一种养肝护肝的药食同源代泡茶及其制备方法与流程

34.玫瑰：味甘、微苦，性温；归肝、脾经。功能主治：行气解郁，和血，止痛，用于肝胃气痛，食少呕恶，月经不调，跌扑伤痛。
35.《本草正义》：玫瑰花，香气最浓，清而不浊，和而不猛，柔肝醒胃，流气活血，宣通窒滞而绝无辛温刚燥之弊，断推气分药之中、最有捷效而最为驯良者，芳香诸品，殆无其匹。
36.栀子：味苦，性寒。归心、肺、三焦经。泻火除烦，清热利湿，凉血解毒；外用消肿止痛。用于热病心烦，湿热黄疸，淋证涩痛，血热吐衄，目赤肿痛，火毒疮疡，外治扭挫伤痛。
37.现代研究表明，栀子中含有十几种环烯萜甙类化合物，具有护肝、利胆、降压、镇静、止血、消肿等作用，在中医临床常用于治疗黄疸型肝炎、扭挫伤、高血压、糖尿病等疾病。
38.本发明的有益效果在于：
39.本发明采用天然的药食同源物质为原料并进行科学配比，通过co2超临界萃取、冷冻干燥、粉碎、煎制等现代科技方法，达到最大程度富集或保留有益元素的效果，制得的代泡茶幽香色纯，具有养阴柔肝，清肝护肝，调畅气机的效果，食用方便，安全无副作用，可长期泡水饮用。
附图说明
40.图1为本发明养肝护肝代泡茶制备方法流程图。
具体实施方式
41.以下结合实施例来进一步解释本发明，但实施例并不对本发明做任何形式的限定。
42.下述实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的试验材料，如无特殊说明，均为自常规商店购买得到的。
43.实施例1co2超临界萃取工艺的确定
44.本发明采用正交试验法对萃取条件进行筛选，选用综合评分为指标筛选最佳工艺，对其进行考察和研究。
45.本发明以压力、温度、萃取时间为因素进行正交试验，选用正交表l9(34)设计正交试验，对超临界萃取萃取菊花、玫瑰花组合物的工艺进行优化，以萃取物得率、β-香茅醇含量、桉叶素含量经权重分配后所得综合评分为评价指标，以得到最优的萃取条件。β-香茅醇和桉叶素分别为玫瑰花和菊花中经研究证实具有一定的保肝作用的成分，萃取物得率、β-香茅醇含量、桉叶素含量三个指标对于萃取条件的选择具有相同的重要程度，因此权重系数均定为1/3。按下式计算综合评分：综合评分＝萃取物得率
×
1/3+β-香茅醇含量
×
1/3+桉叶素含量
×
1/3。
46.表1co2超临界萃取因素水平表
47.48.表2co2超临界萃取l9(34)正交表
[0049][0050][0051]
试验表明，本发明菊花、玫瑰花组合物最佳组合的萃取条件为a2b2c2，即将菊花、玫瑰花萃取压力为30mpa，萃取温度40℃，萃取时间2h。
[0052]
实施例2萃取物包合工艺的确定
[0053]
本发明采用正交试验法对包合条件进行筛选，选用综合评分为指标筛选最佳工艺，对其进行考察和研究。
[0054]
本发明以β-环糊精：萃取物的重量比、研磨时间、加水倍量、乙醇用量为因素进行正交试验，选用正交表l9(34)设计正交试验，对萃取物包合工艺进行优化，以包合物得率(％)、油利用率(％)为评价指标，以得到最优的萃取条件。试验安排及结果见表3。
[0055]
表3萃取物包合因素水平表
[0056][0057]
表4萃取物包合l9(34)正交表
[0058]
[0059][0060]
试验表明，本发明的萃取物包合的最佳制备条件为：a3b2c2d1，萃取物与β-环糊精重量比为1：12，研磨时间为90min，加水量为β-环糊精重量的3倍，乙醇用量为萃取物的30wt％。
[0061]
实施例3冻干工艺的确认
[0062]
本发明采用正交试验法对冻干条件进行筛选，选用综合评分为指标筛选最佳工艺，对其进行考察和研究。
[0063]
本发明以真空度、预冻温度、预冻时间、升华温度、解析温度、干燥时间为因素进行正交试验，选用正交表l27(3^13)设计正交试验，对冷冻工艺进行优化，以浸出物(％)、枸杞多糖(％)(检测方法参见2020版中国药典)为评价指标，以得到最优的萃取条件。试验安排及结果见表5。
[0064]
表5冻干因素水平表
[0065][0066]
表6冻干l27(3^13)正交表
[0067]
[0068][0069]
试验表明，本发明的冻干的最佳制备条件为：a1b1c2d2e3f1，真空度10pa、预冻温度-30℃、预冻时间4h、升华温度-10℃、解析温度55℃、干燥时间12h。
[0070]
实施例4养肝护肝的药食同源代泡茶的制备
[0071]
本实施例提供一种养肝护肝的药食同源代泡茶，原料组分按重量份计，包括：佛手丝20份，桑葚15份，菊花10份，枸杞子15份，决明子8份，玫瑰10份，栀子15份。
[0072]
按上述的原料，采用本发明提供的制备方法，制备代泡茶：
[0073]
(一)预处理：按重量份数配比称取佛手丝、桑葚、菊花、枸杞子、决明子、玫瑰、栀子；所述栀子粉碎成60-80目颗粒，佛手切2-3mm的丝。
[0074]
(二)提取：
[0075]
乙醇提取：佛手丝、决明子、栀子置多功能提取罐中，加入药材总重量10倍量的75％乙醇，回流提取3次，每次2小时，合并，提取液，静置，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15g.cm-3
(60℃)的清膏i，备用；
[0076]
超临界萃取：菊花、玫瑰花混合，装入超临界萃取釜中，采用co2超临界萃取，萃取温度为40℃，萃取压力30mpa，萃取时间2h，萃取物备用；保留co2超临界萃取的药渣ⅰ备用；
[0077]
水提：取co2超临界萃取的药渣i置于多功能提取罐中，加入药渣总重量10倍量的水，煎煮2次，每次2小时，合并水提液，静置，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.15g.cm-3
(60℃)的清膏ii，备用；
[0078]
(三)浓缩：将清膏i、清膏ii合并，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30g.cm-3
的清膏iii，备用；
[0079]
(四)萃取物包合：按萃取物与β-环糊精重量比为1：12的比例，取步骤(二)得到的萃取物与β-环糊精；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的3倍；所述步骤(二)得到的萃取物用95％乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述乙醇用量为萃取物的30wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为90min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；
[0080]
(五)冷冻干燥：桑葚、枸杞子，均匀铺于物料盘中，冻干，经粉碎得冻干粉。冻干参数为：真空冷冻干燥的真空度为10pa，冷冻程序为：-30℃预冻4h，升华温度为-10℃，解析温度为55℃，干燥时间为12h。
[0081]
(六)混合、制粒、干燥：将清膏iii、萃取物包合物及冻干粉混合，制粒，55℃干燥，制成颗粒；
[0082]
(七)分装：将干燥的颗粒过10-24目，并进行分装。
[0083]
将本发明实施例4制备得到的代泡茶，通过药效试验来评价其效果。
[0084]
1、实验目的
[0085]
通过观察大鼠血清肝功能指标alt、ast、alp水平，肝组织氧化应激指标mda、sod、gsh-px水平，探讨养肝护肝代泡茶对如上因子的影响，得到养肝护肝代泡茶对ccl4诱导的急性肝损伤的治疗效果，并初步探究其作用机制，并与市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮(云南滇药医药健康产业有限公司)、菊花决明子枸杞茶(北京同仁堂诚安药材有限公司)进行对比研究。
[0086]
2、实验内容
[0087]
(1)实验用药
[0088]
ccl4(货号:48604)：购自sigma-aldrich公司；
[0089]
养肝护肝代泡茶：以实施例4方法制备；玫瑰桑椹甘麦大枣饮(云南滇药医药健康产业有限公司)、菊花决明子枸杞茶(北京同仁堂诚安药材有限公司)。
[0090]
大鼠谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)、碱性磷酸酶(alp)、丙二醛(mda)检测试剂盒购自南京建成生物工程研究所；
[0091]
超氧化物歧化酶(sod)检测试剂盒购自上海远慕生物科技有限公司；
[0092]
谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)检测试剂盒购自深圳子科生物科技有限公司。
[0093]
(2)实验动物
[0094]
健康sd大鼠：由扬州大学动物中心提供，合格证号：scxk(苏)201716661。
[0095]
(3)实验条件
[0096]
室温25
±
2℃，湿度50～60％，光照适度，通风良好。
[0097]
(4)药物配制
[0098]
养肝护肝代泡茶颗粒研磨成细粉后过筛，加1％吐温80研磨均匀，加蒸馏水溶解并稀释，配成质量浓度为0.1g/ml(按生药量计)，用前摇匀。
[0099]
将ccl4与花生油按1:1比例混匀，配制造模液。
[0100]
市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮、菊花决明子枸杞茶用100℃热水冲泡5min后，混匀4000r/min离心10min，上清液浓缩至质量浓度为0.1g/ml(按生药量计)，得到样品溶液，用前摇匀。
[0101]
(5)实验方法
[0102]
①
分组及给药40只大鼠适应性喂养1周后，随机分为正常对照组、模型组、实施例4组(1g/kg)、玫瑰桑椹甘麦大枣饮组(1g/kg)、菊花决明子枸杞茶组(1g/kg)，每组8只，正常对照组和模型组灌胃给予蒸馏水，其余各组大鼠灌胃给予相应药物，给药量均为1ml/100g，每天1次，持续8d。
[0103]
②
模型的建立末次灌胃给药1h后，正常对照组大鼠腹腔注射0.1ml/100g的花生油，模型组、给药组大鼠注射同样剂量的造模液，给药量均为0.1ml/100g。大鼠禁食不禁水24h后，水合氯醛麻醉，腹主动脉采血，处死后取肝脏组织，部分置于液氮中保存备用。
[0104]
③
生化指标检测按照试剂盒说明，将各组血液以3500r/min离心10min，取上清液，检测血清alt、ast、alp水平；取大鼠肝脏，制备肝组织匀浆，检测各组大鼠肝脏组织氧化应激指标mda、sod、gsh-px水平。
[0105]
3、实验结果
[0106]
(1)表7各组血清肝功能指标比较显示：与空白组比较，模型组血清alt、ast、alp水平显著增加(p＜0.01)；与模型组比较，实施例4组、玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组血清alt、ast、alp水平显著降低(p＜0.05)；与市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组相比，实施例4组降低血清alt、ast、alp水平的程度更为显著(p＜0.01)。
[0107]
(2)表8各组肝脏组织氧化应激指标水平比较显示：与空白组比较，模型组肝脏组织mda含量显著增加，sod、gsh-px活性显著降低(p＜0.01)；与模型组比较，实施例4组、玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组肝脏组织mda含量显著降低，sod、gsh-px活性显著增加(p＜0.01)；与市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组相比，实施例4组对氧化应激指标mda、sod、gsh-px水平的调节程度更为显著(p＜0.01)。
[0108]
表7各组血清肝功能指标比较(n＝8，x
±
s)
[0109][0110]
注：与空白组比较，
##
p＜0.01；与模型组比较，*p＜0.05；与模型组比较，
**
p＜0.01。
[0111]
表8各组肝脏组织氧化应激指标水平比较(n＝8，x
±
s)
[0112][0113][0114]
注：与空白组比较，
##
p＜0.01；与模型组比较，
**
p＜0.01。
[0115]
ccl4可诱导产生大量自由基，破坏肝细胞膜，导致膜通透性增强，最终引起血清alt、ast、alp水平升高，上述指标通常作为诊断肝损伤严重程度的指标。不仅与模型组相比，养肝护肝的药食同源代泡茶能使alt、ast、alp水平显著降低；而且与市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组相比，养肝护肝的药食同源代泡茶能使指标水平降低更为显著(p＜0.01)，表明其减轻肝脏损伤的效果优于市售产品。
[0116]
机体含有多种酶促(例如gsh-px、sod)和非酶促(例如抗坏血酸)的抗氧化剂，以维持内源性氧化还原平衡。ccl4可通过诱导自由基的产生，使得平衡被打破，造成肝脏发生脂质过氧化反应，导致细胞、线粒体等生物膜的流动性降低，通透性增高，组织内抗氧化酶活性降低，肝脏抵御氧化损伤能力下降，进而引起肝脏损伤。mda是自由基攻击生物膜多不饱和脂肪酸最终产物，通常用于监测脂质过氧化反应程度。与模型组相比，养肝护肝的药食同源代泡茶能显著增加血清抗氧化酶gsh-px、sod活性，降低mda含量；且与市售玫瑰桑椹甘麦大枣饮组和菊花决明子枸杞茶组相比，养肝护肝的药食同源代泡茶调节指标水平的幅度更为显著(p＜0.05)，表明其提高机体抗氧化能力，保护机体细胞免受氧化应激损伤的效果优于市售产品。
[0117]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种养肝护肝的药食同源代泡茶，其特征在于，所述养肝护肝的药食同源代泡茶由以下重量的原料组成：佛手丝10-25份，桑葚5-15份，菊花5-15份，枸杞子10-15份，决明子5-10份，玫瑰10-15份，栀子15-20份。2.权利要求1所述养肝护肝的药食同源代泡茶的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(一)预处理：按重量份数配比称取佛手丝、桑葚、菊花、枸杞子、决明子、玫瑰、栀子；(二)提取：乙醇提取：取佛手丝、决明子、栀子，加75-95％乙醇，回流提取，提取液静置，滤过，减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10～1.15g.cm-3
(60℃)的清膏i，备用；超临界萃取：菊花、玫瑰花混合，装入超临界萃取釜中，采用co2超临界萃取，萃取温度为30～50℃，萃取压力20～40mpa，萃取时间1～3h，萃取物备用；保留co2超临界萃取的药渣ⅰ备用；水提：取co2超临界萃取的药渣i，加水，煎煮，水提液静置，滤过，减压浓缩至相对密度为1.10～1.15g.cm-3
(60℃)的清膏ii，备用；(三)浓缩：将清膏i、清膏ii合并，减压浓缩至相对密度为1.25～1.30g.cm-3
的清膏iii，备用；(四)萃取物包合：取步骤(二)得到的超临界萃取萃取物与β-环糊精，萃取物与β-环糊精重量比为1：8～12；所述β-环糊精中加水研匀，制成β-环糊精水溶液倒入胶体磨中，所述加水量为β-环糊精重量的2～4倍；所述步骤(二)得到的萃取物用乙醇溶解，制成萃取物乙醇溶液，缓慢连续滴加至胶体磨中，所述乙醇用量为萃取物的10～30wt％；采用研磨法进行包合，包合时间为60～120min，倾出，冷藏静置24小时，滤过，于40℃真空干燥，即得萃取物包合物；(五)冷冻干燥：桑葚、枸杞子，均匀铺于物料盘中，冻干，经粉碎得冻干粉；冻干参数为：真空冷冻干燥的真空度为≤30pa，冷冻程序为：-30～-50℃预冻3～5h，升华温度为-30℃～10℃，解析温度为45-55℃，干燥时间为12～24h。(六)混合、制粒、干燥：将清膏iii、萃取物包合物及冻干粉混合，制粒，干燥，制成颗粒；(七)分装：将干燥的颗粒过10-24目，并进行分装。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(一)预处理中所述栀子粉碎成粗颗粒，佛手切2-3mm的丝。4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(二)乙醇提取中75-95％乙醇的用量为药材总重量8-10倍量；所述回流提取次数为2-3次，每次1-2小时，合并提取液。5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(二)所述超临界萃取的萃取温度为40℃，萃取压力30mpa，萃取时间2h。6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(二)水提中水的用量为药渣总重量8-10倍量；所述水提次数为2-3次，每次1-2小时，合并水提液。7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(四)中所述萃取物与β-环糊精重量比为1：12，加水量为β-环糊精重量的3倍，乙醇用量为萃取物的30wt％，所述乙醇为95％乙醇，包合时间为90min。8.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(五)中所述冻干参数为：真空冷
冻干燥的真空度为10pa，冷冻程序为：-30℃预冻4h，升华温度为-10℃，解析温度为55℃，干燥时间为12h。9.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(六)中所述干燥温度≤60℃。10.权利要求1所述的养肝护肝的药食同源代泡茶在制备具有对化学性肝损伤有辅助保护功能的药品或保健品或保健食品中的应用。

技术总结
本发明涉及一种养肝护肝的药食同源代泡茶及其制备方法，由以下重量的原料组成：佛手丝10-25份，桑葚5-15份，菊花5-15份，枸杞子10-15份，决明子5-10份，玫瑰10-15份，栀子15-20份。本发明采用天然的药食同源物质为原料并进行科学配比，通过CO2超临界萃取、冷冻干燥、粉碎、煎制等现代科技方法，达到最大程度富集或保留有益元素的效果，制得的代泡茶幽香色纯，具有养阴柔肝，清肝护肝，调畅气机的效果，食用方便，安全无副作用，可长期泡水饮用。可长期泡水饮用。可长期泡水饮用。


技术研发人员：王海丽 殷英 陈逸清 赵开军 刘路路
受保护的技术使用者：南京小蚁健康科学研究院有限公司
技术研发日：2023.05.29
技术公布日：2023/8/23