使用隐陡头菌素或羟基脲甲基酰基富烯治疗脑转移瘤和CNS转移瘤的制作方法

使用隐陡头菌素或羟基脲甲基酰基富烯治疗脑转移瘤和cns转移瘤
1.交叉引用
2.本技术要求2021年1月8日提交的美国临时申请63/135,370号的权益，该美国临时申请全文以引用方式并入本文。
3.援引并入
4.本说明书中提及的所有出版物、专利和专利申请均以引用方式并入本文，其程度与每个单独的出版物、专利或专利申请被具体地并且单独地指示为以引用方式并入的程度相同。
技术领域
5.本技术涉及化学和肿瘤学领域。更具体地，本技术涉及使用隐陡头菌素或羟基脲甲基酰基富烯治疗脑转移瘤的方法。本发明涉及治疗cns转移瘤的方法。


背景技术：

6.大多数脑转移瘤癌症患者通常具有不良的结局。中枢神经系统(cns)转移瘤(特别是在脑中)在肺癌(20％至56％的患者)、乳腺癌(5％至20％的患者)和黑素瘤(7％至16％的患者)中普遍存在。由于改进的全身性治疗无法控制脑中的脑转移瘤，所以认为这种疾病的发病率增加。脑转移瘤的发展损害了患者的存活，是高达50％患者的死亡原因。已经鉴定了脑转移瘤发展的标志。
7.治疗性干预脑转移瘤对于肿瘤学家来说是一大挑战，因为转移性肿瘤通常对许多化疗剂有耐受性，而且保护脑功能的手术切除选择是有限的。脑的独特微环境对转移性癌细胞和治疗构成了强大屏障。脑转移性肿瘤细胞必须穿过血脑屏障(bbb)。bbb对于大多数药物是异质的，并且是大多数药物不可渗透的。直到最近，脑转移瘤疗法仍主要是局部治疗，包括外科手术、立体定向放射疗法和全脑放射疗法。目前的治疗选择依然有限。
8.因此，始终需要治疗性干预手段来治疗脑转移瘤。


技术实现要素：

9.本文提供了用于治疗、压制或减小患有癌症的受试者中的脑/cns转移瘤或转移性脑肿瘤的方法，包括向该受试者施用治疗有效量的隐陡头菌素或羟基脲甲基酰基富烯，特别是具有负光学活性的光学异构体。癌症可以选自由以下项组成的组：肺癌、乳腺癌、黑素瘤、结肠癌、肾癌、肾细胞癌、间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、尿路上皮癌、头颈癌、骨肉瘤、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤和膀胱癌。本文还提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中将隐陡头菌素或羟基脲甲基酰基富烯作为单一疗法施用。本文还提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中羟基脲甲基酰基富烯作为联合疗法施用，其中该联合疗法包括施用羟基脲甲基酰基富烯和至少一种选自由以下项组成的组的治疗剂：替莫唑胺、贝伐单抗、依维莫司、卡莫司汀、洛莫司汀、
丙卡巴肼、长春新碱、伊立替康、顺氯氨铂、卡铂、紫杉醇、甲氨蝶呤、依托泊苷、长春花碱、博来霉素、放线菌素、环磷酰胺和异环磷酰胺。用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法可以还包括使受试者接受放射疗法。放射疗法选自由以下项组成的组：全脑照射、分次放疗、放射外科手术，以及它们的组合。
10.本文提供了用于治疗或减小受试者中的脑转移瘤或cns转移瘤的方法，其中将有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于对其有需要的受试者导致相对于未暴露于该治疗的脑转移瘤，受试者中的脑转移瘤受到抑制，抑制百分比超过10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。
11.本文提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中该癌症与前列腺素还原酶1(ptgr1)的表达增加相关联。本文还提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中该癌症与以seq id no：2或seq id no：4示出的核酸序列的表达增加相关联。本文还提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中该癌症与以seq id no：2或seq id no：4示出的氨基酸序列的表达增加相关联。
12.本文提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测定从受试者获得的样品中ptgr1基因的表达；(b)选择在步骤a中ptgr1基因表达水平增加的受试者；以及(c)向步骤b中选择的受试者施用有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而治疗或减小该受试者中的脑转移瘤。本文还提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测定从受试者获得的样品中ptgr1蛋白的表达；(b)选择在步骤a中ptgr1蛋白表达水平增加的受试者；以及(c)向步骤b中选择的受试者施用有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而治疗或减小该受试者中的脑转移瘤。本文还提供了用于治疗或减小患有足以代谢羟基脲甲基酰基富烯的癌症的受试者中的脑转移瘤的方法。
13.本文提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括向该受试者施用治疗有效量的以下物质：(a)第一药物组合物，其中该第一药物组合物包含治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯和药学上可接受的载剂，和(b)第二药物组合物，其中该第二药物组合物包含附加治疗剂和药学上可接受的载剂。第一药物组合物和第二药物组合物作为一种组合物或作为分开的组合物施用。该附加治疗剂选自由以下项组成的组：替莫唑胺、贝伐单抗、依维莫司、卡莫司汀、洛莫司汀、丙卡巴肼、长春新碱、伊立替康、顺氯氨铂、卡铂、紫杉醇、甲氨蝶呤、依托泊苷、长春花碱、博来霉素、放线菌素、环磷酰胺和异环磷酰胺。
14.本文提供了用于治疗或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测定从受试者获得的样品中ptgr1基因的表达；(b)选择在步骤a中ptgr1基因表达水平增加的受试者；以及(c)向步骤b中选择的受试者施用有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而治疗或减小受试者中的脑转移瘤，其中该癌症可以选自由以下项组成的组：肺癌、乳腺癌、黑素瘤、结肠癌、肾癌、肾细胞癌、间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、尿路上皮癌、头颈癌、骨肉瘤、胶质母细胞瘤、星形细胞瘤和膀胱癌。
15.本文提供了抑制脑转移瘤的方法，包括使脑转移瘤与羟基脲甲基酰基富烯接触，其中该接触包括将治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于具有脑转移瘤的受试者。本文提供了抑制脑转移瘤的方法，包括使脑转移瘤与羟基脲甲基酰基富烯接触，其中脑转移瘤与前列腺素还原酶1(ptgr1)的表达增加相关联。
16.本文提供了诱导脑转移瘤中的细胞凋亡的方法，包括使脑肿瘤细胞与羟基脲甲基
酰基富烯接触，其中该接触包括将有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于具有脑转移瘤的受试者。
17.本文提供了抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测量从受试者获得的生物样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平，(b)将所述样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平与ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的标准表达水平进行比较，以及(c)在ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平升高或是高的情况下，施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制或减小脑转移瘤。
18.本文提供了抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测量从受试者获得的生物样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平，(b)将所述样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平与ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的标准表达水平进行比较，以及(c)在ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平等于或高于羟基脲甲基酰基富烯敏感性阈值的情况下，施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制或减小脑转移瘤。本文还提供了抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，其中确定羟基脲甲基酰基富烯敏感性包括使用pdx来源的脑转移瘤的3d模型。
19.本文提供了试剂盒，其用于根据权利要求1至36中任一项所述的方法来测定试样对羟基脲甲基酰基富烯的敏感性，其中该试剂盒包括一种或多种试剂、标准物，以及它们的使用说明，其中标准物包括ptgr1的表达物或转录物，提供用于筛选试样对羟基脲甲基酰基富烯的敏感性的阈值水平或目标水平。
附图说明
20.在所附权利要求中具体阐述了本发明的新特征。通过参考以下阐述利用本发明原理的说明性实施方案的详细描述和附图，将获得对本发明的特征和优点的更好理解：
21.图1示出了lp-184和替莫唑胺(tmz)的表观渗透性。
22.图2示出了lp-184对细胞存活率和bbb完整性的影响。
23.图3示出了对geo数据集gse100534的分析。
24.图4示出了对geo数据集gse132226的分析。
25.图5示出了lp-184在pdx来源的脑转移瘤的3d模型中的效力。
26.定义
27.除非另有定义，本文中使用的所有技术和科学术语与本主题所属技术领域的技术人员通常理解的含义相同。如本文所用，为了便于理解本技术，提供了以下定义。
28.如本文所用，术语
″
患者
″
、
″
受试者
″
、
″
个体
″
和
″
宿主
″
是指患有或怀疑患有与生物学或细胞生长活性异常或者脑转移瘤相关联的疾病或病症的人类或非人类动物。
29.术语
″
治疗
″
(treat和treating)这种疾病或病症是指改善疾病或失调的至少一种症状。这些术语在与诸如癌症的病症结合使用时，是指以下一种或多种情况：阻碍癌症生长、使癌症的重量或体积缩小、延长患者的预期生存时间、抑制肿瘤生长、减小肿瘤质量、减小转移性病灶的大小或数量、抑制新转移性病灶的发展、延长生存期、延长无进展生存期、延长进展时间，以及/或者提高生活质量。术语
″
治疗
″
(treatment或treating)脑转移瘤可
以包括阻止脑转移瘤的发展或者逆转脑转移瘤的一种或更多种症状，以及/或者改善患有脑转移瘤的患者的临床结果。临床结果改善的实施例包括更长的存活时间、肿瘤大小的减小、肿瘤大小的不生长和/或神经系统症状没有恶化。
30.术语
″
预防
″
在用于例如癌症等病症或疾病时，是指减少病症或疾病症状的发生频率或延迟其发生。因此，预防癌症包括例如相对于未经治疗的对照群体，减少接受预防性治疗的患者群体中可检测到的癌生长物的数量，以及/或者相对于未经治疗的对照群体延迟经治疗群体中可检测到的癌生长物的出现，例如，以统计学上和/或临床上显著的量。
31.术语
″
药学上可接受的
″
是指在制备一般安全、无毒、既无生物学也无其他不良反应的药物组合物时有用的，包括可接受的兽用和人用药物的用途。
32.术语
″
治疗作用
″
是指通过施用本发明的化合物或组合物在动物，特别是哺乳动物，更特别是人类中产生的有益的局部或全身作用。短语
″
治疗有效量
″
是指以合理的收益/风险比有效治疗由脑转移瘤引起的疾病或病症的本发明的化合物或组合物的量。在一些实施方案中，治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯或其药学上可接受的盐选自由以下项组成的组：1mg/天、2mg/天、4mg/天、5mg/天、10mg/天、15mg/天、20mg/天、30mg/天、60mg/天、90mg/天、120mg/天、150mg/天、180mg/天、210mg/天、240mg/天、270mg/天、300mg/天、360mg/天、400mg/天、440mg/天、480mg/天、520mg/天、580mg/天、600mg/天、620mg/天、640mg/天、680mg/天和720mg/天。
33.这种物质的治疗有效量将根据受试者和所治疗的疾病状态、受试者的体重和年龄、疾病状态的严重程度、施用方式等而变化，这可以由本领域的技术人员很容易地确定。
34.前列腺素还原酶-1(ptgrl)是一种烯醛/酮氧化还原酶，其参与类花生酸的分解代谢以及脂质过氧化作用，诸如4-羟基壬烯醛(4-hne)。ptgr1同工型1的蛋白质序列和mrna序列分别以seq id no：1和seq id no：2示出。ptgr1同工型2的蛋白质序列和mrna序列分别以seq id no：3和seq id no：4示出。
35.如本文所用，术语
″
表达水平
″
可以指感兴趣的特定基因(例如，ptgr1)的蛋白质、rna或mrna水平。如本文所述和/或本领域已知的任何方法均可以用于测定表达水平。示例包括但不限于逆转录和扩增测定(诸如pcr、连接rt-pcr或定量rt-pct)、杂交测定、rna印迹法、斑点印迹法、原位杂交、凝胶电泳、毛细管电泳、柱层析、蛋白质印迹法、免疫组织化学、免疫染色或质谱法。可以直接对生物样品或对从样品分离的蛋白质/核酸进行测定。实施这些测定是相关领域的常规实践。例如，本文所述的任何方法中的测量步骤包括使得自受试者的生物样品的核酸样品与一种或多种同本文所提供的感兴趣基因特异性杂交的引物接触。或者，本文所述的任何方法的测量步骤包括使得自受试者的生物样品的蛋白质样品与结合本文所提供的感兴趣生物标志物的一种或多种抗体接触。
36.ptgr1基因的表达水平增加可以包括其表达水平与从相同受试者获得的不同(或先前)样品中测量的该基因的参考值或表达水平相比，至少增加5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、100％、200％、300％、400％、500％、1000％、1500％或更多。
37.如本文所用，
″
参考或基线水平/值
″
可以互换使用，意指相对于源自群体研究的数目或值，包括但不限于：具有相似年龄范围、疾病状态(例如，分期)的此类受试者，相同或相似族群中的受试者，或者相对于经历癌症治疗的受试者的起始样品。此类参考值可以从统
计分析和/或获自数学算法和计算的癌症指数的群体风险预测数据导出。也可以使用统计和结构分类的算法和其他方法来构建和使用参考索引。
38.在本发明的一些实施方案中，参考值或基线值是源自一个或多个健康受试者或者未被诊断患有任何癌症的受试者的对照样品中的ptgr1基因的表达水平。
39.在本发明的一些实施方案中，参考值或基线值是在任何癌症治疗之前从同一受试者获得的样品中ptgr1基因的表达水平。在本发明的其他实施方案中，参考值或基线值是在癌症治疗期间从同一受试者获得的样品中ptgr1基因的表达水平。或者，参考值或基线值是先前从同一受试者或从与测试受试者具有相似的年龄范围、疾病状态(例如，分期)的受试者获得的样品中ptgr1基因的表达水平的先前测量结果。
40.如本文所用，短语
″
与(其中ptgr1的功能活性高的)细胞相关联的脑转移瘤
″
是指包含其中ptgr1的功能活性可能很高的细胞的癌症，或者其中那些细胞中的smarcb 1的功能活性已被验证为很高的癌症。
41.如本文所用，术语
″
样品
″
是指源自受试者的任何生物样品，包括但不限于：细胞、组织样品、体液(包括但不限于粘液、血液、血浆、血清、尿液、唾液和精液)、肿瘤细胞和肿瘤组织。样品可以由正在接受治疗或测试的受试者提供。或者，样品可以由医师根据本领域的常规实践来获得。
42.如本文所用，术语
″
敏感性
″
、
″
响应
″
和
″
响应性
″
是指癌症治疗(例如，lp184)具有(例如，诱导)期望效果的可能性，或者另选地，是指在细胞(例如，癌细胞)、组织(例如，肿瘤)或患有癌症的患者(例如，患有癌症的人类)中由治疗引起或诱导的期望效果的强度。例如，期望的效果可包括相对于未暴露于治疗的癌细胞的生长，体外癌细胞生长的抑制超过10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。期望的效果还可以包括脑转移瘤减小例如约10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。对治疗的敏感性可通过细胞增殖测定来测定，例如基于细胞的测定，其根据入射光束的细胞吸光度测量处理的细胞的生长，诸如本文所述的nci60测定。在该测定中，较低的吸光度指示较低的细胞生长，并因此指示对治疗的敏感性。生长的减少越大指示对治疗的敏感性越高。
43.如本文所用，术语
″
治疗
″
等是指出于获得效果的目的而施用某种药剂或实施某种程序。该效果在完全或部分预防疾病或其症状方面可以是预防性的，并且/或者在实现疾病和/或疾病症状的部分或完全治愈方面可以是治疗性的。如本文所用，
″
治疗
″
可以包括治疗哺乳动物、特别是人类中的肿瘤，包括：(a)预防疾病或疾病症状在可能易患该疾病但尚未诊断为患有该疾病的受试者中出现(例如，包括可能与原发性疾病相关联或由原发性疾病引起的疾病)；(b)抑制疾病，即阻止其发展；以及(c)缓解疾病，即，使疾病消退。
具体实施方式
44.本技术公开或提供了使用羟基脲甲基酰基富烯(目前被lantern pharma，inc.称为lp-184)来治疗脑转移瘤的治疗方法，羟基脲甲基酰基富烯可以是源自蘑菇毒素隐陡头菌素s的半合成或合成的抗肿瘤剂。羟基脲甲基酰基富烯如下所示，并且具有负光学活性的羟基脲甲基酰基富烯在此类治疗中更有效。
[0045][0046]
在某些实施方案中，本技术提供了用于治疗脑转移瘤的方法。如本文所用，
″
转移瘤
″
是指在与癌症(例如，原发癌)的原始位置在物理上不邻接的位置处存在一个或多个癌细胞。例如，但不是以限制的方式，癌症可以包括肺癌、乳腺癌、黑素瘤、结肠癌、肾癌、肾细胞癌、间皮瘤、卵巢癌、胰腺癌、肉瘤、白血病、淋巴瘤、尿路上皮癌、头颈癌、骨肉瘤和膀胱癌。在某些实施方案中，癌症可以包括胶质母细胞瘤和星形细胞瘤。cns转移瘤或脑转移瘤可以由临床医生诊断。
[0047]
具体的实施方案涉及治疗脑转移瘤的方法。这些方法包括将有效量的羟基脲甲基酰基富烯，特别是具有负光学活性的光学异构体施用于对其有需要的受试者。患有脑转移瘤的患者或受试者可以是由黑素瘤、肺癌、乳腺癌、结肠癌或肾癌引起的那些。该治疗方法通常需要将一剂治疗有效量的包含羟基脲甲基酰基富烯的制剂施用于患者。在一个示例中，羟基脲甲基酰基富烯可以作为单一疗法施用。在其他示例中，羟基脲甲基酰基富烯可以作为联合疗法施用。具有负光学活性的羟基脲甲基酰基富烯在此类治疗中是有效的。
[0048]
一个实施方案包括以分开的组合物或同一组合物方式共同施用羟基脲甲基酰基富烯和附加治疗剂。因此，一些实施方案包括第一药物组合物，该第一药物组合物包含：(a)治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯或其药学上可接受的盐，和(b)药学上可接受的载剂、稀释剂、赋形剂或它们的组合；以及第二药物组合物，该第二药物组合物包含：(a)治疗有效量的附加治疗剂，和(b)药学上可接受的载剂、稀释剂、赋形剂或它们的组合。一些实施方案包括药物组合物，该药物组合物包含：(a)治疗有效量的附加治疗剂；和(b)药学上可接受的载剂、稀释剂、赋形剂或它们的组合。在一些实施方案中，本文所述的方法可以还包括使受试者接受放射疗法。在一些实施方案中，放射疗法可以是全脑照射、分次放疗和放射外科手术。受试者应当被诊断为具有cns转移瘤和/或脑转移瘤。
[0049]
在一些实施方案中，该附加治疗剂选自由以下项组成的组：替莫唑胺、贝伐单抗、依维莫司、卡莫司汀、洛莫司汀、丙卡巴肼、长春新碱、伊立替康、顺氯氨铂、卡铂、紫杉醇、甲氨蝶呤、依托泊苷、长春花碱、博来霉素、放线菌素、环磷酰胺和异环磷酰胺。
[0050]
另一个实施方案包括抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法。这些步骤包括在医学上确定受试者是否具有脑转移瘤；测量从受试者获得的生物样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平，并将所述样品中的ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平与ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的标准表达水平进行比较。ptgr1基因或该ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平可以升高或是高的，并且在这种情况下，该方法包括施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制、治疗、压制或减小脑转移瘤。
[0051]
脑转移瘤通常可以用成像测试来检测，其中成像测试通常是计算机断层显像(ct)扫描和磁共振成像(mri)扫描。使用称为示踪剂的放射性物质来寻找疾病的正电子发射断层显像(pet)扫描也可以在肿瘤变大时检测到肿瘤，但这些扫描的灵敏度低得多并且不应当依赖它们寻找脑转移瘤。如果在ct或mri上在脑中发现肿瘤并且没有预先存在的癌症诊
断，则医生通常将获得身体其余部分的扫描，以确定癌症是否来自脑外。如果在体内发现来源，则可以从那里而不是从脑获得活检样品，并且可以推定脑肿瘤与体内发现的癌症有关。如果发现的唯一肿瘤是脑中的肿瘤，则可能需要脑活检来确定其是否为癌症，如果是，则确定其起源于何处。
[0052]
一些实施方案涉及一种抑制脑转移瘤的方法，该方法包括使脑转移瘤与羟基脲甲基酰基富烯接触。在一些实施方案中，该接触包括将有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于受试者。在一些实施方案中，该方法可以用于治疗原发性cns肿瘤或脑转移瘤。
[0053]
一个实施方案包括一种用于治疗受试者中的中枢神经系统(cns)转移瘤的方法，包括：a)确定受试者是否具有cns转移瘤，诊断该受试者具有cns转移瘤，以及b)向诊断为具有cns转移瘤的受试者施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制、治疗、压制或减小该cns转移瘤。
[0054]
一些实施方案涉及一种在脑转移瘤中诱导细胞凋亡的方法，该方法包括使脑肿瘤细胞与羟基脲甲基酰基富烯接触。在一些实施方案中，该接触包括将有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于具有脑转移瘤的受试者。
[0055]
只要肿瘤保持在控制之下并且该方案在临床上是耐受的，给药期可以是一个多周的治疗周期。在一些实施方案中，可以每周施用一次单剂量的羟基脲甲基酰基富烯或其他治疗剂，优选地在三周(21天)治疗周期的第1天和第8天各施用一次。在一些实施方案中，单剂量的羟基脲甲基酰基富烯或其他治疗剂可以每周施用一次、每周施用两次、每周施用三次、每周施用四次、每周施用五次、每周施用六次，或者在一周、两周、三周、四周或五周的治疗周期内每天施用。施用可以在治疗周期中每周的同一日或不同日进行。
[0056]
羟基脲甲基酰基富烯可以主要通过肠胃外途径施用，具体包括皮下施用、肌肉内施用、静脉内施用、经皮施用、鞘内施用、硬膜外施用、关节内施用和局部施用，或者也可以按各种剂型施用，例如，如果可能，通过口服途径施用。
[0057]
用于肠胃外施用的注射剂包括例如无菌、水性或非水性溶液剂、混悬剂和乳剂。水性溶液剂和混悬剂包含例如注射用蒸馏水和生理盐水。非水性溶液剂和混悬剂包含例如丙二醇、聚乙二醇、植物油(诸如橄榄油)、醇(诸如乙醇)和聚山梨醇酯80(商品名)。这种组合物可以含有辅助剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂、分散剂、稳定剂(例如，乳糖)和溶解辅助剂(例如，葡甲胺)。这些通过细菌截留过滤器过滤、混合灭菌剂或辐射进行灭菌。或者，在使用之前可以将这些辅助剂一次性制成无菌固体组合物，然后溶解或悬浮在注射用无菌水或无菌溶剂中。
[0058]
在一些实施方案中，脑肿瘤可以是转移性脑肿瘤、间变性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤、脑膜瘤、混合性神经胶质瘤，以及它们的组合。在一些实施方式中，脑肿瘤是多形性胶质母细胞瘤。在一些实施方式中，脑肿瘤是转移性脑肿瘤。
[0059]
用于口服施用的液体组合物包含例如药学上可接受的乳剂、液体、混悬剂、糖浆剂和酏剂，并且含有一般用途的惰性稀释剂，例如蒸馏水和乙醇。该组合物还可以包含不是惰性稀释剂的辅助剂，诸如润湿剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂、芳香剂和防腐剂。
[0060]
还应当理解，针对任何患者的具体剂量和治疗方案将取决于多种因素，包括所采用的特定化合物的活性、年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、施用时间、排泄率、药物组合、治疗医师的判断，以及所治疗的特定疾病的严重程度。本发明化合物在组合物中的量也将取决于组合物中的特定化合物。
[0061]
实施例
[0062]
具有负手性的羟基脲甲基酰基富烯或lp-184渗透了体外3d模型中的血脑屏障，该3d模型密切地再现人类血脑屏障。该模型模拟bbb的转运性质，这是由于形成紧密连接、特定载体的表达水平较高，并且/或者细胞存活率高。这种通过将脑内皮细胞与周细胞和星形胶质细胞分层共培养，在插入物中创建的bbb体外3d模型，改善了内皮细胞极化并增强了紧密连接的形成，提供了更好的内皮细胞与细胞之间的接触，这对屏障发育很重要，并防止分泌的神经营养因子稀释。这些条件共同导致开发了模拟bbb的体外模型。
[0063]
该测定利用新型3dbbb模型，该模型允许研究化合物跨该屏障的转运以及化合物对bbb结构和功能的影响。除了lp-184和替莫唑胺(tmz)(脑肿瘤的标准护理剂)之外，该实施例还分别示出了对已知的阳性和阴性对照剂安替比林和环孢菌素a的行为的比较来作为基准。lp-184在穿透血脑屏障方面与标准护理药物tmz一样有效。对tmz测得的表观bbb渗透性在30分钟时为1.72*104cm/s，对lp-184测得的表观bbb渗透性在30分钟时为1.53*104cm/s(图1)。在分析由化合物相互作用和治疗所引起的bbb调节时，观察到lp-184对细胞存活率的影响微不足道，并且bbb完整性未受损(图2)。
[0064]
临床数据分析证实，转移到脑的肿瘤中的ptgr1水平足以使lp-184代谢。从国家生物技术信息中心(ncbi)获得两个基因表达综合数据库(geo)数据集gse100534和gse132226，以确定对于lp-184，脑转移组织中ptgr1水平的阈值。
[0065]
如下表1中所示，lp-184表现出相对于血浆，脑肿瘤暴露水平大约为20％(基于auc)；与正常脑相比，脑肿瘤暴露水平大约为2倍。
[0066]
表1.脑中lp-184生物利用度的药代动力学参数
[0067][0068]
此外，lp-184在具有肿瘤的小鼠中表现出比非荷瘤小鼠更慢的清除率(2389ml/h/kg对比5284ml/h/kg)，这可能导致更高的血浆暴露水平。
[0069]
图3显示，对gse100534的分析证明，脑转移组织(来自原发性乳腺肿瘤)中的ptgr1水平高于lp-184敏感性的阈值。
[0070]
图4显示，对gse132226的分析证明，脑转移组织(来自原发性结直肠肿瘤)中的ptgr1水平高于lp-184敏感性的阈值。
[0071]
图5显示，lp-184在患者来源的异种移植物(pdx)来源脑转移瘤的3d模型中保持效力。根据测试条件，原发性肺癌和乳腺癌的各种脑转移瘤模型显示对lp-184的剂量依赖性敏感性
在低纳摩尔至微摩尔范围内。发现在72小时治疗期中，lp-184ic50在88nm至4.283μm范围内。
[0072]
虽然已经结合本发明的具体实施方案对本发明进行了描述，但是应当理解，能够对本发明做进一步修改，并且本技术旨在涵盖本发明的任何变化、用途或改编，这些变化、用途或改编大体上遵循本发明的原理，并且包括在本发明所属领域内的已知或惯例实践内且可以应用于上文所阐述的必要特征并随后出现在所附权利要求书的范围内的相对于本公开的此类背离。
[0073]
序列：
[0074]
seq id no：1-前列腺素还原酶1(ptgr1)同工型1[智人]：
[0075]
seq id no：2-前列腺素还原酶1(ptgr1)同工型1[智人]转录变体1，mrna：
[0076]
[0077][0078]
seq id no：3-前列腺素还原酶1(ptgr1)同工型2[智人]：
[0079][0080]
seq id no：4-前列腺素还原酶1(ptgr1)同工型2[智人]转录变体3，mrna：
[0081][0082]

技术特征：
1.一种治疗、减小或压制已转移至受试者脑部的癌症的方法，包括：(a)诊断所述受试者具有脑转移瘤；以及(b)向所述受试者施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，其中所述羟基脲甲基酰基富烯具有负光学活性。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述羟基脲甲基酰基富烯作为单一疗法施用。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述羟基脲甲基酰基富烯作为联合疗法施用。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述联合疗法包括施用羟基脲甲基酰基富烯和至少一种选自由以下项组成的组的治疗剂：替莫唑胺、贝伐单抗、依维莫司、卡莫司汀、洛莫司汀、丙卡巴肼、长春新碱、伊立替康、顺氯氨铂、卡铂、紫杉醇、甲氨蝶呤、依托泊苷、长春花碱、博来霉素、放线菌素、环磷酰胺和异环磷酰胺。5.根据权利要求1所述的方法，还包括使所述受试者接受放射疗法。6.根据权利要求6所述的方法，其中所述放射疗法选自由以下项组成的组：全脑照射、分次放疗、放射外科手术，以及它们的组合。7.根据权利要求1所述的方法，还包括在用羟基脲甲基酰基富烯治疗之前、之后或期间使所述受试者接受放射疗法。8.根据权利要求1所述的方法，其中将有效量的羟基脲甲基酰基富烯施用于对其有需要的受试者导致相对于未暴露于所述治疗的脑转移瘤，所述受试者中的脑转移瘤受到抑制，抑制百分比超过10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或100％。9.根据权利要求1所述的方法，其中所述癌症与前列腺素还原酶1(ptgr1)的表达增加相关联。10.根据权利要求1所述的方法，还包括：(a)测定从所述受试者获得的样品中ptgr1基因的表达；(b)选择在步骤a中ptgr1基因表达水平增加的所述受试者；以及(c)向步骤b中选择的所述受试者施用有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而治疗、压制或减小所述受试者中的脑转移瘤。11.根据权利要求1所述的方法，其中所述ptgr1基因包含以seq id no：2或seq id no：4示出的核酸序列。12.根据权利要求1所述的方法，包括：(a)测定从所述受试者获得的样品中ptgr1蛋白的表达；(b)选择在步骤a中ptgr1蛋白表达水平增加的所述受试者；以及(c)向步骤b中选择的所述受试者施用有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而治疗或减小所述受试者中的脑转移瘤。13.根据权利要求1所述的方法，其中所述ptgr1蛋白包含以seq id no：1或seq id no：3示出的氨基酸序列。14.一种抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤或cns转移瘤的方法，包括：(a)确定或诊断所述受试者具有脑转移瘤或cns转移瘤；(b)测量从所述受试者获得的生物样品中的ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的蛋白质的表达水平，(c)将所述样品中的ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的所述表达水平与ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的标准表达水平进行比较，其中ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的所述表达水平升高或是高的；以及(d)施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制或减小所述脑转移瘤。
15.一种抑制或减小患有癌症的受试者中的脑转移瘤的方法，包括：(a)测量从所述受试者获得的生物样品中的ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的所述表达水平，(b)将所述样品中的ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的所述表达水平与ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的标准表达水平进行比较，以及(c)在ptgr1基因或所述ptgr1基因编码的所述蛋白质的所述表达水平等于或高于羟基脲甲基酰基富烯敏感性阈值的情况下，施用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯，从而抑制或减小所述脑转移瘤。16.根据权利要求1或15所述的方法，其中确定所述羟基脲甲基酰基富烯敏感性包括使用pdx来源的脑转移瘤的3d模型。17.一种试剂盒，用于根据权利要求1至16中任一项所述的方法来测定试样对羟基脲甲基酰基富烯的敏感性，其中所述试剂盒包括一种或多种试剂、标准物，以及它们的使用说明，其中所述标准物包括ptgr1的表达物或转录物，提供用于筛选所述试样对所述羟基脲甲基酰基富烯的敏感性的阈值水平或目标水平。

技术总结
本申请公开了使用治疗有效量的羟基脲甲基酰基富烯来治疗已经转移至受试者脑部的癌症的方法。此外，公开了具有羟基脲甲基酰基富烯和药学上可接受的载剂、稀释剂、赋形剂或它们的组合的药物组合物。们的组合的药物组合物。们的组合的药物组合物。


技术研发人员：阿迪亚
受保护的技术使用者：蓝腾制药公司
技术研发日：2022.01.10
技术公布日：2023/10/6