一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂及制备方法与流程

1.本发明涉及泰万菌素抗生素的制备技术领域，具体涉及一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂及制备方法。


背景技术：

2.泰万菌素，为大环内酯类抗生素，由英国伊科动物保健品有限公司开发，常使用其酒石酸盐。它是泰乐菌素的衍生物，由泰乐菌素通过微生物转化而得，显著改善了泰乐菌素在体内的抗菌活性。其抗菌谱广、抗菌活性高、毒副作用小等优势，成为防治临床上的急慢性呼吸道系统、消化道系统疾病的常用抗生素。有研究表明(刘丽，影响酒石酸泰万菌素口服生物利用度因素的初步研究，2015)，酒石酸泰万菌素肉鸡单剂量口服后，吸收迅速，但绝对口服生物利用度低，仅有12.67％。酒石酸泰万菌素的口服生物利用度主要受肠道和肝脏代谢的影响。
3.干混悬剂是将难溶性固体药物与适宜辅料制成粉状物或粒状物，临用时加水振摇即可分散成混悬剂供口服使用。与预混剂或粉剂相比，其在水中分散均匀，避免预混剂或粉剂拌料使用时混合不匀导致的药效不理想或局部浓度过高中毒等问题。同时干混悬剂较预混剂的比表面积大，吸收迅速，生物利用度高，药效更显著。
4.膨润土，是一种生物相容性粘土矿物，以蒙脱石为主要矿物成分，其含量为40％～90％，还含有少量的高岭石、水铝英石、绿泥石、蛋白石、云母等矿物质。蒙脱石属单斜晶系网架状结构，即由二层硅氧四面体中间夹铝氧八面体组成，具有离子交换能力，膨润土无臭无味、极细，外观杂色土状，不溶于水和有机溶剂。膨润土在工农业生产中应用广泛，可作为催化剂载体、干燥剂、过滤剂、脱色剂、饲料添加剂、土壤改良剂等。在医药工业中主要是用作辅料，膨润土由于具有吸水性、悬浮性、分散性、粘结性、触变性.使其作为制剂辅料具有乳化、增稠、助悬、吸附的功能，是优良的药用辅料。膨润土作为混悬剂中性能优良的助悬剂，其吸水后带有负电荷，能够阻止微粒聚集，有研究表明膨润土作炉甘石洗剂的助悬剂，并与同浓度的cmc-na、海藻酸钠进行比较，结果表明，其沉降容积比、微粒布朗运动、再分散性、结块情况、微粒大小等指标均优于后两者。此外，膨润土因其高度分散性和非均匀性电性分布等特性，使其具有很好的吸附性对消化道内的一些病毒、病菌及毒索产生较强的选择性吸附作用，对抗生素和杀虫剂等药物起到一定的增效作用。然而过强的吸附性也会导致装载在膨润土内的药物分子释放度较低，从而对治疗产生不利影响，因此，本发明筛选一种表面活性剂以去除药物释放不完全的缺点，有助于在较高ph条件下从药物膨润土复合物中释放药物。
5.磷脂酰胆碱(pc)是一种富含于细胞膜的生物相容性物质，它是由亲水性两性离子头部基团和疏水性烃链组成两亲性物质，由于优良的两亲性，pc在制剂里常作为乳化剂、增溶剂或脂质载体材料。生理条件下pc为中性分子，因为亲水两性离子头部基团所带正电的季胺和带负电的磷酸基团电荷相当。在ph《3时，由于带负电的磷酸基团质子化，pc带正电荷，由于其ph依赖的电荷转换性质，在酸性条件下pc与膨润土通过静电作用相结合，
6.在进入肠道后，pc可以帮助药物从膨润土中溶出，因此本发明将通过试验验证pc的加入对药物从复合物中溶出的影响。


技术实现要素：

7.为解决背景技术中存在的问题，本发明提供一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其按质量计包括如下组成成份：酒石酸泰万菌素5-20份，助悬剂10-40份，表面活性剂5-20份，载体分散材料10-20份，纯化水1-10份。
8.优选的方案中，所述的助悬剂，选自硅酸盐，所述硅酸盐助悬剂选自以下一种或多种：硅酸镁铝、硅酸铝、钠基膨润土、钙基膨润土、氢基膨润土、有机膨润土。
9.优选的方案中，所述的表面活性剂选自天然两亲性表面活性剂磷脂酰胆碱，包括大豆磷脂酰胆碱和蛋黄磷脂酰胆碱中的一种或两种。
10.优选的方案中，所述的载体分散材料，选自麦芽糊精，玉米淀粉，微晶纤维素中的一种或几种。
11.一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂及制备方法，其包括如下的步骤：
12.s1：将配方量的助悬剂用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，
13.得到酸性助悬剂混悬液；
14.s2：用少量95％乙醇溶解表面活性剂，加入到助悬剂混悬液中，搅拌10-20min，得到助悬剂-表面活性剂复合物；
15.s3：取配方量药物溶解于ph2.0的盐酸溶液中，缓慢加入到助悬剂-表面活性剂复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；
16.s4：向载药纳米混悬液中加入载体分散材料混匀后，进行喷雾干燥，设置进风温度150-180℃，出风温度80-100℃，即得。
17.本发明所达到的有益效果为：
18.针对普通酒石酸泰万菌素预混剂口服生物利用度低的问题，本发明提供了一种酒石酸泰万菌素的纳米干混悬剂及制备方法，采用膨润土高效装载药物，药物通过静电吸附牢固地结合在膨润土层状结构中，加入表面活性剂和载体分散材料后，通过纳米研磨机使药物与助悬剂和表面活性剂形成均匀的纳米复合物，而表面活性剂磷脂酰胆碱的加入，优化了药物的吸附与体外溶出速率，可使药物的溶出速度加快，溶出更彻底，且表面活性剂胶束起到明显的药物增溶和吸收促进作用，有利于药物在靶部位的吸收，大大提高了药物的口服生物利用度。本发明的制备的干混悬剂外观为灰白至褐色粉末，流动性好，加水复悬后得到白色混悬液，粒径为500-800nm，多分散指数(pdi)为0.23-0.32，zeta电位为-12.0
‑‑
15.3mv，载药量为12.5-17.6％。该制剂亲水性良好，遇水后在水中可以稳定悬浮3小时以上，在水中均可迅速分散，适口性好，满足畜禽饮水给药的要求，使用方便。
19.本发明的干混悬剂具有ph依赖释药特性和缓释特性，在模拟胃酸条件下药物释放总量低于20％，而在模拟肠道ph条件下，药物缓慢可控释放，有利于提高在吸收部位的药物浓度和作用时间，进而提高药物的口服生物利用度。
20.本发明的高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其相比常规泰万菌素预混剂和普通泰万菌素干混悬剂的生物利用度分别提高了2.3倍和2倍，该纳米制剂显著提高了泰万菌素的口服吸收效率。
附图说明
21.图1：酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂扫描电镜图：膨润土(a)，磷脂酰胆碱(b)，酒石酸泰万菌素(c)，药物-膨润土-pc喷干复合物(d)，药物、膨润土、pc的物理混合物；
22.图2：酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂(f3)复溶后混悬液和pc纳米粒形成的透射电镜图；
23.图3：酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂(f3)和普通干混悬剂复溶后放置时间对比图；
24.图4：膨润土-pc-药物复合物及药物释放机制示意图；
25.图5：酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂体外药物释放结果图；
26.图6：实施例3中酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂的药动学试验结果。
具体实施方式
27.下面将结合本发明中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，另外，在以下的实施方式中记载的各结构的形态只不过是例示，本发明并不限定于在以下的实施方式中记载的各结构，在本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施方式都属于本发明保护的范围。
28.实施例1、
29.一种高口服生物利用度的酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂，其成分按质量混合后构成的制剂组成如下所述(配方1)：
30.(1)酒石酸泰万菌素10g，
31.(2)钠基膨润土10g，
32.(3)大豆磷脂酰胆碱(pc)0g，
33.(4)麦芽糊精30g，
34.(5)纯化水加至500ml。
35.制备步骤如下：
36.(1)将配方量的钠基膨润土用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，得到酸性膨润土混悬液；
37.(2)用少量95％乙醇溶解大豆磷脂酰胆碱，加入到膨润土混悬液中，搅拌10～20min，得到膨润土-pc复合物；
38.(3)取配方量酒石酸泰万菌素原料药溶解于ph2.0的hcl溶液中，缓慢加入到膨润土-pc复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；
39.(4)向载药纳米混悬液中加入麦芽糊精混匀后，进行喷雾干燥(进风温度150～180℃，出风温度80～100℃)，即得。
40.实施例2、
41.本实施例中，干混剂成分按质量混合后构成的制剂组成如下所述(配方2)：
42.(1)酒石酸泰万菌素20g，
43.(2)钙基膨润土40g，
44.(3)大豆磷脂酰胆碱(pc)5g，
45.(4)微晶纤维素30g，
46.(5)纯化水加至500ml。
47.制备步骤如下：
48.(1)将配方量的钙基膨润土用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，得到酸性膨润土混悬液；
49.(2)用少量95％乙醇溶解大豆磷脂酰胆碱，加入到膨润土混悬液中，搅拌10～20min，得到膨润土-pc复合物；
50.(3)取配方量酒石酸泰万菌素原料药溶解于ph2.0的hcl溶液中，缓慢加入到膨润土-pc复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；
51.(4)向载药纳米混悬液中加入微晶纤维素混匀后，进行喷雾干燥(进风温度150～180℃，出风温度80～100℃)，即得。
52.实施例3、
53.本实施例中，干混剂成分按质量混合后构成的制剂组成如下所述(配方3)：
54.(1)酒石酸泰万菌素20g，
55.(2)钠基膨润土50g，
56.(3)蛋黄磷脂酰胆碱(pc)10g，
57.(4)麦芽糊精30g，
58.(5)纯化水加至500ml。
59.制备步骤如下：
60.(1)将配方量的钠基膨润土用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，得到酸性膨润土混悬液；
61.(2)用少量95％乙醇溶解蛋黄磷脂酰胆碱，加入到膨润土混悬液中，搅拌10～20min，得到膨润土-pc复合物；
62.(3)取配方量酒石酸泰万菌素原料药溶解于ph2.0的hcl溶液中，缓慢加入到膨润土-pc复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；
63.(4)向载药纳米混悬液中加入麦芽糊精混匀后，进行喷雾干燥(进风温度150～180℃，出风温度80～100℃)，即得。
64.实施例4、
65.本实施例中，干混剂成分按质量混合后构成的制剂组成如下所述(配方4)：
66.(1)酒石酸泰万菌素20g，
67.(2)有机膨润土40g，
68.(3)大豆磷脂酰胆碱(pc)15g，
69.(4)玉米淀粉30g，
70.(5)纯化水加至500ml。
71.制备步骤如下：
72.(1)将配方量的有机膨润土用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，得到酸性膨润土混悬液；
73.(2)用少量95％乙醇溶解大豆磷脂酰胆碱，加入到膨润土混悬液中，搅拌10～20min，得到膨润土-pc复合物；
74.(3)取配方量酒石酸泰万菌素原料药溶解于ph2.0的hcl溶液中，缓慢加入到膨润土-pc复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；
75.(4)向载药纳米混悬液中加入玉米淀粉混匀后，进行喷雾干燥(进风温度150～180℃，出风温度80～100℃)，即得。
76.实施例5、
77.酒石酸泰万菌素普通干混悬剂的制备
78.配方如下(配方5)：
79.(1)酒石酸泰万菌素20g，
80.(2)酒石酸10g，
81.(3)羟丙甲基纤维素5g，
82.(4)黄原胶4g，
83.(5)二氧化硅0.5g
84.(6)无水葡萄糖加至100g
85.制备方法如下：
86.将原料药、助悬剂、助溶剂、分散剂、填充剂等物料混匀，加入30％乙醇制粒后，60℃烘干，用粉碎机将物料粉碎至80-100目，即得。
87.实施例6、
88.对不同配方酒石酸泰万菌素干混悬制剂的评价
89.对配方1～5的外观、流动性、水化分散性、形态、粒径、电位、载药量等理化性质进行考察，结果如下表所示：
90.表1不同配方酒石酸泰万菌素干混悬制剂的理化性质
[0091][0092]
制备酒石酸泰万菌素的原辅料形态的电镜照片见图1所示，由表1所示，酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂流动性良好，复溶后水分散性好(见图2)，记录测定纳米干混悬剂水化分散性混悬物初始高度(h0)，静置3h，记录混悬物的最终高度(h)，用h/h0得到沉降体积比f。f值越大，代表混悬液越稳定。如图3所示，酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂复溶后在水中稳定性好于普通干混悬剂，说明纳米干混悬剂可以通过饮水给药，使用过程不会堵塞水线。
[0093]
实施例7、
[0094]
酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂的体外药物释放
[0095]
取处方量的酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂和泰万菌素预混剂，照中国兽药典溶出度与释放度测定法分别以0.1mol/l盐酸溶液和ph6.8磷酸盐缓冲液900ml为介质，转速为每分钟75转，依法操作，分别在0、0.5、1、2、4、6、8、12h取溶液滤过，精密量取续滤液适量，用流动相稀释成每1ml中约含100μg的溶液，作为供试品溶液；另取酒石酸泰万菌素对照品，精密称定，流动相稀释成每1ml中约含100μg的溶液，作为对照品溶液。hplc进样，测定每批次酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂的溶出度。色谱条件：c18色谱柱，乙腈-0.15mol/l醋酸铵溶液-醋酸(45:45:10)为流动相，检测波长280nm。
[0096]
结果如图5所示，泰万菌素在模拟胃酸较低ph条件下释放缓慢，而在模拟肠液条件下释放明显加速。这是因为在较低ph值下，泰万菌素分子上的叔胺基的质子化，药物与膨润土层状分子中的离子产生较强的相互作用，药物释放度较小，当ph升高到中性条件下，叔胺基发生去质子化，药物极性降低，从而与膨润土复合物之间的作用力减弱，因此药物释放增加。pc的加入使得药物在肠道ph条件下的溶出更快且更完全，药物与磷脂的复合一方面可以提高溶出率，另一方面有利于在靶部位的跨膜吸收，提高药物吸收利用程度(见图4)。
[0097]
实施例8、
[0098]
取18头30日龄健康仔猪随机分成3组，每组6头，所有仔猪给药前禁食12h。第一组口服酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂，第二组口服酒石酸泰万菌素普通干混悬剂组，第三种口服酒石酸泰万菌素预混剂组，三组给药剂量以泰万菌素计均为25mg/kg，分别单次灌服给药，给药后按照预定的时间点采集血样，所采血液均含有抗凝剂肝素钠的试管中室温下静置2h后3000r/min离心10min，分离血浆，取上清液于－20℃冷冻保存，待测定。根据文献方法(卢迪等，酒石酸泰万菌素预混剂在仔猪体内的药代动力学研究)，采用液相色谱-质谱法(lc/ms/ms)测定酒石酸泰万菌素的血浆浓度，用das 2.0软件计算药动学参数。
[0099]
系统适用性试验结果表明，泰万菌素色谱峰与分离良好，精密度、回收率均满足检测要求。结果如表2和图6所示，口服酒石酸泰万菌素普通预混剂吸收较快，在1.61h达到平均最大血药浓度(cmax)243.2
±
165.1ng
·
ml-1
，平均药时曲线下面积(auc)为2788.2
±
1024.3ng/ml
·
h。普通干混悬剂平均达峰时间延迟到2.48h，与药物的缓释效果有关，其cmax和auc分别为235.0
±
189.4ng
·
ml-1
和3177.4
±
1933.5ng/ml
·
h。与之相比，纳米混悬液组吸收达峰缓慢，t max达到6.63h，这与药物在体内的ph依赖释放有关，表现出了较好的体内外药物释放相关性。酒石酸泰万菌素纳米干混悬剂组的cmax和auc分别为258.6
±
133.5ng
·
ml-1
和6410.5
±
2490.0ng/ml
·
h。
[0100]
与普通预混剂和普通干混悬剂相比，纳米干混悬剂组的药时曲线下面积和平均滞留时间显著增强，药物在体内作用时间延长，清除减慢，吸收增加。与普通预混剂相比，纳米干混悬剂和普通干混悬剂的相对生物利用度分别为229％和113％，说明药物以膨润土-pc作为载体制成的干混悬剂可以显著提高药物的口服生物利用度，其缓控释能力及pc介导的药物促进作用有利于药物更高程度的吸收。泰万菌素为时间依赖型药物，药物作用时间延长，对其体内发挥抗菌作用比较有利。将这种药物包封在含有脂质材料的纳米载体中可以增加其血液循环时间，进而增加了治疗水平。
[0101]
表2药代动力学参数
[0102][0103]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其特征在于，其按质量计包括如下组成成份：酒石酸泰万菌素5-20份，助悬剂10-40份，表面活性剂5-20份，载体分散材料10-20份，纯化水1-10份。2.根据权利要求1所述的高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其特征在于：所述的助悬剂，选自硅酸盐，所述硅酸盐助悬剂选自以下一种或多种：硅酸镁铝、硅酸铝、钠基膨润土、钙基膨润土、氢基膨润土、有机膨润土。3.根据权利要求1所述的高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其特征在于：所述的表面活性剂选自天然两亲性表面活性剂磷脂酰胆碱，包括大豆磷脂酰胆碱和蛋黄磷脂酰胆碱中的一种或两种。4.根据权利要求1所述的高生物利用度泰万菌素干混悬剂，其特征在于：所述的载体分散材料，选自麦芽糊精，玉米淀粉，微晶纤维素中的一种或几种。5.一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂及制备方法，其特征在于，其包括如下的步骤：s1：将配方量的助悬剂用适量纯化水分散均匀，用0.1mol/l盐酸调节ph值至2.0，得到酸性助悬剂混悬液；s2：用少量95％乙醇溶解表面活性剂，加入到助悬剂混悬液中，搅拌10-20min，得到助悬剂-表面活性剂复合物；s3：取配方量药物溶解于ph2.0的盐酸溶液中，缓慢加入到助悬剂-表面活性剂复合物中，用湿法纳米研磨机3000rpm，循环3-5次，得到载药纳米混悬液；s4：向载药纳米混悬液中加入载体分散材料混匀后，进行喷雾干燥，设置进风温度150-180℃，出风温度80-100℃，即得。

技术总结
本发明涉及泰万菌素抗生素的制备技术领域，提供一种高生物利用度泰万菌素干混悬剂及制备方法，采用酒石酸泰万菌素5～20份，助悬剂10～40份，表面活性剂5～20份，载体分散材料10～20份，纯化水适量。其按以下步骤：将配方量助悬剂用适量纯化水搅拌分散均匀，用盐酸调节pH值至酸性，加入用95％乙醇溶解的表面活性剂，然后将药物溶解在pH2.0的盐酸中后加入到上述混悬液中，经过湿法纳米研磨机研磨，得到载药纳米混悬液，加入载体分散材料后经喷雾干燥即得。本发明的药物以纳米尺度长时间悬浮在水中，在模拟胃液中药物释放很少，而在模拟肠液中缓慢释放，延长了药物在肠道的作用时间，表面活性剂增加了药物的溶解性和渗透性。面活性剂增加了药物的溶解性和渗透性。面活性剂增加了药物的溶解性和渗透性。


技术研发人员：张岩 毛倩倩 夏方 刘西峰 王丽 赵志宏 单翠燕 路庭欢 周祥莹 冯建坤
受保护的技术使用者：青岛康地恩动物药业有限公司
技术研发日：2023.03.28
技术公布日：2023/7/13