一种生防制剂及其在草地贪夜蛾防治中的应用

1.本发明属于农作物病虫害防治技术领域，尤其涉及一种生防制剂及其在草地贪夜蛾防治中的应用。


背景技术：

2.草地贪夜蛾(学名：spodoptera frugiperda)是鳞翅目夜蛾科灰翅夜蛾属的一种昆虫。草地贪夜蛾具有很强的扩散能力，2016年从美洲入侵非洲，2018年7月，草地贪夜蛾首次传入亚洲地区，2018年8月，联合国粮农组织将该害虫列为世界十大植物害虫。2018年12月，草地贪夜蛾首次入侵我国，不到一年的时间，就已经分布在我国粮食主产区的26个省、市(区)，已经发展成为我国农业的重要害虫，对我国的粮食安全造成重大威胁。草地贪夜蛾主要以幼虫为害，寄主范围高达76科353种，尤其可对玉米、水稻、大豆、高粱等农作物造成严重为害，同时也是甘蔗、烟草等经济作物上的重要害虫(montezano，2018)。目前对草地贪夜蛾的防治主要是化学防治，如单剂：甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、茚虫威、四氯虫酰胺、氯虫苯甲酰胺、高效氯氟氰菊酯、氟氯氰菊酯、甲氰菊酯、溴氰菊酯、乙酰甲胺磷、虱螨脲、虫螨腈、甘蓝夜蛾核型多角体病毒、苏云金杆菌、金龟子绿僵菌、球孢白僵菌、短稳杆菌、草地贪夜蛾性引诱剂。复配制剂：甲氨基阿维菌素苯甲酸盐茚虫威、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐氟铃脲、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐高效氯氟氰菊酯、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐虫螨腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐虱螨脲、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐虫酰肼、氯虫苯甲酰胺高效氯氟氰菊酯、除虫脲高效氯氟氰菊酯等。
3.化学防治方法虽快速高效，但是对环境和粮食安全不利，因此亟需一种对环境友好且效果显著的草地贪夜蛾防治方法。


技术实现要素：

4.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种生防制剂及其在草地贪夜蛾防治中的应用。
5.为解决上述问题，本发明采取了如下技术方案：
6.本发明的一个技术方案在于提供一种生防制剂，包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；所述昆虫病原线虫为斯氏线虫steinernema carpocapsae；所述乙酸叶醇酯在所述生防制剂中的含量为1～1.3％。
7.作为进一步的优选，所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨3～6份、牛肉膏4～5.5份、琼脂粉3～4.5份、小麦粉3～4.5份、玉米油3.2～4.7份、玉米叶片醇提物10～12份以及蛋黄粉5.2～5.7份。
8.作为进一步的优选，所述昆虫病原线虫在所述生防制剂中的含量为5700000ijs～5900000ijs。
9.作为进一步的优选，所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为5～10∶1。
10.作为更进一步的优选，所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨5份、牛肉膏5.5
份、琼脂粉3份、小麦粉4份、玉米油4.5份、玉米叶片醇提物10份以及蛋黄粉5.5份。
11.作为更进一步的优选所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为9∶1。
12.本发明的第二方面的技术方案在于提供一种生防制剂在防治作物草地贪夜蛾方面的用途。
13.进一步的优选为，所述作物为玉米。
14.进一步的优选为，防治时间为玉米6-8叶龄期。
15.进一步的优选为，所述生防制剂的施用量以保证所述昆虫病原线虫的用量为1.5
×
109ijs/亩～1.8
×
109ijs/亩为准，使用前用水稀释10倍。
16.昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode，epn)具有“天敌昆虫”与“病原微生物”双重特点。对人畜和环境安全友好，易于大量培养，而且在环境中可循环使用，对于作物虫害防治具有持久性。昆虫病原线虫通过害虫的口腔、体壁或肛门进入害虫体内，进入害虫体内后昆虫病原线虫释放共生菌，共生细菌分泌毒素破坏昆虫生理防御机能，使昆虫患败血症在24-48h内死亡。同时昆虫病原线虫和共生细菌共同消耗害虫体内的营养物质进行自身繁殖，直至害虫的营养物质消耗完毕，感染期幼虫爬出虫体，继续寻找寄主昆虫，进而形成昆虫病原线虫的可持续性防治。
17.乙酸叶醇酯能够引起交配雌蛾的嗅觉反应，使处于交配期的雌蛾被吸引至生防制剂的位置，使其在取食生防制剂中的营养物质的同时将昆虫病原线虫引入体内，从而使昆虫病原线虫发挥防治作用。
18.草地贪夜蛾幼虫中栓锥感器和侧栓锥感器内均存在于对蔗糖敏感的味觉受体神经元，因此蔗糖可以作为草地贪夜蛾，尤其是其幼虫的取食激食素。
19.本发明具有如下有益效果：
20.本发明以昆虫病原线虫防治草地贪夜蛾，在蔗糖和乙酸叶醇酯的双重作用下主要诱杀草地贪夜蛾幼虫和交配期的雌虫，从根源上避免了草地贪夜蛾的大量繁殖。营养助剂中包含淀粉、植物油以及蛋白质，植物油选用玉米油，加上玉米叶片醇提物，能够使营养物质具备玉米叶片的味道，使草地贪夜蛾在死亡之前能够尽可能多的食用营养物质而避免取食玉米。
附图说明
21.构成本技术的一部分的附图用来提供对本技术的进一步理解，本技术的示意性实施例及其说明用于解释本技术，并不构成对本技术的不当限定。在附图中：
22.附图1为本发明各实施例对草地贪夜蛾的防效图。
具体实施方式
23.现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
24.应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括
或排除在范围内。
25.除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
26.在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本技术说明书和实施例仅是示例性的。
27.关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
28.本发明中所述的“室温”如无特别说明，均按25
±
2℃计。
29.本发明的公开了一种生防制剂，包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；所述昆虫病原线虫为斯氏线虫steinernema carpocapsae；所述乙酸叶醇酯在所述生防制剂中的含量为1～1.3％。
30.营养助剂的作用是为了使草地贪夜蛾取食过程中同时将昆虫病原线虫摄入体内，此外还可以供昆虫病原线虫摄取营养。因此一方面要求口感良好，另一方面要求营养物质充足。本发明营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨3～6份、牛肉膏4～5.5份、琼脂粉3～4.5份、小麦粉3～4.5份、玉米油3.2～4.7份、玉米叶片醇提物10～12份以及蛋黄粉5.2～5.7份。原料与配比是本发明通过实验筛选出来的，在该范围内均能够满足以上要求。作为典型但非限制的选择，本发明实施例中所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨5份、牛肉膏5.5份、琼脂粉3份、小麦粉4份、玉米油4.5份、玉米叶片醇提物10份以及蛋黄粉5.5份。
31.在一些优选实施例中，所述昆虫病原线虫在所述生防制剂中的含量为5700000ijs～5900000ijs。
32.在一些优选实施例中，所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为5～10∶1。更优选的实施例中为5∶1、7∶1、9∶1以及10∶1。
33.更进一步的优选实施例中所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为9∶1。
34.本发明还提供了一种生防制剂在防治作物草地贪夜蛾方面的用途。作物可以为玉米和水稻。
35.进一步的优选实施例中，所述作物为玉米。
36.进一步的优选实施例中，该生物制剂防治草地贪夜蛾的防治时间为玉米6-8叶龄期。
37.进一步的优选实施例中，所述生防制剂的施用量以保证所述昆虫病原线虫的用量为1.5
×
109ijs/亩～1.8
×
109ijs/亩为准，使用前用水稀释10倍。
38.以下实施例中所述玉米叶片醇提物为新鲜绿色玉米叶片粉碎后经乙醇回流提取、浓缩后得到产物，该方法为常规方法，在此不做赘述。
39.以下实施例中所用到的原料均为商购途径获得。其中，乙酸叶醇酯购自aladdin；昆虫病原线虫斯氏线虫steinernema carpocapsae购自广东省昆虫研究所，使用前在冰箱中保存。其余原料均通过普通网购途径获得。
40.实施例1
41.一种生防制剂，包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；昆虫病原线虫为斯氏线虫steinernema carpocapsae；乙酸叶醇酯在生防制剂中的含量为1.2％。
42.营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨5份、牛肉膏5.5份、琼脂粉3份、小麦粉4份、玉米油4.5份、玉米叶片醇提物10份以及蛋黄粉5.5份。
43.昆虫病原线虫在生防制剂中的含量为5700000ijs～5900000ijs。
44.蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为9∶1。
45.制备方法为将其简单混合均匀即可。需要说明的是，为防止离析，该生防制剂需要现配现用。
46.实施例2～4
47.以蔗糖和乙酸叶醇酯的质量比为单一变量设置实施例2～4，其中实施例2～4的比例依次为5∶1、7∶1以及10∶1，其余均同实施例1。
48.实施例5～7
49.与实施例1的区别仅仅在于，乙酸叶醇酯在所述生防制剂中的含量为1％(实施例5)、1.1％(实施例6)和1.3％(实施例7)。
50.实施例8
51.一种生防制剂，包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；昆虫病原线虫为斯氏线虫steinernema carpocapsae；乙酸叶醇酯在生防制剂中的含量为1.2％。
52.营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨3份、牛肉膏5份、琼脂粉4份、小麦粉4.5份、玉米油3.2份、玉米叶片醇提物12份以及蛋黄粉5.2份。
53.昆虫病原线虫在生防制剂中的含量为5700000ijs～5900000ijs。
54.蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为9∶1。
55.制备方法为将其简单混合均匀即可。
56.对比例1
57.与实施例1的区别仅仅在于，未添加蔗糖。
58.对比例2
59.与实施例1的区别仅在于，未添加乙酸叶醇酯。
60.对比例3
61.与实施例1的区别仅在于，未添加蔗糖和乙酸叶醇酯。
62.对比例4
63.与实施例1的区别仅在于，将玉米油等量替换为大豆油，同时省略玉米叶醇提物的使用。
64.应用例
65.1)防治时机：选择在玉米6～8叶龄期，施用时间为下午5点。
66.2)施用方法：将生防制剂喷施于玉米苗芯中。
67.3)施用量：以保证所述昆虫病原线虫的用量为1.8
×
109ijs/亩为准，使用前用水稀释10倍。
68.4)调查时间和次数：于施药前调查虫口基数，施药后1、3和7天调查残留活虫数；药后7天调查保叶效果。
69.5)调查方法
70.幼虫防效：各处理小区采用“w”型取样调查5点，每点调查20株，统计活幼虫数。
71.保叶效果：调查采用5点取样法，每个试验小区调查20株玉米。于用药后第7天调查玉米新叶受害程度并进行分级。
72.0级：新叶未受害
73.1级：新叶上有较小为害斑
74.3级：为害斑点连成片，并出现透明膜
75.5级：为害已导致新叶出现缺口
76.7级：为害导致新叶出现较大、较多的缺口
77.9级：为害已造成新叶断裂
78.6)药效计算方法：
[0079][0080]
式中：pt0：药剂处理区药前；ck0：空白对照区药前。
[0081]
pt1：药剂处理区药后；ck1：空白对照区药后。
[0082][0083][0084]
7)结果与分析
[0085]
表1杀虫剂防治草地贪夜蛾保叶效果
[0086]
药剂处理叶片受害指数保叶效果(％)处理组16.2190.34处理组27.1588.88处理组39.2285.65处理组47.8387.82处理组57.1588.88处理组69.1585.76处理组77.2288.77处理组88.1587.32处理组919.3669.88处理组1022.2265.43处理组1133.1548.42处理组1216.8373.81空白对照ck64.27/
[0087]
注：本表中处理组1-8分别使用的是实施例1-8的药剂，处理组9-12分别施用的是对照例1-4的药剂；空白对照组施用的是清水。采用三次重复后计算平均值。/表示未统计。
[0088]
表2杀虫剂防治草地贪夜蛾田间药效试验结果
[0089][0090]
注：本表中处理组1-8分别使用的是实施例1-8的药剂，处理组9-12分别施用的是对照例1-4的药剂；空白对照组施用的是清水。采用三次重复后计算平均值。/表示未统计。
[0091]
由表1-2和图1可以看出本发明实施例1-8制备的生防药剂对于草地贪夜蛾的防治具有很好的效果。
[0092]
以上，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。

技术特征：
1.一种生防制剂，其特征在于，包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；所述昆虫病原线虫为斯氏线虫steinernema carpocapsae；所述乙酸叶醇酯在所述生防制剂中的含量为1～1.3％。2.根据权利要求1所述的一种生防制剂，其特征在于，所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨3～6份、牛肉膏4～5.5份、琼脂粉3～4.5份、小麦粉3～4.5份、玉米油3.2～4.7份、玉米叶片醇提物10～12份以及蛋黄粉5.2～5.7份。3.根据权利要求1所述的一种生防制剂，其特征在于，所述昆虫病原线虫在所述生防制剂中的含量为5700000ijs～5900000ijs。4.根据权利要求1所述的一种生防制剂，其特征在于，所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为5～10∶1。5.根据权利要求2所述的一种生防制剂，其特征在于，所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨5份、牛肉膏5.5份、琼脂粉3份、小麦粉4份、玉米油4.5份、玉米叶片醇提物10份以及蛋黄粉5.5份。6.根据权利要求4所述的一种生防制剂，其特征在于，所述蔗糖与乙酸叶醇酯的质量比为9∶1。7.如权利要求1-6任一项所述的生防制剂在防治作物草地贪夜蛾方面的用途。8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述作物为玉米。9.根据权利要求8所述的用途，其特征在于，防治时间为玉米6-8叶龄期。10.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述生防制剂的施用量以保证所述昆虫病原线虫的用量为1.5
×
109ijs/亩～1.8
×
109ijs/亩为准，使用前用水稀释10倍。

技术总结
本发明公开了一种生防制剂及其在草地贪夜蛾防治中的应用，生防制剂包括昆虫病原线虫、蔗糖、乙酸叶醇酯和营养助剂；所述昆虫病原线虫为斯氏线虫Steinernema carpocapsae；所述乙酸叶醇酯在所述生防制剂中的含量为1～1.3％；所述营养助剂以质量份数计包括：蛋白胨3～6份、牛肉膏4～5.5份、琼脂粉3～4.5份、小麦粉3～4.5份、玉米油3.2～4.7份、玉米叶片醇提物10～12份以及蛋黄粉5.2～5.7份；本发明以昆虫病原线虫防治草地贪夜蛾，在蔗糖和乙酸叶醇酯的双重作用下主要诱杀草地贪夜蛾幼虫和交配期的雌虫，从根源上避免了草地贪夜蛾的大量繁殖，对草地贪夜蛾防效良好。对草地贪夜蛾防效良好。对草地贪夜蛾防效良好。


技术研发人员：梁玉勇 漆学伟 洪霖 程森弟 程正新 王旭明 贾志新 万鹏 钟秋瓒 谢金招 孙强
受保护的技术使用者：江西省农业科学院植物保护研究所
技术研发日：2023.06.14
技术公布日：2023/9/9