一种奥沙利铂脂质体及其制剂

1.本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种奥沙利铂脂质体及其制剂。


背景技术：

2.奥沙利铂最早由debiopharm公司开发，属于铂族金属配合物，其未出现顺铂的肾脏毒性，也没有卡铂的骨髓抑制，是继顺铂、卡铂之后的新一代铂类抗肿瘤药物。奥沙利铂与其他铂类药作用相同，以dna为靶作用部位，铂原子与dna形成交叉联结，拮抗其复制和转录。奥沙利铂对大肠癌、卵巢癌有较好疗效，对胃癌、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、头颈部肿瘤有一定疗效。
3.脂质体是由脂质双分子层所形成的一种超微球形载体制剂，具有良好的生物相容性，是目前纳米药物输送系统中研究最广泛的纳米载体之一。
4.公开号为cn103181898a的中国专利公开了一种奥沙利铂脂质体及其应用，其奥沙利铂脂质体包括奥沙利铂、磷脂、胆固酸、泊洛沙姆f68，磷脂与胆固醇的质量比为3～8：1，奥沙利铂与磷脂的质量比为1：30～60，泊洛沙姆f68与磷脂的质量比为1：5～15。
5.公开号为cn113876712a中国专利公开了一种奥沙利铂脂质体注射剂，由奥沙利铂、氨基酸修饰的磷脂、海藻糖、缓冲液制备而成，其中奥沙利铂和氨基酸修饰的磷脂的重量份比为1：0.5～6。
6.公开号为cn115463093a中国专利公开了一种奥沙利铂脂质体及其制备方法，利用咪唑类化合物修饰的磷脂、三萜皂苷溶于有机溶剂，减压旋蒸去除有机溶剂，形成薄膜，再加入溶有奥沙利铂的缓冲溶液，旋转蒸发，振摇，超声，过膜挤压，得到奥沙利铂脂质体，提高了奥沙利铂脂质体的载药量和物理稳定性，降低了渗漏率。
7.但在奥沙利铂用药过程中还常伴有恶心、呕吐、腹泻等胃肠黏膜炎症副反应。现有奥沙利铂脂质体技术均未有效的解决奥沙利铂引起的胃肠道反应不良反应问题。


技术实现要素：

8.克服现有技术的不足，本发明提供了奥沙利铂脂质体及制剂，利用大豆磷脂、豆甾醇、西黄蓍胶对奥沙利铂进行包封，得到了一种载药量高、包封率高，且稳定的奥沙利铂脂质体，进一步的，将奥沙利铂脂质体制成注射剂等制剂。
9.具体而言，本发明的技术方案如下：
10.本发明提供了一种奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述奥沙利铂脂质体包括：
[0011][0012]
本发明的第二个目的在于提供所述奥沙利铂脂质体的制备方法。所述制备方法
为：将大豆磷脂、豆甾醇溶于有机溶剂，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有西黄蓍胶、奥沙利铂的缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0013]
在一个较优的实施例中，所述奥沙利铂脂质体各组分以重量比计算为：
[0014][0015]
在多个实施例中，所述有机溶剂选自三氯甲烷、甲醇、乙醇中的一种。
[0016]
在其中一个实施例中，所述有机溶剂为三氯甲烷。
[0017]
在多个实施例中，所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、枸橼酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液中的一种。
[0018]
在其中一个实施例中，所述缓冲溶液为枸橼酸盐缓冲溶液。
[0019]
在多个实施例中，所述缓冲溶液的ph为5.0～6.0。
[0020]
在其中一个实施例中，所述缓冲溶液的ph为5.5。
[0021]
本发明的第三个目的在于提供一种奥沙利铂制剂，是由权利要求1所述奥沙利铂脂质体和药学上可接受的辅料组成。
[0022]
在多个实施例中，所述制剂注射剂。
[0023]
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
[0024]
本发明利用一定比例的大豆磷脂、豆甾醇、西黄蓍胶对奥沙利铂进行包封，优化制备工艺，得到了一种载药量高、包封率高，且稳定的奥沙利铂脂质体。
[0025]
进一步的，本发明将奥沙利铂脂质体制成注射剂等制剂，通过大鼠实验证明，本发明奥沙利铂注射剂能够减少胃肠道方面的副反应，提高用药安全性。
附图说明
[0026]
图1：各组大鼠血清内毒素水平
[0027]
图2：各组大鼠肠组织中il-6、il-1β和tnf-α表达
具体实施方式
[0028]
为了使本发明的目的、技术方案更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明做进一步的说明，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例，实施例仅用于解释本发明。本领域技术人员应该理解的是，凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。
[0029]
一、奥沙利铂脂质体
[0030]
实施例1奥沙利铂脂质体
[0031]
配方：
[0032][0033]
制备方法：
[0034]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0035]
实施例2奥沙利铂脂质体
[0036]
配方：
[0037][0038]
制备方法：
[0039]
将大豆磷脂、豆甾醇溶于甲醇，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.0碳酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0040]
实施例3奥沙利铂脂质体
[0041]
配方：
[0042][0043]
制备方法：
[0044]
将大豆磷脂、豆甾醇溶于乙醇，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝6.0磷酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0045]
实施例4奥沙利铂脂质体
[0046]
配方：
[0047]
[0048]
制备方法：
[0049]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0050]
实施例5奥沙利铂脂质体
[0051]
配方：
[0052][0053]
制备方法：
[0054]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0055]
对比实施例1奥沙利铂脂质体
[0056]
配方：
[0057]
奥沙利铂
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
10重量份
[0058]
大豆磷脂
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
15重量份
[0059]
西黄蓍胶
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
0.7重量份
[0060]
制备方法：
[0061]
将配方量的大豆磷脂溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0062]
对比实施例2奥沙利铂脂质体
[0063]
配方：
[0064]
奥沙利铂
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
10重量份
[0065]
大豆磷脂
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
15重量份
[0066]
豆甾醇
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
5重量份
[0067]
制备方法：
[0068]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0069]
对比实施例3奥沙利铂脂质体
[0070]
配方：
[0071][0072]
制备方法：
[0073]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0074]
对比实施例4奥沙利铂脂质体
[0075]
配方：
[0076][0077]
制备方法：
[0078]
将配方量的大豆磷脂、豆甾醇溶于三氯甲烷，旋转蒸发，形成磷脂薄膜，加入溶有配方量西黄蓍胶、奥沙利铂的ph＝5.5枸橼酸盐缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。
[0079]
二、奥沙利铂脂质体的质量评价
[0080]
通过载药量、包封率、渗漏率(室温25℃储存2个月)三个方面对实施例1～5奥沙利铂脂质体、对比实施例1～4奥沙利铂脂质体进行质量评价。
[0081]
表1奥沙利铂脂质体的载药量、包封率、渗漏率
[0082] 载药量(％)包封率(％)渗漏率(％)实施例1奥沙利铂脂质体30.8292.410.10实施例2奥沙利铂脂质体32.1388.730.12实施例3奥沙利铂脂质体29.8792.600.12实施例4奥沙利铂脂质体30.6190.080.14实施例5奥沙利铂脂质体31.0490.110.13对比实施例1奥沙利铂脂质体20.7574.510.64对比实施例2奥沙利铂脂质体23.6478.220.53对比实施例3奥沙利铂脂质体25.5078.790.45对比实施例4奥沙利铂脂质体25.7276.930.74
[0083]
通过对实施例1～5奥沙利铂脂质体、对比实施例1～3奥沙利铂脂质体进行载药量、包封率、渗漏率的测定，可以知晓，本发明优选了豆甾醇、西黄蓍胶，并控制比例、优化制备方法，得到了载药量高、包封率高、渗漏率低的奥沙利铂脂质体。
[0084]
三、奥沙利铂注射剂
[0085]
实施例6奥沙利铂注射剂
[0086]
取实施例1所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0087]
实施例7奥沙利铂注射剂
[0088]
取实施例2所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0089]
实施例8奥沙利铂注射剂
[0090]
取实施例3所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0091]
实施例9奥沙利铂注射剂
[0092]
取实施例4所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0093]
实施例10奥沙利铂注射剂
[0094]
取实施例5所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0095]
对比实施例4奥沙利铂注射剂
[0096]
取对比实施例1所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0097]
对比实施例5奥沙利铂注射剂
[0098]
取对比实施例2所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0099]
对比实施例6奥沙利铂注射剂
[0100]
取对比实施例3所得奥沙利铂脂质体溶于注射用水中，葡萄糖溶液调节渗透压，调节ph，注射用水定量，超声、微滤、灭菌、灌装，得奥沙利铂注射剂。
[0101]
四、奥沙利铂注射剂对大鼠胃肠道反应刺激的药效学实验
[0102]
1材料
[0103]
1.1实验药物与试剂
[0104]
1.1.1药物
[0105]
实施例6、7、8奥沙利铂注射剂，对比实施例4、5奥沙利铂注射剂。
[0106]
1.1.2用药剂量
[0107]
实施例6奥沙利铂注射剂：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0108]
实施例7奥沙利铂注射剂：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0109]
实施例8奥沙利铂注射剂：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0110]
对比实施例4奥沙利铂注射剂：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0111]
对比实施例5奥沙利铂注射剂：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d；
[0112]
市售奥沙利铂注射剂(国药准字j20150117)：8mg/kg腹腔注射，每日1次，共7d。
[0113]
1.2实验动物
[0114]
sd大鼠，spf级，180-220g，实验动物许可证号：syxk(鲁)20180008，实验前在标准条件下适应性喂养1周。
[0115]
2.方法
[0116]
2.1实验动物分组
[0117]
将70只sd大鼠随机分为空白组、实施例6组、实施例7组、实施例8组、对比实施例4组、对比实施例5组、市售组，每组10只。
[0118]
3实验项目与结果
[0119]
3.1大鼠生存行为学观察
[0120]
给药前、给药后对各组大鼠称体重，同时对大鼠体重变化、饮食量、饮水量、胃肠道反应(呕吐、腹泻等)情况的观察。
[0121]
评分标准：进食减少计1份、饮水较少计1份、体重减少5％以上计1份、出现呕吐状况计1份、出现腹泻状况计1份，累计统计。
[0122]
表1各组大鼠行为学观察评分(n＝10)
[0123] 行为学观察评分空白组0.1
±
0.32实施例6组0.6
±
0.84
@*
实施例7组0.9
±
0.88
@*
实施例8组0.8
±
1.14
@*
对比实施例4组1.8
±
1.48
@
对比实施例5组1.7
±
1.16
@
市售组2.0
±
1.15
@
[0124]
注：与空白组比较，
@
p《0.01；与市售组比较，
*
p《0.01
[0125]
与空白组相比，实施例6～8组、对比实施例3～4组、市售组大鼠均出现不同程度的不良反应，差异有统计学意义(p＜0.01)，证明奥沙利铂确实具有胃肠道等副反应的发生。给药7天后，本发明实施例6～8组大鼠出现胃肠道反应、体重消减等行为情况较少，与市售奥沙利铂注射剂组大鼠相比，差异有统计学意义(p＜0.01)，说明本发明奥沙利铂注射剂能够有效减少奥沙利铂对于胃肠道方面的副反应。
[0126]
3.2外周血内毒素检测
[0127]
各组大鼠分别在实验第7天麻醉后在无菌条件下剖腹剖胸，心脏穿刺采血1.8ml，注入含肝素0.2ml(含25u)无热源瓶中。3000r/rain离心10min，取上清液，内毒素检测仪进行定量检测。结果以eu/ml表示。
[0128]
图1为各组大鼠血清内毒素水平，与市售组、对比实施例3、对比实施例4组大鼠相比，本发明实施例6～8组大鼠给药后血清内毒素水平较低，说明本发明奥沙利铂注射剂对于胃肠道反应的不良反应较少。
[0129]
3.3肠组织中il-6、il-1β和tnf-α检测
[0130]
各组大鼠分别在实验第7天麻醉后在无菌条件下取肠组织，用10倍体积冷pbs匀浆。根据elisa试剂盒说明书，对各组匀浆液中il-6、il-1β和tnf-α测定。
[0131]
图2为各组大鼠肠组织中il-6、il-1β和tnf-α的相对含量，百分比表示。相比于市售奥沙利铂注射剂组、对比实施例3、对比实施例4组，本发明实施例奥沙利铂注射剂对于大鼠给药后，其肠组织中的il-6、il-1β和tnf-α含量表达较低，更接近于正常组，说明本发明奥沙利铂注射剂对肠道的刺激更小。

技术特征：
1.一种奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述奥沙利铂脂质体包括：2.如权利要求1所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述奥沙利铂脂质体的制备方法为：将大豆磷脂、豆甾醇溶于有机溶剂，置于0℃～5℃冷藏2～4小时，自然回温至室温，加入溶有西黄蓍胶、奥沙利铂的缓冲溶液，于30℃～45℃水浴旋转蒸发去除有机溶剂，高压均质、过滤、洗涤，得到奥沙利铂脂质体。3.如权利要求1所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述奥沙利铂脂质体各组分以重量比计算为：4.如权利要求2所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述有机溶剂选自三氯甲烷、甲醇、乙醇中的一种。5.如权利要求4所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述有机溶剂为三氯甲烷。6.如权利要求2所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、枸橼酸盐缓冲溶液、碳酸盐缓冲溶液中的一种。7.如权利要求6所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述缓冲溶液为枸橼酸盐缓冲溶液。8.如权利要求2所述的奥沙利铂脂质体，其特征在于，所述缓冲溶液的ph为5.0～6.0，优选的，所述缓冲溶液的ph为5.5。9.一种奥沙利铂制剂，其特征在于，由权利要求1所述奥沙利铂脂质体和药学上可接受的辅料组成。10.如权利要求9所述的制剂，其特征在于，所述制剂注射剂。

技术总结
本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种奥沙利铂脂质体及其制剂。本发明所述奥沙利铂脂质体包括：奥沙利铂10重量份、大豆磷脂8～25重量份、豆甾醇3～8重量份、西黄蓍胶0.5～1重量份。本发明利用一定比例的大豆磷脂、豆甾醇、西黄蓍胶对奥沙利铂进行包封，优化制备工艺，得到了一种质量高且稳定的奥沙利铂脂质体。进一步本发明将奥沙利铂脂质体制成注射剂等制剂，通过大鼠实验证明，本发明奥沙利铂注射剂能够减少胃肠道方面的副反应，提高用药安全性。全性。全性。


技术研发人员：王俊锋 庞书菊
受保护的技术使用者：天津市肿瘤医院（天津医科大学肿瘤医院）
技术研发日：2023.06.14
技术公布日：2023/8/23