一种细胞悬液的滴片方法与流程

1.本发明涉及一种滴片方法，涉及遗传实验技术领域。


背景技术：

2.滴片是指血细胞经过一系列处理后，制成悬液，吸取悬液，在距离载玻片一定高度下，将细胞悬液滴在冷冻后的玻片上，经过分散后放进干燥箱内在70℃～80℃进行烘干10～40分钟，然后进行染色。传统的滴片质量没有保证，由于受到滴片高度、玻片表面冷冻效果好坏、滴片环境、滴片温度、滴片湿度、滴片角度的、滴片手法等等的影响，经常一个标本滴6-7片，但结果往往一个成功的都没有，导致影响病人报告发表，也影响结果的分析，是医院对该项目比较头痛的事。以染色体玻片为例，理想的应该是分散均匀、无相互交叠，带纹清晰可辩，但是研究表明染色体的分散和滴片环境的温度、湿度、气流、玻片表面处理方法及倾斜角度等等有关，其中滴片时的温度和湿度非常关键，因此，提供一种高成功率的滴片和分散方法非常重要。


技术实现要素：

3.为解决上述提到的问题，本发明提供的技术方案如下：首先在玻片上先喷一层水膜，然后滴一滴悬液，该滴用于推开水膜，接下来再滴一点悬液在玻片上，该滴借助水膜自动分散，达到细胞悬液分散的效果。
4.为保证每个标本每一个玻片都能达到理想效果，滴片环境如下：a. 环境温度22℃～26℃，可任意调整；b. 环境湿度40%～65%，可任意调整。
5.滴片步骤如下：1）首先将玻片清洁处理；2）取吸头，吸水，吸水量约160-180μl，向玻片喷水，形成水膜，实验证明，吸水量在160-180μl效果最好，过多或过少效果都不理想；3）吸悬液，向玻片第一次滴悬液，由于悬液中含有冰醋酸和甲醇，其比重与水不同，因此悬液滴下去后，悬液下方的水膜会向外推，1-5秒后，推开水膜后会形成一个空间；滴片高度为10～50mm为宜；4）向玻片第二次滴悬液，滴片高度为10～50 mm为宜，第二滴悬液借助水的扩散而自动分散，约10～30分钟后，放到干燥箱内进行烤干即可。
6.本发明的另一目的在于提供另外一种细胞悬液的滴片方法，所述的方法包括如下的步骤：1）首先将玻片清洁处理；2）吸悬液120μl，向玻片第一次滴悬液50-70μl，1-5秒后悬液推开水膜后会形成一个空间；向玻片第二次滴剩下的悬液，第二滴悬液借助水的扩散而自动分散， 10～30分钟后，放到干燥箱内进行烤干即可；滴片环境为：温度22℃～26℃可调，湿度40%～65%可调。
7.本发明的有益效果在于，本发明提供的适合于细胞悬液分散又不会产生交叉污染的方法，让玻片表面形成一层水膜，细胞悬液借助水膜扩散力来带动细胞分裂分散，保证每一个玻片都能滴出质量好的效果，从而提高染色体分析结果，提高工作速度，缩短发报告時间。
附图说明
8.图1为本发明的悬液效果图。
具体实施方式
9.实施例1 滴水量实验 （表一）在温度22℃，湿度45%的环境下，进行滴片：1）首先将玻片清洗处理；2）取吸头，吸水，吸水量约如下表一所示，向玻片喷水；3）吸悬液，向玻片第一次滴悬液一滴；4）向玻片第二次滴悬液，第二滴悬液借助水的扩散而自动分散，25分钟后，放到干燥箱内进行烤干即可。
10.表1 吸水量的实验从上表可以看出，当在滴悬液之前向玻片喷适量的水时，滴片成功的概率，与喷水量有很大关系，当喷水量过少、过多或者不喷水时，滴片成功的概率就会大大降低。
11.实施例2 滴片吸悬液量实验 （表二）环境温度22℃，环境湿度45%，进行滴片：1）首先将玻片清洁处理；2）取吸头吸水，吸水量约160-180μl;3）取吸头吸悬液，吸悬液量如下表二所示，滴片，分散约10-25分钟后：4）烘干即可。
12.表二 吸悬液量实验从上表可以额看出，悬液量滴加为120μl效果最佳，滴加悬液量越多效果越好，但
是临床希望用悬液量越少越好，因为悬液很珍贵。
13.实施例3滴悬液次数的实验（表三）环境温度22℃，环境湿度45%，进行滴片：1）首先将玻片清洁处理；2）取吸头吸水，吸水量约160-180μl;3）吸悬液，向玻片滴悬液，一次滴加和二次滴加两种方式，一次滴加是将120μl悬液一次滴加到玻片上，二次滴加是将悬液120μl，分两次滴加到玻片第一次滴加悬液2-5秒后，再向玻片第二次滴加悬液：4）玻片滴完后，再分散10-40分钟后放进烤箱。
14.表三滴悬液次数实验滴悬液次数次数分两次滴加分一次滴加滴加片数20片20片滴加成功片数20片7片滴片成功的效果如图1所示，可以看出，在滴片前先喷水，然后再分为两个步骤滴加后，滴片效果好，分散均匀，无细胞聚集的现象。


技术特征：
1.一种细胞悬液的滴片方法，其特征在于，所述的滴片方法为在滴片之前在玻片上形成一层水膜，然后向所述的水膜滴加第一滴悬液，2-5sec钟后向第一滴悬液滴加位置再次滴加第二滴悬液。2.如权利要求1所述的细胞悬液的滴片方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1）首先将玻片清洁处理；2）取吸头，吸水，吸水量约160-180μl，向玻片喷水，形成水膜；3）吸悬液，向玻片第一次滴悬液， 1-5秒后，悬液推开水膜后会形成一个空间；4）向玻片第二次滴悬液，第二滴悬液借助水的扩散而自动分散，10～30分钟后，放到干燥箱内进行烤干即可；滴片环境为：温度22℃～26℃可调，湿度40%～65%可调。3.如权利要求1所述的细胞悬液的滴片方法，其特征在于，所述的方法包括如下的步骤：1）首先将玻片清洁处理；2）吸悬液120μl，向玻片第一次滴悬液50-70μl，1-5秒后悬液推开水膜后会形成一个空间；向玻片第二次滴剩下的悬液，第二滴悬液借助水的扩散而自动分散， 10～30分钟后，放到干燥箱内进行烤干即可；滴片环境为：温度22℃～26℃可调，湿度40%～65%可调。

技术总结
一种细胞悬液的滴片方法，本发明涉及一种滴片方法，为提供一种高成功率的滴片和分散方法，本发明提供的技术方案如下：首先在玻片上先喷一层水膜，然后滴一滴悬液，该滴用于推开水膜，接下来再滴一点悬液在玻片上，该滴借助水膜自动分散，达到细胞悬液分散的效果。本发明的有益效果在于，本发明提供的适合于细胞悬液分散又不会产生交叉污染的方法，让玻片表面形成一层水膜，细胞悬液借助水膜扩散力来带动细胞分裂分散，保证每一个玻片都能滴出质量好的效果，从而提高染色体分析结果，提高工作速度，缩短发报告时间。缩短发报告时间。缩短发报告时间。


技术研发人员：姜尚武 马立 陈健 姜宏 张沛沛
受保护的技术使用者：深圳市凯特生物医疗电子科技有限公司
技术研发日：2023.08.10
技术公布日：2023/10/8