一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用

1.本发明涉及向日葵籽粕提取物技术领域，尤其涉及一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.向日葵(helianthus annuus l.)为菊科向日葵属植物，是我国重要的油料作物，种植面积广泛，全国各地均有产。向日葵籽粕是向日葵籽榨取油脂后的副产物，我国葵花籽粕的年产量超过40万吨(张维农，刘大川.向日葵籽资源的综合开发[j].武汉工业学院学报，2002(1):29-30+35.)。有文献报道表明，向日葵籽中含有酚酸类化合物[shuangshuang guo，yan ge，kriskamol na jom.areview of phytochemistry,metabolite changes,and medicinal uses of the common sunfower seed and sprouts(helianthus annuus l.)[j].chemistry central journal，2017，(11):95.doi 10.1186/s13065-017-0328-7]。有文献报道，可提取向日葵籽粕中酚酸类化合物，但由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热，且考虑到绿原酸本身的不稳定很多提取绿原酸的制备方法中多用到稳定剂，另外，为了保证绿原酸的稳定性，通常还采取加入稳定剂或者是利用纳米脂质体包埋等方法，这些无疑都会增大绿原酸的生产成本，且还会存在很多不稳定因素。
[0003]
例如，专利文献(cn201810898013.3)一种利用生物技术从杜仲鲜叶中提取绿原酸的方法，在该制备方法中，以环氧树脂和壳聚糖为原料，通过交联聚合制成纯化树脂，该树脂内部形成了一层壳聚糖吸附膜，通过树脂和吸附膜的双层吸附，可以将绿原酸中的杂质完全吸附在树脂中，同时不破坏绿原酸的结构和生理活性；聚谷氨酸、黄烷醇为原料合成的稳定剂能够增强绿原酸对外界高温、高氧的抗性，保护绿原酸不失活。该制备方法中加入了聚谷氨酸、黄烷醇为原料合成的稳定剂，这就带来很多不确定因素，因为稳定剂本技术对人体造成的各种影响是尚不明确且难以去控制的。
[0004]
专利文献(cn201610541620.5)一种烟草绿原酸纳米脂质体包埋的方法，按配方称取绿原酸、蛋黄卵磷脂和胆固醇；用乙醇溶解；把乙醇溶液注入到磷酸缓冲液中；旋蒸除去乙醇；短时超声，得到绿原酸脂质体。绿原酸的包埋率达到88.02％，平均粒径77.16nm，所制备的绿原酸脂质体体系稳定。通过脂质体包埋的方法，能够减少或避免绿原酸与外界环境接触的机会，从而起到保护绿原酸的作用。该方法显然会增大绿原酸的生产成本。
[0005]
本发明确定一种向日葵籽粕提取物，里面含有6种酚酸类化合物和2种低聚糖，上述酚酸类化合物和低聚糖在提取物中的含量之和大于50％。建立一种安全、简便、高效的制备方法，使用该方法制备得到的向日葵籽粕提取物对皮肤细胞毒性很低，制备时无需添加稳定剂，就具备高稳定性，并且具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化妆品和外用药品中。


技术实现要素：

[0006]
本发明的目的在于：针对上述存在的问题，本发明提供一种生产成本低、对皮肤细
胞毒性很低、稳定性高、并且具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用的向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用。
[0007]
本发明是通过以下技术方案实现的：
[0008]
本发明提供了：一种向日葵籽粕提取物，向日葵籽粕提取物包括6种酚酸类化合物和2种低聚糖；其中，所述的6种酚酸类化合物分别为：绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸a、异绿原酸b、异绿原酸c；所述的2种低聚糖分别为：蔗糖和棉子糖；
[0009]
所述向日葵籽粕提取物中，所述的6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，所述的2种低聚糖的总含量在33wt％以上。
[0010]
进一步地，一种向日葵籽粕提取物，所述向日葵籽粕提取物中各组分含量为：绿原酸的含量在8.80wt％以上，新绿原酸的含量在3.10wt％以上，隐绿原酸的含量在4.40wt％以上，异绿原酸a的含量在0.15wt％以上，异绿原酸b的含量在0.20wt％以上，异绿原酸c的含量在0.28wt％以上，蔗糖的含量在22.10wt％以上，棉子糖的含量在11.50wt％以上；所述向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力是所述的6种酚酸类化合物及所述的2中低聚糖协同作用的结果，所述向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力和高浓度的绿原酸相当，优于化学合成紫外线吸收剂二苯酮-3的抗紫外辐射损伤能力。
[0011]
本发明还提供了一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0012]
(1)取向日葵籽粕，粉碎至200～300目，得到向日葵籽粕粉末；
[0013]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为35～45次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理30～40min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为50～55次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理25～30min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为25～30次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理20～25min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0014]
(3)用乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；
[0015]
(4)将提取液浓缩干燥，即得所述的向日葵籽粕提取物。
[0016]
进一步地，所述步骤(1)中还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔3～5天施沼液300～400
㎏
/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h,关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4～5h；每亩向日葵中补光灯的数量为200～250盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕。
[0017]
进一步地，所述步骤(1)中还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔4～5天施沼液350～400
㎏
/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h,关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4～5h；每亩向日葵中补光灯的数量为230～250盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕。
[0018]
进一步地，所述步骤(1)中所述沼液中还添加有15～20g/l的腐殖酸钾。
[0019]
进一步地，所述步骤(2)中将向日葵籽粕粉末于频率为40～45次/秒、温度为8～10
℃的条件下震荡处理35～40min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52～55次/秒、温度为8～10℃的条件下震荡处理27～30min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28～30次/秒、温度为8～10℃的条件下震荡处理22～25min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末。
[0020]
进一步地，所述步骤(3)中的乙醇水溶液中乙醇的体积分数在20％～95％；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为回流提取、超声提取或超临界流体萃取。
[0021]
本发明还提供了一种向日葵籽粕提取物的应用，应用于防晒的化妆品或防晒的外用药品中。
[0022]
本发明还提供了一种向日葵籽粕提取物的应用，应用于抗氧化的化妆品或抗氧化的外用药品中。
[0023]
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，向日葵籽粕提取物，里面含有6种酚酸类化合物和2种低聚糖，6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，2种低聚糖的总含量在33wt％以上，6种酚酸类化合物和2种低聚糖在提取物中的含量之和大于50wt％；由于6种酚酸类化合物和2种低聚糖的组成配比合理，使得该向日葵籽粕提取物无需通过添加稳定剂或是包埋于纳米脂质体内等方式，去保证向日葵籽粕提取物的稳定性；且6种酚酸类化合物不受2种低聚糖的不利用影响，在2种低聚糖存在的情况下，向日葵籽粕提取物依然对皮肤细胞毒性很低，并且具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化妆品和外用药品中。
[0024]
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，对该提取物进行uva及uvb共同辐射造成的人表皮角质形成细胞(hacat)损伤及uva辐射造成的人皮肤成纤维细胞细胞(hsf)损伤的保护作用试验研究，试验的分组有模型组、二苯酮-3组(阳性对照组)、绿原酸组(200μg/ml)、蔗糖组、向日葵籽粕提取物高、中、低剂量组；6种酚酸在日葵籽粕提取物中的含量约为17％，当向日葵籽粕提取物以400、200、100μg/ml的浓度作用于细胞时，其中总酚酸的浓度约为68、34、17μg/ml，远低于100μg/ml。结果表明，向日葵籽粕提取物三个剂量组对hacat和hsf均具有紫外辐射损伤的预防作用，和模型组相比存活率都有极显著性差异(p＜0.01)。其中，高剂量组的存活率和阳性组相比有极显著性差异(p＜0.01)，和绿原酸组相比则无显著性差异。由此可见，向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力是6种酚酸类化合物及2低聚糖协同作用的结果，本技术所述的向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力和高浓度的绿原酸相当，并且远优于现有化学合成紫外线吸收剂二苯酮-3。
[0025]
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热，为了保证绿原酸本身的得率及避免绿原酸被氧化，本技术制备向日葵籽粕提取物时，先将日葵籽粕粉碎，再分段震荡处理，能够有效破坏葵籽粕的细胞壁，有助于6种酚酸类化合物及2种低聚糖的溶出，提高酚酸的提取率，使得提取得到的向日葵籽粕提取物中所述的6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，所述的2种低聚糖的总含量在33wt％以上，6种酚酸类化合物和2种低聚糖在提取物中的含量之和大于50wt％；由于6种酚酸类化合物和2种低聚糖的组成配比合理，保证了向日葵籽粕提取物的稳定性向日葵籽粕提取物的细胞毒性很低，并且6种酚酸类化合物和2种低聚糖具有协同抗紫线外辐射损伤的作用；本发明所述的向日葵籽粕提取物，是一种高效低毒的天然紫外线吸收剂，具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化
妆品和外用药品中；具有制备方法简单，生产成本低的优势。
[0026]
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，向日葵籽收获前施加沼液及间断补光，微生物在分解发酵沼液产气原料时分泌出多种活性物质，在光照及沼液中多种活性物质及微量元素的共同作用下，能够促进向日葵籽中6种酚酸类化合物的合成及积累，同时能有效提升生成的6种酚酸类化合物的稳定性；沼液中还添加有15～20g/l的腐殖酸钾，能辅助促进向日葵籽中棉子糖的合成及积累，进一步保证向日葵籽粕提取物的稳定性。
具体实施方式
[0027]
本说明书(包括任何附加权利要求、摘要)中公开的任一特征，除非特别叙述，均可被其他等效或具有类似目的的替代特征加以替换。即，除非特别叙述，每个特征只是一系列等效或类似特征中的一个例子而已。
[0028]
本发明一种向日葵籽粕提取物，向日葵籽粕提取物包括6种酚酸类化合物和2种低聚糖；其中，所述的6种酚酸类化合物分别为：绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸a、异绿原酸b、异绿原酸c；所述的2种低聚糖分别为：蔗糖和棉子糖；
[0029]
所述向日葵籽粕提取物中，所述的6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，所述的2种低聚糖的总含量在33wt％以上；
[0030]
更具体地，绿原酸的含量在8.80wt％以上，新绿原酸的含量在3.10wt％以上，隐绿原酸的含量在4.40wt％以上，异绿原酸a的含量在0.15wt％以上，异绿原酸b的含量在0.20wt％以上，异绿原酸c的含量在0.28wt％以上，蔗糖的含量在22.10wt％以上，棉子糖的含量在11.50wt％以上。
[0031]
实施例1：制备所述向日葵籽粕提取物
[0032]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0033]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔3天施沼液300kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h，关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4h；每亩向日葵中补光灯的数量为200盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)榨取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；所述沼液中还添加有15g/l的腐殖酸钾；
[0034]
再取向日葵籽粕，粉碎至200目，得到向日葵籽粕粉末；
[0035]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为35次/秒、温度为5℃的条件下震荡处理30min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为50次/秒、温度为5℃的条件下震荡处理25min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为25次/秒、温度为5℃的条件下震荡处理20min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0036]
(3)用乙醇的体积分数在75％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为回流提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次提取，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第
二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0037]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.3％。
[0038]
实施例2：制备所述向日葵籽粕提取物
[0039]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0040]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔5天施沼液400kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h，关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达5h；每亩向日葵中补光灯的数量为250盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)榨取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；所述沼液中还添加有20g/l的腐殖酸钾；
[0041]
再取向日葵籽粕，粉碎至300目，得到向日葵籽粕粉末；
[0042]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为45次/秒、温度为10℃的条件下震荡处理40min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为55次/秒、温度为10℃的条件下震荡处理30min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为30次/秒、温度为10℃的条件下震荡处理25min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0043]
(3)用乙醇的体积分数在65％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超临界流体萃取；浸提用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次浸提，第一次浸提时，浸提用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次浸提时，浸提用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0044]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.2％。
[0045]
实施例3：制备所述向日葵籽粕提取物
[0046]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0047]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔4天施沼液350kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h，关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4h；每亩向日葵中补光灯的数量为230盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)榨取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；所述沼液中还添加有17g/l的腐殖酸钾；
[0048]
再取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0049]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为40次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理35min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理27min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理22min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0050]
(3)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次浸提，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0051]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.7％。
[0052]
实施例4：制备所述向日葵籽粕提取物
[0053]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0054]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔4天施沼液350kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h，关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4h；每亩向日葵中补光灯的数量为230盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)榨取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；
[0055]
再取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0056]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为40次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理35min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理27min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理22min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0057]
(3)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次浸提，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0058]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.1％。
[0059]
实施例5：制备所述向日葵籽粕提取物
[0060]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0061]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每隔4天施沼液350kg/亩；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)榨取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；所述沼液中还添加有17g/l的腐殖酸钾；
[0062]
再取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0063]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为40次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理35min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理27min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理22min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0064]
(3)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次提取，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0065]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.0％。
[0066]
实施例6：制备所述向日葵籽粕提取物
[0067]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0068]
(1)先进行促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1)向日葵籽收获前一个月，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h，关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4h；每亩向日葵中补光灯的数量为230盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2)收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3)取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕；
[0069]
再取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0070]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为40次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理35min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理27min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理22min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0071]
(3)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次提取，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0072]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为18.1％。
[0073]
实施例7
[0074]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0075]
(1)取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0076]
(2)将向日葵籽粕粉末于频率为40次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理35min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理27min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28次/秒、温度为8℃的条件下震荡处理22min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；
[0077]
(3)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次提取，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的10倍，第
二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为三次震荡的向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0078]
(4)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为17.8％。
[0079]
对比例1
[0080]
一种向日葵籽粕提取物的制备方法，包括以下步骤：
[0081]
(1)取向日葵籽粕，粉碎至250目，得到向日葵籽粕粉末；
[0082]
(2)用乙醇的体积分数在70％的乙醇水溶液提取向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；提取向日葵籽粕粉末的方法为超声提取；提取用乙醇水溶液的总重量为向日葵籽粕粉末重量的15倍，分2次提取，第一次提取时，用乙醇水溶液的总重量为向日葵籽粕粉末重量的10倍，第二次提取时，用乙醇水溶液的总重量为向日葵籽粕粉末重量的5倍；
[0083]
(3)将提取液浓缩干燥，减压回收乙醇，即得所述的向日葵籽粕提取物；所述的向日葵籽粕提取物的得率为17.4％。
[0084]
本发明向日葵籽粕提取物中各组分的测定方法为：
[0085]
(1)酚酸类化合物的含量测定
[0086]
色谱条件：超高效液相色谱仪；色谱柱：c
18
柱(2.1
×
100mm，1.8μm)；流动相：甲醇(a)-0.1％甲酸(b)；梯度洗脱程序：0～3min：15％～25％a，3～5min：25％～30％a，5～8min：30％～33％a，8～10min：33％～40％a；停止时间40min；后运行10min；检测波长：328nm；柱温20℃；进样量2μl；流速：0.12ml/min。
[0087]
混合对照品溶液的制备：用甲醇溶解并制备得到绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸a、异绿原酸b、异绿原酸c浓度分别为0.0990mg/ml、0.0268mg/ml、0.0369mg/ml、0.0021mg/ml、0.0026mg/ml、0.0032mg/ml的混合对照品溶液。
[0088]
供试品溶液的制备：精密称取向日葵籽粕提取物约1g，用10.0ml甲醇超声30min后，冷却，补重，取上清液过微孔滤膜，备用。
[0089]
样品的测定：精密吸取混合对照品溶液及供试品溶液各2μl，按上述色谱条件进样测定峰面积，计算供试品中各酚酸的含量，结果见表1。
[0090]
(2)低聚糖的含量测定
[0091]
色谱条件：高效液相色谱仪(蒸发光散射检测器)；色谱柱：氨基柱；流动相：70％乙腈-30％纯水；运行时间：20min；流速：0.7ml/min；elsd：60℃，1.5ml/min，gain：4。
[0092]
混合对照品溶液的制备：用甲醇溶解并制备得到蔗糖和棉子糖对照品浓度分别为2.520mg/ml和2.519mg/ml的混合对照品溶液。
[0093]
供试品溶液的制备：精密称取向日葵籽粕提取物约0.1g，用30.0ml纯水超声40min后，冷却，补重，取上清液过微孔滤膜，备用。
[0094]
样品的测定：精密吸取混合对照品溶液及供试品溶液各5μl，按上述色谱条件进样测定峰面积，计算供试品中蔗糖及棉子糖的含量；
[0095]
采用上述的检测方法，上述实施例1-7中向日葵籽粕提取物中酚酸及低聚糖的含量测定结果如下表1所示：
[0096]
表1向日葵籽粕提取物中各种酚酸及低聚糖的含量
[0097][0098]
对比例中日葵籽粕提取物中酚酸及低聚糖的含量测定结果为：绿原酸的含量在8.75wt％，新绿原酸的含量在3.07wt％，隐绿原酸的含量在4.35wt％，异绿原酸a的含量在0.13wt％，异绿原酸b的含量在0.18wt％，异绿原酸c的含量在0.24wt％，蔗糖的含量在24.37wt％，棉子糖的含量在7.65wt％；
[0099]
对上述实施例1-7及对比例1中制备得到的负载向日葵籽粕提取物的稳定性，结果如下表2所示；
[0100]
表2向日葵籽粕提取物的稳定性研究结果
[0101] 热稳定性(65℃)碱稳定性贮藏稳定性(三个月)实施例173.4％72.5％93.2实施例273.5％72.3％93.5实施例373.8％72.8％93.8实施例471.2％70.4％90.9实施例570.3％70.6％90.8实施例670.2％70.4％90.5实施例769.7％68.5％87.6对比例162.8％63.7％76.9
[0102]
对实施例1的方法制备得到的向日葵籽粕提取物进行预防紫外辐射损伤的实验研究
[0103]
(1)向日葵籽粕提取物对人表皮角质形成细胞(hacat)和人皮肤成纤维细胞(hsf)的细胞毒性
[0104]
取融合度为80％以上的hacat或hsf细胞，消化之后，用培养基(含10％fbs和1％双抗的dmem高糖培养基)调整细胞浓度为3～4
×
105或1～2
×
105个/ml，接种于96孔板，每孔加样100μl细胞混悬液，放置在5％co2、37℃培养箱培养24h。二苯酮-3(cas：131-57-7)、绿原酸、蔗糖及向日葵籽粕提取物分别用dmso配制成50mg/ml的母液，用培养基适当稀释后分别加样，每孔加入100μl样品溶液，加样后各样品的终浓度分别为400、300、200、160、80、40、20、10μg/ml，每个浓度设3个复孔。加样结束后继续培养24h，将培养基吸出，每孔加入10％cck-8溶液100μl，培养2h之后，在450nm下测定od值，计算抑制率，再用统计软件计算半数抑制率ic
50
，抑制率计算公式如下，结果见表3和表4。
[0105]
抑制率％＝[1-(od
给药-od
空白
)/(od
细胞对照-od
空白
)]
×
100％
[0106]
表3 hacat细胞毒性实验结果
[0107]
样品名称ic
50
(μg/ml)二苯酮-3305.94
±
1.79绿原酸＞400蔗糖＞400向日葵籽粕提取物＞400
[0108]
表4hsf细胞毒性实验结果
[0109]
样品名称ic
50
(μg/ml)二苯酮-399.08
±
1.99绿原酸＞400蔗糖＞400向日葵籽粕提取物＞400
[0110]
结果表明，向日葵籽粕提取物对两种细胞的ic
50
均大于400μg/ml，远小于阳性对照二苯酮-3的ic
50
(305.94μg/ml及99.08μg/ml)，证明向日葵籽粕提取物对两种皮肤细胞的毒性都很小。
[0111]
(2)向日葵籽粕提取物对uvb和uva造成的hacat辐射损伤保护作用
[0112]
取融合度为80％以上的hacat，消化之后，用培养基(含10％fbs和1％双抗的dmem高糖培养基)调整细胞浓度为浓度3～4
×
105个/ml，接种于96孔板，每孔加样100μl细胞混悬液。设置接受辐射的模型组、向日葵籽粕提取物给药组、绿原酸组、蔗糖组、二苯酮-3阳性对照组，不接受辐射的细胞对照组，每组设3个复孔。将细胞种板之后培养24h，吸出上清液，给药组加入用pbs稀释成适当浓度的各样品溶液100μl，模型组和对照组都加入pbs100μl。各组给药组的终浓度分别为400、200和100μg/ml。将接受辐射的各组细胞打开盖子，分别置于一定能量的uvb和uva下进行辐射，辐射能量uvb为5mj/cm2，uva为150mj/cm2，辐射能量计算公式为：
[0113]
辐射剂量(mj/cm2)＝辐射强度(mw/cm2)
×
辐射时间(sec)
[0114]
辐射完成之后，吸出上清液，每孔加入100μl培养基继续培养24h。细胞对照组除了不接受辐射之外，其他操作步骤相同。24h后，用cck-8法显色并计算存活率，存活率计算公式如下，结果见表5。
[0115]
存活率％＝(od
辐射组-od
空白
)/(od
细胞对照-od
空白
)
×
100％
[0116]
表5向日葵籽粕提取物对uvb和uva辐射造成的hacat损伤的保护作用
[0117]
[0118][0119]
注：*表示和模型组相比有显著性差异，p＜0.05，**表示和模型组相比有极显著性差异，p＜0.01。
#
表示和阳性组相比有显著性差异，p＜0.05，
##
表示和阳性组相比有极显著性差异，p＜0.01。
[0120]
结果表明，向日葵籽粕提取物三个剂量组均对uvb和uva造成的hacat辐射损伤具有预防作用，和模型组相比存活率都有极显著性差异(p＜0.01)，高剂量组和中剂量组的存活率显著远优于现有的化学合成紫外吸收剂二苯酮-3(阳性组)(p＜0.01)。向日葵籽粕提取物中所含的酚酸类代表化合物——绿原酸，及所含低聚糖类代表化合物——蔗糖，均对hacat具有一定的紫外辐射预防作用。
[0121]
对本发明实施例1制备得到的向日葵籽粕提取物进行对uva造成的hsf辐射损伤保护作用的试验研究，试验的分组和操作方法同hacat，uva的辐射能量为10j/cm2，结果见表6。
[0122]
表6向日葵籽粕提取物对uva辐射造成的hsf损伤的保护作用
[0123]
组别浓度(μg/ml)存活率(％)模型组-43.04
±
2.13二苯酮-3组(阳性对照组)20064.21
±
1.78**绿原酸组20084.43
±
2.36**
##
蔗糖组20053.35
±
2.34**
#
向日葵籽粕提取物高剂量组40085.56
±
2.45**
##
向日葵籽粕提取物中剂量组20068.13
±
1.54**向日葵籽粕提取物低剂量组10061.24
±
2.37**
[0124]
注：*表示和模型组相比有显著性差异，p＜0.05，**表示和模型组相比有极显著性差异，p＜0.01。
#
表示和阳性组相比有显著性差异，p＜0.05，
##
表示和阳性组相比有极显著性差异，p＜0.01。
[0125]
结果表明，向日葵籽粕提取物三个剂量组均对uva造成的hsf辐射损伤具有预防作用，和模型组相比存活率都有极显著性差异(p＜0.01)。高剂量组的存活率和阳性组相比有极显著性差异(p＜0.01)。向日葵籽粕提取物中所含的酚酸类代表化合物——绿原酸，及所含低聚糖类代表化合物——蔗糖，均对hsf具有一定的紫外辐射预防作用。
[0126]
上述预防紫外辐射损伤作用的实验总结：
[0127]
从实验结果可知，向日葵籽粕提取物对皮肤细胞的毒性很低，远低于现有的常用
紫外吸收剂二苯酮-3。无论是对uvb和uva所共同造成的hacat细胞损伤，还是对uva造成的hsf细胞损伤，向日葵籽粕提取物均有良好的预防作用，其预防效果明显优于二苯酮-3。另外，蔗糖组的存活率虽然较低，但是与模型组相比依然有显著性差异(p＜0.01)，说明低聚糖也有一定的抗紫外辐射损伤作用。从含量测定结果可知，6种酚酸在日葵籽粕提取物中的含量约为17％，当向日葵籽粕提取物以400、200、100μg/ml的浓度作用于细胞时，其中总酚酸的浓度约为68、34、17μg/ml，远低于100μg/ml。由此可见，向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力是6种酚酸类化合物及2低聚糖协同作用的结果。
[0128]
对本发明实施例1制备得到的向日葵籽粕提取物进行抗氧化作用的实验研究
[0129]
(1)dpph自由基清除能力测定
[0130]
参考文献方法(zhao l,kim j c,hur j s.7-hydroxy-2-octenoic acid-ethyl ester mixture as an uv protectant secondary metabolite of an endolichenic fungus isolated from menegazziaterebrata[j].archives of microbiology,2022,204(7):395.)进行dpph自由基清除能力测定，结果见表7。
[0131]
(2)abts
+
自由基清除测定
[0132]
参考文献方法(李琦,吴超权,裴河欢.盐炙对广西余甘子清除2种自由基作用的谱效关系影响[j].中国医院药学杂志,2023,43(2):168-174.)进行abts
+
自由基自由基清除能力测定，结果见表7。
[0133]
(3)羟基自由基清除测定
[0134]
参考文献方法(黄上峰,陆飞燕,黄元河,潘乔丹,张贤桂,黄锁义.三七多糖抗氧化活性研究[j].微量元素与健康研究,2018,35(1):30-32.)进行羟基自由基清除能力测定，结果见表7。
[0135]
表7抗氧化实验结果
[0136][0137][0138]
注：*表示和绿原酸组相比有显著性差异，p＜0.05。
#
表示和二苯酮-3组相比有显著性差异，p＜0.05。
[0139]
抗氧化作用的实验总结：
[0140]
从实验结果可知，向日葵籽粕提取物有一定的抗氧化活性，虽然活性不及绿原酸强，但是远优于现有的化学合成紫外吸收剂二苯酮-3。
[0141]
由此可知，本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，向日葵籽粕提取物，里面含有6种酚酸类化合物和2种低聚糖，6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，2种低聚糖的总含量在33wt％以上，6种酚酸类化合物和2种低聚糖在提取物中的含量之和大于50wt％；由于6种酚酸类化合物和2种低聚糖的组成配比合理，使得该向日葵籽粕提取物无
需通过添加稳定剂或是包埋于纳米脂质体内等方式，去保证向日葵籽粕提取物的稳定性；向日葵籽粕提取物的细胞毒性很低，并且6种酚酸类化合物和2种低聚糖具有协同抗紫线外辐射损伤的作用；本发明所述的向日葵籽粕提取物，是一种高效低毒的天然紫外线吸收剂，具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化妆品和外用药品中；由于绿原酸本身的不稳定性，提取时不能高温、强光及长时间加热，为了保证绿原酸本身的得率及避免绿原酸被氧化，本技术制备向日葵籽粕提取物时，先将日葵籽粕粉碎，再分段震荡处理，能够有效破坏葵籽粕的细胞壁，有助于6种酚酸类化合物及2种低聚糖的溶出，提高绿原酸提取率，使得提取得到的向日葵籽粕提取物中所述的6种酚酸类化合物的总含量在17wt％以上，所述的2种低聚糖的总含量在33wt％以上，6种酚酸类化合物和2种低聚糖在提取物中的含量之和大于50wt％；由于6种酚酸类化合物和2种低聚糖的组成配比合理，保证了向日葵籽粕提取物的稳定性，且6种酚酸类化合物和2种低聚糖具有协同抗紫线外辐射损伤的作用，具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化妆品和外用药品中；本发明具有制备方法简单，生产成本低的优势。
[0142]
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，向日葵籽收获前施加沼液及间断补光，微生物在分解发酵沼液产气原料时分泌出多种活性物质，在光照及沼液中多种活性物质及微量元素的共同作用下，能够促进向日葵籽中6种酚酸类化合物的合成及积累，同时能有效提升生成的6种酚酸类化合物的稳定性；沼液中还添加有15～20g/l的腐殖酸钾，能辅助促进向日葵籽中棉子糖的合成及积累，进一步保证向日葵籽粕提取物的稳定性。
[0143]
前述对本发明的具体示例性实施方案的描述是为了说明和例证的目的。这些描述并非想将本发明限定为所公开的精确形式，并且很显然，根据上述教导，可以进行很多改变和变化。对示例性实施例进行选择和描述的目的在于解释本发明的特定原理及其实际应用，从而使得本领域的技术人员能够实现并利用本发明的各种不同的示例性实施方案以及各种不同的选择和改变。本发明的范围意在由权利要求书及其等同形式所限定。

技术特征：
1.一种向日葵籽粕提取物，其特征在于，向日葵籽粕提取物包括6种酚酸类化合物和2种低聚糖；其中，所述的6种酚酸类化合物分别为：绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸a、异绿原酸b、异绿原酸c；所述的2种低聚糖分别为：蔗糖和棉子糖；所述向日葵籽粕提取物中，所述的6种酚酸类化合物的总含量在17wt%以上，所述的2种低聚糖的总含量在33wt%以上。2.根据权利要求1所述的一种向日葵籽粕提取物，其特征在于，所述向日葵籽粕提取物中各组分含量为：绿原酸的含量在8.80wt%以上，新绿原酸的含量在3.10 wt%以上，隐绿原酸的含量在4.40 wt%以上，异绿原酸a的含量在0.15wt%以上，异绿原酸b的含量在0.20 wt%以上，异绿原酸c的含量在0.28 wt%以上，蔗糖的含量在22.10 wt%以上，棉子糖的含量在11.50 wt%以上；所述向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力是所述的6种酚酸类化合物及所述的2中低聚糖协同作用的结果，所述向日葵籽粕提取物的抗紫外辐射损伤能力和高浓度的绿原酸相当，优于化学合成紫外线吸收剂二苯酮-3的抗紫外辐射损伤能力。3.制备权利要求1-2中任意一项所述的一种向日葵籽粕提取物的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）取向日葵籽粕，粉碎至200～300目，得到向日葵籽粕粉末；（2）将向日葵籽粕粉末于频率为35～45次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理30～40min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为50～55次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理25～30min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为25～30次/秒、温度为5～10℃的条件下震荡处理20～25min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末；（3）用乙醇水溶液提取三次震荡的向日葵籽粕粉末中的6种酚酸类化合物和2种低聚糖，过滤，得到提取液；（4）将提取液浓缩干燥，即得所述的向日葵籽粕提取物。4.根据权利要求3所述的一种向日葵籽粕提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1）向日葵籽收获前一个月，每隔3～5天施沼液300～400 kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h,关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4～5h；每亩向日葵中补光灯的数量为200～250盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2）收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3）取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕。5.根据权利要求4所述的一种向日葵籽粕提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中还包括促进向日葵籽粕中6种酚酸类化合物稳定性的操作，操作方法为：1）向日葵籽收获前一个月，每隔4～5天施沼液350～400kg/亩，每日夜间给向日葵植株补光，补光工艺参数为：间断补光，每开灯补光1h,关灯30min，再开灯补光1h，再关灯30min，如此重复，至补光时间达4～5h；每亩向日葵中补光灯的数量为230～250盏，补光灯距离向日葵植株20cm，补光灯的功率为25w；2）收获向日葵并将向日葵插盘晾晒，晒干，得到葵花籽；3）取葵花籽油脂，即得向日葵籽粕。6.根据权利要求4所述的一种向日葵籽粕提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中所述沼液中还添加有15～20g/l的腐殖酸钾。
7.根据权利要求3所述的一种向日葵籽粕提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中将向日葵籽粕粉末于频率为40～45次/秒、温度为8～10℃的条件下震荡处理35～40min，得到一次震荡的向日葵籽粕粉末；将一次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为52～55次/秒、温度为8～10℃的条件下震荡处理27～30min，得到二次震荡的向日葵籽粕粉末；将二次震荡的向日葵籽粕粉末于频率为28～30次/秒、温度为8～10℃的条件下震荡处理22～25min，得到三次震荡的向日葵籽粕粉末。8.根据权利要求3所述的一种向日葵籽粕提取物的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的乙醇水溶液中乙醇的体积分数在20%～95%；提取三次震荡的向日葵籽粕粉末的方法为回流提取、超声提取或超临界流体萃取。9.如权利要求1-8任意一项所述的一种向日葵籽粕提取物的应用，其特征在于，应用于防晒的化妆品或防晒的外用药品中。10.如权利要求1-8任意一项所述的一种向日葵籽粕提取物的应用，其特征在于，应用于抗氧化的化妆品或抗氧化的外用药品中。

技术总结
本发明一种向日葵籽粕提取物及其制备方法和应用，向日葵籽粕提取物，里面含有6种酚酸类化合物和2种低聚糖，6种酚酸类化合物的总含量在17wt%以上，2种低聚糖的总含量在33wt%以上；由于6种酚酸类化合物和2种低聚糖的组成配比合理，使得该向日葵籽粕提取物无需通过添加稳定剂或是包埋于纳米脂质体内等方式，去保证向日葵籽粕提取物的稳定性；向日葵籽粕提取物的细胞毒性很低，并且6种酚酸类化合物和2种低聚糖具有协同抗紫线外辐射损伤的作用；本发明所述的向日葵籽粕提取物，是一种高效低毒的天然紫外线吸收剂，具有良好的抗紫外线辐射损伤及一定的抗氧化作用，可应用于防晒及抗氧化的化妆品和外用药品中。化妆品和外用药品中。


技术研发人员：潘小姣 莫小莹 陈晓春 卢彦彤 李耀华 李丽 潘真真 谢洁兰 田慧
受保护的技术使用者：广西中医药大学
技术研发日：2023.06.12
技术公布日：2023/8/1