一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法与流程

1.本发明属于灵芝萃取技术领域，具体涉及一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法。


背景技术：

2.灵芝(ganodermo lucidum)属于担子菌纲多孔菌科真菌，是我国名贵的传统中药材，在中国有上千年的药用历史，又名“琼珍”，被历代医药家视为滋补强壮、扶正固本的神奇珍品。灵芝孢子粉是在灵芝成熟后从菌褶中弹射出来的微小的生殖细胞，也是灵芝的种子，具有灵芝的全部遗传物质，其形态极其微小(4~6μm)，一般条件下想要自然收集很困难。近年来经证实灵芝孢子粉主要具有抗癌抗肿瘤活性、保护神经系统、保肝护肝、降血脂、降血糖、调节机体免疫力等作用。此外，灵芝孢子粉类药物被广泛应用于临床方面，且安全无毒。灵芝三萜一般可以从不同种类的灵芝中分离提纯获得，且灵芝三萜在灵芝中的含量多少常被作为评判灵芝质量的关键指标。灵芝萃取油传统的提取方法一般采用甲醇或乙醇等溶剂浸提，但该方法存在提取效率低、提取次数多、能耗高、溶剂用量大、有溶剂残留等诸多缺点。超临界co2萃取技术是食品工业新兴的一项萃取、分离和纯化的技术，与传统的溶剂萃取法相比，具有无溶剂残留、无污染、避免萃取物在高温下的热裂解、有利于脂溶性物质和热敏性物质的萃取，且工艺简单、能耗低，萃取剂无毒、易回收等优点，已被广泛应用于中草药成分及香料的提取。但是多存在活性成分得率低的问题。
3.如申请号为cn202011383470.2公开的一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法。本发明公开了一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，该方法是先将灵芝细粉和破壁灵芝孢子粉与分别制粒，得到灵芝子实体颗粒和灵芝孢子粉颗粒，再将得到的两种颗粒依次分别干燥，混合后进行二氧化碳超临界萃取，最终使制得的萃取油灵芝三萜含量高于灵芝孢子油中灵芝三萜含量，并具有显著的抗肿瘤的药理活性。虽然该申请将灵芝孢子和灵芝子实体作为提取原料，但是原料的生物利用度不是很高，原料未能得到充分的利用，从某种意义上造成了资源的浪费。


技术实现要素：

4.本发明的目的是针对现有的问题，提供了一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法。
5.本发明是通过以下技术方案实现的：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，完成后取出备用；
（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于深冷环境中进行深冷处理；（4）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，得灵芝孢子粉备用；（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可。
6.进一步地，步骤（1）中所述的低温真空干燥处理时控制真空度为1.3~1.9pa，干燥温度为20~28℃。
7.进一步地，步骤（2）中所述的冷等离子处理的功率为80~120w，冷等离子处理3~7min。
8.进一步地，步骤（3）中所述的深冷环境为液氮环境，置于液氮中40~60s。
9.进一步地，步骤（4）中所述的超微粉碎将灵芝孢子粉碎至1~10μm。
10.进一步地，步骤（4）中所述的超声波辅助处理时超声波的频率为30~40khz。
11.进一步地，步骤（5）中所述的萃取时以质量分数25~95%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为25~40mpa，萃取温度为40~55℃，萃取时间为3~5h。
12.本发明相比现有技术具有以下优点：本技术提供了一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，综合考虑灵芝孢子的特性，将低温真空干燥、冷等离子体处理、深冷处理、超声波辅助超微粉碎处理进行相同协同促进，促进萃取时有效成分的浸出，并且有效的保护有效成分的活性，最终得到高得率、高活性的灵芝萃取油。
具体实施方式
13.为了对本发明做更进一步的解释，下面结合下述具体实施例进行阐述。
实施例1
14.一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.3pa，干燥温度为20℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为80w，冷等离子处理3min后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理40s；（4）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，粉碎至1μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为30khz；
（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数25%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为25mpa，萃取温度为40℃，萃取时间为3h。
实施例2
15.一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.6pa，干燥温度为24℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为100w，冷等离子处理5min后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理50s；（4）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，粉碎至5.5μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为35khz；（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
实施例3
16.一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.9pa，干燥温度为28℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为120w，冷等离子处理7min后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理60s；（4）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，粉碎至10μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为40khz；（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数95%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为40mpa，萃取温
度为55℃，萃取时间为5h。
17.对比例1：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）冷等离子体处理：将灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为100w，冷等离子处理5min后取出备用；（2）深冷处理：将步骤（1）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理50s；（3）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，粉碎至5.5μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为35khz；（4）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
18.对比例2：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.6pa，干燥温度为24℃，完成后取出备用；（2）深冷处理：将步骤（1）中干燥处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理50s；（3）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，粉碎至5.5μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为35khz；（4）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
19.对比例3：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.6pa，干燥温度为24℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为100w，冷等离子处理5min后取出备用；（3）超声波辅助超微粉碎处理：将冷等离子体处理后的灵芝孢子置于超微粉碎机内，在超声波辅作用下进行超微
粉碎处理，粉碎至5.5μm得灵芝孢子粉备用，超声波的频率为35khz；（4）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
20.对比例4：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.6pa，干燥温度为24℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为100w，冷等离子处理5min后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理50s；（4）超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内进行超微粉碎处理，粉碎至5.5μm得灵芝孢子粉备用；（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
21.对比例5：一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理控制真空度为1.6pa，干燥温度为24℃，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，冷等离子处理的功率为100w，冷等离子处理5min后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于液氨环境中进行深冷处理50s；（4）超临界co2萃取：深冷处理后取出立马置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可，萃取时以质量分数60%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为32.5mpa，萃取温度为47.5℃，萃取时间为4h。
22.对照组：申请号为cn202011383470.2公开的一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法。
23.为了对比本技术技术效果，分别用上述实施例2、对比例1~5以及对照组的方法对
应制备灵芝萃取油，然后计算各组方法的萃取油得率及三萜提取率。
24.具体实验结果数据如下表1所示：表1
25.由上表1可以看出，将实施例2与对比例1~5对比得出，均对提取率有较大的影响，实施例2的萃取油得率及三萜提取率显著优于对比例1~5，与对照组对比可以看出，本技术虽然只使用了灵芝孢子一种原料，但是萃取油得率以及三萜提取率都是相当高的，说明本技术的富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法科学合理，原料生物利用度高。

技术特征：
1.一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理：将灵芝孢子至于真空干燥箱内进行低温真空干燥处理，完成后取出备用；（2）冷等离子体处理：将干燥后的灵芝孢子置于冷等离子体设备中进行冷等离子体处理，完成后取出备用；（3）深冷处理：将步骤（2）中冷等离子体处理后的灵芝孢子置于深冷环境中进行深冷处理；（4）超声波辅助超微粉碎处理：深冷处理后取出立马置于超微粉碎机内，在超声波辅助作用下进行超微粉碎处理，得灵芝孢子粉备用；（5）超临界co2萃取：将破壁之后的灵芝孢子粉置于具有三级分离的超临界co2萃取釜内，然后进行超临界萃取即可。2.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（1）中所述的低温真空干燥处理时控制真空度为1.3~1.9pa，干燥温度为20~28℃。3.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（2）中所述的冷等离子处理的功率为80~120w，冷等离子处理3~7min。4.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（3）中所述的深冷环境为液氮环境，置于液氮中40~60s。5.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的超微粉碎将灵芝孢子粉碎至1~10μm。6.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（4）中所述的超声波辅助处理时超声波的频率为30~40khz。7.根据权利要求1所述一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，其特征在于，步骤（5）中所述的萃取时以质量分数25~95%的乙醇水溶液作为携带剂，萃取压力为25~40mpa，萃取温度为40~55℃，萃取时间为3~5h。

技术总结
本发明公开了一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，属于灵芝萃取技术领域，包括如下步骤：（1）低温真空干燥处理；（2）冷等离子体处理；（3）深冷处理；（4）超声波辅助超微粉碎处理；（5）超临界CO2萃取。本申请提供了一种富含灵芝三萜的灵芝萃取油的制备方法，综合考虑灵芝孢子的特性，将低温真空干燥、冷等离子体处理、深冷处理、超声波辅助超微粉碎处理进行相同协同促进，促进萃取时有效成分的浸出，并且有效的保护有效成分的活性，最终得到高得率、高活性的灵芝萃取油。高活性的灵芝萃取油。


技术研发人员：刘金贵 蒋功发
受保护的技术使用者：安徽农神生物科技有限公司
技术研发日：2023.06.26
技术公布日：2023/8/14