一种修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料及其制备方法和应用。


背景技术：

2.伤口敷料是用于伤口护理的重要医药产品，具有覆盖并保护伤口、避免感染以及促进伤口愈合的作用。传统的敷料包括天然或合成的细带、药棉、纱布等，它们的主要功能是吸收伤口分泌物，防止有害细菌进入伤口引起感染，目前，这种传统敷料已经不能满足现在大量且多样化的伤口需求，临床上需要更有效率的伤口复原医材及更符合多样化疾病的伤口敷料。随着湿性愈合理论被广泛认可，透明膜敷料、水胶体敷料、泡沫敷料、水凝胶敷料、藻酸盐敷料、亲水性纤维敷料、高渗盐敷料等现代新型敷料发展迅速。其中，水凝胶敷料作为含有大量水分的三维网络聚合物，能够保持伤口湿润并吸收多余伤口渗液，包载药物或生物活性因子，具有良好生物相容性和创面修复能力，是一种极具潜力的创面修复材料，可以为患者缩短伤口愈合时间，减少换药次数，减轻换药痛苦。
3.壳聚糖是自然界中仅次于纤维素的第二大生物大分子，具有止血、抗菌、镇痛等特性，生物相容性良好并且生物可降解，在创伤愈合过程中发挥重要作用，表现出适应伤口愈合全过程的功能特性。以壳聚糖为主要原料可以制成各种形态的敷料，如薄膜敷料、海绵敷料、纤维织物敷料、水凝胶敷料以及多层复合敷料等，其中，壳聚糖凝胶敷料具有凝胶敷料的优良性能，并且能够发挥壳聚糖的医用功效，被认为是最有前景的一类创伤敷料。专利cn102727925a公开了一种酰化壳聚糖伤口敷料，所述伤口敷料具有高吸湿性和高湿强度，吸水后溶胀形成透明凝胶，具有很好的止血和抗菌功能。专利cn105833339b公开了一种医用功能性壳聚糖敷料及其制备方法，该敷料可消炎抑菌，吸附炎性组织渗液，减少疤痕生成。
4.然而，壳聚糖凝胶敷料在应用和研究过程中仍然存在一些问题。首先，大多数壳聚糖凝胶由于壳聚糖原料水溶性不好，壳聚糖抑菌效果不能很好发挥，在溶解壳聚糖时会引入一些无机酸或有机酸，对伤口或皮肤产生刺激；其次，壳聚糖凝胶成型时间长，需要添加小分子交联剂促进凝胶形成，容易导致有毒有害物质在人体内的残留；与此同时，壳聚糖凝胶敷料易成膜，在实际使用过程中，膜的剥离会对皮肤或者伤口创面造成二次损伤。因此，目前的壳聚糖凝胶敷料远没有达到实际应用的需求。


技术实现要素：

5.为了解决现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种用于修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料及其制备方法和应用，所述水凝胶敷料原料在使用前为可流动的溶胶状态，能够适用于复杂的伤口创面，使用时即在人体皮肤表面或创面处形成凝胶，为伤口提供稳定湿性愈合环境；并且，该凝胶敷料可在治疗过程中被皮肤组织完全吸收，不成膜，无需从伤口处剥离，不会因拉扯造成皮肤或伤口的机械损伤。
6.为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
7.一种用于修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料，以重量分数100％计，由以下组分制成：0.01～0.2％羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、0.1～1％透明质酸、8～12％甘油、2～6％丙二醇，余量为纯化水。
8.优选的，所述透明质酸的粘均分子量为1
×
106～3
×
106da。
9.优选的，所述羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖的制备方法包括如下步骤：
10.(1)将蘑菇壳聚糖粉末分散于去离子水中，然后加入丙烯酸，搅拌均匀后，升温并搅拌反应，反应结束后将产物冷却至室温，将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入丙酮中沉淀出固体，抽滤后透析，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
11.(2)将羧乙基蘑菇壳聚糖溶于碱溶液中，一次搅拌得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于异丙醇水溶液中，二次搅拌，然后加入1,2-环氧丁烷，搅拌反应，反应结束后用盐酸中和反应液，将所得产物透析、冷冻、干燥，得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖。
12.优选的，步骤(1)中，蘑菇壳聚糖的粘度为100～300cps，蘑菇壳聚糖溶液的配制温度为35～45℃；升温条件为1h内升温至50～70℃，搅拌反应时间为24～48h，透析时间为48～72h。
13.优选的，步骤(1)中，蘑菇壳聚糖与丙烯酸的重量比为4：20～40。
14.优选的，步骤(2)中，所述碱溶液为40～60％(w/w)koh溶液或40～60％(w/w)naoh溶液。
15.优选的，步骤(2)中，一次搅拌时间为12～24h；所述异丙醇水溶液中异丙醇、水的体积比为40～60：100(v/v)；二次搅拌时间为12～24h，搅拌反应条件为50～70℃下反应18～30h。
16.优选的，步骤(2)中，羧乙基蘑菇壳聚糖与1,2-环氧丁烷的重量体积比为1g：10～30ml。
17.本发明还要求保护一种所述水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
18.按重量百分比称取原料，配制成溶液，搅拌5～9h，静置12～24h脱泡得到前驱液，将前驱液在120～130℃下进行湿热灭菌，得到所述水凝胶敷料原料。
19.本发明还要求保护一种所述水凝胶敷料原料在修复皮肤、药物控释中的应用。
20.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
21.1)本发明提供的一种水凝胶敷料原料，保水性强，具有温度敏感性，涂敷于人体皮肤上即可由溶胶转变为凝胶，能够为伤口创造并维持一个湿润环境，且保留了原料的优异性质，具有抗菌消炎、止血镇痛、促进细胞生长、加速伤口愈合、抑制瘢痕增生的作用；本发明所选择的主要原料均为天然高分子，具有良好的生物相容性和生物可降解性，降解产物无毒；本发明的整个制备过程无需加入任何增塑剂、交联剂，也无需与其他载体复合支撑，安全性高，可广泛应用于药物载体、医学美容、创伤敷料及医疗卫生材料。
22.2)本发明以蘑菇壳聚糖和高分子量透明质酸为主要原料，蘑菇壳聚糖具有良好的生物相容性及安全性，同时还具有黏附性、抗菌性、止血及促进伤口愈合等优良性能，相比于传统的动物来源壳聚糖，其安全性更高，无免疫反应；高分子量透明质酸可调节细胞的黏附、增殖、分化、迁移、凋亡以及信号传导，促进血管生成，减轻炎症反应，加速伤口愈合。
23.3)本发明提供了一种温敏性羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖的制备方法，通过两步反应，将羧乙基和羟丁基接枝到壳聚糖上，可提高壳聚糖的水溶性并赋予其温敏性；该水凝胶敷料原料的温敏性是基于分子内/分子间氢键的变化和由羟丁基产生的疏水相互作用，随着温度升高到较低的临界溶液温度，分子间氢键相互作用的减少导致脱水链和疏水链相互关联，形成固体凝胶，羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖含量的增加使得体系中羟丁基含量提升，温度敏感性升高，涂敷于人体皮肤上即可由溶胶转变为凝胶，为伤口提供稳定湿性愈合环境，并且能够有效覆盖复杂创面。此外，研究中发现，高分子量透明质酸的引入会干扰羟丁基的亲疏水相互作用，从而导致敷料的温度敏感性降低，因此透明质酸的百分含量优选为0.1～1％。
24.4)本发明提供的水凝胶敷料原料在使用过程中可被皮肤完全吸收，不成膜，无需从伤口处剥离，避免了剥离过程中对伤口或者皮肤的二次损伤。
附图说明
25.为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例示意图，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。
26.图1为实施例1在猪皮表面的涂覆情况。
27.图中，a、猪皮表面；b、实施例1制备所得敷料涂覆表面；c、猪皮截面；d、实施例1制备所得敷料涂覆截面。
具体实施方式
28.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚，以下结合实施例，对本发明作进一步的详细说明。当然，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不用于限定本发明。
29.如无特殊说明外，本发明中的化学试剂和材料均通过市场途径购买或通过市场途径购买的原料合成。
30.下面通过具体实施例，来对本发明作进一步的说明。
31.实施例1
32.一种水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
33.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至60℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
34.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比50：100(v/v)混合溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应24h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
35.(3)称取0.01g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、1g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述水凝胶敷料原料，置于4℃环境下保存。
36.实施例2
37.一种水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
38.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至60℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
39.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比40：100(v/v)混合溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应18h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
40.(3)称取0.1g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、1g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述水凝胶敷料原料，置于4℃环境下保存。
41.实施例3
42.一种水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
43.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至60℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
44.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比50：100(v/v)混合溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应24h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
45.(3)称取0.2g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、1g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述水凝胶敷料原料，置于4℃环境下保存。
46.实施例4
47.一种水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
48.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至70℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物
抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
49.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比50：100(v/v)混合溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应24h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
50.(3)称取0.1g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、0.1g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述水凝胶敷料原料，置于4℃环境下保存。
51.实施例5
52.一种水凝胶敷料原料的制备方法，包括如下步骤：
53.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至60℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
54.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比50：100(v/v)混合溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应24h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
55.(3)称取0.1g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、0.5g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述水凝胶敷料原料，置于4℃环境下保存。
56.对比例1
57.一种敷料的制备方法，包括如下步骤：
58.称取0.01g去离子水、1g透明质酸(粘均分子量为1.5
×
106da)、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述敷料，置于4℃环境下保存。
59.对比例2
60.一种敷料的制备方法，包括如下步骤：
61.(1)在40℃下，将4g蘑菇壳聚糖粉末(200cps)分散于250ml去离子水中，然后加入20g丙烯酸，搅拌均匀后，1h内升温至60℃，搅拌反应48h，反应结束后将产物冷却至室温，用5mol/lnaoh将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入500ml丙酮中沉淀出固体，将固体物抽滤后透析48h，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；
62.(2)将1g羧乙基蘑菇壳聚糖溶于50％(w/w)koh溶液中，一次搅拌12h得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于20ml异丙醇与水体积比50：100(v/v)混合
溶液中，二次搅拌12h，然后加入20ml 1,2-环氧丁烷，60℃下搅拌反应24h，反应结束后用0.1mol/l盐酸中和反应液，将所得产物经去离子水透析，冷冻、干燥后得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，其羟丁基取代度ds＝0.8；
63.(3)称取0.01g羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、1g去离子水、10g甘油、4g丙二醇，加入纯化水配制成100g溶液，搅拌7h，静置12h脱泡得到前驱液，将前驱液置于离心管中，用牛皮纸包裹离心管口，将离心管置于高温灭菌锅中，在126℃下进行湿热灭菌15min，得到所述敷料，置于4℃环境下保存。
64.针对实施例1～5、对比例1～2制备所得敷料进行性能测试，包括以下几个方面：
65.(1)凝胶温度测试：通过haake mars流变仪监测和获得溶胶状敷料储能模量(g’)和损耗模量(g”)随温度的变化曲线，其中取g’＝g”时的温度，即为敷料的凝胶温度；
66.凝胶时间测试：保持测试温度37℃，通过haake mars流变仪监测和获得溶胶状敷料储能模量(g’)和损耗模量(g”)随时间的变化曲线，其中取g’＝g”时的时间，即为37℃下敷料的凝胶时间；
67.设置频率f＝1hz，应变γ＝1％。
68.(2)失水率测试：将5g样品置于14mm培养皿中(不盖盖子)，保持恒温恒湿(37℃，湿度10％)，分别在8h、12h、24h称取样品的质量(m2)，计算其失水率，计算公式为：失水率＝(5-m2)/5
×
100％。
69.(3)渗透性测试：取25cm2新鲜猪皮，完全刮去皮下油脂，置于pbs7.4溶液中浸泡30min，用滤纸擦干表面水分，将0.1g胭脂红粉末溶于5g溶胶状敷料中，将染色敷料涂抹于猪皮表面，37℃静置5min，然后利用3d显微镜拍摄其表面和截面，观察敷料在猪皮的渗透情况。
70.成膜测试：按上述实验步骤，将凝胶涂覆于猪皮表面，37℃静置约1h，观察凝胶成膜情况。
71.(4)体外细胞毒性测试：细胞毒性测试按照iso10993-5标准测试方法进行试验。
72.(5)敷料愈合效果动物实验：用脱毛膏脱去小鼠背部面积约3cm
×
3cm的毛发后，使用4％水合氯醛试剂对小鼠进行腹腔麻醉注射。麻醉成功后，用半径为0.8cm
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0.8cm的圆形皮肤取样器于小鼠背部割取伤口深至筋膜的一块皮肤，伤口面积约为0.5cm2，所有创伤小鼠均单独饲养。所有创伤小鼠于制备皮肤缺损创面后立即实行敷料护理，每天均匀涂抹等量对应的敷料两次，早晚各一次，连续涂抹14天。
73.小鼠创伤收缩率评价：在术后第3、7、14天对每组小鼠创伤部位进行标准化摄影，记录每只小鼠创口的创面，创伤面积收缩率＝治疗前后创伤面积差/治疗前创伤面积
×
100％。
74.如表1所示，在一定的测试条件下，随着羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖重量百分比的增加，敷料的温度敏感性升高；在37℃恒温下，通过时间扫描测定了各敷料的凝胶时间，其凝胶时间随着羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖重量百分比的增加而缩短，随着ha重量百分比的增加而延长。并且所有敷料无细胞毒性，能够满足实际应用的需求。
75.对比例1中不含温敏性羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖，温度变化不会导致凝胶的形成，该敷料与人体接触后仍为流动溶胶。对比例2中不含透明质酸，其凝胶温度较高，其在37℃时也不能凝胶，尽管其无细胞毒性，但仍然不能有效阻隔外界颗粒性异物和细菌的侵入。
76.表1敷料凝胶性质和细胞毒性
[0077][0078][0079]
作为用于修复创面的敷料，暴露在空气中的水分蒸发损失是理想敷料的一个重大挑战，同时，敷料的渗透性以及成膜情况也是评价其使用效果的两个重要方面，良好的渗透性有利于敷料的快速吸收，不会导致膜的形成，无需从伤口处剥离，不会因拉扯导致伤口机械损伤以及炎症的加重。表2显示了各水凝胶敷料原料失水率与时间的关系以及敷料的成膜情况和渗透性。从表2中可知，随着时间的增加，失水率在逐渐升高，24h后，实施例1的失水率为16.5
±
1.0％，具有较好的保湿效果。实施例2和实施例3在24h后的失水率分别为10.6
±
0.3％和8.4
±
0.4％，说明随着羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖含量的增加，凝胶敷料的网络结构更致密，能有效防止水分的流失，有利于为皮肤提供一个湿润的环境。同时，随着透明质酸含量的增加，敷料失水率降低，透明质酸是广泛存在于人和动物关节软骨周围的天然多糖，其分子链中含有大量的羧基和羟基，容易在水溶液中形成分子内和分子间的氢键，具有强大的保水作用，有利于创面愈合。
[0080]
表2敷料失水率、成膜情况、渗透性
[0081][0082][0083]
为了评估水凝胶敷料原料对大鼠创面的愈合效果，在大鼠背部建立了0.8cm
×
0.8cm大小的全皮层切除伤口，利用实施例1～5和对比例1～2制备所得敷料进行大鼠创面愈合实验，第3、7、14天创口收缩率评价见表3。
[0084]
表3敷料创口收缩率
[0085][0086]
从表3中可以看出，随着时间的推移，创口收缩率均呈现上升趋势。其中，实施例1和实施例2制备所得敷料的促进伤口愈合效果较好，远高于对比例1～2，这是因为壳聚糖作为自然界中唯一带正电的碱性多糖，具有良好的生物相容性，同时还具有黏附性、抗菌性、止血及促进伤口愈合等优良性能，其中，蘑菇壳聚糖具有更高的安全性，不会引起高度敏感人群的过敏反应，羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖是壳聚糖改性后的产物，它既保留了壳聚糖的性能优点，又能在改善其水溶性的同时响应体温实现溶胶到凝胶的转变，为及时制备符合伤口形状的壳聚糖水凝胶敷料提供了基础。透明质酸作为一种天然高分子，具有独特的生理功能，除了基础的维持细胞含水量以及细胞间质的完整性之外，还能与特定的细胞受体(如cd44、hare、icam-1和rhamm等)结合，以调节细胞的黏附、增殖、分化、迁移、凋亡以及信号传导，可以促进血管生成，加速伤口愈合。基于以上原料的优异性质，该水凝胶敷料原料能够在伤口表面响应体温，实现溶胶到凝胶的转变，有利于复杂创面的完全覆盖，在伤口表面形成的凝胶可以为创面提供一种湿润环境，既能防止有害物质的入侵又能促进伤口愈合，与此同时，不会在伤口表面成膜，防止了去除时导致的二次损伤。实施例3伤后14d的创口收缩率较低，可能是由于其胶凝温度低，凝胶时间短，难以覆盖伤口深处。对比例1和对比例2伤后14d的创口收缩率较低，这可能是因为有效原料的减少以及难以为伤口提供稳定的阻隔屏障导致。
[0087]
图1为实施例1制备所得敷料在猪皮表面的涂覆情况显示，如图所示，猪皮表面呈现规律的毛孔排列，用实施例1制备所得敷料涂覆后，在猪皮表面形成光泽透明的薄层凝胶。利用胭脂红粉末对实施例1样品进行染色，拍摄其截面涂覆情况，从截面图片可以看出，样品在猪皮表面形成红色薄层，同时，红色染料逐渐渗入真皮层，表明水凝胶敷料原料具有良好的渗透性。所有实施例表现出优良渗透性，且不会在猪皮表面成膜，避免了移除时引起的机械损伤。
[0088]
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，
任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。

技术特征：
1.一种用于修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料，其特征在于，以重量分数100％计，由以下组分制成：0.01～0.2％羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、0.1～1％透明质酸、8～12％甘油、2～6％丙二醇，余量为纯化水。2.根据权利要求1所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，所述透明质酸的粘均分子量为1
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106da。3.根据权利要求1所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，所述羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖的制备方法包括如下步骤：(1)将蘑菇壳聚糖粉末分散于去离子水中，然后加入丙烯酸，搅拌均匀后，升温并搅拌反应，反应结束后将产物冷却至室温，将溶液ph调节至碱性，然后将反应溶液倒入丙酮中沉淀出固体，抽滤后透析，冷冻、干燥，得到羧乙基蘑菇壳聚糖；(2)将羧乙基蘑菇壳聚糖溶于碱溶液中，一次搅拌得到碱化羧乙基蘑菇壳聚糖，将碱化羧乙基蘑菇壳聚糖分散于异丙醇水溶液中，二次搅拌，然后加入1,2-环氧丁烷，搅拌反应，反应结束后用盐酸中和反应液，将所得产物透析、冷冻、干燥，得到羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖。4.根据权利要求3所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，步骤(1)中，蘑菇壳聚糖的粘度为100～300cps，蘑菇壳聚糖溶液的配制温度为35～45℃；升温条件为1h内升温至50～70℃，搅拌反应时间为24～48h，透析时间为48～72h。5.根据权利要求3所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，步骤(1)中，蘑菇壳聚糖与丙烯酸的重量比为4：20～40。6.根据权利要求3所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，步骤(2)中，所述碱溶液为40～60％(w/w)koh溶液或40～60％(w/w)naoh溶液。7.根据权利要求3所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，步骤(2)中，一次搅拌时间为12～24h；所述异丙醇水溶液中异丙醇、水的体积比为40～60：100(v/v)；二次搅拌时间为12～24h，搅拌反应条件为50～70℃下反应18～30h。8.根据权利要求3所述的水凝胶敷料原料，其特征在于，步骤(2)中，羧乙基蘑菇壳聚糖与1,2-环氧丁烷的重量体积比为1g：10～30ml。9.一种如权利要求1～8任一项所述水凝胶敷料原料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：按重量百分比称取原料，配制成溶液，搅拌5～9h，静置12～24h脱泡得到前驱液，将前驱液在120～130℃下进行湿热灭菌，得到所述水凝胶敷料原料。10.一种如权利要求1～8任一项所述水凝胶敷料原料在修复皮肤、药物控释中的应用。

技术总结
本发明公开了一种用于修复皮肤黏膜的水凝胶敷料原料及其制备方法和应用，以重量分数100％计，由以下组分制成：0.01～0.2％羟丁基羧乙基蘑菇壳聚糖、0.1～1％透明质酸、8～12％甘油、2～6％丙二醇，余量为纯化水；制备方法包括如下步骤：按重量百分比称取原料，配制成溶液，搅拌5～9h，静置12～24h脱泡得到前驱液，将前驱液在120～130℃下进行湿热灭菌，得到所述水凝胶敷料；所述水凝胶敷料保水性强，且具有温度敏感性，涂敷于皮肤上即可由溶胶转变为凝胶，为伤口创造并维持一个湿润环境，且保留了原料的优异性质，具有抗菌消炎、止血镇痛、促进细胞生长、加速伤口愈合、抑制瘢痕增生的作用。抑制瘢痕增生的作用。抑制瘢痕增生的作用。


技术研发人员：周应山 张梦帆 游国华
受保护的技术使用者：湖南沃德利派医疗科技有限公司
技术研发日：2023.07.11
技术公布日：2023/10/7