一种组合物及其制备方法和用途与流程

1.本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种组合物及其制备方法和用途。


背景技术：

2.新冠病毒是一种具有包膜的单链rna病毒，为β属冠状病毒。与sars和mers类似，sars-cov-2基因组编码非结构蛋白：3c样蛋白酶(3-chymotrypsin-like protease，3clpro)、木瓜蛋白酶样蛋白酶(papain-likeprotease，plpro)、解旋酶(helicase)和rna依赖rna聚合酶(rna-dependent rna polymerase，rdrp)；结构蛋白：如棘突糖蛋白(spike glycoprotein)和附属蛋白(accessory proteins)。新冠病毒的表面棘突糖蛋白与人体细胞表面血管紧张素转换酶(ace2)受体的结合从而感染人的呼吸道上皮细胞。病毒在进入宿主细胞后解体，将核衣壳和病毒rna释放到细胞质中，病毒rna5
′
末端开放阅读框(orf1a/b)将编码多聚蛋白质(pp1a和pp1ab)，它们对病毒复制所需酶的加工、成熟起重要作用。pp1a和pp1ab可被木瓜蛋白酶样蛋白酶(plpro)和3c样蛋白酶(3clpro)裂解，产生非结构蛋白，包括rna依赖性rna聚合酶和解螺旋酶等，它们对于新冠病毒的转录和复制的起着关键的作用。目前，冠状病毒识别受体的表面棘突糖蛋白、参与复制及转录过程的重要蛋白3clpro、plpro与rdrp是四个十分具有抗病毒药物研发吸引力的靶点。
3.关于新冠疫苗的研发，12月2日，英国首先批准了辉瑞和biontech新冠疫苗的紧急使用权。一方面此款疫苗的普遍使用效果还未得知，另一方严格的低温保存要求对其广泛使用带来了极大的不便。
4.关于新冠药物研发，目前瑞德西韦是美国fda唯一批准的新冠用药。瑞德西韦(remdesivir)是一个腺苷类似物的单磷酸氨甲酯前药，起初为吉利德公司开发的抗埃博拉病毒药物。瑞德西韦作为rdrp抑制剂，在细胞层面表现出了抗新冠病毒的活性，但经临床试验表明，瑞德西韦在人体上并没有显著的降低死亡率。且由于临床使用剂量已接近安全剂量，一些明显的副作用不得不引起关注。
5.因此，仍需要有一种安全性好，稳定性好，生物利用度好的治疗新冠病毒的药物。


技术实现要素：

6.发明概述
7.为解决上述问题，第一方面，本发明提供一种组合物，所述组合物包括atv014化合物和药学上可接受的辅料，
8.在一些实施例中，所述药学上可接受的辅料可以包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素、甘露醇和预糊化淀粉中的至少一种。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素和甘露醇。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素或甘露醇。采用微晶纤维素或甘露醇作为稀释剂，更有利于提高原辅料相容性，优选为微晶纤维素或甘露醇作为稀释剂；更优选为微晶纤维素ph102或甘露醇50c作为稀释剂；最优选为甘露醇50c作为稀释剂。
9.第二方面，本发明提供一种前述组合物在制备用于预防、缓解或治疗冠状病毒感染或其同源变异病毒的复制或繁殖及其所产生的细胞病变效应的产品中的用途。
10.第三方面，本发明提供一种前述组合物的制备方法，所述制备方法采用研磨或粉碎atv014，降低atv014粒径的方法，有利于提高产品的溶出速度，还有利于在干法制粒过程中使颗粒硬度适中。所述制备方法采用研磨后的atv014进行干法制粒有利于得到硬度较好的颗粒。所述制备方法采用干法制粒，有利于提高产品的崩解速度。
11.发明详述
12.为解决上述问题，本发明提供一种组合物及其药物制剂、用途和制备方法。
13.第一方面，提供一种组合物。
14.一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，
[0015][0016]
在一些实施例中，所述药学上可接受的辅料可以包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种。在一些实施例中，所述药学上可接受的辅料包括稀释剂、崩解剂、粘合剂和润滑剂。
[0017]
在一些实施例中，所述稀释剂可以包括选自微晶纤维素、甘露醇、磷酸氢钙和预糊化淀粉中的至少一种。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素、甘露醇和预糊化淀粉中的至少一种。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素和甘露醇。在一些实施例中，所述稀释剂为微晶纤维素或甘露醇。采用微晶纤维素或甘露醇作为稀释剂，有利于提高原辅料相容性。在一些更有选的实施例中，所述稀释为微晶纤维素ph102或甘露醇50c，更有利于提
高原辅料相容性。在一些最优选的实施例中，所述稀释剂为甘露醇50c，最有利于原辅料相容性。
[0018]
在一些实施例中，所述崩解剂可以包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种。在一些实施例中，所述崩解剂为交联羧甲基纤维素钠。
[0019]
在一些实施例中，所述粘合剂可以包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种。在一些实施例中，所述粘合剂为羟丙基纤维素。
[0020]
在一些实施例中，所述润滑剂可以包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种。在一些实施例中，所述润滑剂为硬脂酸镁。
[0021]
在一些实施例中，所述其他辅料可以包括选自助流剂。
[0022]
在一些实施例中，所述助流剂可以包括选自胶态二氧化硅或滑石粉。
[0023]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量可以为15wt％-70wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为15wt％、20wt％、25wt％、30wt％、35wt％、40wt％、45wt％、50wt％、55wt％、56wt％、60wt％、65wt％或70wt％。
[0024]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述稀释剂的含量可以为20wt％-70wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述稀释剂的含量为20wt％、25wt％、30wt％、35wt％、36wt％、37wt％、40wt％、45wt％、50wt％、55wt％、60wt％、65wt％或70wt％。
[0025]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述崩解剂的含量可以为1wt％-10wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述崩解剂的含量为1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％或10wt％。
[0026]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述粘合剂的含量可以为1wt％-10wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述粘合剂的含量为1wt％、2wt％、3wt％、4wt％、5wt％、6wt％、7wt％、8wt％、9wt％或10wt％。
[0027]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述润滑剂的含量可以为0.5wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述润滑剂的含量为1.5wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述润滑剂的含量为0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、3wt％、4wt％或5wt％。
[0028]
在一些实施例中，所述组合物可以不包含表面活性剂。在一些实施例中，所述组合物可以不包含十二烷基硫酸钠。
[0029]
在一些实施例中，所述组合物还可以包括外加润滑剂。
[0030]
在一些实施例中，所述外加润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸钠和硬脂富马酸钠中的至少一种。在一些实施例中，所述外加润滑剂为硬脂酸镁。
[0031]
在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述外加润滑剂的含量为
0.5wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述外加润滑剂的含量为1.5wt％-5wt％。在一些实施例中，以所述组合物的总质量计算，所述外加润滑剂的含量为0.5wt％、1wt％、1.5wt％、2wt％、3wt％、4wt％或5wt％。
[0032]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素、甘露醇、磷酸氢钙和预糊化淀粉中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为15wt％-70wt％，所述稀释剂的含量为20wt％-70wt％，所述崩解剂的含量为1wt％-10wt％，所述粘合剂的含量为1wt％-10wt％，所述润滑剂的含量可以为0.5wt％-5wt％。
[0033]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素、甘露醇、磷酸氢钙和预糊化淀粉中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％。
[0034]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素和甘露醇中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％。
[0035]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为微晶纤维素ph102或甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％。
[0036]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为微晶纤维素ph102和甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和
硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％。
[0037]
在本发明的一些实施方式中，一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％。
[0038]
在一些实施例中，所述组合物的剂型可以为口服固体制剂或注射剂。在一些实施例中，所述组合物的剂型为片剂、颗粒剂或胶囊剂。
[0039]
在一些实施例中，所述剂型的规格可以为10mg-500mg(例如10mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg、400mg、450mg或500mg)。在一些实施例中，所述剂型的规格为15mg-300mg。在一些实施例中，所述剂型的规格为20mg-200mg。在一些实施例中，所述剂型的规格为50mg-200mg。在一些实施例中，所述剂型的规格为50mg。
[0040]
第三方面，提供一种用途。
[0041]
一种第一方面所述组合物在制备药物中的用途。
[0042]
在一些实施方式中，一种第一方面所述组合物在制备用于预防、缓解或治疗冠状病毒感染或其同源变异病毒的复制或繁殖及其所产生的细胞病变效应的产品中的用途。
[0043]
在一些实施例中，所述感染包括发热、咳嗽、咽痛、肺炎、急性呼吸道感染、严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症或脓毒性休克。
[0044]
在一些实施方式中，一种第一方面所述组合物在制备用于检测冠状病毒或其同源变异病毒的产品中的用途。
[0045]
在一些实施例中，所述冠状病毒包括：mhv-a59、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-nl63、hcov-hku1、sars-cov，mers-cov、sars-cov-2、小鼠肝炎病毒、猫传染性腹膜炎病毒、犬冠状病毒、牛冠状病毒、禽传染性支气管炎病毒或猪冠状病毒，优选地，所述sars-cov-2包括sars-cov-2的突变株或未突变株；更优选地，所述sars-cov-2的突变株包括sars-cov-2突变株b.1、sars-cov-2突变株b.1.351、sars-cov-2突变株b.1.617.2、sars-cov-2突变株c.37、sars-cov-2突变株p.1族谱、sars-cov-2突变株b.1.525、sars-cov-2突变株b.1.427或sars-cov-2突变株b.1.429。
[0046]
在一些实施例中，所述组合物适用于人或动物。在一些实施例中，所述动物包括牛科动物、马科动物、羊科动物、猪科动物、犬科动物、猫科动物、啮齿类动物、灵长类动物、鸟类动物或鱼类动物。
[0047]
第四方面，提供一种第一方面所述组合物的制备方法。
[0048]
一种第一方面所述组合物的制备方法，其包括：将atv014化合物和药学上可接受的辅料混合，干法制粒，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物。
[0049]
在本发明的一些实施方式中，一种第一方面所述组合物的制备方法，其包括：将
atv014化合物和药学上可接受的辅料混合，湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物。
[0050]
在本发明的一些实施方式中，一种第一方面所述组合物的制备方法，其包括：将atv014化合物研磨或粉碎后和药学上可接受的辅料混合，干法制粒，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物。
[0051]
在本发明的一些实施方式中，一种第一方面所述组合物的制备方法，其包括：将atv014化合物研磨或粉碎后和药学上可接受的辅料混合，湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物。
[0052]
在一些实施例中，所述atv014的粒径d90可以为≤500μm。在一些实施例中，所述atv014的粒径d90为≤300μm。在一些实施例中，所述atv014的粒径d90为≤200μm。在一些实施例中，所述atv014的粒径d90为≤100μm。在一些实施例中，所述atv014的粒径d90为≤50μm。在一些优选的实施例中，所述atv014的粒径d90为≤25μm。在一些优选的实施例中，所述atv014的粒径d90为≤20μm。在一些更优选的实施例中，所述atv014的粒径d90为≤10μm。
[0053]
有益效果
[0054]
相比现有技术，本发明的某一个实施例至少具有包括以下有益技术效果中的一种：
[0055]
(1)采用本发明所采用的处方和处方比例，有利于提高溶出度，提高生物利用度。
[0056]
(2)采用本发明所采用的处方和处方比例，有利于提高药物的高温、高湿、光照等条件的稳定性。
[0057]
(3)采用本发明所采用的处方和处方比例，可用于预防、缓解或治疗冠状病毒感染或其同源变异病毒的复制或繁殖及其所产生的细胞病变效应。
[0058]
(4)采用不加表面活性剂的方式，有利于提高产品的溶出速度。
[0059]
(5)润滑剂(例如：硬脂酸镁)的含量优选为1.5％及以上，有利于干法制粒的颗粒硬度和光滑度。
[0060]
(6)粘合剂(例如：羟丙基纤维素)的含量优选为3％及以上，有利于干法制粒的颗粒硬度和光滑度。
[0061]
(7)粘合剂(例如：羟丙基纤维素)的含量优选约为3％，有利于产品的产品的溶出度。
[0062]
(8)采用研磨或粉碎atv014，降低atv014粒径的方法，有利于提高产品的溶出速度，还有利于在干法制粒过程中使颗粒硬度适中。
[0063]
(9)采用研磨后的atv014进行干法制粒有利于得到硬度较好的颗粒。
[0064]
(10)采用干法制粒，有利于提高产品的崩解速度。
[0065]
(11)相比其他稀释剂，采用微晶纤维素或甘露醇作为稀释剂，更有利于提高原辅料相容性，优选为微晶纤维素或甘露醇作为稀释剂，更优选为微晶纤维素ph102或甘露醇50c，最优选为甘露醇50c。
[0066]
术语定义：
[0067]
本发明中，“室温”表示环境温度，可以为20℃-30℃；在一些实施例中，为22℃-28℃；在一些实施例中，为24℃-26℃；在一些实施例中，为25℃。
[0068]
在本发明的上文中，无论是否使用“大约”或“约”等字眼，所有在此公开了的数字
均为近似值。基于公开的数字，每一个数字的数值有可能会出现
±
10％以下的差异或者本领域人员认为的合理的差异，如
±
1％、
±
2％、
±
3％、
±
4％或
±
5％的差异。
[0069]
术语“任选”、“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件或情形可以但不一定出现。例如，“任选的表面活性剂”是指表面活性剂可以存在或可以不存在。
[0070]
术语“外加润滑剂”表示在制粒后加入的为降低制粒所得颗粒之间摩擦力、防止原辅料粘着冲头表面或降低药片与冲模孔壁之间摩擦力的物质。
[0071]
术语“规格”是指一个单位的制剂(单片或单颗胶囊)中活性成分的重量。
[0072]
术语“重量百分比”或“以重量计的百分比”或“wt％”定义为组合物中单个组分的重量除以组合物所有组分的总重量然后乘以100。
[0073]
术语“和/或”应理解为意指可选项中的任一项或可选项中的任意两项或多项的组合。
[0074]
术语“wt％”表示质量百分比。
[0075]
在本文中，术语“治疗”指意欲改变正在接受治疗的个体中疾病之天然过程的临床介入。想要的治疗效果包括但不限于防止疾病出现或复发、减轻症状、减小疾病的任何直接或间接病理学后果、防止转移、降低病情进展速率、改善或缓和疾病状态，以及缓解或改善预后。
[0076]
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
[0077]
在本技术中，“组合物”可以方便地表现为单位剂量形式并且可以通过制药领域中熟知的方法的任何一种进行制备。所有的方法包括使活性成分与构成一种或多种附属成分的载体相结合的步骤。通常，通过均匀并充分地使活性化合物与液体载体、细碎固体载体或这两者相结合，制备组合物。
[0078]
本发明中，一些化合物的缩写所表示的化合物结构：
[0079]
具体实施方式
[0080]
为了使本领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面进一步披露一些非限制实施例以对本发明作进一步的详细说明。
[0081]
本发明所使用的试剂均可以从市场上购得或者可以通过本发明所描述的方法制备而得。
[0082]“#0”表示0号胶囊壳。“#4”表示4号胶囊壳。“api”表示原料药，以下具体实施例中是指atv014化合物。“rpm”表示转速单位“转每分钟”。“sds”表示十二烷基磺酸钠。“h”表示小时。“min”表示分钟。“μm”表示微摩尔每升，即μmol/l。“ml”或“ml”表示毫升。“化合物rdv”或“rdv”表示瑞德西韦(remdesivir)。
[0083]
实施例1：atv014的制备
[0084][0085]
将1.50g的化合物5溶于15ml的二氯甲烷中，再加入0.42ml环己基甲酸和55.40mg的4-二甲氨基吡啶，搅拌10min后，加入1.02g的二环己基碳二亚胺，室温搅拌24h。经过柱层析分离(洗脱液为：石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/1)，得到化合物7。
[0086]
将1.50g的化合物7溶于3ml质量百分比为37％的盐酸水溶液和15ml的四氢呋喃中，搅拌6小时后，加入碳酸钠调节ph至8，旋转蒸发除去有机溶剂，经过柱层析分离(洗脱液为：石油醚/乙酸乙酯(v/v)＝1/3)，得到0.28g化合物atv014(白色固体，产率45.8％)。取得到的化合物atv014检测氢谱和碳谱，结果如下：
[0087]
氢谱：1h nmr(600mhz,dmso-d6)δ(ppm):7.92(s,1h),7.86(br,1h),6.92(d,j＝4.5hz,1h),6.81(d,j＝4.5hz,1h),6.33(d,j＝5.9hz,1h),5.38(d,j＝5.9hz,1h),4.70(t,j＝5.3hz,1h),4.32-4.29(dd,j＝12.2hz,2.6hz,1h),4.24-4.21(m,1h),4.16-4.13(dd,j
＝12.3hz,4.8hz,1h),3.98-3.95(q,j＝5.9hz,1h),2.26-2.22(m,1h),1.75-1.72(m,2h),1.64-1.56(m,3h),1.30-1.12(m,5h).
[0088]
碳谱：
13
c nmr(150mhz,dmso-d6)δ(ppm):175.34,156.06,148.4,124.0,117.4,117.0,110.7,101.2,81.7,79.4,74.5,70.6,63.0,42.6,29.0,28.9,25.7,25.2,25.1.
[0089]
实施例2：化合物对sars-cov-2复制子在hek293t细胞上的抑制效果
[0090]
分别取化合物gs-441524、atv014或atv014中间体5作为待测化合物，分别按以下步骤进行操作：
[0091]
在24孔板中接种hek293t细胞，待细胞生长至40-50％密度时，通过lipo2000(脂质体2000)转染sars-cov-2复制子质粒250ng，转染6-8h后，弃去细胞上清液，更换新鲜的dmem培养基，分别加入待测化合物至终浓度为50μm、10μm、5μm、2μm、1μm、0.1μm或0.01μm，待转染60h后，弃去细胞上清液，用trizol收取细胞rna，通过提取总rna并通过逆转录酶得到cdna，最后通过荧光定量pcr检测cdna中内参基因gapdh和sars-cov-2n基因亚基因组来反应sars-cov-2复制子中病毒复制情况，计算出不同浓度药物对病毒的抑制效果，并算出药物的ic
50
，结果如表2所示。
[0092]
表2：化合物对sars-cov-2复制子在hek293t细胞上的抑制效果
[0093][0094]
结论：测试化合物在hek293t细胞中均不同程度地抑制sars-cov-2的复制。其中atv014的活性为化合物gs-441524活性的3.65倍，活性显著提高。不同化合物对sars-cov-2复制子在hek293t细胞上的抑制效果见表2所示。
[0095]
实施例3：化合物对vero-e6细胞中sars-cov-2的抑制作用
[0096]
分别取化合物rdv、gs-441524、atv014作为供试化合物，按如下步骤进行操作：
[0097]
将vero-e6细胞接种于48孔板中。当细胞密度约为70-80％时，弃上清液，更换为新鲜的dmem培养基，然后将每种化合物分别加入培养基中，使化合物的终浓度为50μm、10μm、5μm、2μm、1μm，0.5μm、0.25μm、0.1μm或0.01μm。细胞以0.05的感染复数(moi)感染三种sars-cov-2突变体(b.1、b.1.351和b.1.617.2)。通过定量实时聚合酶链反应评估抗病毒活性(qrt-pcr)定量感染48小时后上清液中的病毒拷贝数。我们计算了不同浓度的受试药物对病毒复制的抑制作用，并计算了它们的ic50值。vero-e6细胞中不同化合物对sars-cov-2的ic50见表3。
[0098]
表3：不同化合物对vero-e6细胞中sars-cov-2的抑制作用
[0099]
[0100][0101]
实施例4：表面活性剂的考察(制备方法为湿法制粒)
[0102]
按表4所述处方制备胶囊。
[0103]
表4:处方比例
[0104][0105]
[0106]
制备方法：研磨atv014(处方37181-037-b不研磨)，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，加水后湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0107]
溶出度检测：取所得胶囊剂，以900ml 0.1n盐酸为介质，采用浆法，转速75rpm，分别于5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、75分钟检测溶出度。结果如表5所示。
[0108]
表5：溶出度检测结果
[0109][0110]
结果分析：
[0111]
(1)采用不添加表面活性剂(如：十二烷基硫酸钠(sds))的处方更有利于提高溶出速度。
[0112]
(2)研磨api后有利于提高溶出速度。
[0113]
(3)通过采用研磨api，并且不添加表面活性剂(如：十二烷基硫酸钠(sds))的方式，彼此协同增效，大大提高溶出速度。
[0114]
实施例5：气流粉碎api的制备方法(湿法制粒)
[0115]
按表6所述处方制备胶囊。
[0116]
表6:处方比例
[0117][0118]
制备方法：研磨atv014，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，加水后湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0119]
溶出度检测：取所得胶囊剂，以900ml 0.1n盐酸为介质，采用浆法，转速75rpm，分别于5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、75分钟检测溶出度。结果如表7所示。
[0120]
表7：溶出度检测结果
[0121][0122]
结果分析：
[0123]
1、含有气流粉碎api且不含sds的处方的溶出速度快，溶出平台高。
[0124]
实施例6：atv014研磨对溶出度的影响(制备方法为干法制粒)
[0125]
按表8所述处方制备胶囊。
[0126]
表8:处方比例
[0127]
[0128][0129]
制备方法：研磨atv014(处方37181-027b不研磨)，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，干法制粒，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0130]
溶出度检测：取所得胶囊剂，以900ml 0.1n盐酸为介质，采用浆法，转速75rpm，分别于5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、75分钟检测溶出度。结果如表9所示。
[0131]
表9：溶出度结果
[0132]
[0133][0134]
结果分析：
[0135]
(1)相比湿法制粒，采用干法制粒相比湿法制粒更有利于提高产品溶出度。
[0136]
(2)api经过研磨后，有利于提高产品的溶出度。
[0137]
实施例7：atv014研磨对干法制粒颗粒和崩解时限的影响(制备方法为干法制粒或直接填充)按表10所述处方制备胶囊。
[0138]
表10：处方比例
[0139][0140][0141]
处方37181-020-b的制备方法：研磨atv014，并将atv014和其他各组分过筛，按处
方比例，将内加组分混合，干法制粒，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0142]
处方37181-019-b的制备方法：将未研磨的atv014和其他组分分别过筛后，按处方比例，将内加组分混合，再加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0143]
处方37181-021-b制备方法：研磨atv014，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，再加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0144]
干法制粒现象观察：采用表11所示干法制粒工艺参数进行制粒，在制粒过程中，观察物料性状，结果如表11所示。
[0145]
表11：干法制粒现象观察结果
[0146][0147]
小结：采用研磨后的atv014进行干法制粒有利于得到硬度较好的颗粒。
[0148]
崩解时限考察：取本实施例所得胶囊剂，依据2020年版《中国药典》四部通则0921，检测胶囊剂的崩解时限，结果如表12所示。
[0149]
表12：崩解时限考察结果
[0150][0151]
结论：采用研磨api和干法制粒后填充的制备方法所得胶囊剂的崩解时间快，干法制粒有利于提高产品的崩解速度。
[0152]
实施例8：粘合剂和润滑剂含量的考察
[0153]
按表13所述处方制备胶囊。
[0154]
表13:处方比例
[0155]
[0156][0157]
制备方法：研磨atv014，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，干法制粒，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0158]
干法制粒现象观察：采用表14所示干法制粒工艺参数进行制粒，在制粒过程中，观察物料性状，结果如表14所示。
[0159]
表14：干法制粒现象观察
[0160]
[0161][0162]
小结：
[0163]
1、硬脂酸镁含量优选为1.5wt％及以上，有利于干法制粒的颗粒硬度和光滑度。
[0164]
2、羟丙基纤维素含量优选为3wt％及以上，有利于干法制粒的颗粒硬度和光滑度。
[0165]
溶出度检测：取辊压为6-12kg/cm2所得胶囊剂，以900ml 0.1n盐酸为介质，采用浆法，转速75rpm，分别于5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、75分钟检测溶出度。结果如表15所示。
[0166]
表15：溶出度结果
[0167][0168]
结论：处方37181-047-b和处方37181-051-b所得胶囊剂均能快速和完全溶出，其中处方37181-051-b的释放速度更快。
[0169]
实施例9：不同规格的胶囊剂
[0170]
按表16所述处方制备胶囊。
[0171]
表16:处方比例
[0172][0173]
制备方法：研磨atv014，并将atv014和其他各组分过筛，按处方比例，将内加组分混合，干法制粒，加入外加组分，混合，用胶囊填充，得到胶囊剂。
[0174]
溶出度检测：取所得胶囊剂，以900ml 0.1n盐酸为介质，采用浆法，转速75rpm，分别于5分钟、15分钟、30分钟、45分钟、60分钟、75分钟检测溶出度。结果如表17所示。
[0175]
表17：溶出度结果
[0176][0177][0178]
结论：不同规格的胶囊剂均具有良好的溶出度，其中50mg规格的胶囊剂溶出速度更快。
[0179]
实施例10：稳定性考察
[0180]
取本发明所提供的胶囊剂，分别置表18所示条件考察稳定性，结果表明，本发明所提供的胶囊剂的有关物质的稳定性好。
[0181]
表18：有关物质稳定性考察结果
[0182][0183]
实施例11：原辅料相容性考察
[0184]
赋形剂的相容性研究(excipient compatibility study)
[0185]
按表19所示原辅料和比例混合，分别置60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)放置10天、30天，取出，检测其含量、有关物质的变化，结果如表20所示。
[0186]
表19：原辅料相容性试验
[0187][0188]
表20：含量检测结果(结果数值单位为％)
[0189]
[0190][0191]
n/a：根据ec方案，为备选辅料，未检测。
[0192]
结论：
[0193]
有关物质检测：本发明所选用辅料与atv014在加速(40℃/75％
±
5％rh)、高湿(25℃/90％
±
5％rh)或高温(60℃)条件下放置30天与在光照(可见光不低于1.2
×
106lux
·
hr、近紫外不低于200w
·
hr/m2)条件下放置10天杂质未有明显变化，所有辅料与原料均具有较好的相容性。
[0194]
由表20结果可知：
[0195]
在稀释剂的考察中(编号2～6)，采用微晶纤维素ph102，有利于atv014在高温(60℃)条件和光照(可见光不低于1.2
×
106lux
·
hr、近紫外不低于200w
·
hr/m2)条件的稳定性。相比其他稀释剂，采用甘露醇50c更有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性，具有预料不到的技术效果。
[0196]
在崩解剂的考察中(编号7～8)，采用交联羧甲基纤维素钠或交聚维酮xl-10均有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0197]
在粘合剂的考察中(编号9～10)，采用羟丙基纤维素-exf或聚维酮k30均有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0198]
在表面活性剂的考察中(编号11)，采用十二醇硫酸钠有利于在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0199]
在润滑剂的考察中(编号12～13)，采用硬脂酸镁ligamed mf-2-v或硬脂酰醇富马酸钠pruv均有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0200]
在助流剂的考察中(编号14)，采用二氧化硅200pharma有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0201]
在胶囊囊材和包衣材料的考察中(编号15～16)，采用空心胶囊,0#rich yellow opaque或ii完整的涂膜系统85f620077-cn,us有利于atv014在60℃高温条件(60℃)，高湿条件(25℃，92.5％rh)，加速条件(40℃
±
2℃，75％rh
±
5％)和光照条件(4500lx
±
500lx)的稳定性。
[0202]
本发明的方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明内。

技术特征：
1.一种组合物，其包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，2.根据权利要求1所述的组合物，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种。3.根据权利要求2所述的组合物，所述稀释剂包括选自微晶纤维素、甘露醇和预糊化淀粉中的至少一种；优选地，所述稀释为微晶纤维素或甘露醇；更优选地，所述稀释为微晶纤维素ph102或甘露醇50c；最优选地，所述稀释剂为甘露醇50c；和/或所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种；和/或所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种；和/或所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种；和/或所述其他辅料包括选自助流剂；和/或所述助流剂包括选自胶态二氧化硅或滑石粉；和/或所述组合物还包括外加润滑剂；和/或所述外加润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸钠和硬脂富马酸钠中的至少一种。4.根据权利要求2-3任一项所述的组合物，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为15wt％-70wt％；和/或以所述组合物的总质量计算，所述稀释剂的含量为20wt％-70wt％；和/或以所述组合物的总质量计算，所述崩解剂的含量为1wt％-10wt％；和/或以所述组合物的总质量计算，所述粘合剂的含量为1wt％-10wt％；和/或以所述组合物的总质量计算，所述润滑剂的含量为0.5wt％-5wt％；和/或以所述组合物的总质量计算，所述外加润滑剂的含量为0.5wt％-5wt％；和/或所述组合物不包含表面活性剂；或者所述组合物不包含十二烷基硫酸钠。5.根据权利要求2-3任一项所述的组合物，其特征在于，包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素、甘露醇、磷酸氢钙和预糊化淀粉中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为15wt％-70wt％，所述稀释剂的含量为20wt％-70wt％，所述崩解剂的含量为1wt％-10wt％，所述粘合剂的含量为1wt％-10wt％，所述润滑剂的含量为0.5wt％-5wt％；或者
包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素、甘露醇、磷酸氢钙和预糊化淀粉中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羧甲基淀粉钠和羟丙基纤维素中的至少一种，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素、聚维酮和淀粉中的至少一种，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量为1.5％-5wt％；或者包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂包括选自微晶纤维素和甘露醇中的至少一种，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量为1.5％-5wt％；或者包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为微晶纤维素ph102或甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量可以为1.5％-5wt％；或者包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为微晶纤维素ph102和甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量为1.5％-5wt％；或者包括：atv014化合物和药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括选自：稀释剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂和其他辅料中的至少一种，所述稀释剂为甘露醇50c，所述崩解剂包括选自交联羧甲基纤维素钠，所述粘合剂包括选自羟丙基纤维素，所述润滑剂包括选自硬脂酸镁、硬脂酸和硬脂富马酸钠中的至少一种，以所述组合物的总质量计算，所述atv014化合物的含量为50wt％-60wt％，所述稀释剂的含量为30wt％-40wt％，所述崩解剂的含量为2wt％-5wt％，所述粘合剂的含量为2wt％-5wt％，所述润滑剂的含量为1.5％-5wt％。6.根据权利要求1-3任一项所述的组合物，所述组合物的剂型为口服固体制剂或注射剂；任选地，所述剂型为片剂、颗粒剂或胶囊剂。
7.一种权利要求1-6任一项所述组合物在制备用于预防、缓解或治疗冠状病毒感染或其同源变异病毒的复制或繁殖及其所产生的细胞病变效应的产品或用于检测冠状病毒或其同源变异病毒的产品中的用途。8.根据权利要求7所述的用途，所述感染包括发热、咳嗽、咽痛、肺炎、急性呼吸道感染、严重急性呼吸道感染、低氧性呼吸衰竭及急性呼吸窘迫综合征、脓毒症或脓毒性休克。9.根据权利要求7-8任一项所述的用途，所述冠状病毒包括：mhv-a59、hcov-229e、hcov-oc43、hcov-nl63、hcov-hku1、sars-cov，mers-cov、sars-cov-2、小鼠肝炎病毒、猫传染性腹膜炎病毒、犬冠状病毒、牛冠状病毒、禽传染性支气管炎病毒或猪冠状病毒，优选地，所述sars-cov-2包括sars-cov-2的突变株或未突变株；更优选地，所述sars-cov-2的突变株包括sars-cov-2突变株b.1、sars-cov-2突变株b.1.351、sars-cov-2突变株b.1.617.2、sars-cov-2突变株c.37、sars-cov-2突变株p.1族谱、sars-cov-2突变株b.1.525、sars-cov-2突变株b.1.427或sars-cov-2突变株b.1.429。10.根据权利要求7-8任一项所述的用途，其特征在于，所述组合物适用于人或动物；和/或所述动物包括牛科动物、马科动物、羊科动物、猪科动物、犬科动物、猫科动物、啮齿类动物、灵长类动物、鸟类动物或鱼类动物。11.一种权利要求1-6任一项所述组合物的制备方法，其包括：将atv014化合物和药学上可接受的辅料混合，干法制粒，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物；或者将atv014化合物和药学上可接受的辅料混合，湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物；或者将atv014化合物研磨或粉碎后和药学上可接受的辅料混合，干法制粒，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物；或者将atv014化合物研磨或粉碎后和药学上可接受的辅料混合，湿法制粒，研磨，干燥，干磨，加入外加润滑剂，混合，压片或胶囊填充或装袋，得到所述组合物。

技术总结
本发明涉及一种组合物及其制备方法和用途，属于药物制剂领域。所述组合物包括ATV014化合物和药学上可接受的辅料，所述组合物稳定性好，溶出度高，生物利用度高，可用于预防、缓解或治疗冠状病毒感染或其同源变异病毒的复制或繁殖及其所产生的细胞病变效应。制或繁殖及其所产生的细胞病变效应。制或繁殖及其所产生的细胞病变效应。


技术研发人员：李硕 李官官 刘新军
受保护的技术使用者：深圳安泰维生物医药有限公司
技术研发日：2023.04.04
技术公布日：2023/8/5