淫羊藿次苷II在治疗肺动脉高压疾病中的应用

淫羊藿次苷ii在治疗肺动脉高压疾病中的应用
技术领域
1.本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在治疗肺动脉高压疾病中的应用。


背景技术：

2.肺动脉高压(pulmonary hypertension，ph)是指由多种异源性疾病(病因)和不同发病机制所致肺血管结构或功能改变，引起肺血管阻力和肺动脉压力升高的临床和病理生理综合征，继而发展成右心衰竭甚至死亡，ph的诊断标准为海平面、静息状态下，经右心导管检查法测定的肺动脉平均压(mean pulmonary artery pressure，mpap)≥25mmhg，正常成年人静息状态下mpap为其上限不超过20mmhg，由于诱发ph的因素很多，临床上将肺动脉高压分为五大类，分别是：(1)动脉性ph(pulmonary arterial hypertension，pah)；(2)左心疾病所致ph；(3)肺部疾病和(或)低氧所致ph；(4)慢性血栓栓塞性ph(chronicthromboembolic pulmonary hypertension，cteph)和(或)其他肺动脉阻塞性病变所致ph；(5)未明和(或)多因素所致ph。
3.肺动脉高压的病理特征以肺小动脉重塑和肺血管阻力增加为主，而肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,pasmcs)的异常增殖是肺血管重塑的最重要的因素之一。
4.现肺动脉高压(ph)靶向治疗以内皮素受体拮抗剂(era)、可溶性鸟苷酸环化酶(sgc)激动剂、前列环素类似物和前列环素受体激动剂及pde5(磷酸二酯酶5)抑制剂为主，这些药物虽可改善早期患者症状,但不能逆转其病程,疗效有限,且价格昂贵，故寻找新的药物和有效靶点以延缓肺动脉高压进展成为十分重要的研究方向。


技术实现要素：

5.针对上述问题，发明人意外发现淫羊藿次苷ii可以缓解肺动脉高压，提示了其在制备治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。
6.一方面，本发明涉及淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。
7.淫羊藿首次记载于《神农本草经》，又名“仙灵脾”，来源于小檗科植物淫羊藿epimedium brevicomu maxim.，箭叶淫羊epimedium sagittatum(sieb.et zucc.)maxim.，柔毛淫羊藿epimedium pubescens maxim或淫羊藿epimedium koreanum nakai的干燥叶，具有补肾阳、强筋骨、祛风湿的功效。淫羊藿作为常用药，具有增强免疫、抗衰老、抗肿瘤、抗艾滋病等功效，临床应用范围广，有很大的研发潜力。淫羊藿主要起作用的成分为黄酮类化合物，尤其是淫羊藿苷(ica)，又称淫羊藿素。多篇文献报道淫羊藿苷可以缓解野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压，但研究均不深入。
8.发明人通过比较药代动力学研究表明，大鼠口服淫羊藿苷后91.2％转化为淫羊藿次苷ii，提示淫羊藿次苷ii可能是治疗疾病更直接有效的成分。
[0009][0010]
发明人进一步通过系统实验设计，证明淫羊藿次苷ii可抑制肺动脉高压模型大小鼠肺动脉压力，缓解肺动脉和右心室重塑，且离体实验中淫羊藿次苷ii有效抑制了肺动脉平滑肌细胞增殖。本发明开发了淫羊藿次苷ii新的用途，使淫羊藿次苷ii得到更好的应用；为肺动脉高压治疗提供新的药物研究方向，具有很好的应用前景。
[0011]
在本发明的另一实施方案中，本发明涉及淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善肺动脉压力。
[0012]
在本发明的另一实施方案中，本发明涉及淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善血管重塑。
[0013]
本发明还提供了一种包含上述淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐的药物组合物，所述的药物组合物包括治疗有效量的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体。
[0014]
本发明中，治疗有效量包括足以改善或防止医学疾病的症状或病症的量。对具体受治疗者的有效量可视多种因素而变化，例如待治疗的疾病、患者的整体健康状况、给药的方法途径和剂量及副作用的严重性。有效量可为避免显著副作用或毒性作用的最大剂量或给药方案。
[0015]
本发明中，药学上可接受载体包括生理上相容的任何和全部溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。本发明的药物组合物可以制备成胶囊剂，片剂，粉剂，粒剂，糖浆或类似剂型形式口服给药，或通过注射，软膏，栓剂或类似剂型非肠胃给药。这些药物制剂可通过使用本领域熟知的辅助剂，如粘合剂，赋形剂，稳定剂，崩解剂，矫味剂，润滑剂等等以普通方法生成，也可以制备为控释给药剂型、缓释给药剂型、各种微粒给药系统。
[0016]
虽然剂量随症状和病人的年龄，疾病或失调的性质及严重性和给药的途径和方式
而变，但对成年病人口服给药的情况来说，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐正常给药为每天总剂量1至1000mg，优选为20至800mg，更优选为50-600mg，可以为单剂量或者为分剂量形式给药；例如每日一次、二次或三次。
[0017]
本发明提供了治疗疾病的方法，所述方法包括将治疗有效量的本发明所述的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐给予需要治疗的肺动脉高压受试者。术语“受试者”包括人类和非人哺乳动物，诸如非人灵长类、绵羊、犬、猫、牛和马等，优选的受试者为人类患者。
[0018]
综上，本发明提供了一种淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。兹将本发明的技术方案总结如下：
[0019]
1、淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。
[0020]
2、根据技术方案1所述的用途，其特征在于，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善肺动脉压力。
[0021]
3、根据技术方案1所述的用途，其特征在于，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善血管重塑。
[0022]
4、根据技术方案1所述的用途，其特征在于，所述药物为包含治疗有效量的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物。
[0023]
5、根据技术方案4所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物制备成胶囊剂，片剂，粉剂，粒剂，糖浆或类似剂型形式口服给药，或通过注射，软膏，栓剂或类似剂型非肠胃给药。
[0024]
6、根据技术方案5所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物制备为控释给药剂型、缓释给药剂型、各种微粒给药系统。
[0025]
7、根据技术方案1所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐正常给药为每天总剂量1至1000mg。
[0026]
8、根据技术方案7所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐正常给药为每天总剂量20至800mg。
[0027]
9、根据技术方案8所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐正常给药为每天总剂量50-600mg。
[0028]
10、根据技术方案7-9任一项所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐为单剂量或者为分剂量形式给药。
[0029]
11、根据技术方案10所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐给药为每日一次、二次或三次。
[0030]
12、根据技术方案1所述的用途，其特征在于，所述用途为将治疗有效量的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐给予需要治疗的肺动脉高压受试者。
[0031]
13、根据技术方案12所述的用途，其特征在于，所述的受试者包括人类和非人哺乳动物。
[0032]
14、根据技术方案13所述的用途，其特征在于，所述的受试者为非人灵长类、绵羊、犬、猫、牛和马。
附图说明
[0033]
附图1：淫羊藿次苷ii的化学结构式。
[0034]
附图2：淫羊藿次苷ii缓解低氧联合sugen5416诱导的肺动脉高压模型小鼠肺动脉压力及右心室重塑。
[0035]
附图3：淫羊藿次苷ii缓解mct诱导的肺动脉高压模型大鼠肺动脉压力及右心室重塑。
[0036]
附图4：淫羊藿次苷ii缓解肺动脉高压模型大小鼠血管重塑。
[0037]
附图5：淫羊藿次苷ii抑制低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞(rpasmc)增殖。
具体实施方式
[0038]
下面结合附图和具体实施例对本发明进行进一步的说明。本发明中所用淫羊藿次苷ii(ics ii)购于上海源叶生物科技有限公司，货号b20075。
[0039]
实施例1：
[0040]
低氧肺动脉高压(hph)小鼠模型的建立(图2a)：取成年健康c57bl/6小鼠30只，每组6只，分组如下：a组：常氧组；b组：常氧+ics ii(淫羊藿次苷ii,30mg/kg)给药组；c组：低氧+sugen5416(司马沙尼，20mg/kg)组；d组：低氧+sugen5416+ics ii(10mg/kg)给药组；e组：低氧+sugen5416+ics ii(30mg/kg)组。除ab组外，其余各组均放置于低氧氧舱中进行造模，通过调控系统调整氮气和空气的进气量，制造稳定的低氧环境(舱内氧气浓度9％-11％，湿度50％-70％，温度20℃-26℃)。常氧组和低氧组小鼠接受相同的光照条件和饮食供给。对于sugen5416造模组老鼠每周一次腹部皮下注射sugen5416(20mg/kg)，对于ics ii给药组老鼠，每天早上入舱前根据体重分别灌胃相应量ics ii(10，30mg/kg)，对照组灌胃对应量的生理盐水。每天24小时持续低氧，共持续3周。3周后，将所有小鼠麻醉并进行有创血流动力学测量，然后收集小鼠肺等组织进行进一步研究。
[0041]
低氧肺动脉高压(hph)大鼠模型的建立(图3a)：成年sd野生型大鼠共24只，每组8只，分组如下：a组：对照组；b组：mct组(monocrotaline，野百合碱，60mg/kg)；c组：mct+ics ii(5mg/kg)给药组。三组大鼠接受相同的常氧环境、光照条件和饮食供给。对于mct造模组老鼠第一个造模日进行腹部皮下注射mct(60mg/kg)，对于ics ii给药组老鼠每天根据体重灌胃相应量ics ii(5mg/kg)，对照组灌胃对应量的生理盐水。每天24小时常氧，共持续3周。3周后，将所有大鼠麻醉并进行有创血流动力学测量，然后收集大鼠肺等组织进行进一步研究。
[0042]
肺动脉高压模型大小鼠造模3周后，通过血流动力学及右心室重构评估发现，ics ii可明显降低低氧肺动脉高压小鼠模型的右心室收缩压(rvsp)(图2ab)、大鼠模型的平均肺动脉收缩压(mpap)(图3ab)，而平均颈动脉压力(mcap)无明显差异(图2c,图3c),同时发现ics ii可降低大小鼠rv/(s+lv)(右心室/(左心室+室间隔))比率(图2d,图3d)，而对小鼠rv/bw(右心室/体重)比率无影响(图2e)。上述结果证明了ics ii可以缓解肺动脉高压模型大小鼠的肺动脉压力及右心室重塑。
[0043]
肺动脉高压模型大小鼠造模3周后，通过对肺组织切片进行h&e染色、masson染色等病理研究发现，ics ii显着减弱了肺动脉高压模型大小鼠的肺动脉肌化(图4bcgh)，逆转了肺动脉高压模型大小鼠的肺动脉周围胶原蛋白过度沉积(图4di)，降低肺动脉高压模型
大小鼠的肺动脉管壁骨架蛋白α-sm-actin的表达量(图4ej)。上述结果证明了ics ii可以缓解肺动脉高压模型大小鼠的血管重塑。
[0044]
肺动脉高压模型小鼠造模3周后，通过小鼠肺组织制成匀浆，提取总蛋白，western blot法检测发现造模小鼠肺组织中pcna增殖指标明显上调，而ics ii可显著下调其蛋白表达水平(图5ac)。
[0045]
实施例2：
[0046]
细胞模型的建立：取3-5代的rpasmcs(大鼠肺动脉平滑肌细胞)进行实验。实验分为3组：常氧对照组(nx)、低氧造模组(hx)、低氧+ics ii(淫羊藿次苷ii,25umol/ml)给药组。低氧造模组即将贴壁后的细胞放置在37℃恒温低氧培养箱中(保持o2浓度10％，co2浓度5％)造模24小时。常氧对照组选取同样密度的rpasmcs在37℃恒温培养箱(o2浓度21％、co2浓度5％)培养24小时。24小时后，进一步进行细胞实验。
[0047]
细胞造模后，提取细胞总蛋白，western blot法检测发现造模细胞中pcna增殖指标明显上调，而ics ii可显著下调其蛋白表达水平(图5bd)。
[0048]
细胞造模后，edu实验发现ics ii显著抑制低氧下细胞增殖(图5e)。

技术特征：
1.淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善肺动脉压力。3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，其中淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐用于改善血管重塑。4.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述药物为包含治疗有效量的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物。5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物制备成胶囊剂，片剂，粉剂，粒剂，糖浆或类似剂型形式口服给药，或通过注射，软膏，栓剂或类似剂型非肠胃给药。6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物制备为控释给药剂型、缓释给药剂型、各种微粒给药系统。7.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐正常给药为每天总剂量1至1000mg。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐为单剂量或者为分剂量形式给药。9.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述用途为将治疗有效量的淫羊藿次苷ii或其药学上可接受的盐给予需要治疗的肺动脉高压受试者。10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于，所述的受试者包括人类和非人哺乳动物。

技术总结
本发明涉及淫羊藿次苷II或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肺动脉高压疾病的药物中的用途。研究证明淫羊藿次苷II可抑制肺动脉高压模型大小鼠肺动脉压力，缓解肺动脉和右心室重塑，有效抑制肺动脉平滑肌细胞增殖，改善血管重塑，可用于改善肺动脉压力。将治疗有效量的淫羊藿次苷II或其药学上可接受的盐制备为药物可用于治疗肺动脉高压受试者。为药物可用于治疗肺动脉高压受试者。


技术研发人员：黄晓颖 宋兰兰 厉秀纯 王阳悦 王兴洪
受保护的技术使用者：温州医科大学附属第一医院
技术研发日：2023.03.23
技术公布日：2023/8/24