一种修护组合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及化妆品领域，主要涉及一种修护组合物及其应用。


背景技术：

2.油橄榄(olea europaea l.)属木犀科、木犀榄属常绿乔木，原产于地中海沿岸，是世界著名的木本油料树种。从油橄榄果中榨取得到的橄榄油广泛用于食品、医药和化妆品领域，有一定的抗癌、抗衰、促进伤口愈合等功能。油橄榄叶中含有丰富的活性成分，包括橄榄苦苷、羟基酪醇、黄酮类和多酚类等。研究发现油橄榄叶提取物有包括抗氧化、抗炎、抗菌、抗病毒等作用，在医药和化妆品领域有广泛的应用前景。
3.d-泛醇又称维生素原b5，化学式为c9h
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no4，结构为(r-)2,4-二羟基-n-(3-羟基丙基)-3,3-二甲基丁酰胺，广泛应用于食品、医药和化妆品领域。右旋泛醇(d-泛醇)由于其分子量较小容易吸收，在体内转化为泛酸并进一步形成参与多种生物过程的辅酶a。泛醇作为保湿剂可以渗透角质层，增加皮肤水合，增强皮肤屏障。
4.外源性皮肤老化最重要的诱因之一是日光照射，又被称作“光老化”。紫外线照射可能通过引发氧化应激导致dna损伤和线粒体损伤，造成蛋白质结构破坏与降解，释放凋亡因子激活细胞凋亡信号通路导致细胞损伤，进入死亡程序。减轻紫外线照射对细胞的刺激、调控细胞凋亡过程，可以减轻“光老化”对皮肤的损伤。另外，外界刺激如紫外线、空气污染等会诱导皮肤炎症，导致皮肤出现疼痛、瘙痒、红斑、水肿等反应，慢性炎症更是皮肤衰老的主要原因之一。缓解炎症反应有助于维持皮肤稳态健康，减缓皮肤衰老过程。
5.泛醇作为保湿剂在化妆品中有广泛的应用，可以增加角质层含水量，维持健康的皮肤屏障。如专利cn113332205a中将泛醇对柑橘果皮提取物等活性物质复配，实现了美白、均匀和提亮肤色的作用。油橄榄叶提取物有良好的自由基清除作用，以及对痤疮丙酸杆菌等多种细菌有高效的抑菌作用。如专利cn115025026a将油橄榄叶提取物与多种天然植物提取物复配，实现舒缓、修复、抗敏等功效。
6.泛醇和油橄榄叶提取物具有不同的功效，但暂无涉及泛醇及二者的组合物对紫外光损伤的修护作用、对减轻氧化应激作用的研究。


技术实现要素：

7.针对上述的现有问题，本发明阐述了泛醇和油橄榄叶提取物的组合物对皮肤的协同作用，在化妆品中有更加广阔的应用场景。
8.一方面，本发明提供了一种组合物用于制备减轻皮肤氧化应激的制剂的用途，所述组合物包括如下成分：泛醇和油橄榄叶提取物。
9.进一步的，本发明提供的组合物包括油橄榄叶提取物和泛醇，对抑制紫外线导致的氧化应激有协同增效作用。
10.具体的，本发明提供的组合物可以降低uva照射后成纤维细胞中活性氧的含量。
11.具体的，本发明提供的组合物可以降低uvb照射后表皮模型中活性氧的含量。
12.进一步的，组合物中油橄榄叶提取物可以通过浸提法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界二氧化碳萃取法等方法进行提取，提取物可能为溶液或固体。
13.进一步的，油橄榄叶提取物中橄榄苦苷含量大于0.1％。
14.优选的，油橄榄叶提取物采用大孔树脂吸附法纯化。
15.组合物中，泛醇为右旋泛醇(d-泛醇)。
16.优选的，泛醇为发酵来源的天然右旋泛醇。
17.具体的，上述发酵来源的天然右旋泛醇指发酵得到泛醇前体d-泛解酸内酯，与3-氨基丙醇发生缩合反应后得到的终产物。
18.进一步的，组合物中，油橄榄叶提取物中橄榄苦苷与泛醇的比例为(0.001-1):1。
19.优选的，油橄榄叶提取物中橄榄苦苷与泛醇的比例为(0.01-0.1):1。
20.进一步优选的，油橄榄叶提取物中橄榄苦苷与泛醇的比例为0.075:1。
21.进一步的，组合物在化妆品中的应用，含量范围为0.01-30％。
22.优选的，该组合物在化妆品中的含量范围为0.1-10％。
23.进一步地，向组合物中加入氧代噻唑烷羧酸以增加稳定性：改善油橄榄叶提取物的氧化变色问题、减缓油橄榄叶提取物中主要活性物质橄榄苦柑的降解。
24.进一步的，氧代噻唑烷羧酸与油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的比例为(0.01-10)：1。
25.另一方面，本发明提供了上述组合物用于制备抑制炎症反应或减少细胞凋亡或增强皮肤屏障结构的制剂的用途。
26.进一步的，组合物通过抑制ifna7、il15、cxcl10和sele基因表达减少炎症反应，通过促进fastkd3基因表达和抑制casp10基因表达来减少细胞凋亡，通过促进grhl3基因表达来增强皮肤屏障结构。
27.进一步的，所述组合物对其中fastkd3、casp10和sele基因表达量的影响存在协同增效作用。
28.另一方面，本发明提供了上述组合物用于制备减少紫外线造成的皮肤损伤的用途。
29.进一步的，组合物可显著减少紫外线照射后皮肤模型中晒伤细胞数量，相比于单一原料存在协同增效作用。
30.本发明的有益效果包括：
31.1.本发明提供的组合物包括油橄榄叶提取物和泛醇，对抑制紫外线导致的氧化应激有协同增效作用。具体的，本发明提供的组合物可以降低uva照射后成纤维细胞中活性氧的含量，降低uvb照射后表皮模型中活性氧的含量。
32.2.组合物可通过抑制炎症反应、减少细胞凋亡、增强皮肤屏障结构来减少紫外线造成的皮肤损伤。具体的，组合物可显著减少紫外线照射后皮肤模型中晒伤细胞数量，相比于单一原料存在协同增效作用。
33.3.组合物可通过抑制ifna7、il15、cxcl10和sele基因表达减少炎症反应，通过促进fastkd3基因表达和抑制casp10基因表达来减少细胞凋亡，通过促进grhl3基因表达来增强皮肤屏障结构；对其中fastkd3、casp10和sele基因表达量的影响存在协同增效作用。
附图说明
34.图1相比于阴性对照，使用泛醇、油橄榄叶提取物和组合物后表皮模型中ros含量显著降低(绿色荧光强度指示ros含量，对应图像中浅色部分)
35.图2相比于阴性对照，施用泛醇、油橄榄叶提取物及组合物后表皮模型中晒伤细胞数量变化(白色三角指向晒伤细胞)
36.图3相比于阴性对照，施用组合物后表皮模型中表达上调基因的go富集分析
37.图4相比于阴性对照，施用组合物后表皮模型中表达下调基因的go富集分析
38.图5不同抗氧化剂对油橄榄叶提取物在配方中稳定性的影响(组1-10)
39.图6 0.15％氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性的影响(组11-18)
40.图7 0.3％氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性的影响(组19-30)
具体实施方式
41.下面结合说明书附图和具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
42.实施例1修护组合物的制备
43.下述实施例采用的泛醇购自安徽华恒生物科技股份有限公司，纯度大于98％。
44.采用来自甘肃陇南的油橄榄叶，通过大孔树脂吸附法纯化得到油橄榄叶提取物，其中的橄榄苦苷含量为37％，，具体过程为：将干燥的油橄榄叶粉碎后加入70％乙醇水溶液中加热回流3次，合并提取液后过滤得到浓缩提取液。提取液用大孔树脂柱吸附有效成分，吸附完毕后先用水洗涤树脂柱除去杂质，然后用70％乙醇水溶液解吸附。收集解吸附液，加入适量水醇溶液配制成产物油橄榄叶提取物。
45.向油橄榄叶提取物中添加氧代噻唑烷羧酸以增加稳定性(改善油橄榄叶提取物的氧化变色问题、减缓油橄榄叶提取物中主要活性物质橄榄苦苷的降解)，这一步是通过与油橄榄叶提取物一同加入配方中进行的。氧代噻唑烷羧酸是一种氨基酸衍生物，多作为美白活性成分用于化妆品中，有良好的抗氧化效果，购自南京斯拜科生化实业有限公司。
46.氧代噻唑烷羧酸与油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的比例为(0.01-10)：1。油橄榄叶提取物中橄榄苦苷与泛醇的比例按照重量计为(0.001-1):1。
47.下述实施例中的单一成分和组合物均是通过上述过程和方法取得的。
48.实施例2组合物减轻细胞的氧化应激
49.活性氧(ros，reactive oxygen species)包括超氧自由基、过氧化氢及其下游产物过氧化物等，参与细胞生长增殖、发育分化衰老凋亡等生理过程。紫外线、空气污染等多种环境因素刺激都可能导致氧化应激，即氧化与抗氧化作用失衡，具体表现为活性氧含量增加，造成核酸、蛋白质等生物大分子的损伤，进而导致皮肤衰老和疾病。dcfh-da是一种常用的细胞内活性氧检测探针：其本身没有荧光，进入细胞后被酯酶水解成dcfh，dcfh能进一步被活性氧氧化为无法透过细胞膜的绿色荧光物质dcf，荧光强度与活性氧水平成正比。采用dcfh-da检测了油橄榄叶提取物、泛醇以及组合物对uva照射后成纤维细胞中ros含量的影响，结果如表1。
50.实验中，uva照射剂量为30j/cm2，空白对照组为未经uva照射的细胞，阴性对照组为仅uva照射的细胞，阳性对照组中给药0.05％维生素e，泛醇浓度为0.03％，油橄榄叶提取物浓度为0.006％(对应的橄榄苦苷含量为0.0022％)，组合物为0.03％泛醇+0.006％油橄榄叶提取物，待测样品浓度由细胞毒性实验确定。
51.表1：泛醇、油橄榄叶提取物对细胞活性氧的影响
52.测试组空白对照阴性对照阳性对照泛醇油橄榄叶提取物组合物ros(mfi)27186.0053718.5330828.9327630.1733367.6722878.40sd1784.33194.622621.452865.351720.721023.44p值/0.0000.0000.0000.0000.000抑制率％//42.60％48.56％37.88％57.41％
53.结果显示：泛醇和油橄榄叶提取物均可显著降低uva照射导致的成纤维细胞中活性氧含量升高，泛醇对ros抑制率为48.56％，油橄榄叶提取物对ros抑制率为37.88％，泛醇和油橄榄叶提取物形成的组合物对ros的抑制率为57.41％。且组合物与泛醇组抑制率对比的p值为0.049，与油橄榄叶提取物组对比的p值为0.001，均存在显著性差异。即组合物可减轻紫外线导致的细胞氧化应激，且存在协同增效作用。
54.实施例3组合物减轻皮肤的氧化应激
55.采用荧光显色法检测了油橄榄叶提取物、泛醇以及组合物对uvb照射后表皮模型中ros含量的影响，结果如表2和图1。
56.实验中，uvb照射剂量为600mj/cm2，空白对照组为未经uvb照射的表皮模型，阴性对照组为仅uvb照射的表皮模型，阳性对照组中给药7μg/ml维生素e，泛醇浓度为1％，油橄榄叶提取物浓度为0.2％(对应的橄榄苦苷含量为0.075％)，组合物为1％泛醇+0.2％油橄榄叶提取物。
57.表2：泛醇、油橄榄叶提取物对皮肤活性氧的影响
[0058][0059][0060]
结果显示：泛醇和油橄榄叶提取物均可显著降低uvb照射导致的表皮模型中活性氧含量升高，泛醇对ros抑制率为19.31％，油橄榄叶提取物对ros抑制率为17.24％，泛醇和油橄榄叶提取物形成的组合物对ros的抑制率为22.76％。且组合物与油橄榄叶提取物组抑制率对比的p值为0.032，存在显著性差异。即组合物可减轻紫外线导致的皮肤氧化应激，且存在协同增效作用。
[0061]
实施例4施用组合物对紫外线照射的保护作用
[0062]
为了验证实施例对皮肤的光保护作用，本发明用表皮模型测试了油橄榄叶提取物(0.2％，对应的橄榄苦苷浓度为740ppm)、泛醇(1％)和组合物(油橄榄叶提取物0.2％+泛醇1％)对紫外线(uvb)照射表皮模型的影响，分析了单一成分及组合物对紫外线导致皮肤损
伤的舒缓和修护作用。
[0063]
将全厚表皮重建模型epidermft(购自美国mattek公司)用200μl对应的受试物处理4小时，uvb照射(280-340nm,200mj/cm2)后再用对应的受试物处理24小时，孵育完成后用无菌pbs溶液清洗模型表面残留的受试物，用无菌棉签拭去模型内、外残留液体。将表皮模型切为两半，一半打孔后提取总rna用于微阵列分析(affymetrix human clariom s,共21448个基因)，另一半用10％福尔马林固定后进行石蜡包埋、组织修剪和切片后进行h&e染色(hematoxylin and eosin stain)用于分析细胞和组织形态变化。每组包括三个平行实验。
[0064]
紫外线照射可能通过破坏角质形成细胞内遗传物质结构，影响细胞凋亡信号通路等作用导致细胞损伤，进入死亡程序。这部分凋亡细胞被称为“晒伤细胞”(sunburn cell)，特征为凝缩的细胞核和嗜酸性染色的细胞质(laethem,a.v.等人，the sunburn cell:regulation of death and survival of the keratinocyte.int j biochem cell biol 37,1547-1553(2005))，其数量可以用于量化分析紫外线对皮肤的损伤。
[0065]
h&e染色结果见图2。阴性对照和空白对照相比，可以发现uvb造成皮肤活细胞层(深色组织)变薄，晒伤细胞(白色三角指向，特征为细胞核缩皱，染色加深)数量增加。油橄榄叶提取物和阴性对照相比，皮肤活细胞层厚度略有增加，晒伤细胞数量减少40％。泛醇和阴性对照相比，皮肤活细胞层厚度无明显改变，晒伤细胞数量减少32％。组合物与阴性对照相比，活细胞层变厚，接近正常皮肤组织水平，晒伤细胞数量减少62％。即油橄榄叶提取物与泛醇的组合物在修复组织形态损伤和减少细胞损伤方面相比于单一原料有更好的作用。
[0066]
实施例5施用组合物的表皮模型基因表达的go富集分析
[0067]
为了解释油橄榄叶提取物与泛醇的组合物在修护紫外线损伤方面的协同增效作用，采用基因微阵列测序法分析了油橄榄叶提取物、泛醇和组合物对皮肤模型中基因表达量的影响。
[0068]
从微阵列分析结果中，筛选组合物实验组相比于阴性对照组p-value小于0.05(显著性变化)的基因进行差异表达基因go富集分析，上调基因和下调基因的go富集分析结果见图3和图4。施用泛醇和油橄榄叶提取物的组合物后，表达上调基因与包括热休克蛋白结合，atp相关活性调控，丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶活性，camp介导的信号传递，内部凋亡信号通路调控等；表达下调基因与包括维生素d响应，激活参与凋亡过程的半胱氨酸内肽酶活性，细胞成分组织的负向调节，炎症体复合体等过程相关。即油橄榄叶提取物和泛醇的组合物对紫外损伤的修护作用可能与减少细胞凋亡、增强皮肤屏障结构、抑制炎症反应有关。
[0069]
实施例6施用组合物的表皮模型中细胞进程相关基因表达量变化
[0070]
从微阵列分析结果中，筛选出实验组对比阴性对照组p-value小于0.05(显著性变化)且与细胞进程相关的基因，结果见表3。
[0071]
表3：微阵列分析所得细胞进程相关基因的表达量
[0072]
基因泛醇油橄榄叶提取物组合物fastkd3+103.03％+105.39％+123.91％sele-89.21％-83.55％-89.78％casp10-900％-908％-1097％
[0073]
fastkd3编码fas激活的丝氨酸/苏氨酸激酶的一部分结构，受到线粒体压力调节，
控制细胞凋亡(simarro等，fast kinase domain-containing protein 3 is a mitochondrial protein essential for cellular respiration.biochem biophys res commun.401,440-446(2010))。sele编码选择素e，一种被炎症因子或内毒素激活后表达的糖蛋白，介导白细胞黏附到内皮，在局部炎症中起到重要作用。casp10编码一种半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶，诱导压力条件下的细胞凋亡。
[0074]
uvb刺激后，fastkd3表达量下降，施用测试样品后，泛醇导致表达量上升103.03％，油橄榄叶提取物导致表达量上升105.39％，组合物导致表达量上升123.91％；uvb导致sele表达量大幅上升41倍，施用泛醇后表达量下降89.21％，油橄榄叶提取物导致表达量下降83.55％，组合物导致表达量下降89.78％；uvb导致casp10表达量上升，施用测试样品后则大幅下降，泛醇导致表达量下降900％，油橄榄叶提取物导致表达量下降908％，组合物导致表达量下降1097％。
[0075]
因此，油橄榄叶提取物与泛醇的组合物在调控uvb刺激导致的细胞进程基因表达量变化方面存在协同增效效果，以减少外界刺激导致的细胞凋亡。
[0076]
实施例7组合物促进表皮模型中屏障相关基因的表达
[0077]
油橄榄叶提取物与泛醇的组合物除了对上述细胞进程相关的基因表达呈现协同增效的调控效果，还显著影响如下皮肤屏障结构和炎症相关的基因表达。grhl3编码颗粒头状蛋白转录因子，影响谷氨酰胺转移酶tgm1表达量，影响皮肤屏障中紧密连接的形成，在维持皮肤屏障方面有重要作用(deng等人，grainyhead-like transcription factors:guardians of the skin barrier.veterinary dermatology 32,553-e152(2021))。ifna7编码干扰素α7，是巨噬细胞在免疫过程中产生的一种低分子量糖蛋白，参与jak/stat信号通路，影响炎症反应。il15编码白介素15，诱导活化jak激酶、激活转录因子stat3和stat5，调节炎症反应。cxcl10基因编码趋化因子，也被称为干扰素γ诱导蛋白10(ip-10)，主要诱导单核细胞和巨噬细胞的趋化反应，募集效应细胞进入炎症部位，参与调控免疫细胞的迁移、激活和分化，影响免疫和炎症等过程。
[0078]
施用泛醇和油橄榄叶提取物的组合物后，全厚表皮模型中grhl3表达量上升29.08％，ifna7表达量下降88.52％，il15表达量下降82.32％，cxcl10表达量下降64.32％。
[0079]
综上所述，泛醇和油橄榄叶提取物的组合物可以通过增强皮肤屏障结构、抑制炎症反应来修护uvb导致的皮肤损伤。
[0080]
实施例8研究不同抗氧化剂对油橄榄叶提取物稳定性提升的差异
[0081]
油橄榄叶来自于甘肃陇南，油橄榄叶提取物采用大孔树脂吸附法纯化，提取物为溶液，其中橄榄苦苷含量大于0.6％。
[0082]
大孔树脂吸附法：将干燥的油橄榄叶粉碎后加入70％乙醇水溶液中加热回流3次，合并提取液后过滤得到浓缩提取液。提取液用大孔树脂柱吸附有效成分，吸附完毕后先用水洗涤树脂柱除去杂质，然后用70％乙醇水溶液解吸附。收集解吸附液，加入适量水醇溶液配制成产物油橄榄叶提取物。
[0083]
氧代噻唑烷羧酸是一种氨基酸衍生物，多作为美白活性成分用于化妆品中，有良好的抗氧化效果，购自南京斯拜科生化实业有限公司。
[0084]
季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯是一种肉桂酸衍生物，是一种良好的抗氧化剂，购自巴斯夫(中国)有限公司。
[0085]
(三(四甲基羟基哌啶醇)柠檬酸盐是四甲基哌啶的衍生物，是一种性能优良的光稳定剂，购自巴斯夫(中国)有限公司。
[0086]
葡糖基芦丁是芦丁的衍生物，同样具有极强的抗氧化功效，购自仙婷。
[0087]
亚丁香基丙二酸二乙基己酯是一种光稳定剂，购自默克化工技术有限公司。
[0088]
首先研究相较于季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯、葡糖基芦丁、(三(四甲基羟基哌啶醇)柠檬酸盐、亚丁香基丙二酸二乙基己酯等市面常见抗氧化剂，氧代噻唑烷羧酸能否提升油橄榄叶提取物稳定性。于是采用组号1-10的十组样例来研究不同抗氧化剂对油橄榄叶提取物稳定性提升的差异，成分配比如表4所示。采用行业常见的方法按照如下配方制备乳液样品，其中油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量为0.6％。
[0089]
表4：组1-10的成分配比
[0090]
[0091][0092]
组1-10中抗氧化剂包括不同浓度的氧代噻唑烷羧酸、季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯、葡糖基芦丁、(三(四甲基羟基哌啶醇)柠檬酸盐、亚丁香基丙二酸二乙基己酯及其组合物。
[0093]
观察在不同温度条件下(-18℃、4℃、rt、48℃，部分样品未在常温下测试)存放10天后，实施例1-10的颜色变化情况。结果显示在高温条件下，组3-10均出现颜色明显加深的情况，即季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯、葡糖基芦丁、(三(四甲基羟基哌啶醇)柠檬酸盐和亚丁香基丙二酸二乙基己酯均无法改善油橄榄叶提取物的稳定性问题。组1和组2在高温条件下颜色变化程度小于其它组，即氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性有一定提升作用。图5列出了组1-10在不同温度下放置10天后的颜色变化情况。
[0094]
结论如下：
[0095]
季戊四醇四(双-叔丁基羟基氢化肉桂酸)酯、葡糖基芦丁、(三(四甲基羟基哌啶醇)柠檬酸盐和亚丁香基丙二酸二乙基己酯均无法改善油橄榄叶提取物的稳定性问题。但
氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性有一定提升作用。
[0096]
实施例9研究氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性的影响方式
[0097]
为了进一步研究氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物稳定性的影响方式，采用组11-18研究温度(分别取4℃和40℃)和水溶液ph值(分别取5.5和6)对溶液颜色的影响，成分配比如表5所示。其中油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量大于1％。
[0098]
表5：组11-18的成分配比
[0099]
成分组11组12组13组14水至100至100至100至100丁二醇101010101,2-戊二醇4444泛醇1111油橄榄叶提取物20202020氧代噻唑烷羧酸-0.15-0.15温度4℃4℃40℃40℃ph5.55.55.55.5成分组15组16组17组18水至100至100至100至100丁二醇101010101,2-戊二醇4444泛醇1111油橄榄叶提取物20202020氧代噻唑烷羧酸-0.15-0.15温度4℃4℃40℃40℃ph6666
[0100]
采用微量精氨酸和柠檬酸调节ph至指定值后，将组11-18置于对应温度的冰箱或烘箱中，在第7天、第14天、第28天取出观察溶液颜色变化情况。在不添加抗氧化剂氧代噻唑烷羧酸的样品中，观察到了溶液颜色随着时间的延长、温度的增加和ph的上升变深。添加氧代噻唑烷羧酸的样品对比相同处理条件下不添加氧代噻唑烷羧酸的样品颜色明显较浅，即氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物存在一定的保护作用，可以减缓其氧化变色。图6列出了组11-18在不同温度下放置10天后的颜色变化情况。
[0101]
结论如下：
[0102]
随着时间的延长、温度的增加和ph的上升，溶液颜色加深越快。添加氧代噻唑烷羧酸的样品对比相同处理条件下不添加氧代噻唑烷羧酸的样品颜色明显较浅，即氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物存在一定的保护作用，可以减缓其氧化变色。
[0103]
实施例10研究氧代噻唑烷羧酸含量对油橄榄叶提取物稳定性的影响
[0104]
采用与上述实施例类似的测试方法研究了氧代噻唑烷羧酸含量为0.3％时油橄榄叶提取物颜色在不同温度(4℃、40℃)和水溶液ph值(5、5.5、6)条件下的颜色变化，各组成分配比如表6所示，颜色变化结果如图6所示。其中油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的含量大于1％。
[0105]
表6：组19-30的成分配比
[0106][0107][0108]
在不添加抗氧化剂氧代噻唑烷羧酸的样品中，观察到了溶液颜色随着时间的延长、温度的增加和ph的上升变深。添加氧代噻唑烷羧酸的样品对比相同处理条件下不添加氧代噻唑烷羧酸的样品颜色明显较浅，即氧代噻唑烷羧酸对油橄榄叶提取物存在一定的保护作用，可以减缓其氧化变色。图7列出了组19-30在不同温度下放置10天后的颜色变化情况。
[0109]
结论如下：
[0110]
对比图6和图7中对应样品(组14和组26，组18和组30)可知：提升氧代噻唑烷羧酸的浓度可以进一步减缓油橄榄叶提取物氧化变色。
[0111]
实施例11研究氧代噻唑烷羧酸对橄榄苦苷的降解的影响
[0112]
油橄榄叶提取物中最主要的活性成分是橄榄苦苷。橄榄苦苷受到光照、酸、碱、酶等环境变化的影响容易降解，影响其生物活性。采用hplc测试了组11-18中橄榄苦苷在14天
内的含量变化情况，结果如表7所示。
[0113]
表7：组11-18中橄榄苦苷在14天内的含量变化情况
[0114][0115][0116]
对比不同水溶液条件下组11-18中橄榄苦苷的降解率，可知升高水溶液ph和升高温度均会提升橄榄苦苷的降解率。组11-18中，在第7天时，添加氧代噻唑烷羧酸不影响橄榄苦苷的降解；在第14天时，低温条件下，添加氧代噻唑烷羧酸对橄榄苦苷的降解率无影响，高温条件下，ph＝5.5和ph＝6的水溶液中，氧代噻唑烷羧酸均可降低橄榄苦苷的降解率。即橄榄苦苷的降解率主要受到水溶液条件的影响，但在高温条件下，氧代噻唑烷羧酸能够一定程度上降低橄榄苦苷的降解率。
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结论如下：
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氧代噻唑烷羧酸能够显著改善油橄榄叶提取物的变色问题，并且能够一定程度上减缓油橄榄叶提取物中主要活性物质橄榄苦苷的降解。添加氧代噻唑烷羧酸可提升油橄榄叶提取物的稳定性，增加其在化妆品配方中的应用范围。
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以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内可轻易想到的各种等效修改或替换均应涵盖在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种组合物用于制备减轻皮肤氧化应激的制剂的用途，其特征在于，所述组合物包括如下成分：泛醇和油橄榄叶提取物。2.如权利要求1所述用途，其特征在于，由所述组合物制备得到的减轻皮肤氧化应激的制剂的具体功能为：降低uva照射后成纤维细胞中活性氧的含量，降低uvb照射后表皮模型中活性氧的含量。3.如权利要求1所述用途，其特征在于，所述组合物中泛醇与油橄榄叶提取物中橄榄苦苷的比例按照重量计为1：(0.001-1)。4.如权利要求1所述用途，其特征在于，所述组合物在护肤制剂中的含量范围为0.01-30％。5.如权利要求1所述用途，其特征在于，所述组合物中的油橄榄叶提取物加入了氧代噻唑烷羧酸以增加稳定性。6.一种组合物用于制备抑制炎症反应或减少细胞凋亡或增强皮肤屏障结构的制剂的用途，其特征在于，所述组合物包括如下成分：泛醇和油橄榄叶提取物。7.如权利要求6所述用途，其特征在于，所述组合物通过抑制ifna7、il15、cxcl10、sele基因中的一种或多种的表达减少炎症反应。8.如权利要求6所述用途，其特征在于，所述组合物通过促进fastkd3基因表达或抑制casp10基因表达来减少细胞凋亡。9.如权利要求6所述用途，其特征在于，所述组合物通过促进grhl3基因表达来增强皮肤屏障结构。10.一种组合物用于制备减少紫外线造成的皮肤损伤的制剂的用途，其特征在于，所述组合物包括如下成分：泛醇和油橄榄叶提取物。

技术总结
本发明提供了一种修护组合物及其应用。本发明提供的组合物包括油橄榄叶提取物和泛醇，能够通过减轻氧化应激、抑制炎症反应、减少细胞凋亡、增强皮肤屏障结构来减轻紫外线导致的皮肤损伤，即组合物对皮肤损伤存在良好的修护功效。本发明还提供了上述修护组合物在化妆品中的应用。中的应用。中的应用。


技术研发人员：黄虎 陶侃 王静一 郭莉莉 黄云霞
受保护的技术使用者：上海中翊日化有限公司
技术研发日：2023.04.17
技术公布日：2023/8/5