一种实验大鼠取脑方法

1.本发明涉及生命科学技术领域，特别涉及一种实验大鼠取脑方法。


背景技术：

2.神经精神疾病研究动物模型的使用是非常必要的。这是因为神经精神疾病往往涉及到复杂的神经回路和分子机制，难以直接在人类身上进行研究。使用动物模型可以更好地研究神经精神疾病的发病机制和病理生理学，以及评估治疗方法的有效性和安全性。这些动物模型可以提供一种系统性、可控和可重复的方法，帮助科学家研究疾病的发生和发展过程。使用动物模型进行神经精神疾病研究也有助于开发新的药物和治疗方法。在神经精神疾病研究动物模型中，脑组织是神经精神疾病研究的重要材料，可以提供研究神经元、神经回路和神经递质等方面的重要信息，使用脑组织可以获得许多有用的数据。
3.目前实验大鼠取脑组织的方法是使用电钻在大鼠头部制作一个足够大的颅骨开窗，使用取脑勺或其他取样工具，将大鼠脑组织取出；或者直接利用骨钳一点点将颅骨剪开暴露脑组织，然后取出脑组织。
4.但是，上述获取脑组织的方法不可避免的影响甚至破坏到脑组织的完整性，取样的脑组织可能包含其他组织，从而影响数据的解释和分析。


技术实现要素：

5.本发明实施例提供一种实验大鼠取脑方法，以解决相关技术中使用电钻在大鼠头部制作颅骨开窗，取出大鼠脑组织；或者直接利用骨钳将颅骨剪开，然后取出脑组织，取样的脑组织可能包含其他组织，会影响脑组织的完整性的问题。
6.第一方面，提供了一种实验大鼠取脑方法，其包括以下步骤：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝方向将枕骨剪至人字点；使用弯止血钳沿所述矢状缝的延长方向在所述大鼠的前囟至额骨方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨直至颅底；使用所述弯止血钳将顶骨掰开，取出完整的脑组织。
7.一些实施例中，所述使用弯止血钳沿所述矢状缝的延长方向在所述大鼠的前囟至额骨方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨直至颅底前，还包括：锁紧所述弯止血钳。
8.一些实施例中，所述弯止血钳的钳口设置有尖刺头。
9.一些实施例中，所述使用弯止血钳将顶骨掰开，取出完整的脑组织，包括：解锁所述弯止血钳，沿垂直于所述矢状缝的方向掰开所述弯止血钳，使所述大鼠的脑组织上方的所述顶骨沿所述矢状缝均匀分成两部分；夹断所述脑组织和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织。
10.一些实施例中，所述夹断所述脑组织和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织，包括：使用可拆卸连接于所述弯止血钳的尖刺头夹断所述脑组织和所述颅底的神经的连接；将所述尖刺头从所述弯止血钳上拆下，使用所述弯止血钳取出所述脑组织，使完整的所述脑组织脱离所述颅底。
11.一些实施例中，所述弯止血钳包括主体以及设置于所述主体前端的弧形部；所述使用所述弯止血钳取出脑组织，使完整的脑组织脱离所述颅底，包括：使用所述弧形部的前端触碰所述颅底，并利用所述弧形部的内侧接触所述脑组织，将完整的脑组织扒出所述颅底。
12.一些实施例中，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝方向将枕骨剪至人字点，包括：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝方向将枕骨剪至距离人字点0.5～0.8cm处。
13.一些实施例中，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝方向将枕骨剪至人字点前，还包括：使用组织剪沿矢状缝方向剪开颅顶皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜。
14.一些实施例中，所述使用组织剪沿矢状缝方向剪开颅顶皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜前，还包括：将所述大鼠麻醉后处死，切断所述大鼠的颈部脊髓。
15.本发明提供的技术方案带来的有益效果包括：
16.本发明实施例提供了一种实验大鼠取脑方法，由于使用弯止血钳在选定的位置刺破大鼠的额骨直至颅底，选定的位置处额骨下方没有脑组织，且大鼠的额骨和顶骨相连，左右顶骨之间又存在骨缝，也就是矢状缝，所以大鼠的额骨被刺破之后，左右顶骨会被刺破额骨的弯止血钳撑开并沿矢状缝分成左右两部分，此时，大鼠脑组织上方的顶骨不会产生碎裂的骨片，使取样的脑组织不包含其他组织，因此，能保证大鼠的脑组织的完整性。
附图说明
17.为了更清楚地说明本发明实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
18.图1为本发明实施例提供的一种实验大鼠取脑方法的流程图；
19.图2为本发明实施例提供的大鼠的颅骨解剖及脑组织定位结构示意图；
20.图3为本发明实施例提供的大鼠的颅骨结构俯视图；
21.图4为本发明实施例提供的大鼠的颅骨结构侧视图；
22.图5为本发明实施例提供的大鼠的脑组织和颅骨的位置关系俯视图；
23.图6为本发明实施例提供的大鼠的脑组织和颅骨的位置关系侧视图；
24.图7本发明实施例提供的大鼠取出脑组织的步骤示意图；
25.图8为本发明实施例提供的弯止血钳的立体结构示意图。
26.其中，21、矢状缝；22、人字点；23、额骨；24、顶骨；25、前囟；26、枕骨；
27.3、脑组织；
28.5、弯止血钳；51、尖刺头；52、弧形部。
具体实施方式
29.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人
员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
30.本发明实施例提供了一种实验大鼠取脑方法，其能解决相关技术中使用电钻在大鼠头部制作颅骨开窗，取出大鼠脑组织；或者直接利用骨钳将颅骨剪开，然后取出脑组织，取样的脑组织可能包含其他组织，会影响脑组织的完整性的问题。
31.参见图1至图7所示，为本发明实施例提供的一种试验大鼠取脑方法，包括以下步骤：
32.s1：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝21方向将枕骨26剪至人字点22，便于后续操作时，使大鼠的整个顶骨24分开，此处使用组织剪是因为其为钝头，不会扎破脑膜破坏脑组织3。
33.s2：使用弯止血钳5沿所述矢状缝21的延长方向在所述大鼠的前囟25至额骨23方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨23直至颅底，弯止血钳5相较于直止血钳来说，前端具有一定的弧度，能使操作者依靠该弧度在垂直刺破固定在桌面的大鼠的额骨23直至颅底时更加方便省力，在沿所述矢状缝21的延长方向在所述大鼠的前囟25至额骨23方向的0.5～0.8cm处刺破额骨23，因为该位置的下方没有脑组织3，从此处刺破不会产生碎骨影响脑组织3的完整性，若选择的位置从前囟25至额骨23方向小于了0.5cm，则额骨23下方可能存在脑组织3，刺破额骨23时可能会产生碎骨影响脑组织3的完整性，若选择的位置从前囟25至额骨23方向大于0.8cm，则可能在弯止血钳5刺破额骨23直至颅底后，由于刺入的位置离矢状缝21太远，不能实现分开左右顶骨24的效果。
34.s3：使用所述弯止血钳5将顶骨24掰开，取出完整的脑组织3，大鼠的头部一般都较小，使用弯止血钳5刺破额骨23直至颅底后，此时弯止血钳5的钳身部分进入大鼠的颅骨内部，由于钳身具有一定厚度，大鼠的顶骨24此时直接被撑开并沿矢状缝21分成左右两部分，大鼠的脑组织3完全暴露后，即可以进行取下完整脑组织3的操作。
35.本发明实施例提供了一种试验大鼠取脑方法，由于矢状缝21是左右顶骨24之间的缝隙，位于颅骨的左右两侧的顶骨24的相连处；在获取脑组织3的过程中，使用组织剪剪开了枕骨大孔至人字点22的骨头，人字点22处于枕骨26和矢状缝21的交界处，此时枕骨沿矢状缝延长线方向分为左右两部分，再使用弯止血钳5垂直刺破额骨23直至颅底，定位的额骨23下方没有脑组织3，且大鼠的额骨23和顶骨24相连，此时大鼠的头部顶骨24受到垂直于矢状缝21的延长方向垂直向下的力，之后大鼠的顶骨24在外力作用下即沿矢状缝21左右分开，暴露出位于颅底的脑组织3，即可取出完整的脑组织3。在获取脑组织3的过程中，位于脑组织3上方的顶骨24是直接沿着矢状缝21分裂开，基本没有产生头骨的碎片，也就不存在有其他组织掉落到脑组织3上污染脑组织3的情况。
36.参见图5和图6所示，所述使用弯止血钳5沿所述矢状缝21的延长方向在所述大鼠的前囟25至额骨23方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨23直至颅底前，还可以包括：锁紧所述弯止血钳5，弯止血钳5的结构包括钳喙、关节和钳柄，锁紧弯止血钳5即锁紧位于钳柄上的扣锁结构，将弯止血钳5锁紧之后再刺入额骨23，相较于单单使用弯止血钳5的一侧来说厚度有所增加，能更好的使左右顶骨24沿矢状缝21被撑开，且锁紧弯止血钳5之后，操作者能更方便的握住弯止血钳5发力，此时操作者一只手固定住大鼠的头部，另一只手握住弯止血钳5，利用弯止血钳5的前端具有弧度，调整手握弯止血钳5的角度，刺入时能够更加省力。
37.参见图8所示，所述弯止血钳5的钳口设置有尖刺头51，弯止血钳5的钳口处设置尖
刺头51，可以利用该尖刺头51实现更准确的定位，操作者在刺入额骨23时也能更省力。
38.参见图7所示，所述使用弯止血钳5将顶骨24掰开，取出完整的脑组织3，包括：解锁所述弯止血钳5，即解锁弯止血钳5中位于钳柄位置处的扣锁结构，在一些可选的实施例中，弯止血钳5插入大鼠的颅骨内部后，大鼠的顶骨24没有直接分开，此时沿垂直于所述矢状缝21的方向掰开所述弯止血钳5，弯止血钳5的尾部设置有指圈，可以依据杠杆原理，更为省力的拉开两个指圈相对运动，使所述大鼠的脑组织3上方的顶骨24沿所述矢状缝21均匀分成两部分；夹断所述脑组织3和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织3，顶骨24分成两部分之后，脑组织3暴露出来，此时的脑组织3位于其中一边的颅底，可以使用前端比较尖利的工具夹断脑组织3和颅底之间的神经连接，脑组织3和颅底完全没有连接后，即可被直接取出，且不会破坏脑组织3的完整性。
39.在一些可选的实施例中，所述夹断所述脑组织3和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织3，可以包括使用可拆卸连接于所述弯止血钳5的尖刺头51夹断所述脑组织3和所述颅底的神经的连接，也即将尖刺头51安装在弯止血钳5的前端，利用尖刺头51夹断脑组织3和颅底的神经连接；将所述尖刺头51从所述弯止血钳5上拆下，使用所述弯止血钳5取出所述脑组织3，使完整的所述脑组织3脱离所述颅底，把尖刺头51从弯止血钳5上拆下可以保护脑组织3在被取下并脱离颅底的过程中，不被尖刺头51刺伤，以进一步地保证脑组织3自身的完整，且多次利用弯止血钳5能够使操作者在获取脑组织3的操作过程中，能够准备更少的设备即可完成该实验。
40.在一些可选的实施例中，所述弯止血钳5可以包括主体以及设置于所述主体前端的弧形部52，所述使用所述弯止血钳5取出脑组织3，使完整的脑组织3脱离所述颅底，可以包括，使用所述弧形部52的前端触碰所述颅底，此时弯止血钳5的前端和尖刺头51已经被拆开，脑组织3和颅底的神经连接已经被全部夹断，并利用所述弧形部52的内侧接触所述脑组织3，弧形部52和脑组织3接触时，是弧形部52的内侧和脑组织3接触，脑组织3较为柔软，能够和弧形部52的内侧贴合部位更多，使得操作更加方便，更能保证脑组织3自身的完整度，之后将完整的脑组织3扒出所述颅底。
41.优选的，弯止血钳5的前端安装上尖刺头51夹断脑组织3和颅底的神经的连接后，由于脑组织3和颅底的神经连接有一部分位于脑组织3和颅底的接触部位，脑组织3把这一部分的神经连接压住，不便于直接夹断，此时利用弯止血钳5的弧形部52接触脑组织3，通过弧形部52和脑组织3接触，把脑组织3移动位置，使脑组织3和颅底的连接处的神经暴露出来，再利用尖刺头51夹断这些神经连接，然后将完整的脑组织3扒出所述颅底。
42.参见图2和图3所示，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝21方向将枕骨26剪至人字点22，可以包括，使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝21方向将枕骨26剪至距离人字点22的0.5～0.8cm处，也可以将大鼠的枕骨26从枕骨大孔处刚好剪至人字点22处，但是不能超过人字点22，超过人字点22即会剪到顶骨24，顶骨24下方存在脑组织3，使用组织剪剪骨头时，会产生碎骨，掉落后可能会使碎骨落入脑组织3的表面，影响脑组织3的完整性。
43.优选的，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝21方向将枕骨26剪至人字点22前，还可以包括：使用组织剪沿矢状缝21方向剪开颅顶皮肤，在本实施例中，可以使用组织剪沿矢状缝21的方向只剪开颅顶的皮肤，在一些其他的实施例中，也可以剪去枕骨26、颅
顶及额骨23上的皮肤，甚至减去覆盖在颅骨上的所有皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜，可以是清理所有被剪去皮肤部位的筋膜，也可以是只清理颅顶上的筋膜，处理干净骨面的筋膜能够使后续掰开顶骨24时，没有筋膜产生的阻力阻止顶骨24被掰开，筋膜清理完成后，还可以使用酒精或其他合适的消毒剂清洁需要处理部位，尽可能实现取脑过程的无菌性。
44.优选的，所述使用组织剪沿矢状缝21方向剪开颅顶皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜前，还可以包括将所述大鼠麻醉后处死，切断所述大鼠的颈部脊髓，即使用适当的方法将大鼠麻醉后处死，检查确定大鼠完全失去反应力后，使用钳子夹住大鼠的颈部，迅速将大鼠的颈部脊髓切断，尽可能地减少动物的痛苦。
45.在本发明的描述中，需要说明的是，术语“上”、“下”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
46.需要说明的是，在本发明中，诸如“第一”和“第二”等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个
……”
限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同要素。
47.以上所述仅是本发明的具体实施方式，使本领域技术人员能够理解或实现本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所申请的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

技术特征：
1.一种实验大鼠取脑方法，其特征在于，其包括以下步骤：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝(21)方向将枕骨(26)剪至人字点(22)；使用弯止血钳(5)沿所述矢状缝(21)的延长方向在所述大鼠的前囟(25)至额骨(23)方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨(23)直至颅底；使用所述弯止血钳(5)将顶骨(24)掰开，取出完整的脑组织(3)。2.如权利要求1所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述使用弯止血钳(5)沿所述矢状缝(21)的延长方向在所述大鼠的前囟(25)至额骨(23)方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨(23)直至颅底前，还包括：锁紧所述弯止血钳(5)。3.如权利要求2所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于：所述弯止血钳(5)的钳口设置有尖刺头(51)。4.如权利要求1所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述使用弯止血钳(5)将顶骨(24)掰开，取出完整的脑组织(3)，包括：解锁所述弯止血钳(5)，沿垂直于所述矢状缝(21)的方向掰开所述弯止血钳(5)，使所述大鼠的脑组织(3)上方的所述顶骨(24)沿所述矢状缝(21)均匀分成两部分；夹断所述脑组织(3)和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织(3)。5.如权利要求4所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述夹断所述脑组织(3)和所述颅底的神经的连接，完整的取出脑组织(3)，包括：使用可拆卸连接于所述弯止血钳(5)的尖刺头(51)夹断所述脑组织(3)和所述颅底的神经的连接；将所述尖刺头(51)从所述弯止血钳(5)上拆下，使用所述弯止血钳(5)取出所述脑组织(3)，使完整的所述脑组织(3)脱离所述颅底。6.如权利要求5所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述弯止血钳(5)包括主体以及设置于所述主体前端的弧形部(52)；所述使用所述弯止血钳(5)取出脑组织(3)，使完整的脑组织(3)脱离所述颅底，包括：使用所述弧形部(52)的前端触碰所述颅底，并利用所述弧形部(52)的内侧接触所述脑组织(3)，将完整的脑组织(3)扒出所述颅底。7.如权利要求1所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝(21)方向将枕骨(26)剪至人字点(22)，包括：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝(21)方向将枕骨(26)剪至距离人字点(22)0.5～0.8cm处。8.如权利要求1所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝(21)方向将枕骨(26)剪至人字点(22)前，还包括：使用组织剪沿矢状缝(21)方向剪开颅顶皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜。9.如权利要求8所述的实验大鼠取脑方法，其特征在于，所述使用组织剪沿矢状缝(21)方向剪开颅顶皮肤，清理干净所述颅顶上的筋膜前，还包括：将所述大鼠麻醉后处死，切断所述大鼠的颈部脊髓。

技术总结
本发明涉及一种实验大鼠取脑方法，其特征在于，其包括以下步骤：使用组织剪从大鼠的枕骨大孔沿矢状缝方向将枕骨剪至人字点；使用弯止血钳沿矢状缝的延长方向在所述大鼠的前囟至额骨方向的0.5～0.8cm处，垂直刺破额骨直至颅底；使用弯止血钳将顶骨掰开，取出完整的脑组织。由于使用弯止血钳在选定的位置刺破大鼠的额骨直至颅底，选定的位置处额骨下方没有脑组织，且大鼠的额骨和顶骨相连，左右顶骨之间又存在骨缝，也就是矢状缝，所以大鼠的额骨被刺破之后，左右顶骨会被刺破额骨的弯止血钳撑开并沿矢状缝分成左右两部分，此时，大鼠脑组织上方的顶骨不会产生碎裂的骨片，使取样的脑组织不包含其他组织，因此，能保证大鼠的脑组织的完整性。织的完整性。织的完整性。


技术研发人员：周本宏 黄正元 李光钰
受保护的技术使用者：武汉大学人民医院（湖北省人民医院）
技术研发日：2023.05.19
技术公布日：2023/8/9