一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂及其制备方法与流程

1.本发明属于保健食品技术领域，具体涉及一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂及其制备方法。


背景技术：

2.孤独症患者常常伴有抑郁症状(oakley b et al.,autism and mood disorders.int rev psychiatry.2021；33(3):280-299)。抑郁症是最常见的一种心理疾病，以连续且长期的心情不好为主要的临床特征，是心理疾病最重要的类型。临床表现为心情不好和生活不开心，情绪长时间地低落消沉，从一开始的闷闷不乐到最后的悲痛欲绝，自卑、痛苦，悲观、厌世，感觉活着每一天都是在绝望地折磨自己，消极，逃避，最后甚至更有自杀企图和行为。我国抑郁症患病率在3％-5％。现在抑郁症的病因并不非常清楚，但是研究发现身体、心理与社会环境诸多方面因素与抑郁症的发病有关。主要涉及遗传、神经内分泌、消化系统等方面因素。
3.早发现、早诊断、早干预，可避免因诊治延误而造成孤独症抑郁症患者不可逆的损伤，是抑郁症诊治、干预方面非常重要的工作。抑郁症的及早发现是治疗的关键，早发现，早干预，早治疗，早康复。治疗开始越早，改善程度越明显。
4.目前常用的抗抑郁药主要有丙米嗪，阿米替林，多塞平，马普替林，地昔帕明等，长时间服用会破坏肠道菌群，导致肠道菌群失调，引起胃肠道反应。
5.研究人员发现含有高活性的益生菌可平衡胃肠道菌群并改善孤独症抑郁症状(marotta a et al.，effects of probiotics on cognitive reactivity，mood，and sleep quality.front psychiatry.2019；10：164)。脑肠轴显示肠道菌群与大脑健康密切相关，检测抑郁症患者的基因和表型发现抑郁症的饮食不太多样化，微生物组多样性减少。通过抑郁症粪便宏基因组学研究发现，饮食特征、粪便稠度与抑郁症直接关联，抑郁症患者通过使用益生菌干预后抑郁症患者症状明显缓解。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂及其制备方法，以解决现有抗抑郁药长时间使用会破坏肠道菌群，导致肠道生态失调，引起胃肠道反应的技术问题。
7.为实现上述目的，本发明提供了以下技术方案：
8.本发明提供的一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，包括益生菌、益生元和营养物。
9.进一步的，所述益生菌包括
10.青春双歧杆菌(bifidobacterium adolescentis)、凝乳芽孢杆菌(bacillus coagulans)、短双歧杆菌(bifidobacterium breve)、婴儿双歧杆菌(bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(bifidobacterium longum)、干酪乳杆菌(lactobacillus casei)、
瑞士乳杆菌(lactobacillus helveticus)、副干酪乳杆菌(lactobacillus paracasei)、植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)、鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)、唾液乳杆菌(lactobacillus salivarius)。
11.进一步的，所述青春双歧杆菌5～10亿个，凝乳芽孢杆菌10～15亿个，短双歧杆菌5～15亿个，婴儿双歧杆菌5～15亿个，长双歧杆菌5～15亿个，干酪乳杆菌7～15亿个，瑞士乳杆菌7～15亿个，副干酪乳杆菌5～15亿个，植物乳杆菌5～15亿个，鼠李糖乳杆菌5～15亿个和唾液乳杆菌3～8亿个。
12.进一步的，所述益生元包括低聚果糖、乳糖醇、l-阿拉伯糖和菊粉。
13.进一步的，所述低聚果糖0.1～0.5g、乳糖醇0.2～0.8g、l-阿拉伯糖0.2～0.8g、菊粉20～35mg。
14.进一步的，所述营养物包括维生素b6，维生素b9和人参提取物。
15.进一步的，所述维生素b6 0.01～0.08mg，维生素b9 1～5μg，和人参提取物0.01～0.08g。
16.进一步的，所述益生菌补充剂中益生菌的总活菌浓度＞＝100亿/0.6g/片。
17.本发明提供的一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂的制备方法，包括以下步骤：
18.s1：将本发明所述菌种分别接入三角瓶液体培养基中进行培养，培养基中接入的菌种重量百分含量为0.1％～0.01％，在35～40℃下培养10～30小时；
19.s2：将菌株分别接入大发酵罐的培养基中进行发酵培养，培养基中的接种重量百分含量为1％～5％，35～40℃培养10～30小时，并以氢氧化钠溶液控制培养酸度使发酵液ph值为5.5～6.5、od600为2.0以上，镜检菌形态正常、无杂菌时，终止发酵；
20.s3：采用陶瓷膜孔径大小0.01～1.00nm，在0.05mpa～0.50mpa条件下分别过滤分离菌体，以4000～10000rpm条件下进行以管式离心机分离菌体，得到菌泥；
21.s4：菌泥分别在-10～-20℃预冻15-25小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-50～-60℃，真空度为1～8pa，真空冷冻干燥12～36小时；干燥后得到高活性的冻干菌粉；
22.s5：按照本发明要求制备益生元低聚果糖，乳糖醇，l-阿拉伯糖，菊粉以及营养剂维生素b6，维生素b9和人参提取物；
23.s6：分别加入本发明所述不同的菌粉到益生元和补充剂中搅拌混合均匀。
24.进一步的，步骤s4中，所述冻干菌粉在活菌数量约为1.0
×
109～3.0
×
10
10
cfu/g
25.基于上述技术方案，本发明实施例至少可以产生如下技术效果：
26.本发明提供的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂及其制备方法，所使用的活菌含量高，活菌数量达到100亿/片。益生元可以刺激某些微生物的生长和活性，与益生菌协调并增强其活性，促进肠道有益菌的生长和繁殖，改善肠道微生态。本发明还含有维生素b6和b9，维生素b6是一种水溶性的许多食物中存在的维生素，它通过调节脑神经递质的合成，维持血液中正常的同型半胱氨酸水平。血液同型半胱氨酸是人类健康的重要指标。正常情况下，血液同型半胱氨酸在体内分解代谢，其浓度将保持在相对较低的水平。因为同型半胱氨酸代谢需要维生素b9、维生素b6以及维生素b12参与。维生素b6摄入量减少与抑郁和焦虑风险增加的相关性。维生素b9参与氨基酸的代谢和dna的合成，与维持神经系统的正常功能和一些神经递质的产生有关。特别是，维生素b1、b6、b9和b12对神经元功能至关重要。
具体实施方式
27.下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。另外，各个实施例之间的技术方案可以相互结合，但是必须是以本领域普通技术人员能够实现为基础，当技术方案的结合出现相互矛盾或无法实现时应当人认为这种技术方案的结合不存在，也不在本发明要求的保护范围之内。
28.本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
29.实施例1：
30.s1：将本发明所述菌种分别接入三角瓶液体培养基中进行培养，培养基中接入的菌种重量百分含量为0.1％，在35℃下培养10小时；
31.s2：将菌株分别接入大发酵罐的培养基中进行发酵培养，培养基中的接种重量百分含量为1％，35℃培养10小时，并以氢氧化钠溶液控制培养酸度使发酵液ph值为5.5、od600为2.0以上，镜检菌形态正常、无杂菌时，终止发酵；
32.s3：采用陶瓷膜孔径大小0.5nm，在0.05mpa条件下分别过滤分离菌体，以4000rpm条件下进行以管式离心机分离菌体，得到菌泥；
33.s4：菌泥分别在-10℃预冻15小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-50℃，真空度为1pa，真空冷冻干燥12小时；干燥后得到高活性的冻干菌粉；
34.s5：按照本发明要求制备益生元低聚果糖，乳糖醇，l-阿拉伯糖以及营养剂维生素b6，维生素b9，菊粉和人参提取物；
35.s6：加入不同的菌粉到益生元和营养剂中搅拌混合均匀。
36.实施例2：
37.s1：将菌种分别接入三角瓶液体培养基中进行培养，培养基中接入的菌种重量百分含量为0.05％，37℃培养20小时；
38.s2：将菌株分别接入大发酵罐的培养基中进行发酵培养，培养基中的接种重量百分含量为3％，35℃培养20小时，并以氢氧化钠溶液控制培养酸度使发酵液ph值为6，od600为2.0以上，镜检菌形态正常、无杂菌时，终止发酵；
39.s3：采用陶瓷膜孔径大小0.5nm，在0.3mpa条件下分别过滤分离菌体，以5000rpm条件下进行以管式离心机分离菌体，得到菌泥；
40.s4：菌泥分别在-15℃预冻15小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-55℃，真空度为5pa，真空冷冻干燥20小时；干燥后得到高活性的冻干菌粉；
41.s5：按照本发明要求制备益生元低聚果糖，乳糖醇，l-阿拉伯糖，菊粉以及营养剂维生素b6，维生素b9和人参提取物；
42.s6：分别加入不同的菌粉到益生元和营养剂中搅拌混合均匀。
43.实施例3：
44.s1：将菌种分别接入三角瓶液体培养基中进行培养，培养基中接入的菌种重量百分含量为0.01％，在37℃下培养30小时；
45.s2：将菌株分别接入大发酵罐的培养基中进行发酵培养，培养基中的接种重量百分含量为5％，37℃培养30小时，并以氢氧化钠溶液控制培养酸度使发酵液ph值为6.5、
od600为2.0以上，镜检菌形态正常、无杂菌时，终止发酵；
46.s3：采用陶瓷膜孔径大小1nm，在0.5mpa条件下分别过滤分离菌体，以10000rpm条件下进行以管式离心机分离菌体，得到菌泥；
47.s4：菌泥分别在-20℃预冻15小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-60℃，真空度为8pa，真空冷冻干燥36小时；干燥后得到高活性的冻干菌粉；
48.s5：按照本发明要求制备益生元低聚果糖，乳糖醇，l-阿拉伯糖以及营养剂维生素b6，维生素b9，菊粉和人参提取物；
49.s6：分别加入不同的菌粉到益生元和营养剂中搅拌混合均匀。
50.自愿参与的54个孤独症抑郁症患者(19-52岁，男性16个，女性38个)，27个服用本发明所述益生菌补充剂活菌数100亿cfu每片，另外27个作为对照双盲同样方式给予安慰剂，两组服用前均检测一次(t0)，在第1到3周每日服用两次，每次一片，第3周末检测一次(t1),第4周开始每日服用一次，每次一片，第6周末检测一次(t2)，第9周末检测一次(t3)，总共为期9周，给益生菌组和对照组同样在开始和结束时完成抑郁症状62个问题表答卷，检测结果如下表1所示。
51.表1抑郁检测结果(问题中值打分)
52.腹泻 t0t1t2t3实施例1给药组10.63.53.41.8 对照组7.98.37.88.1
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
睡眠 t0t1t2t3实施例2给药组10.63.83.52.6 对照组7.98.26.87.5
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
焦虑 t0t1t2t3实施例3给药组10.53.93.71.9 对照组7.99.57.88.5
53.以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护的范围由所附的权利要求书及其等效物界定。

技术特征：
1.一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于，包括益生菌、益生元和营养物。2.根据权利要求1所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述益生菌包括青春双歧杆菌、凝乳芽孢杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、唾液乳杆菌。3.根据权利要求2所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述青春双歧杆菌5～10亿个，凝乳芽孢杆菌10～15亿个，短双歧杆菌5～15亿个，婴儿双歧杆菌5～15亿个，长双歧杆菌5～15亿个，干酪乳杆菌7～15亿个，瑞士乳杆菌7～15亿个，副干酪乳杆菌5～15亿个，植物乳杆菌5～15亿个，鼠李糖乳杆菌5～15亿个和唾液乳杆菌3～8亿个。4.根据权利要求1所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述益生元包括低聚果糖、乳糖醇、l-阿拉伯糖和菊粉。5.根据权利要求4所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述低聚果糖0.1～0.2g、乳糖醇0.2～0.3g、l-阿拉伯糖0.2～0.3g和菊粉20～35mg。6.根据权利要求1所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述营养物包括维生素b6，维生素b9和人参提取物。7. 根据权利要求6所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述维生素b6 0.01～0.08mg，维生素b9 1～5
µ
g，人参提取物0.01～0.08g。8.根据权利要求1所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂，其特征在于：所述益生菌补充剂中益生菌的总活菌浓度＞＝100亿/0.6g/片。9.一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂的制备方法，其特征在于，应用权利要求1-8所述的用于缓解抑郁的益生菌补充剂，包括以下步骤：s1：将菌种分别接入三角瓶液体培养基中进行培养，培养基中接入的菌种重量百分含量为0.01%～0.1%，在35～40℃下培养10～30小时；s2：将菌株分别接入大发酵罐的培养基中分别进行发酵培养，培养基中的接种重量百分含量为1%～5%， 35～40℃培养10～30小时，并以氢氧化钠溶液控制培养酸度使发酵液ph值为5.5～6.5、 od600为2.0以上，镜检菌形态正常、无杂菌时，终止发酵；s3：采用陶瓷膜孔径大小0.01～1nm，在0.05mpa～0.5mpa条件下分别过滤分离菌体，以4000～10000rpm条件下进行以管式离心机分离菌体，得到菌泥；s4：菌泥分别在-10～-20℃预冻15-25小时后真空冷冻干燥，冷冻干燥温度为-50～-60℃，真空度为1～8pa，真空冷冻干燥12～36小时；干燥后得到高活性的冻干菌粉；s5：按照本发明要求制备益生元低聚果糖，乳糖醇，l-阿拉伯糖和菊粉以及补充剂维生素b6，维生素b9，人参提取物；s6：按照本发明要求分别加入不同的菌粉到益生元和补充剂中搅拌混合均匀。10.根据权利要求9所述的用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂的制备方法，其特征在于：步骤s4中，所述冻干菌粉在活菌数量约为1.0
×
109～3.0
×
10
10
cfu/g。

技术总结
本发明公开了一种用于缓解孤独症抑郁的益生菌补充剂及其制备方法，以解决现有抗抑郁药长时间使用会破坏肠道菌群，导致肠道生态失调，引起胃肠道反应的技术问题。包括益生菌、益生元和营养物。所述益生菌包括青春双歧杆菌、凝乳芽孢杆菌、短双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、干酪乳杆菌、瑞士乳杆菌、副干酪乳杆菌、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和唾液乳杆菌。所述益生元包括低聚果糖、乳糖醇、L-阿拉伯糖和菊粉。所述营养物包括维生素B6，维生素B9和人参提取物。本发明提供了一组合菌株具有较高的活性，有效的益生菌和营养物组合可以显著改善孤独症患者的睡眠、焦虑和腹泻。焦虑和腹泻。


技术研发人员：吴英 王毅 田野 朱卉
受保护的技术使用者：天津市滨海新区爱迪星自闭症康复护理有限公司
技术研发日：2023.05.16
技术公布日：2023/8/4