负载生长因子的静电纺丝敷料及其制备方法

1.本发明属于敷料成型技术领域，具体涉及一种负载生长因子的静电纺丝敷料，还涉及一种负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法。


背景技术：

2.静电纺丝技术制备的纤维膜已成为一种广泛使用的伤口敷料。静电纺丝敷料孔隙率高、孔径小、与细胞外基质结构相似，因此拥有优秀的隔菌透气性能，能为伤口提供良好的愈合环境。但成分单一的静电纺丝敷料细胞亲和力差，缺乏促进细胞增殖、攀附的位点，对伤口愈合的促进作用有限。细胞生长因子是一类具有刺激细胞生长活性的多肽类物质，将其负载在静电纺丝敷料上能够显著增强敷料的细胞亲和力以及促愈合能力，从而实现对于烧伤、创伤、炎症溃烂等严重的皮肤损伤的治疗。生长因子稳定性差、体内半衰期短，通过合适的负载方式使生长因子均匀分布在纤维上并持续释放形成细胞攀爬点是提高负载生长因子静电纺丝敷料促愈合性能的关键。
3.目前制备负载生长因子的静电纺丝敷料的手段主要分为两类。其一为直接将生长因子与聚合物溶液混合后静电纺丝。生长因子大多附着在纤维表面，前24h即有80％左右的生长因子释放，不利于持续促进细胞增殖。其二为利用乳液静电纺丝技术制备具有芯壳结构的纤维，这种芯壳核纤维会在前24h突释20％-30％的生长因子。因此生长因子负载量不宜过高，从而导致持续释放量低，细胞亲和力差。这两种方法制备的纤维表面光滑，生长因子排列分散，释放不平稳，均难以形成细胞攀爬点。


技术实现要素：

4.本发明的第一个目的是提供一种负载生长因子的静电纺丝敷料，解决光滑静电纺丝纤维敷料细胞亲和力差，缺乏细胞攀爬位点的问题。
5.为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物55％-85％，壳聚糖9.5％-36.4％，牛血清白蛋白3.3％-13.5％，三聚磷酸钠0.07％-0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.004％-0.063％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％
6.本发明的技术方案，还具有以下特点：
7.作为本发明的一种优选的技术方案，所述合成聚合物为聚乳酸、聚己内酯、聚氨酯中的一种或多种。
8.作为本发明的一种优选的技术方案，筛分机构还包括进料斗，所述壳聚糖分子量为15w-25w，脱乙酰度为80％以上。
9.本发明的第二个目的是提供一种负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，解决光滑静电纺丝纤维敷料细胞亲和力差，缺乏细胞攀爬位点的问题。
10.为了达到上述目的，本发明所采用的技术方案是：一种负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
11.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:3-5配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为8％-12％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.01％-0.02％；
12.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；
13.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2％-3％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为1.5％-2.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为0.8％-1.2％，生长因子质量浓度为0.001％-0.003％；另配制质量浓度为1％-2％的氢氧化钠溶液；
14.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7-8得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:1-2；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:1-2；
15.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为30ml-40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架2-4遍后，在零下40℃至零下50℃，真空度10mpa-20mpa条件下冷冻干燥3h-5h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
16.本发明的技术方案，还具有以下特点：
17.作为本发明的一种优选的技术方案，在所述步骤2中，静电纺丝条件为电压15kv-25kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1ml/h-2ml/h，针头到接收端的距离为8cm-14cm，接收端为金属电极。
18.作为本发明的一种优选的技术方案，在所述步骤2中，在所述步骤4中，静电喷雾的条件为电压10kv-20kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1.5ml/h-3ml/h，针头到接收溶液底部的距离为9cm-12cm。
19.本发明的有益效果是：本发明的负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料，拥有更好的细胞亲和力，生长因子累积释放曲线平稳，释放周期可达72h，能够更好的促进细胞增殖、攀附。
附图说明
20.图1为本发明静电纺丝敷料喷金后的扫描电镜图。
21.图2为未结合细胞攀爬点的阴离子支架和结合不同含量细胞攀爬点的本发明静电纺丝敷料对兔红细胞的吸附率。
22.图3为未结合细胞攀爬点的阴离子支架和结合不同含量细胞攀爬点的本发明静电纺丝敷料对兔红细胞吸附实验后的样品图。
23.图4为本发明静电纺丝敷料与现有技术负载生长因子的静电纺丝敷料生长因子释放行为对比图。
具体实施方式
24.本发明的一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物55％-85％，壳聚糖9.5％-36.4％，牛血清白蛋白3.3％-13.5％，三聚磷酸钠
0.07％-0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.004％-0.063％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％；合成聚合物为聚乳酸、聚己内酯、聚氨酯中的一种或多种；壳聚糖分子量为15w-25w，脱乙酰度为80％以上。
25.上述负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
26.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:3-5配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为8％-12％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.01％-0.02％；
27.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压15kv-25kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1ml/h-2ml/h，针头到接收端的距离为8cm-14cm，接收端为金属电极；
28.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2％-3％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为1.5％-2.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为0.8％-1.2％，生长因子质量浓度为0.001％-0.003％；另配制质量浓度为1％-2％的氢氧化钠溶液；
29.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7-8得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:1-2；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:1-2；静电喷雾的条件为电压10kv-20kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1.5ml/h-3ml/h，针头到接收溶液底部的距离为9cm-12cm；
30.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为30ml-40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架2-4遍后，在零下40℃至零下50℃，真空度10mpa-20mpa条件下冷冻干燥3h-5h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
31.实施例1
32.本发明的一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物72.7％，壳聚糖20.3％，牛血清白蛋白6.7％，三聚磷酸钠0.11％，碱性成纤维细胞生长因子0.013％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。
33.本发明的一种载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
34.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:4配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为10％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.015％；
35.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压20kv，温度28℃，湿度35％，纺丝速率1.5ml/h，针头到接收端的距离为11cm，接收端为金属电极；
36.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2.5％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为2％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为1％，生长因子质量浓度为0.002％；另配制质量浓度为1.5％的氢氧化钠溶液；
37.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作
为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7.5得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为2:3；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为2:3；静电喷雾的条件为电压15kv，温度28℃，湿度35％，纺丝速率2.5ml/h，针头到接收溶液底部的距离为10cm；
38.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为35ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架3遍后，在零下45℃，真空度15mpa条件下冷冻干燥4h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
39.实施例2
40.本发明的一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物57％，壳聚糖28.7％，牛血清白蛋白13.5％，三聚磷酸钠0.07％，碱性成纤维细胞生长因子0.03％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。
41.负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
42.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:3配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为8％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.01％；
43.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压15kv，温度25℃，湿度30％，纺丝速率1ml/h，针头到接收端的距离为8cm，接收端为金属电极；
44.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为2.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为1.2％，生长因子质量浓度为0.003％；另配制质量浓度为1％的氢氧化钠溶液；
45.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:1；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:1；静电喷雾的条件为电压10kv，温度25℃，湿度30％，纺丝速率1.5ml/h，针头到接收溶液底部的距离为9cm；
46.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架2遍后，在零下40℃，真空度10mpa条件下冷冻干燥3h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
47.实施例3
48.由以下组分组成：合成聚合物83.5％，壳聚糖12.5％，牛血清白蛋白3.3％，三聚磷酸钠0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.004％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。
49.负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
50.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:5配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为12％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.02％；
51.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸
钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压25kv，温度30℃，湿度40％，纺丝速率2ml/h，针头到接收端的距离为14cm，接收端为金属电极；
52.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为3％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为1.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为0.8％，生长因子质量浓度为0.001％；另配制质量浓度为2％的氢氧化钠溶液；
53.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至8得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:2；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:2；静电喷雾的条件为电压20kv，温度30℃，湿度40％，纺丝速率3ml/h，针头到接收溶液底部的距离为12cm；
54.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架4遍后，在零下50℃，真空度20mpa条件下冷冻干燥5h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
55.实施例4
56.本发明的一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物85％，壳聚糖9.5％，牛血清白蛋白5％，三聚磷酸钠0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.063％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。
57.负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
58.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:5配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为12％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.02％；
59.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压25kv，温度30℃，湿度40％，纺丝速率2ml/h，针头到接收端的距离为14cm，接收端为金属电极；
60.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为3％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为1.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为0.8％，生长因子质量浓度为0.001％；另配制质量浓度为2％的氢氧化钠溶液；
61.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至8得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:1；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:2；静电喷雾的条件为电压20kv，温度30℃，湿度40％，纺丝速率3ml/h，针头到接收溶液底部的距离为12cm；
62.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为30ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架4遍后，在零下50℃，真空度20mpa条件下冷冻干燥5h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
63.实施例5
64.本发明的一种负载生长因子的静电纺丝敷料，按质量百分比，由以下组分组成：合
成聚合物55％，壳聚糖36.4％，牛血清白蛋白8.5％，三聚磷酸钠0.07％，碱性成纤维细胞生长因子0.02％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。
65.负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，具体按照以下步骤实施：
66.步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:3配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为8％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.01％；
67.步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；静电纺丝条件为电压15kv，温度25℃，湿度30％，纺丝速率1ml/h，针头到接收端的距离为8cm，接收端为金属电极；
68.步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为2.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为1.2％，生长因子质量浓度为0.003％；另配制质量浓度为1％的氢氧化钠溶液；
69.步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7得到支架前驱液。混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:2；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:1；静电喷雾的条件为电压10kv，温度25℃，湿度30％，纺丝速率1.5ml/h，针头到接收溶液底部的距离为9cm；
70.步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架2遍后，在零下40℃，真空度10mpa条件下冷冻干燥3h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。
71.图1为本发明静电纺丝敷料喷金后的扫描电镜图。负载生长因子的壳聚糖胶粒作为细胞攀爬点均匀的分散在阴离子支架表面。
72.图2为未结合细胞攀爬点的阴离子支架和结合不同含量细胞攀爬点的本发明静电纺丝敷料对兔红细胞的吸附率。本发明负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料相比未结合细胞攀爬点的阴离子支架细胞吸附率明显提高，并且随着细胞攀爬点含量增加细胞吸附率也提高，说明本发明显著提高了敷料的细胞亲和性。
73.图3为未结合细胞攀爬点的阴离子支架和结合不同含量细胞攀爬点的本发明静电纺丝敷料对兔红细胞吸附实验后的样品图。结合了细胞攀爬点的敷料表面吸附的红细胞明显增加，并且攀爬点含量增加红细胞吸附量也随之增加，说明本发明具有更好的细胞亲和性。
74.图4为本发明静电纺丝敷料与现有技术负载生长因子的静电纺丝敷料生长因子释放行为对比图。本发明的负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料可以实现生长因子的72h平稳释放。
75.本发明通过离子交联技术将包裹生长因子的壳聚糖微球均匀锚定在电纺聚合物纤维支架上，实现生长因子的长期稳定释放，形成了促进细胞增殖的攀爬位点。显著提高了静电纺丝敷料的细胞亲和力。
76.本发明通过静电纺丝技术制备阴离子支架，混合有三聚磷酸钠的聚合物溶液在高压电场的作用下有机溶剂挥发，聚合物细化拉伸形成纤维，三聚磷酸钠均匀分布在纤维上。
通过静电喷雾技术制备支架前驱液，在前驱液中形成负载细胞生长因子的壳聚糖胶粒。在支架前驱液恒流通过阴离子支架时，三聚磷酸钠与前驱液中的壳聚糖胶粒发生离子交联作用而锚定在阴离子支架上形成细胞攀爬位点。攀爬位点处的生长因子缓慢释放，细胞吸附到攀爬位点处进行增殖，显著增强了敷料的细胞亲和力与促愈合能力。
77.将本发明的负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料喷金后以扫描电镜(sem)观察纤维形貌。如图1所示，前驱液中的负载生长因子的壳聚糖胶粒作为细胞攀爬点均匀的分散在阴离子支架表面。
78.将阴离子支架和结合不同数量细胞攀爬位点的静电纺丝敷料与兔红细胞于24孔板中进行细胞吸附实验。实验结果如图2所示，结果表明随着细胞攀爬点数量增加，细胞吸附率明显增加，即随着细胞攀爬点数量增加支架的细胞亲和力明显提高。
79.孵育后兔红细胞在敷料表面的粘附情况如图3所示，结合细胞攀爬点的静电纺丝敷料相对未负载细胞攀爬点的阴离子支架吸附的红细胞数量显著增多。并且随着细胞攀爬点结合量增加敷料吸附的红细胞数量也显著增加。
80.如图4所示，在37℃条件下ph7.2的pbs缓冲液中的累积释放结果表明，本发明的负载生长因子的静电纺丝敷料生长因子释放稳定性更好，持续释放时间较长。
81.因此，本发明负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料生长因子的释放更加平稳，拥有更好的细胞亲和力。

技术特征：
1.一种负载生长因子的静电纺丝敷料，其特征在于，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物55％-85％，壳聚糖9.5％-36.4％，牛血清白蛋白3.3％-13.5％，三聚磷酸钠0.07％-0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.004％-0.063％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。2.根据权利要求1所述的负载生长因子的静电纺丝敷料，其特征在于，所述合成聚合物为聚乳酸、聚己内酯、聚氨酯中的一种或多种。3.根据权利要求2所述的负载生长因子的静电纺丝敷料，其特征在于，所述壳聚糖分子量为15w-25w，脱乙酰度为80％以上。4.一种权利要求1-3中任一项所述负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1、将丙酮与二氯甲烷以体积比1:3-5配制得到溶剂，将合成聚合物溶解在溶剂中后加入三聚磷酸钠混匀得到静电纺丝支架溶液；静电纺丝支架溶液中合成聚合物的质量浓度为8％-12％，三聚磷酸钠的质量浓度为0.01％-0.02％；步骤2、将上述步骤1的静电纺丝支架溶液通过静电纺丝制备成均匀负载三聚磷酸钠的阴离子支架；步骤3、将壳聚糖溶于体积分数为2％-3％的醋酸溶液中得到壳聚糖溶液，壳聚糖溶液中壳聚糖的质量浓度为1.5％-2.5％；将牛血清白蛋白和生长因子溶于去离子水中得到混合溶液，混合溶液中牛血清白蛋白质量浓度为0.8％-1.2％，生长因子质量浓度为0.001％-0.003％；另配制质量浓度为1％-2％的氢氧化钠溶液；步骤4、将上述步骤3配制的壳聚糖溶液与混合溶液混匀后，选择氢氧化钠溶液作为液体接收装置进行静电喷雾，随后利用醋酸调节ph至7-8得到支架前驱液；混合溶液及壳聚糖溶液的体积比为1:1-2；壳聚糖溶液与氢氧化钠溶液的体积比为1:1-2；步骤5、将步骤4制备的支架前驱液恒流通过步骤2制备的阴离子支架，直至壳聚糖包裹生长因子在阴离子支架上缩聚成细胞攀爬点，每1g阴离子支架通过的支架前驱液体积为30ml-40ml；之后用去离子水冲洗阴离子支架2-4遍后，在零下40℃至零下50℃，真空度10mpa-20mpa条件下冷冻干燥3h-5h得到负载生长因子细胞攀爬点的静电纺丝敷料。5.根据权利要求4所述的负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，其特征在于，在所述步骤2中，静电纺丝条件为电压15kv-25kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1ml/h-2ml/h，针头到接收端的距离为8cm-14cm，接收端为金属电极。6.根据权利要求5所述的负载生长因子的静电纺丝敷料的制备方法，其特征在于，在所述步骤4中，静电喷雾的条件为电压10kv-20kv，温度25℃-30℃，湿度30％-40％，纺丝速率1.5ml/h-3ml/h，针头到接收溶液底部的距离为9cm-12cm。

技术总结
本发明公开了一种负载生长因子的静电纺丝敷料，其特征在于，按质量百分比，由以下组分组成：合成聚合物55％-85％，壳聚糖9.5％-36.4％，牛血清白蛋白3.3％-13.5％，三聚磷酸钠0.07％-0.14％，碱性成纤维细胞生长因子0.004％-0.063％，其余为水分，以上组分质量百分比合计100％。该负载生长因子的静电纺丝敷料，解决了光滑静电纺丝纤维敷料细胞亲和力差，缺乏细胞攀爬位点的问题。缺乏细胞攀爬位点的问题。缺乏细胞攀爬位点的问题。


技术研发人员：沈文 毛越洋 吴尚 闫皮 胡佳茹
受保护的技术使用者：陕西科技大学
技术研发日：2023.05.25
技术公布日：2023/9/23