一种小核酸祛斑精华的制作方法

1.本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种小核酸祛斑精华。


背景技术：

2.炎炎夏日，随着紫外线强度逐渐增加，皮肤黑色素细胞也随之苏醒，面部的斑斑点点开始逐渐浮出水面，严重影响着我们的外貌形象，降低了人们的自信心和生活质量。如何美白祛斑成为了化妆品领域的研究焦点。
3.现代研究表明，引起色斑的主要原因为以下几种：1、紫外线：大部分色斑的产生就是因为光老化引起的，紫外线对皮肤伤害很大，容易产生色斑，即使没有阳光也要注意防晒，尤其是天生斑更要注重防晒工作。
4.2、外界刺激、擦伤、含金属成分护肤品：还有一些人长期使用含铅、汞等化学金属成分多或者是添加香料的护肤品，这些化学成分具有吸光的作用，很容易引起皮肤的黑色团。
5.3、妊娠、内分泌失调、酸碱失调：女人最常见的是黄褐斑，斑点的生成首先与女性肌体本身的疾病和腺体有关，如卵巢、乳腺、脑垂体等关系密切，因为这些器官都分泌雌激素，刺激黑色素细胞，增加了黑色素的生成，促使色素沉着。
6.4、慢性胃肠疾病、肝病、结核、癌瘤和慢性酒精中毒等;长期应用某些药物，如苯妥英钠、冬眠灵、避孕药均可发生斑问题。
7.5、年龄、新陈代谢减慢、精神压力大、过度疲劳、神经功能紊乱、肾上腺皮脂功能下降，增加了黑色素的生成，促使色素沉着。
8.常见的色斑分类如下：1、雀斑是一种常见于面部的边界清楚的褐色点状色素斑，家族聚集的患者可能与常染色体显性遗传相关。雀斑最早出现在儿童期，5岁左右发病，常见于浅肤色人群，累及日光暴露的皮肤，其中鼻背较为显著，色斑直径通常为2-4毫米。受紫外线照射的影响，夏季雀斑的数量、大小及色素深度增加，而冬季则变小、变淡或减少。
9.2、黄褐斑黄褐斑也称妊娠斑，是一种面部对称性融合性黄褐色色素沉着斑片，大多发生于面颊部，也可延伸至眶周、前额、上唇和鼻部，边缘一般较清晰明显，形似蝴蝶状。黄褐斑容易受紫外线、化妆品、性激素水平变化等因素的影响。其多发生在亚洲中青年女性，发病率可达30%。
10.3、脂溢性角化病脂溢性角化病俗称“老年斑”，其实是一种良性皮肤肿瘤，好发于中老年人，也可见于年轻人，其形成是由于角质细胞良性增生所致。开始表现为淡褐色斑疹或扁平丘疹，表面光滑或略呈乳头瘤状，直径一般为数毫米到１厘米，大时可有数厘米，边界清楚。可以单发，但通常多发，多无自觉症状，偶有痒感。有些色素沉着非常显著，呈深棕色或黑色。随着年龄增长，斑的面积逐渐增大，数目增多，表面可有油腻性痂，痂皮易刮除。
11.4、褐青色痣颧部褐青色痣是一种非遗传性皮肤色素性疾病，因为好发于颧骨部位，因此又称颧骨母斑。颧部褐青色痣多发于青少年，发病年龄在16-40岁，20岁后发病多
见。主要特点是在颧部对称分布的直径1-5毫米左右。黑灰色、青灰色斑点，无任何自觉症状。
12.一般而言，化妆品领域的祛斑主要作用对象为雀斑和黄褐斑。对于老年斑和褐青色痣只能求助于医药。


技术实现要素：

13.本发明要解决的技术问题提供一种小核酸祛斑精华，对于雀斑和黄褐斑有良好的祛斑效果。
14.本发明的具体技术方案如下：一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：sirna 0.001-0.01%。
15.本发明所述的sirna ，又称小干扰rna，是rnai的效应分子, 由两条互补的rna单链构成。rna 干扰(rna interference,rnai)是将与 mrna 序列相对应的有义和反义 rna组成的双链 rna 导人细胞, 使 mrna 降解和基因沉默。本发明所述的sirna针对黑色素形成调控中的小眼球相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,mitf) 基因设计 sirna, 通过 rnai 调节抑制mitf基因及其调控的下游酪氨酸酶(tyrosinase, tyr)基因和酪氨酸酶相关蛋白l(tyrosinase related protein-1, tyrp-1) 基因, 从而调控黑色素的生成。
16.进一步的，所述sirna的序列如下表1所述：表1 sirna单链序列（另一条为互补链）
17.进一步的，所述小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖1-3%、烟酰胺单核苷酸0.1-1%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-20 0.1-1%、3-邻-乙基抗坏血酸1-3%、薄荷醇0.01-0.1%、peg-40 氢化蓖麻油0.01-0.1%、1,2-己二醇0.1-0.5%、月桂氮卓酮0.1-0.5%、卡波姆0.1-0.5%、烟酰胺1-5%、对羟基苯乙酮0.4-0.6%、丁二醇1-5%、水解原花青素0.1-0.5%、透明质酸0.01-0.05%、精氨酸/赖氨酸多肽0.001-0.01%、酵母菌多肽类0.1-1%、抗坏血酸葡
糖苷1-3%、凝血酸1-3%、sirna 0.001-0.01%、甘松（nardostachys chinensis）提取物 1-10%、水 余量。
18.本发明所述的甘松（nardostachys chinensis）提取物可以通过市售购得，也可以通过如下方法提取制得：（1）取甘松的干燥根及根茎，烘干，粉碎；（2）将甘松粉末用乙醇水溶液浸泡；然后转入渗漉罐中；再用乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；（3）将洗脱液浓缩脱去乙醇，然后加入原洗脱液等体积的丙二醇，超声萃取；离心，取上清液，即得。
19.在其中一些实施例中，所述的乙醇水溶液的浓度均为75%v/v。
20.在其中一些实施例中，步骤（2）中所述的浸泡时间为12-24小时。
21.在其中一些实施例中，步骤（2）中所述甘松粉末与乙醇水溶液的料液比为1:3-1:5。
22.在其中一些实施例中，步骤（2）中所述洗脱液的收集量为2bv。
23.在其中一些实施例中，步骤（3）中所述超声萃取的时间为10-30分钟。
24.本发明实施例提供的技术方案带来的有益效果是：（1）本发明实施例提供了一种生物大分子sirna，分子量大于10000，对肌肤无毒副作用，通过基因信息流的变化，实现多靶点的控制，在微克级的很小用量上即可实现良好的祛斑效果；（2）本发明实施例提供的小核酸祛斑精华，精选配伍了sirna、甘松（nardostachys chinensis）提取物、烟酰胺、抗坏血酸葡糖苷、凝血酸等活性成分，既可从源头阻断黑色素的生成，也可以提升皮肤新陈代谢，加速已生成黑色素的代谢，内外协同，消费者试用测试证明，其对于雀斑和黄褐斑有良好的祛除效果。
附图说明
25.图1 实施例9志愿者使用产品3个月前后对比。
实施方式
26.说明书中的实施方式仅用于对本发明进行说明，其并不对本发明的保护范围起到限定作用。本发明的保护范围仅由权利要求限定，在本发明公开的实施方式的基础上所做的任何省略、替换或修改将落入本发明的保护范围。
27.参选以下本发明的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本发明的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。
28.如本文所用术语“由
…
制备”与“包含”同义。本文中所用的术语“包含”、“包括”、“具有”、“含有”或其任何其它变形，意在覆盖非排它性的包括。例如，包含所列要素的组合物、步骤、方法、制品或装置不必仅限于那些要素，而是可以包括未明确列出的其它要素或此种组合物、步骤、方法、制品或装置所固有的要素。
29.当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至
5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。
30.此外，本发明要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。
31.为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
实施例
32.一种甘松（nardostachys chinensis）提取物，通过如下方法提取制得：（1）取甘松的干燥根及根茎，烘干，粉碎；（2）将甘松粉末用75%v/v乙醇水溶液浸泡12小时，料液比为1:5；然后转入渗漉罐中；再用75%v/v乙醇水溶液洗脱，收集2bv的洗脱液；（3）将洗脱液浓缩脱去乙醇，然后加入原洗脱液等体积的丙二醇，超声萃取10分钟；离心，取上清液，即得。
实施例
33.一种甘松（nardostachys chinensis）提取物，通过如下方法提取制得：（1）取甘松的干燥根及根茎，烘干，粉碎；（2）将甘松粉末用75%v/v乙醇水溶液浸泡24小时，料液比为1:3；然后转入渗漉罐中；再用75%v/v乙醇水溶液洗脱，收集2bv的洗脱液；（3）将洗脱液浓缩脱去乙醇，然后加入原洗脱液等体积的丙二醇，超声萃取30分钟；离心，取上清液，即得。
实施例
34.一种甘松（nardostachys chinensis）提取物，通过如下方法提取制得：（1）取甘松的干燥根及根茎，烘干，粉碎；（2）将甘松粉末用75%v/v乙醇水溶液浸泡18小时，料液比为1:4；然后转入渗漉罐中；再用75%v/v乙醇水溶液洗脱，收集2bv的洗脱液；（3）将洗脱液浓缩脱去乙醇，然后加入原洗脱液等体积的丙二醇，超声萃取20分钟；离心，取上清液，即得。
实施例
35.一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖1%、烟酰胺单核苷酸1%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-20 0.1%、3-邻-乙基抗坏血酸3%、薄荷醇0.01%、peg-40 氢化蓖麻油0.1%、1,2-己二醇0.1%、月桂氮卓酮0.5%、卡波姆0.1%、烟酰胺5%、对羟基苯乙酮0.4%、丁二醇5%、水解原花青素0.1%、透明质酸0.05%、精氨酸/赖氨酸多肽0.001%、酵母菌多肽类1%、抗坏血酸葡糖苷1%、凝血酸3%、sirna 0.001%、实施例1所制得的甘松（nardostachys chinensis）提取物10%、水 余量；所述的sirna选自表1所述的seq.no.1序列。
实施例
36.一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖3%、烟酰胺单核苷酸0.1%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-20 1%、3-邻-乙基抗坏血酸1%、薄荷醇0.1%、peg-40 氢化蓖麻油0.01%、1,2-己二醇0.5%、月桂氮卓酮0.1%、卡波姆0.5%、烟酰胺1%、对羟基苯乙酮0.6%、丁二
醇1%、水解原花青素0.5%、透明质酸0.01%、精氨酸/赖氨酸多肽0.01%、酵母菌多肽类0.1%、抗坏血酸葡糖苷3%、凝血酸1%、sirna0.01%、实施例2所制得的甘松（nardostachyschinensis）提取物1%、水余量；所述的sirna选自表1所述的seq.no.2序列。
实施例
37.一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖2%、烟酰胺单核苷酸0.5%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-200.5%、3-邻-乙基抗坏血酸2%、薄荷醇0.05%、peg-40氢化蓖麻油0.5%、1,2-己二醇0.3%、月桂氮卓酮0.3%、卡波姆0.3%、烟酰胺3%、对羟基苯乙酮0.5%、丁二醇3%、水解原花青素0.3%、透明质酸0.04%、精氨酸/赖氨酸多肽0.005%、酵母菌多肽类0.5%、抗坏血酸葡糖苷2%、凝血酸2%、sirna0.005%、实施例3所制得的甘松（nardostachyschinensis）提取物5%、水余量；所述的sirna选自表1所述的seq.no.3序列。
38.对比例1一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖2%、烟酰胺单核苷酸0.5%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-200.5%、3-邻-乙基抗坏血酸2%、薄荷醇0.05%、peg-40氢化蓖麻油0.5%、1,2-己二醇0.3%、月桂氮卓酮0.3%、卡波姆0.3%、烟酰胺3%、对羟基苯乙酮0.5%、丁二醇3%、水解原花青素0.3%、透明质酸0.04%、精氨酸/赖氨酸多肽0.005%、酵母菌多肽类0.5%、抗坏血酸葡糖苷2%、凝血酸2%、sirna0.005%、水余量；所述的sirna选自表1所述的seq.no.3序列。
39.对比例2一种小核酸祛斑精华，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖2%、烟酰胺单核苷酸0.5%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-200.5%、3-邻-乙基抗坏血酸2%、薄荷醇0.05%、peg-40氢化蓖麻油0.5%、1,2-己二醇0.3%、月桂氮卓酮0.3%、卡波姆0.3%、烟酰胺3%、对羟基苯乙酮0.5%、丁二醇3%、水解原花青素0.3%、透明质酸0.04%、精氨酸/赖氨酸多肽0.005%、酵母菌多肽类0.5%、抗坏血酸葡糖苷2%、凝血酸2%、实施例3所制得的甘松（nardostachyschinensis）提取物5%、水余量。
40.实施例7安全性评价根据《化妆品安全技术规范》（2015版）第七章第2节所规定的人体皮肤斑贴试验方法，对实施例4-6、对比例1-2所制得的小核酸祛斑精华进行人体斑贴测试。
41.本项测试每种测试样品的志愿者人数均为30名，在去除受试物斑试器后0.5小时、24小时和48小时检查样品区和对照区的皮肤状况，结果显示，实施例4-6、对比例1-2所制得的小核酸祛斑精华的样品区0.5小时、24小时和48小时都未观察到明显的皮肤不良反应，由此可判断本发明实施例所制得的小核酸祛斑精华对人体没有刺激性，可以做进一步的志愿者试用功效评价。
42.实施例8人体功效评价对实施例4-6、对比例1-2所制得的小核酸祛斑精华进行志愿者试用测试，以评价其产品功效。
43.测试依据：国家药监局关于将化妆品中防腐剂检验方法等7项检验方法纳入化妆
品安全技术规范（2015 年版）的通告中附件7《化妆品祛斑美白功效测试方法》第一法 紫外线诱导人体皮肤黑化模型祛斑美白功效测试法。
44.志愿者招募：根据上述的标准，每个测试组招募30名志愿者。
45.使用方法：志愿者每天早晚洁面清洗脸部以后，取受试样品各1滴于额头、左脸颊、右脸颊，用指腹均匀涂抹于脸部肌肤，轻轻按压至吸收即可。连续使用4周，期间不可使用其他产品。
46.测试过程：第0周、第1周、第2周、第3周、第4周对志愿者脸部皮肤测量mi值，求得每组每次产品使用前后皮肤mi差值，结果见表1。
[0047][0048]
表1 产品使用前后皮肤mi差值由表1可见，消费者在使用本发明实施例所制得的小核酸祛斑精华4周后，皮肤mi
值发生了下降，显示了良好的祛斑效果。
[0049]
实施例9 消费者试用测试在工厂组织了30名脸部有雀斑、黄褐斑的消费者，试用实施例6所制得的小核酸祛斑精华，每天早晚洁面清洗脸部以后，取受试样品各1滴于额头、左脸颊、右脸颊，用指腹均匀涂抹于脸部肌肤，轻轻按压至吸收即可。连续使用12周，期间不可使用其他产品。12周后回访，统计发现有25例志愿者反馈雀斑、黄褐斑得到了淡化、消除，有效率超过了80%。
[0050]
以上实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0051]
以上实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

技术特征：
1.一种小核酸祛斑精华，其特征在于，包括如下质量百分含量的组分：sirna 0.001-0.01%。2.根据权利要求1所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，所述的sirna的序列选自seq.no.1-seq.no.12。3.根据权利要求1或2所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，包括如下质量百分含量的组分：海藻糖1-3%、烟酰胺单核苷酸0.1-1%、ppg-5-鲸蜡醇聚醚-20 0.1-1%、3-邻-乙基抗坏血酸1-3%、薄荷醇0.01-0.1%、peg-40 氢化蓖麻油0.01-0.1%、1,2-己二醇0.1-0.5%、月桂氮卓酮0.1-0.5%、卡波姆0.1-0.5%、烟酰胺1-5%、对羟基苯乙酮0.4-0.6%、丁二醇1-5%、水解原花青素0.1-0.5%、透明质酸0.01-0.05%、精氨酸/赖氨酸多肽0.001-0.01%、酵母菌多肽类0.1-1%、抗坏血酸葡糖苷1-3%、凝血酸1-3%、sirna 0.001-0.01%、甘松（nardostachys chinensis）提取物 1-10%、水 余量。4.根据权利要求3所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，所述的甘松（nardostachys chinensis）提取物通过如下方法提取制得：（1）取甘松的干燥根及根茎，烘干，粉碎；（2）将甘松粉末用乙醇水溶液浸泡；然后转入渗漉罐中；再用乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液；（3）将洗脱液浓缩脱去乙醇，然后加入原洗脱液等体积的丙二醇，超声萃取；离心，取上清液，即得。5.根据权利要求4所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，所述的乙醇水溶液的浓度均为75%v/v。6.根据权利要求4所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，所述的浸泡时间为12-24小时。7.根据权利要求4所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，步骤（2）中所述甘松粉末与乙醇水溶液的料液比为1:3-1:5。8.根据权利要求4所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，步骤（2）中所述洗脱液的收集量为2bv。9.根据权利要求4所述的小核酸祛斑精华，其特征在于，步骤（3）中所述超声萃取的时间为10-30分钟。

技术总结
本申请公开了一种小核酸祛斑精华，精选配伍了siRNA、甘松（NARDOSTACHYS CHINENSIS）提取物、烟酰胺、抗坏血酸葡糖苷、凝血酸等活性成分，既可从源头阻断黑色素的生成，也可以促进皮肤新陈代谢，加速已生成黑色素的代谢，内外协同，对于雀斑和黄褐斑等色斑有良好的祛除效果。果。果。


技术研发人员：尹进 尹卫群 殷勤伟
受保护的技术使用者：广东创美抗衰老研究有限公司
技术研发日：2023.08.31
技术公布日：2023/10/11