一种用于油田增产的生物酶提取工艺的制作方法

1.本发明涉及生物酶相关技术领域，更具体地说，是一种用于油田增产的生物酶提取工艺。


背景技术：

2.油田增产措施是为通过消除油井筒附近的伤害或在地层中建立高导流能力的结构来提高油井的生产能力所采取的技术措施。
3.在增产措施中，需要用到带有生物酶的增产剂，增产的原理是增产剂注入储层进行驱油，其中生物酶开始发挥它的生物降解作用，把原来坚韧致密的护壁薄膜一点一点破除，而这时，活性生物酶慢慢进入储层，在岩石表面油膜下生长繁殖，使原油从岩石表面剥离，从而被驱出，进而提高原油采收率，起到增产的作用。
4.传统用于油田增产的生物酶在提取工艺中，对酶的活性破坏较大，从而导致增产率低的问题。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种用于油田增产的生物酶提取工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。
6.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种用于油田增产的生物酶提取工艺，所述提取工艺包括以下步骤：
7.s1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡0.5-2min后冷藏备用；
8.s2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入助磨剂进行湿法研磨，得到研磨液；
9.s3：向研磨液中加入磺酸盐和裂解液后混合均匀得到混合液，所述研磨液、磺酸盐和裂解液的比例为1：0.2-0.7：0.2-0.7；
10.s4：在混合液中加入助滤剂后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与助滤剂的比例为1：0.003-0.008；
11.s5：在过滤液中加入吸附凝胶后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与吸附凝胶的比例为1：0.01-0.03；
12.s6：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置11-12min解冻；
13.s7：在解冻后的上清液中加入乙醇，通过离心机离心8-12min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。
14.本技术再进一步的技术方案：所述助磨剂包括无水乙醇和超纯水。
15.本技术再进一步的技术方案：所述磺酸盐为重烷基苯磺酸盐、石油磺酸盐或木质素磺酸盐。
16.本技术再进一步的技术方案：所述磺酸盐为重烷基苯磺酸盐。
17.本技术再进一步的技术方案：所述裂解液包括苯酚和甲苯。
18.本技术再进一步的技术方案：在所述步骤s3中，通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开。
19.本技术再进一步的技术方案：在所述步骤s3中，通过水平振荡器将混合液混匀。
20.本技术再进一步的技术方案：所述研磨液、磺酸盐和裂解液的比例为1：0.5：0.5。
21.本技术再进一步的技术方案：所述步骤s4中的助滤剂为硅藻土或纸浆。
22.本技术再进一步的技术方案：所述凝胶为氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶。
23.采用本发明提供的技术方案，与现有技术相比，具有如下有益效果：
24.1、本发明在研磨时采用低温研磨减少对酶活性的影响，保证酶的活性，此外还能缩短研磨所需时间，此外样品在全封闭状态下研磨，无交叉污染，减小细菌对酶的活性的影响，而且在研磨液中加入苯酚起到裂解细胞的作用，以便于对酶的提取，提高酶的数量，从而起到增加酶的活性的作用；解决了通过传统生物酶的提取工艺中，对酶的活性破坏较大，从而导致增产率低的问题。
25.2、本发明在研磨后加入的磺酸盐作为表面活性剂能够提高酶的活性的同时，还能够起到增产的作用，因为磺酸盐作为表面活性剂，具有优良的润湿、分散、渗透性能和乳化能力，促进原油从岩石上剥落，对油田起到增产的作用。
具体实施方式
26.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围，下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
27.实施例1
28.s1：将植物组织洗净晾干投入到研磨机中，然后加入无水乙醇进行湿法研磨，得到研磨液，其中植物组织与无水乙醇的比例为1:0.5；
29.s2：向研磨液中加入重烷基苯磺酸盐(优选的可以采用氟化重烷基苯磺酸盐)和苯酚后得到混合液，然后通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开，并且通过水平振荡器进一步混匀，所述研磨液、重烷基苯磺酸盐和苯酚的比例为1：0.5：0.5；
30.s3：在混合液中加入为硅藻土或纸浆(优选硅藻土)后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与硅藻土的比例为1：0.005；
31.s4：在过滤液中加入氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶(优选氢氧化铝凝胶)后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与氢氧化铝凝胶的比例为1：0.02；
32.s5：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置10min解冻；
33.s6：在解冻后的上清液中加入乙醇，通过离心机离心10min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。
34.实施例2
35.在本实施例中，一种用于油田增产的生物酶提取工艺，所述提取工艺包括以下步骤：
36.s1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡1min后冷藏备用；
37.s2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入无水乙醇进行湿法研磨，得到研磨液，其中植物组织与无水乙醇的比例为1:0.5；
38.s3：向研磨液中加入重烷基苯磺酸盐(优选的可以采用氟化重烷基苯磺酸盐)后得到混合液，然后通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开，并且通过水平振荡器进一步混匀，所述研磨液和重烷基苯磺酸盐的比例为1：0.5；
39.s4：在混合液中加入为硅藻土或纸浆(优选硅藻土)后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与硅藻土的比例为1：0.005；
40.s5：在过滤液中加入氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶(优选氢氧化铝凝胶)后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与氢氧化铝凝胶的比例为1：0.02；
41.s6：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置10min解冻；
42.s7：在解冻后的上清液中加入乙醇，通过离心机离心10min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。
43.实施例3
44.在本实施例中，一种用于油田增产的生物酶提取工艺，所述提取工艺包括以下步骤：
45.s1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡1min后冷藏备用；
46.s2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入无水乙醇进行湿法研磨，得到研磨液，其中植物组织与无水乙醇的比例为1:0.5；
47.s3：向研磨液中加入苯酚后得到混合液，然后通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开，并且通过水平振荡器进一步混匀，所述研磨液和苯酚的比例为1：0.5；
48.s4：在混合液中加入为硅藻土或纸浆(优选硅藻土)后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与硅藻土的比例为1：0.005；
49.s5：在过滤液中加入氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶(优选氢氧化铝凝胶)后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与氢氧化铝凝胶的比例为1：0.02；
50.s6：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置10min解冻；
51.s7：解冻后的上清液通过离心机离心10min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。
52.实施例4
53.在本实施例中，一种用于油田增产的生物酶提取工艺，所述提取工艺包括以下步骤：
54.s1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡1min后冷藏备用；
55.s2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入无水乙醇进行湿法研磨，得到研磨液，其中植物组织与无水乙醇的比例为1:0.5；
56.s3：向研磨液中加入重烷基苯磺酸盐(优选的可以采用氟化重烷基苯磺酸盐)和苯酚后得到混合液，然后通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开，并且通过水平振荡器进一步混匀，所述研磨液、重烷基苯磺酸盐和苯酚的比例为1：0.5：0.5；
57.s4：在混合液中加入为硅藻土或纸浆(优选硅藻土)后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与硅藻土的比例为1：0.005；
58.s5：在过滤液中加入氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶(优选氢氧化铝凝胶)后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与氢氧化铝凝胶的比例为1：0.02；
59.s6：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置10min解冻；
60.s7：在解冻后的上清液中加入乙醇，通过离心机离心10min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。
61.对比例1
62.与实施例4相比，不同之处在于研磨采用传统研磨机、所述助磨剂采用超纯水，不含有重烷基苯磺酸盐和乙醇。
63.相关实验：
64.将实施例1-实施例4和对比例1制得的生物酶溶液，用紫外分光光度计在动力学模式下反应20分钟，监测所得溶液在405nm的平均吸光度，从而对酶的活性进行对比，以及将得到的生物酶溶液分别投入到传统的油田增产剂的加工中，对其增产量进行统计对比，得到的结果如下表所示：
[0065] 吸光度增产量实施例10.383.2吨/日实施例20.503.6吨/日实施例30.622.5吨/日实施例40.714.0吨/日对比例10.32.0吨/日
[0066]
对酶的活性进行实验时，吸光度越小，酶的活性就越低，由上表可知，在研磨时采用低温研磨减少对酶活性的影响，保证酶的活性，此外还能缩短研磨所需时间，如果直接研磨，高速运转的马达会带来温度的上升，会破坏酶的活性，降低增产率；此外样品在全封闭状态下研磨，无交叉污染，减小细菌对酶的活性的影响。而且苯酚起到裂解细胞的作用，以便于对酶的提取，提高酶的数量，从而起到增加酶的活性的作用。
[0067]
由上表所知，加入磺酸盐作为表面活性剂能够提高酶的活性的同时，还能够起到增产的作用，因为磺酸盐作为表面活性剂，具有优良的润湿、分散、渗透性能和乳化能力，选用的重烷基苯磺酸盐，能够改变岩石润湿性、乳化原油和洗油能力，促进原油从岩石上剥落，对油田起到增产的作用。
[0068]
有必要说明的是，在步骤s1中，采用的是植物组织是黄姜，黄姜中的薯蓣皂素能够为石油的解堵提供促进分解的作用。
[0069]
现有技术中已经公开了重烷基苯作为表面活性剂能够起到驱油的作用，重烷基苯磺化得到的重烷基苯磺酸.然后采用不同盐，通过直接法或间接法制备重烷基苯磺酸盐，重烷基苯磺酸盐为三次采油中和的表面活性剂，能够起到驱油的作用。而氟化的重烷基苯磺
酸盐，能够降低原油的粘度，从而能够促进原油从岩石上剥落，对油田起到增产的作用。
[0070]
此外，在最后一次离心中加入乙醇，最后离心后得到的生物酶溶液中的乙醇，能够增大用于油田增产的生物酶溶液与原油界面的张力。
[0071]
在本实施例中，在旋转真空过滤机对混合液过滤前加入硅藻土，能在过滤介质上形成多孔、疏松的滤饼，使得过滤后得到澄明溶液。
[0072]
在本实施例中，在离心前氢氧化铝凝胶，能除去悬浮的胶体物质，进一步提升离心的效果。
[0073]
综上所述，选用实施例4为最佳实施例。
[0074]
有必要说明的是，为了便于后期的包装和运输，还可以将生物酶溶液进行浓缩结晶、干燥、粉碎为粉状以及包装的工艺，本实施例不做具体限定。
[0075]
以上示意性的对本发明及其实施方式进行了描述，该描述没有限制性。所以，如果本领域的普通技术人员受其启示，在不脱离本发明创造宗旨的情况下，不经创造性的设计出与该技术方案相似的结构方式及实施例，均应属于本发明的保护范围。
[0076]
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

技术特征：
1.一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述提取工艺包括以下步骤：s1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡0.5-2min后冷藏备用；s2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入助磨剂进行湿法研磨，得到研磨液；s3：向研磨液中加入磺酸盐和裂解液后混合均匀得到混合液，所述研磨液、磺酸盐和裂解液的比例为1：0.2-0.7：0.2-0.7；s4：在混合液中加入助滤剂后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液，所述混合液与助滤剂的比例为1：0.003-0.008；s5：在过滤液中加入吸附凝胶后，通过离心机离心，取上清液，其中离心时间为3-8min，离心次数为两次以上，所述过滤液与吸附凝胶的比例为1：0.01-0.03；s6：将上清液放到液氮中浸泡0.5min后放到室温内静置11-12min解冻；s7：在解冻后的上清液中加入乙醇，通过离心机离心8-12min，吸取上清液且无触碰到中间层或下层沉淀，得到用于油田增产的生物酶溶液。2.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述助磨剂包括无水乙醇和超纯水。3.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述磺酸盐为重烷基苯磺酸盐、石油磺酸盐或木质素磺酸盐。4.根据权利要求3所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述磺酸盐为重烷基苯磺酸盐。5.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述裂解液包括苯酚和甲苯。6.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，在所述步骤s3中，通过1ml移液器将混合液中的细胞吹散开。7.根据权利要求6所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，在所述步骤s3中，通过水平振荡器将混合液混匀。8.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述研磨液、磺酸盐和裂解液的比例为1：0.5：0.5。9.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述步骤s4中的助滤剂为硅藻土或纸浆。10.根据权利要求1所述的一种用于油田增产的生物酶提取工艺，其特征在于，所述凝胶为氢氧化铝凝胶或磷酸钙凝胶。

技术总结
本发明涉及生物酶相关技术领域，更具体地说，本发明提供了一种用于油田增产的生物酶提取工艺，所述提取工艺包括以下步骤：S1：将植物组织洗净晾干后放入自封袋中，然后将装有植物组织的自封袋放到液氮里浸泡0.5-2min后冷藏备用；S2：将冷藏后的植物组织投入到低温组织研磨机中，然后加入助磨剂进行湿法研磨，得到研磨液；S3：向研磨液中加入磺酸盐和裂解液后混合均匀得到混合液，所述研磨液、磺酸盐和裂解液的比例为1：0.2-0.7：0.2-0.7；S4：在混合液中加入助滤剂后，通过旋转真空过滤机进行过滤，得到过滤液；在研磨时采用低温研磨减少温度和细菌酶活性的影响，保证酶的活性。保证酶的活性。


技术研发人员：王永忠
受保护的技术使用者：天津圣君宇生物技术集团有限公司
技术研发日：2023.05.31
技术公布日：2023/8/23