一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法与流程

1.本发明涉及中药制剂的质量控制技术领域，具体涉及一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法。


背景技术：

2.熟地黄被称为“至阴之药”，是玄参科植物地黄rehmanniaglutinosa块根的加工炮制品，是中药“滋阴”作用最具代表的药味之一，配伍后相关方剂可应用于肝肾阴虚导致的多种临床疾病：如2型糖尿病、糖尿病肾病和胰岛素抵抗等糖尿病相关疾病，阿尔茨海默病、帕金森和血管性痴呆等神经系统疾病，类风湿等骨关节炎相关疾病以及妇科绝经后骨质疏松、肾阴虚型月经过少、卵巢早衰继发性闭经、围绝经期综合征、更年期综合征等等。
3.化学成分研究表明，熟地黄中主要含有益母草苷、桃叶珊瑚苷、梓醇、京尼平苷、地黄苷a、地黄苷b、地黄苷c、地黄苷d、地黄素a、地黄素c、地黄素d、密力特苷等环烯醚萜类；地黄紫罗兰苷a、地黄紫罗兰苷b、野菰酸、地黄苦苷等紫罗兰酮类；以及松果菊苷、毛蕊花糖苷、焦地黄苯乙醇苷a1、异毛蕊花糖苷、地黄苷、洋地黄叶苷c、对羟基苯乙醇等苯乙醇类化合物；此外还包括糖类、核苷类、生物碱类、酚酸类、异黄酮苷类以及其他类化合物。我们曾以梓醇、地黄苷a、地黄苷d、益母草苷和毛蕊花糖苷5种地黄成分灌胃阴虚模型大鼠，发现能够显著降低血清中t3、t4及血浆中camp含量及camp/cgmp比值，结果提示以上成分可能是熟地黄滋阴清热作用的主要药效物质基础。
4.遵循安全有效、技术先进和经济合理的原则，熟地黄药材药典标准的建立也是一个动态、逐步完善的过程：2010年版一部相比2005年版删除了以5-羟甲基糠醛指标成分为对照的薄层【鉴别】项，新增了毛蕊花糖苷(c
29h36o15
)成分的薄层【鉴别】和【含量测定】项；而2020年药典又删除了毛蕊花糖苷的含量要求，新增地黄苷d(c
27h42o20
)含量不得少于0.050％的规定，为我国药品研制、生产、经营、使用和监督管理均应遵循的标准提供了法定依据，提高了药材饮片质量控制水平。
5.地黄丸类方是以熟地黄为主药，以滋补肾精、调补肾中阴阳为基本功效的一组方药。其中滋补肾阴的代表方六味地黄丸出自北宋太医钱乙《小儿药证直诀》，由《金匮》肾气丸去附子、桂枝，易干地黄为熟地黄而成，清《医宗金鉴》将六味地黄丸增加知母、黄柏而成知柏地黄丸主治肾阴不足所致阴虚火旺诸症，而后世的杞菊地黄丸兼能养肝明目、归芍地黄丸偏于养血调经、麦味地黄丸润肺益气
…
以上地黄丸类方制剂均为历代药典收载品种，其处方共性是在六味地黄丸基础上加味而成，制法、规格和用量类似，形成了中成药市场上一个大的品类。
6.2020年版《中国药典》一部成方制剂收载了六味地黄大蜜丸、水蜜丸、浓缩丸、胶囊和软胶囊等制剂标准，测定莫诺苷、马钱苷、丹皮酚3个指标对处方药味山茱萸和牡丹皮进行质量控制。近年来有关于六味地黄膏中毛蕊花糖苷的hplc含量测定，以及杞菊地黄丸中毛蕊花糖苷及另外10个成分同时测定的hplc-ms/m联用方法，但毛蕊花糖苷成分已经不是现行药典熟地黄法定含量指标，而三重四级杆串联质谱检测器的配置过高不利于技术的普
及和推广，对整个地黄丸类方制剂的适用性也未见提及。麦味地黄丸近年来的质量研究文献主要是对其制剂中五味子醇甲的含量控制。归芍地黄丸未检索到相关报道，药典标准是以芍药苷(c
23h28o11
)计其蜜丸制剂中所含白芍、牡丹皮，以莫诺苷(c
17h26o11
)和马钱苷(c
17h26o10
)的总量计山茱萸，以丹皮酚(c9h
10
o3)计牡丹皮。知柏地黄丸现行药典标准的鉴别项除了对相关药味的粉末显微鉴别外，以丹皮酚、盐酸小檗碱对照品和黄柏对照药材鉴别了制剂中牡丹皮和黄柏药味，规定了马钱苷(c
17h26o10
)、丹皮酚(c9h
10
o3)的含量标准，而制剂中菝葜皂苷元、毛蕊花糖苷的含量测定近年来也有文献报道。现行标准和文献未见桂附地黄丸熟地黄定性定量方法。
7.综上所述，熟地黄作为地黄丸类方制剂的君药或者重用药味，虽然处方药量占比超过1/4甚至1/3之多，但是由于复方中药成分的复杂性，目前针对“地黄”控制的药典收载标准和文献研究较少，尤其是与熟地黄饮片法定标准相对应的毛蕊花糖苷定性鉴别和地黄苷d定量测定方法，缺少对多种地黄丸制剂普遍适用的快速检测技术。


技术实现要素：

8.为解决方中君药熟地黄的量化控制不足的技术问题，本发明提供了一种含熟地黄的产品中熟地黄质量控制的方法。
9.一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，包括以下步骤：
10.(1)样品预处理：对待测地黄丸类方制剂进行预处理一得到待测样品溶液一，对待测地黄丸类方制剂进行预处理二得到待测样品溶液二；
11.所述预处理一为：依次使用甲醇、水饱和正丁醇进行提取，提取后通过含sp700型大孔吸附树脂的混合柱，依次使用水、甲醇洗脱，残渣加水溶解后通过固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣用甲醇溶解；
12.所述预处理二为：使用甲醇进行提取，冷却后用50％甲醇补足减失的重量，再通过含sp700型大孔吸附树脂的混合柱，依次使用水、甲醇洗脱，浓缩，残渣用甲醇溶解；
13.(2)用毛蕊花糖苷对照品、熟地黄对照药材、待测样品溶液一以薄层色谱法对毛蕊花糖苷成分定性鉴别；
14.(3)采用高效液相色谱法对待测溶液二中地黄苷d成分定量测定。
15.优选的，步骤(1)中，所述预处理一的方法为取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入60～100％甲醇，密塞，溶散，提取0.5～1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取2～4次，合并得到正丁醇液，将正丁醇液蒸干，残渣加水使溶解，通过混合柱，用水洗脱，再用30％甲醇洗脱，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，减压回收溶剂，残渣加水溶解后通过固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，得到待测样品溶液一。
16.优选的，取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入60～100％甲醇50～100ml，密塞，振荡涡旋使溶散，超声提取0.5～1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过sp700型大孔吸附树脂柱，用水80ml洗脱，弃去，再用30％甲醇50～100ml洗脱，弃去，续用甲醇100～200ml洗脱，收集甲醇洗脱液，减压回收溶剂，残渣加10ml水溶解后通过c18固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，得到待测样品溶
液一。
17.优选的，步骤(1)中，所述预处理二的方法为取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入50％甲醇，密塞，称定重量，提取0.5～1小时，冷却后再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，减压回收溶剂近干，残渣用水溶解，定量转移通过混合柱，用水洗脱，弃去水液，再用30％甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，残渣用30～70％甲醇溶解滤过，得到待测样品溶液二。
18.优选的，取折合熟地黄生药量0.5g～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入50％甲醇100ml，密塞，称定重量，振荡涡旋使溶散，超声提取0.5～1小时，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液50ml，减压回收溶剂，残渣用水10ml分次溶解，定量转移通过sp700型大孔吸附树脂柱，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇50～150ml洗脱，收集洗脱液，浓缩，残渣用50％甲醇溶解并定容至2ml量瓶，摇匀，滤过，得到待测样品溶液二。
19.优选的，所述混合柱的柱内径为0.8～1.2cm，柱高为10～25cm，柱内混合填料体积比或质量比为硅藻土：d101型大孔吸附树脂：sp700型大孔吸附树脂＝0～2：0～3：2～7份。
20.优选的，步骤(2)中将待测样品溶液一、毛蕊花糖苷对照品和熟地黄对照药材溶液分别点于同一聚酰胺薄膜板上，以甲醇-冰乙酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下，在365nm波长下检视待测样品色谱中在与对照品、对照药材色谱相应位置上是否具有相同颜色的荧光斑点；
21.展开剂中甲醇：冰乙酸：水的体积比为3：1：7。
22.优选的，步骤(3)中色谱条件为：色谱柱为agilent zorbax sb-c18，流动相a为乙腈或者甲醇，流动相b为0.1％磷酸水溶液或者0.1％甲酸水溶液，a：b＝1～10％，体积流量为1ml
·
min-1
，检测波长为203nm，理论板数按地黄苷d峰计算应不低于5000。
23.优选的，所述六味地黄丸类方制剂为六味地黄丸、麦味地黄丸、桂附地黄丸、知柏地黄丸、杞菊地黄丸、归芍地黄丸。
24.优选的，所述六味地黄丸类方制剂剂型为大蜜丸、小蜜丸、水丸、水蜜丸、浓缩丸、口服液、散剂、颗粒剂、胶囊剂和软胶囊剂。
25.与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
26.1、六味地黄丸系列制剂是现阶段我国临床常用中成药中一个很大的品类，但限于方中君药熟地黄的量化控制不足，本发明创建熟地黄制剂标准应用技术平台，采用薄层色谱法对毛蕊花糖苷成分进行定性鉴别，对地黄苷d的含量进行定量测定，开发其产品线通用、快速、简易检测方法，是对已有质量控制研究体系的进一步完善。
27.2、本发明能够同时开展多种地黄丸类方制剂中熟地黄定性定量，大大降低了药品检测时间成本；同时不同厂家、品种、批次样品溶液的平行制备和结果呈现，适合生产企业品控的快速在线检测和药检部门对地黄丸系列产品的优质性评价，对品质提升和工艺改进具有积极意义。
附图说明
28.图1为本发明地黄丸类方制剂中熟地黄tlc定性鉴别和方法专属性图谱；
29.附图中标记分述如下：a为第1-13个样品的图谱，1-13代表地黄丸类方样品zj-1～
zj-13，b为第14-28个样品的谱图，14～28代表地黄丸类方样品zj-14～zj-28，r1为毛蕊花糖苷，r2为熟地黄对照药材，nc1～nc6为六味、麦味、归芍、知柏、杞菊、桂附6种地黄丸的缺地黄阴性制剂；
30.图2为本发明系统适用性研究地黄苷d对照品光谱指数图谱；
31.附图中标记分述如下：a为对照品色谱峰光谱指数图，b为对照品hplc色谱；
32.图3为本发明系统适用性研究熟地黄对照药材光谱指数图谱；
33.附图中标记分述如下：a为对照药材地黄苷d色谱峰光谱指数图，b为对照药材hplc色谱图；
34.图4为本发明系统适用性研究六味地黄大蜜丸样品光谱指数图谱；
35.附图中标记分述如下：a为样品地黄苷d色谱峰光谱指数图，b为样品hplc色谱图；
36.图5为本发明系统适用性研究六味地黄丸缺地黄阴性对照光谱指数图谱；
37.附图中标记分述如下：a为阴性对照地黄苷d色谱峰光谱指数图，b为阴性对照hplc色谱图；
38.图6为本发明系统适用性研究六味地黄大蜜丸样品理论板数图谱；
39.附图中标记分述如下：a为样品hplc色谱图，b为样品地黄苷d绘出峰理论塔板数、拖尾因子图组；
40.图7为本发明系统适用性研究地黄苷d对照品溶液6次响应值的重复性能图谱；
41.图8为本发明7种不同浓度地黄苷d含量测定hplc图谱；
42.图9为本发明地黄苷d含量测定线性关系拟合图谱；
43.图10为本发明六味地黄丸类方制剂中熟地黄hplc含量测定和专属性图谱；
44.附图中标记分述如下：s为地黄苷d色谱峰，r1为地黄苷d对照品，r2为熟地黄对照药材，nc1～nc6为六味、麦味、归芍、知柏、杞菊、桂附6种地黄丸的缺地黄阴性制剂；
45.图11为本发明六味地黄丸类方制剂产品中熟地黄hplc定量测定结果图；其中2-28代表地黄丸类方样品zj-2～zj-28。
具体实施方式
46.下面对本发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。
47.薄层色谱成像及文件系统(camag tlc visualizer，瑞士)，高效液相色谱仪(waters 2695，usa，waters 2996pda检测器)，优普系列超纯水器(ulup-iv-10t，四川优普超纯科技有限公司)，万分之一分析天平(libror-160dpt型，日本岛津公司)，十万分之一分析天平(ae240型，瑞士mettler公司)，高速粉碎机(fw-100型，北京科伟永兴仪器有限公司)，恒温水浴锅(hh-zk6型，郑州凯鹏实验仪器有限公司)，超声波清洗机(sb-5200dt型，宁波新芝生物科技股份有限公司)；具储液球层析柱(12*300mm*100ml*24口*聚四氟阀门，郑州兴华玻璃仪器厂)；玻璃仪器气流烘干器(220v/50hz，800w，郑州凯鹏实验仪器有限公司)，烘箱(xmtd-8222型，上海精宏实验设备有限公司)，薄层定量毛细管1μl、2μl(camag，瑞士)，可调式混匀仪(型号mx-s，大龙兴创实验仪器股份公司)，p-1型薄层色谱展开缸(200
×
100mm，上海信谊仪器厂有限公司)。
48.分析级甲醇、乙醇、冰乙酸、硅藻土等(天津市永大化学试剂有限公司)，液相用水为新鲜优普超纯水，色谱级甲醇(美国fisher公司)，磷酸(天津市科密欧化学试剂有限公司)；聚酰胺薄膜(规格20cm
×
10cm)购自浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂；大孔吸附树脂(d101型，macklin)购自上海麦克林生化科技股份有限公司；大孔吸附树脂(型号sp700，日本三菱)购自北京绿百草科技发展有限公司；熟地黄对照药材(批号121196-202007，规格1g/支)、毛蕊花糖苷(批号111530-201310，规格20mg/支)、地黄苷d(批号112063-202102，规格20mg/支)均购自中国食品药品检定研究院。
49.所购六味地黄丸类方饮片经河南省中医药研究院李更生研究员鉴定，均为中国药典收载品种，饮片和成方制剂样品信息见表1。
50.表1六味地黄丸类方饮片和制剂样品信息
51.[0052][0053]
实施例1
[0054]
六味地黄丸中熟地黄的检测方法
[0055]
1、六味地黄丸信息
[0056]
【处方】熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0057]
【制法】以上六味，粉碎成细粉，过筛，混匀。用乙醇泛丸，干燥，制成水丸；或每100g粉末加炼蜜35～50g与适量的水，制丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸。或将以上六味，牡丹皮用水蒸气蒸馏法提取挥发性成分；药渣与酒萸肉20g、熟地黄、茯苓、泽泻加水煎煮二次，每次2小时，煎液滤过，滤液合并，浓缩成稠膏；山药与剩余酒萸肉粉碎成细粉，过筛，混匀，与上述稠膏和牡丹皮挥发性成分混匀，制丸，干燥，打光，即得六味地黄浓缩丸。
[0058]
【性状】本品为棕黑色的水丸、水蜜丸、棕褐色至黑褐色的小蜜丸或大蜜丸、棕褐色或亮黑色的浓缩丸；味甜而酸。
[0059]
2、六味地黄丸中熟地黄的检测
[0060]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴别：可以取本品水丸2.5g或水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.2g，研细，在本实施例中，取本品大蜜丸5g，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇60ml超声处理(功率240w，频率40khz)30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过sp700型大孔树脂柱(柱内径为1.2cm，柱高为20cm)，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇80ml洗脱，弃去30％甲醇液，继用甲醇150ml洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，残渣加水10ml使溶解，通过以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的固相萃取小柱(1g/6ml，用甲醇5ml活化后再用水25ml平衡)，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，得到供试品溶液。
[0061]
(2)地黄苷d含量测定
[0062]
样品供试溶液的制备：可以取本品水丸2.5g或水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.25g，研细。在本实施例中，取本品大蜜丸5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇50ml，密塞，振荡涡旋使溶散，超声提取1小时，放冷，滤过，减压回收溶剂近干，残渣用水10ml分次溶解，定量转移通过sp700型大孔树脂柱(柱内径为1.2cm，柱高为20cm)，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至近干，残渣用50％甲醇溶解并定容至2ml量瓶，摇匀，滤过，取续滤液作为样品供试溶液。
[0063]
实施例2
[0064]
麦味地黄丸中熟地黄的检测方法
[0065]
1、麦味地黄丸的信息
[0066]
【处方】麦冬60g、五味子40g、熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0067]
【制法】以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸。
[0068]
【性状】本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味微甜而酸。
[0069]
2、麦味地黄丸中熟地黄的检测
[0070]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴定：可以取本品水蜜丸4g，研细，或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，置具塞锥形瓶中，其余步骤与实施例1均相同，制备得到供试品溶液。
[0071]
(2)地黄苷d含量的测定
[0072]
样品供试溶液的制备：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，与实施1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，精密称定，其他步骤均与实施例1相同，制备得到样品供试溶液。
[0073]
实施例3
[0074]
归芍地黄丸中熟地黄的检测方法
[0075]
1、归芍地黄丸信息
[0076]
【处方】当归40g、酒白芍40g、熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0077]
【制法】以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸。
[0078]
【性状】本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味微甜而酸。
[0079]
2、归芍地黄丸中熟地黄的检测
[0080]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴定：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，置具塞锥形瓶中，其余步骤与实施例1均相同，制备得到供试品溶液。
[0081]
(2)地黄苷d含量测定
[0082]
样品供试溶液的制备：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细精密称定，其余步骤与实施例1均相同，制备得到样品供试溶液。
[0083]
实施例4
[0084]
知柏地黄丸中熟地黄的检测方法
[0085]
1、知柏地黄丸信息
[0086]
【处方】知母40g、黄柏40g、熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0087]
【制法】以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸；或将以上八味，取山药、牡丹皮13g、山茱萸21g粉碎成细粉，备用；泽泻、茯苓、知母、黄柏粉碎成粗粉，加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.35～1.40(20℃)
的清膏；取熟地黄加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩成相对密度为1.35～1.40(20℃)的清膏；取剩余的牡丹皮、山茱萸(制)，以70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后，进行渗漉，收集渗漉液，回收乙醇，浓缩成相对密度为1.35～1.40(20℃)的清膏；将上述各清膏、药粉及适量淀粉混匀，制成1000丸，干燥，打光，即得知柏地黄浓缩丸。
[0088]
【性状】本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸、黑棕色的浓缩丸；味甜而带酸苦。
[0089]
2、知柏地黄丸中熟地黄的检测
[0090]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴定：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.2g，研细，与实施例1的不同之处在于，取本品水蜜丸4g，研细，置具塞锥形瓶中，其余步骤均与实施例1相同，制备得到供试品溶液。
[0091]
(2)地黄苷d含量测定
[0092]
样品供试溶液的制备：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.25g，研细，与实施例1的不同之处在于，本实施例中取本品水蜜丸4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，其余步骤均与实施例1相同，制备得到样品供试溶液。
[0093]
实施例5
[0094]
杞菊地黄丸中熟地黄的检测方法
[0095]
1、杞菊地黄丸信息
[0096]
【处方】枸杞子40g、菊花40g熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0097]
【制法】以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸；或将以上八味，取酒萸肉26.7g、牡丹皮26.5g、山药粉碎成细粉；泽泻、茯苓加水煎煮二次，第一次3小时，第二次2小时，滤过，滤液合并并浓缩成相对密度为1.30～1.35(60～80℃)的稠膏；熟地黄切片，加水煎煮三次，第一次3小时，第二次2小时，第三次1小时，滤过，滤液合并并浓缩成相对密度为1.30～1.35(60～80℃)的稠膏；枸杞子以45％乙醇作溶剂，剩余的酒萸肉与牡丹皮及菊花以70％乙醇作溶剂，浸渍24小时后，分别进行渗漉，收集漉液，合并上述漉液，回收乙醇浓缩成相对密度为1.30～1.35(60～80℃)的稠膏，与上述细粉与稠膏混匀，制成浓缩丸，干燥，打光，即得杞菊地黄丸浓缩丸。
[0098]
【性状】本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸、棕色至棕黑色的浓缩丸；味甜而酸。
[0099]
2、杞菊地黄丸中熟地黄的检测
[0100]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴定：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.2g，研细，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，置具塞锥形瓶中，其余步骤均与实施例1相同，制备得到供试品溶液。
[0101]
(2)地黄苷d含量测定
[0102]
样品供试溶液的制备：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.25g，研细。与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，精密称定，其余步骤均与实施例1相同，制备得到样品供试溶液。
[0103]
实施例6
[0104]
桂附地黄丸中熟地黄的检测方法
[0105]
1、桂附地黄丸信息
[0106]
【处方】肉桂20g、附子(制)20g、熟地黄160g、酒萸肉80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g
[0107]
【制法】以上八味，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末用炼蜜35～50g加适量的水泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸。
[0108]
【性状】本品为黑棕色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味甜而带酸、辛。
[0109]
2、桂附地黄丸中熟地黄的检测
[0110]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴定：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，置具塞锥形瓶中，其余步骤均与实施例1相同，制备得到供试品溶液。
[0111]
(2)地黄苷d含量测定
[0112]
样品供试溶液的制备：可以取本品水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎，精密称定，与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，取本品水蜜丸4g，研细，置具塞锥形瓶中，其余步骤均与实施例1相同，制备得到样品供试溶液。
[0113]
实施例7
[0114]
六味地黄丸中熟地黄的检测方法
[0115]
1、六味地黄丸信息
[0116]
同实施例1。
[0117]
2、六味地黄丸中熟地黄的检测
[0118]
(1)毛蕊花糖苷薄层鉴别：与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，样品经80％甲醇超声和水饱和正丁醇振摇提取，加水10ml溶解后，通过混合柱(柱内径1.0cm，柱高14cm，填料体积比硅藻土：d101型大孔吸附树脂：sp700型大孔吸附树脂＝1：1：5)，其余步骤均与实施例1相同，制备得到供试品溶液。
[0119]
(2)地黄苷d含量测定
[0120]
样品供试溶液的制备：与实施例1的不同之处在于，在本实施例中，样品经50％甲醇超声提取，加水10ml溶解后，定量转移通过混合柱(柱内径1.0cm，柱高14cm，填料体积比硅藻土：d101型大孔吸附树脂：sp700型大孔吸附树脂＝1：1：5)，其余步骤均与实施例1相同，制备得到供试品溶液。
[0121]
实施例1-7中进行供试品中毛蕊花糖苷薄层鉴别时，取熟地黄对照药材1g，加80％甲醇60ml，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。取毛蕊花糖苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，作为对照品溶液。
[0122]
照2020版《中国药典》(四部)通则“0502薄层色谱法”试验，吸取上述溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇-冰乙酸-水(3:1:7)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。
[0123]
结果如图1所示：六味地黄丸供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0124]
麦味地黄丸供试品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色
的荧光斑点。
[0125]
归芍地黄丸样品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0126]
知柏地黄丸样品色谱中在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0127]
杞菊地黄丸样品色谱在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0128]
桂附地黄丸样品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
[0129]
实施例1-7中进行供试品中地黄苷d含量测定时照2020版《中国药典》(四部)通则“0512高效液相色谱法”试验。
[0130]
色谱条件：以agilent zorbax sb-c18为色谱柱；以甲醇-0.1％甲酸溶液(5：95)为流动相，体积流量为1ml
·
min-1
，检测波长为203nm，理论板数按地黄苷d峰计算应不低于5000。
[0131]
地黄苷d标准溶液的制备：取地黄苷d对照品适量，精密称定，加25％甲醇溶解并稀释成浓度分别为0.043、0.086、0.129、0.172、0.215、0.258和0.301mg/ml的标准溶液。
[0132]
地黄苷d含量的测定结果见表6。
[0133]
为了进一步验证本发明的有效性，进行了如下验证试验：
[0134]
(1)地黄丸类方制剂毛蕊花糖苷薄层鉴别和方法专属性
[0135]
缺熟地黄阴性制剂的制备：取六味地黄丸、麦味地黄丸、知柏地黄丸、归芍地黄丸、杞菊地黄丸以及桂附地黄丸缺地黄处方，按中国药典成方制剂制法项下收载方法，将饮片粉碎成细粉，过筛，混匀。另取蜂蜜于100℃加热炼制10min，放凉，每100g粉末加炼蜜100g制成大蜜丸，得地黄丸类方阴性制剂。
[0136]
样品、熟地黄对照药材溶液的制备：将表1中的样品和熟地黄均按以下方法处理：取地黄丸类方大蜜丸，剪碎，取约5g；水蜜丸或浓缩丸研细，取约4g和1.25g；熟地黄对照药材粉末约1g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇50ml，密塞，称定重量，振荡涡旋使溶散，超声处理(功率240w，频率40khz)30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过sp700型大孔树脂柱(柱内径为1.2cm，柱高为20cm)，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇80ml洗脱，弃去30％甲醇液，继用甲醇150ml洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，残渣加水10ml使溶解，通过以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的固相萃取小柱(1g/6ml，用甲醇5ml活化后再用水25ml平衡)，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为薄层鉴别用待测样品溶液和熟地黄对照药材溶液。
[0137]
缺地黄阴性对照溶液的制备：取地黄丸类方阴性制剂5g，按照大蜜丸样品溶液的制备方法，制得缺地黄阴性对照溶液。
[0138]
对照品溶液的制备：取毛蕊花糖苷对照品约0.5mg于10ml容量瓶中，加甲醇溶解定容至刻度线，混匀，即得对照品溶液。
[0139]
薄层色谱条件：吸取上述鉴别用各样品溶液、对照品溶液、熟地黄对照药材和阴性对照溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以甲醇-冰乙酸-水(3:1:7)为展开剂，展开，
取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。
[0140]
结果：六味地黄丸类方制剂中熟地黄tlc如图1所示，结果表明各样品色谱中，在与对照品、对照药材色谱相应的位置上，均显相同颜色的荧光斑点，缺熟地黄阴性对照无干扰。
[0141]
(2)地黄丸类方制剂地黄苷d含量测定系统适用性试验
[0142]
色谱条件：agilent zorbax sb-c18色谱柱，30℃柱温，流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液(5：95)，体积流量为1ml
·
min-1
，进样量10μl。
[0143]
对照品储备溶液的制备：取地黄苷d对照品10.75mg于25ml容量瓶中，加25％甲醇溶解定容至刻度线，混匀，即得。
[0144]
系统适用性试验：吸取地黄苷d对照品溶液和实施例1制备的地黄丸类方制剂zj-2样品溶液、熟地黄对照药材溶液和缺地黄类方阴性对照液各10μl，按以上色谱条件进样，记录色谱图，对地黄苷d色谱峰进行200nm～400nm范围的光谱扫描，计算理论板数、拖尾因子并进行重复性试验。
[0145]
结果：如图2～7所示，地黄丸样品、熟地黄对照药材和对照品色谱中地黄苷d吸收峰具有相似的光谱指数，在吸收曲线的最短波长处有一相当强度的吸收但未形成峰的末端，地黄苷d峰理论板数为7751(usp)，6次响应值的重复性能rsd值为1.4％。参考现行版中国药典熟地黄药材含量测定项下方法，检测波长选定为203nm，地黄苷d峰理论板数应不低于5000，对照品溶液6次连续进样其峰面积测量值相对标准偏差应不大于2.0％，图7中，6次进样结果中地黄苷d的保留时间为35.2min左右，为了使每个峰更清楚地展示出来，作图时将5次的谱图进行移动，具体为色谱图属性参数中设定z轴的角度为15，间距为5而实现。
[0146]
(3)六味地黄丸类方制剂地黄苷d含量测定线性关系的考察
[0147]
分别精密吸取(2)中制得的地黄苷d对照品储备溶液1、2、3、4、5、6、7ml置于10ml容量瓶中，加25％甲醇溶液稀释至刻度线，混匀，依次将7种不同浓度的对照品溶液进样2次，每次10μl。
[0148]
结果：地黄苷d含量测定线性关系的考察结果如图8～9所示，图8中，14次进样结果中地黄苷d的保留时间均为36.7min左右，为了使每个峰更清楚地展示出来，作图时将13次的谱图进行移动，具体为色谱图属性参数中设定z轴的角度为15，间距为5而实现，结果表明地黄苷d在0.043mg
·
ml-1
～0.301mg
·
ml-1
检测范围内质量浓度与峰面积积分值呈良好的线性关系，回归方程为y＝6.82
×
106x+4.51
×
103(r＝0.999432)。
[0149]
(4)地黄丸类方制剂熟地黄hplc含量测定方法专属性
[0150]
样品供试溶液的制备：取地黄丸类方制剂水丸2.5g或水蜜丸4g，研细；或取小蜜丸或大蜜丸5g，剪碎；或取浓缩丸1.25g，研细。精密称定，置具塞锥形瓶中，加入50％甲醇50ml，密塞，振荡涡旋使溶散，超声提取1小时，放冷，滤过，减压回收溶剂近干，残渣用水10ml分次溶解，定量转移通过sp700型大孔树脂柱(柱内径为1.2cm，柱高为20cm)，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇80ml洗脱，收集洗脱液，浓缩至近干，残渣用50％甲醇溶解并定容至2ml量瓶，摇匀，滤过，取续滤液作为样品供试溶液。
[0151]
分别吸取地黄丸类方制剂样品溶液、地黄苷d对照品溶液、熟地黄对照药材溶液和缺地黄类方阴性对照溶液各10μl，按(2)项下色谱条件进样，记录色谱图。
[0152]
结果：各地黄丸类方样品和熟地黄对照药材色谱中，在与地黄苷d对照品色谱相同
保留时间处均检出相应色谱峰，阴性对照均无干扰，见图10。
[0153]
(5)六味地黄丸类方制剂熟地黄hplc含量测定方法精密度试验
[0154]
分别吸取地黄苷d对照品溶液连续进样6次，每次10μl，按(2)项下色谱条件记录色谱图。
[0155]
结果：对色谱图中地黄苷d色谱峰响应面积积分，rsd值为1.4％。根据分析方法验证指导原则，本样品基质复杂、组分含量低于0.01％，精密度rsd可接受范围为《6％且可适当放宽，故符合要求，见表2。
[0156]
表2精密度试验结果(n＝6)
[0157][0158][0159]
(6)六味地黄丸类方制剂熟地黄hplc含量测定方法稳定性试验
[0160]
取地黄丸类方制剂zj-2样品约10g，按(1)中待测样品溶液的制备方法制备待测样品溶液，置于25℃高效液相色谱仪自动进样器中，于0、2、4、6、8、10、12、24h分别进样10μl，记录峰面积。
[0161]
结果地黄苷d峰面积的rsd为1.9％，表明供试品溶液室温下放置24h稳定性良好。见表3。
[0162]
表3稳定性试验结果(n＝8)
[0163][0164]
(7)六味地黄丸类方制剂熟地黄hplc含量测定方法加样回收率试验
[0165]
取已知含量的地黄丸类方制剂zj-2样品约5g，精密称定，共6份，分别置于100ml具
塞锥形瓶中，精密加入质量浓度为0.43mg
·
ml-1
的地黄苷d对照品溶液1ml，按(4)中样品溶液制备方法制成供试品溶液，按(2)项中色谱条件进样测定，记录峰面积并计算加样回收率。
[0166]
结果：地黄苷d平均加样回收率为97.8％，rsd为2.9％，表明方法回收率良好。见表5。
[0167]
表5地黄苷d加样回收率(n＝6)
[0168][0169][0170]
(8)六味地黄丸类方制剂熟地黄hplc含量测定
[0171]
取28批次地黄丸类方制剂样品适量，精密称定，分别按(4)样品溶液制备方法制成供试品溶液，再按(2)色谱条件进样测定，计算各成分的含量，重复测定2次，计算平均值，结果见表6，图11。
[0172]
表6地黄丸类方制剂中地黄苷d的含量(n＝2)
[0173][0174]
地黄丸及其类方药味组成复杂，化学成分众多，熟地黄药材的药典检测方法并不适用于其复方制剂。现有技术中丸类方制剂供试溶液的制备方法通常用沸水热提后用乙酸乙酯振摇，保留极性偏小的有机溶剂相成分，或采用一定浓度的甲醇溶液超声或加热回流的方法进行样品提取，单纯的用苯乙烯型极性共聚体如da-201型、非极性大孔树脂如hp20、hp21、sp700、sp825l等大孔吸附树脂除杂，而本发明的方法锁定毛蕊花糖苷活性成分，作为苯乙醇苷类成分在地黄制剂中与与糖、糖醇、环烯醚酷苷和木脂素苷等共存，极性大，不溶于极性较小的有机溶剂，故本发明是将样品提取后采用正丁醇和水萃取技术保留极性偏大成分，通过混合柱或大孔树脂柱联合固相萃取技术，有效的解决了分析过程中供试液多成分夹杂干扰问题。
[0175]
熟地黄及相关制剂毛蕊花糖苷成分薄层鉴别显色的通常方法是采用0.1％的2,2-二苯基-1-苦肼基无水乙醇溶液浸渍，而本发明的技术方案是直接采用荧光观察法，毛蕊花
糖苷成分化学结构酚羟基多、共扼体系长，试验中发现它的薄层斑点具有比显色更为灵敏的紫外吸收特性，并且在365nm荧光灯下相比254nm呈现为更强烈的荧光斑点，该方法有效解决了原有显色技术专属性不强导致的背景掩盖问题。
[0176]
熟地黄及相关制剂毛蕊花糖苷成分薄层鉴别所用薄层层析板通常采用硅胶g或硅胶h涂布的玻璃板，而本发明的方法将固定相硅胶板换成聚酰胺薄膜，在于该涂层具有较好的亲水和亲酯性双重性能，当样品混合物随着展开剂展开，由于聚酰胺与各极性分子产生氢键吸附能力的强弱不同，而将混合物分离开，该技术提高了薄层分离效果，而各类方缺地黄阴性制剂无干扰，具有良好的方法专属性。而以地黄苷d成分计地黄丸类方制剂中地黄含量时，为适应样品成分复杂性，本发明采用混合柱前处理新技术，组合优选的液相色谱条件目标化合物同样得到很好的富集和分离。
[0177]
本发明六味地黄丸类方制剂包括六味地黄丸、麦味地黄丸、桂附地黄丸、知柏地黄丸、杞菊地黄丸、归芍地黄丸而不仅限于以上6种制剂组方，还包括以六味地黄丸基本母方加减的其他地黄组方制剂；六味地黄丸类方制剂剂型包括大蜜丸、小蜜丸、水丸、水蜜丸、浓缩丸、口服液、散剂、颗粒剂、胶囊剂和软胶囊剂而不仅限于以上常见剂型，还包括2020年版《中国药典》四部“0100制剂通则”分类的其他剂型和亚剂型。
[0178]
需要说明的是，本发明权利要求书中涉及数值范围时，应理解为每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用，为了防止赘述，本发明描述了优选的实施例。
[0179]
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
[0180]
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

技术特征：
1.一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品预处理：对待测地黄丸类方制剂进行预处理一得到待测样品溶液一，对待测地黄丸类方制剂进行预处理二得到待测样品溶液二；所述预处理一为：依次使用甲醇、水饱和正丁醇进行提取，提取后通过含sp700型大孔吸附树脂的混合柱，依次使用水、甲醇洗脱，残渣加水溶解后通过固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣用甲醇溶解；所述预处理二为：使用甲醇进行提取，冷却后用50％甲醇补足减失的重量，再通过含sp700型大孔吸附树脂的混合柱，依次使用水、甲醇洗脱，浓缩，残渣用甲醇溶解；(2)用毛蕊花糖苷对照品、熟地黄对照药材、待测样品溶液一以薄层色谱法对毛蕊花糖苷成分定性鉴别；(3)采用高效液相色谱法对待测溶液二中地黄苷d成分定量测定。2.根据权利要求1所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预处理一的方法为取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入60～100％甲醇，密塞，溶散，提取0.5～1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取2～4次，合并得到正丁醇液，将正丁醇液蒸干，残渣加水使溶解，通过混合柱，用水洗脱，再用30％甲醇洗脱，再用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，减压回收溶剂，残渣加水溶解后通过固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，得到待测样品溶液一。3.根据权利要求2所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入60～100％甲醇50～100ml，密塞，振荡涡旋使溶散，超声提取0.5～1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用水饱和正丁醇振摇提取2～4次，每次10ml，合并正丁醇液，蒸干，残渣加水10ml使溶解，通过sp700型大孔吸附树脂柱，用水80ml洗脱，弃去，再用30％甲醇50～100ml洗脱，弃去，续用甲醇100～200ml洗脱，收集甲醇洗脱液，减压回收溶剂，残渣加10ml水溶解后通过c18固相萃取柱，收集流出液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，得到待测样品溶液一。4.根据权利要求2所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述预处理二的方法为取折合熟地黄生药量0.5～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入50％甲醇，密塞，称定重量，提取0.5～1小时，冷却后再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，减压回收溶剂近干，残渣用水溶解，定量转移通过混合柱，用水洗脱，弃去水液，再用30％甲醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，残渣用30～70％甲醇溶解，滤过，得到待测样品溶液二。5.根据权利要求4所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，取折合熟地黄生药量0.5g～1.0g的待测地黄丸类方制剂样品，加入50％甲醇100ml，密塞，称定重量，振荡涡旋使溶散，超声提取0.5～1小时，放冷，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液50ml，减压回收溶剂，残渣用水10ml分次溶解，定量转移通过sp700型大孔吸附树脂柱，用水80ml洗脱，弃去水液，再用30％甲醇50～150ml洗脱，收集洗脱液，浓缩，残渣用50％甲醇溶解并定容至2ml量瓶，摇匀，滤过，得到待测样品溶液二。6.根据权利要求2或4任一项所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，所述混合柱的柱内径为0.8～1.2cm，柱高为10～25cm，柱内混合填料体积比或质
量比为硅藻土：d101型大孔吸附树脂：sp700型大孔吸附树脂＝0～2：0～3：2～7份。7.根据权利要求1所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，步骤(2)中将待测样品溶液一、毛蕊花糖苷对照品和熟地黄对照药材溶液分别点于同一聚酰胺薄膜板上，以甲醇-冰乙酸-水为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯下，在365nm波长下检视待测样品色谱中在与对照品、对照药材色谱相应位置上是否具有相同颜色的荧光斑点；展开剂中甲醇：冰乙酸：水的体积比为3：1：7。8.根据权利要求1所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，步骤(3)中色谱条件是：色谱柱为agilentzorbaxsb-c18，流动相a为乙腈或者甲醇，流动相b为0.1％磷酸水溶液或者0.1％甲酸水溶液，a：b＝1～10％，体积流量为1ml
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，检测波长为203nm，理论板数按地黄苷d峰计算应不低于5000。9.根据权利要求1所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，所述六味地黄丸类方制剂为六味地黄丸、麦味地黄丸、桂附地黄丸、知柏地黄丸、杞菊地黄丸、归芍地黄丸。10.根据权利要求1所述的一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，其特征在于，所述六味地黄丸类方制剂剂型为蜜丸、水丸、水蜜丸、浓缩丸、口服液、散剂、颗粒剂、胶囊剂和软胶囊剂。

技术总结
本发明属于中药制剂的质量控制技术领域，具体为一种地黄丸类方制剂中熟地黄质量控制的方法，包括以下步骤：对待测地黄丸类方制剂进行预处理一得到待测样品溶液一用于毛蕊花糖苷成分定性鉴别，对待测地黄丸类方制剂进行预处理二得到待测样品溶液二用于地黄苷D成分定量测定。本发明能够同时制备多种地黄丸类方制剂样品溶液，采用统一的定性定量方法实现快速检测。速检测。速检测。


技术研发人员：刘明 王慧森 梁瑞峰 李更生 葛文静 孙为 唐素勤
受保护的技术使用者：河南省中医药研究院
技术研发日：2023.07.06
技术公布日：2023/8/24