棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法与流程

1.本发明涉及细菌内毒素检测技术领域，具体而言，涉及棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法。


背景技术：

2.细菌内毒素是革兰阴性菌的细胞壁成分，当细菌死亡或自溶后便会释放出内毒素。内毒素通过注射等方式进入血液时则会引起不同的疾病，当大量进入血液就会引起发热反应—“热原反应”。因此，细菌内毒素检查属于注射剂的安全性检查项目之一。为避免棕榈酸帕利哌酮注射液在生产过程质量风险，保证用药安全，有必要严格控制其原料以及制剂的细菌内毒素含量。棕榈酸帕利哌酮不溶于水，需使其溶解至澄清溶液后再进行细菌内毒素检验，否则不溶性微粒中可能包裹细菌内毒素导致假阴性结果。
3.然而，尚无文献报道棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素检查方法。常规细菌内毒素检查法检测或量化样品细菌内毒素时，首先需对样品进行复溶、稀释，再根据样品的性质确定内毒素限值和最大有效稀释倍数(mvd)，最后采用凝胶法或光度测定法检查样品的细菌内毒素。但是棕榈酸帕利哌酮难溶于水，上述常规细菌内毒素检测方法无法直接检查出棕榈酸帕利哌酮样品中的细菌内毒素。
4.鉴于此，特提出本发明。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法。本发明实施例提供的检测方法能够准确且快速地检测出棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的含量是否符合要求。
6.本发明是这样实现的：
7.第一方面，本发明提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：将棕榈酸帕利哌酮待测样品、溶剂和细菌内毒素检查用水混合形成供试品溶液，而后进行检测，其中，所述溶剂为四氢呋喃和吐温混合形成的混合溶液。
8.在可选的实施方式中，所述四氢呋喃和所述吐温的体积比为1.5:1-15:5，优选为2:1-8:1；更优选为4:1，此比例能溶解棕榈酸帕利哌酮样品，且用细菌内毒素检查用水稀释后溶液仍然澄清，且该溶剂不会对细菌内毒素的检测造成干扰。
9.在可选的实施方式中，所述吐温包括吐温80和吐温20中的至少一种；
10.优选地，所述吐温为注射用吐温，优选所述吐温80为吐温80(ii)；
11.优选地，所述四氢呋喃为色谱级四氢呋喃。
12.在可选的实施方式中，所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度在0.5mg/ml以下；
13.优选地，所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度为0.0625-0.5mg/ml；优选为0.125-0.5mg/ml；更优选为0.125-0.25mg/ml。
14.在可选的实施方式中，包括：将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品用所述溶剂溶解形成母液，而后利用所述细菌内毒素检查用水稀释所述母液形成所述供试品溶液；
15.优选地，所述母液的浓度为5-25mg/ml；优选为12.5mg/ml。
16.在可选的实施方式中，包括：将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品用所述溶剂溶解形成母液，而后利用所述细菌内毒素检查用水稀释所述母液形成所述供试品溶液；其中，所述母液的浓度为5-25mg/ml；所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度在0.5mg/ml以下；所述四氢呋喃和所述吐温的体积比为1.5:1-15:1。
17.在可选的实施方式中，包括：制备细菌内毒素标准品阳性对照品和供试品阳性对照品；
18.优选地，还包括对细菌内毒素标准品阳性对照品、供试品阳性对照品以及细菌内毒素检测用水进行检测。
19.在可选的实施方式中，包括：将细菌内毒素检查用水与细菌内毒素标准品混合形成浓度为2*鲎试剂灵敏度的细菌内毒素标准品阳性对照品；
20.将将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品和所述溶剂混合形成母液，而后依次加入细菌内毒素标准品溶液和细菌内毒素检查用水形成供试品阳性对照品，
21.其中，所述供试品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度与细菌内毒素标准品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度一致；所述供试品阳性对照品中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度与所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度一致。
22.在可选的实施方式中，包括：利用凝胶法或者光度法进行检测。
23.在可选的实施方式中，检测采用的鲎试剂的灵敏度为0.0625-0.125eu/ml；和/或，所述棕榈酸帕利哌酮待测样品包括棕榈酸帕利哌酮原料药样品或棕榈酸帕利哌酮制剂样品。
24.本发明具有以下有益效果：本发明实施例通过采用特定地溶剂能够对棕榈酸帕利哌酮待测样品进行有效溶解，不仅能够对难溶性棕榈酸帕利哌酮待测样品内的细菌内毒素进行高效且快速的检测，有效解决了内毒素被样品包裹而不能全部释放的问题，且该溶剂不会对细菌内毒素的检测造成干扰。
附图说明
25.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
26.图1为本发明对比例2提供的溶解结果图；
27.图2为本发明对比例9提供的溶解结果图。
具体实施方式
28.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产
品。
29.棕榈酸帕利哌酮是一种用于精神分裂症急性期和维持期的治疗药物，其在临床上常采用的制剂为注射剂，而本领域技术人员公知，细菌内毒素是注射剂药品中的主要污染物质，在注射剂产品开发中，为了保证患者用药安全，需对注射剂中内毒素含量进行严格的控制。由于棕榈酸帕利哌酮难溶于水不能采用常规的水溶后进行检测，同时现有技术中并没有棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法。
30.而本发明实施例则提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其不用水溶解棕榈酸帕利哌酮，而采用特定的溶剂溶解棕榈酸帕利哌酮，而后能够快速且高效地检测棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素，且该溶剂不会对棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测造成影响。
31.需要说明的是，本发明实施例提及的检测细菌内毒素的棕榈酸帕利哌酮包括棕榈酸帕利哌酮原料药，也包括棕榈酸帕利哌酮的成品药剂，例如，棕榈酸帕利哌酮注射剂，也可以其他药物制剂。
32.具体如下：
33.s1、制备供试品：
34.将棕榈酸帕利哌酮待测样品和溶剂混合形成母液(本文也称为供试品原液或原液)，其中，母液的浓度为5-25mg/ml，优选为12.5mg/ml；例如，5mg/ml、7.5mg/ml、9mg/ml、10mg/ml、12.5mg/ml、15mg/ml、16mg/ml、17.5mg/ml、19mg/ml、20mg/ml、21.5mg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml以及25mg/ml等之间的任意数值。
35.采用的溶剂为四氢呋喃和吐温混合形成的混合溶液，二者的体积比为1.5:1-15:1。优选地，四氢呋喃和所述吐温的体积比为2:1-8:1；优选为4:1。例如四氢呋喃和所述吐温的体积比为1.5:1、2:1、3:1、4:1、5:1、6:1、7:1、8:1、9:1、10:1、11:1、12:1、13:1、14:1以及15:1等1.5:1-15:1之间的任意数值。
36.本发明的发明人意外发现，通过将四氢呋喃和吐温按照特定体积比进行混合形成混合溶液，既能使得难溶性棕榈酸帕利哌酮待测样品被充分溶解，保证能够实现对棕榈酸帕利哌酮待测样品中细菌内毒素的检测，且检测速度、效率以及准确度高，同时，该溶剂还不会干扰细菌内毒素的检测结果，若更改本发明实施例的溶剂中四氢呋喃和吐温的配比，或更改溶剂中物质的组成都可能影响棕榈酸帕利哌酮待测样品中细菌内毒素的检测，或者根本无法实现检测。
37.具体地，若四氢呋喃和所述吐温的体积比大于15:1，棕榈酸帕利哌酮溶解并用水稀释后会析出块状样品，影响内毒素回收。而小于1.5:1时，样品溶解性不好，需要较大量的混合溶液溶解，此时样品初始浓度较低，可供稀释的倍数较小，对鲎试剂有干扰。当其体积比为最优的4:1时，用水稀释时仍然保持澄清状态，且初始浓度较高，有较大的稀释倍数，内毒素限值能达到小于0.25eu/mg。四氢呋喃和所述吐温的体积比大于等于1.5:1并且小于4:1时，稀释倍数较小，导致内毒素限值变大，但也符合规定的0.5eu/mg。四氢呋喃和所述吐温的体积比大于4:1并且小于等于15:1时，稀释后澄清度降低，但是也不会干扰内毒素的测定，符合规定的检测要求。
38.进一步地，吐温可以采用吐温80或吐温20，吐温为注射用吐温，更优地可以选择吐温80(ii)，能够进一步保证检测结果的准确性，减少溶剂对检测结果的影响。
39.再利用所述细菌内毒素检查用水稀释所述母液形成所述供试品溶液；供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度为0.0625-0.5mg/ml；优选为0.125-0.5mg/ml；更优选为0.125-0.25mg/ml，例如，供试品溶液中棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度为0.0625mg/ml、0.125mg/ml、0.25mg/ml以及0.5mg/ml等0.0625-0.5mg/ml之间的任意数值。
40.s2、制备细菌内毒素标准品阳性对照品；
41.将细菌内毒素检查用水与细菌内毒素标准品混合形成浓度为2*鲎试剂灵敏度的细菌内毒素标准品阳性对照品。
42.s3、制备供试品阳性对照品
43.将s1制备的所述母液加入细菌内毒素标准品溶液和细菌内毒素检查用水形成供试品阳性对照品，
44.其中，所述供试品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度与细菌内毒素标准品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度一致；所述供试品阳性对照品中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度与所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度一致。
45.需要说明的是，虽然形成供试品阳性对照品的过程中会添加细菌内毒素标准品，但是其用量很少，几乎不会对供试品阳性对照品的体积造成影响，因此，认为供试品阳性对照品中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度与所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度一致。
46.s4、检测
47.以细菌内毒素检查用水为阴性对照品，而后对供试品溶液、阴性对照品、细菌内毒素标准品阳性对照品和供试品阳性对照品进行检测，检测采用的方法为中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用的是凝胶法或者光度法。其中，检测采用的鲎试剂的灵敏度为0.0625-0.125eu/ml。
48.需要说明的是，凝胶法还是光度法均为药典记载的内容本发明实施例不再进行详述。
49.以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
50.本发明采用的棕榈酸帕利哌酮待测样品可以是市售棕榈酸帕利哌酮原料药或棕榈酸帕利哌酮注射剂，也可以是按照现有的方法合成或制备得到的棕榈酸帕利哌酮原料药或棕榈酸帕利哌酮注射剂。
51.本发明实施例采用的棕榈酸帕利哌酮为丽珠合成制药有限公司合成得到的物质，分别包括3个批号的棕榈酸帕利哌酮，依次为01、02和03。
52.实施例1
53.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
54.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至0.125eu/ml(2λ，其中，λ表示鲎试剂灵敏度，λ单位为eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
55.供试品溶液配制：将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温80(ⅱ)(体积比：4：1)的混合液配制成浓度为12.5mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.25mg/ml备用。
56.供试品阳性对照的配制：取上述配制的12.5mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为625eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释50倍，每稀释一步混匀30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.125eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照；
57.进行细菌内毒素的检测：
58.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.0625eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液平行制备2管，检测结果如下：
59.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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60.其中，管内形成凝胶并且凝胶坚实不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记为(+)；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性，记为(-)。保温和拿取试管过程应避免受到震动，造成假阴性结果。
61.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.25eu/mg(以帕利哌酮计)。
62.实施例2
63.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
64.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至2λ(0.125eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
65.供试品溶液配制：将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温80(ⅱ)(体积比：15：1)的混合液配制成浓度为25mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.25mg/ml备用。
66.供试品阳性对照的配制：取上述配制的25mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为1250eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释100倍，每稀释一步混匀30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.125eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照。
67.进行细菌内毒素的检测：
68.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.0625eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液平行制备2管，结果如下：
69.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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70.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.25eu/mg(以帕利哌酮
计)。
71.实施例3
72.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
73.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至2λ(0.125eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
74.供试品溶液配制：将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温80(体积比：1.5：1)的混合液配制成浓度为5mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.125mg/ml备用。
75.供试品阳性对照的配制：取上述配制的5mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为500eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释40倍，每稀释一步混匀30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.125eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照。
76.进行细菌内毒素的检测：
77.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.0625eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液设置2个批次的平行管，结果如下：
78.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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79.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.5eu/mg(以帕利哌酮计)。
80.实施例4
81.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
82.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至2λ(0.25eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
83.供试品溶液配制：将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温80(体积比：4：1)的混合液配制成浓度为12.5mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.5mg/ml备用。
84.供试品阳性对照的配制：取上述配制的12.5mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为625eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释25倍，每稀释一步混匀30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.25eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照。
85.进行细菌内毒素的检测：
86.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.125eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液平行制备2管，结果如下：
87.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照
01
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88.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.25eu/mg(以帕利哌酮计)。
89.实施例5
90.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
91.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至2λ(0.25eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
92.供试品溶液配制：将将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温80(体积比：15：1)的混合液配制成浓度为25mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.5mg/ml备用(稀释后的供试品溶液澄清度降低)。
93.供试品阳性对照的配制：取上述配制的25mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为625eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释50倍，每稀释一步混匀30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.25eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照。
94.进行细菌内毒素的检测：
95.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.125eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液平行制备2管，结果如下：
96.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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97.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.25eu/mg(以帕利哌酮计)。
98.实施例6
99.本实施例提供一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，包括：
100.细菌内毒素标准品的配制：用细菌内毒素检查用水溶解细菌内毒素标准品并混匀，混匀后将细菌内毒素标准品用细菌内毒素检查用水进行稀释至2λ(0.125eu/ml)，作为阳性对照，并以细菌内毒素检查用水作为阴性对照。
101.供试品溶液配制：将棕榈酸帕利哌酮加入四氢呋喃和吐温20(体积比：4：1)的混合液配制成浓度为12.5mg/ml(以帕利哌酮计)的母液，再将该母液用细菌内毒素检查用水稀释到0.25mg/ml备用。
102.供试品阳性对照的配制：取上述配制的12.5mg/ml母液1ml，加入10μl浓度为625eu/ml的细菌内毒素标准品溶液；再用细菌内毒素检查用水稀释50倍，每稀释一步混匀
30s，每次不超过10倍稀释。得到含0.125eu/ml标准内毒素的供试品溶液作为供试品阳性对照。
103.进行细菌内毒素的检测：
104.按中国药典2020年版四部《细菌内毒素检查法》，采用凝胶法，用0.0625eu/ml的鲎试剂进行检查，每个检测溶液平行制备2管，结果如下：
105.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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106.若阴性对照溶液的平行管均为阴性，供试品阳性对照溶液的平行管均为阳性，阳性对照溶液的平行管均为阳性，试验有效。若供试品溶液的两个平行管均为阴性，判定供试品符合规定。因此，三批供试品均符合规定，且内毒素限度均小于0.25eu/mg(以帕利哌酮计)。
107.对比例1
108.采用30％醋酸溶液作为溶剂，其与操作均与实施例1一致，检测结果如下：
109.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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110.可见，采用30％醋酸溶液可以溶解棕榈酸帕利哌酮，但是供试品阳性对照的结果为阴性，说明其对鲎试剂有干扰，不能用于检测棕榈酸帕利哌酮。
111.对比例2
112.采用四氢呋喃作为溶剂，其与操作均与实施例1一致，结果见图1，其中图1的左侧图为氢呋喃溶解棕榈酸帕利哌酮样品时的照片，图1中的右侧图为氢呋喃溶解棕榈酸帕利哌酮样品后形成母液采用细菌内毒素检查用水稀释10倍后的图片，可见，能见到明显成块，这些块状物会将内毒素包裹，不能准确检查内毒素。
113.且检测结果如下：
114.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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115.可见，采用四氢呋喃可以溶解棕榈酸帕利哌酮，但是供试品阳性对照的结果为阴性，说明其对鲎试剂有干扰，不能用于检测棕榈酸帕利哌酮。
116.对比例3
117.采用乙醇吐温80(ii)混合液作为溶剂，50℃加热溶解乙醇和吐温80(ii)体积比为1:1.08，其与操作均与实施例1一致，检测结果如下：
118.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
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‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
119.可见，采用乙醇吐温80(ii)可以溶解棕榈酸帕利哌酮，但是供试品阳性对照的结果为阴性，说明其对鲎试剂有干扰，不能用于检测棕榈酸帕利哌酮。
120.对比例4
121.采用dmf作为溶剂(以帕利哌酮计为100mg的样品，需要约80ml)，其与操作均与实施例1一致，检测结果如下：
122.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
‑‑‑‑
++
‑‑
02
‑‑‑‑
++
‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
123.可见，采用dmf可以溶解棕榈酸帕利哌酮，但是供试品阳性对照的结果为阴性，说明其对鲎试剂有干扰，不能用于检测棕榈酸帕利哌酮。
124.对比例5
125.无水乙醇50℃加热溶解，其与操作均与实施例1一致，检测结果如下：
126.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
‑‑‑‑
++
‑‑
02
‑‑‑‑
++
‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
127.可见，采用乙醇加热溶解，但供试品阳性结果为阴性，说明对鲎试剂有干扰。
128.对比例6
129.吐温80(ii)和冰醋酸溶解：称取样品约32mg(以帕利哌酮计20mg)，加入吐温80 4ml分散样品，再加入15.5ml细菌内毒素检查用水，加入0.5ml冰醋酸，50℃水浴溶解样品，用细菌内毒素检查用水稀释至0.125mg/ml，其与操作均与实施例1一致，检测结果如下：
130.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
‑‑‑‑
++
‑‑
02
‑‑‑‑
++
‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
131.可见，供试品阳性结果为阴性，说明对鲎试剂有干扰。
132.对比例7
133.采用dmso，dmso不能溶解样品，无法进行检测。
134.对比例8
135.采用吐温80(ii)，吐温80(ii)不能溶解样品，无法进行检测。
136.对比例9
137.四氢呋喃与吐温的比例为16:1，其余操作均与实施例1一致，结果参见图2，其中，图2的左侧图为四氢呋喃与吐温(ii)16：1(v/v)溶解棕榈酸帕利哌酮样品时的图片，图2的右侧图为四氢呋喃与吐温(ii)16：1(v/v)溶解棕榈酸帕利哌酮样品形成的母液用细菌内毒素检查用水稀释10倍后的图片，可见，样品浑浊，底部有少许成块，块状物会将内毒素包裹，
不能准确检查内毒素。
138.同时，检测结果如下：
139.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
‑‑‑‑
++
‑‑
02
‑‑‑‑
++
‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
140.可见，供试品阳性结果为阴性，说明对鲎试剂有干扰。
141.对比例10
142.四氢呋喃与吐温的比例为1:1，其与操作均与实施例1一致，样品溶解性不好，需要超过30ml的混合溶液溶解，此时样品初始浓度较低，初始浓度为2.5mg/ml，用细菌内毒素检查用水稀释20倍，浓度为0.125mg/ml，检测结果如下：
143.批号供试品溶液供试品阳性对照阳性对照阴性对照01
‑‑‑‑
++
‑‑
02
‑‑‑‑
++
‑‑
03
‑‑‑‑
++
‑‑
144.可见，供试品阳性结果为阴性，说明对鲎试剂有干扰。
145.验证
146.为了确保棕榈酸帕利哌酮细菌内毒素检查方法的可靠性，需在实际检验条件下，验证其对细菌内毒素检查试验有无干扰作用，以确认所采用的方法适合于棕榈酸帕利哌酮原料的细菌内毒素检查。具体如下：
147.采用凝胶法，用两个厂家的鲎试剂(厦门鲎试剂生物技术股份有限公司和福州新北生化工业有限公司生产的鲎试剂)对三批棕榈酸帕利哌酮原料进行干扰试验的验证，验证内容参见下表：
148.[0149][0150]
具体如下：
[0151]
棕榈酸帕利哌酮注射液限值确定：l＝k/m[注射剂k＝5eu/(kg
·
h)，棕榈酸帕利哌酮注射液按最大规格1.5ml，则最大剂量m＝150mg/(60kg
·
h)，棕榈酸帕利哌酮注射液限度为2.0eu/mg(以帕利哌酮计)，由于药物和适应症(如抗感染、抗肿瘤、心血管药等急症用药、儿童老人用药、复合用药、大输液等)的不同，限值可适当严格，至计算值的1/3～1/2，以保证安全用药。因此，棕榈酸帕利哌酮注射液限值定为1.0eu/mg，考虑到注射剂中辅料的加入，将棕榈酸帕利哌酮原料药的细菌内毒素限值定为l＝0.5eu/mg，以帕利哌酮计。
[0152]
干扰预实验1
[0153]
用四氢呋喃与吐温80(ⅱ)(体积比：1.5：1)(v/v)混合溶液对棕榈酸帕利哌酮原料溶解制成5mg/ml的帕利哌酮溶液，用细菌内毒素检查用水分别稀释至1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml一系列浓度，记作npc，同时制备上述每一浓度试验液中均含有2λ浓度标准内毒素的供试品阳性对照溶液，记作ppc。阴性对照溶液为细菌内毒素检查用水，记作nc。取效价为9000eu/支的细菌内毒素标准品，按照标准品说明书，加入1ml细菌内毒素检查用水溶解，然后用细菌内毒素检查用水制成所需的细菌内毒素标准溶液，作为阳性对照溶液pc。
[0154]
取两个不同厂家的鲎试剂，分别与上述npc、ppc、nc和pc进行反应，每一浓度重复两管。预试验结果见表1和表2：
[0155]
表1福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0156][0157]
表2厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0158][0159]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22120912。
[0160]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22111043。
[0161]
由表1和表2的结果可以初步了解：浓度为5mg/ml的棕榈酸帕利哌酮供试品溶液，用细菌内毒素检查用水稀释至0.125mg/ml(稀释40倍)时，对两个厂家的鲎试剂均无干扰作用。选择样品浓度为0.125mg/ml，鲎试剂灵敏度为0.0625eu/ml进正式干扰试验。
[0162]
正式干扰实验1：
[0163]
取4管1ml上述供试品原液(5mg/ml)，分别加入10ul适量浓度的内毒素溶液，混匀，再用细菌内毒素检查用水稀释至40倍，得到含内毒素分别为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的供试品溶液。按《中国药典》中的“细菌内毒素检查法凝胶法干扰实验”项，使用灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂进行实验，结果见表3和表4。
[0164]
表3福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0165][0166]
表4厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0167][0168]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22122312。
[0169]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22111045。
[0170]
正式干扰实验结果表明：3批样品对两个厂家鲎试剂的es和e
t
均在0.5λ～2.0λ范围之内(包括0.5λ和2.0λ)，均符合鲎试剂灵敏度复核的要求，确认在40倍(浓度为0.125mg/ml)稀释下无干扰作用，且内毒素含量小于0.5eu/mg。
[0171]
干扰预实验2
[0172]
用四氢呋喃与吐温80(ⅱ)(体积比15：1)(v/v)混合溶液对棕榈酸帕利哌酮原料溶解制成25mg/ml的帕利哌酮溶液，用细菌内毒素检查用水分别稀释至1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml一系列浓度，记作npc，同时制备上述每一浓度试验液中均含有2λ浓度标准内毒素的供试品阳性对照溶液，记作ppc。阴性对照溶液为细菌内毒素检查用水，记作nc。取效价为9000eu/支的细菌内毒素标准品，按照标准品说明书，加入1ml细菌内毒素检查用水溶解，然后用细菌内毒素检查用水制成所需的细菌内毒素标准溶液，作为阳性对照溶液pc。
[0173]
取两个不同厂家的鲎试剂，分别与上述npc、ppc、nc和pc进行反应，每一浓度重复两管。预试验结果如下表5和表6。
[0174]
表5福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0175][0176]
表6厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0177][0178]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22120912。
[0179]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22111043。
[0180]
由表5和表6的结果可以初步了解：浓度为25mg/ml的棕榈酸帕利哌酮供试品溶液，用细菌内毒素检查用水稀释至0.5mg/ml(稀释50倍)时，对两个厂家的鲎试剂均无干扰作用。考虑到2倍安全系数，选择样品浓度为0.25mg/ml，鲎试剂灵敏度为0.0625eu/ml进正式干扰试验。
[0181]
正式干扰实验2
[0182]
取4管1ml供试品原液(25mg/ml)，分别加入10ul适量浓度的内毒素溶液，混匀，再用细菌内毒素检查用水稀释至100倍，得到含内毒素分别为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的供试品溶液。按《中国药典》中的“细菌内毒素检查法凝胶法干扰实验”项，使用灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂进行实验，结果见表7和表8。
[0183]
表7福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0184][0185]
表8厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0186][0187]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22122312。
[0188]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22111045。
[0189]
正式干扰实验结果表明：3批样品对两个厂家鲎试剂的es和e
t
均在0.5λ～2.0λ范围之内(包括0.5λ和2.0λ)，均符合鲎试剂灵敏度复核的要求，确认在100倍(浓度为0.25mg/ml)稀释下无干扰作用，且内毒素含量小于0.25eu/mg。
[0190]
干扰预实验3
[0191]
用四氢呋喃与吐温80(ⅱ)(体积比4：1)(v/v)混合溶液对棕榈酸帕利哌酮原料溶解制成12.5mg/ml的帕利哌酮溶液，用细菌内毒素检查用水分别稀释至1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml一系列浓度，记作npc，同时制备上述每一浓度试验液中均含有2λ浓度标准内毒素的供试品阳性对照溶液，记作ppc。阴性对照溶液为细菌内毒素检查用水，记作nc。取效价为9000eu/支的细菌内毒素标准品，按照标准品说明书，加入1ml细菌内毒素检查用水溶解，然后用细菌内毒素检查用水制成所需的细菌内毒素标准溶液，作为阳性对照溶液pc。
[0192]
取两个不同厂家的鲎试剂，分别与上述npc、ppc、nc和pc进行反应，每一浓度重复两管。预试验结果如下表9和表10。
[0193]
表9福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0194][0195]
表10厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0196][0197][0198]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22120912。
[0199]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22111043。
[0200]
由表9和表10的结果可以初步了解：浓度为12.5mg/ml的棕榈酸帕利哌酮供试品溶液，用细菌内毒素检查用水稀释至0.5mg/ml(稀释25倍)时，对两个厂家的鲎试剂均无干扰作用。考虑到2倍安全系数，选择样品浓度为0.25mg/ml，鲎试剂灵敏度为0.0625eu/ml进正式干扰试验。
[0201]
正式干扰实验3
[0202]
取4管1ml供试品原液(12.5mg/ml)，分别加入10ul适量浓度的内毒素溶液，混匀，再用细菌内毒素检查用水稀释至50倍，得到含内毒素分别为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的供试品溶液。按《中国药典》中的“细菌内毒素检查法凝胶法干扰实验”项，使用灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂进行实验，结果见表11和表12。
[0203]
表11福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0204][0205]
表12厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0206][0207]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22122312。
[0208]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22111045。
[0209]
正式干扰实验结果表明：3批样品对两个厂家鲎试剂的es和e
t
均在0.5λ～2.0λ范围之内(包括0.5λ和2.0λ)，均符合鲎试剂灵敏度复核的要求，确认在50倍(浓度为0.25mg/ml)稀释下无干扰作用，且内毒素含量小于0.25eu/mg。
[0210]
干扰预实验4
[0211]
用四氢呋喃与吐温20(体积比4：1)(v/v)混合溶液对棕榈酸帕利哌酮原料溶解制成12.5mg/ml的帕利哌酮溶液，用细菌内毒素检查用水分别稀释至1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml一系列浓度，记作npc，同时制备上述每一浓度试验液中均含有2λ浓度标准内毒素的供试品阳性对照溶液，记作ppc。阴性对照溶液为细菌内毒素检查用水，记作nc。取效价为9000eu/支的细菌内毒素标准品，按照标准品说明书，加入1ml细菌内毒素检查用水溶解，然后用细菌内毒素检查用水制成所需的细菌内毒素标准溶液，作为阳性对照溶液pc。
[0212]
取两个不同厂家的鲎试剂，分别与上述npc、ppc、nc和pc进行反应，每一浓度重复两管。预试验结果如下表13和表14。
[0213]
表13福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0214][0215]
表14厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0216][0217][0218]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22120912。
[0219]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22111043。
[0220]
由表13和表14的结果可以初步了解：浓度为12.5mg/ml的棕榈酸帕利哌酮供试品溶液，用细菌内毒素检查用水稀释至0.25mg/ml(稀释50倍)时，对两个厂家的鲎试剂均无干扰作用。选择样品浓度为0.25mg/ml，鲎试剂灵敏度为0.0625eu/ml进正式干扰试验。
[0221]
正式干扰实验4
[0222]
取4管1ml供试品原液(12.5mg/ml)，分别加入10ul适量浓度的内毒素溶液，混匀，再用细菌内毒素检查用水稀释至50倍，得到含内毒素分别为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的供试品溶液。按《中国药典》中的“细菌内毒素检查法凝胶法干扰实验”项，使用灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂进行实验，结果见表15和表16。
[0223]
表15福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0224][0225]
表16厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0226][0227][0228]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22122312。
[0229]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22111045。
[0230]
正式干扰实验结果表明：3批样品对两个厂家鲎试剂的es和e
t
均在0.5λ～2.0λ范围之内(包括0.5λ和2.0λ)，均符合鲎试剂灵敏度复核的要求，确认在50倍(浓度为0.25mg/ml)稀释下无干扰作用，且内毒素含量小于0.25eu/mg。
[0231]
干扰预实验5
[0232]
用四氢呋喃与吐温80(ⅱ)(体积比4：1)(v/v)混合溶液对棕榈酸帕利哌酮注射液溶解制成10mg/ml的帕利哌酮溶液，用细菌内毒素检查用水分别稀释至1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml一系列浓度，记作npc，同时制备上述每一浓度试验液中均含有2λ浓度标准内毒素的供试品阳性对照溶液，记作ppc。阴性对照溶液为细菌内毒素检查用水，记作nc。取效价为9000eu/支的细菌内毒素标准品，按照标准品说明书，加入1ml细菌内毒素检查用水溶解，然后用细菌内毒素检查用水制成所需的细菌内毒素标准溶液，作为阳性对照溶液pc。
[0233]
取两个不同厂家的鲎试剂，分别与上述npc、ppc、nc和pc进行反应，每一浓度重复两管。预试验结果如下表17和表18。
[0234]
表17福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0235][0236][0237]
表18厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0238][0239]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22120912。
[0240]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.125eu/ml，该鲎试剂的批号为22111043。
[0241]
由表17和表18的结果可以初步了解：浓度为10mg/ml的棕榈酸帕利哌酮供试品溶液，用细菌内毒素检查用水稀释至0.25mg/ml(稀释40倍)时，对两个厂家的鲎试剂均无干扰作用。选择样品浓度为0.25mg/ml，鲎试剂灵敏度为0.0625eu/ml进正式干扰试验。
[0242]
正式干扰实验5
[0243]
取4管1ml供试品原液(10mg/ml)，分别加入10ul适量浓度的内毒素溶液，混匀，再用细菌内毒素检查用水稀释至40倍，得到含内毒素分别为2λ、λ、0.5λ、0.25λ的供试品溶液。按《中国药典》中的“细菌内毒素检查法凝胶法干扰实验”项，使用灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂进行实验，结果见表19和表20。
[0244]
表19福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0245][0246][0247]
表20厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0248][0249]
需要说明的是，上述福州新北生化工业有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22122312。
[0250]
上述厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂的λ＝0.0625eu/ml，该鲎试剂的批号为22111045。
[0251]
正式干扰实验结果表明：3批样品对两个厂家鲎试剂的es和e
t
均在0.5λ～2.0λ范围之内(包括0.5λ和2.0λ)，均符合鲎试剂灵敏度复核的要求，确认在40倍(浓度为0.25mg/ml)稀释下无干扰作用，且内毒素含量小于0.25eu/mg。
[0252]
回收实验
[0253]
用溶剂替代供试品原液，按供试品原液的最小稀释倍数(40倍)稀释进行内毒素回收实验，最小稀释倍数内毒素回收合格，则进行更大倍数稀释时也合格。结果参见表21和22。
[0254]
表21福州新北生化工业有限公司的鲎试剂检测结果
[0255][0256]
表22厦门鲎试剂股份有限公司的鲎试剂检测结果
[0257][0258][0259]
综上，棕榈酸帕利哌酮原料药属于非水溶性药物，为了进行内毒素检测，选择四氢呋喃与吐温混合溶液为溶剂，制成5～25mg/ml的样品原液，然后用细菌内毒素检查用水稀释，再与鲎试剂反应。采用厦门鲎试剂生物技术股份有限公司和福州新北生化工业有限公司生产的灵敏度为0.0625eu/ml的鲎试剂，确定结果无干扰作用。因此棕榈酸帕利哌酮样品可适用细菌内毒素检查法，且3批样品内毒素含量小于0.5eu/mg，符合规定。
[0260]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，包括：将棕榈酸帕利哌酮待测样品、溶剂和细菌内毒素检查用水混合形成供试品溶液，而后进行检测，其中，所述溶剂为四氢呋喃和吐温混合形成的混合溶液。2.根据权利要求1所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，所述四氢呋喃和所述吐温的体积比为1.5:1-15:1，优选为2:1-8:1；更优选为4:1。3.根据权利要求1所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，所述吐温包括吐温80和吐温20中的至少一种；优选地，所述吐温为注射用吐温，优选所述吐温80为吐温80(ii)；优选地，所述四氢呋喃为色谱级四氢呋喃。4.根据权利要求1所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度在0.5mg/ml以下；优选地，所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度为0.0625-0.5mg/ml；优选为0.125-0.5mg/ml；更优选为0.125-0.25mg/ml。5.根据权利要求1-4任一项所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，包括：将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品用所述溶剂溶解形成母液，而后再用所述细菌内毒素检查用水稀释所述母液形成所述供试品溶液；优选地，所述母液的浓度为5-25mg/ml；优选为12.5mg/ml。6.根据权利要求1-4任一项所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，包括：将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品用所述溶剂溶解形成母液，而后再用细菌内毒素检查用水稀释所述母液形成所述供试品溶液；其中，所述母液的浓度为5-25mg/ml；所述供试品溶液中的棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度在0.5mg/ml以下；所述四氢呋喃和所述吐温的体积比为1.5:1-15:1。7.根据权利要求1所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，还包括：制备细菌内毒素标准品阳性对照品和供试品阳性对照品；优选地，还包括对细菌内毒素标准品阳性对照品、供试品阳性对照品以及细菌内毒素检测用水进行检测。8.根据权利要求7所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，包括：将细菌内毒素检查用水与细菌内毒素标准品混合形成浓度为2*鲎试剂灵敏度的细菌内毒素标准品阳性对照品；将所述棕榈酸帕利哌酮待测样品和所述溶剂混合形成母液，而后依次加入细菌内毒素标准品溶液和细菌内毒素检查用水形成供试品阳性对照品，其中，所述供试品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度与细菌内毒素标准品阳性对照品中细菌内毒素标准品的浓度一致；所述供试品阳性对照品中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度与所述供试品溶液中所述棕榈酸帕利哌酮待测样品的浓度一致。9.根据权利要求1-4或7-8任一项所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，包括：利用凝胶法或者光度法进行检测。10.根据权利要求9所述的棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法，其特征在于，检测采用的鲎试剂的灵敏度为0.0625-0.125eu/ml；和/或，所述棕榈酸帕利哌酮待测样品包括棕榈酸帕利哌酮原料药样品或棕榈酸帕利哌酮制剂样品。

技术总结
本发明涉及细菌内毒素检测技术领域，具体而言，涉及棕榈酸帕利哌酮的细菌内毒素的检测方法。该检测方法包括：将棕榈酸帕利哌酮待测样品、溶剂和细菌内毒素检查用水混合形成供试品溶液，而后进行检测，其中，所述溶剂为四氢呋喃和吐温混合形成的混合溶液。本发明提供的检测方法能将棕榈酸帕利哌酮待测样品完全溶解，选择的溶剂不会对细菌内毒素的检测造成干扰，有效解决了内毒素被样品包裹而不能全部释放的问题，对难溶性注射剂的安全性具有非常重要的意义。的意义。的意义。


技术研发人员：侯艳辉 于盼盼 付龙 廖春花 陈慧君 陈浩斌
受保护的技术使用者：丽珠医药集团股份有限公司
技术研发日：2023.04.24
技术公布日：2023/9/5