DNA检测设备的制作方法

dna检测设备
技术领域
1.本发明属于疾病筛查领域，尤其涉及dna检测设备，特别是dna检测一体化设备。


背景技术：

2.疾病筛查(也称“疾病筛检”)是在健康的人群中，发现表面健康却可能有病或有缺陷的人。特别地，对于传染性疾病的筛查能够实现早发现、早诊治，有效控制传染病的传播。在各种传染性疾病中，性传播感染(sti)一直备受关注，根据美国疾病控制和预防中心最近的估计报告称，每年约增加2000万的sti感染者。遗憾的是，在18-44岁的成年人中，只有不到一半接受过艾滋病病毒(hiv)以外的sti检测，例如沙眼衣原体(ct)和淋病奈瑟菌(ng)的筛查。然而，考虑隐私性和便利性，大多数人不愿意去筛查机构进行传染病筛查，特别是性病筛查。因此，有必要设计一种供普通大众在家中使用的便捷的疾病筛查设备。


技术实现要素：

3.因此，本发明的目的在于克服上述现有技术的缺陷，提供一种dna检测设备，包括：
4.提取模块，用于从样品中提取dna产物；
5.扩增模块，用于扩增所述dna产物，其包括：
6.分配器，用于将所述dna产物分成至少两份dna产物子集，和
7.至少两个扩增室，分别用于扩增所述至少两份dna产物子集以获得至少两份扩增子；以及
8.检测模块，其包括用于检测不同的病原体的至少两个检测室，所述至少两个检测室分别用于检测所述至少两份扩增子。
9.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述至少两个检测室中的每个设置有侧流试纸条以用于检测不同的病原体。
10.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述提取模块、所述扩增模块和所述检测模块都设置在一个基板上。
11.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述提取模块包括：
12.浓缩装置，用于在滤膜上浓缩样品细胞；
13.裂解装置，用于将所述样品细胞裂解获得dna细胞；以及
14.纯化装置，用于将所述dna细胞进行洗脱获得纯化的dna产物。
15.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述提取模块包含多个腔室和所述多个腔室之间的流体连通的通道，以及其中，所述通道上设置有阀门，所述阀门用于控制所述通道的连通和关闭。
16.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述阀门为弹性体。
17.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述提取模块还包括用于驱动所述阀门的驱动装置，所述驱动装置包括旋转轴，所述旋转轴包括中心轴杆和设置在所述中心轴杆上的至少一个致动部件，所述致动部件包括圆环部和沿所述圆环部的外圆周周向设置的用于致
动所述阀门的至少一个突出部。
18.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述旋转轴包括中心轴杆和设置在所述中心轴杆的不同纵向位置上的至少两个致动部件，从而同时驱动至少两个阀门。
19.根据本发明的dna检测设备，优选地，所述驱动装置还包括压阀器，其由所述至少一个致动部件驱动，用于在垂直于所述通道的方向上致动所述阀门以打开或关闭所述阀门。
20.与现有技术相比，本发明的dna检测设备体积小、操作方便、适合家用、隐私性高。
附图说明
21.以下参照附图对本发明实施例作进一步说明，其中：
22.图1为根据本发明实施例的poct设备的结构框图；
23.图2为根据本发明实施例的poct的提取-扩增-检测过程；
24.图3示出本发明的示例性侧流试纸条lfs；
25.图4示出本发明的lfs的检测结果说明；
26.图5示出本发明实施例的poct设备的结构示意图；
27.图6示出本发明实施例的poct设备的提取模块的印刷电路板示意图；
28.图7a和7b分别示出了图6所示的poct设备的阀门单元的驱动装置的立体视图和俯视图；
29.图8和9示出示例性一分三沟道的示意图；
30.图10a-10d示出稳定性测试的poct测试结果和标准商业方法测试结果；
31.图11示出采用本发明的poct的alpha测试中临床样本dna产物扩增和检测结果；
32.图12所示的采用本发明的poct的beta测试中临床样本dna产物扩增和检测结果；以及
33.图13a和13b分别示出针对up和uu的的lfs检测结果。
具体实施方式
34.为了使本发明的目的，技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图通过具体实施例对本发明进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
35.本发明的实施例提供一种专为普通大众设计的检测尿液中病原体沙眼衣原体(ct)和淋病奈瑟菌(ng)的即时检测(point-of-care testing,poct)设备。参见图1所示的poct设备的结构框图，其包括提取模块100、扩增模块200和检测模块300。
36.提取模块100用于提取尿液中的脱氧核糖核酸(dna)，具体地包括注射器101、过滤器102、离心管103和处理室104。操作时，首先通过注射器101将尿液施加至过滤器102并将尿液中的细胞预浓缩在过滤器102的滤膜上，并优选地通过废液盒收集废弃物。然后，通过注射器101将裂解缓冲液施加至过滤器102的滤膜上以裂解滤膜上的尿液细胞并将裂解物转移至离心管103中。接下来，将离心管103中的裂解物转移至装有沸石的处理室104中进行处理，获得经纯化的包含dna产物的洗脱液。该实施例的dna提取过程需要约3分钟。
37.扩增模块200用于将dna产物分成三份并分别进行扩增，其包括一分三分配器201
和三个对应的电等温扩增室202、203和204，并且优选地还包括温度传感器和振动器(图1中未示出)，温度传感器用于监测电等温扩增室的温度，振动器用于混合试剂以进行扩增反应。dna产物通过一分三分配器201分为三份，然后分别通过电等温扩增室202-204扩增。三个扩增室预装载有不同的扩增剂，分别针对不同的病菌或病原体进行扩增。扩增剂可以采用引物、探针或扩增缓冲剂。该实施例的扩增操作需要约24分钟。
38.检测模块300用于对扩增的dna产物进行检测，其包含三个检测室301、302和303，每个检测室容纳有侧流试纸条(lfs)并且预装有运行缓冲液。当dna产物侧向流动时，试纸条上显现出指示检测结果的相应的条带信号。此外，检测模块300还可以对检测的条带信号强度进行半定量化，该信号强度与病原体的相对浓度成正比，由此可以获得病原体浓度的半定量化检测结果。在该实施例中，三个检测室301-303中的试纸条分别用于检测病原体沙眼衣原体(ct)、淋病奈瑟菌(ng)和扩增对照(ac)。ac装置以人类基因作为内部扩增对照。
39.为了进一步说明本发明poct设备的工作原理，结合图2给出该实施例的poct设备的测试流程。图2具体地示出该实施例的poct的提取-扩增-检测过程。
40.步骤a.)通过注射器101在容器中吸取20ml尿液样品，注射器101出口侧设置有过滤器102，在该实施例中，过滤器102包括厚度为0.45μm、直径为28mm的聚醚砜(pes)膜。
41.步骤b.)将尿液从注射器101挤出并经过过滤器102，尿液中的细胞集中在pes膜上，废弃物优选地通过废液盒收集。
42.步骤c.)在注射器101中注入空气并挤压注射器101从而吹扫过滤器102以帮助去除pes膜上的残留尿液。
43.步骤d.)在注射器101中注入1ml磷酸盐缓冲盐溶液(pbs)并将其挤出通过过滤器102，从而冲洗pes膜上的杂质。
44.步骤e.)再次通过注射器101推动空气吹扫过滤器102以去除pes膜上残留的pbs。
45.步骤f.)将聚集有尿液细胞的过滤器102取出。
46.步骤g.)使用另一个注射器将900ul调节的裂解缓冲液注射至过滤器102以裂解尿液细胞，用干净的微量离心管收集裂解物。
47.步骤h.)将离心管中的裂解物倒入装有0.5g沸石的注射器中。将裂解液与沸石充分混合后，通过1.6μm厚的滤膜滤除沸石粉末，获得纯化的包含dna产物的洗脱液。
48.步骤i.)将洗脱液与扩增试剂混合并分成3份，每份大约50μl，该扩增试剂中包括针对待检测的多种病原体的引物。
49.步骤j.)步骤i.)获得的每一份溶液在扩增室中等温扩增。
50.步骤k.)等温扩增后的大约10ul扩增子与100ul lfs运行缓冲液混合，然后在lfs条上检测和可视化扩增子，信号将在3～10分钟内产生。
51.侧流试纸条是一种即用型试纸，它基于使用金颗粒的侧流技术。该试纸包括三个区域：质控区、背景和检测区。质控区中出现质控线说明检测结果有效，检测区中出现检测线意味着样品中的病原体呈阳性。参见图3所示的lfs以及图4所示的lfs检测结果说明，对照图4，用户就能够解释样品中病原体的情况。
52.在上述测试流程中，有几个操作步骤需要用户操作设备。在测试之前，首先在设备中预装载试剂和干粒，干粒包括引物干粒、探针干粒以及催化酶干粒。在提取模块中装载pbs和裂解液。在扩增模块每个腔中装载干粒和试剂。在检测模块每个腔中装载运行缓冲溶
液。然后装载尿液。最后，用户简单地通过阅读可视化带而获得直接结果。
53.基于前述本发明的工作原理，提供一种专为普通大众设计的检测尿液中病原体沙眼衣原体(ct)和淋病奈瑟菌(ng)的即时检测(poct)设备，参见图5所示的本发明实施例的poct设备的结构示意图，其包括提取模块51、扩增模块52和检测模块53。
54.提取模块51包括废液盒511、第一至第三储液盒512至514、第一过滤器515、沸石盒516、第一振动器517、第二过滤器518、溶液转移盒519、若干阀门2至15和若干导管。第一至第三储液盒512-514分别通过导管连接至第一过滤器515，阀门7、阀门8和阀门9分别设置在第一储液盒512、第二储液盒513、第三储液盒514与第一过滤器515之间用于控制储液盒与过滤器之间的连通。另外，第一至第三储液盒512至514还通过导管连接至空气泵520，空气泵20用于实现吹扫清洁。阀门5、3、4分别设置在第一至第三储液盒512至514与空气泵520之间。第一过滤器515为厚度0.45μm的pes滤膜。第一过滤器515的输出端分别通过不同的导管连接至废液盒511和沸石盒516。阀门10和11分别设置在第一过滤器515与废液盒511之间和第一过滤器515与沸石盒516之间。第一振动器517靠近沸石盒516设置以帮助沸石盒516内材料的混合。优选地，沸石盒516通过阀门12连通至大气以释放沸石盒516内的气压。沸石盒516的输出端通过导管连接至第二过滤器518，导管上设置有阀门2。第二过滤器518为厚度1.6μm的pes滤膜。第二过滤器518的输出端通过导管连接至溶液转移盒519，阀门13控制第二过滤器518与溶液转移盒519之间的连通。溶液转移盒519的一个端口通过导管连接至空气泵520，另一个端口作为提取模块51的输出端口，阀门6控制溶液转移盒519与空气泵520之间的连通，阀门15控制提取模块51的输出。优选地，溶液转移盒519还设置有压力释放端口，通过阀门14控制溶液转移盒519与大气的连通。
55.扩增模块52包括混合室521、第二振动器522、第一至第三溶液分配通道523-1至523-3、第一至第三扩增反应室524至526、加热器527、第三振动器528、若干阀门16、17、18.1至18.3、19.1至19.3、20和21.1至21.3，以及若干导管。混合室521连接至提取模块51的输出端，第二振动器522靠近混合室521设置，混合室521的输出端连接至第一至第三溶液分配通道523-1至523-3，阀门17控制混合室与溶液分配通道之间的连通。优选地，混合室521通过阀门16与大气连通，第一至第三溶液分配通道523-1至523-3分别通过阀门18.1、18.2和18.3与大气连通。第一至第三溶液分配通道523-1至523-3分别连接至第一至第三扩增反应室524至526。优选地，第一至第三扩增反应室中预装载有不同的扩增试剂以用于不同的病原体或病菌扩增，阀门19.1、19.2和19.3分别控制各个分配通道和相应的反应室之间的流体连通。第一至第三扩增反应室524至526优选地分别具有压力释放端口，通过阀门20控制反应室与大气的连通。第一至第三扩增反应室524至526的输出端作为扩增模块52的三个输出端，阀门21.1至21.3分别控制扩增模块52的三个输出。
56.检测模块53包括第一至第三溶液转移盒531至533、第一至第三检测单元534至536、阀门23.1至23.3和若干导管。第一至第三溶液转移盒531至533一端分别连接至扩增模块52的三个输出端，另一端分别连接至第一至第三检测单元534至536，阀门23.1、23.2和23.3分别控制溶液转移盒与相应的检测单元之间的连通，另外，优选地，第一至第三溶液转移盒531至533经由阀门1连接至空气泵520。优选地，第一至第三检测单元534至536中设置有侧流试纸条(lfs)。
57.该实施例的poct设备的示例性检测过程如下：
58.试剂和样品装载步骤：
59.将待检测尿液样品存入第一储液盒512中，在第二储液盒513中装载900μl裂解缓冲液，在第三储液盒514中装载1ml pbs溶液，在沸石盒516中装载0.5g沸石，在混合室521中装载110.4μl缓冲液，在第一至第三反应室524至526中分别装载催化酶干粒和扩增试剂，在第一至第三检测单元534至536中分别装载lfs运行缓冲液。
60.dna提取步骤：
61.(1)打开阀门7，第一储液盒512中的尿液流动通过第一过滤器515以在滤膜上聚集尿液细胞。同时打开阀门10，过滤废液被废液盒511收集。优选地，随后再打开阀门5，空气泵520泵送空气吹扫第一储液盒512和第一过滤器515，清除残留的尿液。
62.(2)优选地，打开阀门9，第三储液盒514中的pbs溶液流动通过第一过滤器515以冲洗滤膜上的杂质。更优选地，打开阀门4，空气泵520泵送空气流过第三储液盒514和第一过滤器515，吹扫残留的pbs。
63.(3)打开阀门8，第二储液盒513中的裂解缓冲液流动通过第一过滤器515并与滤膜上聚集的尿液细胞相互作用获得尿液裂解物。
64.(4)打开阀门11，尿液裂解物流动至沸石盒516并与沸石相互作用，第一振动器517促进尿液裂解物与沸石的混合，获得包含dna产物的洗脱液。
65.(5)打开阀门2，洗脱液通过第二过滤器518过滤掉沸石粉末，获得纯化的包含dna产物的洗脱液。
66.(6)打开阀门13，溶液转移盒519获取39.6μl纯化的洗脱液；再打开阀门15，将纯化的洗脱液转移至混合室521。优选地，随后再打开阀门6，空气泵520泵送空气流过溶液转移盒519以吹扫残留的洗脱液。
67.扩增步骤：
68.优选地在振动器522的作用下，纯化的洗脱液与混合室521中预装载的缓冲液混合获得至少150μl混合溶液，然后打开阀门17和阀门19.1至19.3，混合溶液被分成三份，分别通过第一至第三溶液分配通道523-1至523-3到达第一至第三扩增反应室524至526进行等温扩增。在该实施例中，第一扩增反应室为ct反应室，预装载有催化酶干粒和ct引物和探针，第二扩增反应室为ng反应室，预装载有催化酶干粒和ng引物和探针，第三扩增反应室为ac反应室，预装载有催化酶干粒和ac引物和探针。
69.检测步骤：
70.打开阀门21.1至21.3和阀门23.1至23.3，第一至第三溶液转移盒531至533分别获取约5～10μl扩增子并转移至第一至第三检测单元534至536进行检测。第一检测单元中设置有ct侧流试纸条，第二检测单元中设置有ng侧流试纸条，第三检测单元中设置有ac侧流试纸条。用户通过分析侧流试纸条上的带状信号就能够获知尿液样品中的病原体的情况。
71.在本发明中，图5所示的poct设备可以设置在印刷电路板(pcb)上，参见图6所示的poct设备的提取模块的印刷电路板示意图，其中，在聚合物基底(例如pmma板)上刻蚀腔室和通道用作储液盒、废液盒、溶液转移盒、放置振动器和过滤器的容器、以及导管等。为了清晰，在图6中仅示出了若干导管和13个阀门单元。每个阀门单元由pmma板上的刻蚀通道和泪珠状弹性体组成。阀门701是常开阀。常开阀是一种保持打开状态并允许流体在不致动时通过的阀门。通过驱动装置在垂直方向对阀门弹性体施加压力来触发阀门701的关闭。图7a和
[0079][0080][0081]
根据本发明的其他实施例，阀门单元不采用压阀器，致动部件上设置的突出部足够长，当突出部面对阀门时，能够推动阀门关闭。
[0082]
根据本发明的其他实施例，致动部件上不设置凹痕部，致动部件的圆环部外圆周所在的径向位置能够允许阀门的松弛。
[0083]
根据本发明的其他实施例，突出部能够缩回至圆环内部，从而使得致动部件能够更加灵活地满足多种控制要求。
[0084]
根据本发明的其他实施例，旋转轴包括中心轴杆和直接设置在中心轴杆的不同纵向位置和不同旋转角的突出部，当中心轴杆旋转至突出部面对压阀器或者阀门时，阀门关闭。
[0085]
对于本发明的一分三分配器，可以采用在印制电路板上刻蚀沟道来获得，如图8和9所示的示例性一分三沟道的示意图。本领域技术人员可以采用本领域公知的方法获得任意形式的一分三以及一分多沟道。
[0086]
为评价化学试剂的稳定性，采用本发明的poct设备进行了加速稳定性试验和测试。
[0087]
产品在室温下的预期储存期为6个月。加速稳定性测试是一种快速估计产品的有
效期或寿命的方法，而实时数据需要很长时间才能收集。本发明通过将产品置于受控的升高水平的应力(例如温度或湿度)下来进行加速稳定性研究。测试周期可用于预测产品到期的预期或要求的时间范围。在这个加速稳定性测试中，关键试剂储存在升高的压力条件下(对应针对此设备和测试的室温)。
[0088]
(1)试剂成分
[0089]
poct设备共有5种试剂成分，包括：磷酸盐缓冲液(pbs)、引物-探针混合、醋酸镁(mgoac)、再水化缓冲液和试纸条缓冲液。
[0090]
pbs是一种室温稳定的溶液。引物-探针合物以粉末形式。关键试剂及其各自的储存温度如下表2所示，用于稳定性测试。每两周对设备和试剂组件进行测试和检测。对于每种类型，测试结果并与标准商业实时pcr试剂盒进行比较，直到结果在连续2个时间点不一致。测试周期为6个月。程序与设备原始协议相同。
[0091]
表2
[0092]
材料原始存储温度加速稳定性测试的温度醋酸镁(mgoac)-20℃室温再水化缓冲液-20℃室温试纸条缓冲液2-8℃室温
[0093]
(2)测试程序
[0094]
首先，将足量的试剂1)醋酸镁(mgoac)、2)再水化缓冲液和3)试纸条缓冲液储存在室温下。在每个测试中使用等分的试剂。
[0095]
在每个测试中，准备样品pbs以及ct和ng质粒克隆。将ct和ng质粒克隆稀释到所需浓度(300拷贝数/反应和3000拷贝数/反应)。
[0096]
1.准备带有ct和ng质粒克隆的“样品”。将浓度为300拷贝数/反应-1x lod和3000拷贝数/反应-10x lod的ct和ng质粒克隆添加到设备中。
[0097]
2.测试前将试剂和催化酶干粒预加载到设备中。
[0098]
3.操作设备：将“样品”倒入设备的样品槽中进行提取。
[0099]
4.样品进入设备的扩增室，然后进行扩增20分钟。
[0100]
5.产品被传送到设备的检测模块，其中插入了条带。结果通过lfs波段信号可视化。
[0101]
6.在poct设备测试的同一时间点，使用少量提取的dna并通过标准商业方法(即ct/ng qpcr试剂盒)进行测试，以确认克隆材料在合理的ct值下运行良好。
[0102]
7.每两周重复步骤1到6。
[0103]
稳定性试验的试验周期为6个月。表3示出poct测试的时间点。
[0104]
表3
[0105]
时间点日期开始2020年11月17日第2周2020年12月1日第4周2020年12月15日第6周2020年12月29日第8周2021年1月12日
第10周2021年1月26日第12周2021年2月9日第14周2021年2月23日第16周2021年3月9日第18周2021年3月23日第20周2021年4月6日第22周2021年4月20日第24周2021年5月4日第26周2021年5月18日
[0106]
(3)测试结果
[0107]
每次稳定性测试的poct测试结果和标准商业方法测试结果在图10a-10d中示出。对于每种病原体类型，每个时间点捕获2个条带，左侧的条带测试300拷贝数/反应(l或1fg)，右侧的条带测试3000拷贝数/反应(h或10fg)。
[0108]
从图10a和10c可已看出，对于poct设备，试纸条显示连续2个时间点没有不一致的结果，因此，产品在常温下的储存期为6个月以上。而对于实时pcr ct值，在每次测试时获得一致且相似的ct值。
[0109]
另外，对本发明的poct设备进行alpha和beta测试以进行性能评价。
[0110]
(1)alpha产品测试性能评价——含有ct和ng的尿液标本
[0111]
使用10个临床样本进行评价。样本被本发明的poct设备提取、扩增和检测。干粒预装载在腔室中。通过按下振动器的按钮进行混合。在39-40℃下加热20分钟后，腔室内的溶液与100ul运行缓冲液。运行缓冲液预装在检测模块的检测单元中。通过lfs条带信号检测和观察结果。
[0112]
首先确定患者临床状态的常规方法的可用性
[0113]
常规方法是ct/ng实时pcr来确认已知临床样本的结果。
[0114]
然后将使用硬件测试已知的临床样本，并通过所有评估病例中真阳性和真阴性的比例计算准确度accuracy，灵敏度sensitivity和特异性specificity。
[0115][0116]
sensitivity＝tp/(tp+fn)
×
100％
[0117]
spesificity＝tn/(tn+fp)
×
100％
[0118]
真阳性(tp)＝正确识别为患者的病例数
[0119]
假阳性(fp)＝错误识别为患者的病例数
[0120]
真阴性(tn)＝正确识别为健康的病例数
[0121]
假阴性(fn)＝错误识别为健康的病例数
[0122]
共10份尿样，4℃保存，包含阳性沙眼衣原体和/或淋病奈瑟菌，阴性结果用于评价研究。检测病原体ct和尿液ng的poct装置作为检测目标病原体的候选方法。将结果与ct/ng实时pcr进行比较。然后在样品测试后用0.1％漂白剂溶液清洗硬件，然后用无脱氧核糖核酸酶水(无dna酶水)清洗。
[0123]
样本类型和数量的详细信息如下表4所示。
[0124]
表4
[0125][0126]
为了确定poct方法与标准常规方法的一致性，在检测病原体ct和ng的poct设备的硬件上测试了总共10个样本，ct/ng实时pcr用作参考标准方法。结果显示在下表5中，其中ac表示扩增对照，是人体标本的对照。
[0127]
表5
[0128][0129][0130]
参见图11所示的采用本发明的poct的临床样本dna产物扩增和检测结果。从图11的结果可以看出，沙眼衣原体(ct)的临床表现为4个真阳性样本和6个真阴性样本，淋病奈瑟菌(ng)的临床表现是2个真阳性样本和8个真阴性样本。
[0131]
将该结果与验收标准进行比较，比较结果如下表6所示。
[0132]
表6
[0133][0134]
从表6可以看出，本发明的设备测试的10个临床样本的灵敏度和特异性均为100％。
[0135]
(2)beta产品测试性能评价——含ct和ng的尿液标本
[0136]
beta测试由香港一家临床实验室(新亚生命科技有限公司)进行，对10个临床样本进行评估。测试步骤与alpha测试相同。通过lfs波段信号检测和观察结果。
[0137]
为了获得灵敏度和特异性，提取的dna同时进行了ct/ng qpcr测试以进行比较，比较结果如下表7所示。
[0138]
表7
[0139][0140]
参见图12所示的采用本发明的poct的临床样本dna产物扩增和检测结果。从图12的结果可以看出，沙眼衣原体(ct)的临床表现为4个真阳性样本和6个真阴性样本，淋病奈瑟菌(ng)的临床表现是2个真阳性样本和8个真阴性样本。
[0141]
将该结果与验收标准进行比较，比较结果如下表8所示。
[0142]
表8
[0143]
[0144]
从表8可以看出，本发明的设备测试的10个临床样本的灵敏度和特异性均为100％。
[0145]
(3)其他传染病筛查的初步研究
[0146]
发明人还测试了本发明的poct设备检测其他传染病的可行性。设计了两对引物和探针，分别针对解脲支原体(uu)和细小解脲支原体(up)。uu和up的合成克隆dna用于测试新的引物/探针组。
[0147]
一组新的引物/探针灵敏度(每个反应特异性靶标(uu/up)的300和3x105拷贝中的阳性信号)和特异性(面板内非靶标(ct,ng、ac和阴性对照))进行测试。
[0148]
使用相同的等温扩增试剂盒和热曲线以及针对uu和up的新引物和探针组扩增不同类型和数量的克隆拷贝。然后使用之前测试中相同的lfs检测扩增产物。采用如下表9中所示的克隆浓度进行测定，针对每种类型的克隆浓度和两种类型的检测都使用单独的管。
[0149]
表9
[0150][0151]
参见图13a和13b所示的lfs结果，其分别示出up和uu的检测结果。
[0152]
从结果来看，两组引物在检测各自目标的3
×
105和300拷贝数时都表现出足够的灵敏度，其特异性也足以给出3
×
105拷贝数的其他目标(包括ct、ng、ac和阴性对照)的阴性结果。还可进一步研究检测uu/up阳性临床尿样。
[0153]
本发明实现了用于筛查多种疾病，特别是筛查沙眼衣原体(ct)和淋病奈瑟菌(ng)dna的一体机，并且能够供一般公众家中使用，提高了便利性和隐私性。
[0154]
本发明的poct设备不限于对尿液样品的检测，还可以对例如唾液样品、血液样品进行检测。
[0155]
虽然本发明已经通过优选实施例进行了描述，然而本发明并非局限于这里所描述的实施例，在不脱离本发明范围的情况下还包括所作出的各种改变以及变化。

技术特征：
1.一种dna检测设备，包括：提取模块，用于从样品中提取dna产物；扩增模块，用于扩增所述dna产物，其包括：分配器，用于将所述dna产物分成至少两份dna产物子集，和至少两个扩增室，分别用于扩增所述至少两份dna产物子集以获得至少两份扩增子；以及检测模块，其包括用于检测不同的病原体的至少两个检测室，所述至少两个检测室分别用于检测所述至少两份扩增子。2.根据权利要求1所述的dna检测设备，其中，所述至少两个检测室中的每个设置有侧流试纸条以用于检测不同的病原体。3.根据权利要求1或2所述的dna检测设备，其中，所述提取模块、所述扩增模块和所述检测模块都设置在一个基板上。4.根据权利要求1所述的dna检测设备，其中，所述提取模块包括：浓缩装置，用于在滤膜上浓缩样品细胞；裂解装置，用于将所述样品细胞裂解获得dna细胞；以及纯化装置，用于将所述dna细胞进行洗脱获得纯化的dna产物。5.根据权利要求1所述的dna检测设备，其中，所述提取模块包含多个腔室和所述多个腔室之间的流体连通的通道，以及其中，所述通道上设置有阀门，所述阀门用于控制所述通道的连通和关闭。6.根据权利要求5所述的dna检测设备，其中，所述阀门为弹性体。7.根据权利要求5所述的dna检测设备，其中，所述提取模块还包括用于驱动所述阀门的驱动装置，所述驱动装置包括旋转轴，所述旋转轴包括中心轴杆和设置在所述中心轴杆上的至少一个致动部件，所述致动部件包括圆环部和沿所述圆环部的外圆周周向设置的用于致动所述阀门的至少一个突出部。8.根据权利要求7所述的dna检测设备，其中，所述旋转轴包括中心轴杆和设置在所述中心轴杆的不同纵向位置上的至少两个致动部件，从而同时驱动至少两个阀门。9.根据权利要求7所述的dna检测设备，其中，所述驱动装置还包括压阀器，其由所述至少一个致动部件驱动，用于在垂直于所述通道的方向上致动所述阀门以打开或关闭所述阀门。10.根据权利要求5所述的dna检测设备，其中，所述提取模块还包括用于驱动所述阀门的驱动装置，所述驱动装置包括旋转轴，所述旋转轴包括中心轴杆和设置在所述中心轴杆上的至少一个突出部。

技术总结
本发明提供一种DNA检测设备，包括：提取模块，用于从样品中提取DNA产物；扩增模块，用于扩增所述DNA产物，其包括：分配器，用于将所述DNA产物分成至少两份DNA产物子集，和至少两个扩增室，分别用于扩增所述至少两份DNA产物子集以获得至少两份扩增子；以及检测模块，其包括用于检测不同的病原体的至少两个检测室，所述至少两个检测室分别用于检测所述至少两份扩增子。本发明的DNA检测设备体积小、操作方便、适合家用，便利性和隐私性高。便利性和隐私性高。便利性和隐私性高。


技术研发人员：侯国宝 梁卓雄
受保护的技术使用者：达雅高生命科技有限公司
技术研发日：2022.03.03
技术公布日：2023/9/12