一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法

1.本发明涉及分析检测技术领域，具体地，涉及一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法。


背景技术：

2.全氟和多氟化合物(pfas)是一种人造化学品，由于其防水防油等特性，自1940年以来被应用于工业和消费品中，在不粘涂层、表面活性剂、食品包装材料、灭火泡沫等方面都具有广泛应用，因此人体难以避免地暴露于pfas污染中。与pfas加工制造应用相关的职业、被pfas污染的饮用水、含有pfas的食物、受pfas污染的土壤或灰尘、含有pfas的空气、由pfas制成或使用含有pfa s的材料包装的产品等等都可能是pfas污染来源。pfas化合物具有持久性，导致其在环境中广泛存在。其还具有生物累积性，对生物能带来多种不利的持续的影响，除了能对肝脏造成损伤外，对免疫系统和内分泌及生殖及系统也能带来显著的不良影响。近日，有关部门印发了《重点管控新污染物清单(2023年版)》，全氟辛基磺酸及其盐类和全氟辛基磺酰氟，全氟辛酸及其盐类和相关化合物被列入了重点管控新污染物清单。
3.脑脊液靠近人体大脑，脑脊液的污染物暴露对人体的健康影响重大，但目前缺乏检测脑脊液中的全氟化合物的方法。脑脊液是存在于脑室及蛛网膜下腔的一种无色透明的液体，纯净度较高，蛋白脂质等含量较少，是一种特殊体液，目前专门针对脑脊液中化合物的液相检测方法较少，且都需要对脑脊液进行复杂的前处理后上机检测，影响了回收率和准确性，步骤复杂。为进一步探究人体暴露pfas对脑脊液的影响，需一种简便、快速、准确地在脑脊液特殊基质中检测多种pfas的方法。


技术实现要素：

4.本发明的目的是克服现有技术的上述不足，提供一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法。
5.为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：
6.一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法，其特征在于，用液相色谱串联质谱进行检测，流动相a为甲醇，流动相b为乙酸铵水溶液，梯度洗脱，
7.0～1min，流动相a与流动相b的体积比为20：80；
8.1～4min，流动相a与流动相b的体积比由20：80变化为95：5；
9.4～6.5min，流动相a与流动相b的体积比为95：5；
10.6.5～6.6min，流动相a与流动相b的体积比由95：5变化为20：80；
11.6.6～8min，流动相a与流动相b的体积比为20：80。
12.优选地，在待测脑脊液样品中加入全氟及多氟化合物对应的同位素标记的内标物后，直接用所述的检测方法检测。
13.优选地，所述全氟及多氟化合物为全氟丁酸、全氟戊酸、全氟己酸、全氟庚酸、全氟辛酸、全氟壬酸、全氟癸酸、全氟十一酸、全氟十二酸、全氟十三酸、全氟十四酸、全氟丁基磺
酰胺、全氟己基磺酰胺、全氟辛基磺酰胺、全氟2-甲基-3-氧杂己酸、n-甲基全氟辛烷氨基乙酸、n-乙基全氟辛烷氨基乙酸、全氟丁基磺酸、全氟戊基磺酸、全氟己基磺酸、全氟庚基磺酸、全氟辛基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟己基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟辛基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟癸基磺酸、4,8-二噁-3h全氟壬酸乙酯和2-[(6-氯-1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十二氟己基)氧基]-1,1,2,2-四氟乙烷磺酸中的一种或几种。
[0014]
更优选地，所述同位素标记的内标物为
13c4-pfba、
13c5-pfpea、
13c5-pfhxa、
13c4-pfhpa、
13c8-pfoa、
13c9-pfna、
13c6-pfda、
13c7-pfuda、
13c2-pfdoa、
13c2-pfteda、
13c3-pfbs、
13c3-pfhxs、
13c8-pfos、d
3-n-mefosaa、d
5-n-etfosaa、
13c2-4:2fts、
13c2-6:2fts和
13c2-8:2fts中的一种或几种。
[0015]
优选地，乙酸铵的浓度为1.9～2.1mm。
[0016]
更优选地，乙酸铵的浓度为2mm。
[0017]
优选地，梯度洗脱的流速为0.29～0.31ml/min。
[0018]
更优选地，梯度洗脱的流速为0.3ml/min。
[0019]
优选地，检测柱温为39～41℃。
[0020]
更优选地，检测柱温为40℃。
[0021]
优选地，色谱柱为waters beh c18高效液相色谱柱，色谱柱长度为100mm，内径为2.1mm，填料颗粒直径为1.7μm。
[0022]
优选地，质谱条件为：气帘气40psi，离子化电压-4500v，温度500℃，喷雾气50psi，辅助加热气50psi，碰撞气中等。
[0023]
优选地，所用液相色谱仪为岛津20ad高效液相色谱系统，质谱仪为ab sciex公司qtrap 5500型号的电喷雾三重四极杆质谱仪。
[0024]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0025]
本发明结合脑脊液的性质，开发了一种快速高效、成本低廉的直接进样法用以检测脑脊液中的27种全氟化合物。本发明将脑脊液直接上机检测，不需要复杂的前处理过程，还能使所测的27种全氟及多氟化合物，回收率高，加标回收率在77.9％～101.3％之间，相对偏差小于20％，覆盖范围广，包含全氟基磺酸类、全氟辛酸类及其他全氟类等共27种；灵敏度高，27种全氟化合物均可达到pg级检测需求；效率高、重复性好，回收率高，同时测定27种全氟化合物只需要8min。
附图说明
[0026]
图1为全氟丁酸(perfluoro-n-butanoic acid,pfba)的色谱图。
[0027]
图2为全氟戊酸(perfluoro-n-pentanoic acid,pfpea)的色谱图。
[0028]
图3为全氟己酸(perfluoro-n-hexanoic acid,pfhxa)的色谱图。
[0029]
图4为全氟庚酸(perfluoro-n-heptanoic acid,pfhpa)的色谱图。
[0030]
图5为全氟辛酸(perfluoro-n-octanoic acid,pfoa)的色谱图。
[0031]
图6为全氟壬酸(perfluoro-n-nonanoic acid,pfna)的色谱图。
[0032]
图7为全氟癸酸(perfluoro-n-decanoic acid,pfda)的色谱图。
[0033]
图8为全氟十一酸(perfluoro-n-undecanoic acid,pfuda)的色谱图。
[0034]
图9为全氟十二酸(perfluoro-n-dodecanoic acid,pfdoa)的色谱图。
[0035]
图10为全氟十三酸(perfluoro-n-tridecanoic acid,pftrda)的色谱图。
[0036]
图11为全氟十四酸(perfluoro-n-tetradecanoic acid,pfteda)的色谱图。
[0037]
图12为全氟丁基磺酰胺(perfluoro-1-butanesulfonamide,fbsa)的色谱图。
[0038]
图13为全氟己基磺酰胺(perfluoro-1-hexanesulfonamide,fhxsa)的色谱图。
[0039]
图14为全氟辛基磺酰胺(perfluoro-1-octanesulfonamide,fosa)的色谱图。
[0040]
图15为全氟2-甲基-3-氧杂己酸(2,3,3,3-tetrafluoro-2-(1,1,2,2,3,3,3-heptafluoropropoxy)-propanoic acid,hfpo-da)的色谱图。
[0041]
图16为n-甲基全氟辛烷氨基乙酸(n-methylperfluoro-1-octanesulfonamidoacetic,n-mefosaa)的色谱图。
[0042]
图17为n-乙基全氟辛烷氨基乙酸(n-ethylperfluoro-1-octanesulfonamidoacetic,n-etfosaa)的色谱图。
[0043]
图18为全氟丁基磺酸(perfluoro-1-butanesulfonate,pfbs)的色谱图。
[0044]
图19为全氟戊基磺酸(perfluoro-1-pentanesulfonate,pfpes)的色谱图。
[0045]
图20为全氟己基磺酸(perfluoro-1-hexanesulfonate,pfhxs)的色谱图。
[0046]
图21为全氟庚基磺酸(perfluoro-1-heptanesulfonate,pfhps)的色谱图。
[0047]
图22为全氟辛基磺酸(perfluoro-1-octanesulfonate,pfos)的色谱图。
[0048]
图23为1h,1h,2h,2h-全氟己基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-hexanesulfonate,4:2fts)的色谱图。
[0049]
图24为1h,1h,2h,2h-全氟辛基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-octanesulfonate,6:2fts)的色谱图。
[0050]
图25为1h,1h,2h,2h-全氟癸基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-decanesulfonate,8:2fts)的色谱图。
[0051]
图26为4,8-二噁-3h全氟壬酸乙酯(dodecafluoro-3h-4,8-dioxanonanoate,nadona)的色谱图。
[0052]
图27为2-[(6-氯-1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十二氟己基)氧基]-1,1,2,2-四氟乙烷磺酸(9-chlorohexadecafluoro-3-oxanonane-1-sulfonate,9cl-pf3ons)的色谱图。
具体实施方式
[0053]
下面结合说明书附图及具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
[0054]
实施例1检测脑脊液中27种全氟化合物的方法
[0055]
1、27种全氟化合物的具体化学成分：
[0056]
全氟丁酸(perfluoro-n-butanoic acid,pfba)
[0057]
全氟戊酸(perfluoro-n-pentanoic acid,pfpea)
[0058]
全氟己酸(perfluoro-n-hexanoic acid,pfhxa)
[0059]
全氟庚酸(perfluoro-n-heptanoic acid,pfhpa)
[0060]
全氟辛酸(perfluoro-n-octanoic acid,pfoa)
[0061]
全氟壬酸(perfluoro-n-nonanoicacid,pfna)
[0062]
全氟癸酸(perfluoro-n-decanoicacid,pfda)
[0063]
全氟十一酸(perfluoro-n-undecanoicacid,pfuda)
[0064]
全氟十二酸(perfluoro-n-dodecanoicacid,pfdoa)
[0065]
全氟十三酸(perfluoro-n-tridecanoicacid,pftrda)
[0066]
全氟十四酸(perfluoro-n-tetradecanoicacid,pfteda)
[0067]
全氟丁基磺酰胺(perfluoro-1-butanesulfonamide,fbsa)
[0068]
全氟己基磺酰胺(perfluoro-1-hexanesulfonamide,fhxsa)
[0069]
全氟辛基磺酰胺(perfluoro-1-octanesulfonamide,fosa)
[0070]
全氟2-甲基-3-氧杂己酸(2,3,3,3-tetrafluoro-2-(1,1,2,2,3,3,3-heptafluoropropoxy)-propanoicacid,hfpo-da)
[0071]
n-甲基全氟辛烷氨基乙酸(n-methylperfluoro-1-octanesulfonamidoacetic,n-mefosaa)
[0072]
n-乙基全氟辛烷氨基乙酸(n-ethylperfluoro-1-octanesulfonamidoacetic,n-etfosaa)
[0073]
全氟丁基磺酸(perfluoro-1-butanesulfonate,pfbs)
[0074]
全氟戊基磺酸(perfluoro-1-pentanesulfonate,pfpes)
[0075]
全氟己基磺酸(perfluoro-1-hexanesulfonate,pfhxs)
[0076]
全氟庚基磺酸(perfluoro-1-heptanesulfonate,pfhps)
[0077]
全氟辛基磺酸(perfluoro-1-octanesulfonate,pfos)
[0078]
1h,1h,2h,2h-全氟己基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-hexanesulfonate,4:2fts)
[0079]
1h,1h,2h,2h-全氟辛基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-octanesulfonate,6:2fts)
[0080]
1h,1h,2h,2h-全氟癸基磺酸(1h,1h,2h,2h-perfluoro-1-decanesulfonate,8:2fts)
[0081]
4,8-二噁-3h全氟壬酸乙酯(dodecafluoro-3h-4,8-dioxanonanoate,nadona)
[0082]
2-[(6-氯-1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十二氟己基)氧基]-1,1,2,2-四氟乙烷磺酸(9-chlorohexadecafluoro-3-oxanonane-1-sulfonate,9cl-pf3ons)
[0083]
2、对应的27种同位素标记的内标物
[0084]
13c4-pfba、
13c5-pfpea、
13c5-pfhxa、
13c4-pfhpa、
13c8-pfoa、
13c9-pfna、
13c6-pfda、
13c7-pfuda、
13c2-pfdoa、
13c2-pfteda、
13c3-pfbs、
13c3-pfhxs、
13c8-pfos、d
3-n-mefosaa、d
5-n-etfosaa、
13c2-4:2fts、
13c2-6:2fts和
13c2-8:2fts。
[0085]
3、样品前处理
[0086]
取250μl脑脊液样品，加入同位素标记的内标物，每种1.5ng，得含内标物的脑脊液样品，然后直接上机测定。
[0087]
4、配置标准溶液
[0088]
用甲醇配置浓度为1μg/ml的含有所述27种全氟化合物的混合标准母液，所述27全氟化合物的浓度相同，都为1μg/ml。用甲醇将混合标准母液梯度稀释为0.01、0.02、0.05、
0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20和50ng/ml。
[0089]
5、检测
[0090]
高效液相色谱三重四级杆串联质谱法检测条件为：
[0091]
液相仪器为岛津20ad高效液相色谱系统，质谱仪为ab sciex公司qtrap 5500型号的电喷雾三重四极杆质谱仪，色谱柱选用waters beh c18高效液相色谱柱，其长度为100mm，内径为2.1mm，填料颗粒直径为1.7μm。
[0092]
用正负离子模式收集数据，串联质谱条件采用电喷雾电离，离子源参数为：气帘气40psi，离子化电压-4500v，温度500℃，喷雾气50psi，辅助加热气50psi，碰撞气中等。
[0093]
以2mm乙酸铵水溶液和甲醇的混合溶液作为流动相进行梯度洗脱，柱温40℃，进样量3μl，梯度洗脱程序如表1所示：
[0094]
表1
[0095]
时刻甲醇与水体积比流速(ml/min)0～1min20：800.31～4min由20：80变化为95：50.34～6.5min95：50.36.5～6.6min由95：5变化为20：800.36.6～8min20：800.3
[0096]
具体的多重反应质谱参数如表2所示：
[0097]
表2
[0098][0099]
6、结果分析
[0100]
根据27种全氟化合物标准溶液的峰面积和浓度作标准曲线，根据待测脑脊液样品的峰面积和标准曲线，计算出待测脑脊液样品所含27种全氟化合物的含量。
[0101]
实施例2加标回收
[0102]
一、实验方法
[0103]
1、在脑脊液中按照实施例1的方法，加入所述内标物和27种全氟化合物，验证回收率。250μl脑脊液中，27种全氟化合物加标量设置为1ng/ml、10ng/ml和20ng/ml3个梯度浓度，每个梯度浓度做17个平行实验。每个梯度浓度中各全氟化合物加标量相同，上述3个加标量为每种全氟化合物的加标量。
[0104]
以无实施例1所述的27种全氟化合物的脑脊液作为空白样品。
[0105]
2、标准溶液的配置和检测方法与实施例1相同。
[0106]
3、(1)设置实施例1中流动相流速为0.29ml/min，其他参数不变，进行加标回收；
[0107]
(2)设置实施例1中流动相流速为0.31ml/min，其他参数不变，进行加标回收；
[0108]
(3)设置实施例1中乙酸铵水溶液中乙酸铵的浓度为1.9mm，其他参数不变，进行加标回收；
[0109]
(4)设置实施例1中乙酸铵水溶液中乙酸铵的浓度为2.1mm，其他参数不变，进行加标回收；
[0110]
(5)设置实施例1中柱温为39℃，其他参数不变，进行加标回收；
[0111]
(6)设置实施例1中柱温为41℃，其他参数不变，进行加标回收。
[0112]
二、实验结果
[0113]
按照实施例1的方法，根据27种全氟化合物标准溶液的峰面积和浓度作标准曲线，根据待测脑脊液样品的峰面积和标准曲线，计算出待测脑脊液样品所含27种全氟化合物的含量。27种全氟化合物的检出限及加标回收结果如表3所示。27种全氟化合物的液相色谱图如图1～27所示。标准曲线回归方程如下：
[0114]
pfba：y＝0.00058x2+0.22x+0.0967(r＝1.0000)
[0115]
pfpea：y＝0.000663x2+0.234x+0.0111(r＝0.9992)
[0116]
pfhxa：y＝-1.4e-006x2+0.201x-0.000961(r＝0.9987)
[0117]
pfhpa：y＝-0.000118x2+0.212x-0.00609(r＝0.9985)
[0118]
pfoa：y＝-0.000206x2+0.18x+0.00322(r＝0.9998)
[0119]
pfna：y＝-7.23e-005x2+0.182x-0.000133(r＝0.9982)
[0120]
pfda：y＝6.46e-0.005x2+0.182x-0.0015(r＝0.9991)
[0121]
pfuda：y＝-1.83e-006x2+0.168x+0.000406(r＝0.9990)
[0122]
pfdoa：y＝-6.38e-005x2+0.145x+0.000904(r＝0.9980)
[0123]
pftrda：y＝-0.000382x2+0.177x-0.00162(r＝0.9981)
[0124]
pfteda：y＝-0.000144x2+0.151x-0.00164(r＝0.9978)
[0125]
fbsa：y＝-0.00128x2+0.432x-0.0117(r＝0.9954)
[0126]
fhxsa：y＝-0.00186x2+0.437x-0.0048(r＝0.9978)
[0127]
fosa：y＝-0.00104x2+0.406x-0.00301(r＝0.9990)
[0128]
hfpo-da：y＝-1.65x2+5.17e+003x+407(r＝0.9982)
[0129]
n-mefosaa：y＝0.000162x2+0.185x-0.00079(r＝0.9990)
[0130]
n-etfosaa：y＝0.000876x2+0.189x-0.00231(r＝0.9997)
[0131]
pfbs：y＝-8.8e-005x2+0.219x-0.000304(r＝0.9964)
[0132]
pfpes：y＝-0.00205x2+0.423x-0.00261(r＝0.9992)
[0133]
pfhxs：y＝-0.000348x2+0.228x-0.001(r＝0.9983)
[0134]
pfhps：y＝-0.00017x2+0.129x-0.000571(r＝0.9975)
[0135]
pfos：y＝-0.000272x2+0.175x-0.00308(r＝0.9989)
[0136]
4:2fts：y＝-0.000951x2+0.134x-0.000206(r＝0.9986)
[0137]
6:2fts：y＝-0.000706x2+0.129x-9.49e-005(r＝0.9986)
[0138]
8:2fts：y＝-0.000946x2+0.165x-0.00236(r＝0.9990)
[0139]
nadona：y＝-980x2+2.51e+005x+602(r＝0.9989)
[0140]
9cl-pf3ons：y＝-1.66e+003x2+3.38e+005x-888(r＝0.9997)表3
[0141]
[0142][0143]
按照实施例1的方法，三个加标浓度下的加标回收率在77.9％～101.3％之间，相对偏差小于20％，回收率在75％～120％之间，达到国际公认的许可标准，可以实现27种全氟化合物同步测定，操作简单，成本低廉。
[0144]
流速为0.29～0.31ml/min，乙酸铵水溶液中乙酸铵的浓度为1.9～2.1mm，柱温为39～40℃，峰形依然较佳，相对偏差小于20％，回收率在75％～120％之间，达到国际公认的
许可标准。
[0145]
实施例3检测实际脑脊液样品中的27种全氟化合物
[0146]
一、实验方法
[0147]
收集了418份来自不同捐献者的脑脊液样品，用实施例1的方法检测脑脊液样品中27种全氟化合物的含量。
[0148]
二、实验结果
[0149]
如表4所示，有4种全氟化合物的检出率大于50％，这表明全氟化合物在脑脊液中高频出现，表明本发明实施例1的方法精确度高、稳定性好、检出率低，适用于脑脊液中多种全氟化合物的检测。
[0150]
表4
[0151]
[0152][0153]
对比例1检测卵泡液样品中的27种全氟化合物
[0154]
一、实验方法
[0155]
1、在卵泡液中按照实施例1的方法，加入同位素内标物和27种全氟化合物，直接上机检测，验证回收率。250μl卵泡液中，27种全氟化合物加标量设置为0.25ng(1ng/ml)、和2.5ng(10ng/ml)2个梯度浓度，每个梯度浓度做3个平行实验。每个梯度浓度中各全氟化合物加标量相同，上述2个加标量为每种全氟化合物的加标量。
[0156]
以无实施例1所述的27种全氟化合物的卵泡液作为空白样品。
[0157]
2、标准溶液的配置和检测方法与实施例1相同。
[0158]
二、实验结果
[0159]
根据27种全氟化合物标准溶液的峰面积和浓度作标准曲线，根据待测卵泡液样品的峰面积和标准曲线，计算出待测卵泡液样品所含27种全氟化合物的含量。27种全氟化合物的检出限及加标回收结果如表5所示。
[0160]
相比脑脊液，卵泡液的基质较为复杂，基质抑制较强，部分化合物回收率仅达30％，未达到许可标准。实施例1的方法不能实现卵泡液中部分全氟化合物的测定。
[0161]
表5
[0162]
[0163][0164]
对比例2检测脑脊液样品中的其他全氟化合物
[0165]
一、实验方法
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用实施例1的方法检测脑脊液中的全氟壬基磺酸(perfluoro-1-nonanesulfonate，l-pfna，pfns)、全氟癸基磺酸(perfluoro-1-decanesulfonate，l-pfda，pfds)和2-[(8-氯-1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6,7,7,8,8-十六氟辛基)氧基]-1,1,2,2-四氟乙烷磺酸(11-chloroeicosafluoro-3-oxaundecane-1-sulfonate，11cl-pf3ouds)的含量，不添加内标物，并用实施例2的方法计算其10ng/ml加标浓度的加标回收率。
[0167]
二、实验结果
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实验发现，在加标样品中l-pfna,l-pfda和11cl-pf3ouds的回收率低，分别为45.1％、43.5％、39.7％。本发明实施例1的检测方法不适用于检测脑脊液中的l-pfna、l-pfda和11cl-pf3ouds。
[0169]
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，对于本领域的普通技术人员来说，在上述说明及思路的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动，这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明权利要求的保护范围之内。

技术特征：
1.一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法，其特征在于，用液相色谱串联质谱进行检测，流动相a为甲醇，流动相b为乙酸铵水溶液，梯度洗脱，0～1min，流动相a与流动相b的体积比为20：80；1～4min，流动相a与流动相b的体积比由20：80变化为95：5；4～6.5min，流动相a与流动相b的体积比为95：5；6.5～6.6min，流动相a与流动相b的体积比由95：5变化为20：80；6.6～8min，流动相a与流动相b的体积比为20：80。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，在待测脑脊液样品中加入全氟及多氟化合物对应的同位素标记的内标物后，直接用权利要求1所述的检测方法检测。3.根据权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于，所述全氟及多氟化合物为全氟丁酸、全氟戊酸、全氟己酸、全氟庚酸、全氟辛酸、全氟壬酸、全氟癸酸、全氟十一酸、全氟十二酸、全氟十三酸、全氟十四酸、全氟丁基磺酰胺、全氟己基磺酰胺、全氟辛基磺酰胺、全氟2-甲基-3-氧杂己酸、n-甲基全氟辛烷氨基乙酸、n-乙基全氟辛烷氨基乙酸、全氟丁基磺酸、全氟戊基磺酸、全氟己基磺酸、全氟庚基磺酸、全氟辛基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟己基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟辛基磺酸、1h,1h,2h,2h-全氟癸基磺酸、4,8-二噁-3h全氟壬酸乙酯和2-[(6-氯-1,1,2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-十二氟己基)氧基]-1,1,2,2-四氟乙烷磺酸中的一种或几种。4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述同位素标记的内标物为
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c
4-pfba、
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c
5-pfpea、
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c
5-pfhxa、
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c
4-pfhpa、
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c
8-pfoa、
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c
9-pfna、
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c
6-pfda、
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c
7-pfuda、
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c
2-pfdoa、
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c
2-pfteda、
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c
3-pfbs、
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c
3-pfhxs、
13
c
8-pfos、d
3-n-mefosaa、d
5-n-etfosaa、
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c
2-4:2fts、
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c
2-6:2fts和
13
c
2-8:2fts中的一种或几种。5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，乙酸铵的浓度为1.9～2.1mm。6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，梯度洗脱的流速为0.29～0.31ml/min。7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，检测柱温为39～41℃。8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，色谱柱为waters beh c18高效液相色谱柱，色谱柱长度为100mm，内径为2.1mm，填料颗粒直径为1.7μm。9.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，质谱条件为：气帘气40psi，离子化电压-4500v，温度500℃，喷雾气50psi，辅助加热气50psi，碰撞气中等。10.根据权利要求1～9任一所述检测方法，其特征在于，所用液相色谱仪为岛津20ad高效液相色谱系统，质谱仪为ab sciex公司qtrap 5500型号的电喷雾三重四极杆质谱仪。

技术总结
本发明公开了一种脑脊液中全氟及多氟化合物的检测方法。用液相色谱串联质谱进行检测，流动相A为甲醇，流动相B为乙酸铵水溶液，梯度洗脱，待测脑脊液直接上机检测，不需要复杂的前处理过程，还能使所测的27种全氟及多氟化合物，回收率高，加标回收率在77.9％～101.3％之间，相对偏差小于20％，覆盖范围广，包含全氟基磺酸类、全氟辛酸类及其他全氟类等共27种；灵敏度高，27种全氟化合物均可达到pg级检测需求；效率高、重复性好，回收率高，同时测定27种全氟化合物只需要8min。全氟化合物只需要8min。全氟化合物只需要8min。


技术研发人员：李晶 魏鑫 司梦雅 潘亚男 银仁莉 李倪捷 钟冉
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：2023.04.27
技术公布日：2023/8/24