寡肽组合物及其在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用的制作方法

1.本发明涉及日化和护肤品领域，特别是一种寡肽组合物及其在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用。


背景技术：

2.皮肤老化一般有自然老化和光老化两种表现形式。前者主要指随着年龄增长，由机体内存在的如遗传、重力、内分泌及免疫功能等不可抗因素引起的老化；后者主要是由于紫外线、气候变化以及环境污染等一系列环境暴露对皮肤的光老化也有着直接的影响。根据皮肤的衰老机理，探讨抗衰老的途径，主要包括：保护皮肤免受外界环境刺激；清除细胞内的多余自由基；对皮肤细胞进行修复和补充营养。抗衰老化妆品就是实现抗衰老功效的化妆品，是重要的功效型化妆品之一本公司在结合多年的化妆品组方的研发经验，尤其是在化妆品抗衰老领域的优势，从组方中找寻突破口，发现多肽，如寡肽，在预防衰老、减缓衰老和平缓皱纹等方面应用，有特别神奇的效果；同时公司组织一些生物工程等领域的专家，对具有抗衰修复皮肤功效的发酵产物原料进行研究开发，并对原料进行组方，最终研发出了一种具有促进皮肤修复及抗衰老作用的寡肽组合物。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种寡肽组合物及其在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用，以解决上述技术背景中提出的问题。
4.为实现上述目的，本发明通过以下技术方案来实现：第一方面的，本发明提供了一种寡肽组合物，包含20~300份乳酸杆菌发酵产物滤液、10~100份寡肽-1、10~100份棕榈酰五肽-4、10~100份乙酰基四肽-9；所述乳酸杆菌发酵产物滤液是将乳酸杆菌进行活化后接种于种子培养基中培养得种子液，然后将种子液再接种在发酵培养基中培养制得。
5.作为进一步方案，寡肽组合物包含150份乳酸杆菌发酵产物滤液、60份寡肽-1、60份棕榈酰五肽-4、60份乙酰基四肽-9。
6.作为进一步方案，所述种子培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。
7.作为进一步方案，所述发酵培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/l、枸杞多糖1.35~5.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。
8.作为进一步方案，所述种子培养基包含刺五加多糖3.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；所述发酵培养基包含刺五加多糖
3.55g/l、枸杞多糖2.75g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。
9.第二方面的，本发明提供所述的寡肽组合物在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用。
10.与现有技术相比，本发明的有益效果是：1、本技术实施例利用含刺五加多糖和枸杞多糖的培养基作为原料，采用副干酪乳杆菌对其进行发酵，并将发酵产物与寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9进行复配得寡肽组合物，寡肽组合物中各成分之间协同作用，具有显著的抗氧化、抑制酪氨酸和促进胶原蛋白再生等效果。
11.2、利用本技术公开的寡肽组合物，在体外实验中具有优异的抗氧化、抑制酪氨酸和促进胶原蛋白再生等作用，具有非常突出的抗衰老皮肤修复效果，提升肌肤光泽感，亮泽肤色，具有很好的市场应用前景。
附图说明
12.图1为本发明的寡肽组合物对酪氨酸酶抑制率和dpph自由基清除率的影响的柱状图；图2为本发明的寡肽组合物对人皮肤成纤维细胞的细胞增殖率的影响的柱状图；图3为本发明的寡肽组合物对人皮肤成纤维细胞分泌ⅰ型胶原蛋白含量的影响的柱状图。
具体实施方式
13.以下通过特定的具体实例说明本发明的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本发明的精神下进行各种修饰或改变。需说明的是，在不冲突的情况下，以下实施例及实施例中的特征可以相互组合。
14.本技术中部分原料：刺五加多糖，含量90%，购于陕西慧科植物开发有限公司；枸杞多糖，含量90%，购于陕西慧科植物开发有限公司。
15.实施例1：本实施例提供了一种寡肽组合物，按重量份计包含20份乳酸杆菌发酵产物滤液、100份寡肽-1、100份棕榈酰五肽-4、100份乙酰基四肽-9；所述乳酸杆菌发酵产物滤液的制备方法为：（1）取1支副干酪乳杆菌（货号na-jh487880，购于诺安基因科技（武汉）有限公司）冻干管，用0.5ml mrs液体培养液溶解，接种至1个mrs平板上生长出单菌落后，取单菌落用0.5ml无菌水稀释后以3v/v%体积比接种于种子培养基中，37℃培养18h得种子液；其中，mrs液体培养基：蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20min，备用。所述种子培养基包含刺五加多糖6.25g/l、蛋白胨
10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20min，备用。
16.（2）将种子液按照5v/v%体积比接种在发酵培养基，在37℃下发酵培养36h，过滤，经巴氏灭菌，得乳酸杆菌发酵产物滤液。所述发酵培养基包含刺五加多糖1.35g/l、枸杞多糖5.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
17.实施例2：本实施例提供了一种寡肽组合物，按重量份计包含150份乳酸杆菌发酵产物滤液、60份寡肽-1、60份棕榈酰五肽-4、60份乙酰基四肽-9；乳酸杆菌发酵产物滤液的制备方法与实施例1相似，种子培养基和发酵培养基略有不同；其中，步骤（1）中的所述种子培养基包含刺五加多糖3.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；步骤（2）中的发酵培养基包含刺五加多糖3.55g/l、枸杞多糖2.75g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。
18.实施例3：本实施例提供了一种寡肽组合物，按重量份计包含300份乳酸杆菌发酵产物滤液、10份寡肽-1、10份棕榈酰五肽-4、10份乙酰基四肽-9；乳酸杆菌发酵产物滤液的制备方法与实施例1相似，种子培养基和发酵培养基略有不同，其中，步骤（1）中的种子培养基包含刺五加多糖1.35g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；步骤（2）中的发酵培养基包含刺五加多糖6.25g/l、枸杞多糖1.35g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。
19.对比例1本实施例与实施例2相似，区别在于：去除乳酸杆菌发酵产物滤液。
20.对比例2本实施例与实施例2相似，区别在于：去除寡肽-1。
21.对比例3本实施例与实施例2相似，区别在于：去除棕榈酰五肽-4。
22.对比例4本实施例与实施例2相似，区别在于：去除乙酰基四肽-9。
23.对比例5本实施例与实施例2配方相同，区别在于配方中乳酸杆菌发酵产物滤液制备方法不同，乳酸杆菌发酵产物滤液的制备步骤中，步骤（1）中使用的种子培养基包含：蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
24.步骤（2）中使用的发酵培养基包含：蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、
kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
25.对比例6本实施例与实施例2配方相同，区别在于配方中乳酸杆菌发酵产物滤液制备方法不同，乳酸杆菌发酵产物滤液的制备步骤中，步骤（2）与实施例2相同；步骤（1）中使用的种子培养基包含：蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
26.对比例7本实施例与实施例2配方相同，区别在于配方中乳酸杆菌发酵产物滤液制备方法不同，乳酸杆菌发酵产物滤液的制备步骤中，步骤（1）与实施例2相同；步骤（2）使用的发酵培养基包含：枸杞多糖2.75g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
27.对比例8本实施例与实施例2配方相同，区别在于配方中乳酸杆菌发酵产物滤液制备方法不同，乳酸杆菌发酵产物滤液的制备步骤中，步骤（1）与实施例2相同；步骤（2）中使用的发酵培养基包含：刺五加多糖3.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；调节ph到6.7
±
0.1，121℃灭菌20 min，备用。
28.一、为进一步阐明本技术实施例提供的寡肽组合物的功效，本技术实施例还进行了如下性能试验：1、抑制酪氨酸酶试验待测样品：实施例1~3和对比例1~8分别提供的寡肽组合物、乳酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9；其中，实施例1~3和对比例1~8分别提供的寡肽组合物分别用0.2m、ph6.80的pbs缓冲溶液配置成3wt%溶液（按相应配方称取后，按配方原料总质量3%配置），乳酸杆菌发酵产物滤液用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含1.36%乳酸杆菌发酵产物滤液的溶液，寡肽-1用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%寡肽-1的溶液、棕榈酰五肽-4用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%棕榈酰五肽-4的溶液、乙酰基四肽-9用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%乙酰基四肽-9的溶液。
29.试验方法：构建酪氨酸酶催化反应体系（表1），来评价实施例1~3和对比例1~8提供的寡肽组合物对酪氨酸酶的抑制效果。每个待测样品对酪氨酸酶的抑制试验均按酪氨酸酶催化反应体系进行实验，每个样品做3个重复；酪氨酸酶催化反应体系分为a、b、c、d四个反应管进行加样，加样结束后，37℃水浴下恒温反应10min，在475nm处测定a、b、c、d吸光值。酪氨酸酶抑制率（%）=[1-(c-d)/(a-b)]
×
100%，式中，a、b、c、d为对应反应管反应结束后在475nm处的吸光值，计算各实验组的酪氨酸酶抑制率，试验结果见表3和图1所示。
[0030]
表1反应体系abcd待测样品（ul）00200200
pbs（ul）100012008001000500u/ml酪氨酸酶溶液（ul）200020000.5wt%酪氨酸溶液（ul）3003003003002、dpph自由基清除试验待测样品：实施例1~3和对比例1~8分别提供的寡肽组合物、乳酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9；其中，实施例1~3和对比例1~8分别提供的寡肽组合物分别用0.2m、ph6.80的pbs缓冲溶液配置成3wt%溶液，乳酸杆菌发酵产物滤液用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含1.36%乳酸杆菌发酵产物滤液的溶液，寡肽-1用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%寡肽-1的溶液、棕榈酰五肽-4用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%棕榈酰五肽-4的溶液、乙酰基四肽-9用ph6.80的pbs缓冲溶液配置成含0.55%乙酰基四肽-9的溶液。
[0031]
试验方法：构建dpph自由基清除反应体系（表2），来评价实施例1~3和对比例1~8提供的寡肽组合物的抗氧化活性。每个待测样品均按酪氨酸酶催化反应体系进行实验，每个样品做3个重复；dpph自由基清除反应体系分为a1、a2和a3三个反应管进行加样，加样结束后，25℃水浴下恒温暗处静置30min，在517nm处测定各a0、a1和a2吸光值。dpph清除率=[1-(a1-a2)/a0]
×
100%，式中，a0、a1和a2为对应反应管反应结束后在517nm处的吸光值，计算各实验组的dpph自由基清除率，试验结果见表3和图1所示。
[0032]
表2反应体系a0a1a2待测样品（ml）－0.50.50.2mmdpph甲醇溶液（ml）0.50.5－去离子水（ml）0.5－0.5表3组别dpph自由基清除率%酪氨酸酶抑制率%实施例192.73
±
0.54a85.28
±
0.71a实施例295.87
±
1.13a86.71
±
1.12a实施例395.24
±
0.82a84.17
±
1.10a对比例157.96
±
1.38b24.90
±
0.78c对比例261.93
±
0.63b42.82
±
0.61b对比例363.21
±
0.45b44.69
±
0.78b对比例465.41
±
0.58b46.14
±
0.13b对比例563.59
±
0.53b19.45
±
0.56c对比例666.17
±
0.81b21.02
±
0.40c对比例766.39
±
0.43b25.11
±
0.19c对比例864.79
±
0.87b23.75
±
0.38c乳酸杆菌发酵产物滤液43.39
±
0.53c32.79
±
0.35
bc
寡肽-137.89
±
0.51c14.22
±
0.30c棕榈酰五肽-436.69
±
0.56c18.67
±
0.44c乙酰基四肽-940.56
±
0.70c16.09
±
0.17c由表3和图1可知，实施例1~3提供的寡肽组合物的酪氨酸酶抑制率和dpph自由基清除率均显著高于对比例1~8提供的寡肽组合物、乳酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4以及乙酰基四肽-9，说明本技术实施例提供的寡肽组合物具有更佳的抗氧化能力，更强的抑制酪氨酸酶抑制率；皮肤中黑色素的形成过程中酪氨酸酶最为关键，抑制酪氨酸酶活性可以起到美白的作用，同时自由基或者是氧化剂会影响身体的代谢能力，产生一些健康问题，让身体因为氧化而产生肌肤衰老，抗氧化可以延缓皮肤衰老。实施例2相较于对比例1-8，寡肽组合物的酪氨酸酶抑制率和dpph自由基清除率均显著提高，说明寡肽组合物中乳酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9协同作用；对比例2-4相较于对比例1、对比例5-8，酪氨酸酶抑制率显著提高，说明副干酪乳杆菌采用含刺五加多糖和枸杞多糖的培养基发酵得到的乳酸杆菌发酵产物滤液与寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9具有更显著的美白功效。
[0033]
二、为进一步阐明本技术实施例提供的寡肽组合物的功效，本技术实施例还进行了如下细胞实验：细胞：人皮肤成纤维细胞hsf，货号bfn608007204，购自上海细胞库。
[0034]
3、人成纤维细胞体外增殖活性受试样品及分组：设置9个试验组和1个阴性对照组，试验组分别对应采用本技术实施例2、对比例1-8的寡肽组合物，寡肽组合物分别用去离子水配成母液后，在采用dmem培养基对应配置成含3wt%寡肽组合物的dmem培养基。阴性对照组采用dmem培养基。
[0035]
试验方法：取培养至第4-6代对数生长期的人皮肤成纤维细胞，将细胞配成悬液，按每孔100ul、10000个/孔接种于96孔板，每组设置3个复孔，另设一组只加入100ul dmem培养基作为空白对照。铺好后的96孔板于37℃、5%co2条件下培养过夜。
[0036]
细胞贴壁后，弃去培养基，分别进行给药，加入实验分组所对应的培养基（给药培养时试验组和阴性对照组所对应的培养基中均还加入10%胎牛血清，使用mtt检测试剂盒测试时用pbs清洗后重新加入无血清dmem），放入细胞培养箱继续进行培养24h，弃去孔内培养基，每孔加入10μl mtt和90μl无血清dmem的混合液，在细胞培养箱中孵育4h后，按mtt检测试剂盒（mtt细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒，solarbio）操作，于酶标仪检测波长490nm处试验组、阴性对照组和空白对照组的吸光度值，计算细胞增殖率，细胞增殖率见表4和图2所示；试验组：hsf细胞+dmem培养液+寡肽组合物阴性对照组：hsf细胞+dmem培养液空白对照组：dmem培养液细胞增殖率%（细胞活力）＝（试验组-空白对照组）/（阴性对照组-空白对照组）
×
100％，表4组别细胞增殖率（%）实施例2158.15
±
1.07a对比例1108.21
±
1.10
abc
对比例2124.92
±
0.59
ab
对比例3126.31
±
0.82
ab
对比例4124.80
±
0.91
ab
对比例5110.36
±
1.35
abc
对比例6111.31
±
0.96
abc
对比例7112.83
±
0.69
abc
对比例8112.31
±
0.80
abc
阴性对照组100由表4和图2可知，实施例2提供的寡肽组合物培养hsf细胞的细胞增值率显著高于对比例1-8，说明实施例2提供的寡肽组合物能促进细胞增殖，寡肽组合物中乳酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9协同作用；对比例2-4相较于对比例1、对比例5-8，细胞增殖率显著提高，说明寡肽组合物中的乳酸杆菌发酵产物滤液，其通过副干酪乳杆菌采用含刺五加多糖和枸杞多糖的培养基发酵获得，在促进hsf细胞增殖上具有更显著的效果。
[0037]
4、细胞分泌胶原蛋白ⅰ含量受试样品及分组：设置9个试验组和1个阴性对照组，试验组分别对应采用本技术实施例2、对比例1-8的寡肽组合物，寡肽组合物分别用去离子水配成母液后，在采用dmem培养基对应配置成含3wt%寡肽组合物的含体积分数为10%胎牛血清的dmem培养基。阴性对照组采用含体积分数为10%胎牛血清的dmem培养基。
[0038]
试验方法：取培养至第4-6代对数生长期的人皮肤成纤维细胞，将细胞按5000个/每孔、每孔100ul接种于96孔板，每组设置3个复孔，置于细胞培养箱中37℃、5%co2条件下培养过夜；细胞贴壁后，弃去培养基，pbs清洗后分别进行给药，加入实验分组所对应的培养基，37℃培养箱孵育36小时后，取细胞上清样本，用人i型胶原蛋白（col-i）elisa试剂盒（上海西唐生物科技有限公司）测定胶原蛋白的含量，评估对人成纤维细胞的i型胶原合成促进作用。i型胶原蛋白含量测试结果如表5和图3所示。
[0039]
表5组别ⅰ型胶原蛋白（ng/ml）实施例266.56
±
0.59a对比例129.80
±
0.29
abc
对比例245.01
±
0.67
ab
对比例346.78
±
0.73
ab
对比例444.68
±
1.20
ab
对比例530.84
±
0.31
abc
对比例631.75
±
0.35
abc
对比例733.39
±
0.41
abc
对比例832.04
±
0.18
abc
阴性对照组18.85
±
0.28由表5和图3可知，实施例2提供的寡肽组合物促进hsf细胞分泌ⅰ型胶原蛋白作用显著高于对比例1-8，说明实施例2提供的寡肽组合物能促进胶原蛋白的生成，从而使得皮肤光滑有弹性，具有发展皮肤抗皱修复及抗衰老作用的化妆品的潜力，且寡肽组合物中乳
酸杆菌发酵产物滤液、寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9协同作用促进hsf生成胶原蛋白；对比例2-4相较于对比例1、对比例5-8，胶原蛋白的分泌含量显著提高，说明寡肽组合物中的乳酸杆菌发酵产物滤液，其通过副干酪乳杆菌采用含刺五加多糖和枸杞多糖的培养基发酵获得，在促进hsf细胞分泌ⅰ型胶原蛋白的效果上具有很好的协同作用。
[0040]
本技术提供的寡肽组合物可应用在制备护肤产品上，其中，所述护肤产品具有抗衰、修复皮肤、美白等功效。
[0041]
以上所述实施例仅表达了本发明的具体实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。

技术特征：
1.一种寡肽组合物，其特征在于，包含20~300份乳酸杆菌发酵产物滤液、10~100份寡肽-1、10~100份棕榈酰五肽-4、10~100份乙酰基四肽-9；所述乳酸杆菌发酵产物滤液是将乳酸杆菌进行活化后接种于种子培养基中培养得种子液，然后将种子液再接种在发酵培养基中培养制得。2.根据权利要求1所述的一种寡肽组合物，其特征在于，包含150份乳酸杆菌发酵产物滤液、60份寡肽-1、60份棕榈酰五肽-4、60份乙酰基四肽-9。3.根据权利要求2所述的一种寡肽组合物，其特征在于，所述种子培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。4.根据权利要求3所述的一种寡肽组合物，其特征在于，所述发酵培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/l、枸杞多糖1.35~5.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。5.根据权利要求4所述的一种寡肽组合物，其特征在于，所述种子培养基包含刺五加多糖3.55g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l；所述发酵培养基包含刺五加多糖3.55g/l、枸杞多糖2.75g/l、蛋白胨10g/l、牛肉膏10g/l、酵母膏5g/l、kh2po
4 2g/l、柠檬酸三钠2g/l、乙酸钠2g/l、葡萄糖20g/l、tween 80 1ml/l、mgso4·
7h2o 0.58g/l、mnso4·
4h2o 0.25g/l。6.权利要求1~5任一项所述的寡肽组合物在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用。

技术总结
本发明公开了一种寡肽组合物及其在制备皮肤修复及抗衰老产品上的应用。该寡肽组合物，包含20~300份乳酸杆菌发酵产物滤液、10~100份寡肽-1、10~100份棕榈酰五肽-4、10~100份乙酰基四肽-9；所述乳酸杆菌发酵产物滤液是将乳酸杆菌进行活化后接种于种子培养基中培养得种子液，然后将种子液再接种在发酵培养基中培养制得；所述种子培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/L；所述发酵培养基包含刺五加多糖1.35~6.25g/L、枸杞多糖1.35~5.55g/L。本申请实施例利用含刺五加多糖和枸杞多糖的培养基作为原料，采用副干酪乳杆菌对其进行发酵，并将发酵产物与寡肽-1、棕榈酰五肽-4、乙酰基四肽-9进行复配得寡肽组合物，寡肽组合物中各成分之间协同作用，具有显著的抗氧化、抑制酪氨酸和促进胶原蛋白再生等效果。促进胶原蛋白再生等效果。促进胶原蛋白再生等效果。


技术研发人员：李兴德 李兴泽
受保护的技术使用者：四川肽美生物科技有限公司
技术研发日：2023.05.29
技术公布日：2023/8/21