一种雌激素受体调节剂的制备及其用途的制作方法

1.本发明描述了一种化合物，包括其光学异构体、几何异构体、溶剂化物、同位素衍生物、前药或其与可药用的酸、碱结合成的盐，并包含以此类化合物制备的组合物，以及此类化合物及其组合物在治疗/预防雌激素受体介导的相关疾病的方法。


背景技术：

2.骨质疏松(osteoporosis，op)是一种以骨量减少，常伴有骨骼疼痛、容易骨折为特征的退行性疾病。骨质疏松的病因多种多样，男性多发于55岁之后，女性多见于绝经期后，并且女性发病率远高于男性。严重影响中老年人生活质量，也为国家经济带来较大的损失。2014年统计显示，全世界2亿多人患有骨质疏松症。2018年在中国骨质疏松症发病人数在所有慢性疾病发病人数中排第三位，近年来骨质疏松症的发病率在逐年上升，预计到2050年，患有骨质疏松或是骨密度低于正常水平的人数将达到2亿以上，因此，骨质疏松在我们国家逐渐成为亟待解决的严重的社会公共卫生问题。
3.性激素的失调与骨质疏松有很大的关联性，研究显示雌激素受体(estrogen related receptor，err)在成骨细胞的成长与分化过程中发挥重要作用，逐渐成为治疗骨质疏松症重要靶点。补充雌激素可有效地预防绝经后激素降低所致的骨质疏松并骨折的危险性，因此，选择性堆激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulator，serm)因具有上述特征而引起了人们的注意。serm可选择性地结合于不同组织的的雌激素受体，相应地表现出多种生理效应，如与成骨细胞和心血管系统雌激素受体结合，表现出类激素作用；与乳腺、子宫内膜部位雌激素受体结合，表现出抗雌激素作用，另外还有serm表现出的抗癌、抗高血脂、抗糖尿病作用等。在妇女绝经后，雌激素失调很大程度上提高了骨质疏松发生的概率。目前，serm主要有三大类：三苯乙烯衍生物，如三苯氧胺，可显著防止骨流失，单对子宫内膜却又雌激素作用，长期使用导致子宫内膜增生，对其使用有严重限制；二氢萘衍生物，如萘氧啶，目前尚未公布后期临床的研究报道；苯并噻吩衍生物，如雷洛昔酚(raloxifene)，雷洛昔酚减少骨的重吸收并可使骨转换生化指标明显升高，同时还可影响脂代谢，降低ldl胆固醇水平，可满足绝经后妇女在防治骨质疏松方面的需求，雌激素带来的副作用也较小，但是在动物体内为期21个月的致癌性研究中，雷洛昔酚导致雌性动物的卵巢肿瘤发生率明显增加，雄性动物睾丸间质细胞瘤和前列腺瘤和腺癌发生率增加，具有潜在的危险性。2004年辉瑞公司(pfizer)与ligand制药公司共同研发的盐酸雷洛昔芬(lasofoxifene)，可帮助妇女保持骨骼强健，比雷洛昔芬更能提高脊椎骨密度，药效也更持久，但是并未得到美国fda的批准。
4.总之，现有的药物远远无法完美满足国内临床的巨大需求，仍需开发用于防止骨吸收的理想型药物，目前这也是一个亟待解决的世界性健康问题。


技术实现要素：

5.本发明的第一方面是提供一种雌激素受体调节剂及其组合物及其制备方法。
6.本发明的第二方面是提供一种雌激素受体调节剂，此类化合物可以显著抑制破骨细胞的增殖，同时在体内可以显著防止由绝经引起的骨流失，达到了意想不到的效果。
7.本发明的第三方面室提供的化合物可以在体内提高血清中的igf-1水平。
8.除本文另有特殊说明，本发明使用的专业术语均为本领域技术人员普遍了解的基本含义。
9.本发明提供一种具有如下式i结构的多官能团化合物：
[0010][0011]
及其光学异构体、几何异构体、溶剂化物、同位素衍生物、前药或其与可药用的酸、碱结合成的盐；
[0012]
其中：
[0013]
m选自1、2、或3；
[0014]
x选自ch、或n；
[0015]
y选自ch2、o、或s；
[0016]
表示成键或不成键；
[0017]
r1选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲基；
[0018]
r2选自氢、c
1-8
烷基、c
1-8
烷氧基、c
1-8
烷胺基；
[0019]
g选自：
[0020][0021]
n1选自0、1、或2；
[0022]
n2选自1、或2；
[0023]
n3选自2、或3；
[0024]
n4选自1、2、或3；
[0025]
n5选自2、或3；
[0026]
n6选自1、2、或3；
[0027]
n7选自2、或3；
[0028]
n8选自1、2、或3；
[0029]
z1选自ch、或n；
[0030]
z2选自ch、或n；
[0031]
z3选自o、或nh；
[0032]
z4选自ch、或n；
[0033]
z5选自o、nh、或ch2；
[0034]
r3选自
[0035]
n9选自1、2、或3；
[0036]
l选自
[0037]
r4选自c
1-8
烷基、c
2-8
烯基、c
2-8
炔基、c
3-8
碳环基、c
2-8
杂环基、c
6-12
的芳基、c
3-10
的杂芳基可被一个或多个不同的r5取代；
[0038]
r5选自氢、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲基、巯基、巯甲基、巯乙基。
[0039]
所述的化合物，如式ii所示：
[0040][0041]
式ii中取代基的定义如式i所定义的。所述的化合物，如式iii所示：
[0042][0043]
式iii中取代基的定义如式i所定义的。所述的化合物，具有如下结构：
[0044]
[0045]
[0046][0047]
一种选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators，serm)，包含所述的化合物。
[0048]
所述的化合物可用于治疗或预防雌激素受体介导的相关疾病，如骨质疏松症、高血脂症、癌症。
[0049]
预防或治疗骨质疏松症、癌症、降低血清胆固醇水平的药物组合物，包含所述的化合物与可药用的载体。
[0050]
治疗或预防骨质疏松症、癌症、高血清胆固醇症的方法包括向所需要治疗的个体给与治疗有效量的所述的化合物及其组合物。
[0051]
所述的药物组合物可制备用于注射、皮下给药、口服给药、或局部用药。
[0052]
所述的药物组合物的剂型可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、溶液制剂、悬浮液、乳剂、洗剂、脂质体、栓剂或膏剂。
[0053]
本发明中的术语光学异构体(optical isomerism)是指由于分子中存在不对称院子导致分子中的原子或原子团在空间的不同排布，对平面偏振光的偏振面发生不同影响产生的异构体，包括对映异构体(enantiomer)、非对映异构体(diastereoisomers)。
[0054]
本发明中的术语几何异构体是因双键或成环碳原子单键不能自由旋转而引起的变化异构体，同时包含因取代基的选择性强弱导致的位置异构，包括顺式、反式异构体，醛、酮式异构体，烯醇式异构体，邻位、间位异构体，由立体障碍引起的转动异构体等。
[0055]
本发明中的术语溶剂化物指的是化合物与药学上可接受的溶剂相互作用形成的络合物，药学上可接受的溶剂包括水、乙酸、乙醇等。
[0056]
本发明中的术语同位素衍生物是指化合物中某一个或多个原子或其化学基团被同位素取代而得到的产物。所述的同位素包括氘、
15
n、
31
p、
14
c等。
[0057]
本发明中的术语杂原子是指氮、氧、硼、磷、或硫。
[0058]
本发明中的术语卤素是指氟、氯、溴、或碘。
[0059]
本发明中的术语c
1-8
烷基是指含分子中含有1～8个碳原子组成的直链或支链的饱和脂肪族烃基。包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、异丁基、叔丁基、3-甲基-1-戊基、异辛基、2-甲基已基、3-甲基庚基等。
[0060]
本发明中的术语c
1-8
烷氧基是指分子中含1～8个碳原子的饱和脂肪族烃基在任意合理的位置插入氧原子或羟基的基团，包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、仲丁氧基、2-乙基乙氧基、乙氧基丁基、1-丙氧基-2-丙基、(s)-(+)-1-甲氧基-2-丙基、3-异丙氧基丙基等。
[0061]
本发明中的术语c
2-8
烯基是指由2～8个碳原子与氢原子组成的分子中至少含有一个不饱和碳碳双键的脂肪烃基，包括直链、支链或环状烯烃，包括丙烯基、反-2-已烯基、1-己烯基、2-甲基-1-丁烯基、2,4-二甲基-1,3-戊二烯基、4-乙烯基-1-环己烯基等。
[0062]
本发明中的术语c
2-8
炔基是指由2～8个碳原子与氢原子组成的含有至少一个不饱和碳碳三键的脂肪烃基，包括直链、支链或环状炔烃，包括丙炔基、3-己炔基、2,4-己二炔基、3-环己基丙炔基、4-甲基-2-己基等。
[0063]
本发明中的术语c
3-8
碳环基是指分子中含有3～8个碳原子的单环或者稠合多环的饱和或不饱和环状烃基，包括环丙基、环戊基、甲基环戊基、1-甲基-3-乙基环戊烯基、1-甲基-1-环己烯基等。
[0064]
本发明中的术语c
2-8
杂环基指分子中含有2～8个碳原子和1～4个杂原子的饱和或不饱和环状基团。包括环氮丙啶基、四氢吡咯基、哌啶基、高哌啶基、哌嗪基、高哌嗪基、六氢哒嗪基、杂氮环丁烷基、四氢呋喃基、吗啉基、吡喃基、二氧六环基等。
[0065]
本发明中的术语c
6-12
芳基是指分子中含有6～12个碳原子具有单环或者稠合多环的不饱和芳香族基团，稠合的环可以是饱和的，也可以是不饱和的，包括苯基、萘基、吲哚基、吲哚啉基、1,2,3,4-四氢喹啉基、苯并环庚基等。
[0066]
本发明中的术语c
3-10
的杂芳基指的是含有3～10个碳原子和1～4个杂原子组成的单环或稠合多环的不饱和芳烃环，杂环芳基可以是与另一个芳基、杂芳基稠合，也可以与饱和或不饱和杂环基稠合。包括吡唑基、呋喃基、吡啶基、噁唑基、异噁唑基、1,2-苯并异恶唑基、苯并哒嗪基、吡嗪基、2,3-二氢苯并呋喃基等。
[0067]
本发明中的术语c
1-8
支链或直链烷胺基是指分子中含有1～8个碳原子的烃基在任意合理的位置插入-n-、-nh-、或者-nh2基团的基团，包括甲氨基、异丙胺基、二乙胺基、n,n-二甲基丁胺基、n-甲基正丙胺基、n-乙基正丙胺基、n-异丙基乙胺基、异丁胺基、二异丙氨基等。
[0068]
本发明中的术语雌激素受体(estrogen receptor，er)指的是一种蛋白质分子，可与激素发生特异性结合而形成激素-受体复合物，使激素发挥其生物学效应。雌激素受体可位于细胞膜、细胞质或细胞核。包括两种亚型：er-α和er-β，两种异构体都有类似于核受体超家族的调节结构，在不同的组织和部位发挥不同的生理效应。雌激素受体与雌激素或具有雌激素特性的物质(如serm)结合后，可通过应答素来调节基因的转录，影响蛋白质的合成，调控多种生理机能。因而表现出不同的作用，如雌激素拮抗作用、抗雌激素的作用、增加骨量的形成、降低血脂、降低血糖等作用。
[0069]
本发明中的术语癌症指的是乳腺癌、子宫内膜癌、卵巢癌、肝癌、宫颈癌、甲状腺乳头状癌等雌激素受体失调相关的癌症。
[0070]
本发明所述的有效量指的是组合物中化合物或其可药用的盐的质量含量在0.01％～80％范围内。
[0071]
本发明所述的雌激素受体调节剂可以与雌激素受体结合，调控机体中雌激素水
平。
[0072]
本发明所述的可药用的盐指的是所述的化合物与酸的加成盐，包括无机酸盐如盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等。有机酸盐如乙酸盐、乳酸盐、草酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、琥珀酸盐、枸橼酸、天冬氨酸盐、肉桂酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐、酒石酸盐等。
[0073]
本发明所述的可药用的盐同时指的是所述的化合物与碱的加成盐，无机碱的盐如钠盐、钾盐、铵盐、钙盐、镁盐、锌盐、铝盐等。有机胺的盐如二乙胺盐、s-苯乙胺盐、r-苯乙胺盐、葡甲胺盐、乙醇胺盐、氨基丁三醇盐、精氨酸盐、赖氨酸盐、组氨酸盐、鸟氨酸盐等。
[0074]
本发明所述的治疗指的是成功改善由于疾病(比如骨质疏松症、高血脂症、高血糖症)引起的生理指标异常，如减轻症状、损伤、耐受并最终达到显著改善患者的身体或精神健康。
[0075]
本发明所述的患者或个体指的是发病或具有明显病症的活生物体，包括人以及其他哺乳动物如鼠、猪、牛、羊、犬、猩猩、狒狒、猴、猿、猫、熊、熊、马、鸡、鸭、鹅等。
[0076]
本发明所述的药物组合物包括本发明提供的化合物与药学上可接受的辅料制备而成，药学上可接受的辅料指的是有助于个体服用或者吸收药物组合物中的活性物质的物质，并且对患者或个体不会造成明显不良影响，包括葡萄糖、稀释剂、甜味剂、填充剂、油脂、明胶、脂肪酸酯、湿润剂、稳定剂、乳化剂、助流剂、抗粘剂、着色剂等。
[0077]
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明，但不以任何方式限制本发明，所有化合物的结构均经ms或1h nmr确定。
具体实施方式
[0078]
具体实施方式如下：
[0079]
实施例一：中间体a-9的合成
[0080][0081]
中间体a-1的合成：
[0082]
将起始原料sm1(16.2g，0.1mol，1.0eq)溶于thf(300ml)中，氮气保护下降温至-78℃，缓慢滴加二异丙基氨基锂(2.0m，75.0ml，0.15mol，1.5eq)，滴加完毕后降温到-60℃反应1小时，然后滴加化合物n-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(42.9g，0.12mol，1.2eq)的thf(400ml)溶液，控温不高于-50℃，滴加完毕后继续反应3小时，反应完毕后缓慢饱和氯化铵水溶液(100ml)，浓缩，加入300ml水，乙酸乙酯萃取(300ml
×
2)，有机相无水硫酸钠干燥，再
次浓缩，柱层析分离得中间体a-1(23.8g，黄色油状物，收率：81％)。lc-ms(esi)m/z：295.0[m+h]
+
。
[0083]
中间体a-2的合成：
[0084]
将中间体a-1(14.7g，0.05mol，1.0eq)溶于1,4-二氧六环(300ml)中，加入水(30ml)，加入对羟基苯硼酸(11.1g，0.08mol，1.0eq)，pd(dppf)cl2(2.3g，0.1g/1.0g)，碳酸钾(16.6g，0.12mol，1.5eq)，氮气保护下加热到100℃反应3小时，降温后浓缩，加入300ml水，乙酸乙酯萃取(300ml
×
2)，有机相无水硫酸钠干燥，再次浓缩，柱层析分离得中间体a-2(8.3g，黄色油状物，收率：70％)。lc-ms(esi)m/z：239.1[m+h]
+
。
[0085]
中间体a-3的合成：
[0086]
将中间体a-2(11.9g，0.05mol，1.0eq)溶于thf(100ml)中，降温至0～5℃，向体系中缓慢滴加nbs(8.9g，0.05mol，1.0eq)的thf(100ml)溶液，滴加完毕后室温下搅拌反应3小时，反应完成后抽滤，滤液浓缩，所得固体用乙腈/水重结晶得中间体a-3(11.9g，类白色固体，收率：75％)。lc-ms(esi)m/z：317.2[m+h]
+
。
[0087]
中间体a-4的合成：
[0088]
将中间体a-3(6.3g，0.02mol，1.0eq)溶于1,4-二氧六环(100ml)中，加入水(10ml)，加入苯硼酸(2.4g，0.02mol，1.0eq)，pd(dppf)cl2(0.7g，0.1g/1.0g)，碳酸钾(4.1g，0.03mol，1.5eq)，氮气保护下加热到100℃反应3小时，降温后浓缩，加入100ml水，乙酸乙酯萃取(100ml
×
2)，有机相无水硫酸钠干燥，再次浓缩，柱层析分离得中间体a-4(4.1g，类白色固体，收率：66％)。lc-ms(esi)m/z：315.3[m+h]
+
。
[0089]
中间体a-5的合成：
[0090]
将中间体a-4(3.1g，0.01mol，1.0eq)溶于甲醇(100ml)中，加入钯碳(5％，0.7g)，氢气氛围下于30℃下反应48小时，反应结束后过滤，浓缩，所得固体a-5粗品直接用于下一步。
[0091]
中间体a-6的制备：
[0092]
将中间体a-5直接用手性制备柱分离，浓缩，乙腈/水重结晶得中间体a-6(0.5g，类白色固体，收率：15％)。lc-ms(esi)m/z：317.1[m+h]
+
。
[0093]
中间体a-7的合成：
[0094]
将中间体a-6(3.2g，0.01mol，1.0eq)溶于thf(100ml)中，降温至0～5℃，氮气保护下向体系中缓慢加入九氟丁烷磺酰氟(5.5g，0.01mol，1.0eq)，碳酸钾(2.8g，0.02mol，2.0eq)，置于室温条件下反应12小时，过滤除去不溶的碳酸钾，浓缩，加入水(100ml)，乙酸乙酯萃取(100ml
×
2)，干燥，浓缩后直接用于下一步。
[0095]
中间体a-8的合成：
[0096]
将中间体a-7(5.5g，0.01mol，1.0eq)溶于甲苯(150ml)中，加入起始原料sm2(1.2g，0.01mol，1.0eq)，醋酸钯(0.6g，0.1g/1.0g)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.6g，0.1g/1.0g)，叔丁醇钠(2.9g，0.03mol，3.0eq)，氮气氛围下100℃反应3小时，降温，加入100ml水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-8(2.1g，类白色固体，两步收率：51％)。lc-ms(esi)m/z：414.3[m+h]
+
。
[0097]
中间体a-9的合成：
[0098]
将中间体a-8(2.1g，5.0mmol，1.0eq)溶于dcm(100ml)中，加入戴斯-马丁试剂
(4.2g，0.01mol，2.0eq)，氮气氛围下室温反应3小时，加入100ml水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-9(1.1g，类白色固体，两步收率：54％)。lc-ms(esi)m/z：412.3[m+h]
+
。
[0099]
实施例二：中间体a-14的合成
[0100][0101]
中间体a-10的合成：
[0102]
起始原料sm3(22.7g，0.1mol，1.0eq)溶于1,4-二氧六环(500ml)中，加入起始原料sm4(18.6g，0.1mol，1.0eq)，pd2(dba)3(2.3g，0.1g/1.0g)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(2.3g，0.1g/1.0g)，磷酸钾(42.4g，0.2mol，2.0eq)，氮气氛围下100℃反应12小时，降温后浓缩，加入水(200ml)，乙酸乙酯萃取(200ml
×
2)，干燥，浓缩后柱层析得中间体a-10(23.3g，黄色固体，收率：70％)。lc-ms(esi)m/z：333.1[m+h]
+
。
[0103]
中间体a-11的合成：
[0104]
将中间体a-10(16.6g，0.05mol，1.0eq)溶于thf(150ml)，甲醇(150ml)的混合溶剂中，加入氢氧化钠(20.0g，0.5mol，10.0eq)，水(50ml)溶液，25℃下搅拌1小时，浓缩除去大部分溶剂，冰浴下体系用hcl溶液(0.01m)调节ph值至5.0左右，加入乙酸乙酯萃取，有机相用三乙胺调节至碱性，干燥，浓缩，柱层析得中间体a-11(11.6g，类白色固体，收率：66％)。lc-ms(esi)m/z：351.3[m+h]
+
。
[0105]
中间体a-12的合成：
[0106]
将中间体a-11(7.0g，20.0mmol，1.0eq)溶于dcm(200ml)中，加入戴斯-马丁试剂(17.0g，0.04mol，2.0eq)，氮气氛围下室温反应5小时，加入100ml水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-12(4.3g，类白色固体，收率：62％)。lc-ms(esi)m/z：349.3[m+h]
+
。
[0107]
中间体a-13的合成：
[0108]
将中间体a-12(3.5g，10.0mmol，1.0eq)溶于甲醇(100ml)中，加入起始原料sm5(1.6g，0.01mol，1.0eq)，氮气氛围下室温反应2小时，冰浴下缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(4.2g，20.0mmol，2.0eq)，加入完后自然升至室温反应12小时，三乙胺调剂体系至碱性，浓缩除去大部分溶剂，加入冷的饱和碳酸氢钠水溶液(100ml)，dcm萃取(100ml
×
2)，干燥，浓缩后柱层析得中间体a-13(2.8g，类白色固体，收率：61％)。lc-ms(esi)m/z：461.1[m+h]
+
。
[0109]
中间体a-14的合成：
[0110]
将中间体a-13(2.3g，5.0mmol，1.0eq)溶于dmf(50ml)中，加入三乙胺(1.0g，10.0mmol，2.0eq)后搅拌1小时，冰浴下缓慢加入hatu(2.8g，7.5mmol，1.5eq)，加入完毕后室温反应3小时，将体系倒入冰水(150ml)中，乙酸乙酯萃取(200ml
×
2)，有机相干燥后浓
缩，所得残留物加入乙酸乙酯(25ml)中，冰浴下缓慢加入盐酸乙酸乙酯(25ml)，室温搅拌12小时，有固体析出，抽滤，少量乙酸乙酯洗涤，所得真空干燥得中间体a-14(0.98g，类白色固体，收率：52％)。lc-ms(esi)m/z：343.4[m+h]
+
。
[0111]
实施例三：化合物pr96-07的合成
[0112][0113]
中间体a-15的合成：
[0114]
将中间体a-9(0.79g，2.0mmol，1.0eq)溶于甲醇(50ml)中，加入中间体a-14(0.76g，2.0mmol，1.0eq)，氮气氛围下室温反应2小时，冰浴下缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.84g，4.0mmol，2.0eq)，加入完后室温反应12小时，三乙胺调剂体系至碱性，浓缩除去大部分溶剂，加入冷的饱和碳酸氢钠水溶液(50ml)，dcm萃取(50ml
×
2)，干燥，浓缩后柱层析得中间体a-15(0.80g，类白色固体，收率：55％)。lc-ms(esi)m/z：724.2[m+h]
+
。
[0115]
化合物pr96-07的合成：
[0116]
氮气保护下将中间体a-15(0.72g，1.0mmol，1.0eq)溶于thf(30ml)中，加入钠氢(0.08g，2.0mmol，2.0eq)，室温搅拌1小时，氮气氛围下缓慢加入乙酸氯甲酯(0.22g，2.0mmol，2.0eq)，室温反应6小时，水洗(10ml
×
1)，干燥，浓缩后柱层析得产物pr96-07(0.32g，类白色固体，收率：40％)。lc-ms(esi)m/z：796.1[m+h]
+
。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ9.18(s,1h),7.66-7.64(m,1h),7.25-7.07(m,8h),6.90-6.66(m,6h),6.28-6.18(m,2h),5.78-5.68(m,1h),5.35-5.27(m,3h),4.38-4.17(m,3h),3.45-3.40(m,3h),3.19-3.00(m,5h),2.71-2.59(m,3h),2.49-2.04(m,6h),2.22(s,3h),1.92-1.54(m,4h),1.48-1.02(m,3h)。
[0117]
实施例四：化合物pr96-08的合成
[0118][0119]
化合物pr96-08的合成：
[0120]
氮气保护下将中间体a-15(0.72g，1.0mmol，1.0eq)溶于thf(30ml)中，加入钠氢(0.08g，2.0mmol，2.0eq)，室温搅拌1小时，氮气氛围下缓慢加入氯甲基异丁酸酯(0.27g，2.0mmol，2.0eq)，室温反应16小时，水洗(10ml
×
1)，干燥，浓缩后柱层析得产物pr96-08
3.38(m,8h),3.26-3.24(m,1h),3.07-3.05(m,2h),3.01-2.99(m,2h),2.94-2.89(m,8h),2.83-2.81(m,1h),2.77-2.75(m,1h),2.24-2.22(m,2h),2.16(s,3h),2.07-2.05(m,3h),1.74-1.72(m,1h),1.55-1.53(m,2h),1.43-1.41(m,1h),1.37-1.35(m,2h)。
[0129]
实施例七：中间体a-17的合成
[0130][0131]
中间体a-16的合成：
[0132]
将中间体a-7(5.5g，0.01mol，1.0eq)溶于甲苯(150ml)中，加入起始原料sm6(1.3g，0.01mol，1.0eq)，醋酸钯(0.6g，0.1g/1.0g)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(0.6g，0.1g/1.0g)，叔丁醇钠(2.9g，0.03mol，3.0eq)，氮气氛围下100℃反应5小时，降温，加入100ml水洗，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-16(1.9g，类白色固体，收率：45％)。lc-ms(esi)m/z：428.2[m+h]
+
。
[0133]
实施例八：化合物pr96-16的合成
[0134][0135]
中间体a-17的合成：
[0136]
将sm7(1.9g，0.01mol，1.0eq)溶于thf(100ml)中，加入起始原料sm8(1.0g，0.01mol，1.0eq)，钠氢(0.5g，0.02mol，2.0eq)，氮气氛围下100℃反应5小时，降温，加入10ml水，浓缩，加入100ml水，加入100ml乙酸乙酯萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-17(0.9g，类白色固体，收率：43％)。lc-ms(esi)m/z：211.1[m+h]
+
。
[0137]
中间体a-18的合成：
[0138]
将中间体a-17(2.1g，0.01mol，1.0eq)溶于乙酸(10ml)中，加入乙醇胺(0.6g，
0.01mol，1.0eq)，氮气氛围下100℃反应6小时，降温，加入40ml冰水，加入80ml乙酸乙酯萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-18(0.6g，类白色固体，收率：24％)。lc-ms(esi)m/z：256.2[m+h]
+
。
[0139]
中间体a-19的合成：
[0140]
将中间体a-18(2.5g，0.01mol，1.0eq)溶于thf(100ml)中，加入中间体a-16(4.3g，0.01mol，1.0eq)，三苯基膦(2.6g，0.01mol，1.0eq)与dead(1.7g，0.01mol，1.0eq)，氮气氛围下室温反应16小时，浓缩，加入100ml冰水，加入100ml二氯甲烷萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-19(0.8g，类白色固体，收率：12％)。lc-ms(esi)m/z：665.3[m+h]
+
。
[0141]
化合物pr96-16的合成：
[0142]
氮气氛围下将中间体a-19(0.66g，1.0mmol，1.0eq)溶于无水处理的thf(40ml)中，加入钠氢(0.26g，1.0mmol，1.0eq)，加入完毕后搅拌0.5小时，缓慢加入乙酸氯甲酯(0.11g，1.0mmol，1.0eq)，滴加完毕后室温反应8小时，过滤，浓缩，所得残留物制备液相分离得产物pr96-16(0.10g，类白色固体，收率：12％)。lc-ms(esi)m/z：737.3[m+h]
+
。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.20(s,1h),7.29-7.17(m,5h),7.06-7.04(m,2h),6.79-6.68(m,5h),6.29(s,2h),5.30-5.28(m,1h),4.49-4.47(m,1h),3.46-3.41(m,5h),3.19-3.14(m,3h),3.10-3.02(m,4h),2.67-2.59(m,5h),2.10-2.02(m,5h),1.72-1.68(m,3h),1.52-1.47(m,4h),1.44-1.41(m,3h),1.35-1.32(m,2h)。
[0143]
实施例九：化合物pr96-17的合成
[0144][0145]
中间体a-20的合成：
[0146]
将中间体a-17(2.1g，0.01mol，1.0eq)溶于甲醇(100ml)中，加入硼氢化钠(0.4g，0.01mol，1.0eq)，室温下反应2小时，降温，加入0.1ml盐酸(0.1m)，浓缩至干，加入乙酸乙酯20ml，再次浓缩至干，加入thf(50ml)，氮气保护下缓慢滴加三溴氧磷(2.8g，0.01mol，1.0eq)的thf溶液(30ml)，氮气保护下室温反应4小时，冰浴下缓慢滴加碳酸氢钠溶液(0.05m)中和至弱碱性，减压浓缩，加入100ml水，加入100ml乙酸乙酯萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-20(0.9g，类白色固体，收率：33％)。lc-ms(esi)m/z：276.3[m+h]
+
。
[0147]
中间体a-21的合成：
[0148]
将乙二醇(0.6g，0.01mol，1.0eq)加入至thf(20ml)中，加入钠氢(0.5g，0.02mol，2.0eq)，氮气保护下室温搅拌0.5小时，加入中间体a-20(2.7g，0.01mol，1.0eq)，氮气氛围下60℃反应16小时，降温，加入水1.0ml，浓缩，柱层析分离得中间体a-21(0.3g，类白色固体，收率：13％)。lc-ms(esi)m/z：257.0[m+h]
+
。
[0149]
中间体a-22的合成：
[0150]
将中间体a-21(2.6g，0.01mol，1.0eq)溶于thf(100ml)中，加入中间体a-16(4.3g，0.01mol，1.0eq)，三苯基膦(2.6g，0.01mol，1.0eq)与dead(1.7g，0.01mol，1.0eq)，氮气氛围下室温反应16小时，浓缩，加入100ml冰水，加入100ml二氯甲烷萃取，有机相无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析分离得中间体a-22(0.8g，类白色固体，收率：12％)。lc-ms(esi)m/z：665.3[m+h]
+
。
[0151]
化合物pr96-16的合成：
[0152]
氮气氛围下将中间体a-22(0.66g，1.0mmol，1.0eq)溶于无水处理的thf(40ml)中，加入钠氢(0.26g，1.0mmol，1.0eq)，加入完毕后搅拌0.5小时，缓慢加入乙酸氯甲酯(0.11g，1.0mmol，1.0eq)，滴加完毕后室温反应8小时，过滤，浓缩，所得残留物制备液相分离得产物pr96-17(0.16g，类白色固体，收率：22％)。lc-ms(esi)m/z：738.2[m+h]
+
。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.23(s,1h),7.30-7.18(m,5h),7.09-7.03(m,2h),6.83-6.69(m,5h),6.24(s,2h),4.55-4.53(m,1h),3.49-3.44(m,5h),3.22-3.02(m,7h),2.68-2.60(m,5h),2.14-2.04(m,5h),1.78-1.70(m,3h),1.47-1.41(m,8h),1.37-1.34(m,2h)。
[0153]
实施例十：化合物pr96-27的合成
[0154][0155]
按照实施例一至实施例三制备成中间体a-15的方法制备获得中间体a-23。
[0156]
化合物pr96-27的合成：
[0157]
氮气保护下将中间体a-23(0.72g，1.0mmol，1.0eq)溶于thf(30ml)中，加入钠氢(0.08g，2.0mmol，2.0eq)，室温搅拌1小时，氮气氛围下缓慢加入氯甲基异丁酸酯(0.27g，2.0mmol，2.0eq)，室温反应15小时，水洗(10ml
×
1)，干燥，浓缩后柱层析得产物pr96-27(0.08g，类白色固体，收率：10％)。lc-ms(esi)m/z：826.3[m+h]
+
。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ9.17(s,1h),7.64-7.62(m,1h),7.25-7.08(m,8h),6.91-6.69(m,6h),6.25(s,2h),5.74-5.67(m,1h),5.37-5.29(m,2h),4.36-4.09(m,5h),3.58-3.42(m,3h),3.16-2.99(m,5h),2.71-2.58(m,3h),2.33-2.02(m,3h),1.92-1.58(m,4h),1.36-1.05(m,9h)。
[0158]
实施例十一：化合物pr96-29的合成
[0159][0160]
按照实施例一至实施例三制备成中间体a-15的方法制备获得中间体a-24。
[0161]
化合物pr96-29的合成：
[0162]
氮气保护下将中间体a-23(0.74g，1.0mmol，1.0eq)溶于thf(30ml)中，加入钠氢(0.08g，2.0mmol，2.0eq)，室温搅拌1小时，氮气氛围下缓慢加入氯甲基异丁酸酯(0.27g，2.0mmol，2.0eq)，室温反应40小时，水洗(10ml
×
1)，干燥，浓缩后柱层析得产物pr96-29(0.13g，类白色固体，收率：16％)。lc-ms(esi)m/z：842.0[m+h]
+
。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ9.19(s,1h),7.66-7.59(m,1h),7.27-7.11(m,8h),6.94-6.73(m,6h),6.26(s,2h),5.78-5.65(m,1h),5.39-5.30(m,2h),4.35-4.10(m,5h),3.57-3.44(m,3h),3.15-2.98(m,5h),2.73-2.60(m,3h),2.35-2.11(m,3h),1.94-1.60(m,4h),1.34-1.11(m,8h)。
[0163]
按照与上述实施例提供的合成方法，采用类似的手段，使用市售化合物或经过合理的上保护基、脱保护基合成了以下实施例化合物：
[0164]
[0165]
[0166][0167]
实施例十二：化合物抑制破骨细胞活性研究
[0168]
取1周龄c57bl/6小鼠，颈椎断裂处死后于75％乙醇中浸泡1小时，取出小鼠的中间段股骨和胫骨，肌肉去除完全，用a-mem细胞培养液(含25ng/ml的m-csf)冲洗骨髓腔5次，然后放入t75培养瓶中，加入a-mem细胞培养液(含25ng/ml的m-csf)，而后放置在培养箱中
(37.0℃/5％co2)培养72小时，弃去原培养基，更换新鲜培养基，继续培养24小时，弃去培养基，用0.25％胰蛋白酶处理贴壁细胞1小时，加入a-mem细胞培养液(含25ng/ml的m-csf)，置于离心管中离心处理(2000r/min)10分钟，弃去上清液，加入新鲜的a-mem细胞培养液(含25ng/ml的m-csf)，然后加入等体积的a-mem细胞培养液(含50ng/ml rankl)，将上述细胞培养液混合均匀后以1
×
104个/孔的细胞密度种植于96孔板中，于培养箱中(37.0℃/5％co2)培养24小时，加入相应的化合物溶液(0.2％dmso助溶)，控制每孔的终浓度为30.0μm，每个化合物设置三个复孔，空白对照孔不加入化合物溶液，仅加入相同体积的培养液，继续作用48小时，使用trap染色，在显微镜下观察，采用细胞计数，计算各个孔中大于3个核的破骨细胞数，按照如下式1计算化合物对破骨细胞的抑制率：
[0169]
式1：抑制率(％)＝[1-(化合物处理孔破骨细胞数/空白对照孔破骨细胞数)]
×
100％
[0170]
计算结果如表1：
[0171]
表1：化合物抑制破骨细胞活性
[0172][0173][0174]
数据表明，合成的化合物对破骨细胞的增殖有明显的抑制作用，尤其是化合物pr96-08、pr96-19、pr96-27在30.0μm浓度下对破骨细胞增殖的抑制率在75％以上，达到了预期的效果。
[0175]
实施例十三：化合物体内防止骨流失作用
[0176]
取适量的22周龄雌性sd大鼠，适应性饲养一周后，手术组sd大鼠摘除大鼠双侧卵巢，假手术组sd大鼠仅切除少量脂肪后即缝合伤口，手术组和假手术组sd大鼠继续饲养15周，期间自由饮食和进水。15周后取体重在260g-280g手术组sd大鼠随机分为5组，每组20只，分别为：模型对照组、pr96-08组、pr96-19组、pr96-27组、盐酸雷洛昔芬组，假手术组同样取20只纳入实验。将相应化合物溶解于0.1％羧甲基纤维素钠溶液中，通过灌胃方式给药，剂量为15mg/kg，模型对照组、假手术组不给药，仅给予相同体积的0.1％羧甲基纤维素钠溶液，连续给药15周，颈动脉取血后处死大鼠，取各组大叔的第5节脊椎骨，脊椎骨取出后在explore locus sp scanner(ge healthcare)仪器上测试骨密度等相关指标，扫描尺寸
45μm，数据分析在explore micro-view(version 2.0)仪器上进行。计算结果如表2：
[0177]
表2：大鼠脊椎骨的组织形态分析
[0178]
组别bmd(mg/cc)bv/tvtb.ntb.th(mm)假手术组554.2
±
27.00.56
±
0.041.98
±
0.190.42
±
0.06模型对照组365.0
±
19.70.38
±
0.101.32
±
0.210.25
±
0.09pr96-08组491.2
±
29.00.52
±
0.071.83
±
0.100.38
±
0.05pr96-19组503.6
±
19.90.49
±
0.041.79
±
0.140.39
±
0.04pr96-27组502.7
±
24.80.50
±
0.061.84
±
0.170.37
±
0.07盐酸雷洛昔芬组447.6
±
21.70.43
±
0.071.56
±
0.180.32
±
0.09
[0179]
注：bmd＝骨密度(bone mineral density)；bv/tv＝骨体积占比(bone volume over total volume)；tb.n＝骨小梁数目(trabecular number)；tb.th＝骨小梁厚度(trabecular thickness)。
[0180]
数据表明，模型对照组大鼠在实验结束时，相比于假手术组骨密度明显降低，骨体积占比降低，同时骨小梁数目和骨小梁厚度均有降低，说明实验期间，模型对照组大鼠的骨流失较为严重，而给药组大鼠的骨密度、骨体积、骨小梁数目和骨小梁厚度均有明显升高，尤其是相比于盐酸雷洛昔芬组，pr96-08组、pr96-19组、pr96-27组大鼠的骨密度、骨体积、骨小梁数目和骨小梁厚度均有更显著的提高，说明本发明的化合物pr96-08、pr96-19、pr96-27可以在体内显著防止绝经后大鼠的骨流失，取得了意想不到的效果。
[0181]
同时采用igf-1(insulin-like growth factors-1)elisa试剂盒测试各组大鼠血清中的igf-1水平，结果如表3：
[0182]
表3：大鼠血清中igf-1水平
[0183]
组别igf-1浓度(ng/ml)假手术组896.3
±
32.1模型对照组585.0
±
21.6pr96-08组842.2
±
28.8pr96-19组833.6
±
30.1pr96-27组852.4
±
25.9盐酸雷洛昔芬组748.3
±
26.5
[0184]
表3数据说明给药组大鼠血清中的igf-1水平明显升高，并且pr96-08组、pr96-19组、pr96-27组大鼠血清的中的igf-1水平明显高于盐酸雷洛昔芬组，可有效防止骨流失。
[0185]
本技术描述了多个实施例，但是不以任何方式限制本发明，在本技术所描述的实施例包含的范围内可以有更多的实施例和实现方案。

技术特征：
1.一种具有如下式i结构的多官能团化合物：及其光学异构体、几何异构体、溶剂化物、同位素衍生物、前药或其与可药用的酸、碱结合成的盐；其中：m选自1、2、或3；x选自ch、或n；y选自ch2、o、或s；表示成键或不成键；r1选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲基；r2选自氢、c
1-8
烷基、c
1-8
烷氧基、c
1-8
烷胺基；g选自：n1选自0、1、或2；n2选自1、或2；n3选自2、或3；n4选自1、2、或3；n5选自2、或3；n6选自1、2、或3；n7选自2、或3；n8选自1、2、或3；z1选自ch、或n；z2选自ch、或n；z3选自o、或nh；z4选自ch、或n；
z5选自o、nh、或ch2；r3选自n9选自1、2、或3；l选自r4选自c
1-8
烷基、c
2-8
烯基、c
2-8
炔基、c
3-8
碳环基、c
2-8
杂环基、c
6-12
的芳基、c
3-10
的杂芳基可被一个或多个不同的r5取代；r5选自氢、卤素、羟基、羧基、氨基、氰基、甲基、乙基、甲氧基、乙氧基、异丙氧基、三氟甲基、巯基、巯甲基、巯乙基。2.如权利要求1所述的化合物，如式ii所示：式ii中取代基的定义如权利要求1式i所定义的。3.如权利要求1所述的化合物，如式iii所示：式iii中取代基的定义如权利要求1式i所定义的。4.如权利要求1所述的化合物，具有如下结构：
5.一种选择性雌激素受体调节剂(selective estrogen receptor modulators，serm)，包含权利要求1～4中所述的化合物。6.权利要求1～4中所述的化合物可用于治疗或预防雌激素受体介导的相关疾病，如骨质疏松症、高血脂症、癌症。7.预防或治疗骨质疏松症、癌症、降低血清胆固醇水平的药物组合物，包含权利要求1～4中所述的化合物与可药用的载体。8.治疗或预防骨质疏松症、癌症、高血清胆固醇症的方法包括向所需要治疗的个体给与治疗有效量的权力要求1～4中的化合物及其组合物。9.权利要求6中所述的药物组合物可制备用于注射、皮下给药、口服给药、或局部用药。10.权利要求6中所述的药物组合物的剂型可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、溶液制剂、悬浮液、乳剂、洗剂、脂质体、栓剂或膏剂。

技术总结
本发明涉及一种雌激素受体调节剂，可有效抑制破骨细胞增殖，在体内具有显著的防止骨流失、降低血脂的作用。作为药物开发具有重大意义。义。义。


技术研发人员：张哲峰 张爱琴 杨谋伟
受保护的技术使用者：南京知和医药科技有限公司
技术研发日：2022.12.23
技术公布日：2023/9/14