lncRNALOC646762表达的抑制剂的应用和药物的制作方法

lncrna loc646762表达的抑制剂的应用和药物
技术领域
1.本技术属于肿瘤分子生物学技术领域，尤其涉及一种lncrna loc646762表达的抑制剂的应用和药物。


背景技术：

2.肾癌全称为肾细胞癌(renal cell carcinoma，rcc)，是起源于肾实质泌尿小管上皮系统的恶性肿瘤。而肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma，ccrcc)约占整个肾癌的70％～80％，同时也是为数不多的对放射疗法、化学疗法、免疫疗法等都不敏感的恶性肿瘤，因此其治疗方式以切除为主，包括根治性切除和部分切除，但仍有约三分之一的肾透明细胞癌患者术后会出现转移或复发现象，且转移性患者的预后能力不良。治疗肾透明细胞癌的有效性和预后往往受到肿瘤的分子特征的影响，因此，亟需进一步研究和开发更为安全、有效的生物标志物和治疗靶点。
3.长链非编码rna(long non-coding rna，lncrna)长度大于200nt，以往被认为在细胞内不发挥任何实际功能，但事实上蛋白编码基因只有不足2％，大多数非编码调控元件被转录成lncrna，lncrna在多种生物过程中发挥着重要作用，能够通过表观遗传调控和细胞内信号转导通路等途径影响细胞增殖等生物学行为。目前，lncrna被证明是肿瘤转移的关键调控分子，已成为肿瘤的重要生物标志物和临床治疗靶点，但大多数lncrna的功能不清楚，因此研究lncrna的功能和作用机制仍是当前生命科学领域的一个热点和挑战。
4.rna干扰(rna interference，rnai)技术是一种抑制基因表达的分子生物学技术，该技术是由外源性双链rna分子引起的rna干扰反应，通过rna序列介导的方式将靶基因的mrna分解为小片段，从而使特定基因不能翻译成蛋白质。随着近几年基因测序和靶向运载技术的不断进步，rnai技术已被广泛应用于多种类型的癌症治疗中，如乳腺癌、肺癌、前列腺癌等。rnai技术的成功应用需要比较清楚知晓靶基因的功能，然而目前与肾癌相关的lncrna种类有限。


技术实现要素：

5.本技术的目的在于提供一种lncrna loc646762表达的抑制剂的应用、药物，旨在解决如何从肾癌相关的lncrna角度更好地预防和/或治疗肾癌。
6.为实现上述申请目的，本技术采用的技术方案如下：
7.第一方面，本技术实施例提供一种lncrna loc646762表达的抑制剂在制备用于预防和/或治疗肾癌的药物中的应用。
8.在一实施例中，lncrna loc646762的基因序列如seq id no.1所示；和/或，肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。
9.在一实施例中，抑制剂包括sirna和shrna中的至少一种。
10.在一实施例中，sirna的正义链靶向序列包括seq id no.2-6所示序列中的至少一种；和/或
11.shrna包括seq id no.7-8所示序列中的至少一种。
12.第二方面，本技术实施例还提供一种用于预防和/或治疗肾癌的药物，包括lncrna loc646762表达的抑制剂以及药物学可接受的载体。
13.在一实施例中，lncrna loc646762的基因序列如seq id no.1所示；和/或，肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。
14.在一实施例中，抑制剂包括sirna和shrna中的至少一种；和/或
15.载体包括病毒载体。
16.在一实施例中，sirna的正义链靶向序列包括seq id no.2-6所示序列中的至少一种；和/或
17.shrna包括seq id no.7-8所示序列中的至少一种。
18.第三方面，本技术实施例提供一种lncrna loc646762的定量检测试剂在制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒中的应用。
19.在一实施例中，定量检测试剂包括扩增lncrna loc646762的引物：seq id no.9和seq id no.10；和/或，
20.肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。
21.本技术第一方面提供的应用，是基于lncrna loc646762在肾癌中高表达，并与患者预后相关。进一步实验发现通过抑制lncrna loc646762表达，可以显著抑制体外肾细胞癌的转移和侵袭，即lncrna loc646762表达的抑制剂可以有效用于预防或治疗肾细胞癌的转移侵袭，因此抑制lncrna loc646762表达的抑制剂可以制备用于预防和/或治疗肾细胞癌的药物。
22.本技术第二方面提供的药物，是基于lncrna loc646762表达的抑制剂可以有效预防或治疗肾细胞癌的转移和侵袭，因此通过药物中使用lncrna loc646762表达的抑制剂，可有效用于预防或治疗肾细胞癌，这样的药物可以成为一种很好的预防和/或治疗肾细胞癌药物。
23.本技术第三方面提供的应用，是基于发现一种肾透明细胞癌标志物lncrna loc646762，研究表明lncrna loc646762在肾透明细胞癌中高表达并与患者预后相关，因此该lncrna loc646762的定量检测试剂可以制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒。
附图说明
24.为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
25.图1是基于tcga数据库分析的lncrna loc646762在肾癌配对样本中表达量图；
26.图2是基于数据集gse36895分析得到的lncrna loc646762的表达量图；
27.图3是基于kirc数据集样本进行分析的lncrna loc646762生存曲线；
28.图4是lncrna loc646762在不同肾癌细胞系中的表达量图；
29.图5是sirna对lncrna loc646762在786-o细胞系中抑制效率图；
30.图6是sirna对lncrna loc646762在caki-1细胞系中抑制效率图；
31.图7是shrna对lncrna loc646762在786-o细胞系中抑制效率图；
32.图8是shrna对lncrna loc646762在caki-1细胞系中抑制效率图；
33.图9为干扰lncrna loc646762后786-o细胞和caki-1细胞的照片；
34.图10为干扰lncrna loc646762后786-o细胞和caki-1细胞迁移数变化；
35.图11为干扰lncrna loc646762后786-o细胞和caki-1细胞的照片；
36.图12为干扰lncrna loc646762后786-o细胞和caki-1细胞侵袭数变化；
37.图13为敲低lncrna loc646762对e-cadherin基因在mrna水平表达量；
38.图14为敲低lncrna loc646762对zeb1基因在mrna水平表达量；
39.图15为敲低lncrna loc646762对e-cadherin基因和zeb1基因在蛋白质水平表达量；
40.图16为敲低lncrna loc646762对zeb1基因启动子区h3k27ac的影响。
具体实施方式
41.为了使本技术要解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本技术，并不用于限定本技术。
42.本技术中，术语“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，a和/或b，可以表示：单独存在a，同时存在a和b，单独存在b的情况。其中a，b可以是单数或者复数。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。“至少一种”是指一种或者多种，“多种”是指两种或两种以上。“以下至少一项(个)”或其类似表达，是指的这些项中的任意组合，包括单项(个)或复数项(个)的任意组合。
43.应理解，在本技术的各种实施例中，上述各过程的序号的大小并不意味着执行顺序的先后，部分或全部步骤可以并行执行或先后执行，各过程的执行顺序应以其功能和内在逻辑确定，而不应对本技术实施例的实施过程构成任何限定。在本技术实施例中使用的术语是仅仅出于描述特定实施例的目的，而非旨在限制本技术。在本技术实施例和所附权利要求书中所使用的单数形式的“一种”、“所述”和“该”也旨在包括多数形式，除非上下文清楚地表示其他含义。
44.术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，用来将目的如物质彼此区分开，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。例如，在不脱离本技术实施例范围的情况下，第一xx也可以被称为第二xx，类似地，第二xx也可以被称为第一xx。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。
45.lncrna loc646762位于染色体7p14.3，为了方便，说明书或附图中有时简写成loc646762，其是一种新注释的功能未知的lncrna，利用tcga数据挖掘分析得出，lncrna loc646762在肾细胞癌中表达量上调，并且与预后相关，因此lncrna loc646762有望成为肾透明细胞癌的诊断、预后标志物，lncrna loc646762相关的定量检测试剂可以制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒。进一步实验发现通过抑制lncrna loc646762表达，可以显著抑制体外肾细胞癌的转移和侵袭，即lncrna loc646762表达的抑制剂可以有效用于预防或治疗肾细胞癌的转移侵袭，因此抑制lncrna loc646762表达的抑制剂可以制备用于预防和/或治疗肾细胞癌的药物。
46.本技术实施例第一方面提供一种lncrna loc646762表达的抑制剂在制备用于预防和/或治疗肾癌的药物中的应用。
47.在一实施例中，lncrna loc646762的基因序列(seq id no.1)如下：
48.》nr_024278.1homo sapiens uncharacterized loc646762(loc646762),lon g non-coding rna：
49.ctcggctcggatctaccttccagtagcagcggagtggccaatgggaccgggaccagagccgggggc
50.cggaggccgccgccgcggggaggttcccggcccaggtgcccagcgctcaccagcccggcggcgcc
51.gcggcggccccgcagctgtttcctcgggggggcgtggcgtcgggggccttcgcggcgcagtcctct
52.ttcagcatcccgaacagcagcagcggcccgtaggactcgcaggactcggtgcacagcagccctgag
53.gatggcggcggcggccggcaccggccggtgggctggagccccggcgggccgctcctggtgatcggc
54.tccttaccagctcacctctcaccgcgcatgtttggaggtgctgagaaacataatgtctgttccccaa
55.gagccagctaatcatttttactaagtacgataattggctgccctgattcagataacatatccttattgt
56.gacataggggtgactattgtcagaaaaccctgaaaatgttttaaaacaagaactaatggggcttggc
57.gattcttgccacgcttttccagagctcggaccttgctattatttgctactagacacccacaaaccctt
58.gcttgttaaactgatcgccttcaagactcaagaaaagcgccatgcggctccctcctagggctctcct
59.gacctttcctcaccaatgccgagagtggtcctgctggagaacgcacacgcctgcagttcgtgcacc
60.ttttcccggagctgcaccaggaaattatggatcaactggaagcagccaagaagaagggtcttggcg
61.atcacatccagctattcagccatctcagactgcggacctccgtgcaccccctggcaggttccctccgc
62.ctagggtcgaaagcttcagaggcagccccaactcttccacttcttcctccatctctggctcccaggc
63.ttgggaggccccgcgccaccgcttcaactggctggggtgggaagattgaaacggctcttgagactc
64.tgcttttgcgcttactgctcgtttgcccgactattttctcatagtccctattccagtcaatttctggca
65.cagcccagcttgaaactgctcttgagcctccgattttgagcttactcctggtttgcccgactattttc
66.tcataatccctgttccggtcagtttccggcacagcccagcttgaaacagctcttgagcctcccctttt
67.gagcttactcctcctttgcctgactcttttctcatagtccctgttctggtcaatttccggcgcagccc
68.ggcttgaaatggctcttgagcctacgcttttgagcttacttctcatttgcccgactattttctcatagt
69.tcctgttccggtcaatttccagcgcagcccagctgagttgggcgaggtctagaaaggcctgactcgc
70.ctcttggcctcaatgacttgtacccgctgcttttgcagacctcccggtcttcatggcaactgtgaaat
71.gtggggtggggggcgtagggttgaagccattcgcgccggtagtccctgcatgtcccctcatgtgctc
72.cccagtgcgcacagcaccccagcctccgcgcttctggaagcagcccagaagggtcttggcaatcac
73.gtccagctgtaagccatttcgcggtctcagattgcggacctccgcacgccccctggcaggttccctc
74.cgcctagggtggaaagctgcaaaggcagccccaactcttccaccacctcctccatctccggctcctg
75.ggcttgggaggccccgcgccactgcttcgactggctggggcgggaaggttgaaatggctttgagac
76.tccacttttgagcttactcctcctttgcccgactattttctcatagtccctattccaatcaatttctggt
77.gcagcccagcttgaaatggctcttgagcctccgcttttcagctgactcctcgattg。
78.其中，第1-366个碱基序列对应第一个外显子对，第367-1626个碱基序列对应第二个外显子。
79.具体地，预防和/或治疗肾癌的药物中的肾癌，可以包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种；因肾透明细胞癌比例高，市场需要大，由此可选用于
loc646762表达的抑制剂以及药物学可接受的载体。
96.基于lncrna loc646762表达的抑制剂可以有效预防或治疗肾细胞癌的转移和侵袭，因此通过药物中使用lncrna loc646762表达的抑制剂，可有效用于预防或治疗肾细胞癌，这样的药物可以成为一种很好的预防和/或治疗肾细胞癌药物。
97.具体地，lncrna loc646762的基因序列如seq id no.1所示。肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。抑制剂包括sirna和shrna中的至少一种；如上述五种sirna和两种shrna中选择。
98.具体地，上述药物包括基于rna干扰的治疗肾细胞癌的寡核苷酸，这些寡核苷酸能够抑制肾透明癌细胞中lncrna loc646762的表达，从而抑制肿瘤的转移侵袭。
99.进一步地，上述载体可以包括病毒载体。例如，将装载了shrna的慢病毒载体转导到细胞中，shrna与靶基因的mrna结合并诱导dicer蛋白对shrna分子进行切割，从而形成rna诱导沉默复合物(rna-induced silencing complex，risc)促进mrna的降解，从而抑制了靶基因的表达。这样的rnai药物的制备更为容易，生产和纯化过程也更加高效，而且通过合成rnai药物，可以精确地调节靶基因的表达，从而达到精准治疗的效果。
100.第三方面，本技术实施例还提供一种lncrna loc646762的定量检测试剂在制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒中的应用。
101.具体地，定量检测试剂包括扩增lncrna loc646762的引物：seq id no.9和seq id no.10。
102.通过生物信息学分析发现，lncrna loc646762在肾透明细胞癌中高表达并与患者预后相关，是一种肾透明细胞癌标志物，因此该lncrna loc646762的定量检测试剂可以制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒。
103.下面结合具体实施例进行说明。
104.实施例1lncrna loc646762在肾癌中表达量检测
105.1.生物信息学分析lncrna loc646762在肾癌中的表达量
106.在tcga(the cancer genome atlas)数据库中下载肾癌的基因表达数据，并分析lncrna loc646762的表达量，因肿瘤组织样本和正常组织样本不均衡，因此针对肾癌样本进行配对样本t检验，结果如图1所示，数据库中简写kich表示肾嫌色细胞癌，kirc表示肾透明细胞癌，kirp表示肾乳头状细胞癌中，表达量用tpm(transcripts per million)即每一百万个转录本的数量表示，分析显示：lncrna loc646762在配对的肾癌样本中表达量显著上调，尤其是肾透明细胞癌和肾嫌色细胞癌。随后额外搜集了geo(gene expression omnibus)数据库中数据集gse36895对肾透明细胞癌中lncrna loc646762的表达量进行验证，结果如图2所示，相比癌旁组织，lncrna loc646762在肾透明细胞癌中表达水平显著上调。为了验证lncrna loc646762是否影响肾透明细胞癌的预后，我们对kirc数据集样本进行生存分析，结果如图3所示，高表达lncrna loc646762的患者预后生存能力较差。
107.2.肾透明细胞癌细胞系中lncrna loc646762表达量检测
108.2.1rna提取
109.提前复苏细胞(即肾透明细胞癌细胞系)并传代获得对数生长期细胞。将细胞样品用胰蛋白酶(typsin)进行消化，并在接种前进行细胞计数，将细胞以2
×
105的密度接种到6孔板中，并观察保证细胞良好生长。待细胞长满后，用pbs溶液洗涤2次，加入1ml trizol溶
液，并吹打均匀后将细胞收集后静置10分钟。在每个离心管中加入200微升三氯甲烷，盖上盖子彻底混合，静置15分钟后使用4℃离心机以12000rpm的转速运行15-20分钟。上清液用移液枪吸走丢弃，加入1ml 75％乙醇溶液(3/4无水乙醇，1/4depc水)，上下混匀，在4℃的离心机中以12000rpm速度运行5min，去上清液后再次以12000rpm离心3分钟，用10ul微量移液枪吸去多余的液体。将沉淀物置于室温晾干，加入40ul depc水，并吹打混匀。获得rna溶液后，用核糖蛋白测定法测量总rna溶解度。先用depc水冲洗检测头，然后取1ul rna溶液进行浓度和纯度测定，总rna样品的a260/280处于1.8-2.0区间。
110.2.2rna逆转录
111.采用两步法进行：测定提取的总rna浓度，并控制逆转录的rna总量为500ng。根据总rna样本溶液的溶度，计算500ng rna所需的体积，并用ddh2o水补齐至6ul，将样本放入pcr仪中，65℃保持5min使rna变性，冰上静置2min，加入2μl 5
×
dtt buffer并混匀，放置于pcr仪中，设置温度为37℃反应5min，后加入2μl 5
×
rt buffer使总反应体积为10μl，并设置如下反应：37℃15min，65℃15min，4℃10min，最后生成互补dna(cdna)用于后续实验。
112.2.3rt-qpcr
113.应用ncbi进行引物序列的设计，引物序列如表1所示：
114.表1rt-qpcr检测引物
[0115][0116]
首先将引物于12000rpm下离心5min，并按照引物合成公司提供的引物使用说明书所需剂量加入ddh2o，使引物的工作浓度为10μm，用于后续的实时荧光定量pcr检测。以gapdh为内参，每组样本至少设置三个重复，加入八联管中并离心去除气泡，随后上机检测。实验重复进行三次，确保实验可靠，整理数据并计算结果是否具有显著性。使用比较ct计算rna的相对表达，gapdh用于基因表达标准化的控制，将rna的表达水平计算为相对于gapdh对照的靶rna的量，以归一化总rna的初始输入。
[0117]
对三种肾透明细胞癌细胞系786-o、caki-1和a498中的lncrna loc646762表达量进行检测，并与正常成人肾小管上皮细胞hk2中的表达量进行比较。结果如图4所示，相比成人肾小管上皮细胞hk2，lncrna loc646762在786-o、caki-1、a498中均显著上调，其中，其中786-o细胞中lncrna loc646762的表达水平为hk2细胞的2.5倍，caki-1细胞中lncrna loc646762的表达水平是hk2细胞的2倍，表明786-o和caki-1中lncrna loc646762的表达水平更加显著高于hk2细胞。
[0118]
实施例2lncrna loc646762表达量的敲低
[0119]
1.sirna干扰
[0120]
根据上文的实验结果，选择786-o和caki-1细胞系，将其分为对照组和实验组。用标准的sirna干扰技术，通过jetprime转染试剂将sirna干扰序列转入实验组细胞中，将相应的对照序列(sirna-nc)转入对照组细胞中，并使用rt-qpcr技术检验lncrna loc646762的表达水平，以确认sirna的有效性。瞬时转染786-o细胞后检测lncrnaloc646762的mrna表达水平，结果如图5所示，qpcr结果显示五个干扰组(sirna-1、sirna-2、sirna-3、sirna-4、sirna-5)与对照组相比，干扰效率都大于50％，差异具有显著性意义。瞬时转染caki-1细胞后检测lncrna loc646762mrna表达水平，结果如图6所示，两个干扰组(sirna-1、sirna-2)与对照组相比，干扰效率都大于50％，差异具有显著性意义。选取上述sirna中具有更好抑制效率的sirna-1、sirna-2进行后续功能实验验证。
[0121]
2.shrna干扰
[0122]
为了构建稳定敲低lncrna loc646762的可持续传代的细胞株，使用携带小发卡rna(shrna)的慢病毒对肾透明细胞癌细胞株进行转染，将786-o和caki-1细胞系分为对照组和实验组，shrna慢病毒载体lv2(μ6/puro)购买自吉玛基因，内有嘌呤霉素筛选基因，可用于稳转细胞的筛选。用shrna转染786-o和caki-1细胞2-3天后，使用3μg/ml嘌呤霉素筛选细胞3-4天，随后用trizol提取总rna并检测lncrna loc646762表达水平。结果如图7和图8所示，在786-o和caki-1中，转染组与对照组(shrna-nc)相比，lncrna loc646762的表达水平显著下降，敲低效率都为75％(p《0.01)，说明转染效果良好。
[0123]
实施例3lncrna loc646762对肾透明细胞癌的转移和侵袭
[0124]
探究lncrna loc646762可能参与的信号通路：根据lncrna loc646762的表达水平将tcga数据库中607例肾透明细胞癌样本分为高风险组和低风险组，gsea结果分析显示细胞紧密连接通路显著富集在低风险组，暗示着lncrna loc646762的下调可能会导致细胞间的黏附性增强。另外，通过正常肾细胞的go富集分析结果显示，细胞连接、细胞黏附相关通路显著富集于差异表达基因群中，因此lncrna loc646762可能对细胞黏附起着正向调节作用。
[0125]
为了进一步分析lncrna loc646762对肾透明细胞癌细胞的迁移和侵袭能力的影响，使用transwell迁移和侵袭实验分析抑制lncrna loc646762表达后肾透明细胞癌细胞系转移和侵袭能力的改变。抑制lncrna loc646762表达后肾透明细胞癌细胞系转移能力结果如图9和图10所示，抑制lncrna loc646762表达后肾透明细胞癌细胞系侵袭能力结果图11和图12所示。由此可知，sirna干扰后，786-o和caki-1细胞迁移和侵袭数目明显减少，结果具有显著性差异(p《0.01)，因此干扰lncrna loc646762的表达对肾透明细胞癌的转移和侵袭能力产生抑制效果。
[0126]
实施例4lncrna loc646762影响肾透明细胞癌的emt过程实验
[0127]
为了探究敲低lncrna loc646762后对肾透明细胞癌中emt(epithelial-mesenchymal transition)进程的影响，选取上述shrna中具有更好抑制效率的shrna-1，通过rt-qpcr查看emt过程中标志物的表达水平，e-cadherin和zeb1扩增引物如表1所示，结果如图13-15所示，发现敲低lncrnaloc646762后，caki-1细胞和786-o细胞中e-cadherin的表达量明显上升，zeb1表达量明显下降。western blot结果与rt-qpcr一致。使用ncbi设计6个
zeb1启动子区域的chip引物，序列如表2所示，并设计染色体免疫共沉淀(chip)实验来探究lncrna loc646762表达量的变化是否能影响zeb1启动子区域的h3k27乙酰化水平，以igg抗体作为实验的阴性对照。chip实验结果如图16所示，抑制lncrna loc646762的表达能影响zeb1启动子区域h3k27乙酰化的富集水平，从而调节zeb1的表达。
[0128]
表2chip引物序列
[0129][0130][0131]
综上，本技术实施例研究表明lncrnaloc646762在肾透明细胞癌中高表达并与患者预后相关，通过抑制lncrna loc646762表达的sirna和shrna序列，用于抑制lncrnaloc646762的表达，可有效用于预防或治疗肾透明细胞癌。sirna序列可明显抑制肾透明细胞癌中lncrna loc646762的表达，并抑制了肾透明细胞癌的迁移和侵袭。shrna序列可在mrna和蛋白水平显著上调e-cadherin表达并抑制zeb1表达，从而对肾透明细胞癌的emt进程和转移侵袭产生影响。
[0132]
以上所述仅为本技术的较佳实施例而已，并不用以限制本技术，凡在本技术的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。

技术特征：
1.lncrna loc646762表达的抑制剂在制备用于预防和/或治疗肾癌的药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述lncrna loc646762的基因序列如seq id no.1所示；和/或，所述肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述抑制剂包括sirna和shrna中的至少一种。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述sirna的正义链靶向序列包括seq id no.2-6所示序列中的至少一种；和/或所述shrna包括seq id no.7-8所示序列中的至少一种。5.一种用于预防和/或治疗肾癌的药物，其特征在于，所述药物包括lncrna loc646762表达的抑制剂以及药物学可接受的载体。6.如权利要求5所述的药物，其特征在于，所述lncrna loc646762的基因序列如seq id no.1所示；和/或，所述肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。7.如权利要求5或6所述的药物，其特征在于，所述抑制剂包括sirna和shrna中的至少一种；和/或所示载体包括病毒载体。8.如权利要求7所述的药物，其特征在于，所述sirna的正义链靶向序列包括seq id no.2-6所示序列中的至少一种；和/或所述shrna包括seq id no.7-8所示序列中的至少一种。9.lncrna loc646762的定量检测试剂在制备用于诊断和/或预后评估肾癌的试剂盒中的应用。10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述定量检测试剂包括扩增lncrna loc646762的引物：seq id no.9和seq id no.10；和/或，所述肾癌包括肾透明细胞癌、肾嫌色细胞癌和肾乳头状细胞癌中的至少一种。

技术总结
本申请涉及属于肿瘤分子生物学技术领域，尤其涉及一种lncRNA LOC646762表达的抑制剂的应用和药物。具体是一种lncRNA LOC646762表达的抑制剂在制备用于预防和/或治疗肾癌的药物中的应用。基于lncRNA LOC646762在肾癌中高表达，并与患者预后相关，进一步实验发现通过抑制lncRNA LOC646762表达可以显著抑制体外肾细胞癌的转移和侵袭，因此抑制lncRNA LOC646762表达的抑制剂可以制备用于预防和/或治疗肾细胞癌的药物。或治疗肾细胞癌的药物。或治疗肾细胞癌的药物。


技术研发人员：曲晨 张雅鸥 张世宽 赵旭升
受保护的技术使用者：水木星辰生物制药（深圳）有限公司
技术研发日：2023.04.28
技术公布日：2023/8/14