一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和HPV感染的液体功能性敷料及其制备方法与流程

一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料及其制备方法
技术领域
1.本发明涉及生物医药、医疗器械技术领域，具体涉及一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料及其制备方法。


背景技术：

2.宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤，其主要病因与人乳头瘤病毒(hpv)持续性感染有关。尖锐湿疣(condyloma acuminatum，ca)又称生殖器疣，是由hpv感染所致的以肛门、生殖器部位增生性损害为主要表现的性传播疾病。防治宫颈癌、尖锐湿疣的关键在于抑制hpv病毒的复制增殖。
3.人类乳头瘤病毒(human papilloma virus，简称：hpv)是一种双链dna病毒，直径55nm，具有球形外壳，主要感染皮肤粘膜上皮，导致病变。酸酐化牛β-乳球蛋白是经过酸酐修饰后得到的蛋白，研究表明酸酐化牛β-乳球蛋白对引发宫颈癌、尖锐湿疣的hpv有高效靶向抑制作用，可有效清除hpv病毒，阻断hpv持续性感染。但目前酸酐化牛β-乳球蛋白敷料产品治疗效果有限，还难以满足治疗需求。


技术实现要素：

4.鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料及其制备方法。
5.本发明技术方案如下：
6.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.05％～0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、4～10％甘油、1～5％卡波姆和水；所述酸酐选自甲基六氢邻苯二酸酐、甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐中的至少一种。
7.本发明的研究结果显示，不同结构酸酐修饰的牛β-乳球蛋白对hpv的破坏作用具有显著差异，其中甲基六氢邻苯二酸酐、甲基四氢邻苯二酸酐的效果优于琥珀酸酐。甲基四氢邻苯二酸酐与琥珀酸酐组合修饰的效果优于其他酸酐。
8.优选的，所述卡拉姆为卡拉姆934。
9.优选的，所述酸酐为摩尔比1～2:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐。
10.优选的，所述酸酐为摩尔比1:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐。
11.优选的，所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
12.(1)将酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为0.5-1m酸酐溶液；
13.(2)将牛β-乳球蛋白溶于磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15-20mg/ml，得蛋白溶液；
14.(3)将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，孵育至少l小时，透析，过滤除菌，保存备用。
15.优选的，酸酐溶液与蛋白溶液体积比为1:3-5。
16.本发明还提供一种所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，溶胀后，在小于45℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
17.与现有技术相比，本发明的有益成果在于：
18.本发明液体功能性敷料主要由0.05％～0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、4～10％甘油、1～5％卡波姆和水组成，适用于阻断生殖器的hpv感染，防治宫颈癌、尖锐湿疣。
19.本发明液体功能性敷料产品对引起尖锐湿疣、宫颈癌的hpv病毒具有破坏作用，有效防治hpv，且起效快。
20.本发明产品配方简单，有利于控制生产成本。
具体实施方式
21.为使本领域技术人员更好的理解本发明技术内容，下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明。
22.实施例1
23.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和余量水；
24.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
25.(1)将甲基六氢邻苯二酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
26.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
27.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
28.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，室温溶胀6h，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
29.实施例2
30.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和余量水；
31.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
32.(1)将甲基四氢邻苯二酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
33.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
34.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
35.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，室温溶胀6h，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
36.实施例3
37.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度
的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
38.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
39.(1)将琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
40.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
41.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
42.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，室温溶胀6h，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
43.实施例4
44.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
45.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
46.(1)将摩尔比1:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
47.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
48.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
49.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，溶胀后，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
50.实施例5
51.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
52.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
53.(1)将摩尔比2:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
54.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
55.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
56.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，室温溶胀6h，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
57.实施例6
58.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
59.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
60.(1)将摩尔比1:1的甲基六氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
61.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
62.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
63.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，室温溶胀6h，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
64.实施例7
65.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.05％酸酐化牛β-乳球蛋白、4％甘油、5％卡波姆和水；
66.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
67.(1)将摩尔比1:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为1m酸酐溶液；
68.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
69.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
70.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，溶胀后，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
71.实施例8
72.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
73.所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：
74.(1)将摩尔比1:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为0.5m酸酐溶液；
75.(2)将牛β-乳球蛋白溶于ph8.5的0.1m磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15mg/ml，得蛋白溶液；用5m的氢氧化钠溶液调节ph为8.5-9；
76.(3)按照体积比1:5将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，在温度为25℃的条件下孵育l小时，置于7.5kda透析袋中用ph7.4磷酸盐缓冲液透析24-48h，再用0.45um微孔滤膜过滤除菌，4℃保存备用。
77.所述的液体功能性敷料的制备方法，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，溶胀后，在25℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。
78.实施例9
79.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，包括以下质量浓度的成分：0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、10％甘油、1％卡波姆和水；
实验组2(实施例2)3.0
×
1051.2
×
104实验组3(实施例3)6.3
×
1064.2
×
104实验组4(实施例4)3.3
×
104＜103实验组5(实施例5)5.7
×
104＜103实验组6(实施例6)4.8
×
1052.7
×
104100.以上结果表明，本发明液体功能性敷料产品对引起尖锐湿疣、宫颈癌的hpv病毒具有破坏作用，有效防治hpv。对比组1～组3可知，与琥珀酸酐相比，甲基六氢邻苯二酸酐、甲基四氢邻苯二酸酐对hpv具有显著的抑制效果。对比组1、4、5、6可知，甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐组合酸酐对hpv病毒的破坏作用显著高于其他样品。实施例7-实施例10样品使用效果与实施例4相似。
101.以上所述仅为本发明的部分实施例而已，并不用限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和hpv感染的液体功能性敷料，其特征在于，包括以下质量浓度的成分：0.05％～0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、4～10％甘油、1～5％卡波姆和水；所述酸酐选自甲基六氢邻苯二酸酐、甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐中的至少一种。2.根据权利要求1所述的液体功能性敷料，其特征在于，所述酸酐为摩尔比1～2:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐。3.根据权利要求1所述的液体功能性敷料，其特征在于，所述酸酐为摩尔比1:1的甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐。4.根据权利要求1所述的液体功能性敷料，其特征在于，所述酸酐化牛β-乳球蛋白的制备方法包括以下步骤：(1)将酸酐溶于二甲基亚砜中，得到浓度为0.5-1m酸酐溶液；(2)将牛β-乳球蛋白溶于磷酸二氢钠溶液中，使蛋白终浓度为15-20mg/ml，得蛋白溶液；(3)将酸酐溶液加入蛋白溶液中，震荡混匀，孵育至少l小时，透析，过滤除菌，保存备用。5.根据权利要求1所述的液体功能性敷料，其特征在于，酸酐溶液与蛋白溶液体积比为1:3-5。6.权利要求1至权利要求5任一项所述的液体功能性敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将卡波姆均匀分散于水中，溶胀后，在小于45℃条件下加入甘油、酸酐化牛β-乳球蛋白，搅拌均匀，搅匀即得。

技术总结
本发明提供一种用于防治宫颈癌、尖锐湿疣和HPV感染的液体功能性敷料及其制备方法，所述液体功能性敷料包括以下质量浓度的成分：0.05％～0.1％酸酐化牛β-乳球蛋白、4～10％甘油、1～5％卡波姆和水；所述酸酐选自甲基六氢邻苯二酸酐、甲基四氢邻苯二酸酐和琥珀酸酐中的至少一种。本发明液体功能性敷料适用于阻断HPV感染，可有效预防和治疗宫颈癌、尖锐湿疣。疣。


技术研发人员：陈飞军 姜涛
受保护的技术使用者：湖南巴德医药科技有限公司
技术研发日：2023.04.26
技术公布日：2023/9/11