一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒的制作方法

1.本发明涉及快速检测技术领域，具体涉及一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒。


背景技术：

2.近年，食品安全一直广泛受到关注，其中溴酸钾，作为一种违禁添加的物质随着食品抽检结果不断被提及。溴酸钾是一种无机化合物，化学式为kbro3，自从1941年开始被用于制作烘焙面包，人们发现面粉中添加溴酸钾后，烘焙效果和口感均得到极大改善。后来被作为面粉添加剂广泛使用，被认为是最有效的面团改良剂。而后随着科学的发展，人们对溴酸钾长期毒性、致癌性实验进一步发展得到结论溴酸钾对动物具有长期毒性及致癌作用。溴酸钾是毒害基因的致癌物质，可导致动物的肾脏、甲状腺及其他组织发生癌变。
3.目前国内外检测溴酸钾残留的方法有如下几种：
[0004][0005]
(1)滴定法：(
ⅰ
)亚硫酸盐滴定法提取液在酸性条件下加碘化钾用硫代硫酸钠滴定游离碘，推算样品中溴酸钾的量；(
ⅱ
)碘滴定法：灰化样品，加入次氯酸钠氧化溴离子为溴酸离子，用碘滴定计算溴酸钾含量。
[0006]
(2)色谱法：(
ⅰ
)气相色谱；(
ⅱ
)高效液相色谱；(
ⅲ
)离子色谱法。
[0007]
(3)光谱法：溴酸盐对染料氧化作用变色通过光谱测定计算溴酸钾含，等等。
[0008]
以上这些方法都需要专业的仪器、具备实验能力的工作人员进行操作，需要比较复杂的实验流程以及专业的实验室才能够完成。对于需要快速、初步检测的场景并不适用。所以研发一种安全系数高，操作难度系数低的快速检测试剂盒可以更好的满足面粉、面包中的溴酸钾的检测和初步筛查。


技术实现要素：

[0009]
基于以上不足，本发明提出一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒。
[0010]
本发明提供如下技术方案：所述层析卡包括底板、样品垫和显色垫，所显色垫上固定试剂为甲酚红试剂，所述甲酚红试剂用乙醇水溶液进行溶解，所述甲酚红试剂浓度为1
×
10-4
mol/l～5
×
10-4
mol/l。
[0011]
优选地，所述甲酚红试剂浓度2
×
10-4
mol/l。
[0012]
优选地，所述底板为带粘性pvc材质；所述样品垫材质为玻璃纤维、聚酯纤维膜中的一种；所述显色垫材质为滤纸、层析纸、吸水纸中的一种。
[0013]
优选地，所述显色垫的制备方法：将显色垫放入用乙醇水溶液溶解的甲酚红试剂中，浸泡2～3min后取出，沥干，放入烘箱干燥，干燥后备用。
[0014]
优选地，所述样品垫和显色垫分别粘结在所述底板上，所述样品垫的右侧交叠在所述显色垫左侧上方。
[0015]
优选地，所述底板卡接在所述壳体的底座内，所述壳体顶部的上壳卡接在所述底
座上，且所述上壳上开设有加样孔和视窗，所述加样孔对准所述样品垫，所述视窗对准所述显色垫。
[0016]
该溴酸钾快速检测试剂盒的使用方法，取1g面粉、面包粉碎样本，加入10ml前处理液，摇匀静置5min，用滴管向加样孔滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色并读取结果。
[0017]
优选地，所述前处理液为盐酸水溶液。
[0018]
优选地，所述盐酸水溶液浓度为0.2～0.4mol/l。
[0019]
与现有技术相比，本发明的有益效果：
[0020]
(1)：本发明操作简单，反应快速，场景适用性广阔；
[0021]
(2)：本发明中溴酸钾在酸性条件下与甲酚红显色片发生氧化还原反应，检测限为4mg/kg，色阶梯度扩宽为0～30mg/kg；
[0022]
(3)：本发明以层析卡的形式制备试剂盒，增加过滤系统，用最低的成本减小实际样本测试中的杂质影响，且试剂盒的形式快速简便。
附图说明
[0023]
图1：是本发明中试剂盒主视图。
[0024]
图2：是本发明中层析卡结构图。
具体实施方式
[0025]
下面对发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0026]
实施例：如图1和2所示，一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，包括壳体1和设置于壳体1内部的层析卡2，层析卡2包括底板3、样品垫4和显色垫5。其中，底板3为带粘性pvc材质；样品垫4材质为玻璃纤维、聚酯纤维膜中的一种，优选玻璃纤维；显色垫5材质为滤纸、层析纸、吸水纸中的一种，优选滤纸。
[0027]
样品垫4和显色垫5分别粘结在底板上，样品垫4的右侧交叠在显色垫5左侧上方，底板3卡接在壳体1的底座内，壳体1顶部的上壳卡接在底座上，且上壳1上开设有加样孔6和视窗7，加样孔6对准样品垫，视窗7对准显色垫。
[0028]
显色垫上固定试剂为甲酚红试剂，所述甲酚红试剂用乙醇水溶液进行溶解，所述甲酚红试剂浓度为1
×
10-4
mol/l～5
×
10-4
mol/l。
[0029]
其中，显色垫的制备方法：将显色垫放入用乙醇水溶液溶解的甲酚红试剂中，浸泡2～3分钟后取出，沥干，放入烘箱干燥，干燥后备用。
[0030]
该溴酸钾快速检测试剂盒的使用方法：取1g面粉、面包粉碎样本，加入10ml前处理液(前处理液为盐酸水溶液，盐酸水溶液浓度为0.2～0.4mol/l)，摇匀静置5min，用滴管向加样孔滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色并读取结果。
[0031]
实施例1：显色垫固定试剂选取
[0032]
将甲酚红、中性红显色试剂分别采用乙醇水溶液溶解为2
×
10-4
mol/l浓度，选用滤纸作为显色垫材质，将滤纸分别放置在甲酚红试剂、中性红显色试剂内浸泡2min，滤纸拿出后，沥干，放入烘箱干燥，将显色垫裁剪制备成试剂条。
[0033]
配制溴酸钾标准液0、3、4、5、10、15、20、30mg/l，按照检测步骤取1ml标液+10ml盐酸水溶液，混匀。
[0034]
分别在两个试剂条上滴加3滴样液，甲酚红的显色灵敏度最高4mg/l与0有肉眼可见区别，中性红灵敏度在5mg/l左右，优选甲酚红作试剂固定在显色垫上。
[0035]
实施例2：甲酚红显色垫制备：配制甲酚红乙醇水溶液1
×
10-4
mol/l、2
×
10-4
mol/l、3
×
10-4
mol/l、4
×
10-4
mol/l、5
×
10-4
mol/l五个浓度各20ml，裁剪显色垫(滤纸)为同等大小，浸泡2min，滤纸拿出后，沥干，放入烘箱干燥，之后将显色垫裁剪制备成试剂条。
[0036]
按照实施例1制备溴酸钾标准液，按照检测步骤取1ml溴酸钾标准液+10ml盐酸水溶液，混匀。
[0037]
在5个浓度的试条上，分别滴加0～30mg/l溴酸钾标准液3滴，对比肉眼可分别灵敏度颜色和色阶，结果显示2
×
10-4
mol/l的甲酚红乙醇水溶液泡垫得到的显色垫灵敏度较高为4mg/l且显色范围最佳为0～30mg/l。
[0038]
实施例3：配制乙醇水溶液分别为无水乙醇、20％乙醇水溶液、40％乙醇水溶液、60％乙醇水溶液、80％乙醇水溶液、纯水溶液。
[0039]
用以上6中溶剂配制同浓度的甲酚红1
×
10-4
mol/l。裁剪滤纸为同等大小浸泡2min，滤纸拿出后，沥干，放入烘箱干燥，显色垫裁剪制备成试剂条。
[0040]
甲酚红在无水乙醇中溶解最快，泡片干燥最快，色片均匀度好，显色剂的固定量最多，但是配制好的甲酚红溶液挥发最快，易在短时间内浓度差异大。甲酚红在水中溶解度小于乙醇，泡片干燥最慢，色片均匀度差，显色剂的固定量最少，但是溶液浓度稳定性高。最终选用60％的乙醇水溶液作为溶解甲酚红的溶解试剂。
[0041]
实施例4：色卡的制备：按照实施例1中甲酚红用量进行泡片、烘干、裁剪，加样品垫，装成完整的试剂卡，配置浓度为0.2mol/l的前处理试剂盐酸溶液，配制溴酸钾标准液0、3、4、5、10、15、20、30mg/l，按照检测步骤取1ml标液+10ml盐酸水溶液，混匀。
[0042]
分别滴加3滴样液，反应2～3min，得到溴酸钾色卡0、4、10、15、20、30mg/l分别对应颜色红、橙红、橙黄、黄、淡黄、无色。与其他同类型试剂盒对比，灵敏度从5mg/l提高至4mg/l，色卡梯度从0-15mg/l、拓宽至0-30mg/l.可以应用的检测范围更宽，方便不同检测需求。
[0043]
实施例5：按照实施例1中甲酚红用量进行泡片、烘干、裁剪，样品垫选择(无垫、玻璃纤维)。
[0044]
配制浓度为0.2mol/l的前处理试剂盐酸溶液，配制面粉0mg/kg、10mg/kg加标样本，按照检测步骤取1ml标液+10ml盐酸水溶液，混匀。
[0045]
对于无样品垫试条直接滴加在显色垫上、有样本垫玻璃纤维垫样液滴加在样品垫上。
[0046]
0mg/kg、10mg/kg加标样本滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色读取结果。
[0047]
结果表明直接滴加在显色垫上样本影响结果判读，显色均匀度不佳，易造成假阳结果。
[0048]
实施例6：面粉样本测试
[0049]
市场购买三种品牌的散装面粉，分别为a、b、c，使用实施例4中甲酚红显色试剂装成成卡，以及0.2mol/l盐酸溶液做前处理试剂。取1g面粉粉碎样本，加入10ml前处理液，摇匀静置5min，用滴管向加样孔滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色读取结果。
[0050]
结果如下表，且因为样品垫的增加，过滤了大部分基质，减少基质影响。本发明能够定性的检出面粉样本中的溴酸钾。
[0051]
样本显色结果比色卡读取结果a橙红-橙黄之间4～10mg/kgb红0mg/kgc橙红-橙黄之间4～10mg/kg
[0052]
实施例7：面包类样本测试
[0053]
市场购买散装鸡蛋糕(无奶油、无夹心)、面包(无奶油、无夹心)，使用实施例4中甲酚红显色试剂装成成卡，以及0.2mol/l盐酸溶液做前处理试剂。取1g鸡蛋糕、面包粉碎样本，加入10ml前处理液，摇匀静置5min，用滴管向加样孔滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色读取结果。
[0054]
结果如下表，本发明能够定性的检出面包类样本中的溴酸钾。
[0055]
样本显色结果比色卡读取结果鸡蛋糕橙红-橙黄之间4～10mg/kg面包橙黄10mg/kg
[0056]
综上所述，本发明中溴酸钾在酸性条件下与甲酚红显色片发生氧化还原反应，检测限为4mg/kg，色阶梯度扩宽为0～30mg/kg；本发明操作简单，反应快速，场景适用性广阔；且以层析卡的形式制备试剂盒，增加过滤系统，用最低的成本减小实际样本测试中的杂质影响。
[0057]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，包括壳体和设置于所述壳体内部的层析卡，其特征在于，所述层析卡包括底板、样品垫和显色垫，所述显色垫上固定试剂为甲酚红试剂，所述甲酚红试剂用乙醇水溶液进行溶解，所述甲酚红试剂浓度为1
×
10-4
mol/l～5
×
10-4
mol/l。2.根据权利要求1所述的一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，其特征在于，所述甲酚红试剂浓度为2
×
10-4
mol/l。3.根据权利要求1所述的一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，其特征在于，所述底板为带粘性pvc材质；所述样品垫材质为玻璃纤维、聚酯纤维膜中的一种；所述显色垫材质为滤纸、层析纸、吸水纸中的一种。4.根据权利要求3所述的一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，其特征在于，所述显色垫的制备方法：将显色垫放入用乙醇水溶液溶解的甲酚红试剂中，浸泡2～3min后取出，沥干，放入烘箱干燥，干燥后备用。5.根据权利要求4所述的一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，其特征在于，所述样品垫和显色垫分别粘结在所述底板上，所述样品垫的右侧交叠在所述显色垫左侧上方。6.根据权利要求5所述的一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，其特征在于，所述底板卡接在所述壳体的底座内，所述壳体顶部的上壳卡接在所述底座上，且所述上壳上开设有加样孔和视窗，所述加样孔对准所述样品垫，所述视窗对准所述显色垫。7.权利要求1所述的溴酸钾快速检测试剂盒的使用方法，其特征在于，取1g面粉、面包粉碎样本，加入10ml前处理液，摇匀静置5min，用滴管向加样孔滴加3滴样液，2～3min与比色卡比色并读取结果。8.根据权利要求7所述的溴酸钾快速检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述前处理液为盐酸水溶液。9.根据权利要求8所述的溴酸钾快速检测试剂盒的使用方法，其特征在于，所述盐酸水溶液浓度为0.2～0.4mol/l。

技术总结
一种面粉、面包中溴酸钾快速检测试剂盒，涉及快速检测技术领域，所述层析卡包括底板、样品垫和显色垫，显色垫上固定试剂为甲酚红试剂，甲酚红试剂用乙醇水溶液进行溶解，甲酚红试剂浓度为1


技术研发人员：宋俊奇 樊乃迪 苗青 闫丹丹
受保护的技术使用者：郑州欧柯奇仪器制造有限公司
技术研发日：2023.03.17
技术公布日：2023/8/9