一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法与流程

1.本发明涉及的是一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，属于药物分析检测技术领域。


背景技术：

2.甲硝唑，主要用于治疗或预防厌氧菌引起的系统或局部感染，如腹腔、消化道、女性生殖系、下呼吸道、皮肤及软组织、骨和关节等部位的厌氧菌感染，对败血症、心内膜炎、脑膜感染以及使用抗生素引起的结肠炎也有效。治疗破伤风常与破伤风抗毒素(tat)联用。还可用于口腔厌氧菌感染。甲硝唑凝胶主要用于炎症性丘疹、脓疱疮、酒渣鼻红斑的局部治疗。
3.甲硝唑，英文名称为metronidazole；化学名称为2-(2-methyl-5-nitro-1h-imidazol-1-yl)ethanol；分子式为c6h9n3o3；cas号为443-48-1，化学结构式如下：
4.目前甲硝唑凝胶仅在国外上市，尚未进口到国内；甲硝唑凝胶被国内外药典收录，但没有羟乙基纤维素含量的检测方法。
5.设计一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，可实现对甲硝唑凝胶制剂进行逆向解析，研究其处方组成，且有助于控制甲硝唑凝胶产品的质量，判断羟乙基纤维素含量是否符合要求，提高甲硝唑凝胶的稳定性，更利于贮存。


技术实现要素：

6.本发明提出的是一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其目的旨在填补现有技术存在的上述空白，实现检测甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素的含量。
7.本发明的技术解决方案：一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，该检测方法采用液相色谱仪进行检测，且包括以下步骤：（1）溶液的配制：使用稀释剂稀释甲硝唑凝胶、异丙醇和环氧乙烷的混合物，制得供试品溶液；使用稀释剂稀释羟乙基纤维素、异丙醇和环氧乙烷的混合物供试品溶液，制得对照溶液；使用稀释剂稀释空白辅料，制得空白溶液；（2）量取稀释剂、空白溶液、供试品溶液、对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
8.优选的，所述的步骤（1）中的稀释剂为水。
9.优选的，所述的步骤（1）中供试品溶液的配制方法为：取甲硝唑凝胶2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。
10.优选的，所述的步骤（1）中对照品溶液的配制方法为：取羟乙基纤维素20mg置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀。
11.优选的，所述的步骤（1）中空白辅料溶液的配制方法为：量取空白辅料2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。
12.优选的，所述的采用液相色谱仪进行检测，具体是用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比93：7的水-甲醇为流动相进行洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；进样体积为50μl。
13.优选的，所述的十八烷基硅烷键合硅胶具体是diamonsil plus c18 4.6*250mm，5
µ
m。
14.本发明的优点：方法设计合理，可有效检测甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量，有助于研究甲硝唑凝胶处方组成，另一方面，判断甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量是否符合要求，助于控制甲硝唑凝胶产品的质量，提高甲硝唑凝胶的稳定性，利于甲硝唑凝胶的贮存。
附图说明
15.图1是本发明实施例1色谱图。
16.图2是本发明实施例2羟乙基纤维素线性试验图谱。
具体实施方式
17.下面结合实施例和具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。
实施例1
18.稀释剂：水。
19.供试品溶液：取本品（含浓度0.75%-1%甲硝唑的甲硝唑凝胶）2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。
20.对照品溶液：取羟乙基纤维素20mg置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀。
21.空白辅料溶液：精密量取空白辅料2.0g，按供试品溶液的制备方法同法制备。
22.色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（diamonsil plus c18 4.6*250mm，5
µ
m或效能相当的色谱柱），以体积比93：7的水-甲醇为流动相进行洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；进样体积为50μl。
23.测定法：精密量取稀释剂、供试品溶液、对照品溶液、空白辅料溶液，分别注入液相
色谱仪，记录色谱图，如图1所示。
实施例2
24.专属性试验（1）溶液配制稀释剂：水。
25.对照品溶液：取羟乙基纤维素20mg置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀。
26.供试品溶液：取本品2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使其熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。
27.空白辅料溶液：取空白辅料2.0g，精密称定，其余配制同供试品溶液。
28.（2）试验操作精密量取供试品溶液、对照品溶液各50
µ
l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
29.（3）试验结果表1专属性试验结果表
30.（4）试验结论稀释剂、空白辅料不干扰羟乙基纤维素检测，结果均符合要求，方法专属性较好。
实施例3
31.线性试验（1）溶液配制稀释剂：水。
32.线性贮备液：取羟乙基纤维素200mg置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀。
33.50%线性溶液：精密移取线性贮备液1.0ml，置10ml量瓶中，加入稀释剂稀释至刻度，摇匀。
34.80%线性溶液：精密移取线性贮备液1.6ml，置10ml量瓶中，加入稀释剂稀释至刻度，摇匀。
35.100%线性溶液：精密移取线性贮备液2.0ml，置10ml量瓶中，加入稀释剂稀释至刻度，摇匀。
36.150%线性溶液：精密移取线性贮备液3.0ml，置10ml量瓶中，加入稀释剂稀释至刻度，摇匀。
37.200%线性溶液：精密移取线性贮备液4.0ml，置10ml量瓶中，加入稀释剂稀释至刻度，摇匀。
38.（2）试验操作精密量取各线性溶液各50
µ
l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，如图2所示。
39.（3）试验结果表2线性试验结果表
40.（4）试验结论羟乙基纤维素在0.5013mg/ml~2.0051mg/ml的范围内，溶液浓度与其峰面积呈良好的线性关系，线性方程为y=395593x+2448.6，线性相关系数r为1.000，结果符合要求。
实施例4
41.准确度试验（1）溶液配制稀释剂：水。
42.回收率贮备液：取羟乙基纤维素1000mg置50ml量瓶中加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀。
43.50%供试品溶液：取空白辅料约2g，精密称定，置50ml量瓶中，精密加入回收率贮备液1.0ml，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，离心（12000rpm，10min），取上清液过滤，取续滤液。
44.100%供试品溶液：取空白辅料约2g，精密称定，置50ml量瓶中，精密加入回收率贮备液2.0ml，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，离心（12000rpm，10min），取上清液过滤，取续滤液。
45.150%供试品溶液：取空白辅料约2g，精密称定，置50ml量瓶中，精密加入回收率贮备液3.0ml，加稀释剂稀释至刻度，摇匀，离心（12000rpm，10min），取上清液过滤，取续滤液。
46.对照品溶液：100%供试品溶液。
47.（2）试验操作精密量取供试品溶液、对照品溶液各50
µ
l，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。
48.（3）试验结果表3准确度试验结果表
49.（4）试验结论由上述试验结果可知，平均回收率为99.6%，rsd值为1.7%，结果均符合要求。
实施例5
50.溶液稳定性试验（1）溶液配制稀释剂：水。
51.对照品溶液：取羟乙基纤维素20mg置50ml量瓶中加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀。
52.供试品溶液：取本品2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使其熔融，再加入
环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的水，振摇使其溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。
53.（2）试验操作精密量取供试品溶液、对照品溶液各50
µ
l，分别于注入液相色谱仪，记录色谱图。
54.（3）试验结果表4溶液稳定性试验结果表
55.（4）试验结论供试品溶液室温放置11h，含量rsd值为0.3%，结果符合要求，溶液稳定性良好。
56.以上所述的仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明创造构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，该检测方法采用液相色谱仪进行检测，且包括以下步骤：（1）溶液的配制：使用稀释剂稀释甲硝唑凝胶、异丙醇和环氧乙烷的混合物，制得供试品溶液；使用稀释剂稀释羟乙基纤维素、异丙醇和环氧乙烷的混合物供试品溶液，制得对照溶液；使用稀释剂稀释空白辅料，制得空白溶液；（2）量取稀释剂、空白溶液、供试品溶液、对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。2.如权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的步骤（1）中的稀释剂为水。3.如权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的步骤（1）中供试品溶液的配制方法为：取甲硝唑凝胶2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。4.如权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的步骤（1）中对照品溶液的配制方法为：取羟乙基纤维素20mg置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀。5.如权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的步骤（1）中空白辅料溶液的配制方法为：量取空白辅料2.0g，置50ml量瓶中，加入10ml异丙醇，加热使熔融，再加入环氧乙烷5ml，超声30min，加入适量的稀释剂，振摇使其溶解，并用稀释剂稀释至刻度，摇匀，静置30min，取上清液离心，弃去初滤液2ml，取续滤液。6.如权利要求1所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的采用液相色谱仪进行检测，具体是用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积比93：7的水-甲醇为流动相进行洗脱；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；进样体积为50μl。7.如权利要求6所述的一种甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，其特征在于，所述的十八烷基硅烷键合硅胶具体是diamonsil plus c18 4.6*250mm，5
µ
m。

技术总结
本发明是甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量的检测方法，采用液相色谱仪进行检测，包括以下步骤：（1）溶液的配制：使用稀释剂稀释甲硝唑凝胶、异丙醇和环氧乙烷的混合物，制得供试品溶液；使用稀释剂稀释羟乙基纤维素、异丙醇和环氧乙烷的混合物供试品溶液，制得对照溶液；使用稀释剂稀释空白辅料，制得空白溶液；（2）量取稀释剂、空白溶液、供试品溶液、对照溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。本发明的优点：方法设计合理，可有效检测甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量，有助于研究甲硝唑凝胶处方组成，另一方面，判断甲硝唑凝胶中羟乙基纤维素含量是否符合要求，助于控制甲硝唑凝胶产品的质量，提高甲硝唑凝胶的稳定性，利于甲硝唑凝胶的贮存。的贮存。的贮存。


技术研发人员：蔡蓓蕾 冯杰 陈玉兰
受保护的技术使用者：江苏知原药业股份有限公司
技术研发日：2023.05.25
技术公布日：2023/8/16