一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法与流程

1.本发明涉及食品检测技术领域，尤其涉及一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法。


背景技术：

2.目前，测定食品中氯酸盐和高氯酸盐的方法，主要是bjs201706中所采用的方法，在实践中发现，该方法不仅在提取过程中需要使用prime hlb固相萃取柱(3cc，150mm)，而且还需要采用梯度洗脱工艺，供试品溶液的用量高，测试时间长，在应用于工业大批量检测时，成本高昂，虽然也有相关技术，如专利cn107247105b中采用等度洗脱的方式，但其中仍然需要通过固相萃取对供试品溶液进行净化，测试步骤较为复杂，更为重要的是，前处理容器、有机试剂及固相萃取柱中都可能存在高氯酸盐污染，极易造成测定值比样品实际值高出20μg/kg的情况，从而影响样品的准确定量。
3.鉴于此，提出本发明。


技术实现要素：

4.本发明提供一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，用以解决现有技术中高氯酸盐前处理过程中容易带来污染，依赖于固相萃取净化提取液制备供试品溶液，从而导致测试方法存在的测试时间长、测试成本高、操作复杂和测量准确度等缺陷，通过样品前处理直接在样品小瓶中进行，采用资生堂pc hilic柱作为液相色谱-串联质谱中的色谱柱，则无需对提取液进行固相萃取净化，仅滤膜过滤即可得到供试品溶液，进行液相色谱-串联质谱分析，而且进样量低至1微升，用量小，采用等度洗脱工艺即可高效低成本地实现无污染、高准确度、高灵敏度和高精密度的定性和定量测试，在企业的生产管理过程中具有十分重要意义。
5.具体地，本发明提供一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，采用液相色谱-串联质谱进行分析，包括：
6.提取待测试样中的氯酸盐和高氯酸盐，并经滤膜过滤，即得供试品溶液；
7.取所述供试品溶液注入液相色谱的色谱柱中，并以体积比为20～30:80～70的乙腈和乙酸铵水溶液为流动相并在其流速为0.15～0.4ml/min时进行等度洗脱得流出液；其中，所述色谱柱为资生堂pc hilic柱；
8.取所述流出液直接进行质谱分析，得检测结果。
9.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，当所述待测样品为婴幼儿乳粉用的水时，所述供试品溶液是直接在所述水中加入混合同位素内标液，经再生纤维素膜过滤后即得；
10.和/或，当所述待测样品为液体乳、油脂、蛋白粉、乳糖、牧草、饲料和乳清粉时，所述供试品溶液是将待测样品、混合同位素内标液和溶剂混合，超声，取上清液经再生纤维素膜过滤，弃去前3d流出液，收集续滤液，定容即得；其中，液体乳对应的溶剂为乙腈；油脂对
应的溶剂为乙腈水溶液；蛋白粉、乳糖、牧草、饲料和乳清粉对应的溶剂为超纯水。
11.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述再生纤维素膜的规格为0.22μm。
12.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述混合同位素内标液中氯酸盐-18
o3和高氯酸盐-18
o4浓度分别为500～1500ng/ml和200～300ng/ml。
13.在试验中发现，常规玻璃容器中残留氯酸盐和高氯酸盐，会对试验的准确性产生干扰。根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述供试品溶液的提取在液相色谱所采用的玻璃进样小瓶中进行。
14.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，注入液相色谱的色谱柱中的所述供试品溶液的进样量为1微升以上。
15.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述质谱分析中采用的离子源为电喷雾离子源(esi源)，在负离子模式下扫描，并采用多反应监测(mrm)模式采集数据。
16.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述检测结果包括进行定性分析结果，所述定性分析如下：
17.配制若干份已知浓度的含有氯酸盐和高氯酸盐的混合溶液，将其作为混合标准工作溶液i；
18.将所述混合标准工作溶液i作为待测试样进行所述液相色谱-串联质谱分析，得到所述混合标准工作溶液i中氯酸盐和高氯酸盐的色谱保留时间以及相对离子丰度(以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子的相对离子丰度)；
19.按照下述条件判定待测样品中是否含有氯酸盐和高氯酸盐：
20.若待测试样中检出与混合标准工作溶液i中氯酸盐、高氯酸盐保留时间一致的色谱峰，且其定性离子与浓度相当的混合标准工作溶液i中相应的定性离子的相对离子丰度相比，偏差在规定范围内，则可以确定试样中检出相应的氯酸盐和高氯酸盐；所述规定范围为：当相对离子丰度＞50％时，允许的相对偏差为
±
20％，当相对离子丰度为20％～50％时，允许的相对偏差为
±
25％，当相对离子丰度为10％～20％时，允许的相对偏差为
±
30％，当相对离子丰度≤10％时，允许的相对偏差为
±
50％。
21.根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，所述检测结果包括定量分析结果，所述定量分析如下：
22.配制若干份含有氯酸盐和高氯酸盐且具有浓度梯度的混合溶液，将其作为混合标准工作溶液ii；其中，所有混合标准工作溶液ii中氯酸盐-18
o3和高氯酸盐-18
o4浓度分别为10.0ng/ml和2.5ng/ml；
23.将所述混合标准工作溶液ii作为待测试样进行所述液相色谱-串联质谱分析，得到以混合标准工作溶液ii的浓度为横坐标，以内标校正后的响应值为纵坐标的标准工作曲线；
24.由标准工作曲线计算出所述定量分析结果。
25.在实际应用中，可以将混合标准工作溶液i和混合标准工作溶液ii共用。
26.其中，含量的计算公式可以按照下式进行：
[0027][0028]
式中：
[0029]
x—待测试样中各待测组分的含量，包装饮用水单位为微克每升(μg/l)，其他样品单位为微克每千克(μg/kg)；
[0030]
c—从标准工作曲线中读出的供试品溶液中各待测组分的浓度，单位为纳克每毫升(ng/ml)；
[0031]
v—试样溶液最终定容体积，单位为毫升(ml)；
[0032]
f—试样制备过程中的稀释倍数；
[0033]
m—称样量，包装饮用水单位为毫升(ml)，其他样品单位为克(g)。
[0034]
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
[0035]
根据本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，包括：
[0036]
所述液相色谱的条件为：
[0037]
色谱柱：资生堂pc hilic柱；
[0038]
流动相：体积比为20～30:80～70的乙腈和15～25mmol/l乙酸铵水溶液；
[0039]
流速：0.15～0.4ml/min；
[0040]
柱温：15～45℃
[0041]
和/或，所述质谱条件为：
[0042]
离子源：电喷雾离子源；
[0043]
检测方式：多反应监测；
[0044]
扫描方式：负离子模式扫描；
[0045]
干燥气：氮气；
[0046]
干燥气温度：300～400℃；
[0047]
干燥气流速：5～15l/min。
[0048]
本发明提供的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，通过直接在玻璃进样小瓶中进行前处理，采用资生堂pc hilic柱作为液相色谱-串联质谱中的色谱柱，则无需对提取液进行固相萃取净化，仅滤膜过滤即可得到供试品溶液，进行液相色谱-串联质谱分析，而且进样量低至1微升，用量小，采用等度洗脱工艺即可高效低成本地实现低污染、高准确度、高灵敏度和高精密度的测试，在企业的生产管理过程中具有十分重要意义。
附图说明
[0049]
为了更清楚地说明本发明或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0050]
图1是本发明提供的氯酸盐和高氯酸盐标准品及其内标的多反应监测(mrm)图；其中，(a)：高氯酸盐；(b)：高氯酸盐内标；(c)：氯酸盐；(d)：氯酸盐内标；
[0051]
图2是本发明提供的由液体乳得到的供试品溶液及内标的多反应监测(mrm)图；其
中，(a)：高氯酸盐；(b)：高氯酸盐内标；(c)：氯酸盐；(d)：氯酸盐内标；
[0052]
图3为本发明提供的由混合标准工作溶液测得的高氯酸盐对应的标准工作曲线；
[0053]
图4为本发明提供的由混合标准工作溶液测得的氯酸盐对应的标准工作曲线。
具体实施方式
[0054]
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明中的附图，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
[0055]
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购买得到的常规产品。
[0056]
下面结合图1-图4描述本发明的一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法。
[0057]
本发明中采用的试剂和仪器如下：
[0058]
1、试剂和材料
[0059]
1.1、试剂
[0060]
1.1.1、乙腈(ch3cn)：色谱纯。
[0061]
1.1.2、乙酸铵(ch3coonh4)：液质联用级。
[0062]
1.1.3、超纯水(h2o)：电阻率为18.2mω
·
cm。
[0063]
注：以上试剂在使用前均应做本底测试。
[0064]
1.2、试剂配制
[0065]
1.2.1、20mmol/l乙酸铵溶液：称取1.54g乙酸铵(1.1.2)，用超纯水(1.1.3)溶解并稀释至500ml，混匀。
[0066]
1.2.2、50％乙腈水溶液：取250ml乙腈(1.1.1)，加入250ml超纯水(1.1.3)，混匀。
[0067]
1.3、标准品
[0068]
1.3.1、氯酸钠标准品：采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99％。中文名称、英文名称、cas登录号、分子式、相对分子量详见表1。
[0069]
1.3.2、高氯钠盐标准品：采用具有证书的标准品或高纯试剂，纯度＞99％。中文名称、英文名称、cas登录号、分子式、相对分子量详见表1。
[0070]
表1
[0071]
中文名称英文名称cas登录号分子式相对分子量氯酸钠sodiumchlorate7775-09-9naclo3106.44高氯酸钠sodiumperchlorate7601-89-0naclo4122.45
[0072]
1.4、同位素内标
[0073]
1.4.1、氯酸盐同位素内标：氯酸盐-18
o3(200μg/ml，以氯酸根-18
o3离子计，北京振祥提供，eurl-srm lot no:024，内含50μg/ml高氯酸盐-18
o4)，4℃保存。
[0074]
1.5、标准溶液的配制
[0075]
1.5.1、氯酸盐标准储备液(1mg/ml，以氯酸根计)：精密称取氯酸钠0.128g(精确至
0.0001g)，置于100ml容量瓶中，用超纯水(1.1.5)溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/ml标准储备液，4℃保存。
[0076]
1.5.2、高氯酸盐标准储备液(1mg/ml，以高氯酸根计)：精密称取高氯酸钠0.123g(精确至0.0001g)，置于100ml容量瓶中，用超纯水(1.1.5)溶解并稀释至刻度，摇匀，制成浓度为1mg/ml标准储备液，4℃保存。
[0077]
1.5.3、混合标准中间液：分别准确量取0.2ml氯酸盐标准储备液(1.5.1)、0.1ml高氯酸盐标准储备液(1.5.2)，置于同一100ml容量瓶中，用超纯水(1.1.3)稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐、高氯酸盐浓度分别为2.0μg/ml、1.0μg/ml的混合标准中间液，4℃保存。
[0078]
1.5.4、混合同位素内标液：分别准确量取50μl氯酸盐同位素内标(1.4.1)置于10.0ml容量瓶中，用超纯水(1.1.5)稀释至刻度，摇匀，制成氯酸盐-18
o3、高氯酸盐-18
o4浓度分别为1000ng/ml、250ng/ml的混合同位素内标液，4℃保存。
[0079]
1.5.5、混合标准工作溶液：分别准确量取混合标准中间液(1.5.3)0μl、10μl、25μl、50μl、100μl、250μl、500μl、1000μl，及混合同位素内标液(1.5.4)100μl，用超纯水溶液(1.1.3)稀释并定容至10ml，作为混合标准工作溶液s0、s1—s7。氯酸盐浓度依次为：0.00ng/ml、2.00ng/ml、5.00ng/ml、10.0ng/ml、20.0ng/ml、50.0ng/ml、100ng/ml、200ng/ml，高氯酸盐浓度依次为：0.00ng/ml、1.00ng/ml、2.50ng/ml、5.00ng/ml、10.0ng/ml、25.0ng/ml、50.0ng/ml、100ng/ml，混合标准工作液中氯酸盐-18
o3、高氯酸盐-18
o4浓度分别为10.0ng/ml、2.5ng/ml，或依需要配制适当浓度的混合标准工作液。临用新制。
[0080]
2、仪器和设备
[0081]
2.1、液相色谱-串联质谱仪，配有电喷雾离子源(esi源)。
[0082]
2.2、涡旋振荡器。
[0083]
2.3、组织捣碎机。
[0084]
2.4、均质器。
[0085]
2.5、电子天平：感量为0.0001g。
[0086]
2.6、超声波恒温水浴振荡器。
[0087]
2.7、玻璃进样小瓶：1.5ml。
[0088]
注：2.7的耗材在使用前均应做本底测试。
[0089]
3、试样制备与保存
[0090]
3.1、生产用饮用水
[0091]
充分混匀，直接取用。
[0092]
3.2、液体乳：
[0093]
充分摇匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于4℃避光保存。
[0094]
3.3、乳清粉、乳清蛋白粉、油脂、乳糖：
[0095]
充分混匀，取适量有代表性的试样，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。
[0096]
3.4、牧草、饲料：
[0097]
取适量有代表性的试样，粉碎机粉碎后过40目筛，均分成两份，作为试样和留样，分别装入洁净容器中，密封并标记，于常温避光保存。
[0098]
本发明中待测试样的提取和净化过程如下：
[0099]
(1)生产用水：准确移取1.0ml试样，加入10.0μl混合同位素内标液(1.5.4)，涡旋震荡10s，经0.22μm再生纤维素滤膜过滤后，取续滤液作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0100]
(2)液体乳：准确称取0.5g(精确至0.0001g)试样置于1.5ml玻璃进样小瓶(2.7)中，加入15μl混合同位素内标液(1.5.4)，准确加入1.0ml乙腈(1.1.1)，旋盖涡旋振荡10s，超声5min，取上清液过0.22μm再生纤维素滤膜，弃去前3d流出液，收集续滤液，作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0101]
(3)蛋白粉、乳糖、牧草、饲料：准确称取0.075g(精确至0.0001g)试样置于1.5ml玻璃进样小瓶(2.7)中，加入15μl混合同位素内标液(1.5.4)，准确加入0.5ml超纯水(1.1.3)，涡旋振荡5s，再准确先加入1.0ml乙腈(1.1.1)，旋盖涡旋振荡10s，超声30min，取上清液过0.22μm再生纤维素滤膜，弃去前3d流出液，收集续滤液，作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0102]
(4)乳清粉准确称取0.2g(精确至0.0001g)试样置于1.5ml玻璃进样小瓶(2.7)中，加入15μl混合同位素内标液(1.5.4)，准确加入0.5ml超纯水(1.1.3)，涡旋振荡5s，再准确先加入1.0ml乙腈(1.1.1)，旋盖涡旋振荡10s，超声5min，取上清液过0.22μm再生纤维素滤膜，弃去前3d流出液，收集续滤液，作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0103]
(5)油脂：准确称取0.2g(精确至0.0001g)试样置于1.5ml玻璃进样小瓶(2.7)中，加入10μl混合同位素内标液(1.5.4)，准确加入1.0ml 50％乙腈水溶液(1.2.2)，旋盖涡旋振荡30s，静置，取上清液过0.22μm再生纤维素滤膜，弃去前3d流出液，收集续滤液，作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0104]
分别准确称取某婴配企业原料乳(属于液体乳)0.50001g和0.50002g试样置于1.5ml玻璃进样小瓶中，加入15μl混合同位素内标液，准确加入1.0ml乙腈，旋盖涡旋振荡10s，超声5min，取上清液过0.22μm再生纤维素滤膜，弃去前3d流出液，收集续滤液，作为供试品溶液供液相色谱-串联质谱仪测定。
[0105]
其在液相色谱-串联质谱仪中测试时的检测条件如下：
[0106]
液相色谱条件
[0107]
a)色谱柱：资生堂pc hilic柱(150mm
×
2.0mm，5μm)。
[0108]
b)流动相：乙腈+20mmol/l乙酸铵水溶液(25∶75，v/v)；
[0109]
d)流速：0.25ml/min。
[0110]
e)柱温：35℃。
[0111]
f)进样量：1μl。
[0112]
质谱条件
[0113]
a)离子源：电喷雾离子源(esi源)。
[0114]
b)检测方式：多反应监测(mrm)。
[0115]
c)扫描方式：负离子模式扫描。
[0116]
d)干燥气温度：350℃(氮气)。
[0117]
e)干燥气流速：10l/min(氮气)。
[0118]
f)雾化器压力：413.8kpa(氮气)。
[0119]
g)采用多反应监测(mrm)模式采集数据，质谱参数见表2。
[0120]
表2
[0121][0122]
*
定量离子对。
[0123]
定性测定：
[0124]
在相同试验条件下测定混合标准工作溶液和由液体乳得到的供试品溶液，得到色谱图如图1和图2所示，记录由液体乳得到的供试品溶液和混合标准工作液中氯酸盐、高氯酸盐的色谱保留时间，以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子的相对离子丰度。发现，由液体乳得到的供试品溶液中检出与混合标准工作液(1.5.5)中氯酸盐、高氯酸盐保留时间一致的色谱峰，且其定性离子与浓度相当的标准溶液中相应的定性离子的相对丰度相比，偏差为2.1％，则确定试样中检出相应的氯酸盐、高氯酸盐。
[0125]
定量测试：
[0126]
将混合标准工作溶液(1.5.5)按上述测定条件进行测定，得到以混合标准工作溶液的浓度为横坐标，以内标校正后的响应值为纵坐标绘制标准工作曲线，如图3、4所示。
[0127]
根据标准工作曲线按内标法以内标校正后的响应值计算得到其含量，其计算过程如下：
[0128]
标准工作曲线：y＝1.328607x+0.173985
[0129]
其中，y是峰面积，x是待测试样中各待测组分的含量，其中仪器测定氯酸盐峰面积是5483，带入后计算得x是7.596ng/ml；高氯酸盐峰面积是656，带入后计算得x是6.965ng/ml。
[0130]
计算结果以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留三位有效数字。
[0131]
进一步地，计算出该液体乳中氯酸盐、高氯酸盐的含量分别为7.596ng/ml、6.965ng/ml。
[0132]
通过对其他样品进行测试验证，本发明测定方法的灵敏度、准确度、精密度如下：
[0133]
(1)灵敏度
[0134]
当试样量为1.0ml时，包装饮用水中氯酸盐的检出限为0.6μg/l、定量限为2.0μg/l；高氯酸盐的检出限为0.4μg/l、定量限为1.0μg/l。
[0135]
当试样量为0.075g(精确至0.0001g)、定容体积为1.5ml时，蛋白粉、乳糖、牧草、饲料中氯酸盐的检出限为6.6μg/kg、定量限为20.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为3.3μg/kg、定量限为10.0μg/kg。
[0136]
当试样量为0.1g(精确至0.0001g)、定容体积为1.0ml时，油脂中氯酸盐的检出限为5.0μg/kg、定量限为15.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为2.5μg/kg、定量限为7.5μg/kg。
[0137]
当试样量为0.2g(精确至0.001g)、定容体积为1.5ml时，乳清粉乳中氯酸盐的检出限为5.0μg/kg、定量限为15.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为2.5μg/kg、定量限为7.5μg/kg。
[0138]
当试样量为0.5g(精确至0.001g)、定容体积为1.5ml时，液体乳中氯酸盐的检出限为1.8μg/kg、定量限为6.0μg/kg；高氯酸盐的检出限为1.2μg/kg、定量限为3.0μg/kg。
[0139]
(2)准确度
[0140]
本方法在3～1000μg/kg添加浓度范围内，回收率为80％～110％。
[0141]
(3)精密度
[0142]
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的20％。
[0143]
最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。

技术特征：
1.一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，采用液相色谱-串联质谱进行分析，包括：提取待测试样中的氯酸盐和高氯酸盐，并经滤膜过滤，即得供试品溶液；取所述供试品溶液注入液相色谱的色谱柱中，并以体积比为20～30:80～70的乙腈和乙酸铵水溶液为流动相并在其流速为0.15～0.4ml/min时进行等度洗脱得流出液；其中，所述色谱柱为资生堂pc hilic柱；取所述流出液直接进行质谱分析，得检测结果。2.根据权利要求1所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，当所述待测样品为婴幼儿乳粉用的水时，所述供试品溶液是直接在所述水中加入混合同位素内标液，经再生纤维素膜过滤后即得；和/或，当所述待测样品为液体乳、油脂、蛋白粉、乳糖、牧草、饲料和乳清粉时，所述供试品溶液是将待测样品、混合同位素内标液和溶剂混合，超声，取上清液经再生纤维素膜过滤，弃去前3d流出液，收集续滤液，测定即得。3.根据权利要求2所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，所述再生纤维素膜的规格为0.22μm。4.根据权利要求1～3中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，所述混合同位素内标液中氯酸盐-18
o3和高氯酸盐-18
o4浓度分别为500～1500ng/ml和200～300ng/ml。5.根据权利要求1～4中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，所述供试品溶液的提取在液相色谱所采用的玻璃进样小瓶中进行。6.根据权利要求1～5中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，注入液相色谱的色谱柱中的所述供试品溶液的进样量为1微升以上。7.根据权利要求1～6中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，所述质谱分析中采用的离子源为电喷雾离子源(esi源)，在负离子模式下扫描，并采用多反应监测(mrm)模式采集数据。8.根据权利要求1～7中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，所述检测结果包括进行定性分析结果，所述定性分析如下：配制若干份已知浓度的含有氯酸盐和高氯酸盐的混合溶液，将其作为混合标准工作溶液i；将所述混合标准工作溶液i作为待测试样进行所述液相色谱-串联质谱分析，得到所述混合标准工作溶液i中氯酸盐和高氯酸盐的色谱保留时间以及相对离子丰度；按照下述条件判定待测样品中是否含有氯酸盐和高氯酸盐：若待测试样中检出与混合标准工作溶液i中氯酸盐、高氯酸盐保留时间一致的色谱峰，且其定性离子与浓度相当的混合标准工作溶液i中相应的定性离子的相对离子丰度相比，偏差在规定范围内，则可以确定试样中检出相应的氯酸盐和高氯酸盐；所述规定范围为：当相对离子丰度＞50％时，允许的相对偏差为
±
20％，当相对离子丰度为20％～50％时，允许的相对偏差为
±
25％，当相对离子丰度为10％～20％时，允许的相对偏差为
±
30％，当相对离子丰度≤10％时，允许的相对偏差为
±
50％。9.根据权利要求1～8中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定
方法，其特征在于，所述检测结果包括定量分析结果，所述定量分析如下：配制若干份含有氯酸盐和高氯酸盐且具有浓度梯度的混合溶液，将其作为混合标准工作溶液ii；其中，所有混合标准工作溶液ii中氯酸盐-18
o3和高氯酸盐-18
o4浓度分别为10.0ng/ml和2.5ng/ml；将所述混合标准工作溶液ii作为待测试样进行所述液相色谱-串联质谱分析，得到以混合标准工作溶液ii的浓度为横坐标，以内标校正后的响应值为纵坐标的标准工作曲线；由标准工作曲线计算出所述定量分析结果。10.根据权利要求1～9中任一项所述的婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，其特征在于，包括：所述液相色谱的条件为：色谱柱：资生堂pc hilic柱；流动相：体积比为20～30:80～70的乙腈和15～25mmol/l乙酸铵水溶液；流速：0.15～0.4ml/min；柱温：15～45℃和/或，所述质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；检测方式：多反应监测；扫描方式：负离子模式扫描；干燥气：氮气；干燥气温度：300～400℃；干燥气流速：5～15l/min。

技术总结
本发明属于食品检测技术领域，提供一种婴幼儿乳粉原辅料中氯酸盐和高氯酸盐的测定方法，采用液相色谱-串联质谱进行分析，包括：提取待测试样中的氯酸盐和高氯酸盐，并经滤膜过滤，即得供试品溶液；取供试品溶液注入液相色谱的资生堂PC HILIC柱中，并以体积比为20～30:80～70的乙腈和乙酸铵水溶液为流动相并在其流速为0.15～0.4ml/min时进行等度洗脱得流出液；取流出液直接进行质谱分析，得检测结果。本发明无需对提取液进行固相萃取净化，且等度洗脱工艺即可高效低成本地实现高准确度、高灵敏度和高精密度的测试，并且极大降低了高氯酸盐前处理过程中造成的污染，在企业生产管理过程中具有十分重要的意义。程中具有十分重要的意义。程中具有十分重要的意义。


技术研发人员：王浩 耿健强 刘艳申 王羽 张文超 陈江龙 李冬梅 杨浩 赵宏玉
受保护的技术使用者：北京市食品检验研究院（北京市食品安全监控和风险评估中心）
技术研发日：2023.07.12
技术公布日：2023/10/15