用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0160]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:1.03(t,3h),1.71-1.64(m,2h),3.37(t,2h),4.14(s,3h),7.73(s,1h),8.12(s,1h),8.63(s,1h)。
[0161]
实施例4：n-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0162][0163]
步骤a：2-氯-5-硝基吡啶-4-胺
[0164][0165]
将2,4-二氯-5-硝基吡啶(15mmol)的甲醇氨(15ml)溶液在25℃-28℃下搅拌18h。将反应混合物通过真空蒸发浓缩，然后通过过滤分离残余物并通过己烷洗涤液(3x 30ml)纯化，提供呈固体的标题化合物(产率86％)
[0166]
步骤b：6-氯吡啶-3,4-二胺
[0167][0168]
将2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(15mmol)的乙醇(100ml)悬浮液用pd/c(10％ pd)处理并在大气压下氢化12h。将反应混合物通过硅藻土塞过滤，将滤液在真空下浓缩并通过制备型hplc纯化，产生标题化合物(产率72％)
[0169]
步骤b1：6-氯吡啶-3,4-二胺
[0170]
向2-氯-5-硝基吡啶-4-胺(25mmol)的etoac(100ml)溶液中添加雷尼镍(10％ pd)，随后在室温下在氢气下搅拌2h。将反应混合物过滤并将滤液减压浓缩，得到(80％)粗6-氯吡啶-3,4-二胺(产率74％)
[0171]
步骤c：6-氯-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶
[0172]
[0173]
将6-氯吡啶-3,4-二胺(25mmol)的乙醇(100ml)悬浮液用pd/c(10％ pd)处理并在大气压下氢化12h。将反应混合物通过硅藻土塞过滤，并将滤液真空浓缩，得到(实施例a-3)。将所得油状物用(50mmol)乙酸二乙氧基甲酯处理，在室温下搅拌4h，并在90℃下搅拌一小时。使反应混合物冷却至室温，添加50ml二氯甲烷，并将有机层用水(4x 20ml)洗涤。将合并的有机层浓缩至10ml的体积并通过制备型hplc纯化，产生标题化合物(产率70％)
[0174]
步骤d：1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0175][0176]
将6.5g 6-氯-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶化合物和20ml 28％氨水置于50ml高压釜中，将混合物在100℃下反应24小时，并进一步在125℃下反应5小时(内压：约2atm)。反应完成后，使反应产物冷却，获得晶体。然后将由此获得的晶体用水洗涤并干燥，获得标题化合物(产率74％)。
[0177]
步骤d1：1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0178]
在氮气下向6-氯-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶(6.5mmol)的甲苯溶液中添加外消旋binap(0.4mmol)、pd2(dba)3(0.13mmol)和叔丁醇钠(9.1mmol)，添加二苯甲酮亚胺(7.81mmol)并将混合物加热至80℃持续3h，冷却至室温。将反应混合物用醚稀释，通过硅藻土过滤，并用醚洗涤。将滤液浓缩，并将残余物溶解于甲醇(90ml)中并用羟胺(19.5mmol)处理。将混合物在环境温度下搅拌18h并浓缩。将残余物通过柱色谱法纯化(95％-100％乙酸乙酯/己烷)，得到标题化合物(84％产率)。
[0179]
步骤e：7-碘-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0180][0181]
在圆底烧瓶中，将1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(19.08mmol)溶解在mecn(200ml)中并冷却至0℃。将n-碘琥珀酰亚胺(20.03mmol)溶解在剩余的mecn(50ml)中，并经40min逐滴添加到反应混合物中。将反应混合物在0℃下再搅拌10min，并用2m亚硫酸氢钠(125ml)淬灭。维持搅拌和温度50min。将混合物转移到分液漏斗中。将水层用mdc(3x 100ml)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，经硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将粗残余物通过色谱法纯化，用20％-100％乙酸乙酯/庚烷洗脱，提供标题化合物(产率72％)。
[0182]
步骤f：7-乙炔基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺
[0183][0184]
经由套管将三甲基甲硅烷基乙炔(700mmol)thf(150ml)溶液添加到冷却(0℃-5
℃)、脱气的7-碘-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺(465mmol)、双(三苯基膦)二氯钯(0)(23.2mmol)、碘化铜(i)(27.9mmol)和三乙胺(1.4mol)的thf(1.25l)混合物中。将混合物在0℃-5℃下搅拌30分钟，然后在环境温度下再搅拌30分钟。通过过滤除去固体，并将滤饼用thf洗涤。将滤液用乙酸乙酯稀释并用2m盐酸萃取。将合并的酸提取物用乙醚洗涤，然后通过小心添加碳酸钾使其呈碱性，然后用乙醚萃取。将合并的有机层干燥(na2so4)，过滤并蒸发。将所得残余物溶解于四氢呋喃溶液(300ml)中。将四丁基氟化铵(20mmol，在1m四氢呋喃溶液中)添加在反应物质中，并在室温下搅拌2-3h。将水添加到反应溶液中，然后将其用乙酸乙酯萃取四次。将有机层经无水硫酸钠干燥，并减压蒸发溶剂。将残余物通过硅胶色谱法纯化(庚烷:乙酸乙酯＝1:1，然后1:2)，得到标题化合物(68％)。
[0185]
步骤g：1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0186][0187]
向反应器中添加150g dmf，缓慢添加70g叔丁醇钾，搅拌至60℃-70℃，并缓慢添加50g 7-乙炔基-1h-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-胺。温度控制不高于80℃，加上通过在80℃-85℃下孵育3h完成反应，tlc监测反应完成(pe/dcm＝1/1)。反应完成后冷却，将反应体系缓慢添加到400g冰水中，冷却至10℃，搅拌2h，抽滤，得到固体粗品，湿重约75g。将湿产物添加到500ml反应容器中，添加300g乙酸乙酯(ea)，添加5g活性炭，并且将混合物回流加热30分钟，然后抽滤。将滤饼用适量的ea洗涤，然后将滤液和洗涤液体合并，并减压蒸发ea至约250g，冷却至0℃-5℃，持续2h，抽滤，将滤饼用适量冷ea洗涤，在60℃下干燥，获得固体产物标题化合物(80％)。
[0188]
步骤h：8-溴-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0189][0190]
在室温下将1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(0.9mmol)溶解在thf(25ml)中，并向所得溶液中添加n-溴琥珀酰亚胺(1.08mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌14小时，然后用饱和硫代硫酸钠水溶液(10ml)淬灭。将反应真空浓缩，并将所得残余物用乙酸乙酯(50ml)稀释。将水层用乙酸乙酯(50ml)萃取，并将合并的有机层用1n碳酸氢钠水溶液(10ml)和盐水(10ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，提供标题化合物(85％)，其经纯化或不经纯化进一步使用。
[0191]
步骤i：1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯
[0192]
[0193]
在-78℃下在干四氢呋喃(500ml)中添加8-溴-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(173mmol)，并经2小时的时间段添加正丁基锂(在己烷中的2.5m溶液，487mmol)。将反应混合物在-78℃下再搅拌30分钟。经30分钟添加氯甲酸乙酯(186mmol)，并且将反应混合物在-60℃下搅拌2小时。将温度缓慢升高至30℃，并使混合物在30℃下搅拌12小时。通过tlc监测反应进程。然后在0℃下将反应混合物用氯化铵饱和溶液(150ml)淬灭，并将反应混合物用乙酸乙酯(3x 300ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，经无水硫酸钠(50g)干燥，过滤并减压浓缩，得到粗反应混合物。将残余物通过色谱法纯化，提供标题化合物(52％)。
[0194]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ:1.26(t,3h),3.23(s,3h),4.14(q,2h),7.90(s,1h),8.42(s,1h),8.95(s,1h),12.84(br s,1h)。
[0195]
步骤j：n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0196][0197]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到甲胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并且将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，然后冷却至室温，然后倒入水中并且用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0198]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:3.04(s,3h),8.02(s,1h),8.35(s,1h),8.66(s,1h)。
[0199]
实施例5：n-乙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0200][0201]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到乙胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，并且然后冷却至室温，然后倒入水中并且用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0202]1h nmr(400mhz,dmsod6)δ:1.19(t,3h),3.39(q,2h),7.98(s,1h),8.29(s,1h),8.62(s,1h),9.78(bs,1h),12.12(bs,1h)。
[0203]
实施例6：n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0204][0205]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到异丙胺(1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并且将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，然后冷却至室温，然后倒入水中并用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物(72％)。
[0206]1h nmr(400mhz,cd3od)δ:1.25(d,6h),4.23(m,1h),7.99(s,1h),8.34(s,1h),8.57(s,1h)。
[0207]
实施例7：n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐
[0208][0209]
将乙醇盐酸盐溶液添加到n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(10mmol)的乙醇(50ml)溶液中。将反应在环境温度下搅拌3-4h。将反应物质减压浓缩。向残余物中添加10ml乙醇，搅拌并将反应物质减压浓缩。将所获得的固体真空干燥，得到白色至灰白色固体的标题化合物(产率＝95％)。
[0210]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ:1.25(d,6h),4.23(m,1h),7.99(s,1h),8.34(s,1h),8.57(s,1h),δ8.7(bs1h),11.2(br.s,1h),12.9(br.s,2h)。
[0211]
中间体的制备：6-苄基-n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0212][0213]
步骤a：6-苄基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0214][0215]
在圆底烧瓶中，在dmf(5体积)溶剂中添加氢化钠(0.3摩尔)，在5℃-15℃下向烧瓶中缓慢添加1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(0.1摩尔)，将所得悬浮液在室温下搅拌1小时，然后在5℃-15℃下缓慢添加苄基溴(0.12摩尔)。将反应物质温热至室温并搅拌1-3小时。在tlc上监测反应。反应完成后将反应物质冷却，在5℃-15℃下将甲醇(1体积)添加到反应物质中并搅拌10min。向反应物质中添加氯化铵(25体积)溶液并搅拌30min。将反应物质用乙酸乙酯(3*5体积)萃取。将合并的有机层用水(3*5体积)和盐水(1体积)洗涤，然后经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，提供标题化合物(86％)。
[0216]
步骤b：6-苄基-8-溴-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶
[0217][0218]
在室温下将6-苄基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(1mmol)溶解在thf(25ml)中，并向所得溶液中添加n-溴琥珀酰亚胺(1.2mmol)。将所得悬浮液在室温下搅拌14小时，然后用饱和硫代硫酸钠水溶液(20ml)淬灭。将反应真空浓缩，并将所得残余物用乙酸乙酯(75ml)稀释。将水层用乙酸乙酯(2*100ml)萃取，并将合并的有机层用1n碳酸氢钠水溶液(50ml)和盐水(50ml)洗涤，然后经硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，提供标题化合物(87％)，其经纯化或不经纯化进一步使用。
[0219]
步骤c：6-苄基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯
[0220][0221]
在-78℃下在干四氢呋喃(500ml)中添加6-苄基-8-溴-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶(173mmol)，并经2小时的时间段添加正丁基锂(2.5m的己烷溶液，487mmol)。将反应混合物在-78℃下再搅拌30分钟。经30分钟添加氯甲酸乙酯
(186mmol)，并将反应混合物在-60℃下搅拌2小时。将温度缓慢升高至30℃，并使混合物在30℃下搅拌12小时。通过tlc监测反应进程。然后在0℃下将反应混合物用氯化铵饱和溶液(150ml)淬灭，并将反应混合物用乙酸乙酯(3x 300ml)萃取。将合并的有机层用水洗涤，经无水硫酸钠(50g)干燥，过滤并减压浓缩，得到粗反应混合物。将残余物通过色谱法纯化，提供标题化合物(50％)。
[0222]
步骤d：6-苄基-n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0223][0224]
将三甲基铝(2m的甲苯溶液，1.2mmol)溶液逐滴添加(放热)到甲胺(2m的甲苯溶液，1.2mmol)的二噁烷(7.5ml)溶液中，并将所得混合物在室温下搅拌1h。然后添加6-苄基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸乙酯(0.3mmol)的二噁烷(4ml)溶液。然后将所得混合物在85℃-95℃下加热3h，然后冷却至室温，然后倒入水中并用mdc萃取，然后将其用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并蒸发。通过色谱法纯化(sio2，mdc:meoh＝90:10)，得到呈白色固体的标题化合物。(70％)。
[0225]
实施例8：n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐
[0226][0227]
步骤a：1-(1-苄基-4-氯-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮
[0228][0229]
在0℃-5℃下，向搅拌的氢化钠(39.3g，1638.5mmol，60％)的二甲基乙酰胺(500ml)悬浮液中添加4-氯-7-氮杂吲哚(100g，655.4mmol)的二甲基乙酰胺(150ml)溶液，随后添加苄基溴(134.5gm，786.5mmol)。将所得反应混合物搅拌4.0小时，然后用100ml甲醇淬灭，随后用饱和氯化铵(500ml)淬灭，并用乙酸乙酯萃取。将有机层减压蒸发，得到棕色至
黄色液体1-苄基-4-氯-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶(180gm)。将上述化合物溶解在二甲基甲酰胺(700ml)中，然后添加三氟乙酸酐(129.8g，618.0mmol)。将所得反应混合物在70℃-75℃下加热3.0小时。将反应混合物冷却至10℃-15℃，并添加冰冷的水(500ml)，随后添加饱和碳酸氢钠水溶液。将反应混合物过滤并通过用异丙醇纯化，获得米色至浅黄色固体1-(1-苄基-4-氯-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(125.0g，89.6％)。
[0230]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ9.03(s,1h),δ8.38(m 1h),δ7.46(m,1h),δ7.34(m,5h),δ5.66(s,2h)。
[0231]
步骤b：1-(4-氨基-1-苄基-5-硝基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮
[0232][0233]
向搅拌的1-(1-苄基-4-氯-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(100g，295.2mmol)的二氯甲烷(2500ml)溶液中分批添加四丁基硝酸铵(224.7g，738.0mmol)，随后在0℃下逐滴添加三氟乙酸酐(155g，738.0mmol)。将反应混合物在室温下搅拌5.0小时。将有机层用水洗涤并减压浓缩，得到黄色固体1-(1-苄基-4-氯-5-硝基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(100gm，88.5％)。
[0234]
向搅拌的1-(1-苄基-4-氯-5-硝基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(100g，260.6mmol)的二氯甲烷(500ml)溶液中吹扫氨气，直到tlc上显示反应完成。减压去除溶剂。将残余物溶解在二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-100℃并过滤。将所获得的湿固体真空干燥，得到黄色固体1-(4-氨基-1-苄基-5-硝基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(85gm，89.5％)。
[0235]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ9.04(s,1h),δ8.94(m 1h),δ8.73(s,1h),δ7.30(m,6h),δ5.57(s,2h)。
[0236]
步骤c：1-(4,5-二氨基-1-苄基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮
[0237][0238]
向搅拌的1-(4-氨基-1-苄基-5-硝基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(85g，233.3mmol)的甲醇:四氢呋喃(1500ml，1:0.5)混合物溶液中添加雷尼镍(21.2g，25.0％w/w)，随后逐滴添加水合肼(59.5ml，0.70w/v)，并将反应混合物在室温下搅拌1.0小时。完成后，将反应混合物通过hyflo床过滤并用甲醇(400ml)洗涤。将滤液减压浓缩，将所得物通过水(500ml)纯化，过滤并减压干燥，得到棕色固体1-(4,5-二氨基-1-苄基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(71.0gm，90.8％)。
[0239]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ8.59(d,1h),δ7.66(s 1h),δ7.33(m,4h),δ7.26(m,1h),δ6.56(s,2h),δ5.45(s,2h),δ4.47(s,2h)。
[0240]
步骤d：1-(6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-基)-2,2,2-三氟乙酮
[0241][0242]
向搅拌的1-(4,5-二氨基-1-苄基-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-3-基)-2,2,2-三氟乙酮(70g，209.4mmol)的甲苯(700ml)悬浮液中添加原甲酸三乙酯(96.7ml，418.8mmol)和对甲苯磺酸一水合物(8.0g，41.88mmol)。将所得反应混合物在80℃-85℃下加热5.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩。向所获得的残余物中添加水(700ml)，在室温下搅拌并过滤和干燥，得到1-(6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-基)-2,2,2-三氟乙酮(65gm，90.1％)。
[0243]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.51(bs,1h),δ8.89(m 2h),δ8.29(t,1h),δ7.31(m,5h),δ5.72(s,2h)。
[0244]
步骤e：6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸
[0245][0246]
向氢氧化钠(151gm，3775mmol)的水(945ml)溶液中添加1-(6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-基)-2,2,2-三氟乙酮(65gm，188.8mmol)，将反应物质在80℃-85℃下加热5.0小时。完成后，将反应混合物用水稀释，随后用稀hcl稀释并过滤。将所获得的湿滤饼真空干燥，得到米色至浅棕色固体6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(50gm，90.5％)。
[0247]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.2(s,1h),δ8.75(s,1h),δ8.22(s,1h),δ8.17(s,1h)δ7.27(m,5h),δ5.61(s,2h)。
[0248]
步骤f：3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸
[0249][0250]
向液氨溶液(750ml)中分批添加金属钠(32.8g，1368.5mmol)。向所得反应混合物
中添加叔丁醇(50ml)、四氢呋喃(500ml)，随后添加6-苄基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(50g，171.1mmol)。然后将反应混合物在-60℃至-30℃下搅拌4.0h，并用甲醇(50ml)和水(50ml)淬灭。减压蒸发溶剂。然后向残余物中添加水(100ml)，随后添加hcl并搅拌。将反应混合物过滤并将湿固体减压干燥，得到米色固体3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(32gm，91.4％)。
[0251]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.39(bs,1h),δ12.07(bs 1h),δ8.66(s,1h),δ8.14(d,1h),δ7.94(s,1h)。
[0252]
步骤g：n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0253][0254]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(30g)，将其按原样用于进一步反应。将上述酰氯衍生物(30g)添加到二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并添加异丙胺(300ml)。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0255]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色至灰白色固体n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(29.0gm，80.3％)。
[0256]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ13.04(bs,1h),δ12.19(t,1h),δ10.03(d,1h),δ8.59(d,2h),δ8.07(m,1h),δ4.19(m,1h),δ1.22(td,6h)。
[0257]
步骤h：n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐
[0258][0259]
在10℃-15℃下向n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(25.0g，102.8mmol)在异丙醇(175ml)中的溶液中添加hcl在异丙醇中的溶液。将所得反应混合物在50℃-55℃下搅拌2.0h。完成后，将反应混合物在减压下浓缩。向所得残余物中添加水(250ml)并且在室温下搅拌1.0小时，过滤并且在真空下干燥，得到米色固体n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐(25gm，87.0％)。
[0260]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ13.66(bs,1h),δ12.87(bs,1h),δ9.26(s,1h),δ8.86(s,1h),δ8.57(d,2h),δ4.81(bs 1h),δ4.22(qd,1h),δ1.25(d,6h)。
[0261]
实施例9：n-乙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0262][0263]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(32g)，将其按原样用于进一步反应。
[0264]
将上述酰氯衍生物(32g)溶解于二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并添加乙胺(300ml)。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0265]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色固体n-乙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(27.0gm，79.4％)。
[0266]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ13.24(bs,1h),δ12.4(t,1h),δ10.2(d,1h),δ8.62(d,2h),δ8.23(m,2h),δ3.2(q,2h),δ1.22(t,3h)。
[0267]
实施例10：n-丙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0268][0269]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(31g)，将其按原样用于进一步反应。
[0270]
将上述酰氯衍生物(31g)溶解于二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并添加正丙胺(300ml)。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0271]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色固体n-丙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(30.0gm，83.3％)。
[0272]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.15(t,1h),δ10.24(d,1h),δ8.24(d,2h),δ8.15(m,2h),δ3.22(t,2h),δ1.6(m,2h)δ1.2(t,3h)。
[0273]
实施例11：n-丁基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0274]
[0275]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(33g)，将其按原样用于进一步反应。
[0276]
将上述酰氯衍生物(33g)溶解于二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并添加正丁胺(300ml)。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0277]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色固体n-丁基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺32.0g(83.8％)。
[0278]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.12(t,1h),δ10.4(d,1h),δ8.25(d,2h),δ8.3(m,2h),δ3.2(t,2h).δ1.6(m,4h),δ1.2(t,2h)。
[0279]
实施例12：n-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0280][0281]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(28g)，将其按原样用于进一步反应。
[0282]
将上述酰氯(28g)溶解在二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并添加甲胺盐酸盐(51.0g，757.0mmol)。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0283]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色固体n-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(25.0g，78.4％)。
[0284]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ12.2(t,1h),δ10.2(d,1h),δ8.3(d,2h),δ8.4(m,2h),δ3.3(s,3h)。
[0285]
实施例13：3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺
[0286][0287]
向3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酸(30.0g，148.4mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液中添加亚硫酰氯(300ml)，将反应混合物加热至65℃-70℃并搅拌4.0小时。完成后，将反应混合物减压浓缩，获得酰氯(25g)，将其按原样用于进一步反应。
[0288]
将上述酰氯(28g)溶解在二氯甲烷(300ml)中，冷却至5℃-10℃，并且吹扫氨气，直到tlc上显示反应完成。将所得反应混合物在室温下搅拌5.0小时。完成后，将反应物质减压浓缩，添加水(150ml)并过滤。
[0289]
将所获得的湿固体真空干燥，得到米色固体3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺(22.0gm，73.7％)。
[0290]1h nmr(400mhz,dmso-d6):δ13.3(bs,1h),δ12.2(bs,1h),δ10.2(d,1h),δ8.3(d,1h),δ8.4(m,1h),δ7.3(bs,2h)。

技术特征：
1.一种式(i)的化合物或其药学上可接受的盐；其中q是式q1或式q2的基团；其中q是式q1或式q2的基团；(波浪键)表示连接点；r1是-nr
a
r
b
；r2是氢或c
1-c
10
烷基；r
a
和r
b
独立地表示氢或c
1-c
10
烷基。2.根据权利要求1所述的化合物，其中q是q1，并且r2表示氢或c
1-c
10
烷基。3.根据权利要求1所述的化合物，其中q是q2，并且r2表示氢或c
1-c
10
烷基。4.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中r1是-nhr
a
。5.根据权利要求1至3中任一项所述的化合物，其中r1是-nhr
b
。6.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中r2是甲基。7.根据权利要求1至5中任一项所述的化合物，其中r2是氢。8.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是甲基，r
b
是氢，并且r2是甲基。9.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是乙基，r
b
是氢，并且r2是甲基。10.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是丙基，r
b
是氢，并且r2是甲基。11.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是异丙基，r
b
是氢，并且r2是甲基。12.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是甲基，r
b
和r2是氢。13.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是乙基，r
b
和r2是氢。14.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是丙基，r
b
和r2是氢。15.根据权利要求1至4中任一项所述的化合物，其中r
a
是异丙基，r
b
和r2是氢。16.一种化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物选自由以下项组成的组：
n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；1-甲基-n-丙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；1-甲基-n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n,3-二甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-3-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；3-甲基-n-丙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；3-甲基-n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；和n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺。17.一种化合物，所述化合物选自由以下项组成的组：n,1-二甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-1-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；1-甲基-n-丙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；1-甲基-n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-甲基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n,3-二甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-3-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；3-甲基-n-丙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；3-甲基-n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-甲基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；n-乙基-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺；和n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺。18.n-(丙-2-基)-1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐。19.n-(丙-2-基)-3,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶-8-甲酰胺盐酸盐。20.一种药物组合物，所述药物组合物包含根据前述权利要求中任一项所述的化合物。21.根据权利要求20所述的药物组合物，所述药物组合物还包含药学上可接受的赋形剂。22.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物或根据权利要求20或权利要求21所述的组合物，其用于疗法。23.根据权利要求1至19中任一项所述的化合物或根据权利要求20或权利要求21所述的组合物，其用于治疗或预防由激酶的功能异常引起的疾病或病症。24.根据权利要求23所用的化合物或所用的组合物，其中所述激酶是两面神激酶。
25.根据权利要求24所用的化合物或所用的组合物，其中所述由两面神激酶的功能异常引起的疾病或病症选自由以下项组成的组：增殖性疾病、涉及软骨更新受损的疾病、涉及软骨细胞的合成代谢刺激的疾病、自身免疫性疾病、先天性软骨畸形、炎性病症和移植排斥。26.权利要求1至19中任一项所述的化合物或权利要求20或权利要求21所述的组合物在制备用于治疗或预防由激酶的功能异常引起的疾病或病症的药物中的用途。27.根据权利要求26所述的用途，其中所述激酶是两面神激酶。28.根据权利要求27所述的用途，其中所述由两面神激酶的功能异常引起的疾病或病症选自由以下项组成的组：增殖性疾病、涉及软骨更新受损的疾病、涉及软骨细胞的合成代谢刺激的疾病、自身免疫性疾病、先天性软骨畸形、炎性病症和移植排斥。29.一种治疗或预防有需要的受试者的由激酶的功能异常引起的疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的根据权利要求1至19中任一项所述的化合物或根据权利要求20或权利要求21所述的组合物。30.根据权利要求29所述的方法，其中所述激酶是两面神激酶。31.根据权利要求30所述的方法，其中所述由两面神激酶的功能异常引起的疾病或病症选自由以下项组成的组：增殖性疾病、涉及软骨更新受损的疾病、涉及软骨细胞的合成代谢刺激的疾病、自身免疫性疾病、先天性软骨畸形、炎性病症和移植排斥。

技术总结
本发明提供了一种式(I)的化合物或其药学上可接受的盐，这些化合物作为激酶抑制剂的用途以及包含本发明化合物的组合物；其中Q是式Q1或式Q2的基团；波浪键表示连接点；其中R1是-NR


技术研发人员：D
受保护的技术使用者：联合化学实验室有限公司
技术研发日：2021.10.06
技术公布日：2023/8/6